Меню Рубрики

Количественный анализ на цитомегаловирус у детей

Цитомегаловирусная инфекция (ЦМВИ) – это инфекционное заболевание, которое вызывает цитомегаловирус или вирус герпеса 5 типа. До 90% населения мира заражено возбудителем болезни и являются бессимптомными носителями. Опасность ЦМВИ представляет для здоровья людей с иммунодефицитными состояниями. Инфекция у беременной женщины может привести к внутриутробному заражению плода: мертворождаемости, пороком развития, глухоте, снижению остроты зрения, умственной отсталости. Анализ на цитомегаловирус позволяет выявить заболевание на ранних этапах развития и назначить лечебно-профилактические меры для предупреждения прогрессирования недуга.

Чаще всего заражение ЦМВИ происходит в детском возрасте, но заразиться могут и люди в зрелом возрасте. Пути инфицирования: воздушно-капельный, контактный, гемотрансфузионный, половой, внутриутробный, во время родов. Инкубационный период заболевания составляет 30-60 дней. В течение инкубационного периода вирус с током крови распространяется по организму, внедряется в клетки тканей внутренних органов, размножается и вызывает их гибель. Жизнедеятельность вирионов приводит к специфическим микроскопическим измененениям пораженных клеток – увеличение ядра, которое приобретает вид «глаза совы».

В первые дни после внедрения инфекции в организм, иммунная система вырабатывает антитела – иммуноглобулины класса М (IgM). Специфические IgM связываются с антигенами вирусов и обезвреживают их. Антитела присутствуют в крови в течение 1-1,5 месяцев и свидетельствуют об острой стадии болезни. На 10-14 день после инфицирования синтезируются иммуноглобулины класса G (IgG), которые сохраняются в периферической крови в течение всей жизни. Они обезвреживают вирусы и служат показателем иммунной памяти. Обнаружение в анализе IgG указывает на перенесенное заболевание и стойкий иммунитет к ЦМВИ.

Первичное инфицирование может протекать без клинических проявлений или маскируется под симптомы длительно протекающего (3-6 недель) ОРЗ. В тяжелых случаях при угнетении иммунитета развивается генерализованная форма болезни с поражением внутренних органов и нервной системы. После затихания острой фазы вирус остается в организме в дремлющем состоянии – носительство инфекции. Больной человек или носитель заразен для окружающих.

Несмотря на то, что цитомегаловирус после заражения остается в организме пожизненно, опасность для здоровья в большинстве случаев не представляет. Анализ на цитомегаловирус необходим людям из группы риска, которые подвержены агрессивному воздействию инфекции на здоровье. Активное размножение вирионов и поражение внутренних органов возникает при угнетении иммунной системы. Не менее опасно внутриутробное заражение плода, особенно в первом триместре беременности, когда происходит закладка органов и систем.

Группы риска, которым необходимо назначение анализа на цитомегаловирус:

  • женщины в период подготовки к зачатию ребенка;
  • беременные;
  • приобретенные и врожденные иммунодефициты, в том числе ВИЧ/СПИД;
  • прием иммуносупрессивной терапии аутоиммунных заболеваний, после трансплантации органов, в период химиотерапии и лучевой терапии злокачественных опухолей;
  • онкология;
  • новорожденные с внутриутробным заражением ЦМВИ;
  • дети, часто и длительно болеющие простудными заболеваниями и ОРВИ.

При низком уровне защитных сил организма вирус поражает внутренние органы и центральную нервную системы до появления клинических признаков болезни (в инкубационном периоде). Диагностика ЦМВИ при возникновении симптомов требует длительного лечения и сопряжена с развитием осложнений. Своевременное выявления инфекции в первые дни после заражения позволяет предупредить прогрессирование болезни и снизить риск нежелательных последствий.

Для выявления инфицирования применяют лабораторную диагностику, которая позволяет обнаружить специфические антитела в крови, генетический материал вируса в различных средах организма, характерные микроскопические изменения в клетках.

Наиболее часто применяемые анализы:

  • ИФА (иммуноферментный анализ);
  • ПЦР (полимеразная цепная реакция);
  • цитология;
  • культуральный метод.

Первичного обследования для обнаружения цитомегаловируса в крови включает ИФА. Остальные методы считают дополнительными для уточнения диагноза и правильной интерпретации анализа.

Серология позволяет обнаружить в крови специфические антитела к цитомегаловирусу – IgM и IgG. Для диагностики заболевания имеет значение следующие показатели:

  • присутствие в крови IgM, IgG;
  • нарастание тира антител в парных сыворотках через 2-3 недели;
  • авидность IgG.

Обнаружение в крови иммуноглобулинов М и G дает информацию о стадии болезни и приобретенном иммунитете. Нарастание титра антител позволяет подтвердить факт первичного заражения или рецидива инфекции.

Серологический анализ крови позволяет обнаружить в крови специфические антитела к цитомегаловирусу – IgM и IgG

Авидность IgG – это способность антител связываться с антигеном (цитомегаловирусом). В начале заболевания авидность низкая (менее 40%) или средняя (40-60%). По мере стихания острой фазы ЦМВИ и приобретения иммунитета, авидность становится высокой (более 60%). Показатель авидности необходим для определения риска первичного заражения матери для внутриутробного инфицирования плода. Высокий показатель свидетельствует в пользу инфицирования более, чем 20 недель назад, что значительно снижает вероятность поражения организма плода.

Расшифровка анализа приведена в таблице.

Показатели IgM Показатели IgG Авидность IgG Интерпретация результатов анализа
отрицательный отрицательный не проводят определение Серонегативный результат. Заражение цитомегаловирусом не было. Специфический иммунитет не выработан. Беременные женщины и больные с иммунодефицитами находятся в группе риска по заражению. Необходимы профилактические меры по предупреждению инфицирования в период вынашивания плода
положительный, нарастание титра антител при повторном исследовании отрицательный, либо положительный, с нарастанием антител при повторном исследовании низкий показатель (менее 40%) первичное инфицирование цитомегаловирусом, во время беременности высокий риск внутриутробного заражения плода
отрицательный, либо положительный с низким титром антител положительный, с постепенным снижением уровня антител до минимального постоянного уровня, который сохраняется в течение жизни средний показатель (40-60%) стадия выздоровления при первичной инфекции или рецидиве болезни, риск для внутриутробного заражения плода сохраняется
отрицательный положительный с постоянным уровнем титра антител высокий уровень (более 60%) латентная стадия течения инфекции (носительство), нет риска для здоровья плода
отрицательный, реже положительный положительный низкий уровень рецидив заболевания, риск для развития плода низкий

Анализ крови на цитомегаловирус методом ИФА назначают женщинам в период планирования зачатия. Если женщина не обследовалась до беременности, то анализ необходимо пройти в первые 4-8 недель после зачатия. Обычно диагностику назначает гинеколог при постановке беременной на учет в женской консультации. Несвоевременное обследование повышает риск внутриутробного поражения плода.

Анализ на цитомегаловирус проводят пациентам пред трансплантацией органов, назначением химиотерапии, лучевой терапии, цитостатиков, глюкокортикоидов. Больные иммунодефицитами регулярно проходят обследование для профилактики прогрессирования болезни. Своевременная диагностика позволяет предупредить развитие осложнений.

