Меню Рубрики

Анализ на антинуклеарные антитела расшифровка анализа

Антиядерные антитела: проведение анализов, показания, расшифровка результатов, норма и патология, возможные заболевания и консультация врача

Антиядерные антитела представляют собой категорию аутоантител, которые при вступлении в реакцию с ядрами клеток организма начинают их разрушать. Поэтому исследование на АНА считается довольно чувствительным маркером при диагностике аутоиммунных нарушений, основная часть которых сопровождается поражениями соединительной ткани. Некоторые из разновидностей антинуклеарных антител обнаруживают также при заболеваниях не иммунного происхождения: воспалительные, инфекционные, злокачественные и пр.

Наиболее специфичны антиядерные антитела к следующим патологиям:

  1. Системная красная волчанка – болезнь соединительной ткани и кожи.
  2. Дерматомиозит – поражение мышц, кожи, скелетной ткани и т. д.
  3. Склеродермия – уплотнение соединительной ткани.
  4. Узелковый периартериит – воспалительный процесс, затрагивающий артериальные сосудистые стенки.
  5. Ревматоидный артрит – поражение соединительной ткани и суставов.
  6. Болезнь Шегрена – поражение тканей с железистыми проявлениями (уменьшение секрета слюнных и слезных желез).

В каких случаях скрининг на антиядерные антитела положительный?

Аутоиммунные патологии, когда иммунная система начинает атаку на собственные ткани клетки, в клинической медицине считаются самыми опасными. Большинство аутоиммунных заболеваний относятся к категории хронических и могут провоцировать серьезные нарушения функций внутренних органов.

Одним из распространенных тестов, используемых при диагностике различных аутоиммунных состояний, является исследование на уровень антиядерных антител (антинуклеарных), который осуществляется тремя способами:

  • метод иммуноферментного анализа ИФА, при котором определяется общий уровень антител;
  • метод реакции непрямой иммунофлуоресценции РНИФ, посредством которого можно выявить до 15 разновидностей антител;
  • метод иммуноблоттинга.

Это методика лабораторного исследования крови на наличие антител к ВИЧ. Является более точным анализом, чем ИФА, и применяется для подтверждения результата ИФА. Иммуноблотинг (вестерн-блот) применяется при диагностике ВИЧ-инфекций, определения уровня антиядерных антител, в качестве вспомогательного экспертного метода, который призван подтверждать результат ИФА. Как правило, данной методикой перепроверяют положительные результаты при ИФА, так как она считается более специфичной и чувствительной.

Иммунный блоттинг комбинирует в себе иммуноферментный анализ с электрофоретическим разделением вирусных белков в геле и переносом их на нитроцеллюлозные мембраны. Иммуноблот состоит из нескольких этапов. Сначала очищенный и разрушенный белок подвергается электрофорезу, при котором входящие в его состав антигены разделяются на молекулы. Затем способом блоттинга антигены переносятся из геля на полоску нейлонового фильтра или нитроцеллюлозы, которые содержат определенный спектр белков.

Далее на стрип наносят исследуемый материал, и если в пробе присутствуют специфические антитела, они начинают связываться с соответствующими им полосками антигенов. Результат такого взаимодействия делается видимым. Присутствие полос на некоторых участках стрипа подтверждает наличие в исследованной крови антител к определенным антигенам. Иммунный блоттинг часто используется для подтверждения ВИЧ-инфекции. Положительными считаются сыворотки крови, в которых посредством иммунного блотинга обнаруживают антитела к двум белкам оболочки ВИЧ. Если скрининг положительный, значит, в организме развивается определенное аутоиммунное заболевание.

Антинуклеарные антиядерные антитела могут наблюдаться более чем у 1/3 пациентов с рецидивирующим хроническим гепатитом. Кроме того, уровень АНА может повышаться в случае развития следующих патологий:

  • инфекционный мононуклеоз (вирусное заболевание, при котором возникает массовое поражение внутренних органов);
  • лейкоз (злокачественная болезнь крови) в острой и хронической формах;
  • гемолитическая анемия (малокровие вследствие разрушения эритроцитов);
  • болезнь Вальденстрема (поражает костный мозг);
  • цирроз печени (хроническая патология, связанная с изменением структур печеночной ткани);
  • малярия;
  • лепра (инфекционное поражение кожного покрова);
  • почечная недостаточность хронических форм;
  • тромбоцитопения (снижение продуцирования тромбоцитов);
  • лимфопролиферативные патологии (опухоли в лимфатической системе);
  • миастения (утомляемость мышц);
  • тимома (опухоль вилочковой железы).

Одновременно с оценкой уровня антиядерных антинуклеарных антител в процессе анализа оценивается уровень иммуноглобулинов: IgM, IgA, IgG. Обнаружение таких компонентов в крови может говорить о высоком риске возникновения коллагенозов и ревматических заболеваний.

В случаях, когда связь между уровнем антител и симптоматикой у пациента обнаруживается, само по себе наличие антиядерных антител в составе крови является диагностическим признаком и может повлиять на выбор терапевтической методики для того или иного заболевания. Сохранение высокой концентрации антинуклеарных антител при длительном курсе терапии свидетельствует о крайне неблагоприятном прогнозе для пациента. Снижение значений на фоне проводимой терапии может указывать на период ремиссии или приближающийся смертельный исход.

Кроме того, антинуклеарные антитела могут фиксироваться у здоровых людей в 3-5% случаев — до 65 лет, и в 37% случаев — после 65 лет.

Исследовать антинуклеарный фактор необходимо в следующих случаях:

  • при диагностике аутоиммунных и прочих системных заболеваний без выраженной симптоматики;
  • при комплексной диагностике системной красной волчанки, ее стадии и формы, а также при выборе терапевтической тактики и составлении прогноза;
  • при диагностике лекарственной волчанки;
  • при профилактическом обследовании пациентов с красной волчанкой;
  • при наличии специфических симптомов: длительная лихорадка без определенной причины, боль и ломота в мышцах, суставах, кожные высыпания, высокая утомляемость и т. д.;
  • при наличии симптомов системных патологий: поражение внутренних органов или кожи, артрит, судороги, эпилептические припадки, лихорадка, повышение температуры;
  • при назначении медикаментозной терапии гидралазином, дизопирамидом, пропафеноном, ингибиторами АПФ, прокаинамидомбета-блокаторами, пропилтиоурацилом, литием, хлорпромазином, карбамазепином, изониазидом, фенитоином, гидрохлортиазидом, миноциклином, статинами, так как имеется вероятность возникновения лекарственной красной волчанки.

Помимо специалиста общей практики, возможно консультирование и получение направления на проведение исследования у таких узких специалистов:

Какова норма антиядерных антител?

В норме антиядерные антитела в плазме, как правило, отсутствуют либо определяются в небольших количествах. Результат зависит от метода выполнения тестирования:

  • меньше 0,9 пунктов – норма (отрицательно);
  • 0,9-1,1 пунктов – сомнительный результат (рекомендуют провести повторный тест через 14 дней);
  • больше 1,1 пункта – положительный результат.

2. Для анализа РНИФ нормальным результатом считают титр менее 1:160.

3. При иммуноблоттинге норма – «не обнаружено».

В каких ситуациях может быть анализ на антиядерные антитела положительным?

В перечень факторов, которые способствуют искажению результатов лабораторного исследования, входят:

  • нарушение норм подготовки к анализу или алгоритма венепункции;
  • прием фармакологических препаратов («Метилдопа», «Карбамазепин», «Пеницилламин», «Нифедипин», «Токаинид» и др.);
  • наличие у больного уремии часто дает ложноотрицательный результат.

