Сдать анализ антитела к прогестерону

В настоящее время известно, что около 80% всех ранее необъяснимых случаев повторных потерь беременности (после исключения генетических, анатомических, гормональных причин) связано с иммунологическими нарушениями.

· При аутоиммунных процессах развивается агрессия иммунной системы к собственным тканям матери, т.е. иммунный ответ направлен против собственных Аг. В этой ситуации плод страдает вторично в результате повреждения материнских тканей.

· При аллоиммунных нарушениях иммунный ответ беременной направлен против Аг эмбриона (плода), полученных от отца и потенциально чужеродных для организма матери.

К аутоиммунным нарушениям, наиболее часто обнаруживаемым у больных с привычным выкидышем, относят наличие в крови беременной антифосфолипидных, антитиреоидных, антинуклеарных аутоантител. Установлено, что у 31% женщин с привычным невынашиванием вне беременности выявляют аутоантитела к тироглобулину, пероксидазе щитовидной железы. В этих случаях риск самопроизвольного выкидыша в I триместре беременности возрастает до 20%. При привычном невынашивании беременности в случае наличия антинуклеарных и антитиреоидных АТ показано дальнейшее обследование для выявления аутоиммунного процесса и верификации диагноза.

Общепризнанным аутоиммунным состоянием, ведущим к гибели эмбриона/плода, в настоящее время служит АФС.

По данным американских авторов, частота АФС в популяции достигает 5%, а среди пациенток с привычным невынашиванием беременности она составляет 27–42%, причём без проведения лечения гибель эмбриона (плода) происходит у 85–90% женщин, имеющих аутоантитела к фосфолипидам.

Основным осложнением АФС бывают тромбозы: у 22% женщин с АФС в анамнезе отмечают тромбоз, в том числе у 6,9% — тромбоз мозговых сосудов. Опасность тромботических осложнений возрастает с течением беременности и в послеродовом периоде. Их доля среди всех тромботических осложнений, обусловленных повышением коагуляционного потенциала крови на фоне гиперволемии, достигает 24%.

Классификация, клинические проявления и методы диагностике АФС подробно представлены в главе «Антифосфолипидный синдром».

У больных с АФС обследование и медикаментозную подготовку необходимо проводить до наступления беременности. При положительной пробе на волчаночный антикоагулянт и наличии антифосфолипидных АТ исследование необходимо повторить с через 6–8 нед. В течение этого времени проводят комплексное
обследование и лечение других возможных осложнений при привычной потере беременности. При повторных позитивных тестах на волчаночный антикоагулянт и изменений в параметрах гемостазиограммы лечение необходимо начинать вне беременности.

Терапию АФС подбирают индивидуально в зависимости от выраженности активности аутоиммунного процесса.

Назначают антиагреганты, антикоагулянты, небольшие дозы глюкокортикоидов, при необходимости — плазмаферез.

Без проведения терапии рождение жизнеспособных детей отмечают лишь в 6% случаев.

В последние годы зарубежными авторами предприняты попытки разделения больных с АФС на группы на основании анамнестических данных с последующим назначением различных схем лечения.

· У женщин с «классическим» АФС с тромбозами в анамнезе обязательно назначают гепаринотерапию, с ранних сроков беременности (с момента визуализации плодного яйца) под контролем коагуляционных тестов, а также ацетилсалициловую кислоту в дозе 81–100 мг/сут, препараты кальций и витамина D.

· При наличии в анамнезе преэклампсии в дополнение к антикоагулянтной, антиагрегантной терапии показан иммуноглобулин в дозе 400 мг/кг массы тела в течение 5 сут каждого месяца.

· В случае потерь плода без сосудистых тромбозов назначают антикоагулянтные и антиагрегантные лекартсвенные средства в низких, поддерживающих дозах (ацетилсалициловая кислота в дозе до 100 мг/сут, гепарин по 10 000 МЕ в сутки, низкомолекулярные гепарины в профилактических дозах).

· При циркуляции b2-гликопротеин-зависимых АТ к кардиолипину даже в высоких титрах без тромбозов и невынашивания беременности в анамнезе не рекомендована медикаментозная терапия, а показано только наблюдение.

Основные антикоагулянтные препараты, используемые в акушерской практике, приведены ниже.

· Эноксапарин натрий в профилактической дозе 20–40 мг/сут, в лечебной дозе 1 мг/кг массы тела (с распределением
суточной дозы на 1 или 2 подкожных введения).

· Далтепарин натрий по 2500–5000 МЕ 1–2 раза в сутки или по 50 МЕ/кг массы тела.

· Надропарин кальций в дозе 0,3–0,6 мл (2850–5700 ME) 1–2 раза в сутки, в лечебной дозе 0,01 мл (95 МЕ)/кг массы тела 2 раза в сутки.

Вместе с тем необходимо отметить, что назначение антикоагулянтов с целью антитромботической профилактики досрочного прерывания беременности у женщин с тромбофилиями и осложнённой беременностью не находит единодушного признания ведущих специалистов мира (S. Middeldorp. Antitrombotic prophylaxis for women with thrombophilia and pre- nancy complications-No // Journal of tombosis and haemostasis. — 2003. — Vol. 1(10). — P. 2073– 2074.). Отсутствие единой точки зрения на возможность профилактики осложнений беременности у женщин с приобретёнными тромбофилиями не позволяет однозначно рекомендовать их длительное введение.

Благодаря ряду специфических эффектов (детоксикация, реокоррекция, иммунокоррекция, повышение чувствительности к эндогенным и медикаментозным веществам) плазмафереза при его проведении вне беременности можно снизить активность аутоиммунного процесса, нормализовать гемостазиологические нарушения перед периодом гестации.

Показания к проведению плазмафереза во время беременности приведены ниже.

· Высокая активность аутоиммунного процесса.

· Гиперкоагуляция как проявление хронического ДВС-синдрома, не соответствующая сроку беременности и не поддающаяся коррекции медикаментозными средствами.

· Аллергические реакции на введение антикоагулянтов и антиагрегантов.

· Активация инфекции (хориоамнионит) во время беременности при назначении глюкокортикоидов.

· Обострение хронического гастрита и/или язвенной болезни желудка, двенадцатиперстной кишки, при котором необходимо снизить дозу глюкокортикоидов или прекратить иммуносупрессивную терапию.

Методика проведения плазмафереза включает эксфузию за 1 сеанс 30% объёма циркулирующей плазмы (600– 900 мл). Плазмозамещение проводят коллоидными и кристаллоидными растворами. Вне беременности объём удаляемой плазмы равен объёму плазмозамещающих растворов, а во время беременности последний больше объёма удаляемой плазмы в 1,2 раза (с использованием 10% раствора альбумина в количестве 100 мл).

Ведение беременности у женщин с АФС представлено ниже.

· С ранних сроков гестации необходим контроль за активностью аутоиммунного процесса, включающий определение волчаночного антикоагулянта, титра антифосфолипидных, антикардиолипиновых АТ, гемостазиологический контроль с индивидуальным подбором антикоагулянтной, антиагрегантной и глюкокортикоидной терапии.

· При антикоагулянтной терапии в первые 3 нед еженедельно проводят мониторинг общего анализа крови с подсчётом уровней тромбоцитов для своевременной диагностики тромбоцитопении. В дальнейшем необходим мониторинг уровня тромбоцитов не реже 2 раз в месяц.

· По данным ультразвуковой фетометрии можно следить за адекватностью роста и развития плода. С 16 нед беременности фетометрию проводят с интервалом 3–4 нед для контроля темпов роста плода, количества ОВ.

· Во II и III триместрах показано исследование функций печени и почек: определение протеинурии, концентрации креатинина, мочевины, активности ферментов (АЛТ, АСТ) в крови.

· УЗИ в допплеровском режиме для своевременной диагностики и лечения плацентарной недостаточности, а также для оценки эффективности проводимой терапии.

· КТГ с 33–34 нед беременности для оценки состояния плода и выбора сроков и метода родоразрешения.

· В родах необходим тщательный кардиомониторный контроль в связи с наличием хронической гипоксии плода различной степени выраженности, а также повышенного риска ПОНРП, развития острой гипоксии плода на фоне хронической.

· Необходим контроль гемостазиограммы непосредственно перед родами и в родах.

· Показано наблюдение за состоянием родильниц, поскольку именно в послеродовом периоде возрастает риск тромбоэмболических осложнений. Глюкокортикоидную терапию продолжают в течение 2 нед после родоразрешения с постепенной отменой лекарственных средств.

· Контроль системы гемостаза показан через 3 и 5 сут после родов. При выраженной гиперкоагуляции необходимо назначение короткого курса низкомолекулярных гепаринов или нефракционированного гепарина в течение 10 сут по 10 000–15 000 ЕД/сут подкожно, ацетилсалициловой кислоты в дозе до 100 мг/сут в течение 1 мес. У пациенток, получающих антиагреганты и антикоагулянты (для профилактики тромбоза при выраженной и длительной гиперкоагуляции), лактацию подавляют. При кратковременных изменениях в системе гемостаза после родов, поддающихся медикаментозной терапии, кормление грудью может быть отсрочено на время лечения при сохранении лактации.

Если у пациентки диагностирован АФС, то она должна быть проинформирована о необходимости лечения во время беременности и мониторинга состояния плода, а также срочного обращения к врачу при появлении признаков венозного тромбоза сосудов ног (покраснения, отёк, болезненность по ходу вен).