Методика ПЦР помогает обнаружить ДНК вируса в крови, слюне, мокроте, моче, соскобах из влагалища и шейки матки, смывов из трахее и бронхов. Выявление генетического материала возбудителя ЦМВИ в крови указывает на активную фазу болезни – первичном заражении или рецидиве. Присутствие ДНК вируса в других средах считают вариантом носительства и хронического течения заболевания. Если ДНК не обнаруживают в организме – это негативный результат диагностики, который свидетельствует в пользу отсутствия заражения.

Расшифровку анализов на цитомегаловирус методикой ПЦР проводят с учетом серологической диагностики. Обследование так же проводят беременным женщинам при высоком риске внутриутробного заражения плода. Для этого при помощи амниоцентеза делают забор околоплодных вод и выявляют генетический материал возбудителя. Обнаружение ДНК подтверждает заражение ребенка от матери.

Цитологический метод исследования назначают при сомнительных результатах ИФА и ПЦР. Для получения клеток делают биопсию пораженного органа, центрифугируют слюну, мокроту, кровь, делают соскобы из глотки, уретры, цервикального канала. При микроскопии в пользу ЦМВИ свидетельствует увеличение ядра и форма клетки в виде «глаза совы».

Посев соскобов и биологических жидкостей на питательные для возбудителя среды называют культуральным методом. Диагностику применяют для подтверждения диагноза, после проведения ИФА и ПЦР. Недостатком исследования является получение результат через 7-10 дней – минимальный срок для роста колоний вируса на питательных средах.

Специальной подготовки к обследованию не требуется. Для анализа делают забор венозной крови натощак – 4-6 часов воздержания от приема пищи. Накануне диагностики не рекомендуют физические и стрессовые нагрузки, употребление алкогольных напитков и жирной пищи. За час до сбора биоматериала следует воздержаться от курения.

Своевременное лабораторное обследование при ЦМВИ позволяет провести раннюю диагностику, снизить риск внутриутробного заражения плода, прогрессирования заболевания, развития тяжелых осложнений. Метод обнаружения цитомегаловируса в организме выбирает лечащий врач согласно тяжести состояния больного и наличия сопутствующих заболеваний. Группам риска необходимо наблюдаться у специалиста и регулярно сдавать анализы для контроля активности инфекции. Женщинам рекомендуют проходить диагностику до зачатия ребенка.

источник

Анализ на цитомегаловирус входит в обязательный перечень исследований при обследовании будущих матерей, поскольку заражение цитомегаловирусной инфекцией в первые 20 недель беременности чревато гибелью плода и выкидышем. Но и во второй половине беременности заражение (или реактивация хронической цитомегаловирусной инфекции) может натворить бед. Поэтому во избежание умственной отсталости, тугоухости, слепоты будущего ребенка анализ на цитомегаловирус для своевременного распознания и лечения коварной инфекции жизненно необходим.

Цитомегаловирус (ЦМВ) — это вирус герпеса 5 типа, заразиться которым можно при контакте с биологическими жидкостями (слюна, моча, слезная жидкость, кровь, сперма, шеечная и вагинальная слизь) больного человека. Кроме того, возможна внутриутробная передача инфекции плоду от первично-инфицированной матери, а также заражение новорожденного во время родов при прохождении по родовым каналам женщины с активной цитомегаловирусной инфекцией (ЦМВИ).

После заражения развивается состояние, которое чаще всего остается незамеченным для человека, так как нередко маскируется под ОРЗ (острое респираторное заболевание). После перенесенного заболевания цитомегаловирус в большинстве случаев пожизненно остается в организме человека: удалить его с помощью существующих на сегодняшний день препаратов нельзя.

Первичное заражение цитомегаловирусом опасно во время беременности. Если заражение цитомегаловирусом (ЦМВ) происходит в первые 20 недель беременности, высока вероятность выкидыша, мертворождения или различных врожденных пороков.

Заражение в более поздние сроки беременности или реактивация хронической цитомегаловирусной инфекции (ЦМВИ) вызывает внутриутробное поражение различных органов и систем у плода (дети отстают в развитии, в том числе умственном, имеют тугоухость, слепоту и т.д.).

  1. Цитологическое исследование осадков слюны и мочи.
  2. Получение результатов полимеразно-цепной реакции (ПЦР).
  3. Серологические исследования сыворотки крови

При данном исследовании материал (слюна, моча) исследуется под микроскопом с целью обнаружения характерных для цитомегаловирусной инфекции (ЦМВИ) гигантских клеток.

Получение результатов полимеразно-цепной реакции (ПЦР) основано на определении ДНК (дезоксирибонуклеиновой кислоты), содержащейся внутри вируса и являющейся носителем его наследственной информации, в крови или в клетках слизистых оболочек. Для исследования последних используются соскобы, слюна, мокрота, моча.

Данное исследование ставит целью определение в крови специфических для цитомегаловируса антител. В настоящее время наиболее точным и чувствительным методом определения антител является иммуноферментный анализ (ИФА), обеспечивающий определение как различных видов иммуноглобулинов (обозначаемых как IgG, IgM), так и авидности иммуноглобулина G (IgG) к цитомегаловирусу (ЦМВ).

Иммуноглобулины (или антитела) — это белки, которые вырабатываются клетками крови. При попадании в человеческий организм возбудителя той или иной инфекции иммуноглобулины с ним связываются (образуют комплекс) и через некоторое время нейтрализуют. Сколько есть разных микробов, вирусов и токсинов, столько и существует разных иммуноглобулинов. Вместе с кровью они могут проникать в любые, даже самые далекие уголки нашего организма и везде настигать агрессоров .

Иммуноглобулины М против цитомегаловируса образуются примерно через 4-7 недель после заражения и находятся в крови на протяжении 16-20 недель. Обнаружение их в крови в эти сроки может быть свидетельством первичной цитомегаловирусной инфекции. По мере развития иммунного ответа уровень IgM снижается, но при этом происходит значительный рост количества иммуноглобулинов G (IgG).

В дальнейшем количество иммуноглобулинов G (IgG), достигнув максимума, снижается, но, в отличие от IgM, антитела класса IgG к структурным белкам цитомегаловируса (ЦМВ) продолжают оставаться в крови на протяжении всей жизни.

Реактивация инфекции приводит к увеличению количества IgG. При этом также имеет место повышение количества IgM, но оно не такое значительное, как при первичном инфицировании.

Авидность (от avidity — жадный) — это оценка способности антител IgG связываться с цитомегаловирусом (ЦМВ) для дальнейшей нейтрализации последнего. В самом начале заболевания IgG довольно слабо связываются с вирусом, то есть обладают низкой авидностью. По мере развития иммунного ответа авидность антител IgG увеличивается.

Анализ на цитомегаловирус: как расшифровать результаты иммуноферментного анализа (ИФА), а также анализа на определение полимеразно-цепной реакции (ПЦР) и авидности иммуноглобулина G (IgG) к цитомегаловирусу (ЦМВ)?

При расшифровке иммуноферментного анализа (ИФА) необходимо учитывать, что каждая лаборатория, которая проводит такой анализ, имеет свои показатели нормы (т.н. референтные значения). Они должны быть указаны на бланке. При уровне антител ниже порогового значения говорят об отрицательном результате, выше порогового значения – положительном.

Что касается исследования полимеразно-цепной реакции (ПЦР), то в случае, когда вирусная ДНК обнаружена (т.е. вирус в организме есть) говорят о положительном результате, если же ДНК не обнаружена (вирус отсутствует) – отрицательном.