Интерпретация результатов проводится комплексно. Определить точный диагноз на основании единственного диагностического исследования невозможно.

Венепункция производится натощак в утреннее время (с момента приема пищи должно пройти 8 часов). Пить можно только воду. Перед забором крови не рекомендуется пользоваться никотинозаменителями и курить. Накануне и в день исследования нельзя употреблять энергетические и алкогольные напитки, заниматься физической работой и волноваться. За 15 дней до тестирования по согласованию с врачом отменяется прием медикаментозных препаратов (противовирусные и гормональные средства, антибиотики и др.). Для получения правильного результата анализ рекомендуется повторить через 2 недели.

Мы рассмотрели, что это — скрининг на антиядерные антитела.

источник

Синонимы: АНА, антинуклеарные антитела, антинуклеарный фактор, АНФ, антиядерные антитела, antinuclear antibodies, ANAs, Fluorescent Antinuclear Antibody, Antinuclear factor, ANF

Научный редактор: М. Меркушева, ПСПбГМУ им. акад. Павлова, лечебное дело.

Аутоиммунные заболевания, когда иммунная система атакует собственные ткани организма, считаются одними из самых опасных. Большинство аутоиммунных патологий относятся к хроническим и могут вызывать серьезные нарушения в работе внутренних органов и систем.

Одним из наиболее распространенных тестов, применяемых в диагностике аутоиммунных состояний, является обследование на антинуклеарные антитела (АНА), который проводится тремя способами:

  • методом иммуноферментного анализа ИФА (определяется общий уровень ANA),
  • методом реакции непрямой иммунофлуоресценции РНИФ (выявляется до 15 разновидностей ANA)
  • методом иммуноблоттинга.

Антинуклеарные (антиядерные) антитела представляют собой группу аутоантител, которые, вступая в реакцию с ядрами собственных клеток организма, разрушают их. Поэтому анализ на АНА считается достаточно чувствительным маркером в диагностике именно аутоиммунных нарушений, большая часть из которых сопровождается поражением соединительной ткани. Однако некоторые из видов антинуклеарных антител обнаруживаются и при заболеваниях не иммунной этиологии: воспалительных, инфекционных, злокачественных и пр.

Наиболее специфичны антинуклеарные антитела к следующим заболеваниям:

  • системная красная волчанка (СКВ) – заболевание кожи и соединительной ткани;
  • дерматомиозит – поражение кожи, мышц, скелетной ткани и т.д.;
  • узелковый периартериит – воспаление артериальной сосудистой стенки;
  • склеродермия – уплотнение и затвердение соединительной ткани;
  • ревматоидный артрит – поражение соединительной ткани суставов;
  • болезнь Шегрена – поражение ткани с железистыми проявлениями (снижение секрета слезных и слюнных желез).

Антинуклеарные антитела могут обнаруживаться более чем у 1/3 больных хроническим рецидивирующим гепатитом. Также уровень АНА может возрастать в случае:

  • инфекционного мононуклеоза (вирусное заболевание, сопровождается массовым поражением внутренних органов);
  • лейкоза (злокачественное заболевание крови) в острой и хронической форме;
  • гемолитической анемии (малокровие в результате разрушения эритроцитов);
  • болезни Вальденстрема (поражение костного мозга);
  • цирроза печени (хроническое заболевание, связанное с изменением структуры печеночной ткани);
  • малярии;
  • лепры (инфекционное поражение кожи);
  • хронической почечной недостаточности;
  • тромбоцитопении (снижение выработки тромбоцитов);
  • лимфопролиферативных патологий (опухоли лимфатической системы);
  • миастении (патологическая утомляемость мышц);
  • тимомы (опухоль из вилочковой железы).

Одновременно с определением антинуклеарных антител в процессе иммуноферментного анализа оценивается концентрация иммуноглобулинов: IgA, IgM, IgG. Обнаружение этих компонентов в крови может свидетельствовать о высокой вероятности развития ревматических заболеваний и коллагенозов.

В случае, когда связь между концентрацией антител и симптоматикой у больного не обнаруживается, само присутствие антиядерных антител в крови является диагностическим критерием и может повлиять на выбор лечения. Сохранение высокого уровня антинуклеарных антител при продолжительном курсе терапии свидетельствует о неблагоприятном прогнозе заболевания. Снижение значений АНА на фоне проводимого лечения может указывать на ремиссию (чаще) или приближающийся летальный исход (реже).

Также антинуклеарные антитела могут быть обнаружены у здоровых людей до 65 лет (3-5% случаев), после 65 (до 37%).

Исследовать антинуклеарный фактор целесообразно в следующих случаях:

  • Диагностика аутоиммунных и некоторых других системных заболеваний без ярко выраженной симптоматики;
  • Комплексная диагностика системной красной волчанки, ее формы и стадии, а также выбор тактики лечения и составление прогноза;
  • Диагностика лекарственной волчанки;
  • Профилактическое обследование пациентов с диагнозом красная волчанка;
  • Наличие специфических симптомов: продолжительная лихорадка без установленной причины, боли и ломота в суставах, мышцах, кожные высыпания, повышенная утомляемость и т.д.;
  • Наличие симптомов системных заболеваний: поражение кожи или внутренних органов (почки, сердце), артрит, эпилептические припадки и судороги, лихорадка, беспричинное повышение температуры и т.д.;
  • Назначение лекарственной терапии дизопирамидом, гидралазином, пропафеноном, прокаинамидом, ингибиторами АПФ, бета-блокаторами, пропилтиоурацилом, хлорпромазином, литием, карбамазепином, фенитоином, изониазидом, миноциклином, гидрохлортиазидом, статинами, поскольку есть риск развития лекарственной красной волчанки.

Помимо врача общей практики, направляют на анализ такие узкие специалисты, как

В норме антинуклеарные антител в плазме отсутствуют или определяются в небольшом количестве. Результат зависит от способа выполнения теста:

1. Тест делался методом ИФА

  • менее 0,9 пунктов – отрицательно (норма);
  • от 0,9 до 1,1 пунктов – сомнительно (рекомендуется сделать повторный тест через 7-14 дней);
  • более 1,1 пункта – положительно.

2. Для количественного анализа РНИФ нормой считается титр менее 1:160.
3. Иммуноблоттинг – норма «не обнаружено» (общее заключение / напротив каждого вида антител).

  • нарушение правил подготовки пациентом или алгоритма венепункции медработником;
  • прием лекарственных препаратов (карбамазепин, метилдопа, пеницилламин, токаинид, нифедилин и др.);
  • наличие у пациента уремии (отравление продуктами белкового обмена) может дать ложноотрицательный результат.

Обнаружение антинуклеарных антител может указывать на следующие заболевания:

  • системная красная волчанка;
  • панкреатит (воспаление поджелудочной железы) аутоиммунной природы;
  • сахарный диабет I типа;
  • аутоиммунные поражения щитовидной железы;
  • злокачественные поражения внутренних органов;
  • дерматомиозит;
  • аутоиммунный гепатит;
  • заболевания соединительной ткани;
  • болезнь Шегрена;
  • миастения;
  • склеродермия;
  • ревматоидный артрит;
  • диффузный интерстициальный фиброз (поражение легочной ткани в хронической форме);
  • синдром Рейно (ишемия мелких концевых артерий) и т.д.