При АФС, сопровождающемся сосудистыми тромбозами, после завершения беременности необходим гемостазиологический контроль и наблюдение у гематологов, сосудистых хирургов и ревматологов.

У 10% женщин с привычным невынашиванием вне беременности в крови выявляют аутоантитела к прогестерону.

При наличии аутоантител к прогестерону, как правило, определяют недостаточность лютеиновой фазы, концентрация прогестерона бывает равна нижней границе нормы, отмечают «тонкий» эндометрий в сроки «окна имплантации». При беременности нередко формируется первичная плацентарная недостаточность.

При выявлении АТ к прогестерону в лечение включают микронизированный прогестерон или дидрогестерон, а при высоком уровне аутоантител целесообразно назначение преднизолона в дозе 5–10 мг/сут со 2-й фазы менструального цикла.

К аллоиммунным факторам привычного выкидыша относят наличие АТ к ХГЧ.

В крови 26,7% женщин, страдающих привычным невынашиванием беременности, обнаруживают АТ к ХГЧ, которые, обладая высокой аффинностью, блокируют биологический эффект, и в некоторых случаях приводят к снижению концентрации ХГЧ. Механизм действия АТ, вероятно, состоит не только в предупреждении связывания ХГЧ с рецепторами жёлтого тела яичников, но и в прямом повреждающем влиянии на клетки эмбриональной трофэктодермы. У 95% женщин с высокими титрами АТ к ХГЧ отмечают угрозу прерывания беременности в I триместре. АТ к ХГЧ при проведении ИФА перекрестно реагируют с ЛГ и ФСГ, что связано с наличием общих антигенных детерминант. Подобные гормональные и аллоиммунные нарушения ведут к раннему развитию ДВС- синдрома (с 3–8 нед беременности) и, как следствие, к угнетению гормонопродуцирующей и трофической функции трофобласта.

Лечение пациенток с сенсибилизацией к ХГЧ состоит в коррекции тромбофилии с помощью низкомолекулярных гепаринов под контролем гемостазиограммы и назначения глюкокортикоидов в дозе 5–15 мг/сут в расчёте на преднизолон. Лечение следует начинать в I триместре беременности, так как пик выработки ХГЧ и, как следствие, АТ развивается в первые недели беременности.

К другим аллоиммунным процессам, ведущим к отторжению плода, относят наличие у супругов повышенного количества (более 3) общих Аг системы главного комплекса гистосовместимости (часто бывает при родственных браках), низкий уровень блокирующих факторов в крови матери, повышенное содержание NK-клеток (CD56+16+) в эндометрии и крови матери как вне, так и во время беременности, высокие уровни в эндометрии и крови беременной ряда цитокинов, в частности — -интерферона, фактора некроза опухолиa, ИЛ-1, ИЛ-2. В настоящее время данные аллоиммунные факторы, ведущие к ранним потерям беременности, и пути коррекции вышеуказанных состояний находятся в стадии изучения. Нет единого мнения о методах терапии. По данным одних исследователей активная иммунизация лимфоцитами донора не даёт значимого эффекта, другие авторы описывают значимый положительный эффект при использовании лимфоцитоиммунотерапии и терапии иммуноглобулинами.

В настоящее время одним из иммуномодулирующих средств на ранних этапах беременности служит прогестерон. В исследованиях доказана роль дидрогестерона в суточной дозе 20 мг у женщин с привычным выкидышем в I триместре беременности при повышенном уровне CD56+16+ клеток в эндометрии.

Женщинам, в анамнезе у которых были 2 и более выкидышей или преждевременные роды, необходимо рекомендовать обследование до наступления следующей беременности для выявления причин, коррекции нарушений и предупреждения последующих осложнений. Методы профилактики зависят от причин, лежащих в основе привычного невынашивания беременности.

По данным многоцентровых рандомизированных исследований в соответствии в принципами доказательной медицины, в настоящее время нет достоверных данных о повышении числа рождённых детей у женщин с привычным невынашиванием при назначении предгравидарной подготовки, длительного постельного режима, прогестерона и его аналогов, дексаметазона, низкомолекулярного гепарина и др. Даже без лечения частота рождения ребенка достигает 86%. Однако отказывться от широко распространённой методики лечения нецелесообразно. При выявлении причин, коррекции нарушений вне беременности, мониторинге во время беременности рождение жизнеспособных детей у пар с привычным невынашиванием беременности достигает 95–97%.

источник

Добрый день. Нуждаюсь в ваших рекомендациях, так как устала и от неудач, и от обследований, в надобности которых не уверена.

24 года, цикл регулярнейший, 26 дней, овуляция на 14 день. Мужу 39 лет. Ни у кого детей нет. Экология в городе не самая лучшая, но на вредном производстве не работаем, не пьем, не курим, за здоровьем следим.

В прошлом году был самопроизвольный аборт на 4 неделе (можно сказать, что бхб), а в следующем цикле новая беременность, но она замерла на 8 неделе, если судить по КТР. В ту беременность я ужасно себя чувствовала, и после сдачи анализов на гормоны щитовидной стала принимать тироксин. После неудачи снова забеременела как только разрешили врачи. Беременность протекала прекрасно, но тоже внезапно замерла на 8 неделе, если верить КТР.

В обе беременности не было кровомазаний и болей (были кровянистые выделения после ПА со второй замершей из-за шейки матки, за пару дней всё прекратилось, по УЗИ тогда всё было отлично, шла 5 неделя + 6 дней, а по размерам поставили 6 недель и 4 дня, СБ+).

Что мне делать? Обследоваться ли дальше или забить и пытаться снова и снова?

По мужу: В роду у мужа были замершие беременности, но все рожденные дети здоровы. По спермограмме — всё хорошо, но не учтена морфология (почему-то вообще нет ее описания). Сдавал бакпосев на уреаплазму, микоплазму, хламидии, гонококки и трихомонады — чисто. Недавно сдавал ОАК, биохимию крови, анализ мочи — никаких отклонений, лейкоциты в норме, в моче только немного слизи. Муж к врачу-то пошел из-за утренней отечности лица.

По мне: ТОРЧ — отрицательные (хотя муж носитель цмв и герпеса), к краснухе антитела, бакпосев на зппп чистый, пцр из ц/канала на хламидии и патогенную микоплазму — отрицательный. Гомоцистеин на фоне отсутствия приема фолатов — 5 или 6, то есть норма. Гормоны щитовидной скорректированы — на тироксине 50. Прогестерон во второй фазе 53 нмоль/л, а при беременности на 5 неделе был 94 нмоль/л.

При беременности пила тироксин, йодомарин и фолиевую 1 мг. До всех беременностей была на КОК Диане 35 в течение 5 лет, самочувствие было отличное.

Нет возможности сделать кариотипирование абортуса или нас — в городе просто этого не делают, поэтому насчет ХА стоит только гадать. По гистологии первый раз общая картина воспаление (в принципе логично, так как я поступила уже с недельной, а то и больше замершей). После первой замершей долго кровила, кололи и перед чисткой дицинон и гордокс, затем новый цикл пришел через 22 дня, обнаружили кисту фолликулярную и плацентарный полип. Новый цикл начался через 26 дней и такая частота сохраняется до сих пор, с новым циклом выдавила из себя этот полип. Менструации стали адекватные.

Заключения УЗИ замерших, если имеет смысл:
1 зб — толщина хориона 0,66 см, ктр 1,6 см, пя 3,9 см, сб -, локация по передней стенке с переходом на зев — проведено по акушерским 8 нед + 2 дня
2 зб — толщина хориона 0,9 см, ктр гипоэхогенный 1,79 см, пя 4 см, сб -, локация по задней стенке — проведено по акушерским 8 нед + 3 дня

1. Вопросы по синт.прогестерону, показан ли он мне при наступлении беременности?
2. Вопрос по мутациям гемостаза, имеет ли смысл?
3. проверяться ли на афс, волчаночный антикоагулянт?
4. Чистку второй беременности ещё не провели, завтра иду сдавать коагулограмму — если она в относительной норме , есть смысл искать мутации гемостаза?
5. Увеличить ли мне доизровку при беременности фолатов? Может, достаточно будет фемибиона, к примеру? Или группы В в целом, базовой дозы? При фолиевой 1 мг трескается уголок рта, при добавлении других витаминов группы В всё приходит в норму.
6. Может, еще что-то подскажите, спасибо заранее. Если нужны сканы каких-либо исследований — приложу.

источник

Гормональный статус (в менопаузе) 2390 руб. Климактерический период — физиологический период жизни женщины; характеризуется постепенным снижением, а затем и «выключением» функции яичников. Развившееся в результате этого состояние гипергонадотропного гипогонадизма (прежде всего эстрогенная недостаточность) может с. Заказать
Гормональный статус женский (включает прогестерон) 3340 руб. Данный комплекс исследований целесообразно назначать в 1-ю (фолликулиновую) фазу менструального цикла (3-5 день цикла), если лечащий врач не назначил иначе. Комплекс рекомендован женщинам при нарушении менструального цикла, бесплодии, гирсутизме (избыточном . Заказать

Заказать Срочно В составе комплекса дешевле С этой услугой заказывают Указанный срок не включает день взятия биоматериала

Натощак (не менее 8 и не более 14 часов голодания). Можно пить воду без газа. Взятие крови проводится с 8.00 -12.00 утра, если другое время не указано лечащим врачом. На 22 — 23 день менструального цикла, если другие сроки не указаны лечащим врачом.

