Анализ на гепатит с анти

Поражение печени вирусом типа С – одна из острых проблем инфекционистов и гепатологов. Для заболевания характерный длительный инкубационный срок, в течение которого отсутствуют клинические симптомы. В это время носитель HCV является наиболее опасным, так как не знает о своей болезни и способен заразить здоровых людей.

Впервые о вирусе заговорили в конце 20-го столетия, после чего начались его полномасштабные исследования. На сегодня известно о шести его формах и большом количестве подтипов. Такая вариабельность структуры обусловлена способностью возбудителя мутировать.

В основе развития инфекционно-воспалительного процесса в печени лежит деструкция гепатоцитов (ее клеток). Они разрушаются под непосредственным влиянием вируса, обладающего цитотоксическим действием. Единственным шансом выявить патогенного агента на доклинической стадии является лабораторная диагностика, которая подразумевает поиск антител и генетического набора вируса.

Человеку, далекому от медицины, сложно понять результаты лабораторных исследований, не имея представления об антителах. Дело в том, что структура возбудителя состоит их комплекса белковых компонентов. Они после проникновения в организм вызывают реакцию иммунной системы, как бы раздражая ее своим присутствием. Таким образом начинается продукция антител к антигенам гепатита С.

Они могут быть нескольких видов. Благодаря оценке их качественного состава врачу удается заподозрить инфицирование человека, а также установить стадию заболевания (в том числе и выздоровление).

Первичным методом выявления антител к гепатиту С является иммуноферментное исследование. Его цель заключается в поиске специфических Ig, которые синтезируются в ответ на проникновение инфекции в организм. Заметим, что ИФА позволяет заподозрить болезнь, после чего требуется дальнейшее проведение полимеразной цепной реакции.

Антитела даже после полной победы над вирусом остаются на всю жизнь в крови человека и свидетельствуют о прошлом контакте иммунитета с возбудителем.

Антитела к гепатиту С могут указывать на стадию инфекционно-воспалительного процесса, что помогает специалисту подобрать эффективные противовирусные лекарства и отследить динамику изменений. Выделяют две фазы заболевания:

• латентная. У человека отсутствуют какие-либо клинические симптомы, несмотря на то, что он уже является вирусоносителем. В то же время анализ на антитела (IgG) к гепатиту С будет положительный. Уровень РНК и IgG – небольшой.
• острая – характеризуется нарастанием титра антител, в частности IgG и IgМ, что указывает на интенсивное размножение возбудителей и выраженную деструкцию гепатоцитов. Их разрушение подтверждается ростом печеночных ферментов (АЛТ, АСТ), что выявляется биохимией. Кроме того, обнаруживается РНК патогенного агента в высокой концентрации.

Положительная динамика на фоне лечения подтверждается снижением вирусной нагрузки. При выздоровлении РНК возбудителя не обнаруживается, остаются лишь иммуноглобулины G, которые указывают на перенесенное заболевание.

В большинстве случаев иммунитет не может самостоятельно справиться с возбудителем, так как ему не удается сформировать мощный ответ против него. Это обусловлено изменением структуры вируса, вследствие чего вырабатываемые антитела оказываются неэффективными.

Обычно ИФА назначается несколько раз, так как возможет отрицательный результат (вначале болезни) или ложноположительный (у беременных, при аутоиммунных патологиях или проведении анти-ВИЧ терапии).

Чтобы подтвердить или опровергнуть ответ ИФА, необходимо его повторно провести через месяц, а также сдать кровь для ПЦР и биохимии.

Антитела к вирусу гепатита С исследуются:

1. у инъекционных наркоманов;
2. у людей с циррозом печени;
3. если беременная является вирусоносителем. В данном случае обследованию подлежит как мать, так и младенец. Риск его инфицирования колеблется от 5% до 25% в зависимости от вирусной нагрузки и активность заболевания;
4. после состоявшегося незащищенного секса. Вероятность передачи вируса не превышает 5%, однако при травмировании слизистой гениталий, у гомосексуалистов, а также любителей частой смены партнеров риск значительно выше;
5. после нанесения татуровки и выполнении пирсинга;
6. после посещения косметологического салона с плохой репутацией, так как инфицирование может произойти через загрязненные инструменты;
7. перед сдачей крови, если человек желает стать донором;
8. у медсотрудникаов;
9. у работников интернатов;
10. у недавно освободившихся из МЛС;
11. если обнаружено повышение печеночных ферментов (АЛТ, АСТ) — с целью исключения вирусного поражения органа;
12. при тесном контакте с вирусоносителем;
13. у людей с гепатоспленомегалией (увеличением объема печени и селезенки);
14. у ВИЧ-инфицированных;
15. у человека с желтушностью кожи, гиперпигментацией ладоней, хронической усталостью и болью в печени;
16. перед плановым хирургическим вмешательством;
17. при планировании беременности;
18. у людей со структурными изменениями в печени, выявленными при УЗИ.

Иммуноферментный анализ используется в качестве скрининга для массового обследования людей и поиска вирусоносителей. Это позволяет предупредить вспышку инфекционного заболевания. Лечение, начатое на начальной стадии гепатита, значительно эффективнее терапии на фоне цирроза печени.