Повышение титра АНА при количественном иммуноферментном анализе (РНИФ) говорит о:

  • Системной красной волчанке в активной стадии – титр повышен до 98%;
  • Болезни Крона (гранулематозное поражение пищеварительного тракта) – около 15%;
  • язвенном колите (воспаление слизистой толстой кишки) – от 50 до 80%;
  • склеродермии;
  • болезни Шегрена;
  • Болезни Рейно – до 20%;
  • синдроме Шарпа (смешанное заболевание соединительной ткани);
  • лекарственной волчанке.

Важно! При расшифровке анализа важно понимать, что отрицательный результат не исключает наличия аутоиммунных нарушений у пациентов с характерной симптоматикой. Положительный результат без клинической картины аутоиммунного процесса необходимо интерпретировать с учетом данных других лабораторных анализов.

Биоматериал для проведения ИФА на антинуклеарный фактор – сыворотка венозной крови.

  • Венепункция выполняется в утреннее время и натощак (с момента последнего приема пищи должно пройти минимум 8 часов). Пить чистую негазированную воду можно;
  • Непосредственно перед забором крови (за 2-3 часа) не рекомендуется курить и пользоваться никотинозаменителями (пластырь, спрей, жевательная резинка);
  • Накануне и в день процедуры нельзя употреблять алкогольные и энергетические напитки, волноваться и заниматься тяжелой физической работой;
  • За 15 дней до теста по согласованию с лечащим врачом отменяется прием лекарственных препаратов (антибиотики, противовирусные, гормоны и др.);
  • Для получения достоверного результата анализ желательно повторить через 2 недели.
Читайте также:  Анализ на суммарные антитела ифа

Ответ ИФА можно ожидать в течение 1 суток после венепункции, а в экстренных ситуациях, когда обследование проводится по «cito» – около 3 часов.

  • Информация с сайтов лаборатории Инвитро и Хеликс;
  • Данные Национальной медицинской библиотеки США PubMed.

Другие анализы ревматологического скрининга

источник

В медицине различают специфические состояния, при которых защитные клетки начинают атаковать собственный организм, — аутоиммунные заболевания. Большинство таких болезней протекают в хронической форме и являются потенциально опасными, так как способны вызвать серьезные проблемы работы определенных органов и систем. Это нередко приводит к инвалидности и тяжелым последствиям.

Возможности современной медицины велики, и выявить все эти изменения удается на ранней стадии и своевременно начать лечение. Одним из самых частых исследований, которые применяются для диагностирования этих состояний, служит анализ на антинуклеарные антитела, сокращенно АНА.

Анализ АНА — это самый информативный метод постановки диагноза при подозрении на любые аутоиммунные расстройства, в основном, это заболевания соединительной ткани. Но встречаются также наличие антител при злокачественных процессах, инфекционных и т.д.

Самая большая чувствительность антител к таким недугам:

  1. Системной красной волчанки.
  2. Ревматоидному артриту.
  3. Болезни Шегрена.

Эти клетки могут быть обнаружены также примерно у трети пациентов, страдающих хронической формой гепатита.

На увеличение показателей влияют разные факторы. В частности, малярия, лейкоз, инфекционный мононуклеоз и многое другое.

Вместе с выявлением АНА при выполнении исследования важно оценить уровень содержания таких иммуноглобулинов, как IgA, IgM, IgG. Выявление данных составляющих в крови у пациентов может указывать на большие шансы появления ревматических патологий и коллагенозов.

Если же взаимосвязь между содержанием антител и симптомами не была выявлена, само наличие АНА в крови указывает на выбор правильной тактики лечения. Длительное сохранение высоких титров говорит о неутешительном положении дел. Понижение этих титров говорит о ремиссии патологии, гораздо реже о скорой смерти.

Вместе с тем данные антитела могут быть выявлены у определенного процента здоровых лиц и титры АНФ могут выходить за пределы нормы.

Трактовать результаты вправе врач иммунолог и любой дипломированный специалист, в зависимости от области поражения.

Показаниями для проведения данного исследования служат:

  1. Выявление системных заболеваний, а также аутоиммунных нарушений без явных симптомов.
  2. Обнаружение системной красной волчанки и ее комплексное исследование, подбор стратегии лечения.
  3. Выявление лекарственной волчанки.
  4. Наличие определенных клинических проявлений, таких как, длительная лихорадка без явной на то причины, ломкость суставов и их болезненность, кожная сыпь, ломота мышц, высокая степень утомляемости.
  5. Признаки симптоматических проявлений смешанных заболеваний: болезни кожи и внутренних органов, судорожные состояния, увеличение температурных показателей.
  6. Назначение медикаментов дизопирамид, гидралазином и прочее.

Обнаружить антитела в крови удается двумя способами. Первая методика называется непрямая иммунофлуоресцентная микроскопия. При наличии антител они будут связываться со специфическими ядерными антигенами. Используются элементы, которые светятся в отдельном световом спектре. Под микроскопом появляется возможность выявления типа свечения.

Подробнее про то, что такое миофасциальный синдром и как его лечат читайте тут.

Этот способ признан самым лучшим для определения значения антинуклеарных антител. Также методика получила второе название — волчаночные тест-полосы.
Вторым методом диагностирования выступает ферментный иммунный анализ. Его смысл заключается в том, что антитела, находящиеся в крови, попадают во взаимосвязь с антигеном и в итоге раствор меняет свой оттенок.

Важно подчеркнуть, что положительный скрининг не может быть единственным поводом для постановки диагноза.

Обязательно назначается дополнительное исследование, с помощью которого удается определить недуг на ранней стадии. В случае отрицательного скрининга можно предполагать полное отсутствие нарушений. Однако и это вовсе не исключает наличия у пациента аутоиммунного заболевания.

Сдается кровь на антинуклеарный фактор совместно с другими анализами. Но на конечный результат оказывает влияние прием некоторых медикаментов и наличие у пациента патологий хронического и острого течения. Разобрать все эти моменты поможет специалист, затем установит верный диагноз и посоветует, как поступить дальше.

Материалом для анализа выступает венозная кровь.

Особенности подготовки:

  1. Материал берут на голодный желудок. После последней трапезы должно пройти, как минимум, 8 часов. Допустимо пить качественную фильтрованную воду без газа.
  2. Предварительно за два часа перед забором крови исключается курение и использование никотиновых продуктов.
  3. За несколько дней до совершения манипуляции исключается потребление спиртных напитков и энергетиков, запрещено заниматься тяжелым физическим трудом.
  4. За две недели должен полностью исключаться прием фармацевтических средств, в частности, гормонов, антибиотиков и прочих медикаментов.
  5. В целях подтверждения исследования важно повторить скрининг через две недели.

Ожидайте результатов в течение 48 часов после процедуры. Возможно получение данных в экстренном порядке в течение 3 часов.

При качественном исследовании могут быть получены такие результаты:

  • ниже 0,9 —отрицательный, норма;
  • значения от 0,9 до 1,1 — сомнительный;
  • свыше 1,1 — позитивный.

Пациенты часто задают вопрос: антинуклеарный фактор 1:160 норма или нет? Все, что выше этого показателя, выходит за пределы нормы.

Читайте также: Как лечить эпидурит позвоночника

Стоит также учитывать, что неправильная подготовка и некоторые нюансы могут повлиять на результаты:

  1. Нарушение принципов подготовки.
  2. Несоблюдение правил алгоритма инъекции медицинским специалистом.
  3. Прием определенных фармацевтических средств.
  4. Диагноз уремия может также исказить результаты.

