Анализ ифа на гепатит отрицательный

Для определения степени поражения печени назначают биопсию.

При изменениях результатов анализов вне нормы, это может свидетельствовать о возвращении болезни и размножении вируса. На получение недостоверного результата могут повлиять отдельные факторы, например, загрязнение образцов; присутствие в крови гепарина и веществ, замедляющих действие компонентов ПЦР; ошибки лабораторий; несоблюдение правил проведения теста.

Также результат в нескольких лабораториях может различаться, возможно, была другая методика проведения исследований. Чтобы узнать, насколько поражена печень и опасность болезни, недостаточно провести количественный ПЦР гепатита. Дополнительно проходят биохимические процедуры и биопсию.

Планируя лечение, проводят генотипирование вируса. В связи с тем, что гепатит С способен изменяться, существует несколько групп. Для разных типов лечение может отличаться. Бывают ситуации, когда присутствует несколько видов, но анализ находит один, тот, что преобладает. Тогда тест пересдают.

Методика ПЦР дает возможность дать заключение и назначить правильное лечение. Плюсы методики:

• Быстрота результатов — не требует разграничения и выращивания видов возбудителя. Автоматизация процесса позволяет обрабатывать и изучать материал с получением результата за 4−5 часов.
• Прямота определения возбудителя — найдя особую часть ДНК, прямо указывает на наличие недуга. Например, ИФА — находит белки-маркеры (продукты жизнедеятельности бактерий), что не дает точного подтверждения наличия болезни.
• Специфичность — исследуется вещество, характерное только для конкретного возбудителя, что исключает реакцию на ложные совместно-реагирующие агенты.
• Восприимчивость — может обнаружить самое малое количество вируОписание итогаса.
• Универсальность — основывается на нахождении фрагментов ДНК или РНК конкретных организмов. Это дает возможность провести диагностику для любых агентов из одного биоматериала, если другие методы бессильны.
• Выявляет не только явные, но и скрытые инфекции — эффективен для изучения агентов трудно выращиваемых, не выращиваемых, стойких.
• https://www.youtube.com/watch?v=lBi-d6jAKxQ

Посредством этого исследования провести диагностику могут каждому для удостоверения факта отсутствия болезни. Но для достоверных фактов нужно четко соблюдать инструкции. ПЦР используют в разных отраслях: криминалистике, для установления отцовства, для диагностирования различных вирусов, для выявления аллергии на лекарства, клонировании генов, мутагенезе, секвенирование ДНК.

Следует помнить, что бывает ложноположительный анализ на гепатит С, и такие результаты требуют перепроверки. Ведь гепатит С является самой тяжелой формой болезни, и положительная проба воспринимается как приговор.

Ряд причин может вызвать ошибочное тестирование болезни. Ложноположительный анализ на гепатит С хотя и встречается достаточно редко, но должен учитываться при диагностировании. Ошибка врачей в этом вопросе может нанести серьезную психологическую травму человеку.

Установить болезнь и назначить лечение могут только специализированные врачи: врач-инфекционист — на стадии острого гепатита и врач-гепатолог или врач-гастроэнтеролог — при хронической форме. Для первичного диагностирования гепатита применяется иммуноферментный метод (ИФА). Этим способом устанавливаются маркеры наличия HCV-вируса в венозной крови человека, путем выявления и определения концентрации антител вируса.

Постановка диагноза методом ИФА имеет определенные сложности. Наличие антител не может однозначно указывать на наличие болезнетворного вируса в организме в данный момент: вирус может быть уже уничтожен, или антитела выработаны в результате реакции иммунной системы на другую инфекцию. Если получен отрицательный результат, то все ясно: организм никогда не имел контакта с вирусом гепатита. Другое дело — положительный результат, который может неправильно указывать на болезнь.

Для уточнения диагноза существуют иные способы исследования. Наиболее простые исследования — общий анализ крови, биохимический анализ крови, определение полимеразной цепной реакции ПЦР, УЗИ печени, селезенки, желчного пузыря и поджелудочной железы. Положительный итог первичного исследования проверяется дополнительным тестом рекомбинантного иммуноблотинга РИБА.

Методом ИФА определяется суммарное содержание антител к вирусу гепатита С. В общем случае антитела подразделяются на IgM тип, вырабатываемый при острой форме болезни, и IgG тип, характерный для хронического процесса. Антитела IgM удается обнаружить через 10-14 дней после инфицирования организма, и существуют они 3-5 месяцев. Антитела IgG вырабатываются значительно позже, но продолжают находиться в организме в течение 8-10 лет даже после уничтожения вируса.

Отрицательный результат проверки ИФА говорит об отсутствии антител обоих типов. При этом следует помнить, что он не учитывает возможность проникновения вируса в организм в течение последних двух недель перед исследованием, так как антитела не успели выработаться.

Положительный результат указывает на наличие антител обоих типов или одного из них. Чаще всего это указывает на начало острой вирусной формы гепатита С или протекание хронической формы заболевания. Однако такой показатель может стать следствием уже вылеченной болезни или указывать, что человек является только носителем вируса. Иногда тест дает ложноположительный анализ на гепатит С, что может быть вызвано рядом факторов.

В практике применения метода ИФА ложноположительный результат составляет до 15% от всех положительных результатов, причем для беременных женщин этот процент значительно выше.

К такому показателю могут привести следующие причины:

• аутоиммунные формы заболеваний;
• доброкачественные и злокачественные образования;
• инфицирование другими сложными болезнетворными микроорганизмами.

Достаточно часто диагноз устанавливается ложно у беременных женщин. Это вызвано тем, что при беременности протекает процесс гестации, который сопровождается образованием специфических белков, изменением гормонального фона организма и микроэлементного состава крови, увеличением содержания цитокинов. Таким образом, пробы кровяной плазмы беременных женщин становятся сложными для однозначного анализа и ошибочно указывают на наличие антител к различным инфекционным вирусам, в т.ч. вирусу гепатита С.