Чтобы правильно трактовать результаты лабораторной диагностики, нужно знать, какими бывают антитела, и что они могут означать:

1. анти-HCV IgG – основной вид антигенов, представленных иммуноглобулинами G. Их можно обнаружить при первичном обследовании человека, благодаря чему удается заподозрить болезнь. При положительном ответе стоит задуматься о вялотекущем инфекционном процессе или произошедшем контакте иммунитета с вирусов в прошлом. Пациенту необходимо дальнейшее проведение диагностики с помощью ПЦР;
2. анти-HCVcoreIgM. Этот тип маркера означает «антитела к ядерным структурам» патогенного агента. Они появляются в ближайшее время после заражения и указывают на острое заболевание. Нарастание титра отмечается при снижении силы иммунной защиты и активации вирусов при хроническом течении болезни. При ремиссии маркер слабоположительный;
3. анти-HCV total – суммарный показатель антител к структурным белковым соединениям возбудителя. Зачастую именно он позволяет точно диагностировать стадию патологии. Лабораторное исследование становится информативным спустя 1-1,5 месяца от момента проникновения HCV в организм. Суммарные антитела к вирусу гепатита С представляют собой анализ иммуноглобулином М и G. Их рост наблюдается в среднем через 8 недель после инфицирования. Они сохраняются на всю жизнь и свидетельствуют о перенесенной болезни или ее хроническом течении;
4. анти-HCVNS. Показатель представляет собой антитела к неструктурным белкам возбудителя. К ним относится NS3, NS4 и NS5. Первый вид обнаруживается вначале болезни и указывает на контакт иммунитета с HCV. Он является индикатором инфицирования. Длительное сохранение его высокого уровня – косвенный признак хронизации вирусно-воспалительного процесса в печени. Антитела к оставшимся двум видам белковых структур выявляются на поздней стадии гепатита. NS4 – показатель степени поражения органа, а NS5 – свидетельствует о хроническом течении заболевания. Снижение их титров можно расценивать как начало ремиссии. Учитывая высокую стоимость лабораторного исследования, оно достаточно редко применяется на практике.

Существует также еще один маркер – это HCV-RNA, который подразумевает поиск генетического набора возбудителя в крови. В зависимости от вирусной нагрузки носитель инфекции может быть более или менее заразный. Для исследования используются тест-системы с высокой чувствительностью, что дает возможность обнаружить патогенного агента на доклинической стадии. Кроме того, при помощи ПЦР можно выявить инфекцию на этапе, когда антитела еще отсутствуют.

Важно понимать, что антитела появляются в разное время, что позволяет более точно установить стадию инфекционно-воспалительного процесса, оценить риск возникновения осложнений, а также заподозрить гепатит вначале развития.

Суммарные иммуноглобулины начинают регистрироваться в крови на втором месяце инфицирования. В первые 6 недель стремительно нарастает уровень IgM. Это свидетельствует об остром течении заболевания и высокой активности вируса. После наступления пика их концентрации наблюдается ее уменьшение, что указывает на начало следующей фазы болезни.

Если обнаружены антитела класса G к гепатиту С, стоит заподозрить окончание острой стадии и переход патологии в хроническую. Они выявляются спустя три месяца от момента попадания инфекции в организм.

Иногда суммарные антитела удается выделить уже на втором месяце болезни.

Что касается анти-NS3, то они обнаруживаются на раннем этапе сероконверсии, а анти-NS4 и -NS5 – на более поздней стадии.

Для выявления иммуноглобулинов используется метод ИФА. Он основан на реакции антиген-антитело, которая протекает под действием специальных ферментов.

В норме суммарный показатель не регистрируется в крови. Для количественной оценки антител применяется коэффициент позитивности «R». Он обозначает плотность исследуемого маркера в биологическом материале. Его референсные значения составляют от нуля до 0,8. Диапазон 0,8-1 свидетельствует о сомнительном ответе диагностики и требует дальнейшего обследования пациента. Положительный результат считается при превышении R единицы.

Если проведена ИФА и ПЦР, интерпретация результатов диагностики может быть следующая:

Если пациенту проведено развернутое исследование, тогда результаты могут быть такими:

Только специалист может правильно трактовать результаты лабораторных анализов. Постановка диагноза основывается на комплексной оценке клинической симптоматики, данных инструментальных обследований, ИФА и ПЦР.

При получении ложно+/- результатов требуется повторная сдача крови. Обязательно анализ проводится в конце лечения, что нужно для подтверждения выздоровления.

Неотъемлемой частью диагностики является УЗИ, которое позволяет оценить размеры, структуру и очертания печени и других внутренних органов.

Для более тщательного анализа требуется биопсия. Она проводится под анестезией, после чего материал направляется на гистологическое исследование.

Путем регулярной проверки крови пациента специалисту удается отследить динамику изменений, судить о степени повреждения печени, активности возбудителя и эффективности проводимой терапии.

источник

Вирусный гепатит С представляет серьезную медико-социальную проблему. Около 180 млн. человек в мире сегодня страдают этим заболеванием, 350 тысяч ежегодно умирает. Длительное скрытое (бессимптомное) течение заболевания приводит к запоздалой диагностике. Анализ на гепатит С проводится с целью диагностики заболевания, дифференциальной диагностики, с его помощью определяют ранее перенесенное заболевание «на ногах».

Исследование применяется у лиц с симптомами гепатита С, повышенным уровнем ферментов печени, при получении сведений о перенесенном ранее заболевании неуточненной этиологии, у лиц из групп риска и скрининговых исследованиях.

