Анализ на перинуклеарные антинейтрофильные цитоплазматические антитела

В современной лабораторной диагностике существует довольно узкоспециальный тест, который имеет аббревиатурное обозначение АНЦА, ANCA. Увидев в перечне исследований такую странную аббревиатуру многие пациенты спрашивают: анализ крови АНЦА — что это, и какие результаты, при каких заболеваниях он может показать?

Расшифровывается это странное название – АНЦА — как антинейтрофильные цитоплазматические антитела, и этот анализ является специфическим тестом для диагностики системных васкулитов. Системные васкулиты — это хронические заболевания, которые лечат специалисты — ревматологи. При васкулитах формируются различные очаги некроза в сосудистой стенке, и клиника этих состояний очень многогранна, поскольку во вторичный патологический процесс вовлекаются различные органы и системы.

До сих пор неясно, точно, какова роль этих антител в развитии иммунного воспаления, и какую роль в этом играют нейтрофилы. Но тем не менее, если взять сыворотку крови, исследовав ее методом непрямой иммунофлюоресценции, то если такие аутоантитела у человека имеются, то они проявят себя в виде специфического равномерного окрашивания или в цитоплазме нейтрофилов, или около их ядер, в так называемой перинуклеарной зоне.

Соответственно, антитела к цитоплазме нейтрофилов способны связываться с гранулами нейтрофилов, и даже со структурами моноцитов, но исследованию подлежит только материал нейтрофилов.

Современными данными установлено, что антитела к цитоплазме нейтрофилов играют важную роль в повреждении внутренней стенки сосудов, или эндотелия. В результате возникает биохимический каскад, затем выработка противовоспалительных цитокинов и развитие иммунного воспаления.

Выше было сказано, о том, что имеется два типа антител — цитоплазматические и перинуклеарные. Именно первый тип антител более сильно связан с одной из самых широко распространенных иммунных васкулитов, или гранулематозом Вегенера. Это анализ позволяет верифицировать заболевание у 85% пациентов. Но этот анализ все же является скрининговым, и отрицательный результат определения иммуноглобулинов вовсе не говорит о том, что у пациента нет системного васкулита.

С другой стороны, если у пациента уже установлен диагноз по другим стандартным критериям, то увеличение количества антител говорит или о рецидиве, или об обострении заболевания, а при успешной терапии это количество антител снижается. Можно сделать вывод, что этот анализ используется не только для диагностики, но и для контроля лечения.

Второй тип, а именно перинуклеарные антицитоплазматические антитела обнаруживаются у пациентов с быстропрогрессирующим поражением почек — гломерулонефритом. Позитивны они при системной красной волчанке, и хроническом язвенном колите.

Антитела к цитоплазме нейтрофилов, конечно, назначаются при подозрении на васкулит, но при каких признаках необходимо назначать это исследование? В первую очередь, при:

• быстро прогрессирующем гломерулонефрите, с развитием почечной недостаточности;
• при кровохарканье и при легочных кровотечениях, особенно в сочетании также с поражением почек;
• при различных периферических полинейропатиях;
• при затяжных заболеваниях ЛОР-органов воспалительного характера — при синуситах и отитах;
• при рентгенологическом множественном очагов поражения легких;
• при поражениях кожи, которые сопровождаются различными системными проявлениями.

Антитела к цитоплазме нейтрофилов у здорового человека не определяются, и, согласно единицам титрования, референсные значения должны быть меньше, чем 1 к 40. В том случае, если у пациента анализ показывает гораздо меньше разведение, например, 1к 100, то результат считается положительным.

Положительные значения, кроме названных болезней, может говорить о таком заболевании, как классический узелковый полиартериит, синдром Гудпасчера и язвенный колит. Высокий уровень антител встречается также при системной красной волчанки и синдроме Чарга-Стросса. Повышение значений может быть при болезни Шенлейн-Геноха, неспецифическом язвенном колите, различных аутоиммунных формах гепатита.

Нужно помнить, что у 6% здоровых людей могут быть положительные значения этих антител, и после этого необходимо проверять дополнительно пациента на причастность к иммунным васкулитам.

Наибольшей достоверностью, в 85%, этот анализ показывает гранулематоз Вегенера, далее идет микроскопический полиангиит, при положительных данных анализа достоверность его составляет также 82% совпадения с клиническими данными.

Существуют и ложноположительные результаты, так, при язвенном колите и болезни Крона 8% пациентов могут иметь положительный результат. Нужно помнить, что все результаты теста, которые оказались положительными, нужно оценивать только вместе с клиническими признаками. Если они выражены, то этот анализ помогает диагноз подтвердить, но если у пациентов эти признаки сомнительны, то отрицательный результат позволяет отказать в постановке диагноза системного васкулита.

источник

АНЦА – это лабораторный показатель, который подтверждает диагноз аутоиммунных заболеваний. АНЦА (антинейтрофильные цитоплазматические тела) встречаются при АНЦА-ассоциированных васкулитах, других АНЦА-ассоциированных заболеваниях. АНЦА анализ проводится на сыворотке крови. Антинейтрофильные цитоплазматические антитела – это группа неоднородных антител, образующиеся к ферментам и белкам цитоплазмы клеток крови моноцитов и нейтрофилов. АНЦА вызывает выброс свободных радикалов кислорода и различных ферментов из клеток – в результате травмируются стенки кровеносных сосудов.