Положительный скрининг на антиядерные антитела может говорить о наличии таких недугов, как красная волчанка, патология поджелудочной железы, наличие нарушений функциональности щитовидной железы, патологии печени, синдром Шегрена, поражение тканей легких, суставов и многое другое. Только доктор может интерпретировать результаты и назначать дальнейшее лечение.

В ходе расшифровки данного исследования стоит учитывать, что в случае отрицательных значений вероятность наличия недуга не исключается.

Как применять крем Алезан для суставов подробно описано тут

Если скрининг на данные антитела положительный без сопровождающейся симптоматики, необходимо пройти более тщательное обследование.

Из этой статьи вам стало известно, для чего берется кровь на анализ АНФ и что это такое. Не все антитела могут быть обнаружены при проведении данного исследования в силу их изобилия. Чтобы свести к минимуму возможность появления недостоверных результатов необходимо провести комплексное исследование совместно с другими методами.

Отсутствие высоких титров АНФ вовсе не говорит об отсутствии у пациента системных заболеваний, точно так же, как и положительный результат не может быть однозначным аргументом для постановки диагноза.

источник

Среди прочих исследований лицам, обращающимся по ряду жалоб к терапевту, ревматологу и врачам некоторых иных специальностей, может быть назначен такой не совсем понятный для них анализ, как анализ на антинуклеарные антитела, или ANA-профиль. О том, что это за исследование, в каких ситуациях показано его проведение, какие болезни могут быть диагностированы с его помощью, а также об особенностях подготовки к анализу и его расшифровке вы узнаете из нашей статьи.

Антинуклеарные, антиядерные антитела (сокращенно – ANA) – это группа аутоантител к разным компонентам клеточного ядра (ДНК, РНК и многим другим), которые обнаруживаются почти у всех лиц, страдающих системными заболеваниями соединительной ткани. Анализ крови на антинуклеарные антитела позволяет не только диагностировать эти заболевания, но и провести дифференциальную диагностику между ними, поскольку титры (концентрация) этих антител в крови при разных болезнях различна, кроме того, при каждой из них выявляются лишь определенные разновидности ANA.

Итак, к определенным структурам клеточных ядер организм вырабатывает антитела – аутоантитела. Образуются комплексы антиген-антитело, которые откладываются на базальных мембранах органов, тканей (на клетках кожи, синовиальных и серозных оболочек, почек, головного мозга и прочих) и сосудов, несущих кровь к этим структурам. Развиваются аутоиммунные процессы, результатом которых становится нарушение структуры тканей и воспалительный процесс в них.

Так, антинуклеарные антитела обнаруживаются в крови лиц, страдающих следующими заболеваниями:

Некоторые виды антиядерных антител обнаруживаются в крови лиц, страдающих онкологическими, инфекционными или неиммунными воспалительными заболеваниями:

Стоит отметить, что при заболеваниях неиммунной природы титры антинуклеарных аутоантител нестойки. Чтобы отличить временное повышение их титра от стойкого присутствия в сомнительных случаях, пациенту рекомендуют повторить этот анализ через 1, 2 недели или через месяц. Кроме того, проводить обследование следует в одной и той же лаборатории, поскольку в разных лабораториях могут быть использованы разные методы определения ANA, а также наборы разных антигенов – это существенно исказит результаты, снизит их информативность.

Врач может направить больного на этот анализ при обнаружении следующих изменений состояния его организма:

  • длительно сохраняющаяся субфебрильная температура тела (до 37,5 °С), лихорадка неясного генеза;
  • похудение на 5 кг и более за 3-6 месяцев без видимой на то причины (образ жизни больного за этот период не стал активнее, чем был, пищевые привычки не изменились);
  • увеличение лимфатических узлов неясного генеза;
  • боли в суставах, артриты неясной этиологии;
  • боли в мышцах, выраженная общая слабость;
  • сыпь на коже по типу васкулита;
  • патологические изменения со стороны одновременно многих органов и систем;
  • высокая СОЭ без видимых на то причин;
  • анемия, снижение уровня лейкоцитов и тромбоцитов в периферической крови;
  • повышенная концентрация гамма-глобулинов в крови;
  • белок в моче (при необходимости уточнить характер поражения почек, причину протеинурии).

У лиц, страдающих системными заболеваниями соединительной ткани, как правило, обнаруживаются высокие титры антинуклеарных антител (более чем 1:100). Также эти вещества могут быть верифицированы у лиц с неревматическими и у здоровых родственников лиц с аутоиммунными болезнями. Иногда ANA имеются и в крови здоровых, не состоящих в родственных отношениях с больными СЗСТ лиц.

Согласно данным статистики, антиядерные антитела обнаруживаются:

  • у 1-5 % здоровых людей молодого – до 40 лет – возраста, преимущественно у женщин;
  • у 10-15 % здоровых людей 60 лет и старше;
  • у родственников больных системной красной волчанкой – до 60 % случаев;
  • у родственников больных системной склеродермией – до 30 % случаев;
  • у 18 % родственников больных гемолитической анемией;
  • у 9 % родственников больных синдромом Шегрена;
  • у половины лиц, принимающих новокаинамид и/или гидралазин.

При инфекционных заболеваниях ANA повышаются транзиторно – лишь на некоторое время, и титры их невысоки (до 1:50). Многие лаборатории титр менее 1:100 расценивают как отрицательный результат анализа.

Что касается системных заболеваний, то при повышении активности аутоиммунного процесса титр ANA повышается, а при уменьшении – снижается. Это может служить критерием эффективности лечения болезней данной группы.

Особой подготовки к анализу крови на антинуклеарные антитела не требуется. Единственный момент: анализ следует проводить натощак, то есть за 8-12 часов до исследования пациенту стоит отказаться от приема пищи, особенно – исключить жирные продукты.

На исследование берут 8.5 мл венозной крови.

  • отрицательным (ANA не обнаружены или они имеются в крови в малом титре – до 1:100);
  • положительным (титр этих веществ больше, чем 1:100);
  • «серая зона» – это пограничное, среднее значение, которое не помогает подтвердить или опровергнуть диагноз и требует повторного исследования через некоторое время.

Антинуклеарные антитела – антитела, которые вырабатывает организм на компоненты собственных клеточных ядер. Исследуют их уровень в венозной крови. Как правило, он резко повышен у больных системной красной волчанкой или другими системными заболеваниями соединительной ткани. ANA могут быть обнаружены и у лиц, страдающих онкологическими, воспалительными, но неиммунной природы, и некоторыми инфекционными заболеваниями. Однако титры их в этих ситуациях будут не столь высоки, а нередко и обратимы.

источник

Антинуклеарные антитела — общее название группы антител направленных против различных компонентов клетки, появление их связано с аутоиммунными заболеваниями, преимущественно системной красной волчанкой.

Синонимы: антиядерные антитела, антинуклеарный фактор, антиядерный фактор, антитела к экстрагируемым ядерным (нуклеарным) антигенам, antinuclear antibodies, Hep-2 substrate, ANA-Hep2, fluorescent antinuclear antibody detection, ANA, FANA

комплекс антител (более 200), преимущественно иммуноглобулины G (реже IgМ и IgА), появляются в результате нарушении механизма аутотолернатности при аутоиммунных и ревматических заболеваниях.