Диагностика гепатита С проводится в 2 этапа:

1 этап. Определение наличия в сыворотке крови антител к вирусу (анти HCV).

2 этап. При наличии анти HCV проводится тест на наличие РНК (рибонуклеиновой кислоты) методом ПЦР на гепатит С. Тест позволяет выявить фазу процесса — «активная/неактивная», решить вопрос о необходимости лечения. Известно, что около 30% инфицированных лиц, самостоятельно избавляются от инфекции, так как имеют сильную иммунную систему и в лечении не нуждаются. С помощью ПЦР определяется генотип вируса. Разные генотипы по-разному реагируют на лечение.

Степень поражения печени определяется с помощью биопсии или других инвазивных и неинвазивных тестов (например, фибротест). Степень стеатоза печени определяется с помощью стеатотеста. Во всех случаях диагностика гепатита С должна базироваться на данных эпидемиологического расследования, клинике заболевания и данных биохимического исследования крови.

Рис. 1. Тяжелые последствия вирусного поражения печени — напряженный асцит.

Антитела к вирусам (анти HCV) являются специфическими маркерами инфицирования. В организме больного человека к белкам вируса (антигенам) вырабатываются специфические антитела — иммуноглобулины класса IgM и IgG (анти HCV IgM/IgG).

При получении положительного результата на антитела выполняется подтверждающий тест — определение суммарных антител к структурным и неструктурным белкам вируса. К структурным оболочечным белкам вируса Е1 и Е2 вырабатываются aнти HCV IgM, нуклеокапсидному белку С — cor (aнти HCV IgG), к 7-и неструктурным белкам-ферментам NS (aнти HCV NS IgG).

Для выявления антител к вирусу гепатита С используется иммуноферментный анализ (ИФА). Для подтверждения (+) результатов ИФА применяют подтверждающие тесты — RIBA (рекомбинатный иммуноблотинг), реже Inno-Lia (анализ синтетических пептидов).

• Антитела IgM появляются в сыворотке крови через 4 — 6 недель после инфицирования и быстро достигают максимума. По окончании острого процесса (через 5 — 6 мес.) их концентрация падает.
• Длительная регистрация наличия анти HCV IgM говорит о том, что гепатит С приобрел хроническое течение.
• Повышение уровня IgM в период хронического течения говорит о реактивации инфекционного процесса.
• Уровень иммуноглобулинов IgM позволяет проводить оценку эффективности лечения.

Антитела IgG появляются в сыворотке крови больного через 11 — 12 недель после инфицирования. На 5 — 6 месяце регистрируется пик концентрации. Далее антитела сохраняются на постоянном уровне в течение всего срока заболевания в острый период и период выздоровления.

Суммарные антитела к вирусу (аnti HCV total) используются для диагностики «свежих» случаев заболевания. Суммарные антитела — это антитела нуклеокапсидному белку С — cor (aнти HCV IgG) и 7-и неструктурным белкам-ферментам NS (aнти HCV NS IgG) — aнти HCV NS3, aнти HCV NS4 и aнти HCV NS5.

Суммарные антитела к вирусу гепатита С появляются в сыворотке крови инфицируемого спустя 11 — 12 недель от начала инфицирования, достигают пика к 5 — 6 месяцу и сохраняются на постоянном уровне в течение всего срока заболевания в острый период и в течение 5 — 9 лет после периода выздоровления.

Каждый из видов антител имеет самостоятельное диагностическое значение:

• Анти HCV C (cor) являются основными показателями контакта с вирусами гепатита С.
• Анти HCV NS3 выявляются одними из первых в процессе сероконверсии (выработки антител в ответ на присутствие вируса), указывают на остроту инфекционного процесса и свидетельствуют о высокой вирусной нагрузке. С их помощью определяется гепатит С у больных, не подозревающих у себя наличие инфекции. Продолжительное нахождение анти HCV NS3 в сыворотке крови говорит о высоком риске хронизации процесса.
• Анти HCV NS4 говорят о том, что гепатит С имеет длительное течение. По уровню титров антител можно судить о степени поражения печени.
• Анти HCV NS5 указывают на наличие вирусной РНК. Их обнаружение в острый период является предвестником хронизации процесса. Высокие титры антител на фоне лечения говорят о том, что больной не отвечает на лечение.
• Анти HCV NS4 и анти HCV Данный вид антител появляются на поздних сроках развития гепатита. Их снижение указывает на формирование ремиссии инфекционного процесса. После излечения титры антител NS4 и NS5 снижаются в течение 8 — 10 лет. От повторного заражения этот вид антител не защищает.

Рис. 2. Макропрепарат. Цирроз печени — грозное осложнение вирусного гепатита С.

Отсутствие антител к вирусу гепатита С обозначается термином «Норма». Однако это не всегда это обозначает отсутствие заболевания у человека. Так отсутствие антител в крови у инфицированного человека регистрируется до момента их появления в крови — в срок до 6-и месяцев с момента заражения (в среднем через 12 недель). Период отсутствия антител в крови инфицируемого называется «серологическим окном». Высокой специфичностью (до 99,7%) обладают тест-системы 3-го поколения (ELISA-3). Около 0,3% приходится на получение ложноположительных результатов.

Наличие анти HCV свидетельствуют о текущей инфицированности или перенесенной в прошлом инфекции.