Ложноположительные результаты могут устанавливаться у людей, зараженных другими инфекциями. Это связано с индивидуальными особенностями иммунной системы человека, которая неоднозначно отреагировала на проникновение болезнетворного вируса. Ситуацию усугубляет прием иммунодепрессантов.

На появление ложноположительного результата может повлиять человеческий фактор. Причины самые прозаические:

• недостаточная квалификация врача, проводящего анализ;
• ошибка лаборанта;
• случайная подмена пробы;
• нарушения в подготовке образцов крови;
• воздействие на образцы повышенной температуры.

В настоящее время общепризнаны следующие причины, вызывающие ложные анализы:

1. Малоисследованные перекрестные реакции.
2. Беременность; наличие в организме рибонуклеопротеинов.
3. Острая инфекция верхних дыхательных путей.
4. Сложные формы гриппа, различные ретровирусы.
5. Недавняя вакцинация от гриппа, гепатита В или столбняка.
6. Болезни в форме туберкулеза, герпеса, малярии, некоторых видов лихорадки, артрита, склеродермии, рассеянного склероза, грыжи, почечной недостаточности.
7. Недавнее проведение альфа-интерфероновой терапии.
8. Индивидуальное повышение содержания билирубина в крови.
9. Проявление липемической сыворотки, индивидуальные особенности иммунной системы, выраженные в естественной выработке антител и активности иммунных комплексов, и некоторые другие.

Гепатит С — это острая форма инфекционного поражения печени человека. Он вызывается HCV-вирусом, имеющим несколько генотипов и множество разновидностей.

Мутационные способности вируса вызывают сложности в диагностировании и лечении и приводят к тому, что до сих пор вакцина против этого заболевания не разработана.

Для лечения печени наши читатели успешно используют Leviron Duo. Видя, такую популярность этого средства мы решили предложить его и вашему вниманию.
Подробнее здесь…

Начальный период болезни протекает медленно и обычно не проявляет заметных симптомов. Инкубационный период такого гепатита может достигать 5 месяцев (наиболее характерно — 50 дней). Вялотекущая фаза (до 10 дней) может проявляться лишь в небольшой общей слабости организма и бессоннице. Активная аккумуляция антител и активизация аминотрансфераз приводит к потемнению мочи и желтухе на теле и белках глаз. Последующее прогрессирование болезни вызывает белизну кала, зуд и заметное увеличение печени. Содержание билирубина и аминотрансфераз в крови резко увеличивается.

Гепатит С — трудноизлечимое заболевание, и только порядка 20% людей излечиваются полностью. Почти столько же людей, перенесших острое заболевание, получают статус носителей вируса гепатита С. Они, как правило, не болеют (т.е. печень остается в норме), но могут диагностироваться как больные при случайном обследовании на гепатит или, что гораздо хуже, стать источником инфекции для других. Как показывает практика, почти у двух третей переболевших заболевание переходит в хроническую форму. Такая форма болезни может долго протекать без серьезных осложнений, но имеет характерные симптомы, такие как:

• периодическая тошнота;
• болевые ощущения в области живота;
• нудные суставные боли;
• частые поносы.

В случае получения положительного результата по методу ИФА его необходимо проверить другими способами. Прежде всего проводится исследование ПЦР. Метод ПЦР используется:

• для уточнения результата ИФА;
• отделения гепатита С от других типов гепатитов;
• определения стадии развития болезни;
• контроля проведения лечебных процедур.

Этот способ позволяет определить содержание, концентрацию и активность непосредственно вируса гепатита С, что позволяет более точно диагностировать заболевание. В то же время метод ПЦР тоже может привести к ложноположительному результату на фоне перекрестных реакций. Отсутствие дополнительных серологических маркеров не способно полностью исключить ошибку в диагностировании.

Всемирная организация здравоохранения рекомендует проведение трехкратных подтверждающих исследований. Всеми доступными методами должен определяться уровень трансаминазы, концентрация HCV-вируса, генотип вируса, уровень виремии в крови, гистологические процессы в печени.

Весь комплекс диагностирования должен включать определенные исследования. Анализ на ИЛ-28В определяет генотип вируса. Общий анализ крови проводится на проверку содержания эритроцитов, гематокрита, лейкоцитов, тромбоцитов, моноцитов, СОЭ и других компонентов крови. Биохимический анализ крови направлен на выявление содержания билирубина, АЛТ, АСТ, сывороточного железа и других составов. Оценка функции печени производится по белковым фракциям, альбумину, коагулограмме.

Необходимо провести тесты на другие вирусные гепатиты, а также на ВИЧ. Оценка стадии болезни проводится путем биопсии печени, эластометрическими методами и фибротестами. Используются возможности УЗИ. Количественные исследования проводятся методом ПЦР для выявления антител к тиреоглобулину и тиреопероксидазе, тиреотропного гормона. В дополнение к ПЦР применяется УЗИ щитовидной железы.

Тесты на аутоиммунные отклонения должны быть направлены на установление антимитохондриальных и антинуклеарных антител, уточнение ревматоидного и антинуклеарного факторов. Только после проведения всего комплекса исследований можно утверждать положительный результат на гепатит С.

источник

Чтобы оценить работоспособность защитных функций организма и выявить точные диагностические данные, проводят иммуноферментный анализ. В случаях инфицирования человека обнаруживаются кардинальные изменения в крови и получают результат ИФА на гепатит С положительный.

Метод изучения биологического материала ИФА относят к определению иммунохимических реакций, открывающих взаимосвязи антигенов и антител. В ходе проведения анализа к молекуле антитела химическим способом подсаживают антиген-экзим, служащий маркером, который указывает на компоненты процесса.

К компонентам иммуноферментного анализа относят:

• антитела:
• антитела промаркированные;
• antibodies-attacking-a-virus1-440×264 антиген;
• субстрат фермента;
• краситель-индикатор.