Читайте также:  Брали бак анализы у детей

Анализ на определение авидности иммуноглобулинов G (IgG) к цитомегаловирусу (ЦМВ) интерпретируют следующим образом:

Результаты исследований IgG
Индекс авидности (%)

Узнайте, как расшифровать результаты анализа крови на цитомегаловирус. Пути передачи герпес-вируса, к какому врачу обратиться за диагностикой.

Цитомегаловирус CMV — это ДНК-вирус герпеса пятого типа, относящийся к TORCH-инфекциям. В крови на CMV вырабатываются антитела, или иммуноглобулины: IgG и IgM.

IgM появляются через одну-две недели после заражения и после каждого размножения оставшегося CMV в организме. Через некоторое время они навсегда исчезают.

IgM высокий — результат положительный, обозначается POZ.

*заражение произошло за последний год;

*заражение давнее, вирус был подавлен, но снова размножается.

2. IgM низкий — отрицательный результат — NEG.

*в последний год заражения не было;

*на имеющийся вирус сформированы антитела к цитомегаловирусу, и размножения нет.

Если пациент имеет иные TORCH-инфекции, то анализ IgM может быть положительным. IgG появляются через месяц после заражения и остаются на всю жизнь.

Уровень IgG указывает на время после заражения CMV и продолжает ли он размножение в организме.

  1. Если IgG повышен — контакт с вирусом был ранее, есть иммунитет и носительство CMV.
  2. Если IgG низкий — контакта с CMV не было.

Возможен повторный анализ, и если антитела увеличены более чем вчетверо, цитомегаловирус активно размножается.

Лаборатории используют разные методики определения антител. В бланке анализа указан показатель нормы, который необходим при расшифровке результата. Показатели анализа на цитомегаловирус могут обозначаться:

Анализы на цитомегаловирус назначают терапевт, педиатр, гинеколог: планирующим беременность, беременным, новорожденным, детям с подозрением на инфекцию, ВИЧ-инфицированным, готовящимся к трансплантации и прочее.

Исследуемый материал — сыворотка крови. Кровь берут из вены, утром натощак, исключая за сутки прием жирного.

Цитомегаловирус (CMV) – вирус рода Herpesvirus. Как и все вирусы герпеса, цитомегаловирус может в течение долгого периода времени существовать в организме человека в латентной форме. После заражения данный вирус остается в человеческом организме практически пожизненно. При снижении иммунитета вирус активизируется, вызывая тяжелые поражения многих органов и систем организма. Особенно опасен цитомегаловирус для новорожденных, поэтому беременные женщины сдают анализ на цитомегаловирус. Что же собой представляет данное заболевание и почему так важно сдавать анализ крови на цитомегаловирус?

Чаще всего цитомегаловирус передается следующими способами:

  • через слюну при поцелуе;
  • воздушно-капельным путем;
  • половым путем;
  • при переливании инфицированной крови;
  • от женщины к ребенку при беременности, родах, грудном вскармливании.

Инкубационный период заболевания составляет 20–60 суток. Продолжительность острой фазы болезни – 2–6 недель. Для этого периода характерно появление у больного общей слабости, озноба, интоксикации организма, повышения температуры тела, головной и мышечной боли, бронхита.

Во время обострения данного инфекционного заболевания могут развиваться комплексные патологии внутренних систем и органов. В некоторых случаях возникает пневмония, ринит, ларингит, гепатит, урогенитальные патологии. После окончания острой формы цитомегаловирус переходит в скрытую форму.

Более выражены симптомы заболевания у детей 3–5 лет, беременных женщин, людей, страдающих приобретенными или врожденными иммунодефицитами. Люди, имеющие высокий иммунитет, переносят острую форму заболевания без выраженной симптоматики. Поэтому так важно периодически сдавать анализ на цитомегаловирус.

При снижении иммунитета возможны следующие проявления цитомегаловирусной инфекции:

1. Появляется острая респираторная вирусная инфекция (ОРВИ), которая имеет ярко выраженные симптомы – повышенную утомляемость, недомогание, слабость, насморк, головные боли, повышение температуры. Часто данные признаки сопровождаются воспалением миндалин, слюнных желез.

2. Генерализованная форма течения цитомегаловируса. Инфекция поражает внутренние органы человека. Воспалительный процесс развивается в печеночном эпителии, селезенке, поджелудочной железе, почках, надпочечниках. Нередко у больного появляется бронхит, пневмония, значительно ослабляется иммунная система организма.

3. Патологии органов мочеполовой системы. У больного появляются симптомы систематического неспецифического воспаления мочеполовых органов, которые трудно поддаются терапии обычными антибактериальными препаратами.

Людям, находящимся в группе риска развития данного заболевания, следует регулярно сдавать анализ крови на цитомегаловирус, чтобы при необходимости своевременно начать лечение. Это, прежде всего, беременные женщины, больные, страдающие почечной недостаточностью, онкологическими заболеваниями, ВИЧ-инфекцией, пациенты, перенесшие пересадку органов.

Показаниями к назначению анализов крови на цитомегаловирус, исследования мочи, мазка, мокроты являются следующие заболевания и состояния:

  • подготовка и течение беременности;
  • фетоплацентарная недостаточность;
  • признаки внутриутробного инфицирования плода;
  • невынашивание беременности;
  • неопластические болезни;
  • иммуносупрессия при ВИЧ-инфекции;
  • прием цитостатических (противоопухолевых) средств;
  • лихорадка неизвестной природы;
  • нестандартное развитие пневмонии, в том числе у детей.

Основными методами лабораторных исследований на цитомегаловирус являются:

В результате анализа на цитомегаловирус по цитологическому методу в биологических средах человека под микроскопом выявляют клетки вируса. Данные клетки имеют большие размеры, внутриядерные включения. Преимущества цитологического метода – простота, быстрое получение результатов. Недостатком является низкая информативность, составляющая всего лишь 50%.

Вирусологический метод является одним из наиболее точных исследований. Он заключается в том, что образец материала (кровь, сперма, слюна, выделения шейки матки, околоплодные воды) помещается в питательную среду, которая благоприятна для роста данных микроорганизмов. В течение некоторого времени (2–7 суток) на питательной среде вырастают колонии микроорганизмов, которые затем идентифицируются. Недостаток вирусологического метода – результаты анализа на цитомегаловирус приходится ждать достаточно долгое время.

Иммунологический метод заключается в проведении иммуноферментного анализа (ИФА) и является основным методом анализа на определение цитомегаловируса.

Антитела (иммуноглобулины) к цитомегаловирусу вырабатываются иммунной системой организма сразу после попадания в него вируса. Организм человека вырабатывает два класса иммуноглобулинов – IgG и IgM. Антитела IgM выявляются при текущей первичной или рецидивирующей инфекции. Антитела IgG указывают либо на латентное течение заболевания, либо на первичную инфекцию или ее обострение.

В расшифровке анализа на цитомегаловирус обычно указывают титр иммуноглобулинов класса IgG. Но антитела IgG могут определяться как при течении заболевания, так и в случае ранее перенесенной инфекции. Поэтому обычно анализ повторяют.

Об активации цитомегаловируса свидетельствует повышение титра иммуноглобулинов IgG в четыре и больше раз. Для более точной диагностики дополнительно проводят анализ на определение в крови антител класса IgM.

Приведем расшифровку анализа на цитомегаловирус по иммуноферментному методу.

В данной расшифровке IgG- и IgM- означают отсутствие в крови антител, ІgG+ и IgM+ –присутствие в крови антител.