• Обнаружение антител IgM и антител Corе IgG , нарастание титров антител Corе IgG и (+) результат ПЦР при наличии клинических и лабораторных признаков острого гепатита говорит об остром периоде заболевания.
• Обнаружение антител IgM, анти HCV Corе IgG, анти HCV NS IgG и (+) результат ПЦР при наличии клинических и лабораторных признаков заболевания указывает на реактивацию хронического гепатита С.
• Обнаружение анти HCV Corе IgG и анти HCV NS IgG при отсутствии клинических и лабораторных признаков заболевания и отрицательном результате ПЦР говорит о наличии у больного хронического гепатита в латентной фазе.

Рис. 3. Макропрепарат печени. Первичный рак печени — грозное осложнение гепатита С.

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) является «золотым стандартом» диагностики вирусного гепатита С. Высокая чувствительность теста позволяет выявлять генетический материал вирусов (РНК) даже если их в исследуемом материале единицы. ПЦР способна выявлять РНК вирусов задолго до появления антител в сыворотке крови, но не ранее чем с 5-го дня от момента инфицирования. При заболевании с помощью ПЦР РНК вирусов обнаруживаются не только в сыворотке крови, но и в биоптатах печени.

• Полимеразная цепная реакция позволяет определить наличие или отсутствие в крови вирусов гепатита С и решить вопрос о начале лечения. Известно, что до 30% больных самостоятельно избавляются от инфекции, так как имеют сильную иммунную систему и в лечении не нуждаются.
• С помощью ПЦР определяется генотип вируса. Разные генотипы по-разному реагируют на лечение.
• ПЦР применяется с целью контроля за эффективностью лечения.
• ПЦР применяется при отсутствии антител в крови, но при наличии весомых подозрений на заболевание (повышение уровня щелочной фосфатазы, общего билирубина, превышение в 2 раза печеночных ферментов АСТ и АЛТ).
• Анализ ПЦР на гепатит С используется с целью контроля над внутриутробной передачей вирусов гепатита.

к содержанию ↑

С помощью анализа ПЦР возможно определить не только наличие РНК вирусов в крови — качественный анализ (обнаружено/не обнаружено), но и их количество — вирусную нагрузку (количество единиц вирусной РНК в 1 мл крови). Количественный показатель ПЦР применяется с целью контроля эффективности лечения.

Методы, применяющиеся для проведения ПЦР, обладают разной чувствительностью. В РФ согласно методическим рекомендациям 2014 года рекомендовано применять методики, обладающие чувствительностью 25 МЕ/мл и менее. Согласно рекомендациям Европейской ассоциации по изучению печени 2015 года предлагается применять методики определения вирусной РНК, обладающих чувствительностью 15 МЕ/мл и менее.

В зависимости от чувствительности тест-системы больной получает тот или иной результат исследования:

• Минимальная чувствительность анализатора COBAS AMPLICOR составляет 600 МЕ/мл (анализатор старого поколения).
• Минимальная чувствительность анализатора COBAS AMPLICOR ВГС-TEST составляет 50 МЕ/мл, что составляет 100 копий в 1 мл.
• Минимальная чувствительность анализатора РеалБест РНК ВГС составляет 15 МЕ/мл, что составляет 38 копий в 1 мл (входит в группу современных тест-систем). Специфичность данных анализаторов составляет 100%. С их помощью выявляются РНК вирусов гепатита С субтипов 1а и 1b, 2а, 2b, 2c и 2i, 3, 4, 5а и 6.

При наличии копий РНК ниже порога чувствительности данного анализатора пациент получает ответ «не обнаружено».

Рис. 4. Пример анализа ПЦР (количественный тест). Определение вирусной нагрузки.

• Отсутствие РНК вируса указывает на отсутствие инфицирования.
• Отсутствие РНК в анализе на фоне наличия антител в крови указывает на исчезновение болезни под влиянием лечения или при самоизлечении.
• В ряде случаев вирус присутствует в крови, но в подпороговых уровнях, когда его концентрация не улавливается анализаторами. Такие больные остаются опасными в плане заражения.
• Выявление РНК вируса в течение 6 месяцев подряд у больных с острым гепатитом С говорит о том, что заболевание приняло хроническое течение.
• Снижение вирусной РНК в анализах на фоне лечения говорит об эффективности проводимой терапии и наоборот.

Рис. 5. Макропрепарат. Жировой гепатоз — одно из последствий заболевания.

Биохимические анализы крови помогают установить функциональное состояние многих органов и систем человека.

Печеночные ферменты синтезируются внутриклеточно. Они принимают участие в синтезе аминокислот. Их большое количество находится в клетках печени, сердца, почек и скелетной мускулатуры. При поражении органов (нарушение целостности клеточных мембран) ферменты поступают в кровь, где их уровень повышается. Повышенный уровень ферментов регистрируется при поражении (лизисе, разрушении) печеночных клеток, инфаркте миокарда и других заболеваниях. Чем выше уровень трансаминаз в сыворотке крови, тем больше клеток подверглось разрушению. АЛТ преобладают в клетках печени, АСТ — в клетках миокарда. При разрушении клеток печени уровень АЛТ повышается в 1,5 — 2 раза. При разрушении клеток миокарда уровень АСТ повышается в 8 — 10 раз.

При диагностике хронического вирусного гепатита необходимо обращать внимание на соотношение АСТ/АЛТ (коэффициент де Ритиса). Превышение уровня АСТ над АЛТ говорит о поражении печеночных клеток.

