Меню Рубрики

Анализ пцр на гепатит с где

Медики недаром называют гепатит С «ласковым убийцей», поскольку характерные симптомы этого заболевания проявляются очень поздно, когда патологический процесс зашёл уже очень далеко. Но жизнь пациента можно значительно продлить, если вовремя выявить вирус с помощью метода диагностики – ПЦР анализ на гепатит С.

Это самый надёжный и точный метод обнаружения вирусной инфекции. ПЦР анализ на гепатит С (полимеразная цепная реакция)позволяет с высокой точностью определить конкретный тип вируса, тем самым подтвердив или опровергнув диагноз вирусного гепатита.

Существует два варианта ПЦР – анализ количественный и качественный. Количественное определение вирусов предполагает отдельную методику, отличающуюся от качественного определения вирусов тем, что в этом случае исследование ПЦР строится на искусственном увеличении количества вирусов в исследуемом материале.

Для выполнения анализа на гепатит методом ПЦР необходим исследуемый материал, в случае вирусного гепатита – кровь пациента, которую подвергают определённым воздействиям.

Суть этих воздействий в том, что в кровь добавляют специальным образом помеченный генетический материал и ферменты. Если искомый вирус присутствует в материале, то ферменты вступают в реакцию, и количество вирусной РНК постепенно нарастает. Методика подготовки исследуемой крови к анализу позволяет значительно ускорить этот процесс.

Результаты анализа определяются с помощью химической реакции, которая позволяет визуально отобразить появление в материале большого количества вирусной РНК. Если же искомой РНК в крови нет, то будет отрицательный результат анализа ПЦР – гепатит С не обнаружен. В этом случае никаких изменений на финальном этапе не произойдёт.

Количественный анализ предполагает отдельную методику исследования, позволяющую выявить вирусную нагрузку. Следует сразу сказать, что количество вирусов в определённом объёме крови не влияет на тяжесть заболевания, но влияет на вероятность заражения вирусом других людей.

Поэтому так важно соблюдать меры профилактики, чтобы исключить заражение вирусом и предотвратить развитие гепатита и тяжелых последствий для здоровья. Медики рекомендуют периодически проверять кровь на вирусы гепатита (1 раз в год), чтобы своевременно распознать инфекцию и начать лечение.

Лаборатории, проводящие анализ ПЦР на вирус гепатита С и другие вирусные заболевания есть во всех крупных городах, поэтому доступность анализа не является проблемой. Сегодня ПЦР анализ на гепатит С можно в короткие сроки сделать не только в поликлинике, но и в лаборатории, оказывающей подобные услуги населению на коммерческой основе. Причем в этом случае, обойдется без потери времени в длинных очередях, да и результат можно получить гораздо быстрее.

Чтобы провести анализ необходимо сдать кровь из вены. От пациента требуется уведомить врача о сопутствующих заболеваниях – это может повлиять на время назначения анализа. Женщинам необходимо назначить сдачу анализа так, чтобы она не выпадала на месячные. Подготовка к обследованию может занять определенное время и состоять из следующих этапов:

  • Анализ на ПЦР можно назначать только через две недели после окончания курса лечения антибиотиками или противовирусными препаратами.
  • За 3-4 дня до анализа необходимо отказаться от физиопроцедур и диагностических манипуляций. Если необходим курс лечения, то анализ крови ПЦР на гепатит С проводится после его окончания. Также необходимо на это время отказаться от курения и продуктов, содержащих каротин (жёлтые овощи и фрукты).
  • За сутки до анализа следует ограничить физическую нагрузку до необходимого минимума, отказаться от жирной, острой, солёной и копчёной пищи, алкоголя, крепкого кофе.
  • Последний приём пищи перед сдачей анализа допустим не более чем за 8-9 часов до процедуры, кровь сдают натощак. Именно поэтому забор крови обычно назначают утром до завтрака.

Правильная подготовка к анализу необходима для того, чтобы его результаты получились достоверными, при нарушении этих правил возможны диагностические ошибки.

Для точной диагностики очень важно правильно интерпретировать результат. Знать, как расшифровывается анализ, важно не только врачу, но и пациенту. Это поможет правильно подготовиться к анализу, избежать диагностических ошибок, сделает лечение более понятным для пациента.