Процесс выработки антител и иммуноглобулинов запускается в момент проникания в организм пациента посторонних генов или болезнетворных бактерий.

Задачей иммуноглобулинов считают нейтрализацию антигенов, происходящую при их взаимодействии. В ходе взаимодействия иммуноглобулины формируют комплект антиген-антител, которые имеют количественные и качественные характеристики. Эти значения и изучаются в процессе исследования анализа.

Для регистрации результата в ходе тестирования иммуноферментного анализа у человека забирают биологический материал. Обычно для этих целей используют венозную кровь, но в определенных ситуациях необходим анализ спинномозговой жидкости, стекловидного тела или околоплодных вод беременной женщины. Главной особенностью этого теста является его высокая достоверность, которая составляет порядка 80%.

К плюсам иммуноферментного анализа также относят:

• метод ИФА превосходит прочие тесты по точности определения важных показателей в десятки раз;
• для выполнения ИФА не требуется много времени, результаты, подтверждающие или опровергающие наличие вируса в организме, получают довольно быстро;
• стоимость проведения ИФА доступна большинству категорий населения, в отличие от прочих тестов;
• проведение ИФА дает возможность обнаружить проблему при начальных проявлениях, что значительно облегчает последующий процесс лечения человека;
• все стадии проведения этого анализа автоматизированы;
• высокая степень унификации теста.

К негативным проявлениям данного анализа относят возможность ложноположительных и отрицательных результатов. Сомнительные итоги могут регистрироваться при различных патологических состояниях, беременности и при употреблении медикаментозных средств, которые влияют на выработку организмом антител.

С помощью проведения иммуноферментного анализа подсчитывается количество антител к вирусу гепатита С. В ходе исследования определяется число этих образований по IgM типу, который соответствует острому течению недуга и IgG, обнаруживаемому при хронической форме.

Антитела IgM регистрируют в течение двух недель после инфицирования организма пациента вирусом гриппа С в острой форме, срок существования этих образований от 3 до 5 месяцев.

Антитела IgG вырабатываются спустя несколько месяцев после поражения организма, но их существование подтверждается в течение десяти лет, даже при условии полного выздоровления пациента.

Отрицательный результат тестирования дает возможность утверждать, что антитела обоих типов отсутствуют в организме и на данный момент гепатит С не обнаружен. Следует учитывать, что если человек заразился в течение последних двух недель, определение патологии невозможно.

Положительный результат теста показывает наличие того или иного типа антител в организме пациента. Данный показатель характеризует инфицирование гепатитом С в острой или хронической форме. Следует учитывать, что фиксация этих образований не дает возможность однозначно указывать на заражение человека, вполне допустимо, что он является только носителем. Бывают случаи, когда при расшифровке данных фиксируется ложноположительный результат.

Это происходит в результате фиксирования лабораторными приборами антител, которые производятся защитной системой человека в ответ на следующие патологии:

• аутоиммунное воспаление;
• проникновение в организм пациента прочих инфекций;
• при беременности.

Статистика проведения иммуноферментного исследования показывает, что ложноположительный вывод регистрируется в 15% всех результатов, подтверждающих наличие вируса. Для беременных женщин данный показатель еще выше.

Недостоверный вывод тестирования на гепатит С выявляется при сбоях функционирования внутренних органов и технических сбоев, то есть халатного отношения медицинского персонала к своим обязанностям. Ошибки обнаруживаются не более чем в 15% случаев, но их можно избежать, выполняя следующие правила:

Перед сдачей анализа нельзя курить

• для сдачи анализа необходимо выбирать только проверенные, сертифицированные лаборатории с обученным медицинским персоналом;
• накануне проведения анализов следует прекратить употребление любых медикаментозных препаратов, если прием лекарства обусловлен состоянием пациента, он должен предупредить персонал лаборатории об этом факте;
• процедура обычно проводится утром натощак, но перед этим пациенту не следует проявлять излишнюю физическую активность и курить;
• непосредственно перед проведением анализа рекомендуется определить температуру тела, она не должна превышать норму.

При сомнении в правильности выводов тестирования, назначается повторный анализ. В идеале требуется проведение трех исследований биологического материала на гепатит С.

Если первый тест показал наличие антител в крови пациента, а последующие два не выявили эти образования, можно утверждать, что инфицирования организма вирусом гепатита С нет. Существует ряд заболеваний, которые влияют на результат тестирования крови на наличие вируса гепатита С.

Некоторые патологии сопровождаются выработкой антител, и в этом случае подтверждение наличия вируса гепатита С в организме пациента производится с помощью других методов исследования, так как многократно повторяющиеся ошибки при ИФА анализе не дают гарантии правильного диагноза.

Комплексное изучение с применением исследования биологического материала человека в лабораторных условиях и с использованием инструментальных методов позволит выявить истинную причину недомогания, и исключить гепатит С.

Чаще всего причиной ложноположительного результата анализа являются следующие патологии:

• инфекционные заболевания острого или хронического типа;
• рак или доброкачественные новообразования во внутренних органах;
• заболевания аутоиммунного типа, при течении которых образуются антитела к собственным клеткам организма пациента;
• туберкулез;
• малярия;
• склеродермия;
• герпес;
• рассеянный склероз;
• артрит.

Все перечисленные заболевания являются причиной возникновения сбоев в иммунной системе человека, в результате чего иммуноглобулины начинают вырабатываться с превышением нормы, что и становится помехой для постановки точного диагноза и подтверждения наличия вируса гепатита С в организме пациента.

После соприкосновения с источником инфекции организм человека может успешно подавить воспаление, но антитела, при проведении ИФА, все еще обнаруживались в крови, что стало причиной ложноположительного результата теста.

Довольно часто такой результат тестирования регистрируется у беременных женщин, поэтому без повторного анализа, подтверждение заболевания у такого пациента, не проводится.