• Норма АСТ для мужчин составляет до 41 ед./л, женщин — до 35 ед./л, детей старше 12 лет — до 45 ед./л.
• Норма АЛТ для мужчин составляет до 45 ед./л, женщин — до 34 ед./л, дети 12 лет и старше — до 39 ед./л.
• В норме (у здоровых людей) коэффициент АСТ/АЛТ имеет значение от 0,91 — 1,75.

Билирубин является продуктом распада гемоглобина. Билирубин в крови содержится в виде непрямого (до 96%) и прямого (4%). Процесс распада этого вещества происходит, в основном, в клетках печени, откуда с желчью выводится из организма. При разрушении клеток печени уровень билирубина в сыворотке крови возрастает. В норме содержание общего билирубина составляет менее 3,4 — 21,0 мкмоль/л. При уровне 30 — 35 мкмоль/л и выше билирубин проникает в ткани, из-за чего кожа и склеры приобретают желтушную окраску.

Рис. 6. Желтуха — один из признаков поражения печени.

источник

Что делать, если Ваш анализ на гепатит С Антитела Anti-HCV-total показал положительный результат? Обратить внимание на информацию в статье.

Anti-HCV (антитела гепатита С) — вещества, которые вырабатывает организм человека, когда в него попадает вирус гепатита. Антитела остаются в крови на всю жизнь.

Среди пациентов, получивших Анализ гепатита С Положительно, есть здоровые люди. Например:

• Вирус уже побеждён.
  Наличие антител ВГС не означает, что Вы болеете гепатитом С сейчас. Организм когда-то мог незаметно перебороть вирус. Учёные сходятся на 15-20% случаев самоизлечения людей от ВГС.
• Положительный анализ проявляется из-за других заболеваний: аутоиммунные заболевания, опухоли, инфекции (ангина), грипп, малярия, туберкулёз, вакцинация от ВГВ или гриппа влияют на значение анализа. Также ваша иммунная система могла дать сбой и подать неверные сигналы через кровь.
• Ложно положительный на антитела гепатита С возможен при беременности.
  Лучше заранее оповестите беременную женщину об этом, чтобы она не паниковала.
• Не исключайте ошибку в лаборатории.
  Вдруг просто не повезло: лаборант недостаточно тщательно помыл пробирку, или использовал некачественные реактивы, также не исключена случайна подмена анализа.

Чтобы убедиться на 100%, есть ли заболевание, сдайте ПЦР РНК вируса гепатита С с чувствительностью 10/ 15/ 60/ 100 (ищите именно такие значения). Анализ покажет 2 значения:

• обнаружено означает, что у Вас есть ВГС,
• не обнаружено — всё хорошо, Вы не болеете гепатитом С.

Если Вы заражены этим вирусом, не стоит переживать. С 2014 года гепатит С излечим современными препаратами за 3-6 месяцев.

Просто соблюдайте представленные ниже меры, чтобы никого не заразить, и начинайте подготовку к лечению гепСа.

1. Будьте осторожны при взаимодействии с близкими и окружающими Вас людьми.
   Вирус передаётся через кровь, поэтому заведите себе отдельный маникюрный набор, а также предупреждайте врачей, стоматологов и мастеров маникюра/ педикюра, что инструменты после Вас должны подвергаться очень тщательной обработке.
2. Начинайте лечиться.
   Обязательно посетите гепатолога, инфекциониста или гастроэнтеролога, который назначит Вам необходимые анализы. Для начала лечения обычно сдают Генотип вируса, УЗИ и эластометрию печени. Эти показатели помогут определить длительность лечения и необходимые препараты.

Внимание! Велика вероятность что Вам предложат лечиться интерфероновой терапией, вызывающей сильные побочные эффекты. Пег-Интерферон только подавляет размножение вируса, но не уничтожает его, поэтому высока вероятность возврата вируса.

Обязательно попросите врача назначить современные препараты (Софосбувир + Даклатасвир, Велпатасвир, Ледипасвир) для лечения гепатита С.

источник

Тест на определение антител к возбудителю гепатита С в настоящее время используется в качестве «золотого стандарта» первичной диагностики заболевания. Исследование получило название анти-HCV. Методика выполнения теста позволяет определить титр иммуноглобулинов, что определяет активность иммунного ответа.

Некоторые разновидности анализа способны дифференцировать различные типы антител, что является определяющим фактором в постановке диагноза острого или хронического гепатита С. При наличии показаний возможно выявление иммуноглобулинов к специфическим структурным протеинам патогена. Такое исследование проводят редко, но оно помогает определить причину резистентности к терапии и оценить возможность развития осложнений.

Анализ крови анти-HCV предназначен для обследования человека на предмет гепатита С. Что это за тест? Принцип исследования состоит в выявлении антител (иммуноглобулинов или АТ). Иммуноглобулины – специфические вещества протеиновой структуры, которые вырабатываются для защиты организма от бактерий и вирусов. Антитела способны «распознать» частицы болезнетворных патогенов, которые могут нанести необратимый урон здоровью.

Такие частицы именуют антигенами. Задача АТ – уничтожить их до наступления необратимых изменений. Иммуноглобулины отличаются высокой специфичностью. Иными словами, к каждому антигену вырабатываются определенные, уникальные по структуре антитела. Соответственно, если в организме обнаружены АТ к гепатиту С, то это свидетельствует о произошедшем инфицировании.