Иммунная система человека производит антитела — белки, которые борются с вирусами, бактериями, грибками, паразитами — т.е. всем, что генетически отличается от «своего». Задание любого антитела — уничтожить инородный материал, а родные клетки не трогать (механизм аутотолерантности)

В некоторых случаях иммунный ответ направлен не против чужих, а против собственных тканей. В таком случае говорят о аутоиммунном заболевании. А антитела, которые вырабатываются к своим же клеткам или их компонентам называются аутоиммунными.

У большинства людей есть в крови незначительное(!) количество аутоантител, которые не являются проявлением болезни.

Только в случае серьезной поломки в иммунитете, уровень аутоантител становится повышенным и достаточным для постановки диагноза.

ANA может быть положительным еще до появления первых симптомов болезни. Около 95 % пациентов с системной красной волчанкой имеют в крови антиядерные антитела. Наличие симптомов волчанки подтверждает диагноз.

  • воздействие ультрафиолетовых лучей на кожу приводит к активации запрограммированной гибели клетки (апоптоза), что является нормальной реакцией организма, но при системных заболеваниях одновременно массово мигрируют лимфоциты
  • ранее недоступные и невидимые для иммунной системы компоненты клетки, такие как ядрышки, гистоны, оболочка ядра и др. «оголяются», а макрофаги, вместо того, чтоб данный материал просто «утилизировать», передают сигнал о нем по цепочке иммунного ответа
  • В-лимфоциты, в ответ на сигнал макрофага, начинают вырабатывают антиядерные антитела, которые связываясь с соответствующим антигеном формируют иммунные комплексы (ядерный антиген + антитело IgG, IgM, IgA)
  • иммунные комплексы оседают на базальной мембране различных органов и тканей, особенно сосудов, активируют систему комплемента — местного воспалительного ответа
  • в итоге — повреждение и нарушение функции органа
Читайте также:  Анализ на суммарные антитела к сифилису

Антинуклеарные антитела направлены против различных структур нормальной клетки.

  • anti-Ro (SS-A) — антитела к белкам связанным с РНК Y1-Y5 в сплайсосомах
  • anti-Jo1 — антитела к цитоплазматическому антигену Jo-1
  • anti-dsDNA — антитела к двухцепочечной ДНК
  • anti-Sm
  • anti-La (SS-B) — антитела к белку, связанному с РНК-полимеразой-3
  • anti-Sci 70 — антитела к ядерной топоизомеразе
  • anti-U1 RNP — антитела к U1 рибонуклеопротеину
  • антицентромерные антитела
  • антигистоновые антитела

Системная красная волчанка — аутоиммунное заболевание соединительной ткани и сосудов. Это наиболее тяжелое заболевание соединительной ткани, при котором отмечаются резкие боли в суставах, поражение кожи («бабочка»), серозных оболочек, сердца, почек, нервной системы, легких, трофические нарушения.

  • артрит — воспаление сустава, проявляться болью, отечностью, нарушением подвижности, покраснением кожи и повышением температуры над ним
  • воспаление внешней оболочки сердца или плевры (перикардит или плеврит) неясного происхождения
  • изменения в результатах анализа мочи (протеинурия, гематурия — белок или эритроциты в моче)
  • гемолитическая анемия — разрушение эритроцитов с повышением уровня билирубина в крови и моче
  • тромбоцитопения — сниженное число тромбоцитов в крови
  • нейтропения — сниженное число нейтрофилов в лейкоцитарной формуле
  • кожные симптомы — сыпь, утолщение кожи, особенно после активного воздействия солнца
  • синдром Рейно — периодическое изменение цвета пальцев стоп и кистей (бледность, посинение и покраснение) с нарушением чувствительности и болью
  • атипичные неврологические и психические симптомы
  • повышение температуры тела, усталость, снижение веса, увеличение лимфатических узлов

Существует два метода определения антинуклеарных антител в крови.

Непрямая иммунофлуоресцентная микроскопия (FANA — fluorescent antinuclear antibody test) на препарате Hep-2 клеток (клеточная линия, полученная из аденокарциномы гортани) — антинуклеарные антитела (при их наличии) связываются с антигенами клеток Hep-2, добавляют специальные светящиеся метки, присоединяющиеся к образованному комплексу и под микроскопом смотрят интенсивность и тип свечения. Лучший метод исследования антинуклеарных антител. Другое название — волчаночные тест-полоски.

Результат исследования пишут в виде титра — максимального разведения крови, при котором видно свечение, также описывается тип флуоресценции (в случае положительного результата). Чем больше антител, тем выше титр. Низкие титры считаются негативными, а высокие обозначают повышенную концентрацию антиядерных антител.

  • гомогенный (диффузный, однородный) — при системной красной волчанке, смешанных заболеваниях соединительной ткани (MCTD)
  • зернистый (гранулярный) — при системной красной волчанке, синдроме Шегрена, склеродермии, полимиозите, ревматоидном артрите и MCTD — самый неспецифический
  • ядрышковый (нуклеолярный) — при склеродермии и полимиозите
  • центромерный — при склеродермии и CREST синдроме
  • цитоплазматический — дерматомиозит, полимиозит, аутоиммунные заболевания печени, первичный билиарный цирроз

Пример положительного результата исследования антиядерных антител: «Положительный разведение/титр 1:320, гомогенная картина“.

  • отрицательный результат анализа на антиядерные антитела + симптомы — провести анализы: anti-Ro и anti-Jo1
  • положительный результат анализа на антиядерные антитела + наличие/отсутствие симптомов — провести анализы на anti-DNA, anti-Sm, anti-Ro, антигистоновые и антицентромерные антитела, волчаночный антикоагулянт, anti-Sci-70, anti-U1 RNP, anti-Jo1 — зависит от проявлений заболевания

Ферментный иммунный анализ (ELISA) — антитела, присутствующие в крови, связываются с соответствующим антигеном, что приводит к изменению цвета раствора.

  • менее 1.0 U — отрицательный результат (норма)
  • 1.1-2,9 U — слабо положительный (требует повторения)
  • 3,0-5,9 U — положительный
  • более 6,0 — резко положительный

Положительный результат анализа на антинуклеарные антитела — это не диагноз, а восклицательный знак о необходимости дополнительных исследований. Требует периодического, более тщательного обследования, для максимально раннего выявления возможного заболевания.

Отрицательный результат исследования на антинуклеарные антитела указывает на их отсутствие в крови, но не исключает диагноз аутоиммунного заболевания.

В норме в крови нет антиядерных антител.

  • общий анализ крови
  • общий анализ мочи
  • печеночные пробы — билирубин, АСТ, АЛТ, ГГТ, щелочная фосфатаза
  • ревмопробы — С-реактивный белок, скорость оседания эритроцитов (СОЭ), ревматоидный фактор
  • АЦЦП
  • анализ на LE-клетки
  • циркулирующие иммунные комплексы
  • С3 компонент комплемента
  • С4 компонент комплемента

  • лекарственные препараты — прокаинамид, фенитоин, пенициллин, гидралазин
  • ОРЗ и простуда, любое острое или хроническое инфекционное заболевание

1. Системные заболевания соединительной ткани

2. Аутоимунные заболевания

3. Инфекционные заболевания — частота выявления антинуклеарных антител варьирует

4. Опухолевые заболевания

  • тимома
  • опухолевые заболевания крови — острый и хронический лейкоз, лимфомы

При инфекционных, опухолевых заболеваниях появление антинуклеарных антител неустойчиво — при обострении есть, во время ремиссии исчезают.

