Меню Рубрики

Расшифровка анализа ифа антитела суммарно

Антитела к сифилису начинают вырабатываться через три-четыре недели после проникновения в организм бледной трепонемы (Treponema pallidum). Эти белковые соединения синтезируются иммунной системой в качестве защитной реакции. Таким образом идет естественная борьба с инфекцией, о существовании которой больной длительное время может не подозревать. Современные методы исследования крови позволяют определить наличие антител к сифилису, а также его стадию. При выявлении венерического заболевания на раннем этапе развития риск возникновения серьезных последствий значительно снижается, а лечение проходит эффективно и в короткие сроки.

Продуцируемые организмом белковые образования подразделяются на два класса:

  1. Ранние — IgM. Эти иммуноглобулины начинают образовываться в крови через 7-17 суток с момента внедрения в организм патогенного возбудителя. С помощью специальных тест-систем в условиях лаборатории можно обнаружить белки класса М вскоре после инфицирования человека. После успешно проведенного курса терапии они начинают быстро снижаться и со временем полностью исчезают.
  2. Поздние — IgG. Этот класс антител появляется в организме и постепенно увеличивается через месяц после заражения. Белковые соединения класса G имеют нетрепонемное происхождение и образуются как ответ на происходящие реакции. Антилипидные образования могут оставаться в течение года с момента завершения курса терапии. В некоторых случаях антитела класса G остаются на длительный период и даже на всю жизнь.

Важно знать, что содержащиеся в крови иммуноглобулины после успешно проведенного лечения сифилиса не способны защитить человека от вторичного инфицирования бледными трепонемами.

Если врач подозревает, что новорожденный заражен патогенными микроорганизмами, его кровь исследуется на антитела класса G. Они продуцируются через три недели после того, как у женщины наступила беременность. Иммуноглобулины присутствуют в организме ребенка 1-1,5 года с момента появления его на свет. Их наличие может говорить о врожденной форме сифилиса, требующей проведения курса терапии антибактериальными препаратами.

Антитела, продуцируемые в ответ на проникновение патогенного возбудителя в организм, у многих пациентов присутствуют в крови в течение длительного периода и обнаруживаются при регулярном обследовании, что доставляет немалый дискомфорт при получении лабораторных результатов.

После длительной терапии антибактериальными препаратами количество антител в крови начинает заметно уменьшаться. Это означает, что защитные тельца образуются в меньших количествах, но полностью они не исчезают. Врачи утверждают, что убрать их все невозможно.

Если человек уверен, что венерическое заболевание полностью вылечено, и при этом половые контакты ведутся только с одним здоровым партнером, можно проходить исследование крови с помощью анализа RW.

Иммуноглобулины класса М исчезают спустя полгода после терапии заболевания, выявленного на начальном этапе. После лечения сифилиса поздней стадии они пропадают через год. При отсутствии врачебных мер эти антитела уменьшаются через 1,5 года, что не означает улучшение состояния больного. Как правило, запущенные формы сифилиса сопровождаются усугублением патологических процессов, связанных с нарушением работы внутренних органов и систем. При отсутствии терапии сифилис ведет к потере работоспособности и затем к смерти.

Иммуноглобулины класса G циркулируют в крови много лет. У некоторых пациентов – всю жизнь. Такое явление носит название «серологический шрам».

Так как при проникновении в кровяное русло возбудителя венерического заболевания начинают вырабатываться два вида иммуноглобулинов, для получения точного результата и постановки верного диагноза врачи-венерологи рекомендуют проходить исследование методом ИФА. Иммуноферментный анализ позволяет учитывать суммарные антитела к сифилису. В его основе лежит способ взаимного действия белковых образований с антигенами бледной трепонемы.

ИФА-анализ охватывает антитела классов A, M, G. Для выявления сифилиса применяется совокупный метод. С помощью иммуноферментного анализа имеется возможность определять стадию развития инфекционного процесса и его динамику, поскольку специфические белки синтезируются организмом в определенной последовательности.

Если ИФА-анализ показал положительный результат, это не значит, что будет поставлен диагноз «сифилис», поскольку эта тест-система показывает только присутствие антител в крови. Для подтверждения того, что в организме имеется возбудитель венерического заболевания, врачи назначают исследование биологического материала с помощью метода РПГА, дающего полную картину работы иммунной системы как ответ на внедрение инфекционного агента.

Не всегда анализы на сифилис дают верные результаты, поэтому пациентам рекомендуется проходить обследования несколькими методами. Если антитела в крови не обнаруживаются, но в то же время все признаки венерического заболевания присутствуют, значения тестов считаются ложноотрицательными. И наоборот, анализы могут показывать наличие инфекции в организме, но человек не заражен бледной трепонемой. Такие результаты называют ложноположительными и требуют повторных исследований с применением нескольких тест-систем.

Распространенной причиной получения ложноотрицательных значений является маленький промежуток времени с момента инфицирования. Часто анализы не могут выявить заболевание, находящееся в инкубационном периоде, в котором образование антител еще не произошло. Ложноотрицательный ответ может быть получен при наличии у пациента таких состояний, как:

  • гепатит В;
  • онкологические процессы;
  • аутоиммунное заболевание;
  • цирроз печени;
  • ВИЧ-инфекция;
  • инфаркт миокарда.

После вакцинации также могут выявляться антитела. Именно поэтому о проведении подобных процедур необходимо обязательно сообщить врачу-венерологу перед тем, как сдавать анализы.

Также желательно уведомить специалиста о приеме определенных лекарственных препаратов, прохождении физиопроцедур, исследований с помощью рентгена.

Современные тест-системы позволяют быстро и качественно выявлять венерическое заболевание, связанное с проникновением в организм человека бледных трепонем. При этом необходимо знать, что антитела к сифилису могут обнаруживаться при использовании многих методов при наличии у пациента некоторых патологий. В этом случае, когда врач не выявил признаки инфицирования, требуется повторное проведение исследования с применением разных тест-систем.

источник

Что это за анализ? Это выявление суммарных антител класса M и G к возбудителю сифилиса, которое может использоваться как эффективный сверхчувствительный скрининговый тест для диагностики раннего инфицирования сифилисом.

На данный момент Реакция Вассермана считается устаревшей, и с 2006 года для диагностики сифилиса почти не применяется. Ее заменили более чувствительные и современные анализы. Однако на бланках до сих пор выводят неизменное «RW». Подпись «RW » — это дань традиции, маленькое негласное правило среди врачей: оставляя старую подпись, сейчас имеют в виду новые современные анализы на сифилис.

Какой биоматериал можно использовать для исследования? Венозную кровь

Treponema pallidum (бледная трепонема) – бактерии, которая вызывает сифилис – хроническое венерическое инфекционное заболевание, которое чаще всего передается половым путем, например при прямом контакте с сифилитической язвой (твердым шанкром), также возможно внутриутробное заражение.

Источником инфекции является больной человек. Сифилис легкоизлечим, но грозит серьезными проблемами со здоровьем при бездействии. Инфицированная мать способна передавать заболевание своему плоду, у которого могут развиться серьёзные и необратимые изменения.