1. IgG-, IgM-. Иммунитет к вирусу отсутствует, есть риск первичного инфицирования.

2. IgM-, IgG+. Существует иммунитет к вирусу, риск первичного заражения отсутствует. Риск обострения зависит от иммунной системы.

3. IgM+, IgG-. Первичное заражение, которое требует терапии. При планировании беременности нужно отложить зачатие до формирования иммунитета.

4. IgG+, IgM+. Вторичное обострение инфекции, при котором необходимо лечение.

Молекулярно-биологический метод представляет собой ПЦР-диагностику (полимерная цепная реакция) цитомегаловируса. Он основан на определении ДНК микроорганизма возбудителя. Возбудитель данной инфекции относится к ДНК-содержащим вирусам. Поэтому результаты анализа на цитомегаловирус по этому методу достаточно точные. Кроме того, обычно результаты исследования готовы через 1–2 суток. Недостатком данного метода является то, что с его помощью нельзя определить стадию болезни и состояние иммунитета пациента.

Расшифровку анализа на цитомегаловирус должен делать лечащий врач. При необходимости для уточнения диагноза он назначает дополнительные исследования.

источник

Для здорового человека цитомегаловирус не слишком опасен, но при определенных обстоятельствах он способен привести к серьезным осложнениям. Сдача анализа на цитомегаловирус особенно актуальна для женщин, вынашивающих ребенка и планирующих беременность, для детей, только появившихся на свет, и тех, кто имеет врожденный или приобретенный иммунодефицит.

Среди анализов на цитомегаловирус выделяют следующие методы: иммуноферментный анализ, полимеразная цепная реакция, цистоскопия мочи, культуральный метод (бакпосев).

С помощью лабораторных анализов можно узнать:

  • заражен человек или нет;
  • сколько времени вирус обитает в организме;
  • на каком этапе находится течение инфекции — активный или латентный (спящий) период.

У взрослых людей возбудить может передаваться при половом акте, у новорожденных в процессе родовой деятельности матери либо при кормлении грудью, цитомегаловирус у ребенка постарше проявляется после общения с зараженными сверстниками, проникая в организм со слюной.

Учитывая все выше сказанное, можно выделить определенные категории среди населения, которым анализ на цитомегаловирус показан в первую очередь:

  • Женщинам, вынашивающим ребенка и тем представительницам слабого пола, которые проходят предгравидарную подготовку (комплекс мероприятий, направленных на полноценное зачатие, период беременности и появление на свет здорового младенца).
  • Новорожденным младенцам.
  • Детям, у которых часто наблюдается ОРВИ.
  • Пациентам, у которых присутствует иммунодефицит как врожденный, так и приобретенный и ВИЧ в том числе.
  • Пациентам всех возрастов с наличием злокачественных новообразований.
  • Пациентам, принимающим цитостатики.
  • Людям с ярко выраженными клиническими симптомами цитомегаловируса.

Женщинам, планирующим зачатие либо уже тем, которые становятся на учет на ранних этапах беременности, анализ на цитомегаловирус делается сразу при посещении медучреждения. При этом необходимо проведение анализа на антитела к цитомегаловирусу, который помогает выявить их количество и определить, наблюдался ли у женщины этот вирус ранее, и имеется ли иммунитет к возбудителю.

У младенцев, только появившихся на свет, анализ крови на цитомегаловирус либо исследование мочи проводят в случае, если при наблюдении за беременной женщиной есть подозрение на возможность врожденной инфекции либо приобретенной при родах патологии. Диагностику проводят в первые 24-48 часов после появления ребенка на свет.

Анализ на ЦМВ необходим и при подготовке пациента к проведению иммуносупрессии при трансплантации органов либо тканей, при этом исследование назначают до начала процедуры.

Диагностировать наличие патологии поможет проведение следующих исследований:

  • иммуноферментный анализ (ИФА). Является наиболее точным видом анализа на цитомегаловирус.
  • полимеразная цепная реакция (ПЦР), которая дает возможность обнаружить ДНК вируса, определить время нахождения вируса в организме, узнать активен ли вирус в данный момент или нет;
  • непрямая иммунофлюоренция (РИФ). С помощью данного метода можно установить срок присутствия вируса в организме;
  • культуральный метод, при котором выращивают вирус на питательных средах. Редко применяется из-за длительности анализа.

Для определения наличия патологии необходима проверка крови на антитела, при этом видов анализа может быть несколько, но самым надежным считается проведение иммуноферментного исследования.

ИФА позволяет определить количество и свойства специфичных Anti-CMV антител. К тому же этот метод относится к самым быстрым, точным и наиболее доступным.

В человеческом организме присутствуют различные типы иммуноглобулинов, однако если рассматривать цитомегаловирус, действенными являются IgM, IgG. Первый тип вырабатывается на начальном этапе инфицирования, обеспечивая подавление первичного заражения. Второй тип генерируется позднее и призван защищать организм от цитомегаловируса в течение всей последующей жизни человека.

Важный факт. Первые IgG, сформировавшиеся в качестве ответа на инфицирование, связаны с вирусными частицами весьма слабо, в этом случае говорят об их низкой авидности. Спустя примерно 14 суток начинается производство высоко авидных IgG, которые отличаются достаточной эффективностью и способны легко распознать и произвести связывание вирусных частиц. Что такое авидность? Определение авидности необходимо для установления давности инфицирования. При этом понятие «норма» для IgG как таковое отсутствует – анализ строится на обнаружении антител, а не их количества.

Теперь о том, какие свойства имеют серологические маркеры IgM и IgG, рассмотрим их наряду с авидностью IgG более подробно, для чего имеется сводная таблица:

Иммуноглобулины Описание
IgM Формируются первыми спустя 5 или 7 суток как ответ на реактивацию или внедрение возбудителя. Дают возможность определить первичную инфекцию в острой стадии, либо обострение хронической патологии. Anti-CMV IgM способны демонстрировать ложноположительный результат на фоне реакции с иными герпес-вирусами. В случае первичной инфекции антитела могут выявляться на протяжении примерно трех месяцев. Если это реактивация, срок составляет от двух-трех суток до недель. У новорожденных на фоне особенностей иммунной системы выработка этих антител может отсутствовать даже в случае заражения, потому может потребоваться дополнительный анализ ПЦР, исследующий разные биожидкости.
IgG Anti-CMV IgG формируются через две или три недели после заражения, сохраняясь после этого на протяжении всей жизни, при этом их уровень не позволяет определить активность процесса. Увеличение количества этих антител указывает на активность болезнетворных процессов и требует выработки тактики ведения. Тестирование проводят при наличии положительного IgM, дабы исключить возможность ложноположительного итога. Также тест требуется проводить при отрицательном IgM, чтобы иметь возможность подтвердить отсутствие реактивации заражения.
Авидность IgG Позволяет определить давность заражения инфекцией – после первичного инфицирования низко авидные антитела наблюдаются от трех до четырех месяцев, после чего их сменяют высоко авидные антитела. При наличии низко авидных IgG говорят о первичном заражении, которое длится на протяжении трех-четырех последних месяцев. При наличии высоко авидных IgG утверждают, что заражение имело место за три-четыре месяца до проведения обследования. Этот показатель особо актуален при проведении обследования беременных, если до зачатия его наличие не проверялось.
Читайте также:  Бланк анализа на энтеробиоз у детей

При назначении полимеразной цепной реакции врач хочет узнать присутствует возбудитель в крови или нет. При положительном анализе можно еще установить и тип возбудителя.

