Меню Рубрики

Анализ гепатит с качественный или ифа

Появление большого количества заболеваний, в том числе иммунных и инфекционных, спровоцировало появление огромного количества тестов для их выявления. Больше всего успехов наблюдается в молекулярной биологии. Именно к этой отрасли и относятся анализы ИФА и ПЦР.

Для того чтобы выяснить отличия между ПЦР и ИФА, а также их сходства, необходимо рассмотреть в отдельности каждое обследование.

ИФА #8212; это иммуноферментный анализ, который проводится в лаборатории и основан на избирательной реакции специфических иммунологических реакций в паре антиген-антитело.

Для того чтобы провести ИФА-диагностику, необходимо сдать кровь, над которой проведут исследования и смогут выяснить, есть ли в организме возбудители инфекций.

Наиболее часто встречающиеся инфекции можно представить в виде списка, в который входят в основном половые заболевания:

  • сифилис;
  • вирус иммунодефицита человека или ВИЧ;
  • гепатит;
  • хламидиоз, уреаплазмоз, микоплазмоз;
  • инфекция цитомегаловируса;
  • герпес.

Кроме того, по результатам ИФА возможно определить и другие инфекционные заболевания, уровень гормонов, антител и даже начальные стадии онкозаболеваний.

Главное, чем отличается ИФА от ПЦР заключается в том, что результаты метода ИФА нельзя использовать как первичные данные. Перед выяснением инфекционных заболеваний, передающихся половым путем, и уровня антител в крови стоит провести анализ ПЦР.

Как исключение, можно назвать только анализ на сифилис, но и здесь нужно проводить метод ИФА в комплексе с микропреципитацией.

Также ИФА отличается тем, что даже если по результатам найдены антитела в организме человека, то нельзя однозначно сказать, что человек болен, так как их наличие может говорить только о контакте с возбудителем в недавнем времени (иногда в далеком прошлом).

Даже, несмотря на то что метод ИФА не очень достоверный, есть вероятность, что ряд заболеваний не выяснит и ПЦР. К таким заболеваниям относят незаметные для иммунной системы человека болезни, например, уреаплазмоз, микоплазмоз или трихомонада.

ПЦР #8212; это полимеразная цепная реакция, которая относится к методам молекулярной диагностики и так называемого золотого стандарта. Именно этот метод является наиболее точным в определении иммунных заболеваний, передающихся половым путем. А является он настолько действенным благодаря проверке временем и многоразовым тщательным клиническим апробированиям, обследованию не одной тысячи людей.

Важным отличием является то, что для изучения ПЦР используется клинический материал больного или материал, полученный из внешней среды, которой является вода или почва.

Метод ПЦР лучше тем, что даже если в пробе есть несколько молекул ДНК, которые принадлежали возбудителю инфекции, как результат все равно будет найдено заболевание.

Еще одной особенностью этого метода считается и то, что можно определить и медленно развивающиеся заболевания. Кроме того, не нужно использовать трудоемкие микробиологические методы.

Наиболее часто при помощи ПЦР определяются гинекологические, урологические заболевания, такие как:

  • урогенитальные инфекции, которые передаются половым путем;
  • гепатит;
  • вирус иммунодефицита человека или ВИЧ;
  • папилломы;
  • туберкулез;
  • хеликобактериоз;
  • сальмонеллез;
  • дифтерия.

Хоть и полагают, что метод ПЦР дает наиболее точные данные обследования, но это касается только той части материала (ткани), клеточный материал которого берется на обследование. Таким образом, даже в этом методе возникают погрешности и затруднения в диагнозе, которые связаны со скоростью распространения болезни.

Как пример можно привести наличие хламидий в канале шейке матки, но их отсутствие в маточных трубах, ткани яичников и т. д.

Главное отличие между ПЦР и ИФА заключается в оборудовании для проверки и используемом материале. Из-за этого и может возникнуть ситуация, в которой ИФА-тест будет положительным, а ПЦР-тест отрицательным или наоборот.

Например, взяли ПЦР из области предполагаемой инфекции, а ИФА в любом другом месте организма (поскольку для этого теста нет разницы в месте, так как антитела есть везде, а ИФА реагирует именно на них). Далее проводят тест, и результат ПЦР показывает, что заболевания нет, а ИФА дает положительный ответ. Это будет обозначать, что вирус в организме есть, но не конкретно в той части ткани, которую исследовали при методе ПЦР.

Таким образом, важно запомнить то, что выбирать лучшее между ПЦР или ИФА не стоит, а стоит делать совместно два теста и получать 100% результат.

Также можно отметить, что ПЦР #8212; это достоверная информация о зараженном (инфицированном) участке (конкретной ткани), которая получена благодаря высокой чувствительности. А ИФА #8212; косвенный метод получения информации о состоянии всего организма и наличия в нем инфекции, а еще о процессе инфицирования вовлеченных тканей и органов, которые не подлежат прямой диагностике. Кроме видимых расхождений, есть и кое-что общее в этих двух методах. Например, высокая скорость получения результата и универсальность, результаты которых можно проверить уже через 4 или 5 часов.

Более подробную информацию о том, чем отличается обследование ИФА от ПЦР, какой метод лучше для человека и его организма, в частности, или конкретно для его заболевания, выбирает доктор. Так что лучше обратиться к врачу за направлением на проведение анализа, чем заниматься самолечением, поскольку иногда даже личное желание провериться чаще чем нужно приводит к неожиданным последствиям, ведь каждый анализ крови и тканей несет за собой последствия и если переусердствовать, то они будут непредвиденными.

Возможно Вас заинтересуют Реклама на сайте ✆

Гепатит С в хронической или острой фазе представляет собой одно из самых часто диагностируемых заболеваний печени, возникающее в результате заражения вирусом гепатита С (HCV), который попадает в организм в основном с кровью инфицированного человека.

Более чем у 70% больных острым гепатитом С практически отсутствуют какие-либо признаки болезни. Только в редких случаях после заражения могут встречаться такие проявления заболевания, как желтуха, тошнота, изменение цвета мочи и кала, рвота, потеря аппетита, усталость, боли в животе. Обычно симптомы возникают спустя 45 дней после инфицирования, однако, этот срок может варьироваться от 15 до 180 дней. При проявлении подобных симптомов нужно обязательно обратиться в больницу для прохождения анализа крови на гепатит С.

Своевременно проведенная диагностика предоставляет возможность обнаружить заболевание на ранней стадии, что намного повышает шансы на выздоровление.

Какие же следует сдать анализы для этого? Какова их норма? И каким врачом будет произведена их расшифровка и вынесен точный диагноз?

Обязательная сдача анализа на гепатит С – норма для:

  1. Женщин в период планирования и вынашивания беременности;
  2. Пациентов с симптомами хронического или острого гепатита;
  3. Людей, находящихся в группе риска, в том числе:
    • медицинских работников;
    • сотрудников правоохранительных органов;
    • наркоманов;
    • больных СПИДом.

Особой подготовки к сдаче анализа на гепатит С не требуется. Забор крови производится натощак из вены спустя не менее 10 часов после еды.

Норма, регламентирующая сроки выполнения исследования, составляет не более 2 суток.