Сифилис относят к классическим заболеваниям, передающимся половым путем (венерическим болезням). Возбудитель – бледная трепонема (Treponema pallidum). Сифилис характеризуется медленным прогрессирующим течением. На поздних стадиях он может приводить к тяжелым поражениям нервной системы и внутренних органов

Симптомы сифилиса

Симптомы сифилиса очень разнообразны. Они меняются в зависимости от стадии заболевания. Выделяют три стадии сифилиса:

Первичный сифилис возникает после окончания инкубационного периода. В месте проникновения возбудителя в организм (половые органы, слизистая рта или прямой кишки) возникает безболезненная язва с плотным основанием (твердый шанкр). Через 1-2 нед после возникновения язвы увеличиваются ближайшие лимфатические узлы (при локализации язвы во рту увеличиваются подчелюстные, при поражении половых органов – паховые). Язва (твердый шанкр) самостоятельно заживает в течение 3-6 нед. после возникновения.

Вторичный сифилис начинается через 4-10 нед после появления язвы (2-4 мес. после заражения). Он характеризуется симметричной бледной сыпью по всему телу, включая ладони и подошвы. Возникновение сыпи нередко сопровождается головной болью, недомоганием, повышением температуры тела (как при гриппе). Увеличиваются лимфатические узлы по всему телу. Вторичный сифилис протекает в виде чередования обострений и ремиссий (бессимптомных периодов). При этом возможно выпадение волос на голове, а также появление разрастаний телесного цвета на половых органах и в области заднего прохода (широкие кондиломы).

Третичный сифилис возникает в отсутствие лечения через много лет после заражения. При этом поражается нервная система (включая головной и спинной мозг), кости и внутренние органы (включая сердце, печень и т. д.).

При заражении во время беременности у ребенка возможен врожденный сифилис.

Осложнения сифилиса

По результатам научных исследований, в отсутствие лечения примерно у трети больных развивается третичный сифилис. Примерно четверть больных из-за него погибает. Врожденный сифилис может приводить к тяжелым поражениям или смерти ребенка.

Лечение сифилиса

Достаточно сложное и требует дальнейшего длительного наблюдения. Стоит отметить, что лечение сифилиса на ранних стадиях не представляет особенной сложности с точки зрения выбора препаратов. Особенность бледной трепонемы заключается в том, что она все еще сохраняет чувствительность к пенициллину, который является препаратом выбора при сифилисе.

В случае аллергии на пенициллин назначают антибиотики из ряда макролидов (эритромицин,кларитромицин) или цефалоспоринов (цефтриаксон и тд). Препараты назначаются внутримышечно или в таблетках. Лечение активных форм заболевания проходит в стационарных условиях, пациенты с латентной формой могут получать амбулаторную терапию. Длительность лечения зависит от стадии заболевания и может занимать от нескольких недель до нескольких лет.

Антитела к возбудителю сифилиса

Когда происходит контакт человека с T. pallidum, его иммунная система реагирует, вырабатывая антитела к бактерии. В крови могут быть обнаружены два вида антител к бледной трепонеме: IgM и IgG. В ответ на инфицирование T. pallidum антитела IgM к T. pallidum вырабатываются организмом в первую очередь. Они выявляются у большинства пациентов в конце второй недели заболевания и присутствуют у них в первичную и вторичную стадию. Иммуноглобулины класса G к T. pallidum в определяемых количествах появляются в крови через 3-4 недели после инфицирования. Концентрация их нарастает и на 6-й неделе начинает преобладать над концентрацией IgM, достигая максимума, а затем сохраняется на определённом уровне в течение длительного времени. Начиная с 4-й недели в крови нарастает количество обоих видов иммуноглобулинов, что ведет к положительному результату теста на суммарные антитела к T. Pallidum. Это позволяет использовать данное исследование для ранней диагностики инфицирования T. pallidum. После эффективного лечения концентрация иммуноглобулинов постепенно снижается, но происходит это медленно, в отдельных случаях антитела могут обнаруживаться спустя год и более. От сифилиса можно избавиться с помощью антибиотиков, причём предпочтительно применять производные пенициллина. На ранней стадии заболевание лечится легче и быстрее. Более длительная терапия может понадобиться для пациентов, инфицированных больше года.

Зачем проводится анализ?

Повышение и понижение показателей

Для диагностики сифилиса. Для обследования всех беременных с профилактической целью (желательно на первом приеме гинеколога, при постановке на учет).

Когда назначается исследование? При симптомах сифилиса, таких как твердый шанкр на половых органах или в горле. Когда пациент лечится от другого ЗППП, например от гонореи. При ведении беременности, потому что сифилис может передаться развивающемуся плоду и даже убить его. Когда необходимо определить точную причину заболевания, если у пациента неспецифические симптомы, которые схожи с сифилисом (нейросифилисом). Если пациент инфицирован, он должен повторить анализ на сифилис через 3, 6, 12 и 24 месяца, чтобы убедиться, что лечение прошло успешно.

Результаты/Норма/Расшифровка анализа

Референсные значения (значения в норме)

Результат: отрицательно. Отношение S/CO (signall/cutoff): 0 — 0,9.

Положительный результат означает, что у пациента недавно приобретённое инфицирование. Вместе с тем отрицательный результат не всегда означает, что у пациента нет сифилиса.

Положительный результат

Положительный результат у ранее серонегативного пациента, а также значительный прирост титров в парных сыворотках, взятых с интервалом 7 дней, говорит о первичной инфекции. Обнаружение антител к трепонеме в крови новорождённого помогает подтвердить диагноз «врождённый сифилис». Кроме того, причиной положительного результата может быть третичный или скрытый сифилис.

Отрицательный результат

Отрицательный результат анализа может свидетельствовать об отсутствии инфицирования или слишком раннем его сроке, когда не выработался иммунный ответ. При этом отсутствие антител у младенца, родившегося от инфицированной матери, не исключает врождённого заболевания, поскольку на момент исследования антитела могут ещё не сформироваться.

Подготовка к сдаче анализа

Не курить в течение 30 минут до сдачи крови

Что может повлиять на результат анализа?

Могут отмечаться ложноположительные результаты при таких заболеваниях, как ВИЧ, болезнь Лайма, малярия, системная красная волчанка, некоторые виды пневмоний, а также при наркомании и беременности. И многие другие соматические заболевания.

Важные замечания

  • Обследование на сифилис обязательно должно быть комплексным и включать в себя учёт анамнеза, клинической картины и подтверждение диагноза лабораторными данными.
  • Людям, ведущим активную сексуальную жизнь, необходимо консультироваться с врачом насчёт любых подозрительных высыпаний или болей в области половых органов.
  • Если у пациента выявлено инфицирование, ему необходимо поставить в известность и своего сексуального партнера (партнершу), чтобы он (она) тоже прошел обследование и при необходимости лечение.
  • При сифилисе риск заражения другими заболеваниями, передающимися половым путем, повышается, в том числе риск заражения ВИЧ, который ведёт к СПИДу.
Читайте также:  Анализ расшифровка антитела к вирусу кори

• Сифилис может также передаваться при переливании крови через загрязненные медицинские инструменты, поэтому перед госпитализацией в стационар очень важно проводить обследование.