источник

Антинуклеарные антитела (АНА, антиядерные антитела, антинуклеарный фактор) — показатель системных заболеваний соединительной ткани. Представляет собой группу аутоантител к белкам и другим компонентам, находящимся в ядрах клеток. Основные показания к применению: исключение диагноза — системная красная волчанка (считается , что АНА появляются в 90% случаев СКВ), дифференциальная диагностика системных коллагенозов (системная красная волчанка, склеродермия, узелковый периартериит, дерматомиозит), хронический активный гепатит.

При некоторых заболеваниях, например СКВ, системной склеродермии (системный склероз), некоторых инфекциях, иммунная система пациентов воспринимает ядра (белки ядер) клеток собственных тканей, как чужие, и продуцирует к ним антитела (антинуклеарные антитела — AHA). При этом они повреждают соединительную ткань, что и способствовало внедрению определения антинуклеарного фактора в качестве теста на системные заболевания соединительной ткани.

При интерпретации данных следует учитывать, что спектр AHA включает в себя большую группу аутоантител к ДНК, нуклеопротеидам, гистонам, ядерным рибонуклеопротеидам и другим компонентам ядра. К настоящему времени описано более 200 разновидностей АНА, направленных против нуклеиновых кислот, гистонов, белков ядерной мембраны, компонентов сплайсосомы, рибонуклеоротеинов, белков ядрышек и центромер. Таким образом тест направлен на обнаружение различных антител к компонентам ядра и цитоплазмы, которые впервые были обнаружены при СКВ. В дальнейшем диагностические критерии теста были расширены в связи с обнаружением данных антител и при других заболевания соединительной ткани.

В скрининговых тестах для определения суммарных АНА обычно используется набор следующих антигенов, являющихся основными маркерами аутоиммунных заболеваний соединительной ткани: SS-A (Ro), SS-B (La), Scl-70, Sm, RNP/Sm, J01, центромере B.
Основные антигены, применяющиеся в современных наборах для выявления ядерных антител класса IgG представлены следующим набором:

  1. SS-A (Ro) — ядерные рибонуклеопротеины, (полипептиды). Антитела на них обнаруживаются, чаще, при системной склеродермии (60 % случаев), синдроме Шегрена (до 70% случаев) и при СКВ (до 30% случаев). Считается, что если данные антитела обнаруживаются в крови у беременных, то это является показателем риска увеличения возникновения неонатального волчаночноподобного синдрома у новорожденного ребенка (неонатальный люпус-синдром). Данные антитела матери проходят через плаценту и вызывают поражение плода, приводящие к гемолитической анемии и тромбоцитопении. К тяжелым последствиям относят поражение проводящей системы сердца ребенка (вплоть до постоянной кардиостимуляции). Отмечено, что у женщин у которых во время беременности был выявлен значительный титр данных антител, без явных клинических признаков, в дальнейшем развивается какое либо аутоиммунное заболевание, включая СКВ.
  2. SS-B (La) — ядерные белки. Антитела к ним выявляются до60% случаев при синдроме Шегрена и в 15% случаев при СКВ.
  3. Scl-70 — белок-фермент, участвующий в обмене нуклеиновых кислот (топоизомераза-1). Антитела на данный белок наиболее специфичны при системной склеродермии (до 70% случаев).
  4. Двухцепочечная ДНК — нативная ДНК. Антитела к ДНК наиболее специфичны при СКВ (до 80% случаев) и практически не определяются при ревматоидном артрите и склеродермии.
  5. RNP/Sm — Комплекс антигенов RNP/Sm состоит из U1-рибонуклеопротеидов: U1-68, U1-A, U1-C, U5, U6; а также из Sm-полипептидов: SmA | , SmB | B, SmD, SmE, SmF, SmG. Антитела, образующиеся к этим антигенам наиболее специфичны для смешанных заболеваний соединительной ткани — т.е. при наличии симптомов склеродермии, ревматоидного артрита, СКВ, полимиозита (около 95% случаев) и в меньшей степени для СКВ (до 30% случаев).
  6. Jo-1 — фермент — синтетаза аминоацилтранспортной РНК. Аутоантитела к данному белку являются диагностически значимыми при миозите (полимиозит/дерматомиозит).
  7. CENP-B (Центромера) — для выявления Антицетромерных антител (Anti-Centromer B), с целью диагностики CREST-синдрома (данный синдром представляет собой совокупность кальциноза кожи, синдрома Рейно, нарушения моторики пищевода, склеродактилии, телеангиэктазии. CREST-синдром относится к варианту системной склеродермии (системный склероз). Данные антитела у больных свидетельствуют о благоприятном течении системной склеродермии и говорят о небольшом поражении внутренних органов.
  8. Hep-2 клетки — клетки эпителиальной карциномы гортани человека линии Hep-2, содержащие много различных ядерных антигенов, включая антиген SS-A (Ro) и антигены центромеры. Антитела к Hep-2 обнаруживаются у больных с полимиозитом и дерматомиозитом до 90% случаев.
  9. Митохондрии (PDC). PDC — пируватдегидрогеназный комплекс. Большая группа антимитохондриальных антител представляют собой аутоантитела, которые образовались на ферменты пируватдегидрогеназного комплекса, располагающегося в митохондриях клеток и участвующего в окислительном декарбоксилировании пирувата.

Часто эти антитела обнаруживаются при билиарном циррозе печени.

AHA обычно не проникают в живые клетки и поэтому безвредны. Но иногда они образуют комплексы антиген-антитело, которые вызывают повреждение ткани (как, например, при СКВ поражение почек). В связи с вовлечением в патологический процесс многих органов диагностическое значение определения AHA невелико и результаты анализа лишь частично подтверждают клинические данные.

Помимо ревматических заболеваний, АНА обнаруживаются и при хроническом активном гепатите до 50% случаев.

источник

Антинуклеарные антитела (ANA, АНА) – специфические иммуноглобулины, связывающиеся с компонентами клеточных ядер собственного организма. Определяются в плазме при ревматических болезнях, первичном билиарном циррозе, злокачественных опухолях, инфекциях. Исследование применяется для диагностики и дифференциации аутоиммунных заболеваний в рамках скрининга и при характерных клинических признаках. Забор крови производится из вены. Анализ выполняется тремя способами: иммуноферментным методом (определяется общий уровень ANA), методом иммуноблоттинга и реакции непрямой иммунофлуоресценции (выявляется до 15 разновидностей ANA). В норме результат отрицательный. Срок проведения теста при ИФА – 1 день, при иммуноблоттинге, РНИФ – 8 дней.

Антинуклеарные антитела (ANA, АНА) – специфические иммуноглобулины, связывающиеся с компонентами клеточных ядер собственного организма. Определяются в плазме при ревматических болезнях, первичном билиарном циррозе, злокачественных опухолях, инфекциях. Исследование применяется для диагностики и дифференциации аутоиммунных заболеваний в рамках скрининга и при характерных клинических признаках. Забор крови производится из вены. Анализ выполняется тремя способами: иммуноферментным методом (определяется общий уровень ANA), методом иммуноблоттинга и реакции непрямой иммунофлуоресценции (выявляется до 15 разновидностей ANA). В норме результат отрицательный. Срок проведения теста при ИФА – 1 день, при иммуноблоттинге, РНИФ – 8 дней.