Первоначально назначаемый для диагностики заболевания анализ – это ИФА тест, или иммуноферментный анализ, который позволяет выявить в крови наличие и количество специфических антител Anti-HCV в 95% случаев. Данные антитела бывают 2 видов – IgM и IgG. В случае если результат положительный, это свидетельствует о наличии контакта организма с HCV. Однако у 40% людей с положительным ИФА в крови вируса не обнаруживается – это сомнительный, или ложноположительный, результат.

Чтобы подтвердить положительные результаты ИФА, используется метод рекомбинантного иммуноблотинга (RIBA), который представляет собой более точное исследование наличия антител к вирусу гепатита С. Однако положительный результат также не определяет наличие HCV в организме пациента, а лишь подтверждает присутствие в нем антител.

Анализ РНК HCV, часто называемый анализом полимеразной цепной реакции, или ПЦР – более точный метод исследования крови, позволяющий обнаружить непосредственно генетический материал вируса гепатита (каждый вирус представляет собой одну частицу РНК). Анализ ПЦР на гепатит С выявляет его до возникновения антител в сроки, не превышающие пяти суток после заражения.

Современная медицина использует следующие вариации анализа ПЦР:

  • Количественный ПЦР, который определяет не только сам факт присутствия вируса, но и его количество.
  • Генотипирование, позволяющее установить генотип вируса гепатита С, что дает возможность определить, какие методы терапии необходимо применить в каждом конкретном случае.

Существует более 10 генотипов HCV, однако для клинической практики достаточно определения 5 наиболее распространенных из них.

Рассмотрим подробнее количественный и качественный анализы на РНК HCV.

Качественный анализ указывает на наличие вируса в крови. Это довольно сомнительный анализ, поскольку у него есть предел границы чувствительности. При проведении качественного ПЦР желательно использовать для диагностики систему, норма чувствительности которой составляет не ниже 50 международных единицах на мл (МЕ/мл). Референсное значение, или норма – отрицательный результат («не обнаружено»), который говорит о том, что в анализируемом образце не выявлены специфичные для HCV фрагменты РНК. Положительный результат ПЦР («обнаружено») означает наличие активной инфекции.

Количественный анализ ПЦР, или вирусная нагрузка, представляет собой тест на концентрацию вируса (виремию) в крови, который показывает количество единиц вирусной РНК в определенном объеме крови.

  1. Более 800 МЕ/мл – норма высокой вирусной нагрузки;
  2. Менее 800 МЕ/мл – норма низкой вирусной нагрузки.
  3. Количественный анализ ПЦР нужно проводить, если:
  4. Качественный тест на наличие в сыворотке РНК вируса гепатита С имеет положительные результаты;
  5. Определяется тактика и оценка эффективности терапии больного.

Количественный показатель вируса в крови и тяжесть заболевания не имеют между собой прямой зависимости.

Концентрация вируса влияет на:

  • инфекционность болезни, что предполагает более высокий риск передачи вируса при большем содержании его в крови больного;
  • эффективность проведения терапии, которая тем выше, чем ниже вирусная нагрузка.

Анализ генотипирования делается при качественном положительном тесте на присутствие в сыворотке РНК вируса гепатита С, а также для:

  1. Определения прогрессирования заболевания;
  2. Выработки тактики лечения;
  3. Оценивания эффективности терапии;
  4. Прогнозирования хронизации протекающего инфекционного процесса.

Продолжительность лечения, зависящая от выявления генотипа вируса, является важным фактором, поскольку применяемые для лечения препараты имеют целый ряд побочных эффектов и плохо переносится больными.

Расшифровка тестов проводится квалифицированным специалистом. Норма предполагает полное отсутствие РНК вируса, антител к ним и антигенов. Содержание антител в крови может указывать как на наличие острого или хронического гепатита С, так и на протекание периода выздоровления. Наличие в крови RNA HCV, выявленное при ПЦР, свидетельствует о присутствии в крови вируса.

При нарушениях забора и транспортировки крови, а также техники выполнения исследования анализ ПЦР иногда показывает ложноположительный, или сомнительный, результат. Анализы RIBA и ИФА могут показывать ложноположительные результаты в случае ранней стадии заболевания, когда организму еще не удалось выработать достаточного количества антител.

Если расшифровка тестов на гепатит С показывает положительные результаты, пациенту необходимо обратиться к гепатологу и врачу-инфекционисту, которые подскажут, какие дополнительные анализы нужно сдать для дальнейшего диагностического обследования и лечения.

Медицинская статистика свидетельствует, что в настоящее время около 4% населения планеты инфицировано вирусом гепатита С. Однако эта цифра не отражает объективной реальности, ведь многие люди даже не догадываются о том, что являются носителем данного вируса. Вот почему так важно регулярно проводить обследование у врача и периодически делать анализ крови на гепатит. Каждый в отдельности тест может давать сомнительный результат, и только в комплексе они позволяют окончательно определиться с диагнозом и начать адекватно лечить гепатит.

Автор. Загороднюк Михаил Петрович,
специально для сайта moizhivot.ru

В настоящее время признанным в мире и самым оптимальным по сочетанию цена-эффективность методом лечения является комбинированная терапия с использованием препаратов интерферона и рибавирина. Эффективность такой терапии примерно от 40% до 85%. Эффективность терапии зависит от: генотипа вируса, генотипа больного, веса, пола, возраста, давности инфицирования, применяемых препаратов и др.

Новые методы лечения дженериками Софосбувир. Асунапревир. Даклатасвир дает эффективность до 100%.

О Гепатите С — обычно он вызывается вирусом, попавшим в организм с половым контактом или кровью зараженного человека.

Заболевание протекает в двух вариантах — если вирус активно размножается, он при этом повреждает клетки печени,а печень не успевает восстановится (регенерировать). т.к. скорость повреждения выше скорости восстановления,при этом клетки замещаются рубцами, страдают функции печени. Если репликация (размножение вируса) медленное, печень успевает регенерировать.

При заболевании необходимо контролировать Трансаминазы- маркеры повреждения гепатоцитов. ALT (АЛТ, АлАТ), AST (АСТ, АсАТ)- катализируемые ими реакции осуществляют связь между белковым и углеводным обменом. Не понятно что побуждает перейти гепатиту С из вялотекущей в активную форму, которая является смертельно опасной и полностью разрушает печень за 10-20 лет. Поэтому считается, что опасность представляет именно гепатит, который протекает с повышением трансаминаз

Пациентам с положительным анализом крови на наличие РНК (Рибонуклеиновые кислоты) вируса гепатита С в крови методом Полимеразной цепной реакции (ПЦР. PCR) и Иммуноферментным анализом, ИФА (Enzyme immunoassay) необходимо контролировать активность вирура по уровню АЛТ (Аланин — аминотрансфераза). АЛТ считается индикаторным ферментом, и к его определению постоянно ссылаются при постановке диагноза различных гепатитов.

Если уровень АЛТ в пределах нормы, то противовирусная терапия обычно не рекомендуется.

Необходимо повторять биохимический анализ крови один раз в 3-6 месяцев. А также регулярное обследование состояния печени. Рекомендуется биопсия печени (извлечение фрагмента-биоптата печеночной ткани) которая покажет полную картину в печени на текущий день, а также поможет определить стадию развития фиброза (рубцевания) печени. Также возможно проведение других анализов на фиброз, или применение неинвазивного метода эластографии печени с аппаратом Фиброскан.