В результатах данного метода может быть только 2 результата:

  • Обнаружен — это означает положительный результат. Заболевание при этом может находиться как в острой, так и скрытой фазе.
  • Не обнаружен. Такой результат не всегда свидетельствует об отсутствии цитомегаловируса в организме. Для подтверждения лучше использовать метод ИФА.

Что касается других диагностических методов, то их относят к прямым: они позволяют определить наличие возбудителя в исследуемых материалах, а не антитела к нему. При этом подбор биологического материала проводится с учетом развития этапов патологического процесса, его клинических проявлений и целей проведения лабораторных исследований. Использоваться может слюна, кровь, соскоб со слизистой оболочки половых органов.

Расшифровка анализа крови на цитомегаловирус предусматривает подсчет титра антител IgG. Как мы упоминали выше, норма для этого показателя не предусмотрена. Следует учитывать, что IgG генерируется не только при заражении, но и в периоды обострения, также он остается в организме после перенесенной патологии. По этим причинам результаты анализа на цитомегаловирус могут вызывать сомнения, и исследования биоматериалов часто проводятся повторно.

Рассмотрим комбинации антител при расшифровке анализа.

Результат Значение
IgG +; IgM- У пациента наличествует иммунитет, первичное заражение невозможно. Не исключено обострение на фоне снижения иммунитета
IgM-; IgG- Иммунитет к цитомегаловирусу отсутствует, соответственно существует риск первичного заражения
IgM+; IgG+ Цитомегаловирус – анализ подтверждает это – присутствует в организме, при этом имеет место обострение
IgG-; IgM+ Наблюдается первичное заражение, требующее немедленного лечения.

Отдельного рассмотрения требуют результаты анализов женщин, вынашивающих ребенка. Поговорим о расшифровке показателей при наличии беременности, в этом случае большое значение имеет срок, на котором производился отбор биоматериала:

  • Даже при получении благоприятных результатов позднее четвертой недели вынашивания ребенка потребуется дополнительное обследование, поскольку данные нельзя считать абсолютно однозначными. Инфицирование могло затронуть организм как 12 месяцев назад, так в начале беременности, что чревато поражениями зародыша.
  • Следует учитывать, что чрезмерно повышенный титр IgG в большей части случаев говорит о настойчивой борьбе организма с инфекцией, не являясь подтверждением опасности.
  • В тех случаях, когда у вынашивающей ребенка женщины обнаруживают в крови IgM наряду с низко авидными IgG следует разработать специальное лечение и впоследствии внимательно наблюдать, как развивается плод.

При отсутствии специфических к вирусу антител беременной женщине необходимо повысить осторожность и в течение месяцев вынашивания ребенка еще не один раз проверять наличие или отсутствие цитомегаловируса.

Теперь о том, как сдавать анализ методом ИФА. Исследование на цитомегаловирус ничем не отличается от обычных анализов крови, отбираемых из вены. В некоторых случаях требуется исследование мочи, слюны либо околоплодных вод. Ни один из анализов не требует какой-либо специфической подготовки, разве что кровь вполне ожидаемо сдается натощак и в течении нескольких дней до анализа нужно отказаться от жирных блюд и спиртных напитков. За пару часов до процедуры не рекомендуется курить. После того, как анализ на цитомегаловирус сдан, а результаты получены, их расшифровывают квалифицированные специалисты.

При использовании метода ПЦР предусмотрены следующие рекомендации:

  • необходимо исключить половые контакты в течение 3 суток до сдачи анализа;
  • нужно прекратить прием антибактериальных препаратов и средств местной гигиены;
  • женщинам лучше не проходить процедуру в период менструаций;
  • желательно не посещать туалет в течение 3-х часов до взятия анализа.

Для подтверждения диагноза лучше сдать тесты в нескольких учреждениях.

источник

Цитомегаловирус (CMV) – вирус рода Herpesvirus. Как и все вирусы герпеса, цитомегаловирус может в течение долгого периода времени существовать в организме человека в латентной форме. После заражения данный вирус остается в человеческом организме практически пожизненно. При снижении иммунитета вирус активизируется, вызывая тяжелые поражения многих органов и систем организма. Особенно опасен цитомегаловирус для новорожденных, поэтому беременные женщины сдают анализ на цитомегаловирус. Что же собой представляет данное заболевание и почему так важно сдавать анализ крови на цитомегаловирус?

Чаще всего цитомегаловирус передается следующими способами:

  • через слюну при поцелуе;
  • воздушно-капельным путем;
  • половым путем;
  • при переливании инфицированной крови;
  • от женщины к ребенку при беременности, родах, грудном вскармливании.

Инкубационный период заболевания составляет 20–60 суток. Продолжительность острой фазы болезни – 2–6 недель. Для этого периода характерно появление у больного общей слабости, озноба, интоксикации организма, повышения температуры тела, головной и мышечной боли, бронхита.

Во время обострения данного инфекционного заболевания могут развиваться комплексные патологии внутренних систем и органов. В некоторых случаях возникает пневмония, ринит, ларингит, гепатит, урогенитальные патологии. После окончания острой формы цитомегаловирус переходит в скрытую форму.

Более выражены симптомы заболевания у детей 3–5 лет, беременных женщин, людей, страдающих приобретенными или врожденными иммунодефицитами. Люди, имеющие высокий иммунитет, переносят острую форму заболевания без выраженной симптоматики. Поэтому так важно периодически сдавать анализ на цитомегаловирус.

При снижении иммунитета возможны следующие проявления цитомегаловирусной инфекции:

  1. Появляется острая респираторная вирусная инфекция (ОРВИ), которая имеет ярко выраженные симптомы – повышенную утомляемость, недомогание, слабость, насморк, головные боли, повышение температуры. Часто данные признаки сопровождаются воспалением миндалин, слюнных желез.
  2. Генерализованная форма течения цитомегаловируса. Инфекция поражает внутренние органы человека. Воспалительный процесс развивается в печеночном эпителии, селезенке, поджелудочной железе, почках, надпочечниках. Нередко у больного появляется бронхит, пневмония, значительно ослабляется иммунная система организма.
  3. Патологии органов мочеполовой системы. У больного появляются симптомы систематического неспецифического воспаления мочеполовых органов, которые трудно поддаются терапии обычными антибактериальными препаратами.

Людям, находящимся в группе риска развития данного заболевания, следует регулярно сдавать анализ крови на цитомегаловирус, чтобы при необходимости своевременно начать лечение. Это, прежде всего, беременные женщины, больные, страдающие почечной недостаточностью, онкологическими заболеваниями, ВИЧ-инфекцией, пациенты, перенесшие пересадку органов.

Показаниями к назначению анализов крови на цитомегаловирус, исследования мочи, мазка, мокроты являются следующие заболевания и состояния:

  • подготовка и течение беременности;
  • фетоплацентарная недостаточность;
  • признаки внутриутробного инфицирования плода;
  • невынашивание беременности;
  • неопластические болезни;
  • иммуносупрессия при ВИЧ-инфекции;
  • прием цитостатических (противоопухолевых) средств;
  • лихорадка неизвестной природы;
  • нестандартное развитие пневмонии, в том числе у детей.

В результате анализа по цитологическому методу в биологических средах человека под микроскопом выявляют клетки вируса. Данные клетки имеют большие размеры, внутриядерные включения. Преимущества цитологического метода – простота, быстрое получение результатов. Недостатком является низкая информативность, составляющая всего лишь 50%.