В норме погибшие клетки организма фагоцитируются макрофагами. При аутоиммунном заболевании происходит не только утилизация клеточных компонентов (ядрышек, гистонов, оболочек ядер), но и передача информации о них в рамках иммунного ответа. B-лимфоциты запускают выработку антител к ядерным антигенам. Образующиеся иммунные комплексы закрепляются на базальных мембранах сосудов и органов, активируется система комплемента, развивается местное воспаление. Исследование ANA с помощью иммуноферментного анализа обладает невысокой специфичностью, но экономично по времени и трудовым затратам. Иммуноблоттинг и метод РНИФ дают высокоспецифичную информацию, но их распространение ограничивается трудоемкостью и высокой стоимостью процедуры.

Читайте также:  Анализ на титр резус антитела

Тест на антинуклеарные антитела назначается при аутоиммунных патологиях. Показания к суммарному определению IgG, IgM, IgA с помощью ИФА:

  • Скрининг коллагенозов. Тест используется для обследования людей из групп риска, при неспецифических и слабовыраженных симптомах: быстрой утомляемости, лихорадке, головных болях. Положительный результат является основанием для выполнения более точных и трудоемких диагностических процедур.
  • Диагностика СКВ. Анализ назначается пациентам с характерными клиническими проявлениями: мышечной и суставной болью, кожными высыпаниями, одышкой, нарушениями сердечного ритма, отеками.
  • Мониторинг СКВ. Определение АТ периодически выполняется для уточнения активности патологии, составления прогноза, оценки эффективности лечения.
  • Диагностика лекарственной волчанки. Тест проводится больным, которые принимают препараты, способные спровоцировать лекарственный волчаночный синдром.

Определение антинуклеарных антител методами иммуноблоттинга и РНИФ используется более узконаправленно. Показания:

  • Дифференциация аутоиммунных заболеваний. Исследование назначается для выявления СКВ, синдрома Шарпа, синдрома Шегрена, склеродермии, полимиозита, дерматомиозита, ревматоидного артрита, первичного билиарного цирроза, первичного склерозирующего холангита. Основанием служат высокие показатели АТ к ядерным антигенам (ИФА), к экстрагируемому ядерному антигену, к ДНК, к нуклеосомам в сочетании с характерной клинической картиной.
  • Мониторинг ревматических болезней. Тест выполняется для выявления обострений, оценки течения и эффективности терапии артритов, остеоартроза, васкулитов, диффузных заболеваний соединительной ткани.

Уровень АНА определяется в венозной крови. Ее забор выполняется утром, специальной подготовки не требуется, но стоит придерживаться общих правил:

  1. Выдержать период голода 4-6 часов. Пить воду разрешено без ограничений.
  2. Ограничить употребление жирной пищи накануне вечером, в течение дня отказаться от приема алкогольных напитков, выполнения интенсивных физических нагрузок. Избегать влияния стрессовых факторов.
  3. За 7-10 дней сообщить врачу об используемых лекарствах. Их действие будет учтено при интерпретации результата.
  4. Физиотерапевтические процедуры, инструментальные обследования выполнять после сдачи крови.
  5. За 30 минут воздержаться от курения, умеренных физических нагрузок.

Кровь забирается из локтевой вены, доставляется в лабораторию в герметичной пробирке. Предварительно из первичного биоматериала выделяют сыворотку. При определении общего количества антинуклеарных антител выполняется иммуноферментный анализ, при исследовании их разновидностей – иммуноблоттинг, реакция непрямой иммунофлуоресценции. В первом случае результат подготавливается за 1 день, во втором – за 8 дней.

В норме АНА в плазме отсутствуют или определяются в небольшом количестве, не влияя на функционирование тканей. Отрицательный результат выражается по-разному в зависимости от способа выполнения теста:

  • ИФА – 0-1,0 Ед, «отрицательно».
  • Иммуноблоттинг – «не обнаружено» (общее заключение / напротив каждого вида АТ).
  • РНИФ – титр менее 1:160.

На итоговый показатель не влияют физиологические факторы. Нормальный результат не исключает заболевание, но снижает вероятность патологии.

Интерпретация повышенного показателя теста зависит от метода исследования. При определении уровня суммарных ANA причиной увеличения их концентрации являются:

  • Аутоиммунные заболевания. Положительный результат выявляет СКВ, ревматоидный артрит, синдром Шегрена, склеродермию, сахарный диабет 1 типа, полимиозит, дерматомиозит, миастению, поражение щитовидной железы, печени.
  • Инфекции. Повышение значения определяется у людей с туберкулезом, вирусным гепатитом, подострым бактериальным эндокардитом, ВИЧ-инфекцией.
  • Онкопатологии. Образование АНА наиболее характерно для рака легких и печени.
  • Прием лекарственных препаратов. Показатель теста растет при использовании ингибиторов АПФ, бета-блокаторов, гидралазина, пропилтиоурацила, хлорпромазина, лития, карбамазепина, фенитоина, изониазида, миноциклина, гидрохлортиазида, ловастатина, симвастатина.

При анализе с определением вида антинуклеарных антител интерпретируется повышение отдельных показателей. При иммуноблоттинге выполняется разделение видов АТ. При РНИФ преобладающие АТ выявляются по характеру свечения. Причинами отклонения результатов от нормы могут быть СКВ, синдром Шарпа, синдром Шегрена, склеродермия, ревматоидный артрит, неонатальный волчаночноподобный синдром, полимиозит, изолированный синдром Рейно, волчаночный нефрит, CREST-синдром, полимиозит, дерматомиозит, лекарственная волчанка, билиарный цирроз.

Анализ на антинуклеарные антитела широко распространен в клинической практике как инструмент для скрининга, дифференциальной диагностики и мониторинга аутоиммунных патологий. Способы выявления АНА адаптируют исследование под разные задачи. За интерпретацией результата и назначением лечения нужно обратиться к врачу – ревматологу, дерматовенерологу, нефрологу.

источник

Иммунная система человека – уникальный слаженный механизм, способный реагировать на любые внешние внедрения патогенных факторов, тем самым защищая организм от целого ряда заболеваний. Но как известно, из каждого правила есть исключения, и в данном случае они выглядят как реагирование иммунитета на собственные клетки, что получило название аутоиммунные болезни.

При данных патологиях идет выработка антител, атакующих здоровые клетки, поражая или уничтожая их. В результате происходит нарушение функционирования отдельных тканевых структур и даже органов. Такие патологии из-за своей распространенности и вовлеченности в процесс нескольких органов или систем получили название системных заболеваний.

При появлении современных методов лабораторной диагностики, одним из которых является АНФ анализ крови на поиск антинуклеарного фактора, позволяющий выявить антинуклеарные (антиядерные) антитела и определить причину патологии. Данный показатель является одним из маркеров системных заболеваний соединительной ткани (СЗСТ), принятым как «золотой стандарт» данного вида исследований.

Как уже описывалось выше, патогенез данных патологий берет свое начало со сбоев функционала иммунной системы, и выработке защитных антител к определенным компонентам собственных клеток. Такие клетки за особенность своего происхождения имеют второе название – аутоантитела. В процессе иммунного сбоя они вступают в контакт с белковыми соединениями ядра, нуклеиновыми кислотами и антигенами цитоплазмы, что приводит к появлению симптомов воспалительных заболеваний, таких как:

  • структурные изменения тканей и органов;
  • выраженное необоснованное утомление;
  • болевые ощущения в мышцах и суставах;
  • поражение кожных покровов;
  • снижение веса тела и другие.

Антинуклеарные антитела (АНА) могут образовываться при довольно обширном спектре аутоиммунных патологий, но наибольшая вероятность их появления при системной красной волчанке (СКВ).