Пациенты часто спрашивают, если анализ анти-HCV положительный, что это значит? Зачастую такие результаты говорят о заражении. Но при проведении скрининга на иммуноглобулины возможно получение ложных (как позитивных, так и негативных) анализов. Дело в том, что результаты исследования Anti-HCV зависят от особенностей работы иммунной системы. К примеру, беременность и аутоиммунные заболевания могут продемонстрировать ложные маркеры теста.

Когда пациенты интересуются, что это за анализ, доктора разъясняют, что существует несколько разновидностей исследования. Типы тестов для выявления антител описаны в таблице.

Практически все современные клинические лаборатории сейчас перешли на тест-системы последнего поколения. Их точность и специфичность превышает 98%. Поэтому возможные сомнительные результаты обычно связаны не с человеческим фактором либо качеством используемого для диагностики набора реактивов, а с особенностями работы иммунной системы больного.

Именно из-за этого положительный анализ на гепатит С иммуноферментным методом (ИФА) не служит основанием для постановки диагноза. Результат ИФА требует обязательного подтверждения более специфичным тестом на наличие РНК патогена в крови, выполняемого способом полимеразной цепной реакции (ПЦР). Точность последнего также приближается к 100%.

Сравнительно недавно в продаже в аптеках появились экспресс-тесты, направленные на выявление антител и позволяющие провести анализ HCV самостоятельно дома. Их преимуществом служит возможность выполнения без медицинской помощи. Подобный набор не заменит полноценного лабораторного анализа, но поможет провести самодиагностику и вовремя обратиться к врачу. Точность экспресс-тестов составляет порядка 95%. Но для минимизации риска неправильных результатов нужно соблюдать все правила выполнения анализа. Подробная инструкция по использованию тест-системы прилагается к набору. Существуют экспресс-тесты для выявления антител как в крови, так и в слюне.

Серологический анализ на гепатит С выполняется с использованием одной из следующих методик:

• ELISA (от английской аббревиатуры «enzyme linked immunoadsorbent assay), исследование проводят при помощи реагентов-адсорбентов, которые обладают специфической способностью связывать иммуноглобулины в биологическом образце;
• EIA (enzyme immunoassay), результаты теста основаны на биохимической реакции антител с содержащимися в реактивах специфическими ферментами.

Существуют и другие методики выполнения анализа ИФА анти-HCV (например, EMIT), но они используются гораздо реже. ELISA и EIA просты в применении, доступны в финансовом плане, подходят для работы с большим количеством образцов. Во время исследования находящиеся в крови антитела образуют соединения со специфическими реагентами. Впоследствии они обнаруживаются либо при микроскопическом исследовании, либо при обработке образца при помощи специальных компьютерных программ. Таким образом возможен двойной контроль результатов исследования.

В качестве реактивов могут использоваться различные соединения:

• лизатные, полученные путем очищения патогена (для этой цели обычно применяют ультразвук);
• рекомбинантные, когда реагенты получают генно-инженерным путем;
• пептидные с применением искусственно полученных веществ.

В зависимости от используемого реагента тест-системы могут определять либо суммарные антитела, либо дифференцировать иммуноглобулины на G и М. В качестве твердой фазы применяют луночные планшеты либо шарики, лидируют в производстве таких устройств корпорации Roche или Abbot.

Тестирование на HCV (Hepatitis C Virus) проводится как в качестве рутинного исследования для регулярного обследования работников некоторых сфер (образования, здравоохранения), при планировании зачатия и т.д. Также анализ ИФА Тотал на суммарные антитела к гепатиту С выполняется и при подозрении на вирусное поражение печени.

ИФА является основным первичным методом диагностики заболевания. Остальные тесты проводятся по результатам этого исследования.

Проведение ИФА строго показано в следующих случаях:

• перенесенные до 1992 года гемотрансфузионные процедуры и хирургические вмешательства по поводу трансплантации органов (до этого времени не были известны методы выявления HCV у доноров и в биологическом материале);
• пристрастие к внутривенным наркотикам: применение психоактивных веществ ослабляют иммунную систему и делают организм более восприимчивым к подобного рода заболеваниям;
• использование общих с инфицированным человеком предметов гигиены;
• половые контакты с больным (особенно, гомосексуальные);
• инфицирование ВИЧ;
• при беременности;
• повышение уровня печеночных ферментов;
• любые иммунодефицитные состояния;
• работа с сфере здравоохранения.

Людям из группы риска рекомендуют регулярно сдавать кровь на HBsAg, HCV и HIV (гепатиты В и С, ВИЧ ).

Также исследование показано и при появлении определенных клинических признаков, которые могут косвенно указывать на наличие поражения печени вирусной этиологии. Это:

• постоянное чувство слабости;
• головные боли;
• сонливость;
• расстройства пищеварения (тошнота, изжога, диспепсия, диарея либо запор, неприятный привкус во рту);
• желтуха;
• потемнение урины;
• осветление кала.

Относительными показаниями к проведению иммуноферментного теста на ВГС служат:

• нанесение татуировок, перманентного макияжа, выполнение пирсинга;
• ведение беспорядочной половой жизни;
• проведение частых лечебных процедур (гемодиализа, эндоскопии);
• планирование беременности (тестирование проходят оба партнера);
• регулярные посещения маникюрных кабинетов.

В некоторых структурах результаты ИФА требуют при приеме на работу и далее ежегодно. С этой целью оформляется медицинская книжка, куда вносится не только тест на гепатит С, но и другие обследования и рекомендации врача.