Вирусологический метод является одним из наиболее точных исследований. Он заключается в том, что образец материала (кровь, сперма, слюна, выделения шейки матки, околоплодные воды) помещается в питательную среду, которая благоприятна для роста данных микроорганизмов. В течение некоторого времени (2–7 суток) на питательной среде вырастают колонии микроорганизмов, которые затем идентифицируются. Недостаток вирусологического метода – результаты анализа на цитомегаловирус приходится ждать достаточно долгое время.

Иммунологический метод заключается в проведении иммуноферментного анализа (ИФА) и является основным методом анализа на определение цитомегаловируса.

Антитела (иммуноглобулины) к цитомегаловирусу вырабатываются иммунной системой организма сразу после попадания в него вируса. Организм человека вырабатывает два класса иммуноглобулинов – IgG и IgM. Антитела IgM выявляются при текущей первичной или рецидивирующей инфекции. Антитела IgG указывают либо на латентное течение заболевания, либо на первичную инфекцию или ее обострение.

В расшифровке анализа на цитомегаловирус обычно указывают титр иммуноглобулинов класса IgG. Но антитела IgG могут определяться как при течении заболевания, так и в случае ранее перенесенной инфекции. Поэтому обычно анализ повторяют.

Об активации цитомегаловируса свидетельствует повышение титра иммуноглобулинов IgG в четыре и больше раз. Для более точной диагностики дополнительно проводят анализ на определение в крови антител класса IgM.

Приведем расшифровку анализа на цитомегаловирус по иммуноферментному методу.

В данной расшифровке IgG- и IgM- означают отсутствие в крови антител, ІgG+ и IgM+ –присутствие в крови антител.

  1. IgG-, IgM-. Иммунитет к вирусу отсутствует, есть риск первичного инфицирования.
  2. IgM-, IgG+. Существует иммунитет к вирусу, риск первичного заражения отсутствует. Риск обострения зависит от иммунной системы.
  3. IgM+, IgG-. Первичное заражение, которое требует терапии. При планировании беременности нужно отложить зачатие до формирования иммунитета.
  4. IgG+, IgM+. Вторичное обострение инфекции, при котором необходимо лечение.

Молекулярно-биологический метод представляет собой ПЦР-диагностику (полимерная цепная реакция) цитомегаловируса. Он основан на определении ДНК микроорганизма возбудителя. Возбудитель данной инфекции относится к ДНК-содержащим вирусам. Поэтому результаты анализа на цитомегаловирус по этому методу достаточно точные. Кроме того, обычно результаты исследования готовы через 1–2 суток. Недостатком данного метода является то, что с его помощью нельзя определить стадию болезни и состояние иммунитета пациента.

Расшифровку анализа на цитомегаловирус должен делать лечащий врач. При необходимости для уточнения диагноза он назначает дополнительные исследования.

источник

Цитомегаловирус (ЦМВ) или вирус герпеса 5 типа, – ДНК-содержащий вирус Cytomegalovirus hominis семейства Herpesviridae подсемейства Betaherpesvirinae. Цитомегаловирусная инфекция (ЦМВИ) человека – хроническая антропонозная болезнь вирусной этиологии, характеризующаяся многообразием форм патологического процесса и клинических проявлений – от латентной инфекции до клинически выраженного генерализованного заболевания. Заболевание ЦМВИ классифицируют в зависимости от сроков и механизмов заражения (врожденная и приобретенная инфекция, пренатальная, интранатальная и постнатальная), степени активности вируса (латентная, персистирующая и реактивированная инфекция), первичного или повторного заражения (острая инфекция, реактивация вируса и реинфекция).

Отличительными особенностями инфекции являются возможность ЦМВ персистировать во многих органах и способность его к инфицированию практически всех клеток организма человека, что предопределяет многообразие клинических проявлений, как при врожденной, так и приобретенной формах инфекции. ЦМВ рассматривается в качестве основного возбудителя внутриутробной инфекции, имеющей самые различные исходы: от инфицирования без реализации инфекции, формирования пороков развития и заболевания новорожденных до гибели плода и мертворождения.

ЦМВИ – типичный антропоноз. Источником инфекции является больной человек либо вирусоноситель. Пути передачи: вертикальный, половой, воздушнокапельный, фекально-оральный, артифициальный (парентеральный). Факторами передачи являются кровь, цервикальный и вагинальный секреты, сперма, женское молоко. Вирус выделяется с мочой, фекалиями, слюной, мокротой, в меньшей степени – со слезной жидкостью. Заражение может происходить также при переливании крови, трансплантации органов и тканей. Цитомегалия — широко распространенная инфекция, среди взрослого населения РФ у 73–98% обнаружены АТ-ЦМВ.

ЦМВИ относится к оппортунистическим инфекциям, особую опасность представляет для больных с иммунодефицитами различной природы. Иммуносупрессия приводит к реактивации латентной инфекции и развитию манифестных вариантов болезни с поражением различных органов и систем, способных привести к летальному исходу. Манифестная ЦМВИ занимает одно из первых мест в структуре оппортунистических заболеваний у ВИЧ-инфицированных пациентов. Данная патология встречается у 20–40% больных СПИДом, не получающих антиретровирусной терапии. Клинически выраженная ЦМВИ — одно из серьезных инфекционных осложнений при трансплантации органов, инфекция обостряет процессы, приводящие к реакции отторжения трансплантата.

При персистенции ЦМВ в организме человека выделяют две стадии, которые сменяют друг друга – продуктивную (с репликацией вируса) и латентную. Выход вируса из латентной стадии означает реактивацию, что может быть предопределено снижением иммунорезистентности либо появлением иных факторов, способствующих его репродукции. Выявление прямых маркеров репликации вируса (виремия, ДНК или АГ) свидетельствует о наличии инфекции.

При первичном заражении на 5–7 день вырабатываются АТ IgM, через 10–14 дней – низкоавидные АТ IgG, затем постепенно авидность этих АТ увеличивается, они становятся высокоавидными. АТ IgM исчезают через один месяц, низкоавидные АТ IgG – через 1–3 месяца, высокоавидные АТ IgG циркулируют в крови носителя пожизненно. При первичном инфицировании в стадии “серологического окна”, до начала синтеза АТ, происходит активная репликация вируса, в этот период единственным маркером инфекции является ДНК вируса в крови. При реактивации возможно появление АТ IgM и/или IgA, а также низкоавидных АТ IgG; в пик реактивации выявляются ДНК либо АГ ЦМВ в плазме крови.

Решающим условием антенатальной ЦМВИ является виремия у матери вследствие первичного или повторного заражением вирусом или его реактивации. ЦМВ способен преодолевать плацентарный барьер и поражать плод в различные сроки беременности, вызывая врожденную инфекцию. По данным различных авторов, активная форма ЦМВИ выявляется у женщин с отягощенным акушерским анамнезом в 35–60% случаев. Входными воротами для вируса в антенатальном и интранатальном периодах течения беременности могут быть плацента и плодные оболочки, в неонатальном периоде и позже – дыхательные пути и пищеварительный тракт, возможно заражение и через кровь.

Читайте также:  Болезни кожи у детей анализ

ЦМВ обладает преимущественно нейротропным, эпителиотропным, гепатотропным и кардиотропным действием на плод. Его воздействие может быть и опосредованным, приводящим к различным нарушениям в плаценте: расстройству маточно- плацентарного кровообращения, отклонению в эволюционном формировании плаценты. Клиническим эквивалентом этих расстройств могут быть сокращение продолжительности беременности и преждевременное родоразрешение, рождение детей с симптомами перенесенной гипоксии или признаками внутриутробной гипотрофии, общая задержка внутриутробного развития.

Наибольшее значение для развития ранних перинатальных поражений плода имеет гематогенный путь инфицирования. Кроме того, для интранатальных и более поздних поражений характерными являются вертикальный и контактный пути передачи ЦМВ, нередки также случаи смешанного инфицирования. Острая ЦМВИ может протекать в виде генерализованной формы с присоединением вторичных инфекций и иметь летальный исход уже в первые недели жизни ребенка. При инфицировании плода во время реактивации латентной ЦМВИ чаще имеют место поздние проявления инфекции в виде нарушений зрения, слуха, задержки психического развития, двигательных нарушений. При отсутствии выраженных иммунологических нарушений острая ЦМВИ переходит в латентную с пожизненным присутствием вируса в организме человека. Развитие иммуносупрессии, в частности связанной с ВИЧ-инфекцией, ведет к возобновлению репликации ЦМВ, появлению вируса в крови и манифестации заболевания. Летальность больных ВИЧ-инфекцией, страдающих ЦМВИ, составляет 25–27%.

Клинический диагноз ЦМВ-инфекции требует обязательного лабораторного подтверждения. Выявление в крови пациента АТ-ЦМВ IgМ и/или IgG недостаточно ни для установления факта активной репликации ЦМВ, ни для подтверждения манифестной формы заболевания.

  • Женщины, планирующие беременность;
  • женщины с отягощенным акушерским анамнезом (перинатальные потери, рождение ребенка с врожденными пороками развития);
  • беременные женщины (в первую очередь имеющие УЗИ-признаки внутриутробной инфекции, лимфоаденопатии, лихорадку, гепатит и гепатоспленомегалию неясного генеза);
  • беременные женщины с иммунодефицитом, в т. ч. с ВИЧ-инфекцией;
  • матери, родившие ребенка с признаками внутриутробной инфекцией или врожденными пороками развития;
  • дети, имеющие симптоматику врожденной инфекции, пороки развития или рожденные женщинами из группы риска по внутриутробной передаче ЦМВ;
  • пациенты (в первую очередь новорожденные) с сепсисом, гепатитами, менингоэнцефалитом, пневмонией, поражением ЖКТ;
  • пациенты с наличием иммунодефицита с клинической картиной органных или генерализованных поражений.
  • Врожденная ЦМВИ – краснуха, токсоплазмоз, неонатальный герпес, сифилис, бактериальная инфекция, гемолитическая болезнь новорожденных, родовая травма, наследственные синдромы;
  • мононуклеозоподобное заболевание – инфекции, вызываемые вирусом Эпштейна-Барр, герпес-вирусами 6 и 7 типов, острая ВИЧ-инфекция, стрептококковый тонзиллит, дебют острого лейкоза;
  • заболевание органов дыхания у детей раннего возраста – коклюш, бактериальный трахеит или трахеобронхит, РС-вирусной инфекция, герпетический трахеобронхит;
  • у больных с иммунодефицитом – пневмоцистная пневмония, туберкулез, токсоплазмоз, микоплазменная пневмония, грибковые и герпетические инфекции, бактериальный сепсис, лимфопролиферативные заболевания, ВИЧ-энцефалит, нейросифилис, прогрессирующая многоочаговая лейкоэнцефалопатия;
  • полинейропатия и полирадикулопатия – полирадикулопатия, вызванная герпесвирусами 2 и 6 типов, синдром Гийена-Барре, токсическая полинейропатия, связанная с приемом лекарственных средств, алкоголя, наркотических психотропных веществ.

Этиологическая лабораторная диагностика включает микроскопические исследования, выявление возбудителя в культуре клеток, обнаружение АГ или ДНК, определение АТ IgM, IgА, IgG, авидности АТ IgG.

Материал для исследования

  • Кровь (сыворотка, плазма), лейкоциты крови, моча, слюна, СМЖ – культуральные исследования, выявление ДНК;
  • пуповинная кровь, амниотическая жидкость – выявление ДНК;
  • слюна, моча – выявление АГ;
  • сыворотка/плазма крови – определение АТ.

Сравнительная характеристика методов лабораторной диагностики. Использование метода ПЦР позволяет определить наличие ДНК вируса в тканях и биологических жидкостях. Исследование обладает высокой специфичностью (100%) и чувствительностью (85–100%). ДНК ЦМВ может быть выявлено и при латентной ЦМВИ, указывая на продолжающуюся репликацию вируса даже при полном отсутствии клинических симптомов болезни. Использование ПЦР в реальном времени позволяет определить уровень виремии («вирусную нагрузку») в крови и СМЖ.

Выделение вируса из лейкоцитов крови, мочи, слюны, ликвора, спермы и др. в культуре клеток долгое время называли «золотым стандартом» в диагностике ЦМВИ. В настоящее время, с появлением высокочувствительных и специфичных молекулярно-биологических методов, вирусологические исследования уже не занимают главного места в лабораторной диагностике ЦМВИ. Это обусловлено как особенностями вируса – на результат культивирования влияет неустойчивость ЦМВ к изменению температуры и замораживанию, так и необходимостью выполнения исследований в специально оборудованной вирусологической лаборатории, которыми обычно не располагают лечебно-профилактические учреждения. Кроме того, вирусологическое исследование не позволяет отличить первичное инфицирование от рецидивирующей формы ЦМВИ, особенно при бессимптомном течении. Некоторые лаборатории используют “быстрый культуральный метод” с предварительным внесением биоматериала в культуру фибробластов и выявлением цитопатического действия ЦМВ при применении РИФ.

Для обнаружения АГ вируса в слюне и моче используют метод РИФ, по количеству светящихся клеток можно приблизительно оценить интенсивность выделения вируса. В связи с персистенцией ЦМВ обнаружение АГ не указывает на активность инфекционного процесса, для ее оценки требуются дополнительные исследования – выявление отдельных АГ вируса (р55, рр65 и др.).

При проведении микроскопического исследования (световая микроскопия) основными морфологическими признаками ЦМВИ являются гигантские клетки с внутриядерными включениями (цитомегалы). Их можно обнаружить в эпителии почечных канальцев, желчных протоках, выводных протоках слюнных желез, поджелудочной железы, ткани легких, клетках глии, нейронах, эндотелиоцитах. Наличие таких клеток указывает на репродукцию вируса, однако они обнаруживаются не во всех случаях активной инфекции. Диагностическая чувствительность метода не превышает 50%.

Для определения АТ-ЦМВ обычно используют метод ИФА. Наличие АТ IgM свидетельствует в пользу острой инфекции или реактивации. Реактивация гораздо чаще сопровождается гиперпродукцией АТ IgА, чем IgM. Выявление АТ IgG имеет низкое диагностическое значение. Диагностическую ценность теста повышает определение авидности АТ IgG: выявление низкоавидных АТ IgG свидетельствует о текущей или недавно перенесенной ЦМВИ, снижение индекса авидности возможно и при реактивации. Обнаружение высокоавидных АТ позволяет исключить первичную инфекцию, однако реактивация может протекать при наличии высокоавидных АТ, что подтверждается обнаружением ЦМВ, его АГ («ранних белков») или ДНК, а также выявлением АТ IgА.