Прогестерон — женский половой гормон у небеременных вырабатывается желтым телом, во время беременности — плацентой; в меньшем количестве образуется в коре надпочечников. Главный орган-мишень для прогестерона — матка. Концентрация гормона в крови возрастает после овуляции и падает к концу цикла. Основные эффекты: секреторная трансформация пролиферативно утолщенного эндометрия, образование густой и вязкой цервикальной слизи, снижение активности гладкой мускулатуры матки во время беременности, стимуляция роста молочных желез, антиэстрогенное действие.

Диагностика нарушениий менструального цикла,
Беременность,
Угроза прерывания беременности,
Подозрение на опухоль или кисту яичников.

Референсные значения (вариант нормы):

Возраст, годы

Мужчины

Женщины

Единицы измерения

0 –1

0,32–0,65

Фолл. фаза: 0,32–2,23
Овул. пик: 0,92–4,13
Лют. фаза: 1,91–56,64
Менопауза: string(3) «510» [«cito_price»]=> string(4) «1020» [«parent»]=> string(2) «22» [10]=> string(1) «1» [«limit»]=> NULL [«bmats»]=> array(1) array(3) string(1) «Y» [«own_bmat»]=> string(2) «12» [«name»]=> string(31) «Кровь (сыворотка)» > > [«add»]=> array(23) array(2) string(52) «luteinizirujushhij-gormon-luteinizing-hormone_060001» [«name»]=> string(65) «Лютеинизирующий гормон (Luteinizing hormone)» > [1]=> array(2) string(39) «follikulostimulirujushhij-gormon_060002» [«name»]=> string(88) «Фолликулостимулирующий гормон (Follicle stimulating hormone)» > [2]=> array(2) string(26) «estradiol-estradiol_060003» [«name»]=> string(30) «Эстрадиол (Estradiol)» > [3]=> array(2) string(16) «prolaktin_060004» [«name»]=> string(30) «Пролактин (Prolactin)» > [4]=> array(2) string(29) «17-gidroksiprogesteron_060006» [«name»]=> string(62) «17-гидроксипрогестерон (17-OH progesterone)» > [5]=> array(2) string(27) «anti-mullerov-gormon_060007» [«name»]=> string(63) «Анти-Мюллеров гормон (anti-Mullerian hormone)» > [6]=> array(2) string(35) «degidroepiandrosteron-sulfat_060201» [«name»]=> string(90) «Дегидроэпиандростерон-сульфат (Dehydroepiandrosterone sulfate)» > [7]=> array(2) string(26) «testosteron-obshhij_060202» [«name»]=> string(37) «Тестостерон (Testosterone)» > [8]=> array(2) string(45) «globulin-svazyvajushhij-polovoj-gormon_060204» [«name»]=> string(99) «Глобулин, связывающий половой гормон (Sex hormone-binding globulin)» > [9]=> array(2) string(54) «tireotropnyj-gormon-thyroid-stimulating-hormone_060305» [«name»]=> string(67) «Тиреотропный гормон (Thyroid Stimulating Hormone)» > [10]=> array(2) string(68) «antitela-k-tireoperoksidaze-thyroid-peroxidase-autoantibodies_060702» [«name»]=> string(88) «Антитела к тиреопероксидазе (Thyroid peroxidase autoantibodies)» > [11]=> array(2) string(53) «prostaticheskij-specificheskij-antigen-obshhij_070001» [«name»]=> string(115) «Простатический специфический антиген общий (Prostate-Specific Antigen total)» > [12]=> array(2) string(62) «prostaticheskij-specificheskij-antigen-obshhijsvobodnyj_070002» [«name»]=> string(178) «Простатический специфический антиген общий / свободный (Prostate-Specific Antigen total/free). Расчет соотношения» > [13]=> array(2) string(45) «rakovyj-antigen-125-cancer-antigen-125_070006» [«name»]=> string(62) «CA 125 (Раковый антиген 125, Cancer Antigen 125)» > [14]=> array(2) string(52) «sekretornyj-belok-4-epididimisa-cheloveka-he4_070014» [«name»]=> string(110) «HE 4 (Секреторный белок эпидидимиса человека 4, Human epididymis protein 4)» > [15]=> array(2) string(93) «25-oh-vitamin-d-25-gidroksivitamin-d-25-gidroskikalciferol-25-hydroxyvitamin-d-25-on-d_080006» [«name»]=> string(44) «25-OH витамин D (25-hydroxyvitamin D)» > [16]=> array(2) string(61) «diagnostika-funkcii-shhitovidnoj-zhelezy-rasshirennaja_300005» [«name»]=> string(96) «Диагностика функции щитовидной железы (расширенная)» > [17]=> array(2) string(34) «gormonalnyj-status-muzhskoj_300013» [«name»]=> string(54) «Гормональный статус (мужской)» > [18]=> array(2) string(30) «diagnostika-osteoporoza_300029» [«name»]=> string(45) «Диагностика остеопороза» > [19]=> array(2) string(74) «risk-obnaruzhenija-epitelialnoj-karcinomy-jaichnikov-v-premenopauze_300062» [«name»]=> string(122) «Риск обнаружения эпителиальной карциномы яичников в пременопаузе» > [20]=> array(2) string(75) «risk-obnaruzhenija-epitelialnoj-karcinomy-jaichnikov-v-postmenopauze_300063» [«name»]=> string(124) «Риск обнаружения эпителиальной карциномы яичников в постменопаузе» > [21]=> array(2) string(37) «gormonalnyj-status-v-menopauze_300105» [«name»]=> string(61) «Гормональный статус (в менопаузе)» > [22]=> array(2) string(34) «gormonalnyj-status-zhenskij_300132» [«name»]=> string(94) «Гормональный статус женский (включает прогестерон)» > > [«within»]=> array(2) array(5) string(37) «gormonalnyj-status-v-menopauze_300105» [«name»]=> string(61) «Гормональный статус (в менопаузе)» [«serv_cost»]=> string(4) «2390» [«opisanie»]=> string(2393) «

Климактерический период — физиологический период жизни женщины; характеризуется постепенным снижением, а затем и «выключением» функции яичников. Развившееся в результате этого состояние гипергонадотропного гипогонадизма (прежде всего эстрогенная недостаточность) может сопровождаться изменением или нарушением секреции нейрогормонов, поражением органов-мишеней. Ранние симптомы климактерического синдрома: приливы жара, ознобы, повышенная потливость, головные боли, раздражительность и др. Через 1-3 года после наступления менопаузы появляются урогенитальные расстройства, сухость кожи, ломкость ногтей, выпадение волос. К поздним проявлениям относят постменопаузальный метаболический синдром (атеросклероз, артериальная гипертензия, инсулинорезистентность). В период перименопаузы и постменопаузы также возникают дисфункциональные маточные кровотечения

Данная программа показана для женщин в период менопаузы для выяснения причины нарушений.

Обращаем Ваше внимание на то, что интерпретация результатов исследований, установление диагноза, а также назначение лечения, в соответствии с Федеральным законом ФЗ № 323 «Об основах защиты здоровья граждан в Российской Федерации», должны производиться врачом соответствующей специализации.

» [«catalog_code»]=> string(6) «300105» > [1]=> array(5) string(34) «gormonalnyj-status-zhenskij_300132» [«name»]=> string(94) «Гормональный статус женский (включает прогестерон)» [«serv_cost»]=> string(4) «3340» [«opisanie»]=> string(1897) «

Данный комплекс исследований целесообразно назначать в 1-ю (фолликулиновую) фазу менструального цикла (3-5 день цикла), если лечащий врач не назначил иначе. Комплекс рекомендован женщинам при нарушении менструального цикла, бесплодии, гирсутизме (избыточном росте волос), избыточном весе, угревой сыпи, приеме контрацептивных препаратов и других состояниях.

ВНИМАНИЕ! У женщин репродуктивного возраста и до наступления климактерического периода на результаты влияют физиологические факторы, связанные с фазой менструального цикла, поэтому при обследовании на половые гормоны необходимо сообщить регистратору день менструального цикла или срок беременности.

» [«catalog_code»]=> string(6) «300132» > > >

Биоматериал и доступные способы взятия:

Тип	В офисе
Кровь (сыворотка)

Подготовка к исследованию:

Диагностика нарушениий менструального цикла,
Беременность,
Угроза прерывания беременности,
Подозрение на опухоль или кисту яичников.

Референсные значения (вариант нормы):

Возраст, годы

Мужчины

Женщины

Единицы измерения

0 –1

0,32–0,65

Фолл. фаза: 0,32–2,23
Овул. пик: 0,92–4,13
Лют. фаза: 1,91–56,64
Менопауза:

источник

Что такое гормоны?
Какие бывают гормоны?
Диагностика беременности
Что такое аутоантитела?
Стоимость анализов

Гормоны — это группа биологически активных веществ, выделяющихся непосредственно в кровоток железами внутренней секреции (эндокринными железами): гипофизом, надпочечниками, поджелудочной железой, щитовидной железой, половыми железами и др. и оказывающие сложное и многогранное воздействие на организм в целом, либо на определённые органы и ткани-мишени. Выполнив свою задачу, гормоны либо расщепляются в клетках-мишенях или в крови, либо транспортируются в печень, где расщепляются, либо, наконец, удаляются из организма в основном с мочой. Недостаток или избыток одного или нескольких гормонов может привести к развитию различных эндокринных заболеваний.