Справка! По статистике, более чем у 90% пациентов, страдающих СЗСТ, определяется патологическая выработка подобных антител. На текущий момент изучено около 200 их видов, которые получили обобщенное название – антинуклеарный фактор. В основном они представлены иммуноглобулинами класса G, но иногда встречаются М или А.

Прежде чем углубляться в особенности проведения исследования на АНФ, стоит отметить, что методика была изобретена и начала применяться довольно давно – в 60-х годах прошлого века. Но широкое распространение в диагностической практике получила лишь в начале 80-х годов XX века после усовершенствования. В качестве субстрата еще в 1961 году ученый Beck применял клетки лабораторных животных, и только в 1982 году Tan воспользовался перевиваемой клеточной линией человека HEp-2 для поиска АНФ.

Хотя основная цель использования данного теста – это установление диагноза красная волчанка, все же он считается универсальной методикой и для других коллагенозов (СЗСТ). К последним относятся:

Одной из наиболее удобных, и поэтому чаще всего используемых методик для определения в крови пациентов антинуклеарного фактора, считается непрямая иммунофлюорестенция. Исследование проводится при нанесении сыворотки крови на клетки перевиваемой эпителиоидной линии аденокарциномы гортани человека НЕр-2 (содержащих определенный ряд ядерных антигенов) с применением меченого коньюгата (соединения) с антителами.

Этот выбор сделан неслучайно – клетки НЕр-2 – очень удобный субстрат для изучения биоматериала. Они имеют довольно крупные ядра, и при высадке на лабораторных стеклах растут однослойно. В качестве субстрата можно использовать и другие клеточные линии человека, но удачная морфология и культивирование однозначно делает именно НЕр-2 – незаменимым материалом.

В ходе диагностики при инкубации сыворотки обследуемого с клеточным субстратом, при наличии АНА происходит их соединение с соответствующими нуклеарными антигенами. Места связки АНФ с НЕр-2 определяются при использовании меченого флюоресцеином (красителем) коньюгата. Для выполнения оценки результатов произошедших реакций применяется люминесцентный микроскоп, позволяющий дифференцировать характер и степень получившихся связок.

Справка! HEp-2 человека, в отличие от тканевых криосрезов животных, имеют более высокую скорость деления клеток, что дает возможность обнаружить антитела к антигенам, которые экспрессируются лишь при делении. Также в субстрате человека отсутствует клеточный матрикс, снижающий качество визуализации изучаемого свечения.

При расшифровке материалов всегда необходимо брать во внимание, что в спектр АНА входит довольно большая группа аутоантител к нуклеопротеидам, рибонуклеопротеидам, гистонам, ДНК и другим структурным единицам ядра. Из этого следует, что функционал теста направлен на выявление антител к составляющим ядра и цитоплазмы, которые изначально были определены при СКВ.

Позже диагностические возможности исследования были расширены, что обусловлено определением подобных антител при других СЗСТ. В скрининговых методиках для обнаружения суммарных АНА, как правило, применяется определенный набор антигенов, принятых за основные маркеры аутоиммунных ЗСТ.

К ним относятся антитела класса IgG:

  • SS-A (Ro) – ядерные рибонуклеопротеины;
  • SS-B (La) – ядерные белки;
  • Scl-70 – белок-фермент (топоизомераза-1);
  • нативная двухцепочная ДНК;
  • RNP/Sm – комплекс антигенов;
  • Jo-1 – фермент РНК – синтетаза;
  • CENP-B (центромера)
  • Hep-2 клетки;
  • митохондрии (PDC).

АНА практически безвредны для организма – они не способны проникать в живые ткани. Но в отдельных случаях могут соединяться в комплексы антиген-антитело, что в результате приводит к структурным разрушениям тканей. Одним из таких примеров является поражение паренхимы почек при СКВ. Так как при СЗСТ в процесс вовлечено несколько органов, то выявление АНА не является первостепенно важным для диагностики, а считается лишь подтверждением определенной симптоматики.

После проведения всех необходимых процедур – взятия биоматериала и его лабораторной подготовке к исследованию, проводится оценка и интерпретация результатов. Сюда входит определение титра (концентрации) антител и типа свечения. Значимым параметром для диагностики является показатель концентрации свыше 1:160. К примеру, при обострении ревматизма он может превышать отметку 1:640, тогда как в ремиссионном периоде наблюдается понижение до 1:160–1:320.

Тип свечения показывает мишени АНА, что является особо важным клиническим моментом, направляющим последующие действия врача в назначении диагностических мероприятий. По характеру свечения ядер при использовании НЕр-2 определится свыше 20 вариантов ядерного окрашивания, в зависимости от видов присутствующих антител в биоматериале. К основным из них относятся следующие типы свечения.

  • Периферическое. Свечение свидетельствует о наличии анти-ДНК-антител, что подтверждает СКВ. Основным видом антигенов для периферического типа являются гистоновые белки и ДНК.
  • Диффузное (гомогенное). Такое свечение наблюдается при СКВ, сопровождающейся поражением структуры почек и похожих ЗСТ, нефрите, склеродермии, а также лекарственно-индуцированной СКВ. Антигены при данном типе представлены дсДНК, гистонатами и нуклеосомами.
  • Ядрышковое (нуклеарное). Данный тип характерен для системной формы склеродермии, и определяется при присутствии у пациентов антител – PHК полимераза 1, PM/Scl, NOR, U3RNP.
  • Цитоплазматическое. Подобный тип подсвечивания указывает на наличие АНА к тРНК–синтетазам, а именно Jo-1, и наблюдается при полимиозите.
  • Гранулярное. Определяется при синдроме Шегрена, инфекционном мононуклеозе, смешанном ЗСТ (Sharp-синдром, MCTD) и лекарственном волчаночном синдроме. Преимущественно присутствующие антигены для этого типа – SS-A, SS-B, Sm, U1-RNP, и PCNA.
  • Крупногранулярное. Характерно для смешанных ЗСТ и, по мнению многих ученых, связано с наличием антигена RNP.
  • Мелкогранулярное. Определяется присутствие антител, образующихся против рибонуклеиновых белков – АSSP (АЦЦП), SS-A, SS-B и других. Такие антитела характерны для СКВ, также ее специфических кожных формах, ревматоидном артрите, склеродермии, полимиозите, синдроме Шегрена.
  • Центромерное. Данный тип в основном отмечается при склеродермии. Хотя в одном образце крови, особенно у обследуемых с диффузными ЗСТ, в отделенной плазме могут определяться антитела к различным ядерным компонентам.
  • Точечные вкрапления в ядре. Этот тип преимущественно выявляется при болезнях печени аутоиммунного характера. При нем могут сочетаться несколько флюоресцентных типов, к примеру, ядрышковый и мелкогранулярный, что обусловлено антителами к Scl-70.

На достоверность полученных в ходе исследования данных могут повлиять всего несколько факторов, способных показать и ложноположительный и ложноотрицательный результат. Так, неправдоподобные ответы со сдвигом вверх наблюдаются у пожилых пациентов в возрасте от 60 лет (по статистике в 10–37% случаях) и при приеме медпрепаратов, вызывающих лекарственную волчанку (некоторые антибиотики, контрацептивы, сульфаниламиды, тиазидные диуретики).

Отмечено, что у 5–55% особ женского пола, имеющих грудные имплантаты, повышается уровень концентрации АНА. К ошибочной диагностике со сдвигом вниз может привести употребление глюкокортикоидных препаратов – Преднизолона, Метипреда или Дексаметазона.

источник