Читайте также:  Анализ показал гепатит с почему

Различают 5 стадий (от 0 до 4) развития поражения печени (стадий фиброза печени). последней стадией является цирроз печени (сильное поражение печени, при котором она утрачивает свои функции). По этим обследованиям и результатам анализов принимается решение о необходимости лечения.

Для стадий 0-1 лечение не обязательно. Возможно начало лечения при персональной рекомендации врача при внепеченочных проявлениях вируса.

Для стадий 2 и выше рекомендуется безотлагательно начинать терапию.

В любом случае, даже при откладывании лечения необходимо пациенту находиться под контролем гепатолога. Один раз в полгода проводить тесты на трансаминазы, один раз в 3-4 года контролировать стадию развития фиброза печени.

ИТОГО: АЛТ + ИФА + ПЦР — для диагностики гепатита С. К лечению вируса гепатита С мы обычно переходим при повышенной АЛТ, положительном ПЦР анализе и наличии маркеров ИФА. Лечение начинается после:

  • получения ИФА-маркеров (когда выявлены антитела к вирусу гепатита С)
  • методом ПЦР в крови выявлено наличие РНК вируса гепатита С

Желательно это сделать в двух разных лабораториях.

Гепатита С без ИФА маркеров не бывает! Но они появляются по завершении, инкубационного периода, и сохраняются в дальнейшем вне зависимости от результатов лечения. Обычно, после срока инкубационного периода, если нет маркеров — нет гепатита!

Внимание. По последним исследованиям, если говорить о гепатите С у коинфицированных ВИЧ / ВГС могут отсутствовать антитела к вирусу. Соответственно ИФА маркеры отсутствуют, а вирус гепатита С есть, который подтверждается положительным результатом при анализе методом ПЦР.

Метод ПЦР- Полуколичественный анализ крови для прогноза гепатита С — это уже устаревший вид анализа, дающий очень расплывчатый результат. Лучше используйте количественный анализ крови методом ПЦР для определения вирусной нагрузки.

Качественный ПЦР анализ может быть только либо положительным, либо отрицательным (анализ, котторый устанавливает факт наличия РНК вируса гепатита С). «полуположительный и полуотрицательный», не имеет никакого смысла.

Смотрим на результаты биохимического анализа крови и трансаминазы. Но надо учитывать, что эти показатели, по оценке активности гепатита С, имеют погрешность около 20%.

Самую точную картину сможет дать биопсия печени. Но это тяжело и она доступна не везде. Также сужествуют другие методы обследования, они менее точные, но безболезненные, например фибросканирование (эластометрия) печени и фибротест.

Внепеченочные проявления — результаты исследований с участием мед.работников, с гепатитом С, показали, что 74% больных испытывали различные формы. Наиболее часто наблюдались боли в суставах -74%; нечувствительность или покалывание — 17%; боли в мышцах – 15%; нестерпимый зуд — 15%; сухость слизистых рта и глаз – 11%.

Схемы лечения (выбор препаратов, дозировка и частота приема) подбирается в соответствии с генотипом вируса гепатита С. Сейчас существует 6 основных генотипов вируса, которые дают более детальную информацию о гепатите С (обозначаемых цифрами: 1,2,3,4,5,6), а также обозначаются подтипы/субтипы ( которые обозначаются латинскими буквами, присоединенными к цифре генотипа: 1b, 3a,…). Вирусы с разными генотипами-субтипами отличаются по чувствительности к терапии интерфероном, по содержанию вируса в крови (виремии ), по распространению в теле.

Генотипирование диктует длительность терапии и ее интенсивность.

Первый и четвертый генотип ( которые встречающийся редко), примерно вдвое устойчивее при антивирусной терапии. Подтип генотипа вируса — при этом не существенен.

Количественная оценка вирусной нагрузки (наличие вируса) — относительно новое понятие,введеное европейскими гепатологами. Суть сравнения показателей вирусной нагрузки до лечения и через 4, 8, 12 недель терапии, соответственно, это сравнение позволяет уточнять схему терапии, а также рекомендовать отмену или продолжение терапии (при снижении загрузки в 100 и более раз) с большой вероятностью на успех.

Плюс такой оценки — если терапия не работает пациент узнает об этом быстро.

Минусы- нужны качественные и постоянные анализы.

Это все относится к стандартной интерфероновой терапии.

Контрацепция в период терапии, а также в течение 6 месяцев после окончания терапии обязательна для обоих партнеров.

источник

Основной источник заражения гепатитом С – больной человек. Иногда тот, кто является носителем вируса, не проявляет клинические симптомы гепатита ц. Путь заражения гепатовирусом – через кровь. Это может произойти при любом контакте крови зараженного человека с кровью здорового человека. Чаще всего заражаются следующим образом:

  • дети от матери при родах;
  • медицинские работники во время проведения манипуляций;
  • у взрослых чаще всего гепатит проникает в кровь из-за посещения маникюрных салонов, салонов татуажа и пирсинга, где могут работать с инструментами без должной дезинфекции;
  • заболевание часто обнаруживается у наркоманов, вводящих себе в вену наркотические препараты;
  • половой путь хотя и редко, но тоже может спровоцировать заражение гепатовирусом.

Более подробно об основном источнике инфицирования Гепатитом Ц читайте тут.

Поскольку заболевание является наиболее распространенной разновидностью, а также от него нет вакцины, то оно признано одним из наиболее приоритетных в диагностике. Именно поэтому во всех государственных клиниках анализ крови на гепатит С бесплатный. При себе достаточно иметь лишь направление от лечащего врача на сдачу анализа.

В поисках, где сдать анализ на гепатит, пациенты часто пользуются услугами частных клиник и лабораторий. Не стоит не доверять частным лабораториям, поскольку зачастую именно такие диагностические центры имеют более мощное оборудование, нежели государственные учреждения. Поэтому результаты современных лабораторий могут не просто не отличаться, а даже быть более точными, нежели результаты в государственных лабораториях. Некоторые категории пациентов специально сдают кровь на гепатит несколько раз в различных центрах, чтобы сравнить результаты анализа крови на гепатит и избежать ложного диагноза.

Сразу вас успокоим, гепатит С излечим. На сегодняшний день, в мире уже появились препараты от гепатита С с эффективностью приближенной к 100% Современная фарм промышленность создала лекарства, которые практически не имеют побочных эффектов. Многие пациенты получают первые результаты в виде облегчения симптомов и снижения вирусной нагрузки уже через неделю приёма. Подробнее о индийских дженериках от гепатита с читайте в нашей отдельной статье.

На рынке компаний по перевозке индийского лекарства от гепатита С «GalaxyRus (Galaxy Super Speciality)» отлично зарекомендовала себя. Данная компания успешно помогает людям излечиться от недуга больше 2-х лет. Отзывы и видео довольных пациентов вы можете посмотреть здесь. На их счету более 4000 людей, которые выздоровели благодаря купленным препаратам. Не откладывайте свое здоровье в долгий ящик, перейдите на сайт www.galaxyrus.com или позвоните по номеру 8-800-3500-695 , + 7 (495) 369 00 95.