Как правило, это касается:

• работников здравоохранения, которые непосредственно контактируют с пациентами или донорским материалом;
• продавцов;
• поваров, официантов и других служащих сферы общественного питания;
• учителей, воспитателей в детских садах и другого персонала школ, интернатов, дошкольных детских учреждений, образовательных и развлекательных центров;
• косметологов и парикмахеров;
• мастеров в тату- и пирсинг-салонах.

В целом, риску заразиться гепатитом С подвергается почти каждый человек. Сейчас для выполнения теста вовсе не обязательно обращаться к врачу, брать направления и тратить несколько часов на ожидание в очереди. Анализ проводится практически в каждой частной лаборатории, а цена его вполне доступна. Забор крови занимает несколько минут, а результат выдают на руки либо присылают по указанному в бланке электронному адресу в течение 1–3 дней.

Иммуноферментное исследование для выявления гепатита С зависит не только от качества используемых тест-систем и профессионализма лаборанта, проводящего анализ. На результаты также влияет и особенности подготовки к забору крови. В первую очередь это касается пациентов, страдающих от хронических заболеваний и вынужденных принимать медикаменты.

Таким больным следует:

• за 7–10 дней до предполагаемого обследования предупредить врача о необходимости сдачи анализов и возможности сделать перерыв в приеме лекарств;
• если прием медикаментов не требует соблюдения временного режима, пить препараты (делать укол) следует после забора крови;
• некоторые средства обладают иммуносупрессивной активностью (лекарства, назначаемые для терапии онкологических заболеваний, цитостатики, иммунобиологические медикаменты);
• длительный прием антибиотиков, противомикробных, противопаразитарных средств и некоторых других препаратов может негативно отразиться на состоянии печени, поэтому о курсе такого лечения следует известить доктора.

На консультации перед сдачей крови либо при обращении к врачу по поводу расшифровки анализа необходимо обязательно сообщить о любых проблемах со здоровьем, а тем более, об известных диагнозах и принимаемых лекарствах.

Чтобы снизить вероятность сомнительных, неопределенных результатов доктор и консультанты в клинической лаборатории неоднократно предупреждают о необходимости соблюдать определенные правила.

К числу обязательных врачебных рекомендаций относят:

1. Специальную диету – за 3 дня до обследования. Питание по столу №5 рекомендовано при подтвержденном поражении печени вирусного либо другого генеза. Но на этапе подготовки к проведению исследования также нужно придерживаться диеты. Не следует есть жирные сорта птицы, мяса и рыбы, молока и кисломолочных продуктов, некоторые сыры, мясные субпродукты, соусы, колбаса, ветчина, сосиски, консервы. Рекомендуют ограничить употребление соли, противопоказаны маринованные овощи и фрукты, жареные блюда, фаст-фуд, сдоба.
2. Полное исключение алкоголя вне зависимости от объема и крепости напитков. Такое правило соблюдают как минимум 2 недели до забора крови.
3. Воздержание от приема пищи (разрешена только негазированная вода) за 12 часов до посещения лаборатории.
4. Не курить 8–10 часов до сдачи крови.
5. Посещение лаборатории утром после пробуждения.
6. За сутки до исследования ограничить тяжелые физические нагрузки.

Исследование лучше перенести, если:

• развилась бактериальная инфекция (вне зависимости от этиологии, например, ангина, пневмония, пиелонефрит);
• возникла необходимость в приеме антибиотиков, противоглистных средств, фунгицидных препаратов (анализ лучше выполнять через 7–10 дней после окончания курса терапии).

Симптомы ОРЗ и других заболеваний следует дифференцировать от признаков гепатита С. Зачастую вирусное поражение печени дает о себе знать гриппоподобной симптоматикой.

При нарушении правил подготовки к проведению исследования, лучше перенести анализ. Если же это по каким-либо причинам сделать невозможно, нужно известить доктора. Иногда подобные обстоятельства могут стать причиной получения ложноположительных либо ложноотрицательных результатов.

Идеально, если расшифровка Anti-HCV проводится профильным специалистом. Но при сдаче анализа в частной лаборатории пациент получает результаты лечения еще до посещения врача. Редкий человек сможет дождаться консультации доктора и не поинтересоваться, выходят ли показатели за пределы физиологически допустимых значений.

В норме Anti-HCV Total отрицательный, это значит, что антител к возбудителю гепатита С в крови человека не обнаружено.

Основные принципы интерпретации различных вариантов результатов серологического исследования приведены в таблице. Также указана цель выполняемого теста.

Как и любое другое исследование, ИФА на антитела к HCV сопряжены с риском получения ошибочных результатов.

Помимо технической ошибки в проведении анализа, ложные позитивные либо негативные данные возможны при:

• беременности;
• аутоиммунных заболеваниях (особенно, аутоиммунном гепатите);
• лейкемии и других видах онкологии;
• ВИЧ;
• ранее перенесенном гепатите С (как после противовирусной терапии, так и при самостоятельном выздоровлении, которое отмечают в 10–15% случаев инфицирования);
• тяжелых системных инфекциях, когда в кровь происходит постоянный выброс большого количества антител, что и является причиной погрешности в анализе;
• любых состояниях, связанных с серьезным иммунодефицитом (включая медикаментозный).