источник

Иммуноферментный анализ крови является распространенным методом выявления различных патологий. Результат анализа крови, расшифровка ИФА которого была интерпретирована врачом лабораторной диагностики, является достоверным в большинстве случаев.

ИФА — современный диагностический метод, который применяется для диагностики инфекций, гормональных и иммунных нарушений, онкологических заболеваний в лабораторных условиях. Метод позволяет выявить антитела к инфекции уже на ранних сроках заболевания. Данный метод относится к непрямым диагностическим методам, так как он выявляет иммунный ответ организма. Среди преимуществ ИФА в сравнении с другими методами диагностики можно выделить высокий уровень технологичности, что уменьшает вероятность ошибок. Метод является высокочувствительным и применяется для диагностики заболеваний как у детей, так и у взрослых. Существует обширное количество различных модификаций ИФА.

Метод ИФА основывается на специфичности иммунохимических реакций, а также физико-химических закономерностях реакций комплексов антиген-антитело. Реакции производятся с участием специфических ферментов, которые являются метками для определения антител. В результате иммунохимической реакции строго определенные антитела связываются с соответствующими антигенами. Исследование крови методом иммуноферментного анализа почти исключает возможность получения ложноположительного результата. О положительном или отрицательном результате специалисты лабораторной диагностики судят исходя из того, произошло ли окрашивание раствора в ходе ферментативной индикации комплекса антиген-антитело. Если раствор окрасился, то произошло взаимодействие антигена с антителом, результат ИФА положителен.

Исследование методом иммуноферментного анализа позволяет:

  • выявить ряд инфекционных заболеваний;
  • диагностировать аутоиммунные заболевания;
  • выявить наличие онкологии;
  • определить гормональные нарушения;
  • произвести иные исследования.

Анализ крови методом ИФА позволяет определить наличие следующих инфекций:

  • вирусные гепатиты;
  • ВИЧ;
  • цитомегаловирус;
  • вирус Эпштейн-Барра;
  • герпетические инфекции;
  • краснуха;
  • боррелиоз;
  • паразитарные инфекции;
  • ЗППП;
  • иные инфекции.

Метод применяется для выявления антигенов возбудителей ряда инфекций, а также для выявления антител различных классов. Большую популярность метод ИФА получил для выявления сифилиса, ВИЧ, вирусных гепатитов. Определять наличие и уровень антител в сыворотке крови с целью первичной диагностики ИППП не рекомендуется. В данном случае наличие антител в крови может быть лишь признаком того, что организм пациента контактировал с возбудителем инфекции в прошлом.

Диагностика различных аутоиммунных заболеваний методом ИФА производится посредством исследования:

  • антинуклеарных тел;
  • антител к двухспиральной ДНК;
  • антител к растворимым нуклеарным антигенам (ENA скрин);
  • антикардиолипиновых антител;
  • IgG к цитрулиновому пептиду;
  • ревматоидного фактора;
  • С-реактивного белка;
  • аутоантител к цитоплазматическим антигенам нейтрофилов (ANCA скрин).

Специфические иммунные комплексы характерны для определенных аутоиммунных заболеваний. Например, антитела двуспиральной ДНК являются характерными для такого заболевания, как системная красная волчанка.

Определение онкологических заболеваний производится при иммуноферментном исследовании сыворотки крови на специфические онкомаркеры, такие как ПСА, СА-125.

ПСА свидетельствует о наличии аденомы простаты и рака простаты. СА-125 — это онкомаркер злокачественной опухоли яичника. Значение повышается и при раковых опухолях матки, молочных желез, эндометрия.

Чтобы обеспечить максимальную точность результатов, нужно следовать определенным правилам подготовки к исследованию. Анализ для лабораторной диагностики методом ИФА, как правило, сдается утром из локтевой вены. Сдавать кровь необходимо строго натощак. Кроме этого простого предписания, следует выполнять следующие рекомендации по подготовке:

  • за 24 часа до исследования необходимо исключить прием алкоголя и курение;
  • избегать тяжелых физических нагрузок;
  • пребывать в спокойном состоянии;
  • избегать нервного напряжения;
  • сдавать кровь на ИФА не ранее, чем через 10 дней после отмены лекарств;
  • предупредить врача о приеме необходимых лекарств.

Кроме того, за несколько дней до сдачи анализа рекомендуется придерживаться диеты. При этом из рациона исключить жирные продукты, жареную пищу. Перед анализом на вирусные гепатиты из рациона исключить не только жирное и жареное, но и цитрусовые, а также оранжевые овощи.

Следует отметить, что на результаты определенного спектра гормональных исследований влияет такой фактор, как фаза менструального цикла. Необходимость сдавать анализ в ту или иную фазу менструального цикла следует заранее обговорить с лечащим врачом. В противном случае можно получить неожиданные показатели. Так, например, нормальный уровень лютеинизирующего полового гормона у женщин варьируется в зависимости от дня цикла:

  • 1-12 день — 2-14 мЕд/л;
  • 12-14 день — 24-150 мЕд/л;
  • с 15 дня до начала нового цикла — 2-17 мЕд/л.

Анализ позволяет установить наличие в организме антител различных классов. Существуют антитела 3 классов:

Выработка этих антител происходит на различных стадиях заболевания. Самыми первыми после заражения в организме начинают вырабатываться антитела IgM. Их наличие является показателем болезни в любом случае. В организме здорового человека этот класс антител отсутствует.

Эти иммуноглобулины присутствуют в сыворотке крови около 5-6 недель.

Иммуноглобулины класса G, присутствующие в крови, говорят о том, что человек либо уже перенес заболевание, либо является носителем инфекции. Эти антитела начинают вырабатываться после антител класса М, при большинстве заболеваний на 3-4 неделю после заражения. Их присутствие в организме возможно в течение нескольких лет. А при некоторых болезнях (например, сифилисе) IgG присутствуют в крови пожизненно.

Если в организме присутствуют IgA, необходимо как можно интенсивнее бороться с инфекцией. Антитела этого класса появляются лишь в случае хронического инфекционного заболевания. Исчезновение IgA говорит об уничтожении инфекции.

Если анализ ИФА производится в детском возрасте до 1,5 лет, должна учитываться следующая особенность: кровь ребенка содержит IgG матери к различным инфекциям. Это совсем не означает, что ребенок болен. В таком случае это скорее норма. Наличие IgM является свидетельством внутриутробной инфекции либо инфекции, приобретенной уже после рождения. IgM матери не могут проникнуть в организм ребенка через плаценту.

В таблице представлены возможные комбинации наличия или отсутствия в организме антител 3 классов и их интерпретации.

Таблица 1
IgM IgG IgA Расшифровка
Иммунитет к инфекции отсутствует
+ Имеется поствакцинальный или постинфекционный иммунитет
+ -/+ -/+ Острая инфекция
+ + + Обострение хронической инфекции
+/- +/- Наличие хронической инфекции

При расшифровке анализов (+) свидетельствует о положительном результате, а (-) говорит об обратном, то есть об отрицательном. Результат, показывающий наличие или отсутствие какого-либо вещества в организме, называется качественным. Он может быть дополнен количественным. Количественный результат отображает количественное содержание различных веществ в организме.

Стоит отметить, что тест-системы имеют собственные, определенные изготовителем, референтные значения, которые характеризуют показатели. Превышения референтных значений, как правило, означают наличие тех или иных патологий в организме исследуемого.

После получения результатов ИФА расшифровку полученных значений должен производить лечащий врач. Только он сможет произвести правильную оценку полученных результатов и определить стадию заболевания.

источник

Анализ крови на антитела – виды (ИФА, РИА, иммуноблоттинг, серологические методики), норма, расшифровка результатов. Где можно сдать анализ крови на антитела? Цена исследования.

Сайт предоставляет справочную информацию исключительно для ознакомления. Диагностику и лечение заболеваний нужно проходить под наблюдением специалиста. У всех препаратов имеются противопоказания. Консультация специалиста обязательна!

Анализ крови на антитела означает совокупное название целого ряда лабораторных методов диагностики, предназначенных для определения различных веществ и микроорганизмов в крови по наличию антител к этим выявляемым биологическим структурам.

Чтобы понимать значение термина «анализ крови на антитела», нужно знать, что такое антитела, против чего и кого они бывают, и как используются в лабораторных методах.

Итак, антитела представляют собой белки, которые вырабатываются клетками иммунной системы (В-лимфоцитами) против каких-либо микробов, попавших в организм, либо против биохимических молекул. Вырабатываемые иммунными клетками антитела предназначены для уничтожения тех микроорганизмов или биохимических соединений, против которых они были синтезированы. Иными словами, когда иммунные клетки синтезируют достаточное количество антител, последние появляются в системном кровотоке и начинают планомерное уничтожение микробов или биологических молекул, попавших в организм человека и вызывающих различные заболевания.

Иммунные клетки вырабатывают исключительно специфичные антитела, которые работают и уничтожают только строго определенный вид микробов или биомолекул, ранее распознанные иммунной системной, как чужеродные. Схематично это происходит следующим образом: в организм попадает какой-либо патогенный микроорганизм или биологическая молекула. На это соединение или микроб «садится» клетка иммунной системы, которая как бы «считывает» его характеристики (имеющиеся на поверхности белки-рецепторы), то есть «знакомится». Далее иммунная клетка-посредник путем сложного каскада биохимических реакций передает «считанную информацию» лимфоцитам. Получившие «информацию» лимфоциты активируются – они как бы приняли «задачу». И после активации лимфоциты начинают синтезировать антитела, которые содержат рецепторы, позволяющие им «узнавать» и прицепляться к поверхности только тех микробов или молекул, «характеристики» которых были переданы клетками-посредниками. В результате получаются строго специфические антитела, эффективно уничтожающие исключительно «узнанные» патогенные микробы и биомолекулы.

Такие специфические антитела нарабатываются в организме всегда при попадании в него какого-либо патогенного микроорганизма – бактерии, вируса, простейшего, гельминта и т.д. Также антитела могут синтезироваться для уничтожения биологических молекул, которые иммунная система признала «чужеродными». Например, при попадании в организм крови другой группы иммунная система распознает ее эритроциты, как «чужие», передает сигнал лимфоцитам, которые нарабатывают антитела, в свою очередь, уничтожающие чужеродные эритроциты. Из-за этого развивается реакция «хозяин против трансплантата».

Но всегда иммунная система вырабатывает антитела, действующие строго против конкретного микроба или биомолекулы, а не против всех, кто «похож» на них. Благодаря подобной специфичности и избирательности не происходит уничтожения антителами нужных клеток и биомолекул, а подвергаются нападению только признанные иммунной системой «чужими» и опасными.

Антитела на языке биохимии называются иммуноглобулинами, и обозначаются английской аббревиатурой Ig. В настоящее время выделяют пять классов иммуноглобулинов, которые может синтезировать В-лимфоцит, – это иммуноглобулины А (IgA), иммуноглобулины G (IgG), иммуноглобулины М (IgM), иммуноглобулины Е (IgE) и иммуноглобулины D (IgD). Каждый класс иммуноглобулинов обладает вышеописанной специфичностью в отношении уничтожаемых им микробов или биомолекул. Но каждый класс иммуноглобулинов имеет и, так сказать, свой «фронт», на котором они действуют.

Так, иммуноглобулины А, главным образом, расположены на слизистых оболочках, и обеспечивают уничтожение патогенных микробов во рту, носу, носоглотке, мочеиспускательном канале, влагалище. Иммуноглобулины М нарабатываются первыми при попадании микроба в кровоток, и потому считаются ответственными за острый воспалительный процесс. Иммуноглобулины G, напротив, нарабатываются медленнее, но зато долго циркулируют в крови и обеспечивают уничтожение всех остатков микробов, попавших в организм. Именно иммуноглобулины G ответственны за хронический инфекционно-воспалительный процесс, который они поддерживают вялотекущим, уничтожая патогенные микробы настолько, что они не могут привести к смертельному исходу, но недостаточно для их полного удаления из организма. Иммуноглобулины Е обеспечивают постоянное протекание аллергических реакций, так как вырабатываются в ответ на различные антигены, присутствующие в окружающей среде. А иммуноглобулины D выполняют разные функции.

Таким образом, обобщая вышесказанное, можно коротко резюмировать, что антитела в крови могут быть различных классов, и что каждое антитело строго специфично к какому-либо патогенному микробу либо к биомолекуле.

Когда лабораторными методами определяют наличие в крови антител, то обязательно указывают, к какой биомолекуле или к какому микробу ищут антитела. Определение антител к какому-либо микробу позволяет понять, заражен человек этим микроорганизмом или нет, так как если заражение отсутствует, то и антител в крови не будет. Но если заражение имеется, то в крови у человека будут циркулировать антитела, нарабатываемые иммунной системой для уничтожения микроорганизма.

Кроме того, определение антител в крови используют для того, чтобы понять, болел ли в прошлом человек какой-либо инфекцией. Такое применение анализа на антитела возможно благодаря тому, что даже после полного выздоровления в крови у человека остается небольшое количество антител (клеток памяти), уничтоживших патогенный микроб. Эти антитела циркулируют в крови «на всякий случай», чтобы при повторном попадании в организм такого же, уже знакомого микроба сразу его уничтожить и даже не дать болезни начаться. Собственно, именно такие клетки памяти и обеспечивают то, что называется иммунитетом к инфекции, а именно – то, что человек, перенесший болезнь, больше ей не заражается.

Анализ крови на антитела проводят с целью обнаружения антител к тому или иному конкретному микроорганизму или биомолекуле. Причем для обнаружения каждого конкретного вида антител делают отдельный анализ. Например, иммунная система организма против вируса гепатита В вырабатывает несколько разных антител – антитела против оболочки, антитела против ДНК вируса и т.д. Соответственно, для обнаружения антител против оболочки вируса гепатита В выполняют один анализ, а для выявления антител против ДНК вируса – другой анализ, и т.д. Таким образом, совершенно справедливым является простое правило: один вид антител – один анализ. Это правило всегда нужно учитывать при планировании обследования, когда нужно обнаружить антитела в крови к каким-либо патогенным микроорганизмам или биомолекулам.

Наличие антител в крови к различным микробам и биомолекулам определяют целым рядом различных лабораторных методик. В настоящее время наиболее распространенными методами выявления различных антител в крови являются следующие методы:

  • Иммуноферментный анализ (ИФА, ELISA);
  • Радиоиммунный анализ (РИА);
  • Иммуноблоттинг;
  • Серологические методики (реакция гемагглютинации, реакция непрямой гемагглютинации, реакция торможения гемагглютинации и т.д.).
Читайте также:  Анализ суммарные антитела к гельминтам

Рассмотрим методы определения наличия антител в крови подробнее.

Метод иммуноферментного анализа (ИФА) позволяет определить наличие различных антител в крови. В настоящее время подавляющее большинство анализов крови на антитела выполняются именно методом ИФА, который относительно прост в использовании, недорог и очень точен.

Метод иммуноферментного анализа состоит из двух частей – иммунной и ферментной, которые позволяют с точностью «вылавливать» строго определенные микробы или биомолекулы в крови, и потом определять их.

Иммунная часть методики заключается в следующем: в наборе для лабораторного анализа на дно лунок прикреплены антигены, которые способны связываться с искомыми строго определенными антителами. Когда в эти лунки вносится исследуемая кровь, то присутствующие в ней антитела связываются с антигенами на дне лунок, образуя прочный комплекс. Если же в крови выявляемые антитела отсутствуют, то в лунках не образуются прочные комплексы, и результат анализа будет отрицательным. После внесения исследуемой крови в лунки ее оставляют на некоторое время, достаточное для образования комплекса антиген-антитело, после чего выливают. Далее лунку несколько раз промывают от остатков крови специальными растворами, которые не могут разъединить образовавшихся комплексов антиген-антитело, прочно прикрепленных к дну лунок.

Далее проводится ферментная часть анализа: в промытые лунки вносится специальный фермент, как правило, пероксидаза хрена, которая прочно связывается с комплексами антиген-антитело. Затем в лунки добавляют перекись водорода, которую разлагает пероксидаза хрена с образованием окрашенного вещества. Соответственно, чем больше будет комплексов антиген-антитело, тем большее количество пероксидазы окажется в лунках. А значит, тем большее количество окрашенного вещества получится в результате разложения перекиси водорода, и тем интенсивнее будет окраска раствора в лунке. Далее на специальном приборе измеряется степень интенсивности окраски полученного в лунках вещества, и по формулам вычисляется сначала концентрация пероксидазы. После этого, на основании концентрации пероксидазы, рассчитывается концентрация комплексов антиген-антитело, и, соответственно, количество, выявляемых антител в крови.

Как видно, метод ИФА не сложный, но надежный, простой, информативный и высокоточный. Более того, методом ИФА можно определить концентрацию практически любых антител в крови – достаточно просто «приклеить» к лункам вещество, с которым эти детектируемые антитела будут связываться. Именно из-за этих качеств метод ИФА и получил широчайшее распространение в настоящее время для выявления различных антител в крови человека.

Данный метод реже используется для выявления различных антител ввиду его дороговизны, отсутствия необходимого оборудования в лабораториях и сложности производства реактивов для его проведения. По своей сути РИА основан на тех же принципах, что и ИФА, только в качестве веществ, по которым производится определение концентрации искомых антител, применяются меченые изотопы, дающие излучение, а не пероксидаза хрена. Естественно, изготовление меченых изотопов и их фиксация на антигенах, прикрепленных к дну лунок, гораздо сложнее и дороже производства пероксидазы хрена. В остальном РИА состоит из тех же двух этапов, что и ИФА – на первом, иммунном этапе искомые антитела из крови связываются с прикрепленными на дне лунок антигенами. А на втором, радиоэтапе, меченые изотопы связываются с комплексами антиген-антитело, причем их количество пропорционально концентрации искомых антител. Далее специальные приборы улавливают количество посылаемых изотопами импульсов, которые затем пересчитываются в концентрации определяемых антител.

Данный метод представляет собой сочетание ИФА или РИА с электрофорезом. Иммуноблоттинг – очень точный метод выявления антител к различным микроорганизмам или биомолекулам, и именно поэтому в настоящее время его активно используют.

Иммуноблоттинг заключается в том, что сначала антигены различных микробов разделяют методом электрофореза в геле, после чего эти разные фракции антигенов наносят на специальную бумагу или нитроцеллюлозную мембрану. А далее уже на этих полосках бумаги или мембраны, на которых закреплены известные антигены, проводят обычный ИФА или РИА для выявления наличия в крови антител к тем микробам, антигены которых зафиксированы на бумаге или мембране.

Серологические методы обнаружения антител в крови человека к различным микроорганизмам-возбудителям инфекционных заболеваний являются наиболее старыми способами «анализов на антитела». Но из-за своей «старости» эти методы не потеряли актуальности, довольно высокой точности и по-прежнему широко применяются для скорейшего выявления антител к некоторым опасным вирусам, бактериям и простейшим. А ряд заболеваний по наличию антител к микробу-возбудителю в крови можно диагностировать и вовсе только серологическими методами.

К серологическим методикам относят реакцию нейтрализации (РН), реакцию торможения гемагглютинации (РТГА), реакцию непрямой гемагглютинации (РНГА, РПГА), реакцию торможения гемадсорбции (РТГАд), реакцию связывания комплемента (РСК), реакцию иммунофлуоресценции (РИФ). Все серологические методики основаны на взаимодействии искомых (определяемых) антител, присутствующих в крови человека, с антигеном. При этом в качестве антигена подбирается именно такое вещество, на которое должны среагировать антитела, которые пытаются выявить. На практике имеются готовые наборы антигенов различных микробов, которые и соединяют с исследуемой кровью, и если в последней имеются антитела к взятому антигену, то результат анализа положителен – то есть в крови человека присутствуют антитела к микробу, который был выбран для анализа.

В ходе серологических реакций удается также установить и концентрацию выявляемых антител в крови. Только эта концентрация выражается не в миллиграммах на миллилитр или в иных привычных величинах, а в титрах. Рассмотрим подробнее, что это значит, и как проводятся серологические реакции.

Конечно, каждая разновидность серологической реакции имеет собственные правила проведения, но мы постараемся описать в общем виде, как их делают, так как в принципиальных моментах они однотипны. Так, любая серологическая реакция основана на том, что в лунку или пробирку вносят исследуемую сыворотку крови с предполагаемыми в ней антителами. Затем в эту же сыворотку вносят определенное количество антигенов микроба, к которому в крови предположительно есть антитела.

Далее сыворотку исследуемой крови разводят в 10 раз, наливают в другую пробирку или лунку и добавляют к ней антигены. Затем сыворотку крови разводят снова в 10 раз, получая уже разведение 1:100, помещают в отдельную лунку или пробирку и добавляют антиген. Так делают несколько разведений, например, 1:1, 1:100, 1:1000, 1:10000 и т.д. Не обязательно всегда делают разведения, кратные 10 – часто используют разведения в два раза, и в таком случае получаются пробирки с разведениями сыворотки 1:1, 1:2, 1:4, 1:8 и т.д. Такие разведения и называются титрами.

В пробирки со всеми разведениями вносят антигены микробов, антитела к которым пытаются выявить. Затем пробирки или лунки инкубируют (оставляют в теплом месте или при комнатной температуре на некоторое время, причем для каждого антигена свой промежуток времени инкубации), чтобы антигены смогли связаться с антителами, если таковые, конечно, присутствуют в крови. После завершения инкубации в пробирки со всеми разведениями вносят чистые эритроциты кур, баранов и т.д. Далее смотрят, в какой пробирке произошло разрушение этих эритроцитов. Ведь если сформировался комплекс антиген-антитело, то он обладает определенными свойствами, среди которых разрушение специально подготовленных чистых эритроцитов. Если в какой-то пробирке видно разрушение эритроцитов, то смотрят, какое разведение сыворотки в ней. И это значит, что в крови человека присутствуют искомые антитела в титре, например, 1:8.

Анализ крови на антитела любым методом (ИФА, РИА, иммуноблоттинг, серологические методы), в принципе, выполняется в течение нескольких часов, максимум суток. Но на практике лаборатории не выдают результатов через несколько часов после сдачи крови, что обусловлено особенностями работы медицинских учреждений.

Так, во-первых, любая лаборатория, даже частная, ждет некоего часа Х, когда у нее считается завершенным набор проб на сегодняшний день. Например, такой час Х – это 12-00. Значит, даже если человек сдаст кровь в 8-00 утра, до 12-00 часов она будет просто храниться в холодильнике, пока не завершится период сбора проб. Далее, в 12-00 часов сотрудник лаборатории пустит пробы крови в работу, которая и займет несколько часов. Таким образом, результат будет только вечером, а возможно и утром, если методика выполнения анализа длинная.

Во-вторых, из-за небольшого количества запросов многие лаборатории ряд анализов проводят не каждый день, а только раз в неделю или раз в месяц. В этом случае имеется назначенный день Х, в который все собранные за неделю или месяц пробы пускают в работу. До наступления такого дня проба крови будет просто храниться замороженной. Если лаборатория действует по такому принципу, то результат анализа на антитела может быть выдан через 1 – 4 недели, в зависимости от частоты выполнения данной методики в конкретном учреждении.

В крови могут определять концентрации различных типов антител, а именно – IgG, IgM, IgA, IgE. Причем зачастую определяют концентрацию каждого типа антител отдельно, так как они имеют разное диагностическое значение. Но в некоторых случаях, когда это информативно с точки зрения диагностики, определяют концентрацию сразу всех типов антител, то есть, IgG + IgM + IgA. Ситуации, когда определяют концентрации сразу нескольких типов антител в крови, называются анализом на суммарные антитела.

Такие анализы на суммарные антитела могут выполняться для диагностики различных инфекций, например, гепатита С, сифилиса и т.д.

Аббревиатура igg – это неправильная запись IgG, что означает иммуноглобулины типа Джи. Эти иммуноглобулины относятся к антителам, которые вырабатываются иммунной системой для уничтожения различных патогенных микробов, попавших в организм. Таким образом, очевидно, что антитела igg – это антитела типа IgG, которые могут присутствовать в крови и определяться лабораторными методами анализа.

Однако просто анализа на антитела IgG не существует, так как иммунная система вырабатывает антитела этого типа против разных микробов. Причем против каждого микроба вырабатывается собственная разновидность IgG, и все они разные. То есть антитела IgG против вируса кори – одни, против вируса краснухи – вторые, против вируса гриппа – третьи, против стафилококка – четвертые, и т.д. Соответственно, можно выполнить анализы на определение IgG в крови против вируса кори, против вируса краснухи, против микобактерии туберкулеза, и т.д. А значит, нужно сначала выяснить, антитела против какого именно микроба нужно искать в крови, и только после этого выполнять анализ на антитела типа IgG к этому микроорганизму.

Вирусы являются патогенными микроорганизмами, при проникновении которых в организм иммунная система начинает вырабатывать антитела для их уничтожения. Но против каждого вируса иммунная система вырабатывает собственные, уникальные, подходящие только к этому виду микроба антитела. Соответственно, можно выявить наличие в крови антител к какому-либо конкретному вирусу, но нельзя определить антитела к вирусам вообще. Поэтому, прежде чем сдавать анализ крови на вирусы, следует точно выяснить, антитела к каким именно вирусным микроорганизмам человек желает отыскать.

Результат анализа крови на антитела, проведенный любым методом, всегда бывает двух видов – положительный или отрицательный. Положительный результат означает, что в крови человека обнаружены искомые антитела к какому-либо микробу или биомолекуле. Это свидетельствует о том, что человек был в прошлом или является в настоящий момент инфицированным каким-либо микробом (инфекционным заболеванием). Отрицательный результат означает, что в крови человека отсутствуют искомые антитела, и он не был заражен инфекционным заболеванием, гельминтами и т.д.

Кроме того, при положительном результате анализа на антитела практически всегда указывается их концентрация. Если определение проводилось методом ИФА, РИА или иммуноблоттинга, то концентрация антител указывается в МЕ/мл. Но если для анализа крови на антитела применялись серологические методики, то в таком случае концентрация антител указывается в титрах, например, 1:64 и т.д.

Расшифровка каждого анализа на антитела зависит от того, какой вид антител выявлялся в крови (IgG, IgM, IgA), а также от того, к какому именно микробу или биомолекуле эти антитела. Например, если в крови обнаруживаются антитела типов IgG и IgM к какому-либо патогенному микроорганизму, то это свидетельствует о том, что человек в настоящее время болеет инфекционным заболеванием, вызываемым этим микробом. Обнаружение же в крови антител к микробу типа IgG свидетельствует о хроническом течении инфекции или о том, что человек в прошлом ее перенес и выздоровел.

Часто для определения того, насколько давно человек был инфицирован каким-либо микробом, оценивают не просто концентрацию антител типа IgG в крови, но и их авидность. Авидность антител определяет то, насколько давно они циркулируют в крови человека. Соответственно, чем выше авидность, тем больше давность перенесенного инфекционного заболевания. Например, если авидность антител к краснухе составляет менее 40 %, то человек перенес это заболевание недавно, в ближайшие три месяца. А если авидность антител к краснухе более 60 %, то инфекция была перенесена более полугода назад.

Читайте также:  Анализ при артрите на антитела

Норма анализа на антитела зависит от того, какой именно вид антител «искали» у конкретного человека. Например, если проводился анализ на антитела к вирусу краснухи у женщины, планирующей беременность, то наличие таких антител в крови, то есть положительный результат анализа, считается хорошим. Ведь если у женщины есть антитела, значит, она уже «сталкивалась» с вирусом краснухи (переболела или была привита), организм выработал иммунитет, и в настоящее время он сохранился. А значит, такой женщине не грозит заражение краснухой во время предстоящей беременности, и у нее нет риска того, что ребенок родится глухим из-за краснухи у матери.

Если же в крови человека обнаруживаются антитела к ДНК, то это плохой результат анализа, так как он свидетельствует о тяжелом аутоиммунном заболевании, когда иммунная система по ошибке считает свои органы и ткани чужими, и планомерно уничтожает их.

Анализы крови на различные антитела можно сдать в частных или государственных лабораториях, которые выполняют необходимый тест. Так как анализ на каждый вид антител выполняется при помощи специального набора, то следует сначала точно определиться, какие именно антитела нужно обнаружить, и только после этого выяснить, какие лаборатории могут это сделать.

В зависимости от того, какие именно антитела будут определяться в крови, цена анализа может быть различной. Наиболее простые и дешевые анализы стоят около 100 рублей (например, на титр антител при беременности), а дорогие – до 3000 рублей. Конкретную стоимость анализа на антитела к определенному микроорганизму или биомолекуле нужно узнавать непосредственно в лабораториях, выполняющих такие исследования.

Симптомы полиомиелита. Лабораторная и дифференциальная диагностика полиомиелита. Антитела к вирусу – видео

Автор: Наседкина А.К. Специалист по проведению исследований медико-биологических проблем.

источник

ИФА анализ — что это такое, расшифровка иммуноферментного анализа крови на паразитов, сифилис, ВИЧ, туберкулез. Норма в таблице, результаты

Благодаря развитию современной медицины, врачу при постановке диагноза больше не нужно ориентироваться на косвенные проявления заболеваний или проводить многоступенчатые лабораторные исследования. Достаточно провести один анализ, который подтвердит или опровергнет предполагаемый первоначальный диагноз.

Таким методом является иммуноферментный анализ (ИФА) — это исследование позволяет обнаружить специфические антитела и антигенны свойственные при разнообразных патологиях, что во многом ускоряет установку диагноза.

ИФА анализ — это такое лабораторное исследование (метод), которое помогает определить присутствие или отсутствие определённых антител в организме для борьбы с вирусом и их количество.

Основой исследования является естественная реакция антиген (вредоносный организму объект) – антитело (белок уничтожающий вредоносные объекты), позволяющая выявить присутствие разнообразных вирусов, бактерий.

ИФА представляет собой естественный иммунный ответ организма – взаимодействие антитела с соответствующим антигеном. Так во время ИФА в пробирку с материалом добавляются поочередно антигены или антитела, после чего происходит выявление концентрации получившихся комплексов антиген-антитело.

Если совпадения образовались, то возникают иммунные комплексы, далее происходит ферментная реакция красящего вещества с объединённой молекулой. Именно благодаря изменению цвета в ходе ферментативной индикации происходит идентификация заболевания после исследования уровня определяемого соединения.

Иммуноглобулины человека дифференцируются на несколько классов, отличающихся друг от друга свойствами, структурой и антигенными особенностями тяжелых цепей (Н-цепи). У всех млекопитающих, в том числе и человека, выделяют пять Н-цепей, которые и определяют принадлежность иммуноглобулинов к соответствующему классу: G, М, A, D, Е.

Каждый класс отличается друг от друга биологическими свойствами, и способностями связывать антигены, и скоростью и прочностью связи с молекулой.

Функции каждых иммуноглобулинов (lg) различны:

Кол-во в организме Функции Период полураспада (дней) Значение
G 70% Формируют пассивный иммунитет у новорожденного;

необходимы для иммунного ответа

улучшают фагоцитоз,

21-24 обеспечивают длительный гуморальный иммунитет при инфекционных заболеваниях
М 5-10% нужны для активации фагоцитоза,

способны связать 5 молекул антигена,

5 Обеспечивает первичную иммунную реакцию
А 10-15 Нейтрализуют токсины и вирусы

нужны для формирования раннего иммунитета

Образование местного иммунитета

4-5 Защита слизистых оболочек
Е 0,2% вызывают аллергию и анафилаксию активируют тканевые базофилы 2 Защита от паразитов
D 0,2% задействованы в выработке лимфоцитов, необходим как мембранный рецептор для антигенов; 3 Их роль малоизучена

Возникновение иммуноглобулинов происходит по своеобразной «цепочке» — lgM lgG, именно так реагирует организм на появление в организме антигена. Во время лабораторной диагностики проводится оценка концентрации трех основных иммуноглобулинов – G, M, A.

ИФА-анализ с каждым годом становится все более популярным.

Такое исследование ускоряет постановку диагноза, а это очень важно для терапии таких патологий как:

  • вирусный гепатит;
  • ВИЧ-инфекция;
  • цитомегаловирус,
  • вирус Эпштейна-Барр,
  • вирус герпеса,
  • корь
  • краснуха,
  • туберкулез,
  • сальмонеллёз,
  • дизентерия,
  • клещевой энцефалит,
  • бактерии хеликобактер,
  • боррелиоз,
  • столбняк,
  • сифилис,
  • дифтерия,
  • лептоспироз,
  • хламидиоза,
  • уреаплазмоз,
  • микоплазмоз,
  • коклюш.

Так же анализ позволяет определить инфицирование паразитами:

  • плоскими червями
  • аскаридами
  • гистолическими амебами,
  • печеночными тремадами,
  • лямблиями,
  • токсоплазмами,
  • трихинеллами,
  • двуусткой,
  • цестодозами.

ИФА является своеобразным маркером аутоиммунных патологий и злокачественных новообразований.

При подготовке к исследованию следует придерживаться таких правил:

  • за сутки до забора крови нельзя курить и употреблять алкоголь,
  • не заниматься спортом или другими физическими нагрузками,
  • стараться не допускать стрессов,

Перед тем как сдать ИФА анализ, нужно избегать стрессов.

  • прекратить употребление лекарственных средств не позже чем за 10 дней до манипуляции.
  • Так же врачи рекомендуют придерживаться специальной диеты – исключить жирную и жареную пищу, а если исследование проводится на гепатиты, то необходимо не употреблять любые оранжевые овощи и особенно цитрусовые. Сдавать кровь следует с утра на голодный желудок.

    Ложноположительным анализ бывает из-за невыполненных рекомендаций, особенно употребления жирной пищи, что приводит к слишком большой концентрации триглицеридов в плазме, из-за чего проводимость ИФА снижается.

    В качестве исследуемого материала может использоваться цельная кровь, сыворотка или плазма венозной крови. Забор материала, обычно проводится из локтевой вены, для этого применяется одноразовая игла и вакуумная пробирка, необходимо 5-10 мл крови.

    Для точности результата важно придерживаться правильной техники взятия пробы – прокол самого сосуда и окружающих тканей должен быть произведен одной манипуляцией, поэтому используется короткая игла с большим диаметром, благодаря чему не травмируется противоположная стенка вены и не повреждаются эритроциты.

    Так же для сохранения целостности эритроцитов, нужно чтобы кровь стекала по стенкам пробирки.

    Во время хранения материала следует избегать возможной его ионизации, кроме того материал не должен контактировать с остатками дезинфицирующих средств, поэтому используется только одноразовая пластиковая пробирка, с маркировкой ФИО пациента, датой и временем сдачи материала.

    Если необходимо непродолжительное хранение исследуемого материала, то используется холодильная камера с температурой 2-4 о С, если необходимо более продолжительное хранение, то материал замораживается при температуре -20 о С.

    После подготовки исследуемого материала врач-лаборант приступает к необходимым манипуляциям. Для этого используются ряд специальных наборов антигенов, обдающих свойством спровоцировать ответные реакции организма на раздражитель, это разнообразные инфекции, гормоны, аллергены.

    Схема ожидаемой реакции «антиген-антитело» выглядит приблизительно так:

    • Первичная реакция — определяемый Ig (Ab) и очищенный антиген возбудителя (Ag).
    • Для обнаружения получившихся иммунных комплексов далее следует новая иммунологическая реакция, где антигеном выступает связанный специфический Ig, а антителом для него выступает коньюгат- Ig (Ab).
    • Последний этап — ферментативная реакция, вместе с катализатором молекулой коньюгата. Субстратом выступает хромоген (не окрашенный), который в процессе протекания реакции окрашивается, и интенсивность цвета и определяется количественный показатель иммуноглобулина в пробе.

    В настоящий момент разработано множество разнообразных вариантов ИФА, четкая классификация их отсутствует. Обычно, методы рассматриваются исходя из разделения её на гетеро- и гомогенные — все фазы анализа происходят с применением твердой фазы или с использованием только раствора.

    Современные клинико-диагностические лаборатории обычно используют гетерогенный (твердофазный) ИФА, в нем под твердой фазой подразумевается абсорбция антигенов или антител на твердой поверхности специальных лунок, расположенных на полистироловом микропланшете, метод подразделяется на прямой и непрямой ИФА.

    При прямом ИФА, вносимый антиген закрепляет в период инкубационного процесса на поверхности пустых лунок, для этого исследуемые пробы материал помещают в чистые лунки на 20-25 минут, это нужно для прикрепления антигена к их поверхности. После этого происходит добавление необходимого антитела. Далее материал остается на определенное время для образования связей.

    Антитела всегда добавляют в избытке, поэтому даже при их наличии в пробе остаются не связанные антигены, а если антигенов нет совсем, то связей не будет. Чтобы удалить«лишние» антитела проводится декантация, после чего остаются только те антитела, которые создали связь с антигеном.

    После этого следует ферментативная реакции – добавление в лунки раствора с ферментом, после чего происходит окрашивание полученных связей.

    При непрямом методе ИФА используемые антитела, заранее соединенные с субстратом ферментативной реакции; в этом случае связь антител с антигеном происходит в период инкубационного процесса, после чего происходит мобилизация связей на поверхности лунок, а вносимый после конъюгат и субстратно-хромогенный реагент окрашивают реакцию.

    Таким образом, главным отличием непрямого от прямого метода является не приклеивание материала к поверхности чистых лунок, а связывание с антигеном, иммобилизованным на планшете.

    Останавливается протекание реакции с применением специализированных устройств, далее каждая лунка подвергается процессу фотометрирования, за которым следует сравнительная характеристика полученного результата с проведенными ранее контрольными пробами.

    Если обнаруживается повышение оптической плотности в пробе, то завышена и концентрация специфических антител в исследуемом результате.

    Проведение исследования не занимает много времени, от забора крови до получения результата проходит от 1 до 10 дней, в зависимости от диагностических мероприятий.

    На полученном пациентом бланке-результате диагностики указывается отрицательный либо положительный результат на определенные классы иммуноглобулинов, так же указывается количественный показатель различных классов антител.

    Возможны различные интерпретации результатов:

    1. IgM (+) (IgA, IgG не определялись) – процесс выздоровления;
    2. IgM (-) ;IgG (+), IgA (+) – хроническая инфекционная патология;
    3. IgM, IgG, IgA (все с – значением) – отсутствие защитных механизмов к инфекциям;
    4. IgG (+/-) и IgA (+/-), IgM (+) – острый процесс;
    5. IgM (-), IgA(-),IgG(+) – постинфекционный иммунитет;
    6. IgM, IgG, IgA (+) – хроническая патология в стадии обострения.

    Так, например, если были обнаружены IgG и IgM, то возможно у пациента одно из таких заболеваний:

    • вирусный гепатит;
    • цитомегаловирус;
    • герпес;
    • ветряная оспа;
    • хламидиозом;
    • стафилококковая или стрептококковая инфекция.

    Иммуноферментный анализ часто назначается при гормональных исследованиях, нормы показаны в таблице:

    Название гормона Пол Норма
    1 тиреоглобулин м/ж До 70 МЕ/мл
    2 тироксин м/ж 64-146 нмоль/л
    3 трийодтиронин м/ж 1,8-2,8 нмоль/л
    4 Свободный тироксин м/ж 11-25 пмоль/л
    5 Свободный трийодритонин м/ж 4,49-9,3 пмоль/л
    6 Тестостерон, дегидротестостерон Ж 0,5-10 мЕд/л

    ИФА анализ — это такое диагностическое исследование, которое позволяет оценить вероятность образования онкологических патологий. Однако интерпретация результатов проводится только лечащим врачом.

    ИФА подходит для выявления разнообразных форм половых инфекций, в том числе сифилиса, часто используется и для скрининга беременных.

    Благодаря этому исследованию можно узнать, как давно произошло заражение и стадия заболевания на момент исследования:

    • иммуноглобулины М говорят о длительности заболевания;
    • IgA — пациент заразился более 30 дней назад;
    • IgG обнаруживается на «пике» заболеваний, или же в тот момент, когда терапия окончилось недавно.

    В процессе исследования лунки на планшете с отрицательным показателем остаются бесцветные, а положительные окрашиваются в ярко-желтый цвет. Если цвет положительных лунок не совпадает с цветом контроля, то результат считается сомнительным и необходимо повторное исследование.

    Иммуноферментный анализ — это первая ступень в диагностике ВИЧ. Проводить анализ нельзя сразу же после предполагаемого заражения необходимо дождаться окончания инкубационного периода (от 14 дней до 6 месяцев).

    В ходе анализа определяются антитела к ВИЧ-1 и ВИЧ-2, происходит поиск АТ класса G, который обычно появляется на более поздних сроках и АТ класса А и М, они могут быть определены на ранних стадиях (во время инкубационного периода).

    При получении положительных проб далее следует:

    • если первый тест дал положительный результат, то кровь вновь перепроверяется другим лаборантом;
    • повторный положительный результат предполагает пересдачу материала,
    • при повторении результата, пациенту назначается иммуноблотинг.

    Окончательный вывод о наличии ВИЧ-инфекции выдается только после результата иммуноблотинга.

    ИФА также применяется в качестве диагностического исследования туберкулеза, но если у пациента даже и были выявлены антитела к данной патологии, то это не всегда подтверждает наличие у него туберкулеза, поэтому ИФА часто применяется качестве уточняющей методики, либо же для диагностики скрытой внелегочной формы.

    ИФА анализ — это такое исследование, позволяющее обнаружить у пациента заражения паразитами и простейшими, в ходе диагностики можно определить даже время заражения.

    Цитомегаловирус IgM обнаруживаются через 30-45 дней после заражения, либо во время реактивации инфекции в течение 4-6 месяцев

    источник