На результаты анализов могут повлиять следующие факторы: прием лекарственных средств, прием пищи, перегрузки организма, как моральные, так и физические, употребление алкоголя, табакокурение, физиотерапевтические процедуры, время забора крови. Все выше перечисленные показатели могут сделать так, что норма уже не будет соблюдаться и появятся отклонения, которые по сути таковыми не являются. Поэтому перед обследованием пациента врач расскажет, какие анализы надо сдать и как к ним подготовиться. Можно привести для примера общие правила подготовки к анализу на гепатит С:

  1. нужно сдать кровь утром, с 8 до 11 часов;
  2. в день забора крови не курить и не нервничать;
  3. за восемь часов – не пить, за четырнадцать часов – не есть;
  4. сказать врачу о приеме каких-либо лекарственных средства и при необходимости прекратить их прием на время;
  5. исключить алкоголь любой крепости за пару дней до того, как сдают кровь.

Для того, чтобы определить наличие заболевания, необходимо сделать ряд диагностических процедур:

  1. общий анализ крови при гепатите С;
  2. биохимический анализ крови при гепатите на активность трансаминаз;
  3. полимеразно-цепную реакцию на наличие рнк вируса гепатита С;
  4. при обнаружении возбудителя делается анализ на генотип гепатита;
  5. ультразвуковое исследование печени может дополнительно подтвердить наличие поражений паренхимы.

Анти-HCV – это анализ на наличие иммуноглобулинов к вирусным белкам. Если анализ на антитела показывает положительный результат, то это свидетельствует о заражении человека гепатовирусом или ранее перенесенном заболевании. Специфические иммуноглобулины начинают появляться как реакция организма на белок ядра гепатовируса и фрагменты его генома. Первые антитела в большинстве случаев появляются в первые три-шесть месяцев заражения вирусом, но в редких случаях они не попадают в кровь более года.

Иммуноферментный анализ длительное время был и остается одним из основных диагностических способов определения возбудителя в организме человека. Анализ достаточно высокочувствителен и дает возможность в 95 процентах случаев обнаружить хроническую форму течения заболевания. Выполняется несколько дней. Но, тем не менее, несмотря на высокую информативность анализа, существует риск получить ложный результат – как положительный, так и отрицательный. Например, пациенты, у которых заболевание находится в острой стадии, получают правильный ответ лишь в среднем в 60 процентах случаев. Это происходит из-за того, что антитела в среднем появляются в течение четырех-пяти месяцев от заражения, поэтому до этого времени ИФА будет показывать отрицательный результат. Ложноотрицательные реакции будут наблюдаться у тех пациентов, которые лечатся от сифилиса, онкологического заболевания или страдают аутоиммунными патологиями. В этом случае чувствительность колеблется в диапазоне 50-95 процентов. В восьми процентах ИФА у ВИЧ инфицированных также получается ложноположительный результат. Поэтому можно утверждать, что погрешности ИФА не позволяют точно поставить диагноз гепатит.

Показатель Значение
IgM+, core IgG+, (NS и IgG)-, RNA (=РНК) HCV+ Острая форма заболевания
IgM+, core IgG+, (NS и IgG)+, RNA (=РНК) HCV+ Хроническая форма
IgM-, core IgG+, (NS и IgG)+, RNA (=РНК) HCV- Латентная фаза
IgM-, core IgG+, (NS и IgG)+/-, RNA (=РНК) HCV- Выздоровление пациента после недуга

Этот анализ позволяет непосредственно увидеть присутствие генетического материала вируса в крови. Анализ основывается на оценке качественных и количественных показателей и выполняется до семи дней. Качественный тест показывает лишь наличие вируса в крови, поэтому результат может быть либо однозначно положительный, либо однозначно отрицательный. Норма для здорового человека, когда в выписке стоит пометка «не обнаружено», т.е. тест отрицательный. Количественный тест позволяет определить концентрацию вируса гепатита С в крови, так называемую вирусную нагрузку. Обычно такой тест делают через три месяца, если предыдущий тест показал наличие гепатовируса в организме.

Показатель Значение
200 копий/мл = 400 МЕ/мл Вирус не обнаруживается либо его количество настолько мало, что не дает возможности его диагностировать
4*10^6 МЕ/мл Высокая концентрация вируса
>2*10^8 МЕ/мл Концентрация является наивысшей из определяемой

Биохимия крови – важная часть общего исследования. По наличию разнообразных микроэлементов в человеческой крови, уже через несколько дней анализ позволяет определить состояние здоровья. Для оценки гепатита С важно получить данные по содержанию аланинаминотрансферазы, астаспартатаминовой трансферазы, билирубина, гамма-глутамилтранспептидазы, глюкозы, ферритина, альбумина, общего белка и белковых фракций, креатинина.

Расшифровку этих основных маркеров представляет следующая таблица

Показатель Норма Характеристика
АЛТ 0,1-0,68 мкмоль/л Показатели повышены при гепатите в острой стадии и при разрушении печени, а снижение показателей указывает на развитие цирроза
АСТ 0,1-0,45 мкмоль/л
Билирубин До 20 мкмоль/л Повышение билирубина указывает на желтуху – основной признак гепатита С в хронической стадии
ГГТ У женщин – 6-42 Ед/л,

У мужчин – 10-71 Ед/л

Показатель повышается при развитии цирроза печени

При острой форме заболевания, когда вирус гепатита только попал в организм человека, и проходит период инкубации, симптоматика не проявляется не только со стороны здоровья пациента, но не видно изменений и в картине лабораторных исследований. Это связано с тем, что вирус достаточно долго появляется в крови. Например, в среднем можно обнаружить генотип вируса только лишь через несколько месяцев. Показатели крови – маркеры гепатита, которые указывают на вирус.

Хроническая форма течения заболевания характерна тем, что в ней появляются признаки наличия возбудителя и если сдавать анализ на вирус, то это подтверждается и результатами анализа. Например, повышение аминотрансферазы будет вызвано гибелью гепатоцитов, а уровень ГГТ будет существенно выше при циррозе. Зная это, врачи делают несколько анализов и при подозрении на возможное заражение анализы на гепатит С повторяют через несколько месяцев.

Обычно врач может назначить ультразвуковое исследование. Узи помогает выявить увеличение размеров печени и места, пораженные вирусом. Но наиболее точные результаты даст единственный анализ – он называется биопсия. Это забор специальной иглой образцов гепатоцитов. Пациентов пугает это исследование, и они хотят знать сколько делается биопсия, больно ли проводится процедура. Биопсия проводится довольно быстро, под спинальной анестезией, ее результаты укажут на изменения в самой печени, что подтвердит или опровергнет подозрения.

Ложноположительный анализ появляется даже у здорового человека. Что это значит? Это означает, что у человека определяется в крови присутствие антител к гепатиту С. При этом такой анализ чаще всего получается методом ИФА – наиболее распространенным методов, но и наиболее «грешным». Ложноположительный анализ можно получить в следующих случаях:

  • при аутоиммунных заболеваниях:
  • при опухолях;
  • при заражении другими тяжелыми инфекциями;
  • если есть беременность.

Ложноположительный анализ может возникнуть и в результате человеческого фактора, профессиональной недобросовестности, нарушении техники проведения анализа. В данном случае приходится переделывать анализ.

К сожалению, выпуск препарата о котором говорится в видео в России так и не начат. но уже сейчас его можно заказать из Индии, подробнее читайте об этом в нашей статье «Дженерики от гепатита с»

Читайте также:  Анализ печени на гепатит с

Для того, чтобы точно узнать, качественная ли диагностика гепатита С, можно поступить двумя способами:

  1. сдать анализы в нескольких лабораториях и сравнить результаты анализов крови при гепатит С с расшифровкой. Наиболее информативным будет сравнение государственной лаборатории и частной. Если результаты не внушают доверия, можно провести еще несколько анализов в разных клиниках. Всегда нужно помнить о человеческом факторе, а в случае, если получен положительный анализ на гепатит С, лучше перестраховаться. Также стоит принять во внимание, что лабораторная диагностика гепатита С может быть не точной, если есть беременность;
  2. если пациент доверяет клинике полностью, он может сделать анализ повторно позже. Как правило, это назначают и врачи, если результаты анализа на гепатит С положительны. Если они отрицательны через три месяца, также можно подозревать человеческий фактор или другие патологии, благодаря которым сдвинулась норма показателей. После этого нужно сделать анализ крови еще раз.

Определение генотипа вируса чрезвычайно важно для пациента. Анализ проводится на основе взятой венозной крови методом полимеразно-цепной реакции. От того, какой вирус обнаружен, зависит план лечения заболевания. Известно, что генотип 1б в девяноста процентах случаев приведет к развитию хронической формы заболевания, а вот генотип 2а и генотип 3a – лишь в половине случаев. Также стоит отметить, что генотип 1b протекает наиболее тяжело – после такого поражения высок риск развития карциномы. Поэтому определение генотипа необходимо для дальнейшей терапии и прогноза заболевания.

Чтобы диагностировать заболевание, необходимо сдать анализы крови на гепатит С с расшифровкой, после чего врач сравнит полученные показатели с референсными значениями.

источник

Гепатит – серьезное заболевание, которое имеет множество причин для возникновения. В основе его развития лежит прямое или опосредованное поражение печени. Учитывая ее важность для всего организма, можно только догадываться, насколько тяжело протекает патология. В этой статье более подробно разберем особенности течения и лабораторную диагностику гепатита С.

Причиной болезни является вирусный агент, который относится к РНК-содержащим возбудителям. Он имеет отличительную черту – способность мутировать, то есть изменять свою структуру. Благодаря этому инфекция ускользает от атаки иммунной системы и в большинстве случаев приводит к хронизации воспалительного процесса в печени.

Учитывая существование различных подтипов вируса, подбор лекарственных средств должен проводиться с учетом результатов генотипирования. Несмотря на длительное изучение болезни и особенностей строения HCV, до сих пор не удалось разработать специфическую прививку от заболевания.

Трудности ранней диагностики заключаются в бессимптомном течении гепатита, вследствие чего человек обращается к врачу на стадии цирроза. Чтобы вовремя обнаружить заболевание, требуется регулярное проведение медосмотров. Только путем лабораторного исследования крови удается выявить HCV и предупредить заражение окружающих. Дело в том, что носитель инфекции может длительное время не догадываться о патологии и продолжать передавать вирус здоровым людям.

Вирус в большинстве случаев распространяется через кровь, так как в ней содержится наибольшая концентрация патогенных агентов. Таким образом, инфекция передается:

  • при гемодиализе;
  • при уколе зараженной иглой;
  • в процессе драки, когда травмируются кожные покровы, и происходит гемоконтакт;
  • при гемотрансфузии (переливании крови).

Вероятность заражения при интимной близости незначительная, так как в сперме и выделениях из влагалища содержится небольшое количество возбудителей. Риск инфицирования существенно увеличивается при нарушении целостности слизистой гениталий. Такое наблюдается при агрессивном и анальном сексе.

Что касается вертикального способа передачи инфекции, то он осуществляется в процессе родовой деятельности. В периоде вынашивания плода возбудитель не может проникнуть через плаценту к эмбриону. При естественных родах патогенный агент передается ребенку при травмировании его кожи, когда наблюдается контакт с кровью матери.

После проникновения возбудителя в здоровый организм начинается синтез антител, которые являются защитой от инфекции и относятся к иммунным структурам. Именно они обнаруживаются при первичном исследовании человека с помощью ИФА.

Для подтверждения диагноза пациенту проводится полимеразная цепная реакция. Она представляет собой анализ на выявление генетического материала патогенного агента и определение вирусной нагрузки.

Лабораторная диагностика начинается с проведения иммуноферментного анализа. Основная его задача заключается в обнаружении антител, вырабатывающихся против возбудителя. Его эффективность – почти 95%. Благодаря этому исследованию на доклинической стадии удается выявить вирусоносителя и направить его на дальнейшее обследование.

Качественный анализ ИФА указывает на наличие или отсутствие иммуноглобулинов в крови пациента. Его результат может быть «положительный» или «отрицательный». Получив первый вариант ответа, человек направляется на следующее обследование – ПЦР. Его цена зависит от качества реактивов и лаборатории. Стоимость полимеразной цепной реакции может достигать 4 тысяч рублей.

С помощью полимеразной цепной реакции даже небольшой объем биологического материала позволяет оценить вирусную нагрузку в крови, то есть подсчитать концентрацию возбудителей в одном миллилитре жидкости.

С появлением ПЦР диагностика гепатита значительно упростилась. Анализ дает возможность выявить РНК HCV, установить стадию инфекционного процесса и заразность вирусоносителя.

Существует несколько разновидностей генетической диагностики:

  1. качественный анализ ПЦР на гепатит С – подтверждает факт наличия или отсутствия HCV в крови обследуемого:
  2. количественный, благодаря которому можно подсчитать концентрацию вирусов и установить стадию болезни. Результат выдается в МЕ/мл или копии/мл (в зависимости от лаборатории);
  3. генотипирование – необходимо для определения генотипа HCV. Это требуется для точного подбора лекарственных средств, которые будут максимально эффективны в данном случае. Анализ косвенно указывает на тяжесть патологического процесса в печени. Так, при третьем генотипе возбудителя чаще всего наблюдается стеатоз, в основе развития которого лежит накопление жира в гепатоцитах (ее клетках). Помимо этого, тип вируса влияет на результат и продолжительность терапевтического курса.

Первым делом в лаборатории биологический материал исследуется на наличие РНК HCV. Важно помнить, что качественный анализ на гепатит С имеет определенный уровень чувствительности, в связи с чем не всегда может давать верный ответ. В таком случае рекомендуется повторное проведение лабораторной диагностики с применением других реактивов.

Для получения достоверных результатов следует использовать тест-системы с чувствительностью – не ниже 50 МЕ/мл.

Результат диагностики может быть как «положительный», так и «отрицательный». Если возбудитель не найден в крови, исследование завершается. При выявлении патогенного агента в образце далее проводится количественный подсчет вирусной нагрузки.

Ложноотрицательный ответ получается, когда нарушается технологический процесс, например, в среду попадают активные компоненты, угнетающие построение копий возбудителя. Таким образом не удается отобразить истинную картину крови, из-за чего инфицирование человека не диагностируется.

Ложноположительный результат можно получить, если пробирка для забора биологического материала, а также среда для проведения исследования были загрязнены. Помимо этого, такой ответ анализа возможен при микст-инфекции, когда печень поражается несколькими вирусами, например, гепатитом С и D.

Врач может назначать пациенту качественное исследование на выявление РНК вируса гепатита С:

  • при получении положительного или сомнительного ответа иммуноферментной диагностики;
  • для верификации диагноза;
  • определения вирусной нагрузки;
  • постановки стадии заболевания;
  • диагностики микст-инфекции. Зачастую гепатит С поражает печень одновременно с вирусом «D»;
  • определения терапевтической тактики с учетом генотипа возбудителя;
  • оценки динамики изменений на фоне лечения противовирусными медикаментами.

К преимуществам полимеразной цепной реакции относится:

  1. высокая чувствительность методики, что позволяет установить факт инфицирования на доклинической стадии;
  2. выявление генетического материала возбудителя, а не антител к нему;
  3. возможность установления субтипа патогенного агента;
  4. высокая скорость диагностики, так как не требуется посев материала на питательную среду, а достаточно использовать специфические тест-системы. Человек получает результат спустя 5 часов;
  5. универсальность. Анализ позволяет выявить любой генетический материал (РНК, ДНК). Благодаря этому врач может подтвердить гепатит С и другие виды болезни (В);
  6. возможность выявления скрытой инфекции.

При исследовании крови с помощью полимеразной цепной реакции удается подсчитать количество возбудителей в фиксированном объеме биологического материала. Показатель представлен в МЕ/мл. Благодаря анализу можно установить степень заразности пациента, определить стадию инфекционного процесса, а также оценить эффективность лекарственной терапии.

На основании ПЦР специалист решает, какие дозы медикаментов позволяют блокировать размножение возбудителей. Кроме того, определяется длительность противовирусного лечения и прогноз для жизни. Важно помнить, что тест-системы имеют высокую чувствительность, поэтому метод дает возможность подтвердить инфицирование человека еще на доклинической стадии.

Учитывая способность возбудителя мутировать, для определения тактики лечения и выбора противовирусных лекарств необходим его генотип. Например, лечение гепатита HCV 1 длится 48 недель, при этом положительная динамика отмечается лишь в 60% случаев. Генотипы 2 и 3 имеют более благоприятный прогноз. Противовирусные лекарства назначаются на 8 месяцев, а их эффективность достигает 85%.

Согласно статистическим данным, в большинстве случаев на территории Российской Федерации регистрируется HCV 1, 2 и 3.

При расшифровке лабораторного исследования может быть указан такой ответ – «не типируется». Это значит, что в кровеносной системе больного циркулирует вирус, которого не удается распознать тест-системой. Результат анализа в данном случае свидетельствует о заражении человека нетипичным для данной географической зоны возбудителем.

Чтобы качественное исследование ПЦР по выявлению РНК возбудителя гепатита С показало правильные результаты, необходимо соблюдать требования по подготовке к лабораторной диагностике:

  1. забор крови осуществляется натощак, причем «голодный» промежуток не должен быть короче 8-ми часов;
  2. за два дня до исследования рекомендуется прекратить распитие спиртных напитков и отказаться от острых, жирных и копченых блюд;
  3. отменить введение лекарственных средств, снижающих свертываемость крови, например, гепарина. Если данные медикаменты назначены по жизненным показаниям, необходимо предупредить об этом врача. Кроме того, специалист должен знать о приеме других препаратов, которые могут повлиять на результат лабораторного исследования;
  4. накануне забора биологического материала не следует проводить физиотерапевтические процедуры и подвергать себя тяжелой физической нагрузке.

На результаты анализа может влиять не только человек, сдающий кровь, но и другие факторы, а именно:

  • некачественный забор крови;
  • несоблюдение рекомендаций по транспортировке биологического материала;
  • недостаточная профессиональная подготовка работников лаборатории;
  • несоблюдение техники проведения исследования;
  • введение антикоагулянтов (гепарина) накануне забора крови. Данная группа лекарств снижает свертываемость, тем самым замедляя работу реактивов.

В разных лабораториях ответ диагностики может несколько отличаться, однако эти погрешности не влияют на конечный результат исследования.

Особое внимание уделяется видам тест-систем, которые используются в лаборатории. Зачастую предпочтение отдается реактивам с высокой чувствительностью. Это важно для пациентов с низкой вирусной нагрузкой, поскольку ее сложно обнаружить.

Первично полимеразная цепная реакция проводится людям, у которых при иммуноферментном анализе были выявлены антитела к возбудителю гепатита. В данном случае она назначается для подтверждения факта заражения человека и установления стадии болезни. Кроме того, анализ позволяет определить субтип вируса, что особенно важно для выбора лекарственных средств.

Следующим периодом для обязательного лабораторного исследования является 3 месяца от начала противовирусной терапии. Диагностика дает возможность оценить эффективность медикаментов, откорректировать дозу или заменить их.

Помимо основных анализов, ПЦР может дополнительно проводиться на 4 и 24 неделях от начала лечения. Положительный прогноз болезни подтверждается уменьшением вирусной нагрузки по истечении трех месяцев терапии. Так, например, она должна снизиться с 1 миллиона МЕ/мл до нескольких сотен тысяч.

Если концентрация патогенных агентов в крови остается на прежнем уровне или несколько нарастает, это указывает на неэффективность противовирусных средств и требует их замены. С помощью ПЦР в конце лечения удается подтвердить выздоровление пациента.

Чтобы правильно трактовать результаты лабораторной диагностики, требуется консультация гепатолога или инфекциониста. Учитывая большую частоту ложных ответов при ИФА, анализ используют исключительно для первичного скрининга. Для более тщательного обследования пациента применяется полимеразная цепная реакция.

источник

Анализ на гепатит С необходимо сдавать всем пациентам с подозрением на подобное расстройство. Существует несколько разновидностей подобной диагностической меры. Они указывают, какой именно вирус, а точнее, его разновидность, стала возбудителем недуга.

Необходимость проведения лабораторных обследований заключается в том, что в некоторых случаях подобная болезнь может протекать без выражения каких-либо признаков. Кроме этого, стоит учесть, что вирусный гепатит не имеет специфической симптоматики, отчего его можно ошибочно принять за ряд других патологий ЖКТ. Из этого следует, что диагностика гепатита С основывается на данных лабораторного и инструментального обследования пациентов.

Для окончательного утверждения или отрицания инфицирования человека этим вирусом необходимо проведение следующих тестов:

  • общий анализ крови – показывающий нарушение функционирования поражённого органа;
  • биохимический анализ крови на АЛТ, АСТ и билирубин. Такое исследование даст возможность получить информацию о разрушении печёночных клеток;
  • иммуноферментный анализ – это наиболее эффективная процедура, указывающая на стадию протекания подобного поражения печени, тип вируса и его количественные значения;
  • ПЦР-диагностика – укажет на наличие вируса и его происхождение;
  • иммунохроматографический анализ – представляет собой экспресс-тест, который позволяет в короткие сроки установить наличие у пациента антител.

Показаниями к осуществлению вышеописанных анализов на гепатит С выступают:

  • незащищенный половой акт с заражённым человеком;
  • появление одного или нескольких симптомов подобного недуга. К основным из них стоит отнести желтуху, тяжесть, дискомфорт и боль в зоне правого подреберья, снижение аппетита, нарушение сна, частые приступы тошноты и рвоты;
  • переливание крови;
  • недавнее нанесение татуировок или пирсинга;
  • наркомания – инфицироваться можно через использование одного шприца для инъекционного введения наркотиков;
  • наличие у человека в близком окружении людей с подобным диагнозом – высока вероятность инфицирования при пользовании бытовыми предметами с переносчиком вируса.
Читайте также:  Анализ после прививки на гепатит

Проводить расшифровку анализов должен только тот врач, который их назначил. Это обуславливается тем, что клиницист владеет необходимой информацией о состоянии больного.

Общий анализ крови при гепатите даёт возможность получить клиницисту полную информацию об общем состоянии и функционировании внутренних органов пациента. Изменения в таких показателях не будут специфическими, но при различном протекании вирусного гепатита они будут иметь особенные изменения. Для гепатита С характерны такие отклонения:

  • снижение содержания лейкоцитов и уровня гемоглобина;
  • повышение лимфоцитов среди всего количества лейкоцитов;
  • нарушение процесса свёртываемости крови;
  • уменьшение концентрации тромбоцитов;
  • возрастание СОЭ.

Биохимический анализ крови направлен на отражение функционирования печени. В анализе особо важными являются следующие показатели:

  • АЛТ и АСТ – они попадают в кровь в случаях уничтожения клеток печени. При скрытой форме протекания подобного заболевания такие показатели нередко выступают единственными признаками протекания в организме патологического процесса. Нормой для представительниц женского пола является 31 МЕ/л, а у мужчин – 37. При наличии гепатита подобные показатели будут повышены;
  • билирубин – указывает на тяжесть проявление такого симптома, как желтуха. Лёгкой форме будут соответствовать значения до 85 мкмоль/л, а на тяжёлую укажут показатели свыше 170 мкмоль/л для представителей обоих полов.
  • активность других ферментов печени.

С помощью анализа ПЦР на гепатит С клиницисты смогут выявить генетический материал возбудителя недуга и его количество. Преимуществом такой методики является возможность определения вируса при его минимальном количестве.

Такое исследование входит в список тех анализов, которые нужно сдать абсолютно всем пациентам, обратившимся за консультацией по поводу возможного наличия вирусного поражения печени.

Анализ может определить наличие инфицирования уже через пять дней со времени предполагаемого заражения. Положительный результат укажет на протекание патологии в организме, однако такой исход — ещё не повод для отчаяния и паники. Это обуславливается несколькими причинами:

  • анализ крови иногда может дать ложноположительный анализ на гепатит С. Такой итог может говорить о развитии аутоиммунной патологии, формировании злокачественных или доброкачественных образований, широком спектре других расстройств вирусной этиологии. Помимо этого, он нередко является следствием индивидуальных особенностей иммунной системы;
  • подобный результат, помимо всего прочего, указывает и на наличие инфекции в прошлом;
  • данное заболевание является излечимым – оно хорошо поддаётся консервативной терапии.

Полимеразная цепная реакция существует нескольких разновидностей:

  • качественный и количественный анализы на гепатит С;
  • генотипирование.

Анализ на гепатит С ПЦР качественный – позволяет понять, присутствует ли вирус в крови или нет. Стандартной чувствительностью такого теста будут показатели от 10 до 500 МЕ/мл. Его исходами могут быть два результата:

  • присутствует – говорит об активном размножении вируса;
  • отсутствует – количество возбудителя в крови человека находится ниже уровня восприимчивости такого лабораторного исследования.

ПЦР количественный – это значение вирусной нагрузки, отображающее содержание РНК вируса один кубический сантиметр крови. Такая методика не только является частью диагностических мероприятий, но также даёт возможность контролировать эффективность противовирусной терапии. Таким образом, при помощи такого теста уточняется несколько важных факторов:

  • инфекционность – это возможность передачи возбудителя от одного человека к другому. Чем выше количество РНК гепатита, тем больше шансы заразить здорового человека, в частности, во время полового контакта, а также при пользовании одной бритвой или маникюрными принадлежностями;
  • выбор тактики терапии;
  • продолжительность приёма противовирусных препаратов и прогноз.

Количественный ПЦР-анализ на гепатит зависит от разновидности лабораторного теста и границ его восприимчивости. Нижним значением является не более 600.000 МЕ/мл, средние показатели находятся в пределах от 600.000 до 700.000 МЕ/мл. Результаты от 800.000 МЕ/мл и более уже считаются высокой степенью содержания РНК вируса.

Генотипирование позволяет выявить, каким именно из одиннадцати генотипов возбудителя заразился человек.

После расшифровки анализов клиницист может назначить индивидуальную схему медикаментозной терапии.

ИФА – иммуноферментный тест, являющийся наиболее распространённым и наиболее точным тестом, который позволяет определить наличие или отсутствие антител к возбудителю гепатита.

ИХА – иммунохроматографическое исследование, представляющее собой экспресс-тест для выявления антител. Он осуществляется при помощи специальных полосок и кассет. Несмотря на то что такая методика является довольно новой и только в начале пути своего совершенствования, выделяют один её недостаток, а именно низкую точность. Индикаторные полоски далеко не во всех случаях способны показать итог теста с точностью до сотых.

В независимости от того, какие анализы нужно сдать, они требуют тщательной подготовки пациента. Для получения достоверных результатов анализов на гепатит С, пациенту рекомендуется:

  • сдавать анализы в первой половине дня, обязательно на голодный желудок;
  • непосредственно перед лабораторной диагностикой запрещается пить кофе, чаи, соки или другие напитки. Можно принимать внутрь только очищенную воду без газа;
  • за двое суток до осуществления исследований стоит отказаться от употребления жирных и острых блюд, а также от распития спиртного;
  • минимум за два часа до какого-либо анализа нужно ограничиться от выкуривания сигарет.

Основу лабораторной диагностики составляет ПЦР, во время расшифровки которого, учитываются:

  • положительный или отрицательный результат качественного анализа;
  • количество копий вируса, которое при подобном недуге всегда будет показывать выше 800.000 МЕ/мл.

Во время расшифровки особое внимание обращают на значение второго пункта.

В некоторых случаях наблюдается такая ситуация, когда антитела к гепатиту С положительны, а ПЦР — отрицательный. Это свидетельствует о ранее перенесённом заболевании данной этиологии.

Для прохождения лабораторной диагностики необходимо обратиться к инфекционисту. Только этот специалист сможет провести грамотное первичное обследование и расшифровку результатов анализов.

источник

Вирусом гепатита С заражено около 170 миллионов человек по всему миру. Болезнь коварная – при смазанной симптоматике начала заболевания ее дебют проходит незамеченным. Часто развиваются хронические формы, которые приводят к разрушению клеток печени.

Исходом гепатита С становятся цирроз или рак печени. Для выявления маркеров заболевания в первую очередь назначают иммуноферментный анализ – ИФА на гепатит С.

Анализ основан на способности специфических антител (белков крови) связываться с антигеном (частицами вируса), при этом один из них «помечен» ферментом. Образовавшийся комплекс реагирует с подкрашенным субстратом, что фиксируется спектрофотометрическими методами.

Иммуноферментный анализ (ИФА) на гепатит С показывает не присутствие самого вируса-возбудителя в крови, а ответ иммунной системы на столкновение с ним. Количество вируса в крови на момент проведения ИФА может быть ничтожно мало, за порогом определения. А антитела – иммуноглобулины, которые выработались при встрече с «агрессором», продолжают циркулировать в кровеносной системе.

Именно присутствие антител определяется при ИФА. Появляются они в срок от нескольких дней до нескольких недель после заражения гепатитом С.

ИФА выявляет циркулирующие иммуноглобулины даже в малой концентрации. По их типу можно судить о давности заболевания. В острый период, когда вирус гепатита активно размножается, определяют иммуноглобулины класса М.

В хронической стадии (спустя 6 мес. от начала заболевания) при ИФА обнаруживают иммуноглобулины класса G. Последний тип также может свидетельствовать не о хронизации процесса, а о самом факте столкновения иммунной системы с вирусом гепатита С в прошлом.

Обследование на маркеры гепатита С, к которым относятся антитела – иммуноглобулины, давно стала рутинной процедурой. ИФА назначают при:

  • острых и хронических заболеваниях печени;
  • желтухе неясного генеза;
  • обследовании перед хирургическими вмешательствами;
  • стандартном обследовании доноров крови;
  • постановке на учет в женской консультации при беременности. Повторно анализ сдают за 2-4 недели до предполагаемой даты родов;
  • прохождении гемодиализа;
  • профилактических осмотрах медработникам, контактирующим с компонентами крови и другими биологическими жидкостями;
  • незащищенном сомнительном половом контакте;
  • рождении детей от инфицированных матерей.

В порядке рекомендаций анализ на гепатит С назначают родственникам больного, близко с ним контактирующим. В 50% случаев парентеральный источник заражения выявить не удается. Инфекционисты предполагают бытовой путь передачи, когда зараженная кровь может попадать в кровоток здорового человека через кожные ранки и трещины. У этой версии много противников.

За 48 часов до ИФА исключают из пищи алкоголь, жареное, жирное и соленое. За 12 часов до забора крови из вены пациенту необходимо воздержаться от приема каких-либо лекарств. Анализ сдают утром натощак.

Наибольшее распространение получил «твердофазный» ИФА. Твердая фаза – это материал, на котором фиксируют антитела или антигены. В этом качестве используют мембраны, активно собирающие на себя белки (лабораторные планшеты, стенки пробирки, шарики и бусины из полипропилена или поливинилхлорида, нитроцеллюлозу и пр.).

Вне зависимости от разновидности ИФА, в его проведении существует строгая этапность:

  1. На первой стадии исследуемый материал «узнается» специфическим антителом и связывается с ним, образуя иммунный комплекс;
  2. На второй стадии с образовавшимся иммунным комплексом реагирует помеченный ферментом так называемый конъюгат – антитело или антиген;
  3. Заключительная стадия ИФА позволяет уловить и зарегистрировать сигнал от ферментной метки.

Вариантов выполнения анализа достаточно много. Их классифицируют:

  • По типу реагентов, используемых на первом этапе ИФА:
    a) конкурентный;
    b) неконкурентный;
  • По степени однородности среды, в которой происходят реакции ИФА:
    a) гомогенные;
    b) гетерогенные;
  • 3) По принципу определения исследуемого вещества:
    a) прямой;
    b) непрямой. Именно непрямой метод ИФА используется при выявлении маркеров гепатита С.

При этом методе используют стандартные антитела к вирусу гепатита С, помеченные меткой – ферментом.

  1. В лунки лабораторного планшета (если выбрали именно его в качестве твердой фазы) помещают сыворотку крови пациента. Выдерживают 20 минут, чтобы антигены (белки вируса гепатита С) успели прикрепиться к стенкам.
  2. Добавляют стандартные помеченные ферментом антитела к гепатиту С. Выдерживают еще несколько часов – за это время образуются иммунные комплексы антиген-антитело с меткой. Чем больше антигенов в исследуемой сыворотке, тем больше таких комплексов образуется.
  3. Содержимое лунок промывается от несвязанных белков. Затем добавляют субстрат. Это вещество при реакции с ферментом-меткой меняет цвет. Чем больше комплексов при ИФА образовалось, тем большее количество фермента может воздействовать на субстрат и тем ярче хроматографическая реакция. Она считывается ИФА-ридером и оценивается количественно.

При этом методе ИФА стандартный антиген связывается с антителами сыворотки пациента. К образовавшемуся иммунному комплексу добавляют меченые ферментом стандартные антитела к иммуноглобулинам.

  1. В лунки лабораторного планшета помещают стандартный антиген гепатита С (частички вируса). Антиген прикрепляется к стенке, незакрепленные белки вымываются лаборантом.
  2. В подготовленные таким образом лунки помещают исследуемый материал (сыворотку крови), инкубируют. Есть обязательные контрольные лунки со стандартными реагентами. За время инкубации образуются комплексы антиген-антитело. Непрореагировавшие компоненты опять вымывают.
  3. В лунки добавляют меченые ферментом антитела к иммуноглобулинам М и G. Эти белки прореагируют с образовавшимся ранее комплексом, только если в исследуемом образце есть антитела к гепатиту С. Промывают.
  4. Добавляют еще один компонент – субстрат. Это химическое соединение разрушается ферментом из комплекса антиген-антитело. При этом образуется окрашенное вещество, количество которого фиксируют специальным прибором – ИФА-ридером. Чем больше фермента, тем сильнее он прореагирует с субстратом и тем ярче будет цветовой сигнал.

Высокая чувствительность ИФА иногда играет с пациентом злую шутку. Не каждый положительный результат означает заболевание и не каждый отрицательный – гарантия свободы от вируса.

При положительном ИФА определяют генотип вируса и определяют количество циркулирующих в крови вирусов с помощью ПЦР (полимеразной цепной реакции).

При ИФА выявляют маркеры острой фазы заболевания (иммуноглобулины класса М (IgM)) и иммуноглобулины класса G (IgG). Последние могут означать, что у пациента хронический гепатит С или то, что иммунная система хотя бы раз в прошлом сталкивалась с этим вирусом и выработался иммунитет.

Выявление одновременно двух типов иммуноглобулинов при ИФА говорит об обострении хронического гепатита С.

Самый вероятный вариант – пациент не болен и его иммунная система никогда не сталкивалась с вирусом.

Псевдоотрицательный результат при ИФА можно получить в том случае, если пациент инфицировался относительно недавно и защитные антитела просто не успели выработаться. Это так называемое «диагностическое окно». Его срок – 6 месяцев.

Наконец, нельзя полностью исключить ошибку лаборатории.

ИФА реже дает погрешности по сравнению с ПЦР. Тем не менее, исследуемые вещества – белки. Реагент может связаться с неспецифическим белком сыворотки крови. Ложноположительный ИФА на гепатит С нередок в случаях:

  • выполненной накануне вакцинации;
  • при аутоиммунных патологиях или туберкулезе, рассеянном склерозе, склеродермии;
  • опухолевом процессе;
  • инфекциях, протекающих с гипертермией (грипп, ОРЗ и пр.).

Грешат ложноположительными результатами исследования на маркеры гепатита С у беременных. Довольно часто ИФА дает ложное заключение о наличии антител пациентам со II группой крови.

Полимеразная цепная реакция выявляет присутствие вируса в крови и его количество, помогает определить генотип. ИФА «видит» антитела – клетки, вырабатываемые спустя какое-то время после инфицирования и остающиеся в организме после уничтожения «врага».

Вариантов, при которых у пациентов с гепатитом С ПЦР отрицательный, а ИФА – положительный, два. Самый вероятный – сформировался иммунитет к вирусу, а сам он уничтожен иммунной системой или лекарствами.

Второй: нельзя исключить ошибку лаборатории при проведении ПЦР.

Диагностикой заболеваний должен заниматься врач. Он учитывает все нюансы обследования. А лабораторная диагностика, в том числе ИФА – только вспомогательный метод, не лишенный погрешностей.

источник