Еще одной причиной ложного результата является так называемое «диагностическое окно». Это период с момента инфицирования до накопления в крови человека антител в количестве, необходимом для лабораторной диагностики. Сроки, когда выявляется HCV методом ИФА, индивидуальны, но в среднем составляют 6–8 недель.

Проведение серологического исследования нецелесообразно для диагностики патологии у ребенка, рожденного от больной матери. Если вероятность внутриутробной и интранатальной передачи вируса не превышает 5–7% (исключение составляют женщины с ВИЧ, у них риск составляет порядка 20–25%), то IgG проходят через плаценту и обнаруживаются в крови ребенка. Поэтому в данном случае исследование на HCV всегда проводят при помощи ПЦР.

Учитывая возможность получения ложных результатов, доктора всегда назначают подтверждающий тест по методике качественной ПЦР.

ИФА остается главным рекомендуемым методом быстрой диагностики гепатита С. Данный тест проводится повсеместно. Но во избежание ошибок с результатами анализа лучше обратиться к врачу за более комплексным обследованием (особенно при негативном ИФА на фоне ухудшающегося самочувствия).

источник

Вирусный гепатит C – болезнь печени, которая чревата развитием цирроза, рака, недостаточности органа. Одним из методов диагностики является анализ на антитела Anti-HCV, хотя он еще назначается для профилактики инфекции людям, составляющим группу риска. Рассмотрим подробнее, что это такое, когда назначается анализ и что показывает.

Данный анализ представляет собой иммуноферментное исследование, определяющее антитела к HCV – вирусу гепатита C. Кровь в объеме 20 мл берут из периферической вены, помещают в центрифугу, дают отстояться, пока плазма отделится от кровяных элементов. Потом проводится исследование.

Возможно обнаружение иммуноглобулинов трех классов, которые позволяют определить наличие болезни и стадию: скрытый период, острое или хроническое течение, ранее перенесенное заболевание, которое не лечилось.

Есть 2 класса иммуноглобулинов, помогающие установить стадию болезни – M и G. Теперь разберемся, что это значит. M – острая фаза, титр нарастает первые несколько месяцев после заражения. Благодаря современной трехкомпонентной системе излечиваются больше 95% инфицированных. G – хроническая форма. Прогноз неблагоприятный, лечение затруднено. Редко получается полноценно очистить гепатоциты от вирусных частичек.

Анализ можно сдавать без направления от доктора. Такую услугу оказывают различные лаборатории, медцентры. Однако есть определенные случаи, требующие провести исследование:

1. Желание стать донором крови.
2. Переливание крови либо ее компонентов в прошлом.
3. Тесные контакты с зараженным, включая половые связи (возможность заражения при незащищенном половом контакте достоверно не подтверждена, но и не исключена).
4. Прием инъекционных наркотиков.
5. Рождение ребенка от больной матери – малышу нужно пройти исследование на анти-HCV, потому что вероятность его заражения – до 20%.
6. Повышение уровней АЛТ, АСТ вследствие медицинского вмешательства.
7. Вторичные признаки поражения печени (для исключения/подтверждения наличия заболевания).
8. Установка эффективности лечения.

Обычно исследование на антитела проводится массово, являясь средством выборочной диагностики в определенной местности. Однако любой может самостоятельно сдать тест, если обнаружит симптомы поражения печени.

При инфицировании в крови обязательно обнаруживается маркер Anti–HCV Abbott ARCHITECT. Это антиген из вирусной оболочки. Он становится причиной болезни, разрушает печеночные клетки, вызывает тяжкие осложнения – цирроз, рак, летальный исход. Обнаружить маркер можно только спустя более 3 недель после заражения, когда завершается инкубационный период. Если он выявляется через полгода, это уже признак хронического заболевания.

Гепатит с положительным Anti-HCV еще не окончательно подтвержден, поэтому требуется более доскональное исследование. При этом сами антитела делятся на несколько типов. Основных выделяют 2:

1. Anti-HCV класса IgM – показатели острого или недавно стартовавшего процесса. Такие антитела образуются через 4-6 недель после заражения.
2. Anti-HCV класса IgG. Вырабатываются позже, спустя 11-12 недель поле инфицирования. Свидетельствуют о хронизации или затяжном течении недуга.

На практике обычно определяют Anti-HCV сумм, то есть суммарные антитела к вирусу гепатита. Они образуются под воздействием структурных компонентов инфекционного агента через месяц с момента заражения. Остаются навсегда или пока не удаляется возбудитель.

Некоторые лаборатории ищут антитела не в целом к возбудителю, а к отдельным протеинам:

1. Anti-HCV класса core IgG. Появляются в ответ на белки из вирусной структуры через 11-12 недель после инфицирования. Означают, что клетки возбудителя активно делятся, а болезнь прогрессирует.
2. Анти-NS3 – показатели острого течения инфекционного процесса.
3. Анти-NS4 – признаки затяжной болезни. Иногда еще помогают определить степень печеночного поражения.
4. Анти-NS5 – свидетельствуют о присутствии вирусной РНК. Отмечается повышенный риск того, что болезнь станет хронической.

Однако антитела к белкам NS3, NS4, NS5 на практике выявляют редко. Причина банальна – это сильно увеличивает цену комплексной диагностики. Кроме того, почти всегда установления суммарных антител с общей вирусной нагрузкой хватает для уточнения диагноза, выяснения стадии патологического процесса, назначения адекватного лечения.

При оценке результатов исследования учитывают сочетания следующих маркеров: