Анализ на ифа на гепатит

Поверхностный антиген гепатита В в сыворотке крови в норме отсутствует.
Обнаружение поверхностного антигена (HBsAg) гепатита В в сыворотке подтверждает острое или хроническое инфицирование вирусом гепатита В.

При остром заболевании HBsAg выявляется в сыворотке крови в последние 1-2 недели инкубационного периода и первые 2-3 недели клинического периода. Циркуляция HBsAg в крови может ограничиваться несколькими днями, поэтому следует стремиться к раннему первичному обследованию больных. Метод ИФА позволяет выявить HBsAg более чем у 90% больных. Почти у 5% больных самые чувствительные методы исследования не обнаруживают HBsAg, в таких случаях этиология вирусного гепатита В подтверждается наличием анти-HBсAg JgM или ПЦР.

Концентрация HBsAg в сыворотке крови при всех формах тяжести гепатита В в разгар заболевания имеет значительный диапазон колебаний, вместе с тем имеется определенная закономерность: в остром периоде существует обратная связь между концентрацией HBsAg в сыворотке и тяжестью болезни.

Высокая концентрация HBsAg чаще наблюдается при легких и среднетяжелых формах болезни. При тяжелых и злокачественных формах концентрация HBsAg в крови чаще низкая, причем у 20% больных с тяжелой формой и у 30% со злокачественной антиген в крови может вообще не обнаруживаться. Появление на этом фоне у больных антител к HBsAg расценивается как неблагоприятный диагностический признак; он определяется при злокачественных формах гепатита В.

При остром течении гепатита В концентрация HBsAg в крови постепенно снижается вплоть до полного исчезновения этого антигена. HBsAg исчезает у большинства больных в течение 3 месяцев от начала острой инфекции.

Снижение концентрации HBsAg более чем на 50% к концу 3-й недели острого периода, как правило, свидетельствует о близком завершении инфекционного процесса. Обычно у больных с высокой концентрацией HBsAg в разгар болезни он обнаруживается в крови в течение нескольких месяцев.
У больных с низкой концентрацией HBsAg исчезает значительно раньше (иногда через несколько дней после начала заболевания). В целом срок обнаружения HBsAg колеблется от нескольких дней до 4-5 мес. Максимальный срок обнаружения HBsAg при гладком течении острого гепатита В не превышает 6 месяцев от начала заболевания.

HBsAg может быть обнаружен у практически здоровых людей, как правило, при профилактических или случайных исследованиях. В таких случаях исследуют другие маркеры вирусного гепатита В – анти HBсAg JgM, анти- HBсAg JgG, анти HBеAg и изучают функцию печени.

При отрицательных результатах необходимы повторные исследования на HBsAg.
Если повторные исследования крови в течение более 3 месяцев выявляют HBsAg, такого пациента относят к хроническим больным вирусным гепатитом В.
Наличие HBsAg – довольно распространенное явление. В мире насчитывается более 300 млн. носителей, а у нас в стране – около 10 млн. носителей.
Прекращение циркуляции HBsAg с последующей сероконверсией (образование анти-HBs) всегда свидетельствует о выздоровлении — санации организма.

Исследование крови на наличие HBsAg применяется в следующих целях:

для диагностики острого гепатита В:

инкубационный период;
острый период заболевания;
ранняя стадия реконвалесценции;

для диагностики хронического вирусного гепатита В;

при заболеваниях:

персистирующем хроническом гепатите;
циррозе печени;

для скрининга и выявления больных в группах риска:

больные с частыми гемотрансфузиями;

больные с хронической почечной недостаточностью;

больные с множественным гемодиализом;

больные с иммунодефицитными состояниями, в том числе СПИДом.

Результаты исследования выражаются качественно – положительный или отрицательный. Отрицательный результат исследования указывает на отсутствие HBsAg в сыворотке крови. Положительный результат – выявление HBsAg свидетельствует об инкубационном или остром периоде острого вирусного гепатита В, а также при хроническом вирусном гепатите В.

В норме анти-HBcAg JgG в сыворотке отсутствует.
У больных анти-HBcAg JgG появляются в острый период вирусного гепатита В и сохраняются на протяжении всей жизни. Анти-HBcAg JgG – ведущий маркер перенесенного ВГВ.

Исследование крови на наличие анти-HBcAg JgG применяются для диагностики:

хронического вирусного гепатита В при наличии HBs антигена в сыворотке крови;

перенесенного вирусного гепатита В.

Результат исследования выражается качественно – положительный или отрицательный. Отрицательный результат исследования указывает на отсутствие анти-HBcAg JgG в сыворотке крови. Положительный результат – выявление анти-HBcAg JgG свидетельствует об острой инфекции, реконвалесценции или ранее перенесенном вирусном гепатите В.

В норме HBeAg в сыворотке крови отсутствует.
HBeAg можно обнаружить в сыворотке крови большинства больных острым вирусным гепатитом В. Он обычно исчезает в крови раньше HBs-антигена. Высокий уровень HBeAg в первые недели заболевания или обнаружение его на протяжении более 8 недель дает основание заподозрить хроническую инфекцию.

Этот антиген часто обнаруживается при хроническом активном гепатите вирусной этиологии. Особый интерес к определению HBeAg связан с тем, что его обнаружение характеризует активную репликативную фазу инфекционного процесса . Установлено, что высокие концентрации HBeAg соответствуют высокой ДНК-полимеразной активности и характеризуют активную репликацию вируса.

Наличие HBeAg в крови свидетельствует о высокой ее инфекциозности, т.е. присутствии в организме обследуемого активной инфекции гепатита В, и обнаруживается только в случае присутствия в крови HBs-антигена. У больных хроническим активным гепатитом противовирусные препараты применяются только при обнаружении в крови HBeAg. HBeAg – антиген – маркер острой фазы и репликации вируса гепатита В.

Исследование крови на наличие HBe-антигена применяется для диагностики:

инкубационного периода вирусного гепатита В;

продромального периода вирусного гепатита В;

острого периода вирусного гепатита В;

хронического персистирующего вирусного гепатита В.

Результат исследования выражается качественно – положительный или отрицательный. Отрицательный результат исследования указывает на отсутствие HBeAg в сыворотке крови. Положительный результат – выявление HBeAg свидетельствует об инкубационном или остром периоде острого вирусного гепатита В или продолжающейся репликации вируса и инфекциозности больного.

Анти-HBeAg в сыворотке в норме отсутствует. Появление анти-НВeAg антител указывает обычно на интенсивное выведение из организма вируса гепатита В и незначительное инфицирование больного.

Эти антитела появляются в острый период и сохраняются до 5 лет после перенесенной инфекции. При хроническом персистирующем гепатите анти-НВeAg обнаруживаются в крови больного вместе с НВsAg. Сероконверсия, т.е. переход HBeAg в анти-НВeAg, при хроническом активном гепатите, чаще прогностически благоприятна, но такая же сероконверсия при выраженной цирротической трансформации печени прогноза не улучшает.

Исследование крови на наличие анти-НВeAg применяются в следующих случаях при диагностике вирусного гепатита В:

установление начальной стадии заболевания;

острый период инфекции;

ранняя стадия реконвалесценции;

реконвалесценция;

поздняя стадия реконвалесценции.

диагностика недавно перенесенного вирусного гепатита В;

диагностика хронического персистирующего вирусного гепатита В.

Результат исследования выражается качественно – положительный или отрицательный. Отрицательный результат исследования указывает на отсутствие антител к HBeAg в сыворотке крови. Положительный результат – выявление антител к HBeAg, которые могут свидетельствовать о начальной стадии острого вирусного гепатита В, остром периоде инфекции, ранней стадии реконвалесценции, реконвалесценции, перенесенном недавно вирусном гепатите В или персистирующем вирусном гепатите В.

Критериями наличия хронического гепатита В являются:

бнаружение или периодическое выявления ДНК ВГВ в крови;

постоянное или периодическое повышение активности АЛТ/АСТ в крови;\

морфологические признаки хронического гепатита при гистологическом исследовании биоптата печени.

Вирус гепатита В в крови в норме отсутствует.
Качественное определение вируса гепатита В методом ПЦР в крови позволяет подтвердить наличие вируса в организме больного и тем самым устанавливает этиологию заболевания.

Данное исследование дает полезную информацию для диагностики острого вирусного гепатита В в инкубационном и раннем периоде развития заболевания, когда основные серологические маркеры в крови у пациента могут отсутствовать. Вирусную ДНК в сыворотке крови обнаруживают у 50% больных при отсутствии HBeAg. Аналитическая чувствительность метода ПЦР составляет не менее 80 вирусных частиц в 5 мкл, прошедшей выявление ДНК пробы, специфичность – 98%.

Этот метод имеет важное значение для диагностики и мониторинга течения хронического ВГВ. Примерно 5-10% случаев цирроза и других хронических заболеваний печени обусловлены хроническим носительством вируса гепатита В. Маркерами активности таких заболеваний является наличие HBeAg и ДНК вируса гепатита В в крови.

Метод ПЦР позволяет определять в крови ДНК вируса гепатита В как качественно, так и количественно. Определяемым фрагментом в обоих случаях служит уникальная последовательность ДНК гена структурного белка вируса гепатита В.

Обнаружение ДНК вируса гепатита В в биоматериале с помощью ПЦР необходимо для:

разрешения сомнительных результатов серологических исследований;

выявление острой стадии заболевания по сравнению с перенесенной инфекцией или контактом;

контроля эффективности противовирусного лечения.

Исчезновение ДНК вируса гепатита В из крови – признак эффективности терапии

Этот метод дает важную информацию об интенсивности развития заболевания, об эффективности лечения и о развитии резистентности к активным препаратам.
Для диагностики вирусного гепатита методом ПЦР в сыворотке крови применяются тест-системы, чувствительность которых составляет 50-100 копий в пробе, что позволяет детектировать вирус при его концентрации 5 Х 10^3 -10^4 копий/мл. ПЦР при вирусном гепатите В безусловно необходима для суждения о вирусной репликации.

Вирусную ДНК в сыворотке крови обнаруживают у 50% больных при отсутствии HBeAg. Материалом для выявления ДНК вируса гепатита В могут служить сыворотка крови, лимфоциты, гепатобиоптаты.

Оценку уровня виремии осуществляют следующим образом:
менее 2.10^5 копий/мл (менее 2.10^5 МЕ/мл) – низкая виремия ;
от 2.10^5 копий/мл (2.10^5 МЕ/мл) до 2.10^6 копий/мл (8.10^5 МЕ/мл) – средняя виремия;
более 2.10^6 копий/мл – высокая виремия.

Существует зависимость между исходом острого вирусного гепатита В и концентрацией ДНК ВГВ в крови больного. При низком уровне виремии процесс хронизации инфекции близок к нулю, при средней – хронизация процесса наблюдается у 25-30% больных, а при высоком уровне виремии острый вирусный гепатит В чаще всего переходит в хронический.

Показаниями для лечения хронического ВГВ интерфероном-альфа следует считать наличие маркеров активной репликации вируса (выявление HBsAg, HBeAg и ДНК ВГВ в сыворотке крови в течение предшествующих 6 месяцев.).

Критериями оценки эффективности лечения служат исчезновение HBeAg и ДНК ВГВ в крови, что обычно сопровождается нормализацией уровня трансаминаз и долговременной ремиссией заболевания, ДНК ВГВ исчезает из крови к 5-му месяцу лечения у 60%, к 9-му месяцу – у 80% больных. Снижение уровня виремии на 85% и более к третьему дню от начала лечения по сравнению с исходным служит быстрым и достаточно точным критерием для прогнозирования эффективности терапии.

источник

Вирусом гепатита С заражено около 170 миллионов человек по всему миру. Болезнь коварная – при смазанной симптоматике начала заболевания ее дебют проходит незамеченным. Часто развиваются хронические формы, которые приводят к разрушению клеток печени.

Исходом гепатита С становятся цирроз или рак печени. Для выявления маркеров заболевания в первую очередь назначают иммуноферментный анализ – ИФА на гепатит С.

Анализ основан на способности специфических антител (белков крови) связываться с антигеном (частицами вируса), при этом один из них «помечен» ферментом. Образовавшийся комплекс реагирует с подкрашенным субстратом, что фиксируется спектрофотометрическими методами.

Иммуноферментный анализ (ИФА) на гепатит С показывает не присутствие самого вируса-возбудителя в крови, а ответ иммунной системы на столкновение с ним. Количество вируса в крови на момент проведения ИФА может быть ничтожно мало, за порогом определения. А антитела – иммуноглобулины, которые выработались при встрече с «агрессором», продолжают циркулировать в кровеносной системе.

Именно присутствие антител определяется при ИФА. Появляются они в срок от нескольких дней до нескольких недель после заражения гепатитом С.

ИФА выявляет циркулирующие иммуноглобулины даже в малой концентрации. По их типу можно судить о давности заболевания. В острый период, когда вирус гепатита активно размножается, определяют иммуноглобулины класса М.

В хронической стадии (спустя 6 мес. от начала заболевания) при ИФА обнаруживают иммуноглобулины класса G. Последний тип также может свидетельствовать не о хронизации процесса, а о самом факте столкновения иммунной системы с вирусом гепатита С в прошлом.

Обследование на маркеры гепатита С, к которым относятся антитела – иммуноглобулины, давно стала рутинной процедурой. ИФА назначают при:

острых и хронических заболеваниях печени;

желтухе неясного генеза;

обследовании перед хирургическими вмешательствами;

стандартном обследовании доноров крови;

постановке на учет в женской консультации при беременности. Повторно анализ сдают за 2-4 недели до предполагаемой даты родов;

прохождении гемодиализа;

профилактических осмотрах медработникам, контактирующим с компонентами крови и другими биологическими жидкостями;

незащищенном сомнительном половом контакте;

рождении детей от инфицированных матерей.

В порядке рекомендаций анализ на гепатит С назначают родственникам больного, близко с ним контактирующим. В 50% случаев парентеральный источник заражения выявить не удается. Инфекционисты предполагают бытовой путь передачи, когда зараженная кровь может попадать в кровоток здорового человека через кожные ранки и трещины. У этой версии много противников.

За 48 часов до ИФА исключают из пищи алкоголь, жареное, жирное и соленое. За 12 часов до забора крови из вены пациенту необходимо воздержаться от приема каких-либо лекарств. Анализ сдают утром натощак.

Наибольшее распространение получил «твердофазный» ИФА. Твердая фаза – это материал, на котором фиксируют антитела или антигены. В этом качестве используют мембраны, активно собирающие на себя белки (лабораторные планшеты, стенки пробирки, шарики и бусины из полипропилена или поливинилхлорида, нитроцеллюлозу и пр.).

Вне зависимости от разновидности ИФА, в его проведении существует строгая этапность:

На первой стадии исследуемый материал «узнается» специфическим антителом и связывается с ним, образуя иммунный комплекс;
На второй стадии с образовавшимся иммунным комплексом реагирует помеченный ферментом так называемый конъюгат – антитело или антиген;
Заключительная стадия ИФА позволяет уловить и зарегистрировать сигнал от ферментной метки.

Вариантов выполнения анализа достаточно много. Их классифицируют:

По типу реагентов, используемых на первом этапе ИФА:
a) конкурентный;
b) неконкурентный;

По степени однородности среды, в которой происходят реакции ИФА:
a) гомогенные;
b) гетерогенные;

3) По принципу определения исследуемого вещества:
a) прямой;
b) непрямой. Именно непрямой метод ИФА используется при выявлении маркеров гепатита С.

При этом методе используют стандартные антитела к вирусу гепатита С, помеченные меткой – ферментом.

В лунки лабораторного планшета (если выбрали именно его в качестве твердой фазы) помещают сыворотку крови пациента. Выдерживают 20 минут, чтобы антигены (белки вируса гепатита С) успели прикрепиться к стенкам.
Добавляют стандартные помеченные ферментом антитела к гепатиту С. Выдерживают еще несколько часов – за это время образуются иммунные комплексы антиген-антитело с меткой. Чем больше антигенов в исследуемой сыворотке, тем больше таких комплексов образуется.
Содержимое лунок промывается от несвязанных белков. Затем добавляют субстрат. Это вещество при реакции с ферментом-меткой меняет цвет. Чем больше комплексов при ИФА образовалось, тем большее количество фермента может воздействовать на субстрат и тем ярче хроматографическая реакция. Она считывается ИФА-ридером и оценивается количественно.

При этом методе ИФА стандартный антиген связывается с антителами сыворотки пациента. К образовавшемуся иммунному комплексу добавляют меченые ферментом стандартные антитела к иммуноглобулинам.

В лунки лабораторного планшета помещают стандартный антиген гепатита С (частички вируса). Антиген прикрепляется к стенке, незакрепленные белки вымываются лаборантом.
В подготовленные таким образом лунки помещают исследуемый материал (сыворотку крови), инкубируют. Есть обязательные контрольные лунки со стандартными реагентами. За время инкубации образуются комплексы антиген-антитело. Непрореагировавшие компоненты опять вымывают.
В лунки добавляют меченые ферментом антитела к иммуноглобулинам М и G. Эти белки прореагируют с образовавшимся ранее комплексом, только если в исследуемом образце есть антитела к гепатиту С. Промывают.
Добавляют еще один компонент – субстрат. Это химическое соединение разрушается ферментом из комплекса антиген-антитело. При этом образуется окрашенное вещество, количество которого фиксируют специальным прибором – ИФА-ридером. Чем больше фермента, тем сильнее он прореагирует с субстратом и тем ярче будет цветовой сигнал.