Гормоны управляют следующими процессами:

Обеспечивают гуморальную (т.е. осуществляемую через кровь) регуляцию биологических процессов в организме.
Поддерживают целостность внутренней среды в организме и гармоничное взаимодействие между клеточными группами тела.
Регулируют процессы роста, созревания, размножения, обмена веществ и др.

Гипофиз – своеобразный командный пункт гормональной системы организма. Здесь вырабатываются тропные гормоны. Их еще называют «гормонами гормонов». Эти вещества являются регуляторами выработки гормонов остальными железами внутренней секреции.

ТТГ – тиреоторопный гормон. Стимулирует работу щитовидной железы – основного регулятора обмена веществ в нашем организме.

ФСГ – фолликулостимулирующий гормон. У женщин это гормон стимулирует созревание фолликула в яичниках, а у мужчин играет очень важную роль в созревании спермы.

ЛГ – лютеинезирующий гормон. У женщин этот гормон вызывает разрыв фолликула (овуляцию) и образование желтого тела, а у мужчин стимулирует синтез тестостерона (основного мужского полового гормона).

Пролактин. Гормон, необходимый для нормального развития грудных желез, обеспечивающий выработку молока молочными железами. Избыток этого гормона вызывает у женщин – нарушение менструального цикла, у мужчин – импотенцию и потерю полового влечения (либидо).

СТГ – соматропный гормон. «Гормон роста». Самый необходимый гормон для нормального физического развития ребенка, у взрослых секреция СТГ в норме значительно ниже. Кроме того, он влияет на образование костной и хрящевой ткани, и выполняет еще ряд разнообразных функций, суть которых сводится к росту и развитию организма. Недостаточность продукции этого гормона у детей приводит к развитию карликовости. Симптомы недостаточности СТГ у взрослых пока недостаточно изучены. Избыток этого гормона у детей приводит к гигантизму, а у взрослых – к акромегалии.

Щитовидная железа – основной регулятор обмена веществ в нашем организме.

Йодсодержащие тиреоидные гормоны, продуцируемые этой железой, являются главными стимуляторами метаболических процессов.

У детей тиреоидные гормоны способствуют процессу роста, а также значительно влияют на развитие головного мозга.

По соотношению этих гормонов можно судить о функциональном состоянии щитовидной железы.

Состояние, когда синтез тиреоидных гормонов снижен, называется гипотиреозом. У взрослых он характеризуется снижением скорости всех метаболических процессов, замедлением психической реакции, резким повышением утомляемости. У детей значительное снижение уровня этих гормонов в раннем возрасте приводит к сильной задержке физического и умственного развития – кретинизму.

Состояние избыточности синтеза тиреоидных гормонов называется гипертиреозом. У людей с такой патологией резко повышен основной обмен, скорость расщепления белков и жиров, сами больные выглядят очень возбужденными. У многих гипертиреоз может сопровождаться зобовидным утолщением шеи, развитием экзофтальма (пучеглазия).

Производятся в половых железах – яичниках (у женщин) и яичках (у мужчин).Незначительное количество синтезируется в надпочечниках. Основные функции – формирование и поддерживание половых функций мужского или женского организма.

Мужские гормоны

Тестостерон. Основной мужской половой гормон. Он ответственен за формирование вторичных половых признаков мужского организма. Кроме того, он обладает анаболическим эффектом. С его помощью достигается ускоренный рост мускулатуры, усиленное образование эритроцитов, более быстрая регенерация тканей. Улучшается общий обмен веществ, активизируется сжигание жира.

Повышение концентрации тестостерона может наблюдаться при наличии лишней мужской половой хромосомы (XYY), преждевременном созревании у мальчиков, различных опухолях яичек.

Снижение концентрации – при генетических заболеваниях (синдром Кляйнфельтера, гермафродизм), при длительной гиподинамии, травмах, атрофических явлениях в яичках, под воздействием ионизирующих излучений и токсических веществ.

Женские гормоны

Женские половые гормоны делятся на две группы – эстрогены и гестагены.

Эстрогены вырабатываются в первой фазе менструального цикла, гестагены – во второй. Именно бесперебойная выработка этих гормонов обеспечивает безотказную работу главных женских «часов».

Наиболее важный из эстрогенов – эстрадиол. У девочек он вызывает формирование вторичных половых признаков, а у взрослых женщин – существенно влияет на процессы оплодотворения. Кроме того, эстрадиол обладает анаболическим эффектом, правда, менее выразительным, чем тестостерон у мужчин. Еще один важный эффект эстрадиола – предотвращение потери кальция костями скелета.

К гестагенам относится, в частности, прогестерон. Он вызывает развитие слизистой матки, подготовки ее к беременности, является основным гормоном, ответственным за сохранение беременности. Прогестерон может служить точным маркером овуляции. Любое отклонение значений этих гормонов от нормальных показателей вызывает нарушение менструального цикла, может быть причиной бесплодия или невынашивания беременности.

ВНИМАНИЕ: Для получения точных результатов анализа на эстрадиол необходимо сдавать на 5-й – 7-й день менструального цикла. Анализ на прогестерон необходимо сдавать в середине второй фазы менструального цикла. Эти анализы сдают строго натощак.

Хронический гонадотропин (β — ХГЧ)

β – ХГЧ является специфическим гормоном. Он начинает вырабатываться клетками плаценты к концу первой недели после оплодотворения. В первые недели беременности концентрация гормона удваивается каждые два дня. На 10-ый день после зачатия уровень β – ХГЧ возрастает в 40 раз, а к первому дню ожидаемой, но не наступившей менструации – в 100 раз.

Таким образом, возможно определять наличие беременности начиная с 7-19 дня после зачатия, еще до задержки с эффективностью не ниже 99 %.Ошибки в диагностике происходят крайне редко и, как правило, связаны с той или иной патологией (нарушение менструального цикла, склонность к невынашиванию беременности, киста желтого тела), предшествующей беременности или абортом. В этих случаях рекомендуется повторное обследование, проводимое через 3-4 дня.

Наряду с диагностикой беременности, данное исследование помогает обнаружить многие заболевания женской половой сферы.У мужчин повышение концентрации этого гормона может свидетельствовать о возможности развития опухолей различной локализации.

Аутоиммунные антитела (аутоантитела) образуются при развитии в организме аутоиммунных нарушений. Аутоиммунные реакции — это патологический ответ иммунной системы человека на компоненты собственных тканей организма — могут проявляться в выработке антител к фосфолипидам, фрагментам ДНК, факторам щитовидной железы и др. В акушерско-гинекологической практике подобные нарушения рассматриваются в рамках антифосфолипидного синдрома. Аутоантитела вызывают повышение свертывающей способности крови, развитие микротромбозов в сосудах плаценты, нарушение имплантации, маточно-плацентарную недостаточность, синдром внутриутробной задержки развития плода, гибель зародыша.