Причиной отклонений от нормы становится изменения в организме женщины, которая ждет ребенка. В этот период у нее происходит перестройка внутренних органов, что выражается в следующих процессах:

• изменяется гормональный фон;
• в крови формируются специфические белки, вследствие чего меняется ее состав;
• уровень цитокинов увеличивается.

Помимо перечисленных факторов, влияющих на итоги иммуноферментного анализа, нужно отметить ошибки медицинского персонала, приводящие к обнаружению ложноположительных выводов тестирования:

• недостаточная квалификация персонала, проводящего забор биологического материала;
• сбои в функционировании лабораторного оборудования;
• подмена проб по халатности;
• ненадлежащее хранение биологического материала (нарушение температурного режима).

При проведении иммуноферментного анализа следует учитывать, что пациент мог недавно получить прививку против гриппа, гепатита или столбняка. Этот факт нужно обязательно довести до сведения лечащего врача или медицинского персонала в лаборатории, чтобы была назначена другая дата исследования.

Регистрация антител в биологическом материале пациента, указывающая на присутствие вируса гепатита С в организме, не всегда является окончательным диагнозом заболевания. Ложноположительные результаты иммуноферментного анализа нередки, и повторные тесты часто опровергают первоначальные выводы.

При положительных анализах нужно обратиться к гепатологу

Нужно понимать, что ИФА тест дает возможность выявить количественные и качественные изменения в биологическом материале человека и определить характер течения заболевания. Делать окончательное заключение об инфицировании гепатитом С можно только после комплексного изучения состояния пациента с применением других лабораторных и инструментальных исследований.

Если положительный результат выявлен надлежащим образом, человеку следует отправиться к специалистам: инфекционисту и гепатологу. Только профильный врач сможет определить, какие тесты необходимо пройти дополнительно до назначения курса терапии

По данным медицинской статистики, в мире инфицировано гепатитом С почти 4% населения, но этот показатель явно занижен, так как многие носители недуга не подозревают о своей проблеме. Поэтому проведение ИФА теста в качестве профилактической меры поможет выявить заболевание на начальной стадии и быстро справиться с болезнью.

источник

Анализ на гепатит С необходимо сдавать всем пациентам с подозрением на подобное расстройство. Существует несколько разновидностей подобной диагностической меры. Они указывают, какой именно вирус, а точнее, его разновидность, стала возбудителем недуга.

Необходимость проведения лабораторных обследований заключается в том, что в некоторых случаях подобная болезнь может протекать без выражения каких-либо признаков. Кроме этого, стоит учесть, что вирусный гепатит не имеет специфической симптоматики, отчего его можно ошибочно принять за ряд других патологий ЖКТ. Из этого следует, что диагностика гепатита С основывается на данных лабораторного и инструментального обследования пациентов.

Для окончательного утверждения или отрицания инфицирования человека этим вирусом необходимо проведение следующих тестов:

• общий анализ крови – показывающий нарушение функционирования поражённого органа;
• биохимический анализ крови на АЛТ, АСТ и билирубин. Такое исследование даст возможность получить информацию о разрушении печёночных клеток;
• иммуноферментный анализ – это наиболее эффективная процедура, указывающая на стадию протекания подобного поражения печени, тип вируса и его количественные значения;
• ПЦР-диагностика – укажет на наличие вируса и его происхождение;
• иммунохроматографический анализ – представляет собой экспресс-тест, который позволяет в короткие сроки установить наличие у пациента антител.

Показаниями к осуществлению вышеописанных анализов на гепатит С выступают:

• незащищенный половой акт с заражённым человеком;
• появление одного или нескольких симптомов подобного недуга. К основным из них стоит отнести желтуху, тяжесть, дискомфорт и боль в зоне правого подреберья, снижение аппетита, нарушение сна, частые приступы тошноты и рвоты;
• переливание крови;
• недавнее нанесение татуировок или пирсинга;
• наркомания – инфицироваться можно через использование одного шприца для инъекционного введения наркотиков;
• наличие у человека в близком окружении людей с подобным диагнозом – высока вероятность инфицирования при пользовании бытовыми предметами с переносчиком вируса.

Проводить расшифровку анализов должен только тот врач, который их назначил. Это обуславливается тем, что клиницист владеет необходимой информацией о состоянии больного.

Общий анализ крови при гепатите даёт возможность получить клиницисту полную информацию об общем состоянии и функционировании внутренних органов пациента. Изменения в таких показателях не будут специфическими, но при различном протекании вирусного гепатита они будут иметь особенные изменения. Для гепатита С характерны такие отклонения:

• снижение содержания лейкоцитов и уровня гемоглобина;
• повышение лимфоцитов среди всего количества лейкоцитов;
• нарушение процесса свёртываемости крови;
• уменьшение концентрации тромбоцитов;
• возрастание СОЭ.

Биохимический анализ крови направлен на отражение функционирования печени. В анализе особо важными являются следующие показатели:

• АЛТ и АСТ – они попадают в кровь в случаях уничтожения клеток печени. При скрытой форме протекания подобного заболевания такие показатели нередко выступают единственными признаками протекания в организме патологического процесса. Нормой для представительниц женского пола является 31 МЕ/л, а у мужчин – 37. При наличии гепатита подобные показатели будут повышены;
• билирубин – указывает на тяжесть проявление такого симптома, как желтуха. Лёгкой форме будут соответствовать значения до 85 мкмоль/л, а на тяжёлую укажут показатели свыше 170 мкмоль/л для представителей обоих полов.
• активность других ферментов печени.

С помощью анализа ПЦР на гепатит С клиницисты смогут выявить генетический материал возбудителя недуга и его количество. Преимуществом такой методики является возможность определения вируса при его минимальном количестве.

Такое исследование входит в список тех анализов, которые нужно сдать абсолютно всем пациентам, обратившимся за консультацией по поводу возможного наличия вирусного поражения печени.

Анализ может определить наличие инфицирования уже через пять дней со времени предполагаемого заражения. Положительный результат укажет на протекание патологии в организме, однако такой исход — ещё не повод для отчаяния и паники. Это обуславливается несколькими причинами:

• анализ крови иногда может дать ложноположительный анализ на гепатит С. Такой итог может говорить о развитии аутоиммунной патологии, формировании злокачественных или доброкачественных образований, широком спектре других расстройств вирусной этиологии. Помимо этого, он нередко является следствием индивидуальных особенностей иммунной системы;
• подобный результат, помимо всего прочего, указывает и на наличие инфекции в прошлом;
• данное заболевание является излечимым – оно хорошо поддаётся консервативной терапии.

Полимеразная цепная реакция существует нескольких разновидностей:

• качественный и количественный анализы на гепатит С;
• генотипирование.

Анализ на гепатит С ПЦР качественный – позволяет понять, присутствует ли вирус в крови или нет. Стандартной чувствительностью такого теста будут показатели от 10 до 500 МЕ/мл. Его исходами могут быть два результата:

• присутствует – говорит об активном размножении вируса;
• отсутствует – количество возбудителя в крови человека находится ниже уровня восприимчивости такого лабораторного исследования.

ПЦР количественный – это значение вирусной нагрузки, отображающее содержание РНК вируса один кубический сантиметр крови. Такая методика не только является частью диагностических мероприятий, но также даёт возможность контролировать эффективность противовирусной терапии. Таким образом, при помощи такого теста уточняется несколько важных факторов:

• инфекционность – это возможность передачи возбудителя от одного человека к другому. Чем выше количество РНК гепатита, тем больше шансы заразить здорового человека, в частности, во время полового контакта, а также при пользовании одной бритвой или маникюрными принадлежностями;
• выбор тактики терапии;
• продолжительность приёма противовирусных препаратов и прогноз.

Количественный ПЦР-анализ на гепатит зависит от разновидности лабораторного теста и границ его восприимчивости. Нижним значением является не более 600.000 МЕ/мл, средние показатели находятся в пределах от 600.000 до 700.000 МЕ/мл. Результаты от 800.000 МЕ/мл и более уже считаются высокой степенью содержания РНК вируса.

Генотипирование позволяет выявить, каким именно из одиннадцати генотипов возбудителя заразился человек.

После расшифровки анализов клиницист может назначить индивидуальную схему медикаментозной терапии.

ИФА – иммуноферментный тест, являющийся наиболее распространённым и наиболее точным тестом, который позволяет определить наличие или отсутствие антител к возбудителю гепатита.

ИХА – иммунохроматографическое исследование, представляющее собой экспресс-тест для выявления антител. Он осуществляется при помощи специальных полосок и кассет. Несмотря на то что такая методика является довольно новой и только в начале пути своего совершенствования, выделяют один её недостаток, а именно низкую точность. Индикаторные полоски далеко не во всех случаях способны показать итог теста с точностью до сотых.

В независимости от того, какие анализы нужно сдать, они требуют тщательной подготовки пациента. Для получения достоверных результатов анализов на гепатит С, пациенту рекомендуется:

• сдавать анализы в первой половине дня, обязательно на голодный желудок;
• непосредственно перед лабораторной диагностикой запрещается пить кофе, чаи, соки или другие напитки. Можно принимать внутрь только очищенную воду без газа;
• за двое суток до осуществления исследований стоит отказаться от употребления жирных и острых блюд, а также от распития спиртного;
• минимум за два часа до какого-либо анализа нужно ограничиться от выкуривания сигарет.

Основу лабораторной диагностики составляет ПЦР, во время расшифровки которого, учитываются:

• положительный или отрицательный результат качественного анализа;
• количество копий вируса, которое при подобном недуге всегда будет показывать выше 800.000 МЕ/мл.

Во время расшифровки особое внимание обращают на значение второго пункта.

В некоторых случаях наблюдается такая ситуация, когда антитела к гепатиту С положительны, а ПЦР — отрицательный. Это свидетельствует о ранее перенесённом заболевании данной этиологии.

Для прохождения лабораторной диагностики необходимо обратиться к инфекционисту. Только этот специалист сможет провести грамотное первичное обследование и расшифровку результатов анализов.

источник

Вирусом гепатита С заражено около 170 миллионов человек по всему миру. Болезнь коварная – при смазанной симптоматике начала заболевания ее дебют проходит незамеченным. Часто развиваются хронические формы, которые приводят к разрушению клеток печени.

Исходом гепатита С становятся цирроз или рак печени. Для выявления маркеров заболевания в первую очередь назначают иммуноферментный анализ – ИФА на гепатит С.

Анализ основан на способности специфических антител (белков крови) связываться с антигеном (частицами вируса), при этом один из них «помечен» ферментом. Образовавшийся комплекс реагирует с подкрашенным субстратом, что фиксируется спектрофотометрическими методами.

Иммуноферментный анализ (ИФА) на гепатит С показывает не присутствие самого вируса-возбудителя в крови, а ответ иммунной системы на столкновение с ним. Количество вируса в крови на момент проведения ИФА может быть ничтожно мало, за порогом определения. А антитела – иммуноглобулины, которые выработались при встрече с «агрессором», продолжают циркулировать в кровеносной системе.

Именно присутствие антител определяется при ИФА. Появляются они в срок от нескольких дней до нескольких недель после заражения гепатитом С.

ИФА выявляет циркулирующие иммуноглобулины даже в малой концентрации. По их типу можно судить о давности заболевания. В острый период, когда вирус гепатита активно размножается, определяют иммуноглобулины класса М.

В хронической стадии (спустя 6 мес. от начала заболевания) при ИФА обнаруживают иммуноглобулины класса G. Последний тип также может свидетельствовать не о хронизации процесса, а о самом факте столкновения иммунной системы с вирусом гепатита С в прошлом.

Обследование на маркеры гепатита С, к которым относятся антитела – иммуноглобулины, давно стала рутинной процедурой. ИФА назначают при:

• острых и хронических заболеваниях печени;

• желтухе неясного генеза;

• обследовании перед хирургическими вмешательствами;

• стандартном обследовании доноров крови;

• постановке на учет в женской консультации при беременности. Повторно анализ сдают за 2-4 недели до предполагаемой даты родов;

• прохождении гемодиализа;

• профилактических осмотрах медработникам, контактирующим с компонентами крови и другими биологическими жидкостями;

• незащищенном сомнительном половом контакте;

• рождении детей от инфицированных матерей.

В порядке рекомендаций анализ на гепатит С назначают родственникам больного, близко с ним контактирующим. В 50% случаев парентеральный источник заражения выявить не удается. Инфекционисты предполагают бытовой путь передачи, когда зараженная кровь может попадать в кровоток здорового человека через кожные ранки и трещины. У этой версии много противников.

За 48 часов до ИФА исключают из пищи алкоголь, жареное, жирное и соленое. За 12 часов до забора крови из вены пациенту необходимо воздержаться от приема каких-либо лекарств. Анализ сдают утром натощак.

Наибольшее распространение получил «твердофазный» ИФА. Твердая фаза – это материал, на котором фиксируют антитела или антигены. В этом качестве используют мембраны, активно собирающие на себя белки (лабораторные планшеты, стенки пробирки, шарики и бусины из полипропилена или поливинилхлорида, нитроцеллюлозу и пр.).

Вне зависимости от разновидности ИФА, в его проведении существует строгая этапность:

1. На первой стадии исследуемый материал «узнается» специфическим антителом и связывается с ним, образуя иммунный комплекс;
2. На второй стадии с образовавшимся иммунным комплексом реагирует помеченный ферментом так называемый конъюгат – антитело или антиген;
3. Заключительная стадия ИФА позволяет уловить и зарегистрировать сигнал от ферментной метки.

Вариантов выполнения анализа достаточно много. Их классифицируют:

• По типу реагентов, используемых на первом этапе ИФА:
  a) конкурентный;
  b) неконкурентный;

• По степени однородности среды, в которой происходят реакции ИФА:
  a) гомогенные;
  b) гетерогенные;

• 3) По принципу определения исследуемого вещества:
  a) прямой;
  b) непрямой. Именно непрямой метод ИФА используется при выявлении маркеров гепатита С.

При этом методе используют стандартные антитела к вирусу гепатита С, помеченные меткой – ферментом.

1. В лунки лабораторного планшета (если выбрали именно его в качестве твердой фазы) помещают сыворотку крови пациента. Выдерживают 20 минут, чтобы антигены (белки вируса гепатита С) успели прикрепиться к стенкам.
2. Добавляют стандартные помеченные ферментом антитела к гепатиту С. Выдерживают еще несколько часов – за это время образуются иммунные комплексы антиген-антитело с меткой. Чем больше антигенов в исследуемой сыворотке, тем больше таких комплексов образуется.
3. Содержимое лунок промывается от несвязанных белков. Затем добавляют субстрат. Это вещество при реакции с ферментом-меткой меняет цвет. Чем больше комплексов при ИФА образовалось, тем большее количество фермента может воздействовать на субстрат и тем ярче хроматографическая реакция. Она считывается ИФА-ридером и оценивается количественно.

При этом методе ИФА стандартный антиген связывается с антителами сыворотки пациента. К образовавшемуся иммунному комплексу добавляют меченые ферментом стандартные антитела к иммуноглобулинам.

1. В лунки лабораторного планшета помещают стандартный антиген гепатита С (частички вируса). Антиген прикрепляется к стенке, незакрепленные белки вымываются лаборантом.
2. В подготовленные таким образом лунки помещают исследуемый материал (сыворотку крови), инкубируют. Есть обязательные контрольные лунки со стандартными реагентами. За время инкубации образуются комплексы антиген-антитело. Непрореагировавшие компоненты опять вымывают.
3. В лунки добавляют меченые ферментом антитела к иммуноглобулинам М и G. Эти белки прореагируют с образовавшимся ранее комплексом, только если в исследуемом образце есть антитела к гепатиту С. Промывают.
4. Добавляют еще один компонент – субстрат. Это химическое соединение разрушается ферментом из комплекса антиген-антитело. При этом образуется окрашенное вещество, количество которого фиксируют специальным прибором – ИФА-ридером. Чем больше фермента, тем сильнее он прореагирует с субстратом и тем ярче будет цветовой сигнал.

Высокая чувствительность ИФА иногда играет с пациентом злую шутку. Не каждый положительный результат означает заболевание и не каждый отрицательный – гарантия свободы от вируса.

При положительном ИФА определяют генотип вируса и определяют количество циркулирующих в крови вирусов с помощью ПЦР (полимеразной цепной реакции).

При ИФА выявляют маркеры острой фазы заболевания (иммуноглобулины класса М (IgM)) и иммуноглобулины класса G (IgG). Последние могут означать, что у пациента хронический гепатит С или то, что иммунная система хотя бы раз в прошлом сталкивалась с этим вирусом и выработался иммунитет.

Выявление одновременно двух типов иммуноглобулинов при ИФА говорит об обострении хронического гепатита С.

Самый вероятный вариант – пациент не болен и его иммунная система никогда не сталкивалась с вирусом.

Псевдоотрицательный результат при ИФА можно получить в том случае, если пациент инфицировался относительно недавно и защитные антитела просто не успели выработаться. Это так называемое «диагностическое окно». Его срок – 6 месяцев.

Наконец, нельзя полностью исключить ошибку лаборатории.

ИФА реже дает погрешности по сравнению с ПЦР. Тем не менее, исследуемые вещества – белки. Реагент может связаться с неспецифическим белком сыворотки крови. Ложноположительный ИФА на гепатит С нередок в случаях:

• выполненной накануне вакцинации;

• при аутоиммунных патологиях или туберкулезе, рассеянном склерозе, склеродермии;

• опухолевом процессе;

• инфекциях, протекающих с гипертермией (грипп, ОРЗ и пр.).

Грешат ложноположительными результатами исследования на маркеры гепатита С у беременных. Довольно часто ИФА дает ложное заключение о наличии антител пациентам со II группой крови.

Полимеразная цепная реакция выявляет присутствие вируса в крови и его количество, помогает определить генотип. ИФА «видит» антитела – клетки, вырабатываемые спустя какое-то время после инфицирования и остающиеся в организме после уничтожения «врага».

Вариантов, при которых у пациентов с гепатитом С ПЦР отрицательный, а ИФА – положительный, два. Самый вероятный – сформировался иммунитет к вирусу, а сам он уничтожен иммунной системой или лекарствами.

Второй: нельзя исключить ошибку лаборатории при проведении ПЦР.

Диагностикой заболеваний должен заниматься врач. Он учитывает все нюансы обследования. А лабораторная диагностика, в том числе ИФА – только вспомогательный метод, не лишенный погрешностей.

источник

Для того чтобы с высокой точностью определить вид гепатита после постановки предварительного диагноза, спрогнозировать течение заболевания, установить стадию его развития, используют различные серологические исследования. Наиболее точные данные получают после проведения иммуноферментного анализа. Используя ИФА гепатит С, диагностируют в 95% случаев. Именно данный анализ даёт возможность выявить антитела антивируса гепатита С (антивирус HCV) и оценить не только степень активности патологического процесса, но и уровень результативности противовирусной терапии, назначенной лечащим врачом и проведённой под его контролем.

Гепатит С является самым опасным видом данного заболевания, так как отличается длительным скрытым (латентным) периодом и опасными последствиями. Избежать появления и развития позволяет правильная и своевременная диагностика, одним из самых информативных методов которой признан иммуноферментный анализ.

Подтвердить наличие в крови пациента HCV инфекции можно с помощью серологических маркеров, а получить наиболее полные и достоверные данные о существовании антител позволяет анализ, который основан на комплексе структурных и неструктурных вирусных пептидов. У здоровых людей антитела к вирусу гепатита С в крови пациента отсутствуют, а их обнаружение свидетельствует о наличии патогена и развитии патологического процесса.

В ходе исследования специалисты выявляют суммарные антитела класса IgM и IgG, имеющие непосредственное отношение к структурным и неструктурным белкам HCV. Проведение данного исследования позволяет на ранней стадии заболевания выявить больных, инфицированных вирусом гепатита C. Присутствие суммарных антител в крови пациента говорит о начале болезни или перенесённой инфекции.

О начале заболевания свидетельствует наличие антител класса IgM, а о перенесённом гепатите типа С можно судить по выявленным антителам класса IgG. Они же становятся подтверждением реконвалесценции (заключительной стадии болезни).Для этого периода характерно анатомическое и функциональное восстановление поражённых недугом органов.

Своевременно проведённый ИФА (иммуноферментный анализ) позволяет на ранней стадии развития выявить патологический процесс, с высокой точностью диагностировать заболевание и увеличить шансы на быстрое выздоровление. Тест ИФА даёт возможность определить не только наличие вируса, но и количество специфических суммарных антивирус антител.

1. Женщинам в состоянии беременности при постановке на учёт в женской консультации.
2. Пациентам, у которых обнаружены симптомы острого или хронического гепатита.
3. Медицинским работникам, постоянно контактирующим с биологическими материалами.
4. Пациентам с диагнозом СПИД.
5. Наркозависимым гражданам.
6. Больным алкоголизмом и тем, кто ведёт асоциальный образ жизни.

Направление на тест ИФА (иммуноферментный анализ) получают и сотрудники правоохранительных органов или работники коммунальных служб. Необходимость в проведении ИФА возникает при подозрении на нарушение функциональности печени или при получении сомнительных данных о состоянии органа после ультразвукового исследования. Врач может дать пациенту направление на иммуноферментный анализ крови, если последнему предстоит сложное хирургическое вмешательство. Если женщина (особенно в возрасте старше 30 лет) планирует беременность, а в анализе крови обнаружены повышенные значения билирубина или трансфераз (АЛТ, АСТ).

Специфические антивирусные антитела IgG обнаруживаются на протяжении нескольких лет. Их концентрация постепенно снижается, что является подтверждением положительной динамики. Что касается хронического гепатита С, то в этом случае количество суммарных анти-HCV антител не меняется. Точная диагностика основана на определении уровня содержания антител класса IgM.

Течение гепатита С зависит от генотипа вируса, ставшего причиной развития заболевания. Современной медицине известны 11 их разновидностей. В самых сложных ситуациях возможно инфицирование сразу несколькими генотипами вируса, и один из них всегда оказывается доминирующим. Только точная диагностика поможет выбрать наиболее эффективные лекарственные препараты для результативной терапии, подобрать их дозировку и установить длительность проведения терапевтических мероприятий.

Для постановки диагноза при подозрении на наличие гепатита С и получения ориентировочной информации о количестве и качестве возбудителя проводится иммуноферментный анализ (ИФА), в ходе которого специалисты получают подтверждение присутствия в организме вируса и могут судить о его активности.

С помощью данного исследования можно сделать выводы о:

• вирусной нагрузке;
• степени риска развития хронического процесса;
• активности воспроизведения (репликации) молекулы РНК вируса HCV;
• продолжительности течения патологического процесса;
• степени поражения печени.

Оценивается и уровень риска перехода заболевания в хроническую форму. Выявленные с помощью ИФА антивирус HCV антитела свидетельствуют о вирусной репликации. Конечные результаты требуют подтверждения с помощью более точных исследований.

Качественная оценка итога иммуноферментного анализа выражается как положительный или отрицательный результат. ИФА позволяет выявить гепатит С на ранней стадии развития недуга, а также при течении заболевания в безжелтушной форме.

Анализ имеет определённые преимущества, среди которых:

1. Точность качественных и количественных показателей.
2. Минимальные сроки исследования.
3. Поэтапное проведение теста.

Иммуноферментный анализ принадлежит к числу обследований, отличающихся высокой точностью, но несмотря на все преимущества, в некоторых случаях не позволяет выявить возбудителя, присутствующего в организме человека.

Для исследования лаборант берёт венозную кровь пациента и помещает её в специальные ёмкости. Спустя определённое время антигены (чужеродные микроорганизмы) прикрепляются к стенкам сосуда. Специалист вводит в сосуд иммуноглобулины (антитела) и добивается иммунной реакции.

Полученные результаты сверяют с данными специально составленной таблицы. Результат оценивается как:

Положительный, свидетельствующий о наличии острой формы заболеваний, если в ходе исследования крови определяется наличие антител классов IgA, IgG, IgM.

Отрицательный – все три типа антител не выявлены, отсутствуют.

Ложноположительный – результат ИФА положительный, но не получивший подтверждения после проведения ПЦР (полимеразной цепной реакции).

Сомнительный – маркеры в крови не определяются при наличии гепатита С. Такое возможно при слишком ранней диагностике. Требуется повторное проведение анализа через 2-3 недели. Для постановки точного диагноза делают анализ ПЦР.

Ложноотрицательный результат анализа возможен у пациентов, принимающих лекарственные препараты, оказывающие подавляющее действие на защитную систему организма.

Как ложноположительный, так и ложноотрицательный результаты проведённого анализа возможны по нескольким причинам. В первую очередь – это минимальная вирусная нагрузка на самой ранней стадии развития заболевания. Не менее важно состояние иммунной системы пациента и индивидуальные особенности его организма. На результатах исследования заметно сказывается приём лекарственных препаратов из числа иммунодепрессантов.

Нельзя быть полностью уверенным в точности результата иммуноферментного анализа, если пациентка – это женщина в состоянии беременности. Ложные результаты возможны и в тех случаях, когда анализ проводят пациентам, страдающим аутоиммунными недугами, онкологическими заболеваниями, имеющим доброкачественные новообразования.

Дополнительное исследование проводится в том случае, если пациент недавно перенёс тяжёлое инфекционное заболевание, у него диагностировано нарушение обмена веществ или сбой в работе эндокринной системы. Если в составе крови повышено содержание гепарина или заметно снижен уровень содержания микроэлементов.

Увеличить точность проведённого анализа можно, соблюдая существующие правила подготовки к его сдаче:

1. Кровь сдают только натощак. Последний приём пищи разрешён не менее чем за 8-10 часов до забора материала.
2. Вечером перед анализом требуется отказаться от употребления в пищу жирных, жареных, острых, копчёных продуктов и блюд.
3. Не может быть речи об употреблении спиртосодержащих напитков.
4. Лучше отказаться от курения за сутки до сдачи крови.

Делать иммуноферментный анализ можно только тем пациентам, которые в данное время не болеют простудными, воспалительными или инфекционными заболеваниями, не жалуются на недомогание.

Нарушение перечисленных правил и требований приводит к тому, что результат анализа оценивается как ложноположительный. Такая ситуация складывается в 15-20% случаев. Однако для полной уверенности врачи направляют пациентов на дополнительное обследование, в ходе которого им нужно сдать кровь на ПЦР.

Постановка диагноза невозможна только на основании результатов иммуноферментного анализа. Наличие антител не является доказательством присутствия болезнетворного вируса в организме на момент исследования. Ошибочное тестирование может спровоцировать нервный срыв или ещё более острую реакцию пациента. Постановка диагноза на основании результатов ИФА не является точной. Требуется дополнительное исследование, по итогам которого и будет вынесен окончательный вердикт врачей.

Важно помнить, что ложноположительный результат анализа возможен у людей, которые в данный момент болеют другими инфекционными заболеваниями, однако их иммунная система неправильно отреагировала на проникновение в организм болезнетворных микроорганизмов или вирусов.

Диагностировать гепатит С позволяет ряд лабораторных исследований, особое место среди которых занимает иммуноферментный анализ (ИФА). Качественная оценка показателей определяется как положительный или отрицательный результат. Отсутствие вируса гепатита в крови пациента – норма, но в некоторых случаях после проведённого исследования специалисты заявляют об обнаружении в биологическом материале незначительных концентраций некоторых фрагментов РНК (рибонуклеиновой кислоты). Выявляют их с помощью ПЦР (полимеразной цепной реакции).

Этот анализ крови даёт возможность выявить возбудителя гепатита С на ранней стадии развития заболевания и с высокой точностью поставить диагноз. Основано исследование на том, что вирусы имеют в составе структуры молекулы ДНК (гепатит B) или РНК (гепатит C).

В ходе анализа ПЦР с помощью специальной обработки образцов крови пациента:

• увеличивают концентрацию молекул нуклеиновых кислот;
• определяют их тип;
• устанавливают вид возбудителя.

Если в крови человека есть небольшое количество фрагментов РНК возбудителя, то с помощью ПЦР все они будут выявлены. Это и даёт возможность поставить точный диагноз. Главное отличие данного анализа от всех иных методов исследования – на 100% точная диагностика.

Такой анализ проводится при исследовании крови беременных женщин, обратившихся в женскую консультацию для постановки на учёт, при подозрении на наличие гепатита С с длительным латентным (скрытым) периодом, при затруднении в постановке точного диагноза с помощью ИФА. Проведения ПЦР необходимо в тех случаях, когда после иммуноферментного анализа получен сомнительный результат.

Вирус гепатита С в данной ситуации есть в организме больного, но ещё не спровоцировал стремительное развитие недуга. Это и есть латентное течение заболевания. Анализ делается довольно быстро, так как для получения результата нет необходимости выращивать возбудителя, используя питательную среду. Главное отличие ПЦР от иммуноферментного анализа (ИФА) заключается в том, что в данном исследовании не существует такого понятия, как ложноположительный или сомнительный результат.

источник