Высокая чувствительность ИФА иногда играет с пациентом злую шутку. Не каждый положительный результат означает заболевание и не каждый отрицательный – гарантия свободы от вируса.

При положительном ИФА определяют генотип вируса и определяют количество циркулирующих в крови вирусов с помощью ПЦР (полимеразной цепной реакции).

При ИФА выявляют маркеры острой фазы заболевания (иммуноглобулины класса М (IgM)) и иммуноглобулины класса G (IgG). Последние могут означать, что у пациента хронический гепатит С или то, что иммунная система хотя бы раз в прошлом сталкивалась с этим вирусом и выработался иммунитет.

Выявление одновременно двух типов иммуноглобулинов при ИФА говорит об обострении хронического гепатита С.

Самый вероятный вариант – пациент не болен и его иммунная система никогда не сталкивалась с вирусом.

Псевдоотрицательный результат при ИФА можно получить в том случае, если пациент инфицировался относительно недавно и защитные антитела просто не успели выработаться. Это так называемое «диагностическое окно». Его срок – 6 месяцев.

Наконец, нельзя полностью исключить ошибку лаборатории.

ИФА реже дает погрешности по сравнению с ПЦР. Тем не менее, исследуемые вещества – белки. Реагент может связаться с неспецифическим белком сыворотки крови. Ложноположительный ИФА на гепатит С нередок в случаях:

выполненной накануне вакцинации;

при аутоиммунных патологиях или туберкулезе, рассеянном склерозе, склеродермии;

опухолевом процессе;

инфекциях, протекающих с гипертермией (грипп, ОРЗ и пр.).

Грешат ложноположительными результатами исследования на маркеры гепатита С у беременных. Довольно часто ИФА дает ложное заключение о наличии антител пациентам со II группой крови.

Полимеразная цепная реакция выявляет присутствие вируса в крови и его количество, помогает определить генотип. ИФА «видит» антитела – клетки, вырабатываемые спустя какое-то время после инфицирования и остающиеся в организме после уничтожения «врага».

Вариантов, при которых у пациентов с гепатитом С ПЦР отрицательный, а ИФА – положительный, два. Самый вероятный – сформировался иммунитет к вирусу, а сам он уничтожен иммунной системой или лекарствами.

Второй: нельзя исключить ошибку лаборатории при проведении ПЦР.

Диагностикой заболеваний должен заниматься врач. Он учитывает все нюансы обследования. А лабораторная диагностика, в том числе ИФА – только вспомогательный метод, не лишенный погрешностей.

источник

Анализ на гепатит С необходимо сдавать всем пациентам с подозрением на подобное расстройство. Существует несколько разновидностей подобной диагностической меры. Они указывают, какой именно вирус, а точнее, его разновидность, стала возбудителем недуга.

Необходимость проведения лабораторных обследований заключается в том, что в некоторых случаях подобная болезнь может протекать без выражения каких-либо признаков. Кроме этого, стоит учесть, что вирусный гепатит не имеет специфической симптоматики, отчего его можно ошибочно принять за ряд других патологий ЖКТ. Из этого следует, что диагностика гепатита С основывается на данных лабораторного и инструментального обследования пациентов.

Для окончательного утверждения или отрицания инфицирования человека этим вирусом необходимо проведение следующих тестов:

общий анализ крови – показывающий нарушение функционирования поражённого органа;
биохимический анализ крови на АЛТ, АСТ и билирубин. Такое исследование даст возможность получить информацию о разрушении печёночных клеток;
иммуноферментный анализ – это наиболее эффективная процедура, указывающая на стадию протекания подобного поражения печени, тип вируса и его количественные значения;
ПЦР-диагностика – укажет на наличие вируса и его происхождение;
иммунохроматографический анализ – представляет собой экспресс-тест, который позволяет в короткие сроки установить наличие у пациента антител.

Показаниями к осуществлению вышеописанных анализов на гепатит С выступают:

незащищенный половой акт с заражённым человеком;
появление одного или нескольких симптомов подобного недуга. К основным из них стоит отнести желтуху, тяжесть, дискомфорт и боль в зоне правого подреберья, снижение аппетита, нарушение сна, частые приступы тошноты и рвоты;
переливание крови;
недавнее нанесение татуировок или пирсинга;
наркомания – инфицироваться можно через использование одного шприца для инъекционного введения наркотиков;
наличие у человека в близком окружении людей с подобным диагнозом – высока вероятность инфицирования при пользовании бытовыми предметами с переносчиком вируса.

Проводить расшифровку анализов должен только тот врач, который их назначил. Это обуславливается тем, что клиницист владеет необходимой информацией о состоянии больного.

Общий анализ крови при гепатите даёт возможность получить клиницисту полную информацию об общем состоянии и функционировании внутренних органов пациента. Изменения в таких показателях не будут специфическими, но при различном протекании вирусного гепатита они будут иметь особенные изменения. Для гепатита С характерны такие отклонения:

снижение содержания лейкоцитов и уровня гемоглобина;
повышение лимфоцитов среди всего количества лейкоцитов;
нарушение процесса свёртываемости крови;
уменьшение концентрации тромбоцитов;
возрастание СОЭ.

Биохимический анализ крови направлен на отражение функционирования печени. В анализе особо важными являются следующие показатели:

АЛТ и АСТ – они попадают в кровь в случаях уничтожения клеток печени. При скрытой форме протекания подобного заболевания такие показатели нередко выступают единственными признаками протекания в организме патологического процесса. Нормой для представительниц женского пола является 31 МЕ/л, а у мужчин – 37. При наличии гепатита подобные показатели будут повышены;
билирубин – указывает на тяжесть проявление такого симптома, как желтуха. Лёгкой форме будут соответствовать значения до 85 мкмоль/л, а на тяжёлую укажут показатели свыше 170 мкмоль/л для представителей обоих полов.
активность других ферментов печени.

С помощью анализа ПЦР на гепатит С клиницисты смогут выявить генетический материал возбудителя недуга и его количество. Преимуществом такой методики является возможность определения вируса при его минимальном количестве.

Такое исследование входит в список тех анализов, которые нужно сдать абсолютно всем пациентам, обратившимся за консультацией по поводу возможного наличия вирусного поражения печени.

Анализ может определить наличие инфицирования уже через пять дней со времени предполагаемого заражения. Положительный результат укажет на протекание патологии в организме, однако такой исход — ещё не повод для отчаяния и паники. Это обуславливается несколькими причинами:

анализ крови иногда может дать ложноположительный анализ на гепатит С. Такой итог может говорить о развитии аутоиммунной патологии, формировании злокачественных или доброкачественных образований, широком спектре других расстройств вирусной этиологии. Помимо этого, он нередко является следствием индивидуальных особенностей иммунной системы;
подобный результат, помимо всего прочего, указывает и на наличие инфекции в прошлом;
данное заболевание является излечимым – оно хорошо поддаётся консервативной терапии.

Полимеразная цепная реакция существует нескольких разновидностей:

качественный и количественный анализы на гепатит С;
генотипирование.

Анализ на гепатит С ПЦР качественный – позволяет понять, присутствует ли вирус в крови или нет. Стандартной чувствительностью такого теста будут показатели от 10 до 500 МЕ/мл. Его исходами могут быть два результата:

присутствует – говорит об активном размножении вируса;
отсутствует – количество возбудителя в крови человека находится ниже уровня восприимчивости такого лабораторного исследования.

ПЦР количественный – это значение вирусной нагрузки, отображающее содержание РНК вируса один кубический сантиметр крови. Такая методика не только является частью диагностических мероприятий, но также даёт возможность контролировать эффективность противовирусной терапии. Таким образом, при помощи такого теста уточняется несколько важных факторов:

инфекционность – это возможность передачи возбудителя от одного человека к другому. Чем выше количество РНК гепатита, тем больше шансы заразить здорового человека, в частности, во время полового контакта, а также при пользовании одной бритвой или маникюрными принадлежностями;
выбор тактики терапии;
продолжительность приёма противовирусных препаратов и прогноз.

Количественный ПЦР-анализ на гепатит зависит от разновидности лабораторного теста и границ его восприимчивости. Нижним значением является не более 600.000 МЕ/мл, средние показатели находятся в пределах от 600.000 до 700.000 МЕ/мл. Результаты от 800.000 МЕ/мл и более уже считаются высокой степенью содержания РНК вируса.

Генотипирование позволяет выявить, каким именно из одиннадцати генотипов возбудителя заразился человек.

После расшифровки анализов клиницист может назначить индивидуальную схему медикаментозной терапии.

ИФА – иммуноферментный тест, являющийся наиболее распространённым и наиболее точным тестом, который позволяет определить наличие или отсутствие антител к возбудителю гепатита.

ИХА – иммунохроматографическое исследование, представляющее собой экспресс-тест для выявления антител. Он осуществляется при помощи специальных полосок и кассет. Несмотря на то что такая методика является довольно новой и только в начале пути своего совершенствования, выделяют один её недостаток, а именно низкую точность. Индикаторные полоски далеко не во всех случаях способны показать итог теста с точностью до сотых.

В независимости от того, какие анализы нужно сдать, они требуют тщательной подготовки пациента. Для получения достоверных результатов анализов на гепатит С, пациенту рекомендуется:

сдавать анализы в первой половине дня, обязательно на голодный желудок;
непосредственно перед лабораторной диагностикой запрещается пить кофе, чаи, соки или другие напитки. Можно принимать внутрь только очищенную воду без газа;
за двое суток до осуществления исследований стоит отказаться от употребления жирных и острых блюд, а также от распития спиртного;
минимум за два часа до какого-либо анализа нужно ограничиться от выкуривания сигарет.

Основу лабораторной диагностики составляет ПЦР, во время расшифровки которого, учитываются:

положительный или отрицательный результат качественного анализа;
количество копий вируса, которое при подобном недуге всегда будет показывать выше 800.000 МЕ/мл.

Во время расшифровки особое внимание обращают на значение второго пункта.

В некоторых случаях наблюдается такая ситуация, когда антитела к гепатиту С положительны, а ПЦР — отрицательный. Это свидетельствует о ранее перенесённом заболевании данной этиологии.

Для прохождения лабораторной диагностики необходимо обратиться к инфекционисту. Только этот специалист сможет провести грамотное первичное обследование и расшифровку результатов анализов.

источник

Для диагностики вирусного гепатита в рамках медицинского протокола используется несколько лабораторных и инструментальных методик. Одной из самых достоверных является иммуноферментный анализ (ИФА). Метод помогает определить наличие антигена к тому или иному виду вируса. Для этого выполняется стандартная процедура забора крови из вены пациента. Результаты становятся известны уже через неделю после взятия анализа.

Термин расшифровывается как «иммуноферментный анализ». Он подразумевает определение в крови комплексов антиген-антитело для уточнения этиологии возбудителя. Если это вирус, определяются его виды и подвиды. Антигены — это частички на поверхности клеток возбудителей, связывающиеся с определенными участками антител. Последние являются иммунными молекулами, вырабатываемыми организмом для собственной защиты. Антигены и антитела неповторимы, поэтому определение их структуры с помощью иммуноферментного анализа свидетельствует о наличии конкретной патологии в организме больного. В качестве меток используются ферменты, которые и дали название методике.

ИФА — это высокоточная методика, ее чувствительность достигает 90%. Она помогает проводить скрининг парентеральных гепатитов. Эти заболевания передаются путем инъекции, или через переливание крови. ИФА помогает выявить пациентов, у которых отсутствуют симптомы. Таковыми является большинство хронических больных. Они имеют риск развития цирроза. Его обнаружение на поздних стадиях — это плохой прогноз. Поэтому иммуноферментная методика позволяет своевременно определить заболевание и сэкономить деньги на лечение. ИФА верифицирует этиологию возбудителя и определяет прогноз недуга. Диагностические наборы для нее стоят недорого и длительно хранятся. За быстроту, удобство и точность данных ИФА называют экспресс-методом.

ИФА необходим, когда требуется уточнить этиологию вирусного возбудителя для определения схемы лечения. У пациента идентифицируют наличие хронического гепатита B и C, или перенесенного заболевания вирусом подтипа A. Методику нужно применять у членов семьи больного, которые могут заразиться. В инфекционном стационаре анализ выполняется всем пациентам, у которых присутствуют такие симптомы:

Желтуха. Желтушность кожных покровов не сопровождается болями в правом подреберье и изменением цвета стула и мочи.
Повышение температуры тела. Она вырастает до субфебрильных цифр, иногда наступает лихорадка.
Диспепсия. Присутствуют тошнота и рвота, которая не приносит облегчение.
Немотивированная слабость.
Мелкоточечные высыпания на теле. Это мелкие кровоизлияния вследствие печеночной недостаточности.
Тяжесть в правом подреберье. Симптом возникает вследствие растяжения увеличенной печенью собственной капсулы, содержащей множество нервных окончаний.

Основным показанием к выполнению анализа является наличие определенных анамнестических данных. Если пациент ранее страдал инъекционной наркоманией, ему переливали кровь или пересаживали органы — это повод выполнить ИФА.

Чтобы результаты ИФА были достоверными, требуется предварительно подготовиться. За день до сдачи крови пациенту рекомендуется перестать употреблять жирную и жареную пищу, продукты с высокой концентрацией красителей, стабилизаторов, консервантов, усилителей вкуса и аромата. Нежелательно непосредственно перед выполнением метода заниматься тяжелым физическим трудом и спортивными упражнениями. В день сдачи крови необходимо воздержаться от завтрака. Забор материала натощак позволит получить точный результат. Необходимо исключить из употребления некоторые лекарственные средства. Но самостоятельно это делать не рекомендуется, поскольку есть вероятность вреда для здоровья. Нужна предварительная консультация лечащего доктора.

Метод ИФА состоит из двух этапов. На первом выполняется забор материала, на втором последний исследуется в лаборатории. Начальный этап проходит стандартно. Ему предшествует подготовка пациента к сдаче крови. В стерильном помещении проводится забор биоматериала, отправляемый в герметических контейнерах на лабораторное исследование. Дальнейшее определение комплексов антиген-антитело происходит с помощью ферментов и тест-систем на специализированном оборудовании. Результат становится известен в течение недели и отправляется пациенту на электронную почту.

Интерпретация данных подразделяется на качественную и количественную. При качественном определении результаты анализа считаются позитивными, если обнаружены суммарные антитела к определенному подтипу вируса. Выявление anti-НАV IgМ свидетельствует про острый, а anti-НАV IgG — хронический гепатит А. Позитивный маркер НВsAg — признак инфицирования вирусом подтипа В. Он наблюдается в острой и хронической фазах заболевания. Если же выявлен HBCAg, у человека присутствует хронический гепатит С. А anti-НDV сигнализирует про инфицирование подвидом D. Пациенты, у которых определен положительный маркер к вирусу, нуждаются в дальнейшем обследовании для более точной верификации диагноза.

источник

Почему важно периодически сдавать анализ крови на вирус гепатита C? Гепатит C — заболевание, которое иногда называют «ласковый убийца», потому что у 80% пациентов он вообще себя никак не проявляет на протяжении нескольких десятков лет. Диагноз в таких случаях нередко ставится с большим опозданием, когда уже внезапно развивается острая печеночная недостаточность.

Вызывается болезнь вирусом НСV, относящимся к семейству Flaviviridae.

Существует 11 генотипов вируса гепатита C.
Три типа вируса характерны для России, наиболее распространены подтипы 1b, 3, 1а и 2.
По агрессивности трудноизлечимой и опасной считается болезнь, вызванная генотипом вируса 1.
Подтип 1b чаще всего попадает в организм при переливании крови.
Опасен также гепатит, вызванный вирусом 3 генотипа.
Для него характерно быстрое прогрессирование заболевания.
Иногда хронический гепатит, вызванный данным типом вируса, превращается в цирроз за 7-10 лет.
Подтип гепатита 3а – самая распространенная разновидность заболевания среди наркоманов.
Случается, что в крови больного обнаруживается сразу несколько разновидностей вируса.

В подавляющем большинстве случаев течения гепатита C никаких симптомов у человека не возникает.

А если и наблюдается течение заболевания, то не будет ни одного признака, который бы так или иначе указывал на свою природу.
Все проявления будут говорить в пользу ОРВИ (интоксикационный, астеновегетативный и диспепсический синдромы).
То есть, человека сильно тошнит, отмечается выраженная общая слабость, головная боль и головокружение, возможно повышение температуры тела.
После того, как спадут эти симптомы, возникает желтушность склер и кожных покровов – но чаще приходится отмечать безжелтушные формы.

Если иммунитет человека побеждает вирус, то он полностью исчезает из организма.

Однако антитела к вирусу при этом могут сохраняться в организме длительное время.
Подобное развитие заболевания встречается в 10-15% случаев.
Согласно данным ВОЗ, инкубационный период гепатита C составляет по продолжительности от 2 недель до 6 месяцев.

Вирус обитает не только в клетках печени, но и в других биологических жидкостях организма.

Наибольшая концентрация вируса обнаруживается в крови.
Вирус не попадает в грудное молоко.

Нужно знать, что источником заражения для одного человека может быть только другой человек. Заражение происходит в следующих случаях:

При переливании крови, зараженной возбудителем;
Инъекционным способом;
Половым путем, при незащищенных контактах.
При хирургических или стоматологических процедурах;
При использование нестерилизованных многоразовых шприцов;
При использование нестерилизованных инструментов в парикмахерских, салонах красоты, тату-салонах, и т.д.;
Передача от матери новорожденному ребенку во время родов.

Читайте также: Анализы ама и гепатит с

Обследование, которое позволит установить точный диагноз — это два анализа крови ИФА и ПЦР , которые помогают точно определить маркеры вирусного гепатита С, тип вируса и его количество.

ИФА анализ — определение маркеров вируса – это самый главный анализ, определяющий возбудителя заболевания. Называется он иммуноферментный анализ с определением антител к вирусу гепатита (сокращенно – ИФА).
Анализ крови ИФА (иммунно ферментный анализ). Суть анализа заключается в выявлении специфических иммунных белков, которые вырабатываются организмом человека в ответ на проникновение вируса.
Анализ ИФА, иммуноферментный анализ крови с определением титра антител: специфических антител класса M и G.
Данный анализ уточняет факт наличия вируса гепатита C в крови человека.
Наличие в организме антител класса М к любому из вирусов указывает на развитие острого процесса.
Определение антител класса G говорит в пользу хронизации гепатита.

Если результат анализа АФА будет положительным, то возникнет необходимость проведения анализа крови полимеразная цепная реакция ( ПЦР анализ), с целью определения «вирусной нагрузки».
ПЦР анализ — метод ДНК-диагностики, который используется для уточнения диагноза, это специальный анализ крови, называется полимеразная цепная реакция (сокращенно — ПЦР), который укажет конкретного возбудителя болезни, стадию заболевания и покажет вирусную нагрузку, приблизительное количество патогенных микроорганизмов.
Определение вирусной нагрузки позволяет оценить тяжесть заболевания и определить тактику лечения пациента.

Дополнительно проводится общий и биохимический анализы крови.

При хроническом прогрессирующем заболевании прогноз для выздоровления нельзя назвать оптимистичным.

Грозное осложнение болезни — цирроз печени.
Другое осложнение гепатита C – гепатоз (жировое перерождение печеночной ткани).
В некоторых случаях эта болезнь может завершиться карциномой (раком) печени.

Осуществляется забор крови из вены, после чего образец забирают в лабораторию и выполняют анализ.

Для получения достоверного результата необходимо сдавать анализ крови только на голодный желудок.

Это обследование показано:

Перед проведением любой операции,
при подозрении на вирусный гепатит и при необходимости проведения дифференцированной диагностики.
Работникам сферы здравоохранения, детских учреждений.
Лицам, практикующим гомосексуальные и беспорядочные половые связи.
Наркоманам.
Лицам, отбывающим срок в заключении.
Пациентам на гемодиализе.
Реципиентам и донорам крови.
Младенцам, родившимся от зараженной вирусом матери.
Членам семьи зараженного.

Вирус гепатита C погибает при нагревании до 100°С в течение 2 минут, при стирке, в 60°С погибает за 30 минут.

Механизм заражения гепатитом C во многом схож с механизмом заражения ВИЧ.
Однако гепатит C в целом более характерен для развитых стран.
Примерно 50% заразившихся вирусом гепатита C– это наркоманы, как и в случае с ВИЧ.
В настоящее время нет вакцины от вируса гепатита C, сложность разработки вакцины объясняется наличием множества генотипов вируса.
Рекомендуется вакцинация от гепатитов А и В, особенно группам риска, поскольку одновременное заболевание данными типами гепатита значительно осложняет течение гепатита C

Приблизительно в 20% случаев организм человека самостоятельно справляется с этим вирусом, однако высока вероятность перехода заболевания в хроническую форму, со всеми вытекающими из этого последствиями.

При отсутствии терапии болезнь обычно прогрессирует, ткань печени подвергается разрушению.
Прогноз ухудшают и многие сопутствующие факторы:
ослабленный иммунитет;
другие тяжелые заболевания,
алкоголизм,
употребление наркотиков.

Еще совсем недавно гепатит C считался неизлечимым. Но ситуация изменилась с появлением нового поколения противовирусных препаратов.

Традиционная схема терапии гепатита C включает интерфероны и препарат рибавирин.
Интерфероны – вещества, аналогичные тем, которые вырабатывают иммунные клетки для борьбы с вирусом.
Существуют различные типы интерферонов.
Продолжительность курса лечения рибавирином и интерферонами определяется врачом.
Однако эффективность подобной терапии оставляет желать лучшего.

В последнее время был разработан ряд новых антивирусных препаратов:

софосбувир, велпатасвир, даклатасвир, ледипасвир.
Они относят к классу препаратов прямого действия (ППД).
Нередко в одном лекарственном препарате совмещают сразу несколько — софосбувир и ледипасвир, софосбувир и велпатасвир.
Курс терапии ими может занимать от одного до шести месяцев, все зависит от типа вируса и от степени развития заболевания.
При гепатите, не отягощенном циррозом, продолжительность лечения обычно составляет 3 месяца.
Если же быстро избавиться от вируса не удается, то в схему лечения могут быть добавлены интерферон и рибавирин.
Правильно подобранное лечение позволяет уничтожить вирус в 95% случаев.
Недостатком этих современных препаратов является их очень высокая стоимость.
Но существует также ряд более дешевых дженериков индийского производства.

Использование препаратов класса гепатопротекторов имеет своей целью поддержку печени и замедление в ней процессов разрушения.

Чаще используются гепатопротекторы: Гепабене, Карсил или Гептрал
Также врачом одновременно с антивирусными препаратами могут назначаться иммуномодуляторы, которые нормализуют функции и состав крови.
Имеет значение и правильно подобранная диета.
Запрещается при заболевании употребление алкоголя.
Следует ограничить использование гепатотоксичных медикаментов.

Контроль эффективности проводимой терапии осуществляется по анализам крови:

если количество вируса уменьшилось, то снижается концентрация в крови печеночных ферментов, билирубина, улучшаются и другие показатели.
Анализ на ПЦР , (полимеразная цепная реакция), определить количественное снижение вирусных частиц.

источник

Оставьте комментарий 3,052

Для выявления вирусных гепатитов в организме медицина широко применяет метод иммуноферментного анализа, основанного на выявлении концентрации и вида антигенов с помощью антител и ферментов. Проводится поэтапно, путем лабораторных исследований, с высокой точностью показаний. В зависимости от количества и класса антител изменяется цвет и концентрация фермента, который использует ИФА и, согласно этому, врач диагностирует заболевание.

Наличие вирусного гепатита в организме больного определяют с помощью серологического метода анализа крови на присутствие вируса HCV и маркеров (тел и антител), на него указывающих. Иммуноферментный анализ (ИФА) исследует разные вирусы, низкомолекулярные соединения, макромолекулы, их качественный и количественный показатели, используя проявление реакции на их антигены. Для этого применяют фермент, как метку для сигнальной регистрации. Его все шире используют в медицине, поскольку ИФА четко находит строго определенные антигены, не путая их с другими, имеет высокую чувствительность к наличию инвазии при вирусном гепатите.

Минус такой диагностики — невозможность выявить причину болезни, так как метод указывает только на реакцию иммунной системы организма. На результаты анализа влияет вакцинация, проведенная ранее. За 8 часов перед проведением анализа рекомендуется воздержаться от приема пищи, никотина, алкоголя. Основа ИФА теста — ферментативная и иммунная реакция организма на вирус. Биологические молекулы связываются с клеткой и ее элементами, микроорганизмами, обнаруживают вирус, далее работают ферменты, которые позволяют выразить иммунную реакцию в видимый и измеримый параметр.

Вирусные гепатиты в организме могут стать причиной возникновения онкологических заболеваний и цирроза печени. Важность своевременной диагностики неоспорима. Первичным способом диагностики является тест ИФА, который с высокой точностью определяет наличие HCV вируса (IgM и IgG) и активность его микроэлементов. В обязательном порядке анализы на вирусный гепатит сдают:

Люди с групп риска (наркозависимые, болеющие СПИДом, работники медицинских и правоохранительных учреждений).
Люди с острой или хронической формой гепатита.
Беременные и планирующие беременность женщины.

ИФА распознает болезнь на любой стадии. Результаты анализа, в среднем, готовы за 2 дня.

ИФА тест определяет наличие антител класса IgG, IgM, IgA. При диагностике вирусного гепатита врач не обращает внимания на их тип, так как присутствие любого такого проявления вируса HCV уже указывает на острую или хроническую стадию протекания болезни. На ранних стадиях заболевания повышается уровень IgM (через 5 дней после заражения); на 15—20 день появляются IgG антитела и могут долгое время находиться в крови человека даже после излечения; IgA — появляется через 10—14 дней, снижается после лечения.

В случае, если IgG и IgA обнаруживаются после применения препаратов и их уровень остается в том же показателе — у носителя хроническая форма гепатита. Важным критерием теста будет четкое определение класса имеющихся антител и их количества. На основании этого можно знать не просто о наличие заболевания, но и стадию его развития. Обнаружение таких элементов в крови больного дает возможность назначить правильное и своевременное лечение для предотвращения более тяжелых последствий.

Выделяют прямой и не прямой тест ИФА. Этапы прямого:

Сбор биологического материала и размещение его в специальных лунках.
В течение 15—30 мин. антигены прикрепляются к поверхности лунок.
Добавление антител в лунки к найденному антигену. Оставляется все на 1—5 часов.
Удаления неприкрепленных антигенов (выливание содержимого лунок).
Ополаскивание лунок специальным раствором.
Добавления ферментного раствора в лунки. Оставляют на 30 мин.—1 час.
Использование колориметрии (выявление цвета и концентрации окраса содержимого лунки, сопоставление с показателями, которые прямо пропорциональны с концентрацией вируса).

Использование для диагностики непрямого метода ИФА даст более точный результат.

Непрямой метод ИФА проходит при применении немеченных антител к найденным антигенам и впоследствии добавлении к ним меченных. Сначала берется кровь у пациента и разносится по лункам на 15—30 мин. (антитела фиксируются с лунками). Потом в них вносятся немеченные антитела на 1—5 часов (образуется связь антител с антигенами — иммунный комплекс). Далее не прикрепленные микроэлементы выливаются с лунок и промываются специальным раствором. На следующем этапе лаборант добавляет в лунки меченные микроэлементы на 15—30 мин. (при этом связываются немеченные с меченными с образованием комплекса «антитело-антитело-антиген»). Повторно удаляются лишние (незакрепленные) при сливании и промывке раствором. Далее вносится фермент, который меняет цвет за 5—30 мин. пребывания в лунках и данные окраса сверяются с данными показателей таблиц. Непрямой метод ИФА более точный.

Иммуноферментный анализ позволяет выявить наличие инфекции (вирусы гепатита всех видов, ВИЧ, герпес, сифилис, цитомегаловирус, корь, краснуху, вирус паротита, вирус Эпштейн-Барра), является маркером аутоиммунных заболеваний, раковых клеток. Указывает на нарушения репродуктивных функций (изменения уровня тестостерона, пролактина, эстрадиола и прогестерона), сбой работы щитовидной железы, инвазию гельминтами, хламидиями. Эффективен для выявления уреаплазмоза, коклюша, вируса Данге, вируса Западного Нила, Боррелии. Список определений высок, включает много наименований.

Определение антигена вируса HCV методом ИФА дает 98% точность. Его также используют для повторного тестирования биологического материала при нечетких предыдущих показателях. Наличие IgM антигенов не является показателем на гепатит острой формы и требует дополнительных исследований. При повторном проведении ИФА теста результаты совпадают на 90—100%. В случаях минимального расхождения как показатель принимается среднее значение. Для получения максимальной точности в показателях врачи советуют параллельно проводить биохимический анализ крови. Для проверки результатов после иммуноферментного анализа можно использовать другие способы диагностики.

ИФА гепатит С определяет эффективно, это один из методов диагностики заболевания, основанный на взаимодействии антигенов и антител. Иммунохимическая реакция путем ИФА (иммуноферментного анализа) позволяет выявить в организме анти-HCV антитела. Метод дает возможность дифференциальным путем диагностировать у человека гепатит С, определить стадию развития заболевания, спрогнозировать его течение. Выявление специфических серологических маркеров позволяет также подобрать эффективное противовирусное лечение патологии.

Анализ на выявление в крови человека антител к вирусу гепатита типа C проводится путем присоединения к молекуле иммуноглобулина чужеродного микроорганизма (антигена). Присоединенный энзимный фермент играет роль своеобразной метки. Она позволяет проследить за иммунохимической реакцией, а также одним из ее компонентов.

В качестве компонентов иммуноферментного анализа могут выступать:

антитела;
антитела, помеченные специальным ферментом;
антигены;
субстраты ферментов;
индикаторные красители.

При попадании в организм человека вредоносных чужеродных микроорганизмов защитные силы начинают вырабатывать иммуноглобулины (антитела). Впоследствии они воздействуют на антигены и нейтрализуют их. Такое взаимодействие приводит к образованию антитела-антигена, имеющего свои показатели количества и качества. Именно они свидетельствуют о наличии либо отсутствии в организме HCV-инфекции. В случае если результат иммуноферментного анализа положительный, имеет место вирус гепатита типа С.

Современные технологии в медицине позволяют значительно сократить сроки выявления вируса гепатита, протекающего в острой форме. Благодаря диагностическим системам третьего поколения также представляется возможным повысить специфичность и чувствительность иммунохимической реакции.

Основным исследуемым материалом при проведении ИФА выступает венозная кровь (в том числе донорская). По показаниям могут производить забор спинномозговой жидкости или околоплодных вод.

Положительный результат метода ИФА на гепатит типа С не всегда свидетельствует о наличии вирусной инфекции в организме. В более чем 35 % случаев в крови вирусных антигенов не обнаруживается, что приводит к ложноположительному результату.

Метод позволяет следить за количественными и качественными изменениями, разграничением острой и хронической формы гепатита С. Однако для определения активности патологического процесса он малоэффективен. Для более точного подтверждения наличия HCV-инфекции следует применять также другие методы диагностики патологии.

Метод выявления видовой и количественной концентрации чужеродных микроорганизмов (антигенов) при помощи иммуноглобулинов и ферментов проводится в несколько этапов. На основании изменения цвета и количественного показателя фермента врач может диагностировать у человека гепатит типа C.

В большей степени заболеванию подвержены следующие категории людей:

Пациенты, перенесшие хирургические вмешательства, а также заболевания внутренних органов и систем.
ВИЧ-инфицированные (инфицированные вирусом иммунодефицита человека). Большой процент людей, входящих в эту группу, составляют наркозависимые люди.
Медицинские работники.
Сотрудники правоохранительных органов.
Беременные женщины.

Гепатиты вирусного происхождения нередко приводят к развитию онкологического заболевания (например, рака печени). Именно поэтому сдавать кровь на иммуноферментный анализ следует в первую очередь людям, входящим в основную группу риска, а также больным с острой либо хронической формой гепатита.

По показаниям врач может назначить проведение метода ИФА пациентам, у которых диагностируется:

ИППП (инфекции, передающиесяполовым путём);
заболевания вирусной природы происхождения (папилломавирус, герпетическая инфекция, гепатит и т. д.);
аллергический характер патологии;
иммунодефицитное состояние;
онкология.

ИФА гепатит С позволяет выявлять на ранней стадии, а также в бессимптомной и безжелтушной формах. Как и у любого метода диагностики, он имеет ряд преимуществ и недостатков.

Среди положительных особенностей ИФА специалисты выделяют:

Точность качественных и количественных показателей. Чувствительность метода превышает другие исследования на выявление гепатита в десятки раз.
Значительное сокращение сроков выявления вирусной инфекции благодаря современным диагностическим системам.
Невысокая цена по сравнению с другими исследованиями на выявление гепатита у человека.
Возможность диагностирования заболевания печени на ранней стадии при отсутствии выраженных симптомов.
Поэтапное проведение исследования с использованием автоматизированных процессов.

Несмотря на высокую точность ИФА, более чем в 35 % случаев при положительном результате вирус гепатита у пациента не выявляется. Нередко тест не подтверждает патологию, что свидетельствует о сомнительном или отрицательном результате.

На достоверность исследования в той или иной степени влияет:

Прием лекарственных препаратов.
Нарушения обменных процессов в организме.
Наличие некоторых патологий хронического характера, способствующих активной выработке иммуноглобулинов.

Учитывая недостатки результатов опыта инвитро методом ИФА, пациенту назначаются дополнительные исследования. Для достоверного обнаружения антител к вирусной инфекции гепатита С применяется метод ПЦР (полимеразной цепной реакции) либо RIBA (рекомбинантный иммуноблоттинг).

Анализ методом ИФА способен выявить широкий ряд заболеваний у человека.

Помимо обнаружения антител гепатита всех видов, положительный результат теста может свидетельствовать о наличии в организме следующих патологий:

вируса иммунодефицита человека;
герпетической инфекции;
сифилиса;
ИППП (уреаплазмоза, хламидиоза и др.);
папилломавируса;
цитомегаловируса.

Исследование также является своеобразным маркером по обнаружению злокачественных новообразований, генетических патологий, гормональных нарушений, а также сбоев в функционировании эндокринной системы.

Подготовка к сдаче биологического материала на выявление вируса гепатита С подразумевает отказ от приема пищи и медикаментов за 12 часов до проведения исследования. Также необходимым условием является воздержание от употребления алкоголя, жирных, жареных и соленых блюд.

Основные этапы при проведении прямого теста заключаются в следующем:

Вначале лаборант производит забор крови из вены (либо другого биологического материала), а затем помещает ее в специальные емкости.
Чужеродные микроорганизмы (антигены) в течение 20 минут начинают прикрепляться к ним.
Специалист добавляет иммуноглобулины (антитела) к найденным антигенам для образования иммунной реакции. При этом компоненты оставляются на несколько часов.
Неприкрепленные антигены удаляются путем выливания содержимого из емкостей.
Материал ополаскивается раствором, а затем обрабатывается ферментами и оставляется на один час.
Цвет и концентрация содержимого анализируются благодаря использованию колориметрии.

Если количественный показатель содержимого превышает допустимые нормы, то это свидетельствует о наличии вируса гепатита С в организме человека.

Подразумевает взаимодействие непомеченных иммуноглобулинов с антигенами, к которым впоследствии присоединяют помеченные антитела.

В начале у пациента берется кровь из вены. Затем биологический материал помещается в специальные емкости примерно на полчаса. При этом непомеченные антитела присоединяются к стенкам емкостей. Затем к ним добавляются помеченные антитела. В результате их взаимодействия образуется иммунный комплекс «антитело-антиген».

По истечении 4 часов содержимое емкостей выливается, а неприкрепленные микроэлементы удаляются. Лаборант присоединяет помеченные антитела к уже образовавшемуся комплексу, при этом происходит иммунная реакция «антитело-антитело-антиген».

После повторного удаления незакрепленных микроэлементов в емкость добавляется специальный фермент, меняющий цвет и количественные показатели содержимого. На основании полученного результата специалист сверяет данные и делает заключение.

При проведении ИФА внимание уделяется наличию либо отсутствию антител классов IgA, IgG и IgM. Количественные показатели этих антител сверяются с данными специальной таблицы.

Согласно ей, расшифровка результатов сводится к следующему:

Если все три типа показателей не определяются, у человека наблюдается полное выздоровление.
При одновременном положительном результате по всем трем показателям, наблюдается острая форма вирусной инфекции.
Если определяются антитела класса IgG, при этом остальные классы не выявлены, то у человека развился постинфекционный иммунитет.
На хронический характер заболевания указывают положительные показатели антител классов IgG и IgA. При этом они остаются неизменными даже после медикаментозного лечения.
При положительном выявлении всех трех типов антител может наблюдаться рецидив хронического характера гепатита.

Согласно статистическим данным, уровень IgM начинает повышаться через несколько дней после попадания инфекции в организм, что свидетельствует о ранней стадии патологии. IgG антитела обычно проявляются через 2 недели после начала заболевания и находятся в крови на протяжении длительного периода времени (даже после выздоровления). Антитела IgA обнаруживаются через 2 недели, при этом после медикаментозной терапии их концентрация в организме снижается.

Помните, что гепатит С ИФА положительный не всегда свидетельствует о наличии инфекции. Нередко тест считается ложноположительным, что требует повторной сдачи крови. В некоторых случаях пациенту назначают дополнительные исследования для более точного определения показателей крови.

Основным критерием при проведении теста является точное выявление количественных и типовых показателей. Они позволяют определить не только наличие вируса, но и форму заболевания. Диагностика гепатита С при помощи современных методов позволит начать своевременную медикаментозную терапию и минимизировать негативные последствия.

Может ли анализ на гепатит С быть ошибочным? К большому сожалению, такие случаи иногда бывают. Эта патология опасна тем, что после заражения симптомы часто отсутствуют у человека в течение многих лет. Точность в диагностике гепатита С особенно важна, так как при несвоевременном выявлении и лечении недуг приводит к катастрофическим осложнениям: циррозу или раку печени.

Вирусы гепатита C передаются через кровь, поэтому важен ее анализ. Иммунная система вырабатывает против возбудителей болезни белковые антитела — иммуноглобулины М и G. Они являются маркерами, посредством которых печеночная инфекция диагностируется при применении иммуноферментного анализа (ИФА).

Примерно месяц спустя после инфицирования или при обострении хронического гепатита С формируются антитела класса М. Наличие таких иммуноглобулинов доказывает: организм поражен вирусами и стремительно уничтожает их. В ходе выздоровления пациента численность этих белков неуклонно сокращается.

Антитела G (anti-HCV IgG) формируются значительно позже, в период от 3 месяцев до полугода после вторжения вирусов. Их обнаружение в кровотоке сигнализирует о том, что инфицирование случилось давно, поэтому острота болезни миновала. Если таких антител немного и в повторном анализе становится еще меньше, это свидетельствует о выздоровлении больного. Но у пациентов с хроническим гепатитом С иммуноглобулины G присутствуют в кровеносной системе всегда.

В лабораторных анализах определяют и наличие антител к неструктурным вирусным белкам NS3, NS4 и NS5. Anti-NS3 и Anti-NS5 выявляются на ранней стадии болезни. Чем больше их показатель, тем вероятнее, что она станет хронической. Anti-NS4 помогают установить, давно ли инфицирован организм и как сильно поражена печень.

У здорового человека в анализах крови нет АЛТ (аланинаминотрансферазы) и АСТ (аспартатаминотрансферазы). Каждый из данных печеночных ферментов свидетельствует о ранней стадии острого гепатита. Если же обнаружены оба, то это может сигнализировать о начале некроза клеток печени. А наличие фермента ГГТ (гамма-глутамилтранспептидазы) — один из признаков цирроза органа. Доказательством разрушительной работы вирусов является и присутствие в крови билирубина, фермента ЩФ (щелочной фосфатазы), белковых фракций.

Самая точная диагностика при правильном ее проведении — методом ПЦР (полимеразной цепной реакции). Основывается она на выявлении не иммунных антител, а структуры РНК (рибонуклеиновой кислоты) и генотипа возбудителя гепатита С. Используют 2 варианта этого метода:

качественный — есть вирус или нет;
количественный — какова его концентрация в крови (вирусная нагрузка).

«Анализ на гепатит С — отрицательный». Такой формулировкой подтверждается отсутствие болезни при качественном исследовании методом ПЦР. Аналогичный результат количественного теста ИФА показывает, что в крови нет антигенов вируса. В иммунологических исследованиях иногда указывают их концентрацию ниже нормы — это тоже отрицательный результат. Но если антигенов нет, а антитела к ним есть, данное заключение сигнализирует о том, что пациент или уже переболел гепатитом С или недавно был вакцинирован.

«Анализ на гепатит С — положительный». Такая формулировка требует уточнения. Позитивный результат лаборатория может выдать человеку, который когда-то болел им в острой форме. Эта же формулировка применима и к людям, которые в настоящее время здоровы, но являются вирусоносителями. Наконец, это может быть ложный анализ.

В любом случае необходимо провести исследование повторно. Больному с острым гепатитом С, находящемуся на лечении, врач может назначать тестирование через каждые 3 дня, чтобы отслеживать эффективность терапии и динамику состояния. Пациент с хроническим недугом должен сдавать контрольные анализы через каждые полгода.

Если результат теста на антитела положительный, а заключение исследования методом ПЦР отрицательное, считается, что человек потенциально инфицирован. Чтобы убедиться в наличии или отсутствии антител, проводят диагностику методом RIBA (РИБА — рекомбинантного иммуноблота). Данный метод информативен через 3–4 недели после инфицирования.

Во врачебной практике различают 3 варианта неадекватных результатов диагностического исследования:

сомнительный;
ложноположительный;
ложноотрицательный.

Иммуноферментный метод считается весьма точным, но порой он дает ошибочную информацию. Сомнительный анализ — когда клинические симптомы гепатита С у пациента есть, но маркеров в крови нет. Чаще всего это происходит при слишком ранней диагностике, поскольку антитела не успевают сформироваться. В таком случае делают повторный анализ через 1 месяц, а контрольный — через полгода.

Ложноположительный анализ на гепатит С врач получает, когда методом ИФА обнаруживаются иммуноглобулины класса М, а методом ПЦР РНК вируса не выявляется. Такие результаты нередко бывают у беременных женщин, пациентов с иными типами инфекции, онкобольных. Им тоже нужно делать повторные тесты.

Ложноотрицательные результаты появляются весьма редко, например, в инкубационном периоде болезни, когда человек уже инфицирован вирусом гепатита С, но и иммунитет к нему, и симптомы еще отсутствуют. Такие результаты могут быть у пациентов, которые принимают препараты, подавляющие защитную систему организма.

Гепатит С протекает по-разному в зависимости от генотипа вируса. Поэтому в ходе диагностики важно определить, какой из 11 его вариантов находится в крови пациента. У каждого генотипа есть несколько разновидностей, которым присвоены буквенные обозначения, например 1а, 2в и т. д. Точно подобрать дозировки препаратов, длительность лечения можно, узнав вид вируса.

В России распространены преимущественно генотипы 1, 2 и 3. Из них хуже и дольше всего лечится генотип 1, особенно подтип 1в. У вариантов 2 и 3 более благоприятные прогнозы. Но генотип 3 может приводить к тяжелому осложнению: стеатозу (ожирению печени). Бывает, пациент инфицируется вирусами сразу нескольких генотипов. При этом один из них всегда доминирует над другими.

Диагностика гепатита С показана, если:

возникли подозрения на нарушения в деятельности печени;
получены сомнительные данные о ее состоянии при УЗИ органов брюшной полости;
в анализе крови содержатся трансферазы (АЛТ, АСТ), билирубин;
планируется беременность;
предстоит операция.

Ложноположительные анализы, когда инфекции в организме нет, но результаты указывают на ее наличие, составляют до 15% лабораторных исследований.

минимальная вирусная нагрузка в начальной стадии гепатита;
прием препаратов-иммунодепрессантов;
индивидуальные особенности защитной системы;
высокий уровень криоглобулинов (белков плазмы крови);
содержание гепарина в крови;
тяжелые инфекции;
аутоиммунные заболевания;
доброкачественные новообразования, раковые опухоли;
состояние беременности.

Ложноположительные результаты тестов возможны, если у будущей матери:

нарушается обмен веществ;
имеются эндокринные, аутоиммунные заболевания, грипп и даже банальная простуда;
появляются специфические белки беременности;
резко снижается уровень микроэлементов в кровотоке.

Кроме того, при проведении тестов на гепатит С причины ошибок могут заключаться в человеческом факторе. Нередко сказываются:

низкая квалификация лаборанта;
ошибочный анализ чужой крови;
некачественные химические реактивы;
устаревшие медицинские приборы;
загрязнение образцов крови;
нарушения правил их транспортировки и хранения.

Любая лаборатория может иногда ошибаться. Но это возможно при тестах только ИФА или только ПЦР. Поэтому при проведении диагностики заболевания следует применять оба метода исследования. Тогда оно наиболее достоверно, поскольку сложно допустить ошибку, если в крови нет вируса.

Важно делать анализ на гепатит С, когда нет никаких недомоганий, даже легкой простуды. Не требуется сдавать кровь натощак. Следует только накануне отказаться от жирных, жареных, острых блюд, не употреблять спиртное. И последнее: первоначальный ложноположительный результат о гепатите С — не повод для паники. Вывод нужно делать лишь после дополнительных исследований.

Заболевания печени в современном мире очень актуальны, ведь этот орган подвержен негативному влиянию со стороны окружающей среды, неправильного образа жизни и т.д.

Но есть такие заболевания, которыми заразиться может абсолютно каждый, и предугадать, произойдет это или нет – крайне сложно. Это, например, вирусные гепатиты, которые передаются в основном через кровь и изначально не дают о себе знать. В частности, речь идет о С-гепатите.

То, что вирус изначально не подает особых признаков серьезно затрудняет постановку диагноза, но, тем не менее, существуют достаточно эффективные и разнообразные исследования, которые помогут точно указать на проблему.

Основной принцип обнаружения заболевания HCV – расшифровка анализов на гепатит С, то есть сравнение определенных показателей с нормами.

Диагностику гепатита С проводят людям по разным причинам, в основном это:

подозрение на возможный гепатит;
человек находится в группе риска;
диагностика обязательна в виду специфики работы;
женщинам во время беременности или при планировании.

Видов диагностик несколько: какие-то из них – это поверхностные исследования, другие – глубокие и высокоточные, принцип которых – изучение минимальных отклонений нормальных показателей или обнаружение специфических веществ.

Для обнаружения вируса гепатита С в крови человека используют 3 вида диагностических методов, это:

Иммуноферментный анализ (ИФА). Проводится в лаборатории, принцип заключается в определении антител к гепатиту, в частности: IgG, IgM. Эта диагностика не даст развёрнутого ответа: болен человек или нет, ведь у трети носителей антитела не обнаруживаются. Происходит это из-за промежутка между попаданием в тело вируса и выработкой к нему антител, поэтому это сомнительный и очень поверхностный анализ.
Рекомбинантный иммуноблотинговый анализ. Его проводят лишь для подтверждения лабораторного исследования, если результат положительный, значит, человек является или являлся переносчиком заболевания. Антитела к вирусу не выводятся сразу даже после успешного лечения гепатита. Кроме того, возможен ложный результат из-за некоторых сторонних факторов.
Полимеразный (ПЦР) анализ. Какой самый точный метод в определении гепатита? – однозначно ПЦР. Является самым молодым и самым высокоточным способом диагностики. Именно ПЦР может дать развернутый ответ о протекании заболевания, позволяет установить концентрацию вируса в крови и его генотип (всего их 6). Принцип основывается на обнаружении ДНР/РНК вируса в плазме крови. Этот метод обходит все вышеперечисленные по качеству диагностики: до клинических проявлений гепатита должно пройти минимум 20, максимум – 120 суток, до выработки антител – 10-12 недель после проникновения вируса. А вот обнаружение в крови возбудителя никак не может оказаться ложным, единственное ограничение: с момента заражения должно пройти 5 суток, ведь в исследуемом объеме крови вируса может еще не быть.

ПЦР проводят для точной постановки диагноза, бывает он трех подвидов:

Качественный анализ. С его помощью определяют только наличие вируса.
Количественная диагностика. Используется для определения точного содержания вируса в объеме крови; при лечении используется для проверки эффективности.
Генотипическая диагностика. Используется для определения генотипа, а в последствии и фенотипа вируса. Знать генотип возбудителя крайне важно для терапии, ведь в зависимости от особенностей меняется курс и концентрация приема препаратов.

В методах диагностики важную роль играют дополнительные анализы, которые, порой, полностью изменяют особенности лечения, а иногда могут указать даже на другой диагноз.

Биохимический анализ

Для того, чтобы правильно назначит лечение и не усугубить картину, нужно достоверное определить степень поражения печени, для этого используют биохимический анализ крови, который покажет отклонения от нормы в её составе.

Изменения характеризуют особенности поражения печеночной ткани, это: стадия заболевания, тяжесть фиброза, нарушения работы печени. Биохимический метод покажет реальные цифры содержания в крови билирубина, белка, мочевины, креатинина, сахара, АСТ и АЛТ, щелочной фосфатозы, железа и гамма-глютамилтрансспептидазы. Кроме того, будет определен липидный профиль и качество белкового обмена.

Фиброзо-диагностика

Фиброз – поражение тканей печени, от его степени зависит особенности курса, поэтому диагностика тяжести поражения тканей очень важна. Судя по картине протекания заболевания, врач может судить о срочности лечения: если ситуация некритичная, его могут даже отложить, чтобы не наносить препаратами вред другим органам.

Другие анализы

Иногда, для того чтобы получить полную картину болезни, используют УЗИ брюшной полости и щитовидной железы, общий анализ крови. Людям преклонного возраста проводят диагностику сердечно-сосудистой и пищеварительной системы, легких.

Если возможности провести стандартные ИФА/ПЦР-анализы нет, проходят специфические: анализ слюны и других жидкостей на наличие возбудителя.

Технологии проведения диагностики на гепатит С находятся на высоком уровне и, зачастую, не выдают ложных результатов.

Несмотря на это, невозможно предоставить 100%-ю гарантию точности: возможны ложно-положительные результаты.

Дать неправильный ответ исследование крови может в случае несоблюдения правил анализа или при некоторых других факторах. Основные причины искажения результатов:

некоторые специфические инфекции, что реагируют с экранирующими веществами и тест оказывается положительным;
исследование при беременности;
наличие в организме побочных веществ;
нарушение работы иммунной системы;
нарушение правил забора крови.

Расшифровкой анализов на гепатит занимается опытный специалист, который определит отклонения от нормы каждого из показателей и напишет заключение насчет вероятности гепатита.

При диагностике методами ИФА, обнаружение антител в крови будет безошибочно говорить о том, что в теле человека есть или был вирус гепатита: либо пациент болен сейчас, либо перенес болезнь и антигены просто не успели вывестись из организма. Следует помнить, что антитела врабатываются не сразу – должно пройти определенное время, чтобы такой анализ дал достоверные результаты, поэтому при необходимости нужно повторно сдать кровь на проверку.

Если диагностика ПЦР дала положительный ответ, то с вероятностью 99% в организме находится возбудитель. В этом случае нужно определить степень тяжести и провести генотипирование rna для коррекции курса, а затем неотложно начинать лечение, чтобы гепатит не перерос в хронический. Данные полимеразных анализов считаются очень точными, ведь способны выявить вплоть до 1 представителя вируса в клетке. Если норма протекания полимеразной цепной реакции не нарушена – значит ответ отрицательный и волноваться не стоит.

При установлении гепатита С используют количественное определение показателей билирубина, АЛТ и АСТ, белков. Их содержание так же говорит о степени и тяжести заболевания.

Общая таблица показателей веществ в крови, которые могут указывать на С-гепатит после биохимического анализа:

источник