Название исследования	Клинический материал	Результат	Срок испол.	Цена	CITO
Фертильность и репродукция
ЛГ	кровь (сыворотка)	кол.	2 р.д.	390,00р.
ФСГ	кровь (сыворотка)	кол.	2 р.д.	390,00р.
Эстрадиол	кровь (сыворотка)	кол.	2 р.д.	440,00р.
Пролактин	кровь (сыворотка)	кол.	2 р.д.	420,00р.
Прогестерон	кровь (сыворотка)	кол.	2 р.д.	440,00р.
17-ОН -прогестерон	кровь (сыворотка)	кол.	2 р.д.	440,00р.
Антимюллеров гормон (АМH)	кровь (сыворотка)	кол.	4 р.д.	1370,00р.
Ингибин B	кровь (сыворотка)	кол.	4 р.д.	1370,00р.
Пренатальная диагностика
Гомоцистеин*	кровь (сыворотка)	кол.	2 р.д.	1370,00р.
PAPP-A (ассоциированный с беременностью плазменный белок А)	кровь (сыворотка)	кол.	4 р.д.	800,00р.
в-ХГЧ	кровь (сыворотка)	кол.	2 р.д.	390,00р.
Свободный эстриол	кровь (сыворотка)	кол.	2 р.д.	390,00р.
АФП	кровь (сыворотка)	кол.	2 р.д.	470,00р.
Свободный в-ХГЧ	кровь (сыворотка)	кол.	2 р.д.	530,00р.
Плацентарный лактоген	кровь (сыворотка)	кол.	2-6 р.д.	630,00р.
Андрогены
ДГЭА-сульфат	кровь (сыворотка)	кол.	2 р.д.	390,00р.
Тестостерон	кровь (сыворотка)	кол.	2 р.д.	390,00р.
Определение экскреции 17-КС	моча	кол.	5 р.д.	630,00р.
ГСПГ(глобулин,связывающий половой гормон)	кровь (сыворотка)	кол.	2 р.д.	730,00р.
Свободный тестостерон	кровь (сыворотка)	кол.	2-6 р.д.	890,00р.
Дигидротестостерон	кровь (сыворотка)	кол.	4-5 р.д.	990,00р.
Андростендион	кровь (сыворотка)	кол.	2 р.д.	890,00р.
Андростендиола Глюкуронид	кровь (сыворотка)	кол.	5 р.д.	940,00р.
Тиреоидная панель
Т3	кровь (сыворотка)	кол.	2 р.д.	390,00р.
Т4	кровь (сыворотка)	кол.	2 р.д.	390,00р.
Т3 свободный	кровь (сыворотка)	кол.	2 р.д.	390,00р.
Т4 свободный	кровь (сыворотка)	кол.	2 р.д.	390,00р.
ТТГ	кровь (сыворотка)	кол.	2 р.д.	390,00р.
ТГ (тиреоглобулин)	кровь (сыворотка)	кол.	2 р.д.	630,00р.
Т-uptake (тест поглощенных тиреойдных гормонов)	кровь (сыворотка)	кол.	2 р.д.	560,00р.
Гормоны коры надпочечников
Кортизол	кровь (сыворотка)	кол.	2 р.д.	390,00р.
Гормоны гипофиза
СТГ**	кровь (сыворотка)	кол.	2-6 р.д.	550,00р.
АКТГ	кровь с апротинином	кол.	2-6 р.д.	830,00р.
Гормоны поджелудочной железы
Инсулин*	кровь (сыворотка)	кол.	3 р.д.	510,00р.
С- пептид*	кровь (сыворотка)	кол.	4 р.д.	440,00р.
Проинсулин	кровь (сыворотка)	кол.	2-6 р.д.	830,00р.
Аутоантитела
Антитела к тиреоглобулину	кровь (сыворотка)	кол.	2 р.д.	440,00р.
Антитела к тиреопероксидазе	кровь (сыворотка)	кол.	2 р.д.	440,00р.
Антитела к двухспиральной ДНК (a-dsDNA)	кровь (сыворотка)	кол.	5 р.д.	710,00р.
Антитела к односпиральной ДНК (a-ssDNA)	кровь (сыворотка)	кол.	5 р.д.	710,00р.
Антитела к ядерным антигенам (ANA)	кровь (сыворотка)	п.кол.	5 р.д.	710,00р.
Антитела к фосфолипидам	кровь (сыворотка)	кол.	5 р.д.	630,00р.
Антитела к митохондриям (AMA)	кровь (сыворотка)	кол.	5 р.д.	950,00р.
Антитела к микросомальной фракции печени и почек	кровь (сыворотка)	кол.	5 р.д.	1340,00р.
Антитела к трансглутаминазе IgА	кровь (сыворотка)	кол.	2-6 р.д.	830,00р.
Антитела к трансглутаминазе IgG	кровь (сыворотка)	кол.	2-6 р.д.	830,00р.
Антитела к β-клеткам поджелудочной железы	кровь (сыворотка)	кач.	2-6 р.д.	1000,00р.
Антитела к инсулину	кровь (сыворотка)	кол.	2-6 р.д.	610,00р.
Антитела к глутаматдекарбоксилазе (GAD)	кровь (сыворотка)	кач.	2-6 р.д.	1050,00р.
Антитела к рецепторам ТТГ	кровь (сыворотка)	кол.	2-6 р.д.	1260,00р.
Антиспермальные антитела	кровь (сыворотка)	кол.	2-6 р.д.	740,00р.
Антиовариальные антитела	кровь (сыворотка)	кол.	2-6 р.д.	740,00р.
Антитела к циклическому цитрулиновому пептиду (АТ к ССР)	кровь (сыворотка)	кол.	1-2 р.д.	1470,00р.
Антитела к модифицированному цитруллинированному виментину	кровь (сыворотка)	кач.	5 р.д.	1680,00р.
Антитела к кардиолипину IgG	кровь (сыворотка)	кол.	5 р.д.	1260,00р.
Антитела к кардиолипину IgM	кровь (сыворотка)	кач.	5 р.д.	1260,00р.
Антитела к β2 гликопротеину I IgG	кровь (сыворотка)	кол.	5 р.д.	1260,00р.
Антитела к β2 гликопротеину I IgM	кровь (сыворотка)	кач.	5 р.д.	1260,00р.
Антитела к аннексину V IgG	кровь (сыворотка)	кол.	5 р.д.	1260,00р.
Антитела к аннексину V IgM	кровь (сыворотка)	кач.	5 р.д.	1260,00р.
Минералокортикоиды
Альдостерон	кровь (сыворотка)	кол.	2-6 р.д.	440,00р.
Метаболиты
Гастрин**	кровь (сыворотка)	кол.	2-6 р.д.	630,00р.
Лептин	кровь (сыворотка)	кол.	2-6 р.д.	770,00р.
Гиалуроновая кислота	кровь (сыворотка)	кол.	7 р.д.	4410,00р.
ГОРМОНЫ ПАРАЩИТОВИДНЫХ ЖЕЛЕЗ И МАРКЕРЫ ОСТЕОПОРОЗА
Остеокальцин*	кровь (сыворотка)	кол.	2 р.д.	890,00р.
Паратиреоидный гормон*	кровь (сыворотка)	кол.	2 р.д.	620,00р.
CrossLaps*	кровь (сыворотка)	кол.	2 р.д.	820,00р.
Р1NP (Маркер формирования костного матрикса)	кровь (сыворотка)	кол.	2 р.д.	1 680,00р.
Кальцитонин**	кровь (сыворотка)	кол.	2-6 р.д.	940,00р.

р.д. — рабочий день, п.кол — полуколичественный, кол. — количественный, кач. — качественный

Исследование в режиме CITO:

— поступление биологического материала до 14.00 — выдача результатов исследований после 19.00 в тот же день по факсу или электронной почте;

— поступление биологического материала после 14.00 — выдача результатов исследований до 13.00 следующего дня по факсу или электронной почте.

* Отделить от форменных элементов, ** Отделить от форменных элементов и заморозить

источник

Способ определения аутоантител к прогестерону в сыворотке и плазме крови человека методом иммуноферментного анализа

Владельцы патента RU 2567724:

Изобретение относится к биотехнологии и медицине, в частности иммунологии, и предназначено для определения аутоантител к прогестерону в сыворотке и плазме крови человека. Изобретение раскрывает способ непрямого твердофазного иммуноферментного анализа, в котором в качестве антигена на поверхность полистирола иммобилизуют конъюгат прогестерона с гемоцианином: гемоцианин-11α-гидроксипрогестерон, гемоцианин-3α-гидроксипрогестерон. Предлагаемый способ технически прост, информативен, обладает высокой чувствительностью и специфичностью при определении антител к прогестерону в сыворотке и плазме крови больных с привычным невынашиванием беременности и бесплодием, его применение позволяет получить достоверные результаты при хранении готовых планшетов до 1 года. Изобретение может быть применено для обследования больных с различной акушерско-гинекологической патологией. 7 табл., 7 пр.

Изобретение относится к биотехнологии, в частности к способу определения антител к прогестерону, и может быть использовано в биологии и медицине для определения аутоантител к прогестерону в сыворотке и плазме крови человека при акушерско-гинекологической патологии, а именно при привычном невынашивании беременности, бесплодии, у больных с гипоплазией эндометрия, неудачами в программах экстракорпорального оплодотворения, с акушерскими осложнениями (гипоплазия хориона, угроза прерывания беременности, хроническая плацентарная недостаточность), с предменструальным синдромом, после применения гормональных контрацептивов и препаратов, содержащих прогестерон.

Известен способ определения антител к прогестерону [1], заключающийся в том, что на поверхность лунок полистирольного микропланшета иммобилизуют конъюгат прогестерона с БСА из 0,1 М карбонат-бикарбонатного буферного раствора (рН 9,5) в концентрации 10 мкг/мл при 4°С в течение ночи; планшет промывают трисовым солевым буферным раствором (рН 7,4), содержащим 0,05% твина-20; планшет обрабатывают смесью 1,5% БСА и 1,5% желатина в трисовом солевом буферном растворе при комнатной температуре в течение 2 часов и затем при 4°С в течение ночи; сыворотки крови для определения IgM и IgG исследуют в разведении 1:100 по объему и инкубируют при комнатной температуре в течение 2 часов, для определения IgE сыворотки исследуют в разведении 1:2 по объему и инкубируют в течение ночи; антитела козы, меченные щелочной фосфатазой, к IgM, IgG или IgE человека инкубируют при комнатной температуре в течение 2 часов; инкубацию с субстратно-хромогенной смесью, содержащей паранитрофенилфосфат, проводят в течение 45 минут. К недостаткам следует отнести сложность и многоэтапностъ методики, включение длительных инкубации, в том числе в течение ночи. Многокомпонентность системы, использование длительных инкубаций, конъюгата поликлональных антител с ферментом для детекции антител к прогестерону приводят к недостаточно высокой чувствительности, специфичности, точности и воспроизводимости определения.

Наиболее близким к заявляемому по технической сущности является способ определения антител к прогестерону [2], заключающийся в том, что конъюгат прогестерона с БСА (БСА-11α-гидроксипрогестерон) иммобилизуют на полистирольную поверхность лунок микропланшета из фосфатно-солевого буферного раствора при 20±2°С в течение 18±2 часов; сыворотки крови разводят 1:100 в фосфатно-солевом буферном растворе, содержащем 0,5% желатина и 0,5% твина-20, и инкубируют на встряхивателе при 20±2°С в течение 1 часа; планшет промывают фосфатно-солевым буферным раствором, содержащим 0,5% твина-20; планшет инкубируют с мышиными моноклональными антителами к IgM, IgG человека, меченными пероксидазой хрена, при 20±2°С в течение 1 часа; планшет инкубируют с субстратно-хромогенным раствором, содержащим 3,3′,5,5′-тетраметилбензидин и перекись водорода. Использование в качестве антигена конъюгата прогестерона с БСА, в котором содержание прогестерона ограничивается 12-16 молекулами прогестерона на 1 молекулу БСА, отсутствие дополнительной обработки поверхности твердой фазы блокирующим раствором, содержащим инертные белки, использование высокой концентрации поверхностно-активного вещества в буфере для промывки и разведения сывороток и конъюгата приводят к ограничению чувствительности, специфичности и точности определения.

Технической задачей изобретения является создание чувствительного, специфичного и простого в исполнении способа определения аутоантител к прогестерону в сыворотке и плазме крови человека методом ИФА. Эта задача решается описываемым способом определения антител к прогестерону, заключающимся в использовании в качестве антигена конъюгата прогестерона с гемоцианином с высоким содержанием прогестерона от 120 до 150 молекул на 1 молекулу гемоцианина, иммобилизации антигена на поверхность полистирола из водного буферного раствора (рН 7,2±0,2), обработке поверхности водным буферным раствором, содержащим 5-20 мг/мл инертного белка (БСА, желатина), инкубации сывороток крови, разведенных в соотношении 1:10-1:100 по объему в водном буферном растворе, содержащем 5-10 мг/мл инертного белка (БСА, желатина) и 0,05-0,1% по объему твина-20, промывании поверхности до и после инкубации водным буферным раствором, содержащим 0,05-0,1% твина-20, использовании для детекции антител к прогестерону конъюгата моноклональных антител к иммуноглобулинам человека класса М, G, А, Е, с ферментом.

Практически способ осуществляется следующим образом.

Конъюгат прогестерона с гемоцианином из лимфы улитки Megathura crenulata (гемоцианин-11α-гидроксипрогестерон, гемоцианин-3α-гидроксипрогестерон) в водном буферном растворе (фосфатно-солевом, трисовом) с рН 7,2±0,2, содержащем 0,05-0,1% проклина 300, в концентрации 1-5 мкг/мл иммобилизуют на поверхность полистирола при 20±2°С в течение 18±2 часов, поверхность промывают указанным водным буферным раствором, поверхность обрабатывают водным буферным раствором, содержащим 5-20 мг/мл инертного белка (БСА, желатина) при 20±2°С в течение 60-90 минут, промывают водным буферным раствором, содержащим 0,05-0,1% по объему твина-20. Образцы сыворотки, плазмы крови, разведенные в соотношении 1:10-1:100 по объему в водном буферном растворе, содержащем 5-10 мг/мл инертного белка и 0,05-0,1% по объему твина-20, инкубируют при 20±2°С на орбитальном шейкере при 200-300 об/мин в течение 60-120 минут, поверхность твердой фазы до и после инкубации промывают водным буферным раствором, содержащим 0,05-0,1% твина-20, и инкубируют с конъюгатом мышиных моноклональных антител к иммуноглобулинам человека класса М, G, А, Е, с пероксидазой хрена в разведении в соотношении 1:2000-1:60000 по объему в водном буферном растворе, содержащем 5-10 мг/мл инертного белка и 0,05-0,1% твина-20, при 20±2°С на орбитальном шейкере при 200-300 об/мин в течение 60±10 минут. После промывания водным буферным раствором, содержащим 0,05-0,1% твина-20, инкубируют с субстратно-хромогенной смесью, содержащей 3,3′,5,5′-тетраметилбензидин и перекись водорода, при 20±2°С в течение 15-20 минут, ферментативную реакцию останавливают 0,5М H₂SO₄ результат анализа оценивают инструментально путем измерения оптической плотности (ОП) на фотометре при длине волны 450 нм.

Отличительной особенностью предлагаемого способа является то, что в качестве антигена используют конъюгат прогестерона с гемоцианином, адсорбцию антигена на поверхность полистирола проводят из водного буферного раствора с рН 7,2±0,2 при 20±2°С в течение 18±2 часов, поверхность промывают водным буферным раствором и обрабатывают раствором инертного белка (БСА, желатина) с концентрацией 5-20 мг/мл при 20±2°С в течение 60-90 минут, образцы сыворотки, плазмы крови разводят в водном буферном растворе, содержащем 5-10 мг/мл инертного белка и 0,05-0,1% по объему твина-20, в соотношении 1:10-1:100 по объему и инкубируют при 20±2°С на орбитальном шейкере при 200-300 об/мин в течение 60-120 минут, поверхность полистирола до и после инкубации промывают водным буферным раствором, содержащим 0,05-0,1% твина-20, инкубируют с конъюгатом мышиных моноклональных антител к иммуноглобулинам человека класса М, G, А, Е, с пероксидазой хрена в водном буферном растворе, содержащим 5-10 мг/мл инертного белка и 0,05%-0,1% твина-20.

Пример 1. Для подтверждения возможности получения технического результата с помощью заявленного способа определения аутоантител к прогестерону используют образцы сыворотки, плазмы крови здоровых доноров и пациенток с привычным невынашиванием беременности и бесплодием.

Конъюгат гемоцианин-11α-гидроксипрогестерон (Michigan Diagnostics, США) в фосфатно-солевом буферном растворе (ФСБР) с рН 7,2±0,2, содержащем 0,05% проклина 300, в концентрации 1 мкг/мл вносят по 100 мкл в лунки полистирольного микропланшета (Nunc MaxiSorp, Thermo Fisher Scientific, Дания) и инкубируют при 20±2°С в течение 18±2 часов. Планшет промывают 4 раза ФСБР. В лунки планшета вносят по 200 мкл ФСБР, содержащего 10 мг/мл БСА, и инкубируют при 20±2°С в течение 90±10 минут. После 4-кратного промывания планшета ФСБР, содержащим 0,05% по объему твина-20, в лунки вносят по 100 мкл образцов сыворотки, плазмы крови, предварительно разведенных в ФСБР, содержащем 5 мг/мл БСА и 0,05% по объему твина-20, в соотношении 1:100 по объему, инкубируют при 20±2°С на орбитальном шейкере при 200 об/мин в течение 60±10 минут. После 4-кратного промывания планшета ФСБР, содержащим 0,05% твина-20, в лунки вносят конъюгат мышиных моноклональных антител с пероксидазой хрена к IgM человека в разведении в соотношении 1:30000 по объему, к IgG человека в разведении в соотношении 1:50000 по объему в ФСБР, содержащем 5 мг/мл БСА и 0,05% твина-20, по 100 мкл в лунку, инкубируют при 20±2°С на орбитальном шейкере при 200 об/мин в течение 60±10 минут. После 4-кратного промывания планшетов ФСБР, содержащим 0,05% твина-20, в лунки вносят по 100 мкл субстратно-хромогенного раствора, содержащего 3,3′,5,5′-тетраметилбензидин и перекись водорода, инкубируют при 20±2°С в течение 15-20 минут, реакцию останавливают добавлением в лунки по 100 мкл 0,5 М H₂SO₄. Оценку результатов проводят инструментально путем измерения ОП на фотометре при длине волны 450 нм.

Пример 2. Анализ проводят аналогично способу, описанному в примере 1, за исключением того, что в качестве антигена для иммобилизации на твердую фазу используют гемоцианин-3α-гидроксипрогестерон (Michigan Diagnostics, США).

Пример 3. Анализ проводят аналогично способу, описанному в примере 1, за исключением того, что в качестве антигена для иммобилизации на твердую фазу используют БСА-11α-гидроксипрогестерон (Michigan Diagnostics, США).

Пример 4. Анализ проводят аналогично способу, описанному в примере 1, за исключением того, что выполняют 2-кратное титрование образцов сыворотки крови больных с привычным невынашиванием беременности (1:100-1:6400).

Пример 5. Анализ проводят аналогично способу, описанному в примере 1, за исключением того, что в качестве антигена на поверхность твердой фазы иммобилизуют гемоцианин из лимфы улитки Megathura crenulata (Sigma-Aldrich, США).

Пример 6. Анализ проводят аналогично способу, описанному в примере 1, за исключением того, что в качестве антигена на поверхность твердой фазы иммобилизуют БСА (Sigma-Aldrich, США).

Пример 7. Анализ проводят аналогично способу, описанному в примере 2, за исключением того, что используют планшет, который после иммобилизации антигена и обработки раствором инертного белка, хранят в вакуумной упаковке при +4°С в течение 1 года.

Способ определения аутоантител к прогестерону в сыворотке и плазме крови человека методом иммуноферментного анализа, включающий адсорбцию конъюгата прогестерона с белком-носителем на поверхность полистирола, обработку поверхности водным раствором инертного белка, инкубацию с разведенной сывороткой, плазмой крови, инкубацию с конъюгатом антител к иммуноглобулинам человека с ферментом, инкубацию с субстратно-хромогенным раствором, отличающийся тем, что на полистирольную поверхность адсорбируют конъюгат прогестерона с гемоцианином (гемоцианин-11α-гидроксипрогестерон, гемоцианин-3α-гидроксипрогестерон) в водном буферном растворе (фосфатно-солевом, трисовом) с pH 7,2±0,2, содержащем 0,05-0,1% проклина 300, при 20±2°С в течение 18±2 часов, поверхность промывают указанным буферным раствором и обрабатывают буферным раствором, содержащим инертный белок (БСА, желатин) в концентрации 5-20 мг/мл, инкубируют с образцами сыворотки, плазмы крови, разведенными в соотношении 1:10-1:100 по объему в буферном растворе, содержащем инертный белок в концентрации 5-10 мг/мл и 0,05-0,1% по объему твина-20, поверхность до и после инкубации промывают буферным раствором, содержащим 0,05-0,1% по объему твина-20, инкубируют с мышиными моноклональными антителами к иммуноглобулинам человека класса М, G, А, Е, конъюгированными с пероксидазой хрена, используют субстратно-хромогенный раствор, содержащий 3,3′,5,5′-тетраметилбензидин и перекись водорода измеряют оптическую плотность при длине волны 450 нм.

источник

Автореферат и диссертация по медицине (14.00.01) на тему: Роль сенсибилизации к прогестерону в клинике привычного невынашивания беременности

Автореферат диссертации по медицине на тему Роль сенсибилизации к прогестерону в клинике привычного невынашивания беременности

На правах рукописи ГЛАДКОВА КРИСТИНА АЛЕКСАНДРОВНА

РОЛЬ СЕНСИБИЛИЗАЦИИ К ПРОГЕСТЕРОНУ В КЛИНИКЕ ПРИВЫЧНОГО НЕВЫНАШИВАНИЯ БЕРЕМЕННОСТИ

14 00 01 — акушерство и гинекология

диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Работа выполнена в Федеральном Государственном Учреждении «Научный центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. академика В.И. Кулакова Федерального агентства по высокотехнологичной медицинской помощи» в отделении профилактики и лечения невынашивания беременности Научные руководители: доктор медицинских наук,

профессор Вера Михайловна Сидельникова

академик РАМН, профессор Геннадий Тихонович Сухих

профессор Людмила Евгеньевна Мурашко

Ведущее учреждение: Российский Университет Дружбы Народов. Защита диссертации состоится «11» ноября 2008г в 13 часов на заседании совета по защите докторских и кандидатских диссертаций Д 208 125 01 при ФГУ «Научный центр акушерства, гинекологии и перинатологии им В И Кулакова Росмедтехнологий» по адресу 117997, г Москва, ул Академика Опарина, д 4

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГУ «Научный центр акушерства, гинекологии и перинатологии им В И Кулакова Росмедтехнологий»

Автореферат разослан «_»_2008г

Ученый секретарь диссертационного совета

(ФГУ «НЦ АГиП им В И Кулакова Росмедтехнологий»)

доктор медицинских наук, профессор

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Согласно современным представлениям до 80% ранних репродуктивных потерь неясной этиологии обусловлено иммунологическими нарушениями, которые принято подразделять на аллоиммунные и аутоиммунные

Данное исследование посвящено изучению аутоиммунных механизмов прерывания беременности и в частности антителообразования к прогестерону Согласно данным американской школы акушеров, занимающихся иммунологией репродукции [Beer А Е , Kwak J Y Н, 1999], аутоантителл к прогестерону играют негативную роль в генезе привычного невынашивания беременности

Иммунологическая реакция во время беременности необходима для распознавания материнским организмом чужеродных ему антигенов плода В результате на системном и локальном уровнях развиваются механизмы иммуносупрессии, необходимые для иммунолоштеской защиты фстоплацентарного комплекса в течение беременности Одновременно с этим индуцируются механизмы плацентарного иммунотрофизма, способствующие развитию трофобласта и затем плаценты Причиной репродуктивных потерь иммунологического генеза может явиться нарушение в деятельности одного или нескольких перечисленных компонентов

В последние годы наибольшее внимание исследовагелей привлечено к аутоиммунным аспектам репродуктивных потерь

С общепринятых позиций, под аутоиммунными состояниями понимают ряд симптомов и заболеваний, возникающих вследствие неконтролируемой активности иммунных реакций, направленных против собственных структур организма В нормальных условиях существует иммунологическая толерантность к собственным клеткам, тк в пре- и постнатальном периоде клеточные клоны, возникающие против собственных структур, блокируются

или разрушаются Однако при определенных условиях эта толерантность может нарушаться, что ведет к развитию патологического процесса

Наличие аутоантител является нормальным физиологическим и жизненно-необходимым компонентом, обеспечивающим существование организма Аутоиммунная катастрофа возникает в тех ситуациях, когда количество, эпитопная специфичность и аффинность аутоантител превышают допустимые границы

Аутоантитела обнаруживаются при многих заболеваниях скорее как реальность, чем как причина, тем не менее, при таких заболеваниях как антифосфолипидный синдром, аутоиммунный тиреоидит и др аутоантитела играют основную патогенетическую роль Вероятно, понимание механизмов иммунологического взаимодействия во время беременности позволит определить место и роль антителообразования к гормонам в генезе репродуктивных потерь Считается, что на долю аутоиммунизации приходится до 22% привычного невынашивания беременности иммунною генеза [Mahnowski А, Szpakowski М , Zeman К, 1997]

Научные исследования роли антител к. стероидам проводились с начала 30 годов XX века, когда была сформулирована концепция аллергии на гормоны яичников [Bosze Р, 1988] В дальнейшем, в 70-80 годы прошлого столетия разрабатывались контрацептивные средства на основе моноклональных антипрогестероновых антител [Dalgleish A G, Kennedy R С ,1988, Йен С С К, Джаффе РБ, 1998] Тем не менее, несмотря на многолетние исследования в этой области успехи создания вакцин на основе прогестерона нельзя признать обнадеживающими

Более того, появились публикации о роли аутоантител к прогестерону в генезе предменструального синдрома, дисменореи, аутоиммунного дерматита [Rasi А, Khatami А , 2004, Baptist А Р , Baldwin J L, 2004] Исследования роли патологической сенсибилизации к про1естерону при привычном невынашивании беременности стали проводиться только в последние годы [Beer АЕ, 1999] При высоком уровне антител к прогестерону могут

нарушаться механизмы, обеспечивающие процессы имплантации, формирования трофобласта, развития беременности

Н Оогеат и соавт (1997) впервые выделили антипрогестероновые антитела ^М и подробно исследовали их структуру II И. ЯоЬу и соавт (2006) определяя с помощью иммуноферментного анализа антитела к прогестерону и эстрадиолу 1цО, ^М и ^Е, установили высокую частоту наличия ауюантител у пациенток с астмой, мигренями, дерматитом и дисменореей

В работе АМ Шекэоп и соавт (2007) на основании трансдермальных тсстов, проведенных во II фазу менструального цикла, женщинам с самопроизвольными репродуктивными потерями в анамнезе выявлена сенсибилизация к прогестерону в 69% случаев По мнению авторов, причинами аутосенсибилизации явились предшествующие репродуктивные потери, а также прием препаратов гестагенового ряда в анамнезе

Таким образом, возможность как спонтанного, так и индуцированною появления аутоантител к прогестерону делает актуальной изучение проблемы влияния патологической аутосенсибилизации к этому гормону на репродуктивную функцию женщины

Целью настоящею исследования является оптимизация тактики нредгестационной подготовки и ведения беременности у женщин с привычными репродуктивными потерями аутоиммунного генеза с учетом сенсибилизации к прогестерону

1 Определить частоту встречаемости аутосенсибилизации к прогестерону у пациенток с привычным невынашиванием беременности

2 Изучить предрасполагающие факторы, приводящие к развитию сенсибилизации к прогестерону

3 Провести анализ гинекологической заболеваемости, состояния репродуктивной системы, иммунного статуса у женщин с аутосенсибилизацией к прогестерону и привычным невынашиванием беременности

4 Разработать и оценить влияние комплексной предгестационной подготовки на иммунологические, ультразвуковые показатели у женщин с сенсибилизацией к прогестерону

5 Изучить особенности течения беременности у женщин с сенсибилизацией к прогестерону

6 На основании полученных результатов разработать тактику ведения беременности у женщин привычны невынашиванием беременности и сенсибилизацией к прогестерону

Впервые проведено комплексное обследование пациенток с привычным невынашиванием беременности на наличие аутоантител к прогестерону

Установлено, что развитию аутосенсибилизации к прогестерону у женщин с привычным невынашиванием беременности способствуют самопроизвольные и искусственные прерывания беременности в анамнезе, аутоиммунные заболевания, использование в лечении препаратов прогестеронового ряда при предыдущих беременностях

Выявлены клинические проявления аутосенсибилизации к прогестерону у женщин с привычным невынашиванием беременности Вне беременности синдром аутосенсибилизации к прогестерону характеризуется дисменореей, гипоплазиеи эндометрия, повышением относительного содержания лимфоцитов с фенотипом СБ 19+5+ в периферической крови

Наиболее частыми осложнениями течения беременности являются гипоплазия хориона (33%) и плацентарная недостаточность (19,2%)

Полученные данные позволяют более глубоко понять генез прерывания беременности у сенсибилизированных женщин и оптимизировать комплекс мероприятий по подготовке к беременности

Устинов тена целесообразность включения в алгоритм обследования у женщин с потерями беременности в анамнезе определения аутосенсибилизации к прогестерону

На основании тщательною иммунологического обследования оптимизированы схемы лечения с учетом выявленных нарушений у каждой конкретной больной

Разработана оптимальная предгестационная подготовка и тактика ведения беременности пациенток с аутосенсибшшзацией к прогестерону, включающая использование препаратов иммуноглобулина, метилпреднизолона и дидрогестерона

Определены критерии эффективности проведенного лечебного воздействия вне и вовремя беременности, включающие нормализацию иммунного, интерферонового статуса, состояния эндометрия, снижения активности аутоантител к прогестерону

Положения, выносимые на защиту:

1 Аутосенсибилизация к прогестерону выявлена у 42% женщин с привычными репродуктивными потерями и, возможно, является одним из факторов, приводящих к привычному невынашиванию беременности

2 Наличие антител к прогестерону клинически проявляется дисменореей, гипоплазией эндометрия во II фазе менструального цикла при нормальном уровне прогестерона в крови Отмечена эффективность проведения комплексного лечения с использованием препаратов иммуноглобулина, метилпреднизолона, дидрогестерона и иммуномодулирующей терапии в качестве подготовки к зачатию

3 У пациенток с аутосенеибилизацией к прогестерону отмечается развитие гипоплазии хориона в I триместре беременности и в ряде случаев плацентарной недостаточности с внутриутробной задержкой развития плода Адекватная терапия в процессе беременности, с использованием препаратов иммуноглобулина, метилпреднизолона и дидрогестерона, своевременные профилактика и лечение плацентарной недостаточности позволяют добиться рождения жизнеспособных детей в 92,1% случаев

Основные положения диссертации доложены и обсуждены на конференции отделения профилактики и лечения невынашивания беременности совместно с лабораторией клинической иммунологии 17 12 2007г и на заседании апробационной комиссии ФГУ «НЦ АГиП им В И Кулакова Росмедтехнологий» 24 12 2007г

Внедрение результатов исследования в практику

Результаты исследования и основные рекомендации, вытекающие из них, используются в отделении профилактики и лечения невынашивания беременности ФГУ «Научный центр акушерства, гинекологии и перинатологии им В И Кулакова Росмедтехнологий» при обследовании и лечении супружеских пар с привычными потерями беременности, использованы в подготовке образовательных программ для врачей, проходящих обучение на базе Центра, а также семинаров по вопросам привычного невынашивания беременности По теме диссертации опубликовано 8 печатных работ

Структура и объем диссертации

Диссертация состоит из введения, 6 глав, выводов, практических рекомендаций, изложена на 117 страницах машинописного текста (включая список литературы), работа иллюстрирована 34 табтицами, 2 диаграммами и 3

рисунками Библиографический указатель включает 183 источников, из них 16 отечественных, 167 иностранных авторов

Для реализации поставленных задач, с целью проведения скрининга на наличие аутосенсибилизации к прогестерону, нами было проведено обследование 260 женщин, обратившихся за консультацией в научно-поликлиническое отделение ФГУ «НЦ АГиП им В И Кулакова Росмедтехнологий» в течение 2004-2007 гг по поводу привычной потери беременности Средний возраст пациенток, включенных в исследование, составил 31,2+4,2 лет Проанализированы анамнестические данные у 205 (78,9%) женщин имело место привычное невынашивание беременности ранних сроков (2-7 самопроизвольных выкидыша и/или неразвивающихся беременностей в сроках 5-12 недель гестации), у 32 (12,3%) женщин — поздние гестационные потери при сроках 16-24 недель беременности, у 23 (8,8%) -антенатальная гибель плода в анамнезе в сроках 24-38 недель гестации

Результаты проведенного скрининга сенсибилизация к прогестерону выявлена у 42% (109) женщин В 58% (151) случаев аутоантитела к прогестерону не выявлялись

Результаты скрининга на наличие аутосенсибилизации к прогестерону

Отсутствие сенсибилизации к прогестерону 151 (58%)

Сенсибилизация к прогестерону 109 (42%)

После проведенного обследования из 260 женщин были отобраны 89 пациенток в две группы исследования

Критериями отбора в группы исследования явились репродуктивный возраст, наличие или отсутствие аутоантител к прогестерону, отсутствие по данным клинико-лабораторного обследования активации бактериально-вирусной инфекции, отсутствие пороков развития матки, отсутствие аномалий кариотипа, возможность проведения обследования и ведения беременности в условиях ФГУ НЦ АГиП

В соответствии с критериями включения основную группу составили 52 женщины с наличием аутоантител к прогестерону Группу сравнения составили 37 женщин с привычным невынашиванием беременности в анамнезе и отсутствием аутосенсибилизации к прогестерону

Средний возраст пациенток, включенных в исследование, составил в I группе 31,1+4,3 лет, во II группе — 31,3+4,2 лет

Все женщины прошли тщательное клиническое и лабораторно-инструментальное обследование, включающие генетические,

иммунологические, вирусологические, гемостазиологические,

микробиологические и биохимические методы исследования

Определение антител к прогестерону проводили методом иммуноферментного анализа (ИФА), разработанным в лаборатории клинической иммунологии ФГУ «НЦ АГиП им В И Кулакова Росмедтехнологий «

На полистирольные микропланшеты (Nunc, Дания) иммобилизовали конъюгат прогестерон- lla-БСА (Michigan Diagnostics, LLC, США) из фосфатно-солевого буферного раствора (ФСБР) при 20±2°С в течение 18±2 часов Перед проведением ИФА образцы сывороток крови разводили 1 100 раствором для разведения (ФСБР, содержащий 0,5% желатина и 0,5% твина-20) и вносили по 100 мкп в лунки планшета с иммобилизированным на поверхности полистирола прогестероном Инкубировали на встряхивателе при 20±2°С в течение 60 минут, отмывали 4 раза ФСБР, содержащим 0,5% твина-20

Затем вносили мышиные моноклональные антитела против иммуноглобулинов М и G человека, конъюгированные с пероксидазой хрена (Sigma, США) После инкубации при 20±2°С в течение 60 минут лунки отмывали и добавляли по 100 мкл субстратно-хромогенного раствора, содержащего тетраметилбензидин и перекись водорода Планшеты инкубировали в течение 15-20 минут, ферментативную реакцию останавливали внесением в лунки по 100 мкл 0,5М H2SO4 При постановке исследования использовались положительный и отрицательный контроли Учет результатов анализа проводили инструментально путем измерения оптической плотности на фотометре «Multiskan» (Labsystem, Финляндия) при длине волны 450 нм

Результаты исследования оценивали полуколичественным способом Пограничное значение (cut-off) определяли как сумму среднего значения оптической плотности отрицательного контроля и трех среднеквадратичных отклонений Проба считалась слабоположительной при средней оптической плотности, превышающей cut-off до 1,5-2 раз, положительной — при превышении cut-off в 2 раза, резкоположительной — в 3 и более раз

Антитела к хорионическому гонадотропину человека и антифосфолипидные антитела (к кардиолипину, фосфатидилсерину, фосфатидилхолину, фосфатидилэтаноламину) (IgM, IgG) определялись по методикам иммуноферментного анализа, разработанным в лаборатории клинической иммунологии НЦ АГиП

Исследование клеточного звена иммунитета проводилось выделением лейкоцитов из периферической крови методом градиентного центрифугирования, производилась характеристика субпопуляционно! о состава лейкоцитов периферической крови методом проточной цитофлуометрии и определение иммуноглобулинов класса G, М, А методом радиальной иммунодиффузии по Манчини Для определения интерферонового статуса биологическим методом (Григорян С С, Ершова Ф И 1989) использовали препараты цельной крови

Ультразвуковое исследование, допплерометрия выполнялись с использованием трансабдоминальных и трансвагинальных мультичастотных датчиков с частотой 8-6-4 МГц

Статистическая обработка полученных данных выполнена на компьютере с помощью электронных таблиц «Microsoft Excel» и пакета прикладного программного обеспечения «Statistics for Windows», версия 7, StatSoft Inc (США)

Клиническая часть работы выполнена в отделении профилактики и лечения невынашивания беременности (руководитель — профессор В M Сидельникова), научно-поликлиническом отделении Центра (руководитель -профессор В H Прилепская) Родоразрешение больных проводилось в I-акушерском отделении Центра (руководитель — профессор Е А Чернуха)

Лабораторные методы исследования осуществлялись в следующих подразде тениях ФГУ «НЦ АГиП им В И Кулакова Росмедтехнологий» лаборатория клинической иммунологии (руководитель — академик РАМН, профессор Г Т Сухих), лаборатория функциональной диагностики (руководитель — профессор В H Демидов), лаборатория генетики (руководитель — профессор В А Бахарев), лаборатория микробиологии (руководитель -профессор А С Анкирская)

Результаты исследования и их обсуждение

В соответствии с поставленными задачами нами был проведен анализ анамнестических данных, результатов клинического, лабораторно-инструментально1 о обследования, течения и исходов беременностей у 89 женщин с привычным невынашиванием беременности

На основании проведенного сравнительного анализа анамнестических данных нами выявлено, что предшествующие искусственные и самопроизвольные репродуктивные потери, сопровождающиеся иммуногормональным стрессом, Moiyr способствовать синтезу аутоантител, что согласуется с результатами исследования A M Itsekson и соавт (2007)

источник