В лаборатории Юсуповской больницы проводятся различные исследования и анализы, в том числе анализ АНЦА. Юсуповская больница – это современный разнопрофильный медицинский комплекс. В состав комплекса входит несколько разнопрофильных клиник, лаборатория, диагностический центр, стационар, реабилитационный центр. Стационар больницы – это комфортные палаты, квалифицированная помощь медицинского персонала, высокоэффективная помощь разнопрофильных врачей. В Юсуповской больнице пациенты смогут пройти реабилитацию в Центре восстановительной медицины.

Тест АНЦА проводится методом непрямой иммунофлюоресценции с использованием препаратов человеческих нейтрофилов. В результате теста обнаруживают антитела в виде диффузного цитоплазматического или перинуклеарного окрашивания (cANCA или pANCA). Мишенью для cANCA служит лизосомная протеиназа, для pANCA мишенью служит миелопероксидаза. Антитела к цитоплазме нейтрофилов различают по типу свечения – так интерферируют pANCA c антителами ANA. Анализ на антитела к цитоплазме нейтрофилов (АНЦА) имеет показания:

• Диагностика неспецифического язвенного колита, болезни Крона.
• Диагностика васкулитов (микроскопический полиангиит, узелковый периартрит, синдром Чарга-Стросса, гранулематоз Вегенера, васкулит при ревматоидном артрите и системной красной волчанке, другие виды васкулитов).

АНЦА васкулит ассоциированный – это группа заболеваний, к которой относится МПА (микроскопический полиангиит), ГПА — гранулематоз с полиангиитом (гранулематоз Вегенера), ЭГПА – эозинофильный гранулематоз с полиангиитом (синдром Чарга-Стросса). Ассоциированный васкулит некротизирующий МПА (микроскопический полиангиит) характеризуется преимущественным поражением мелких кровеносных сосудов, могут быть поражены мелкие и средние артерии. МПА нередко сопутствуют геморрагический альвеолит и некротизирующий гломерулонефрит. АНЦА ассоциированный васкулит (ГПА) – это некротизирующий гранулематозный воспалительный процесс, поражающий нижние и верхние дыхательных пути, преимущественно средние и мелкие кровеносные сосуды. Нередко заболеванию сопутствует гломерулонефрит некротизирующий.

ANCA ассоциированный васкулит ГПА у большинства больных сопровождается развитием некротизирующего гранулематозного воспалительного процесса, который проявляется в виде:

• Поражения органа слуха.
• Язвенно-некротического ринита.
• Синусита.
• В воспалительный процесс вовлекаются гортань и трахея.

Гранулематозное некротизирующее воспаление нередко осложняется полной потерей слуха, деформацией носа из-за перфорации носовой перегородки, развитием тяжелой формы деструктивного пансинусита, очень часто заболевание сопровождается поражением легких, которое может протекать бессимптомно даже при тяжелом течении. У 80% больных развивается поражение почек, у 50% пациентов происходит потеря зрения, у 35% больных отмечаются поражения кожного покрова, у 20% больных диагностируется поражение сердца, около 30% пациентов страдают на сенсорно-моторный множественный мононеврит. АНЦА ассоциированные системные васкулиты увеличивают риск развития различных заболеваний сердца, в 5% случаев отмечается поражение желудочно-кишечного тракта.

Микроскопический полиангиит протекает остро, не сопровождается гранулематозным воспалительным процессом, но нередко осложняется поражением легких и легочным кровотечением. Также может развиться фиброзирующий альвеолит. Около 90 % случаев осложнений при МПА – это поражение почек, которое в половине случаев характеризуется быстропрогрессирующим течением. МПА характеризуется поражением органов зрения, периферической нервной системы, желудочно-кишечного тракта.

Исследование АНЦА можно пройти в различных медицинских клиниках и медицинских центрах в Москве, а также в Юсуповской больнице. Существуют определенные требования для сдачи теста:

• Тест сдается утром, натощак. За 8-12 часов до сдачи анализа не следует принимать пищу.
• Перед сдачей теста нельзя есть жирную пищу.

В лаборатории Юсуповской больницы проводят исследования крови, мочи, кала, ликвора. В лаборатории можно пройти исследования для диагностики различных заболеваний, в том числе аутоиммунных. Перед проведением исследования пациент должен получить консультацию врача. Записаться на прием можно по телефону больницы или онлайн.

источник

Антитела к цитоплазме нейтрофилов (ANCA, АНЦА) – специфические иммуноглобулины A и G, действующие против белков цитоплазмы, содержимого азурофильных гранул нейтрофилов. Количество АТ в крови повышается на фоне первичных системных васкулитов, иногда – на фоне других аутоиммунных патологий. При поражениях сосудов среднего и мелкого калибра АНЦА представлены в основном протеиназой 3, миелопероксидазой. Исследование применяется с целью дифференциальной диагностики и мониторинга ангиитов. Биоматериалом для анализа является сыворотка венозной крови. Уровень IgA и IgG определяется методом непрямой реакции иммунофлуоресценции. При полуколичественном отображении результата в норме антитела не обнаруживаются. Исследование выполняется за 8-9 дней.

Антитела к цитоплазме нейтрофилов (ANCA, АНЦА) – специфические иммуноглобулины A и G, действующие против белков цитоплазмы, содержимого азурофильных гранул нейтрофилов. Количество АТ в крови повышается на фоне первичных системных васкулитов, иногда – на фоне других аутоиммунных патологий. При поражениях сосудов среднего и мелкого калибра АНЦА представлены в основном протеиназой 3, миелопероксидазой. Исследование применяется с целью дифференциальной диагностики и мониторинга ангиитов. Биоматериалом для анализа является сыворотка венозной крови. Уровень IgA и IgG определяется методом непрямой реакции иммунофлуоресценции. При полуколичественном отображении результата в норме антитела не обнаруживаются. Исследование выполняется за 8-9 дней.

Нейтрофилы – вид лейкоцитов зернистой структуры. Имеют гранулы трех типов, содержащие белки. Первичные гранулы содержат протеиназу 3, миелопероксидазу, бактерицидный белок, эластазу, катепсин G. Во вторичных гранулах присутствует лизоцим и лактоферрин, в третичных – желатиназа. При васкулитах вырабатываются первостепенные антитела: АТ к протеиназе 3 (PR-3), к миелопероксидазе (MPO); при других аутоиммунных патологиях, воспалительных болезнях кишечника – второстепенные: АТ к лактоферрину, анти-BPI. Реакция непрямой флуоресценции дает разные варианты свечения АНЦА в зависимости от преобладания PR-3 или MPO. Преимуществом исследования является высокая информативность при выявлении «первичных» антител, недостатком – трудоемкость процедуры анализа.

Основное назначение теста на антитела к цитоплазме нейтрофилов – выявление и мониторинг ангиитов. Показания к исследованию:

• Дифференциация системных васкулитов : гранулематоза Вегенера, микроскопического полиангиита, эозинофильного ангиита, ревматической пурупуры. Определение АНЦА необходимо при характерной клинической картине: повышении температуры, снижении массы тела, слабости, кожных высыпаниях, расстройствах кровообращения в конечностях, кашле, нарушении мочеиспускания, гипертензии, головных болях.
• Диагностика экстракапиллярного гломерулонефрита . Тест используется для уточнения причины нарушения работы почек. Назначается при наличии отеков, олигурии, повышении артериального давления в сочетании с признаками ангиита.
• Мониторинг системных васкулитов. Исследование назначается с определенной периодичностью при ремиссии болезни, после каждого курса лечения иммуносупрессорами. Уровень ANCA коррелирует с активностью патологических процессов, снижение показателя свидетельствует об успешности терапии, низком риске рецидива.
• Дифференциальная диагностика патологий: воспалительных болезней кишечника, легких, ревматоидного артрита, муковисцидоза, первичного склерозирующего холангита, полиневропатий, кокаиновой наркомании. Тест является дополнительным, назначается при наличии характерных симптомов. Присутствие «вторичных» АНЦА рассматривается в пользу одного из перечисленных заболеваний, позволяет с меньшей вероятностью предполагать васкулит.

Исследованию подвергается сыворотка венозной крови. Процедура сдачи биоматериала не требует специальной подготовки, рекомендуется соблюдать общие правила:

1. После приема пищи следует выдержать перерыв не менее 4 часов. Ограничений в потреблении чистой негазированной воды нет.
2. Накануне процедуры стоит избегать эмоционального напряжения, отказаться от тяжелых физических нагрузок, употребления алкогольных напитков.
3. Инструментальные диагностические процедуры, физиолечение разрешено проводить после сдачи биоматериала.
4. За неделю до сдачи крови необходимо сообщить врачу об используемых лекарствах.
5. За полчаса до процедуры нужно отказаться от курения. Это время стоит провести в спокойной обстановке, без физических нагрузок.

Забор биоматериала выполняется утром. Полой иглой прокалывается локтевая вена, кровь помещается в пустую пробирку или в пробирку с разделительным гелем. В лаборатории она устанавливается в центрифугу – происходит разделение жидкой части и сгустка. Затем из плазмы удаляется фибриноген, остается сыворотка. Для определения уровня ANCA используется непрямая реакция иммунофлуоресценции. Сроки проведения анализа составляют 8-9 дней.

Тест на определение антител к цитоплазме нейтрофилов может быть количественным или полуколичественным. В зависимости от этого результат выражается через титр или через показатель серопозитивности. В норме на итоговом бланке напротив каждого вида АТ отмечен один из вариантов: «титр >1:40», «отрицательно», «не обнаружено». При интерпретации итоговых показателей важно учитывать:

• Физиологические факторы, пол, возраст не влияют на уровень антител.
• Отрицательный результат не исключает наличия ангиита.
• Для постановки диагноза требуется учет данных клинических, лабораторных и инструментальных исследований.

При отклонении показателей исследования от нормы учитывается повышение концентрации ANCA определенного типа (MPO, PR-3 и других), класса (IgA, IgG), а иногда и характер свечения (цитоплазматический, перинуклеарный). Причинами повышения результатов являются:

• Васкулиты. Повышение концентрации первостепенных ANCA (MPO, PR-3) характерно для гранулематоза Вегенера, микроскопического полиангиита, узловатого периартериита, синдрома Чарга-Стросса, геморрагического васкулита.
• Кокаиновая наркомания. Повышается уровень антител к эластазе, определяется цитоплазматический тип свечения.
• Синдром Шегрена. Перинуклеарный тип свечения дают АТ к катепсину G.
• Ревматоидный артрит, анкилозирующий спондилоартрит, язвенный колит, СКВ. Перинуклеарное свечение определяется на фоне увеличения концентрации АТ к лактоферрину.
• Вирусные инфекции, злокачественные опухоли, IgA-нефропатия. АНЦА повышаются редко. Их выявление не имеет диагностической ценности.
• Другие заболевания: воспалительные болезни кишечника (болезнь Крона, НЯК), воспалительные болезни легких, ревматоидный артрит, муковисцидоз, саркоидоз, ПСХ. Свечение возникает из-за повышенного уровня анти-BPI.

Снижение уровня антител к цитоплазме нейтрофилов имеет диагностическую и прогностическую ценность при мониторинге ангиитов, оценке эффективности их лечения. Уменьшение концентрации АТ свидетельствует о состоянии ремиссии, положительном ответе на применение иммуносупрессоров.

Основное назначение исследования АНЦА – дифференциальная диагностика васкулитов, мониторинг их течения, оценка эффективности терапии. Учет типа и класса антител, характера свечения позволяет правильно поставить диагноз, составить прогноз заболевания, определить тактику лечения. Результат анализа необходимо обсудить с лечащим врачом – ревматологом, пульмонологом, нефрологом, дерматовенерологом.

источник

Лабораторное обследование больных системными васкулитами включает определение аутоантител, компонентов системы комплемента, клеточных иммунологических реакций, показателей активации эндотелия и острофазового ответа организма.

Для идентификации инфекционных агентов, ассоциирующихся с развитием васкулитов, проводят бактериологические и серологические тесты.

Основным методом определения антинейтрофильных цитоплазматических антител (АНЦА) является метод реакции непрямой иммунофлюоресценции (НРИФ) с использованием фиксированных спиртом нейтрофилов [A.Wiik, 1989], с помощью которого выявляются два основных типа аутоантител: классические цитоплазматические АНЦА (к-АНЦА) и перинуклеарные (п-АНЦА).

В некоторых случаях обнаруживается атипичное диффузное свечение нейтрофилов (а-АНЦА). В последнее время для определения антинейтрофильных цитоплазматических антител вместо НРИФ применяют проточную цитофлюориметрию.

к-АНЦА дают гранулярную цитоплазматическую флюоресценцию с большей интенсивностью по направлению к ядру нейтрофилов, чем к периферии. Кроме того, они реагируют с цитоплазмой моноцитов, но не эозинофилов, лимфоцитов или НЕр-2 клеток, которые используются для определения антинуклеарного фактора (АНФ), и обычно специфичны в отношении ПР-3.

п-АНЦА вызывают перинуклеарное свечение нейтрофилов и некоторых моноцитов и наиболее часто реагируют с миелопероксидазой. Этот тип свечения является как бы артефактом, обусловленным спиртовой фиксацией нейтрофилов. Обработка их спиртом позволяет зафиксировать клетки на поверхности стекла и увеличивает проницаемость клеточной мембраны для молекул Ig, но приводит к растворению липидной мембраны.

В результате этого содержимое цитоплазмы нейтрофилов распределяется вокруг них. Катионные молекулы (лизоцим, миелопероксидаза, эластаза, катепсин G и лактоферрин) могут связываться с отрицательно заряженными компонентами ядра собственных и близлежащих клеток и давать свечение, напоминающее АНФ. Вот почему при определении п-АНЦА необходима постановка соответствующих контролей с лимфоцитами донора или НЕр-2 клетками.

О наличии п-АНЦА можно судить только в том случае, если сыворотки реагируют только с нейтрофилами (или моноцитами) или если титр антител, реагирующих с полиморфно-ядерными лейкоцитами, в 2 раза выше, чем у антител, связывающихся с лимфоцитами. Для исключения перераспределения катионных антигенов предлагается фиксировать клетки формальдегидом, но это приводит к увеличению аутофлюоресценции и к потере ими некоторых антигенных детерминант.

В последнее время для определения антинейтрофильных цитоплазматических антител разработаны иммуноферментные методы с использованием иммобилизованных на твердой фазе кислых экстрактов цитоплазмы нейтрофилов, а-гранул или «чистых» нейтрофильных ферментов (ПР-3, миелопероксидаза и др.). В целом примерно у 85% больных с к-АНЦА обнаруживаются антитела к ПР-3, а у 90% больных с п-АНЦА выявляются антитела к миелопероксидазе.

Однако, хотя результаты определения АНЦА методом непрямой иммунофлюоресценции и иммунофермеитный метод (ИФМ) нередко совпадают, последний требует стандартизации [E.Hagen, 1993]. У части больных с к-АНЦА, по данным иммунофлюоресценции, в сыворотках обнаруживаются антитела к миелопероксидазе, и, наоборот, в сыворотках, в которых выявляются только антитела к миелопероксидазе, иногда идентифицируются не п-АНЦА, а к-АНЦА [M.Segelmark et al.,1994; J.Jennings et al.,1994].

Данные, касающиеся распространенности и типов антинейтрофильных цитоплазматических антител при заболеваниях человека, суммированы в таблицах 5.1 и 5.2.

Таблица 5.1. Частота (%) обнаружения АНЦА при заболеваниях человека (C.G.M.Kallenberg et al.,1995; W.L.Gross,1995)

Таблица 5.2. Тип антинейтрофильных цитоплазматических антител при заболеваниях человека

• Диагностика ANCA-ассоциированных системных васкулитов и быстропрогрессирующего гломерулонефрита;
• Мониторинг состояния пациентов после проведения лечения;
• Дифференциальная диагностика системных аутоиммунных заболеваний.

Референсные значения (вариант нормы):

• Обнаружено – свидетельствует о наличии специфических аутоантител;
• Не обнаружено – свидетельствует об отсутствии специфических аутоантител;
• Серая зона (пограничный результат) – рекомендуется повторить исследование не ранее, чем через 2 недели при отсутствии острых воспалительных заболеваний.

Результат лабораторного исследования не является диагнозом, интерпретация результатов проводится с учетом клинических проявлений и данных анамнеза.

• определение аутоантител проводится с целью подтверждения диагноза у пациентов с недостаточным количеством клинических критериев;
• обнаружение аутоантител при отсутствии клинических признаков не является достаточным для постановки диагноза аутоиммунного заболевания;
• отмечено нарастание частоты выявления аутоантител у лиц пожилого и старческого возраста, на фоне приема лекарственных препаратов, при вирусных и бактериальных инфекциях, злокачественных новообразованиях, у здоровых родственников больных аутоиммунными заболеваниями;
• при оценке клинического значения аутоантител необходимо учитывать стойкость и выраженность их гиперпродукции. Например, при инфекциях наблюдается умеренное транзиторное образование аутоантител, а при аутоиммунных заболеваниях – стойкая выраженная гиперпродукция.

Обращаем Ваше внимание на то, что интерпретация результатов исследований, установление диагноза, а также назначение лечения, в соответствии с Федеральным законом № 323-ФЗ «Об основах охраны здоровья граждан в Российской Федерации» от 21 ноября 2011 года, должны производиться врачом соответствующей специализации.

» [«serv_cost»]=> string(4) «2165» [«cito_price»]=> NULL [«parent»]=> string(2) «24» [10]=> string(1) «1» [«limit»]=> NULL [«bmats»]=> array(1) array(3) string(1) «N» [«own_bmat»]=> string(2) «12» [«name»]=> string(31) «Кровь (сыворотка)» > > >

Биоматериал и доступные способы взятия: Подготовка к исследованию:

Не менее 3 часов после последнего приема пищи. Можно пить воду без газа.

Метод исследования: Иммуноферментный анализ.

Антинейтрофильные цитоплазматические антитела (АНЦА) — гетерогенная популяция аутоантител, специфичных к цитоплазматическим антигенам гранулоцитов. АНЦА — надежные серологические маркеры системных некротизирующих васкулитов сосудов мелкого калибра, также именуемых ANCA-ассоциированными васкулитами (AAV).

В оответствии с Номенклатурой васкулитов пересмотра 2012 года (Arthritis & Rheumatism, 2013) к ANCA-ассоциированным васкулитам относятся: гранулематозный полиангиит (гранулематоз Вегенера), эозинофильный гранулематозный полиангиит (синдром Черджа-Стросс), микроскопический полиангиит, васкулит гиперчувствительности, пурпура Шенлейна-Геноха, болезнь Бехчета, криоглобулинемический васкулит, васкулит при ревматических заболеваниях (СКВ, РA, ССД, болезнь Шегрена), кожный лейкоцитокластический васкулит.

Различают два основных типа антинейтрофильных антител — цитоплазматические, взаимодействующие с протеиназой 3 (PR3, ПР3), и перинуклеарные, направленные против миелопероксидазы (МРО, МПО). Уровни анти-PR3 и анти-МРО коррелируют с клиническим статусом, они высоки в активную стадию заболеваний и снижаются во время ремиссии. Антитела к базальной мембране клубочков (AТ к GBM) используются в диагностике синдрома Гудпасчера, который характеризуется гломерулонефритом, легочными кровотечениями и образованием антител к базальной мембране клубочков.

Диагностическое значение аутоАТ

• Диагностика ANCA-ассоциированных системных васкулитов и быстропрогрессирующего гломерулонефрита;
• Мониторинг состояния пациентов после проведения лечения;
• Дифференциальная диагностика системных аутоиммунных заболеваний.

Референсные значения (вариант нормы):

• Обнаружено – свидетельствует о наличии специфических аутоантител;
• Не обнаружено – свидетельствует об отсутствии специфических аутоантител;
• Серая зона (пограничный результат) – рекомендуется повторить исследование не ранее, чем через 2 недели при отсутствии острых воспалительных заболеваний.

Результат лабораторного исследования не является диагнозом, интерпретация результатов проводится с учетом клинических проявлений и данных анамнеза.

• определение аутоантител проводится с целью подтверждения диагноза у пациентов с недостаточным количеством клинических критериев;
• обнаружение аутоантител при отсутствии клинических признаков не является достаточным для постановки диагноза аутоиммунного заболевания;
• отмечено нарастание частоты выявления аутоантител у лиц пожилого и старческого возраста, на фоне приема лекарственных препаратов, при вирусных и бактериальных инфекциях, злокачественных новообразованиях, у здоровых родственников больных аутоиммунными заболеваниями;
• при оценке клинического значения аутоантител необходимо учитывать стойкость и выраженность их гиперпродукции. Например, при инфекциях наблюдается умеренное транзиторное образование аутоантител, а при аутоиммунных заболеваниях – стойкая выраженная гиперпродукция.

Обращаем Ваше внимание на то, что интерпретация результатов исследований, установление диагноза, а также назначение лечения, в соответствии с Федеральным законом № 323-ФЗ «Об основах охраны здоровья граждан в Российской Федерации» от 21 ноября 2011 года, должны производиться врачом соответствующей специализации.

источник

Комплексный анализ на антитела к антигенам цитоплазмы нейтрофилов (ANCA), используемый для диагностики первичных системных васкулитов.

• Антитела к нейтрофилам
• Антинейтрофильные цитоплазматические антитела, АНЦА

Синонимы английские

• ANCA (Antineutrophil Cytoplasmic Antibodies), Panel
• ACPA (Anti-Neutrophil Cytoplasmic Antibodies)
• Anticytoplasmic Autoantibodies
• Anti-Neutrophil Cytoplasmic Abs

Непрямая реакция иммунофлюоресценции.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Как правильно подготовиться к исследованию?

• Не курить в течение 30 минут до исследования.

Общая информация об исследовании

Антитела к цитоплазме нейтрофилов (ANCA, от англ. anti-neutrophilic antibodies) – серологические маркеры, выявляемые у большинства пациентов с первичными системными васкулитами. При васкулитах ANCA направлены преимущественно против двух основных компонентов первичных гранул нейтрофилов – сериновой протеиназы-3 (анти-PR-3) и миелопероксидазы (анти-MPO). Следует, однако, отметить, что нейтрофилы человека содержат по меньшей мере 3 типа гранул, каждый из которых содержит несколько белков:

• азурофильные (первичные) гранулы (протеиназа-3, миелопероксидаза, бактерицидный белок, увеличивающий проницаемость мембран, эластаза, катепсин G);
• вторичные гранулы (лактоферрин, лизоцим);
• третичные гранулы (желатиназа).

Любые антигены в составе указанных гранул могут быть потенциальными мишенями для ANCA.

Для некоторых васкулитов характерны определенные типы свечения в непрямой реакции иммунофлюоресценции (РНИФ). Так, например, у большинства пациентов с гранулематозом Вегенера наблюдается так называемый цитоплазматический (c-ANCA) тип свечения РНИФ. Напротив, для пациентов с микроскопическим полиангиитом и синдромом Чарга – Стросс более характерен перинуклеарный (p-ANCA) тип свечения. c-ANCA-тип свечения наиболее часто обусловлен присутствием в сыворотке антител к протеиназе-3, а p-ANCA-тип свечения – антител к миелопероксидазе. У некоторых пациентов, положительных по ANCA в РНИФ, однако, не удается выявить ни анти-MPO, ни анти-PR-3. В этой группе РНИФ + /MPO — /PR-3 — свечение обусловлено присутствием в сыворотке антител к «второстепенным» антигенам цитоплазмы нейтрофилов:

• Антитела к лизоциму.
• Антитела к эластазе – эластаза похожа на протеиназу-3 и иногда формирует c-ANCA тип свечении в РНИФ. Показано, что антитела к эластазе часто определяются у пациентов с поражениями носовой полости при кокаинизме и что наличие этих антител может помочь в дифференциальной диагностике этого и другого, очень похожего на него, состояния – гранулематоза Вегенера.
• Антитела к катепсину G. Эти антитела, формирующие p-ANCA-тип свечения в РНИФ, выявляются у пациентов с синдромом Шегрена и гранулематозом Вегенера у детей.
• Антитела к лактоферрину также формируют p-ANCA-тип свечения. Они были выявлены у пациентов с ревматоидным артритом, васкулитами, анкилозирующим спондилоартритом, язвенным колитом и системной красной волчанкой. Появление антител к лизоциму и катепсину G также может быть спровоцировано приемом пропилтиоурацила при лечении гипертиреоза.
• Антитела к бактерицидному белку, увеличивающему проницаемость мембран (анти-BPI, от англ. antibodies to bactericidal permeability increasing proiein), могут образовывать c-ANCA-тип свечения в РНИФ. Эти антитела, однако, в большей степени ассоциированы с воспалительными заболевания кишечника, воспалительными заболеваниями легких, ревматоидным артритом и муковисцидозом, чем с первичными васкулитами.

В то время как диагностическое и прогностическое значение анти-MPO и анти-PR-3 хорошо известно, роль этих второстепенных антител не до конца ясна. Считается, что второстепенные антитела не определяются у здоровых людей. Приблизительно у 80 % пациентов с результатами анализов РНИФ + /MPO — /PR-3 — выявляется по крайней мере один тип второстепенных антител. Эта группа включает пациентов с первичными системными васкулитами (гранулематоз Вегенера, микроскопический полиангиит), а также другими воспалительными заболеваниями (например, неспецифический язвенный колит). Таким образом, в то время как анти-MPO и анти-PR-3 – это достаточно специфические для системных васкулитов серологические маркеры, второстепенные антитела – это неспецифические и поэтому дополнительные маркеры. Второстепенные антитела не позволяют провести дифференциальную диагностику первичных васкулитов. В настоящий момент их основное значение заключается в том, чтобы объяснить положительный результат в РНИФ при отсутствии анти-MPO и анти-PR-3.

Удобным диагностическим решением для врача и пациента является комплексный анализ, в ходе которого определяются как основные (анти-MPO и анти-PR-3), так и второстепенные антитела к цитоплазме нейтрофилов. Результаты анализа оценивают с учетом всех значимых клинических, дополнительных лабораторных и инструментальных данных.

Для чего используется исследование?

• Для дифференциальной диагностики и прогноза системных васкулитов (гранулематоза Вегенера, микроскопического полиангиита, синдрома Чарга – Стросс, быстропрогрессирующего гломерулонефрита).

Когда назначается исследование?

• При наличии симптомов системного васкулита: лихорадка, потеря веса, немотивированная слабость, кожные высыпания, синдром Рейно, носовые кровотечения, кашель с отхождением кровавой мокроты, гематурия, гипертензия, головная боль, очаговая неврологическая симптоматика, эпилепсия и др.

источник

зарегистрируйте свою электронную почту на сайте и получайте дополнительные информационные материалы по аутоиммунной диагностике

где сдать анализ крови на тест анализы спб СПб инвитро Петербург Питер на целиакию аутоиммунные заболевания аутоантитела аутоиммунная диагностика Лапин autoimmun антиядерные лабораторная антинуклеарный фактор антинуклеарные антитела HEp-2 тип волчанка свечения амилоидоз склеродермия иммуноблот ревматоидный цитруллиновый расшифровка экстрагируемые скрининг заболевания смешанное системная СКВ артрит дсДНК CCP ССР АЦЦП саркоидоз антинейтрофильные криоглобулины гранулематозные АНФ АНЦА ANCA ENA иммунофиксация васкулиты Крона целиакия аутоиммунный печени язвенный колит глиадину трансглутаминазе стероидпродуцируюшим Вегенера яичника эндокринопатии пузырные пузырчатка пемфигоид рассеянный склероз миастения миелина белок олигоклональный изоэлектрофокусирования IgG IgA IgM легкие цепи полиневрит ганглиозидам полимиозит парапротеин миелома неоптерин островковые GAD антимитохондриальные гладкие скелетные мышцы ASCA колит антигену фосфолипидный синдром кардиолипину фосфолипидам гликопротеину нуклеосомам SSA SSB RNP Sm CENT Scl Jo-1 АМА антикератиновые антиперинуклеарный MCV LKM-1 рецептору иммунофлюоресценция ИФА иммунологическая лаборатория университет санкт-петербург павлова Чардж-Стросса полиангиит микрокристаллические первичный билиарный цирроз трансглутаминаза трансглютаминаза критерии ревматоидного артрита 2010 года СПб Питер Петербург нейрогенетика

01 02 15 615, антитела к хгч, к двухспиральной ДНК, Кандида, ANCA 3 line, ответы на анализы, Pcna, Антитела к сахаромицетам IgG IgA, АРА, Реакция непрямой иммунофлюорисцен, Антитела к бета2 гликопротеину, С3 и с4 компоненты системы комплеме, эластаза в кале, ипирование криоглобулинемий с пом, пересадка стволовых клеток, иммуноглобулин 4G, скачать направление, серологические маркеры на воспали, узловата яэритема, показатель антител к тро, иммунология.

Диагностика васкулитов и поражения почек, Антитела к цитоплазме нейтрофилов

Диагностика васкулитов (аортоартериит Такаясу, височный артериит, с-м Кавасаки, узелковый полиартериит, с-м Вегенера, с-м Чарг-Штраусса, микроскопический полиангиит, быстропрогрессирующий гломерулонефрит, пурпура Шонлейн-Геноха, криоглобулинемия)

Васкулиты представляют собой широкий спектр заболеваний имеющих разнообразную природу. Среди них первичные васкулиты имеют аутоиммунную этиологию, а другие процессы являются вторичными по отношению к опухолям, инфекциям и коагулопатиям.

На основании классификации Чаппелл Хилл 1994 г. прервичные васкулиты делят по калибру пораженных сосудов и механизму иммунологического поражения. Васкулиты крупных сосудов (аортоартериит, височный артериит, узелковый периартериит) связаны с поражением эндотелия. Этот процесс сопровождается появлением антител к эндотелию и выбросом цитокинов, приводящих к выраженному острофазовому ответу, в том числе увеличению СОЭ и СРБ. По выраженности острофазовый ответ при системных васкулитах похож на сепсис.

Гранулематозные васкулиты, такие как с-м Вегенера, сопровождаются появлением антител к цитоплазме нейтрофилов (АНЦА или ANCA), которые реагируют с белками азурофильных гранул цитоплазмы нейтрофилов. Некоторые бактериальные агенты (стафилококки), производящие суперантигены, могут играть роль в индукции аутоиммунных ответов. Воспаление приводит к экспрессии антигенов антинейтрофильных антител на поверхности лейкоцитов и эндотелия. Взаимодействие антител к цитоплазме нейтрофилов (АНЦА) с мишенями приводит к преждевременной дегрануляции нейтрофилов при их трансэндотелиальной миграции и образованию воспалительной гранулемы. Существует ряд исследованных антигенов антинейтрофильных антител, из которых важнейшими являются протеиназа-3 (ПР-3 или PR-3) и миелопероксидаза (МПО или MPO). При воспалительных заболеваниях кишечника антитела к цитоплазме нейтрофилов (АНЦА или ANCA) направлены против плохо изученных антигенов.

Поражения мельчайших сосудов или капилляриты (с-м Шонлейн-Геноха, криоглобулинемия) возникают под воздействием циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК),которые представлены полимерными иммуноглобулинами и недостаточно растворимы. Так, резкое снижение растворимости ЦИК при криоглобулинемии на фоне охлаждения является причиной кожной пурпуры, артралгий, полиневрита и гломерулонефрита. При капилляритах целесообразно исследовать белки комплемента и антитела к ним. Биопсия кожи, при капилляритах позволяет обнаружить специфические отложения иммуноглобулинов в стенках мелких сосудах.

Тест 01.02.15.395 Антитела к эндотелиальным клеткам (HUVEC)

Антигенные мишени антиэндотелиальных антител невозможно очистить или синтезировать, поэтому основным методом выявления данных аутоантител является нРИФ на клетках эндотелия пуповины человека (HUVEC). Исследуется титр антител и у 70% больных с васкулитами крупных и средних сосудов отмечается положительный результат обнаружения антител. Антитела к эндотелию могут иметь перекрестную реакцию с антикардиолипиновыми антителами.

Тест 01.02.15.010 Антинейтрофильные цитоплазматические антитела (АНЦА или ANCA)

Основной тест для выявления антинейтрофильных антител является нРИФ с исследованием титра и типа свечения цитоплазмы клетки. Выделяют два основных типа свечения антител к цитоплазме нейтрофилов (АНЦА или ANCA) – цитоплазматический (характерный для с-ма Вегенера) и перинуклеарный (характерный для других васкулитов и воспалительных заболеваний кишечника). Для описания типов свечения антител к нейтрофилов обычно используются сокращения – цАНЦА и пАНЦА. Кроме того, при выявлении антител к цитоплазме нейтрофилов (АНЦА) могут быть обнаружены антитела против ядер нейтрофилов или редкий тип свечения хАНЦА. При обнаружении положительного результата обнаружения АНЦА необходимо определить антигенную специфичность антител. Целесообразно выявлять АНЦА совместно с АНФ ( тест 01.02.15.035 ), так как последние могут маскировать АНЦА, а также АНФ, АНЦА и РФ в качестве скрининга васкулитов и ревматической патологии ( тест 01.02.15.020 ).

Тест 01.02.15.140 Антитела к протеиназе 3 (ПР3 или PR-3),

Тест 01.02.15.135 Антитела к миелопероксидазе (МПО или MPO),

Тест 01.02.15.415 Антитела к антигенам антинейтрофильных антител (6 антигенов)

В азурофильных гранулах цитоплазмы нейтрофилов находится ряд белков, которые осуществляют микробицидные и бактерицидные функции этих клеток. Антитела к ним играют большое значение в диагностике васкулитов, поражений печени и заболеваний кишечника.

источник

АНЦА — гетерогенная популяция аутоантител, реагирующих с фермента­ми, локализованными в цитоплазме нейтрофилов. Основнык методом опреде­ления АНЦА является метод непрямой иммунофлюоресценции с использова­нием фиксированных спиртом нейтрофилов, с помощью которого выявляют ся 2 основных типа аутоантител: цитоплазматические АНЦА (цАНЦА).

Метод определения. Основным методом определения АНЦА является ме­тод непрямой иммунофлюоресценции. В последнее время длг определения АНЦА рекомендуется использовать проточную цитофлюори метрик) и ИФМ.

Частота АНЦА при заболеваниях человека (%)

м ие л опероксидаза)

Метод НИФ. Ход исследования. Гранулоциты доноров выделяют из гепа­рин изированной венозной крови с использованием 6% раствора декстрана Т- 500 (8^та) с последующим центрифугированием клеток и градиенте плотно­сти Н181ора9ие“1077 (51&та). Осадок лейкоцитов отмывают 3 раза РВ8, разво­дят РВ8, содержащим 5% В8А до концентрации клеток 2>:106 в 1 мл и наносят по 25 мкл на предметное стекло. После высушивания препарат фиксируют 99% спиртом в течении 5 мин. при 4°С и дважды отмывают РВ8 Затем нано­сят 20 мкл исследуемой сыворотки в разведении от 1:16 до 1:512 После инку­бации при комнатной температуре в течении 30 мин препарат дважды отмыва­ют РВ8. Затем наносят 25 мкл кроличьей антисыворотки к иммуноглобулинам человека (1^С+1^А+1§М), меченной ФИТЦ, и инкубируют р течении 30 мин при комнатной температуре. Препарат дважды отмывают РВ8, просушивают и анализируют с помощью люминисцентного микроскопа. Интерпретация ре­зультатов. цАНЦА обычно дают гранулярную цитоплазматическую флюорес­ценцию с большей интенсивностью по направлению к ядру нейтрофилов, чем к периферии. пАНЦА дают перинуклеарное свечение нейтрофилов и некото­рых моноцитов. Этот тип свечения часто является как бы артефактом, обсу- ловленным спиртовой фиксацией нейтрофилов. Обработка спиртом позволя ет зафисиксировать клетки на поверхности стекла и увеличивает проницае­мость клеточной мембраны для молекул иммуноглобулинов, но рас гворяет ли­пидную мембрану, что позволяет содержимому цитоплазмы нейтрофилов рас­пределяться вокруг клеток или вступать в контакт с близлежащими клетками.