Определение специфических АТ к вирусу помогает в распознавании заражения человека ЦМВ, но ввиду длительного периода нарастания титра АТ от момента инфицирования, последующего долгого сохранения их в крови, трансплацентарного перехода АТ IgG от матери к плоду (выявляются у ребенка до 1,5 лет) диагностическая ценность исследования ограничена. При наблюдении в динамике (2–4 недели) повышение титра АТ IgG в 4 раза указывает на активную ЦМВИ. Однако необходимость длительного периода наблюдения (до 4 недель) и возможность сохранения повышенного титра АТ на протяжении ряда лет лимитирует использование такого подхода к диагностике.

Дополнительным исследованием при поражении мозга, вызванного ЦМВ, может быть параллельное обнаружение АТ IgG в периферической крови и СМЖ методом ИФА с последующим расчетом их соотношения. Значение соотношения позволяет выявить интратекальную продукцию АТ и соответственно вовлечение в инфекционный процесс ЦНС.

Иммуноблот позволяет детектировать АТ IgM и IgG к отдельным белкам ЦМВ, подтвердить специфичность исследования, следить в динамике за появлением и исчезновением отдельных белков, что имеет высокое диагностическое и прогностическое значение. Наличие АТ к отдельным АГ вируса подтверждает формирование иммунного ответа к ЦМВ.

Показания к применению различных лабораторных исследований и интерпретация их результатов у разных категорий обследуемых

Диагностика первичного заражения, в т. ч. в период беременности, возможна только у пациентов, в крови которых отсутствуют АТ-ЦМВ. Независимо от клинических вариантов заболевания, при первичной ЦМВИ выявляются прямые (присутствие вируса, его ДНК или АГ) и косвенные (АТ-ЦМВ) лабораторные маркеры активной репликации ЦМВ. При обследовании больных при подозрении на активную ЦМВИ и манифестную форму заболевания (ЦМВ-болезнь) необходимо количественное определение содержания ДНК ЦМВ в крови. Определение ДНК ЦМВ в ликворе, плевральной жидкости, БАЛЖ, биоптатах бронхов, биоптатов органов выполняют при наличии соответствующей органной патологии.

Выявление прямых маркеров репликации вируса (виремия, ДНК или АГ) свидетельствует о наличии инфекции. Выявление ДНК ЦМВ или АГ вируса в крови беременной женщины – основной маркер высокого риска заражения плода и развития врожденной ЦМВИ.

Отсутствие АТ-ЦМВ IgM, IgА и IgG означает отсутствие ЦМВ в организме. Однако у лиц с выраженным иммунодефицитом при активной репликации ЦМВ продукция специфических АТ может быть снижена до неопределяемого уровня.

Выявление АТ-ЦМВ разных классов позволяет определить фазы инфекционного процесса (репликативная или латентная). АТ IgM чаще оценивают как маркер первичной герпес-вирусной инфекции. При выявлении АТ IgM для подтверждения инфицирования ЦМВ рекомендуются дополнительные исследования: определение АТ IgА или авидности АТ IgG, выявление АТ к отдельным белкам с использованием иммуноблота; повторное обследование женщины или ребенка через 2 недели. Выявление АТ IgА и(или) низкоавидных АТ IgG подтверждает наличие инфекции. При повторном выявлении АТ IgM и отсутствии IgА и(или) низкоавидных IgG результат выявления АТ IgM считают ложноположительным.

Выявление АТ IgM и IgG к предранним белкам-антигенам и низкоавидных АТ IgG свидетельствует о первичном инфекционном процессе.

Обнаружение только АТ IgG не позволяет охарактеризовать период заболевания. При наличии иммуносупрессии классического (4-х кратного) увеличения АТ IgG во время рецидива не наблюдают.

Установление факта инфицирования плода осуществляется на основании обнаружения ДНК ЦМВ. Выбор биологического материала определяется с учетом срока гестации, обусловливающего возможность проведения того или иного метода инвазивной пренатальной диагностики: амниотическая жидкость – 16–23 недели, пуповинная кровь – 20–24 недели. Косвенным подтверждением факта инфицирования плода является обнаружение АТ IgM и/или АТ IgА в пуповинной крови (проведение исследования возможно с 22 недели беременности).

Лабораторная диагностика врожденной ЦМВИ основана на обнаружении ЦМВ, его ДНК или АГ в различном биологическом материале (периферическая кровь, моча, слюна, смывы и мазки от ротоглотки, СМЖ) и выявлении в сыворотке или плазме крови АТ IgМ и IgА в течение первых 7 дней после рождения. Проведение исследования в более поздние сроки не позволяет дифференцировать врожденную и приобретенную инфекцию. Выявление ДНК ЦМВ или АГ вируса в крови, моче, соскобах со слизистой ротовой полости через 4–6 недель жизни ребенка при отсутствии вируса в первые 2 недели говорит об интранатальном или раннем постанатальном заражении. Подтверждением манифестной ЦМВИ у детей первых месяцев жизни является наличие ДНК ЦМВ в крови.

При сомнительных результатах дополнительную диагностическую информацию может дать выявление АТ IgМ к отдельным белкам-антигенам вируса методом иммуноблота. Отсутствие АТ-ЦМВ у детей с врожденной ЦМВИ может быть связано с развитием иммунологической толерантности к АГ вируса цитомегалии (инфицирование ЦМВ не сопровождается эффективным синтезом АТ-ЦМВ).

При обследовании детей в постнеонатальном возрасте показано выявление возбудителя (классический или модифицированный вирусологический метод), его ДНК или АГ («ранних белков») и АТ IgМ и IgА. Выявление анти-ЦМВ IgМ у детей первых недель жизни считают критерием внутриутробного заражения вирусом. Недостатком определения АТ IgМ служит их частое отсутствие в крови при наличии активного инфекционного процесса и не менее частые ложноположительные результаты. При обследовании детей в возрасте до 4–6 месяцев жизни целесообразно одновременное определение АТ у ребенка и матери с последующим сопоставлением величины их уровня (титра) и характера авидности. При обследовании ребенка в возрасте старше 6 месяцев может быть исследована только кровь ребенка. Для исключения ЦМВИ у детей первого года жизни рекомендуется определение ДНК или АГ в моче.

Выявление АТ IgG в сыворотке крови новорожденного без сопоставления с уровнем АТ в крови матери не является диагностически значимым вследствие возможности их трансплацентарного переноса из материнского организма. Только при динамическом (с интервалом в 14–21 день) сравнении уровня АТ IgG новорожденного ребенка с уровнем АТ IgG в крови матери можно судить об их природе. Если титры АТ IgG у ребенка при рождении равны материнским, а при повторном исследовании через 3–4 недели снижаются приблизительно в 1,5–2 раза, то АТ, выявленные у ребенка, являются материнскими.

Скрининг беременных женщин – выявление АТ IgМ и низкоавидных АТ IgG. Для исключения реактивации целесообразно определение АТ IgА и низкоавидных АТ IgG.

Обследование больных с наличием иммунодефицита при подозрении на активную ЦМВИ и манифестную форму заболевания (ЦМВ-болезнь) включает гистологическое исследование биопсийных материалов для выявление цитомегалов (окраска гематоксилином и эозином), обнаружение ДНК ЦМВ в ликворе, плевральной жидкости, БАЛ, биоптатах бронхов, биоптатов внутренних органов при наличии соответствующей органной патологии; выявление АГ ЦМВ в крови, определение концентрации ДНК ЦМВ в крови методом ПЦР. В диагностике ЦМВИ у ВИЧинфицированных наиболее информативно наличие в крови ДНК ЦМВ в высокой концентрации (в плазме крови >10000 копий/мл, в лейкоцитах > 1000 копий/ 105 лейкоцитов).

источник