Если речь идёт о качественном анализе ПЦР на гепатит С, то здесь всё просто.

  • В норме вирусы в крови не обнаруживаются, и результат отрицательный.
  • Положительный результат означает наличие вируса, и, следовательно, подтверждает заболевание гепатитом.
  • Ложноположительный результат возможен при нарушении методики забора и хранения крови, ложноотрицательный – на ранних стадиях заболевания, когда количество вирусных тел ниже, чем позволяет определить чувствительность метода.

В сомнительных случаях ПЦР могут назначить повторно через 2-3 недели.

Количественный ПЦР анализ на гепатит С определяет не только наличие или отсутствие вируса, но и вирусную нагрузку. Диапазон результатов здесь гораздо шире. Значение «ниже уровня диагностических измерений» означает, что вирус отсутствует или присутствует в очень малых количествах. Такой результат в сочетании с отрицательным показателем качественного анализа считается нормой.

Шкала перевода количества вирусных тел в международные единицы может отличаться в разных лабораториях. Поэтому лучше всего поинтересоваться, где сдать анализ ПЦР на гепатит С у своего лечащего врача. Если врач знает, какой именно шкалой пользуется лаборатория, это значительно облегчит ему интерпретацию результатов и назначение лечения.

На достоверность результатов во многом влияет степень повреждения печени непосредственно перед анализом, уровень сахара в крови на момент сдачи анализа, соблюдение медицинским персоналом правил забора и хранения крови.

Количественный тест необходим в первую очередь для оценки эффективности лечения, а качественный – для определения самого факта наличия болезни. Чувствительность качественного теста выше, поэтому его нужно делать для подтверждения отрицательного результата количественного теста.

Расшифровка анализа ПЦР на гепатит С достаточно проста – при эффективном лечении вирусная нагрузка постепенно снижается. Её повышение говорит о неэффективности лечения, несоблюдении режима или очень высокой активности вируса.

Если вирусная нагрузка оказалась ниже диагностического диапазона, то качественный анализ подтвердит или опровергнет отсутствие вируса в крови. В настоящее время вирусный гепатит С успешно лечиться с помощью индийских препаратов Софосбувир и Ледипасвир.

Цена на анализ ПЦР может очень сильно варьироваться в зависимости от используемой диагностической системы, уровня подготовки персонала, престижности лаборатории, места проживания пациента и прочих факторов.

В среднем цена качественного анализа начинается от 500р, количественного – от 2000. Учитывая, что делать количественный анализ необходимо раз в несколько месяцев, только на определение эффективности лечения может уйти достаточно большая сумма.

источник

Анализ ПЦР гепатит С – это исследование, основной целью которого является идентификация генетического материала возбудителя. Анализ выявляет возбудитель заболевания методом использования полимеразной цепной реакции. Данная диагностика отличается высокой степенью точности, специфичностью к выявлению отсутствия или наличия вирусной инфекции.

Достоинства анализа ПЦР на гепатит

Как подготовиться к сдаче крови для ПЦР-исследования

Результаты анализа: нормы и отклонения

Расшифровка количественного анализа

Расшифровка качественного анализа

Ложноположительные и ложноотрицальные результаты

Где сделать ПЦР-диагностику и сколько стоит?

Чтобы провести ПЦР анализ на определение вируса гепатита С у пациента берётся венозная кровь, которая потенциально содержит в себе РНК (рибонуклеиновая кислота) HCV искомого вируса.

Тест ПЦР на гепатит С подразумевает порядок действий, когда в частицы крови пациента добавляют:

  • праймеры (короткие искусственно-синтезируемые участки необходимо гена);
  • специальный фермент (РНК-полимераза).

После забора биологический материал отправляется на исследования в лабораторию. Одна порция крови нужна для проведения непосредственно ПЦР анализа, вторая – отправляется на исследование по методу ИФА. Фермент способен за короткое время увеличить численность генетического материала вируса возбудителя. В специальном аппарате проводится несколько циклов тепловых и охлаждающих процессов. На конечном этапе полученный материал сопоставляется с генами вируса и делается заключение о наличии или отсутствии патологии в организме пациента.

Суть и проведение ПЦР анализа в лаборатории. Снято каналом SiberianMedicalLaboratory.

Существует 3 вида диагностики, дающие возможность определять наличия вируса гепатита С в организме человека:

  • генотипирование;
  • качественный;
  • количественный.

Диагностика гепатита С качественным методом применима для пациентов, у которых в анализе крови определены антитела к вирусу. В случае наличия острой фазы РНК ВГС подобные диагностические мероприятия позволяют определить наличие заболевания за 1-2 недели после инфицирования. В этот период антитела к гепатиту С могут быть ещё не выработаны.

Количественный метод диагностики используется для определения концентрации вируса в образцах крови. Подобный тест на виремию (степень концентрации) даёт возможность точно определить количество единиц вирусной РНК. Конечный результат выражается в соответственном объёме. Если речь идёт о количественном анализе, тогда показатели измеряются в 1 мл (1 куб. см).

Параметр вирусной нагрузки означает уровень инфекционности заболевания, то есть отображает степень «заразности» пациента. На практике это значит, что чем выше концентрация вируса в крови, тем больше шансов у пациента заразить окружающих гепатитом С. Количественный метод исследования также позволяет установить качество и результативность проведённого лечения.

Генотипированием выявляют мутации возбудителя заболевания. Перед назначением лечебного плана определяют генотип вируса: от этого зависит качество и продолжительность терапии. Так, например, при лечении заболевания I-типа эффективность составляет 60%, в случае II, III-типа – около 80%.

Среди основных достоинств проведения процедуры выделяют:

  1. Возможность ранней диагностики. ПЦР анализ способен определить наличие вируса на ранних стадиях заражения.
  2. Низкая погрешность результатов. Исследуемый биологический ресурс позволяет диагностировать участок генетического материала, который является характерным только для одного типа вирусной инфекции. Это обстоятельство позволяет не допустить ложных результатов диагностики.
  3. Высокая степень чувствительности. Анализ ПЦР способен выявлять РНК вируса в небольших количествах, что также дает возможность вовремя отследить скрытые инфекции.

Сдавать анализ ПЦР на гепатит C нужно, если есть:

  • наличие контактов с больными людьми, которое могло бы привести к заражению;
  • симптомы заболевания цирроза печени (увеличение селезенки, нехарактерные изменения размеров печени, обнаружение на животе венозного сплетения под кожей);
  • положительные результаты ИФА;
  • увеличение активности АСТ и АЛТ (проявляется в биохимическом анализе крови);
  • необходимость контроля ведения антивирусной терапии;
  • проведение начального этапа лечения для необходимости установления вирусной нагрузки;
  • проведение завершающего этапа терапии для исключения возможных рецидивов;
  • наличие у пациента гепатита В, чтобы исключить вариант развития смешанного поражения печени.

Подготовка к ПЦР анализу включает следующие рекомендации:

  • забор крови проводится утром;
  • анализ проводится натощак, поэтому желательно выдержать перерыв между последним приёмом пищи 8-10 часов;
  • за несколько дней до проведения диагностики следует исключить жирную, острую и жареную пищу, алкогольные напитки и курение;
  • за сутки до анализа следует воздержаться от тяжёлых физических нагрузок, исключить занятия в спортзале или бассейне.

Сам анализ делается недолго, а расшифровывает результаты ПЦР на гепатит С высококвалифицированный специалист гепатолог или инфекционист. На основании результатов анализа пациенту выставляется диагноз.

Чтобы правильно расшифровать результаты обследования, учитывают показатели:

  • биохимического анализа крови;
  • данные ультразвукового исследования;
  • результаты биопсии.

При получении результатов количественного анализа ПЦР учитываются следующие показатели:

Показатель Характеристика
Не обнаружено Норма здорового человека.

Данный показатель обозначает, что в организме человека не присутствует генетический материал вируса или его концентрация ниже порога чувствительности.

До 1,8*10^2 МЕ/мл Значение подобных результатов изучается с повышенной осторожностью, так как необходимо соотношение информации с другими видами диагностирования. Такой результат требует повторного проведения процедуры, ввиду того, что концентрация РНК возбудителя ниже порога количественного определения.
До 8*10^5 МЕ/мл Вирусная нагрузка данного параметра считается низкой. Снижение концентрации вируса говорит о том, что лечебные мероприятия проводятся эффективно.
Больше 8*10^5 МЕ/мл Высокая вирусная нагрузка, следует пересмотреть подход к лечению.
Больше 2,4*10^7 МЕ/мл В этом случае концентрация РНК возбудителя достигает запредельных отметок, поэтому делать выводы об уровне вирусной нагрузке нет смысла. Чаще всего при таком результате назначается повторный тест с разведение частиц крови.

В заключении качественного анализа ПЦР на гепатит С могут присутствовать следующие данные:

Показатель Характеристика
Обнаружено Если зафиксирован положительный ответ, это значит, что в исследуемом образце крови присутствует генетический материал вируса. Простыми словами – подтверждается факт заражения человека.
Не обнаружено Если в конечном итоге выходит отрицательный ответ, значит, заражение не произошло или количество РНК вируса недостаточно для определения чувствительности.

При получении анализов на генотипирование вируса можно обнаружить следующие варианты показателей:

Показатель Характеристика
Обнаружена РНК конкретного генотипа Данный результат показывает то, что в биологическом материале пациента найден вирус гепатита С конкретного генотипа и субтипа. Обозначается каждый генотип цифрой и латинской буквой.
Обнаружена РНК вируса гепатита С При подобных результатах назначается повторное исследование, так как данный параметр обозначает наличие вируса гепатита, который не относится к 1,2,3 типу. Подобные случаи считаются редкими в России.
Не обнаружено Данный результат считается нормой и свидетельствует о том, что человек здоров или концентрация вируса ниже порога определения.

Ложно положительные и ложноотрицательные результаты ПЦР исследования получаются в таких случаях:

  • при недостаточной квалификации медицинского персонала, которые проводят диагностику;
  • ошибки в работе лаборантов, когда кровь транспортируется в лабораторию ненадлежащим способом или биоматериал загрязнён;
  • случаи ненамеренной подмены проб крови;
  • нарушения в процессе подготовки биологического материала;
  • воздействие на исследуемые образцы повышенной температурой.

Среди других причин получения неточных результатов выделяют такие:

  • кровь пациента содержит остаточные частицы гепарина и прочих коагулянтов;
  • в образце присутствуют вещества-ингибиторы, способствующие замедлению или остановке полимеразной цепной реакции.

Подобные исследования проводятся:

  • в частных медицинских центрах;
  • в КДВ;
  • в государственных поликлиниках.

Государственные поликлинники проводят анализ ПЦР на гепатит С бесплатно на основаниях наличия у пациента направления от гепатолога или инфекциониста.

Диагностика заболевания на платной основе проводится во всех крупных городах России.

Читайте также:  Гепатит а сроки лечения анализы

Стоимость диагностики зависит от:

  • качества оборудования клиники;
  • скорость выполнения работы;
  • типа теста.

Цена на изучение крови методом ПЦР колеблется в следующих пределах:

  • качественный ПЦР анализ — 600-900 рублей (в Москве и Санкт-Петербурге);
  • качественный ПЦР анализ — 300-800 рублей (регионы);
  • определение вирусной нагрузки — 17000-22000;
  • определение других видов инфекции количественного анализа 1200-10000 рублей.

Ошибочные анализы на гепатит С. Снято каналом Гепатит С побежден.

источник

Гепатит С — патология воспалительного характера, при которой поражаются клетки печени. Болезнь развивается вследствие проникновения вируса гепатита С (HVC) в организм человека.

Форма заболевания может быть острой или хронической.

Чаще всего признаки острой формы патологии у большинства пациентов отсутствуют, иногда болезнь сопровождается болезненными ощущениями в области живота, снижением работоспособности, повышенной утомляемостью, нарушением аппетита, темным оттенком мочи, обесцвечиванием каловых масс, желтушностью кожных покровов и слизистых, суставными болями. Возникают такие симптомы как правило через 6-8 недель после заражения, но могут проявиться и через полгода.

При развитии подобных явлений необходимо обратиться в медицинское учреждение и пройти комплексное обследование всего организма. В рамках медицинского обследования проводят анализ крови на гепатит С.

Сегодня при помощи современных диагностических методик можно выявить данную патологию на начальной стадии развития, что значительно увеличивает шансы на полное излечение от болезни.

Анализ на гепатит С в обязательном порядке сдают следующие группы людей:

  • женщины в период вынашивания ребенка;
  • лица, имеющие признаки гепатита;
  • сотрудники медицинских учреждений;
  • потенциальные доноры органов и крови;
  • наркозависимые, вич-инфицированные, лица, ведущие беспорядочную интимную жизнь.

Какие анализы нужно сдать при гепатите С? Для точной диагностики болезни, выявления ее причин и определения состояния паренхимы печени требуется выполнение таких исследований:

  • общего анализа мочи и крови;
  • биохимического анализа крови;
  • анализа методом ПЦР;
  • анализа крови на выявление антител к HVC;
  • анализа крови на имеющиеся антитела к собственным печеночным клеткам;
  • биопсии печени.

Расшифровка анализа крови на гепатит С выполняется специалистом. Рассмотрим каждый способ исследования подробнее, а также разберемся какой анализ на гепатит С самый точный.

При выполнении общего анализа крови при гепатите С можно оценить состояние пациента. Изменения показателей крови не воспринимаются, как специфические симптомы гепатита, однако при данном заболевании происходят такие нарушения, как:

  • снижается концентрация гемоглобина, тромбоцитов и лейкоцитов;
  • повышается содержание лимфоцитов;
  • нарушается свертываемость крови;
  • увеличивается скорость оседания эритроцитов (СОЭ).

Общий анализ мочи дает возможность обнаружить в ее составе уробелин — желчный пигмент, возникающий в моче в результате нарушения функционирования печени.

Биохимический анализ крови при гепатите С позволяет выявить такие нарушения, как:

  • повышено содержание ферментов печени (аланинтрансаминазы — АЛТ и аспартатаминотрансферазы — АСТ), которые поступают в кровь при повреждении гепатоцитов. В нормальном состоянии данные показатели у мужчин не должны быть более 37 МЕ/л, у женщин — не выше 31 МЕ//л. Повышенная концентрация АЛТ и АСТ при гепатите С, протекающем бессимптомно, часто является единственным симптомом данного заболевания. Кроме этого, в составе крови увеличивается уровень глутамилтранспептидазы щелочной фосфатазы (в норме не выше 150 МЕ/л).
  • содержание билирубина (как общего, так и прямого) в крови превышено. Если уровень желтого пигмента в сыворотке крови превышает 27-34 мкмоль/л, возникает желтуха (до 80 мкмоль/л в легкой форме, 86-169 мкмоль/л — в среднетяжелой, выше 170 мкмоль/л — в тяжелой форме).
  • Понижен уровень альбуминов, концентрация гамма-глобулинов, наоборот, повышена. Гамма-глобулины состоят из иммуноглобулинов — антител, которые защищают организм от болезнетворных веществ.
  • увеличена концентрация триглицеридов в составе крови.

При помощи методики ПЦР можно диагностировать возбудителя болезни. Выполнение этого анализа дает возможность обнаружить в составе крови вирус, даже если количество его минимально. Анализ ПЦР на гепатит С позволяет определить в крови имеющуюся инфекцию уже по прошествии 5 дней с момента заражения, то есть задолго до того, как появятся антитела.

Если результат анализа крови на гепатит С методом ПЦР положительный, это говорит о присутствии активной инфекции в организме. При помощи данного метода можно провести качественное и количественное исследование РНК HVC.

В ходе качественного анализа ПЦР на гепатит С возможно обнаружить в организме человека имеющийся вирус.

Такую диагностическую процедуру выполняют в том случае, если в крови выявлены анти-HVC.

Расшифровка анализа на гепатит С содержит информацию о том, что в организме инфекция или выявлена, или не выявлена. В нормальном состоянии патологические вещества в составе крови не обнаруживаются.

Если анализ на гепатит С дает положительный результат, это говорит о том, что патогенный микроорганизм непрерывно делится и поражает печеночные клетки.

Результаты такого анализа могут оказаться недостоверными, это возможно в следующих случаях:

  • при загрязнении используемого биоматериала;
  • при наличии в крови гепарина;
  • при наличии химических или белковых субстанций (ингибиторов) в исследуемом биоматериале, влияющих на элементы ПЦР.

Количественный анализ на гепатит С дает информацию о количестве вируса, содержащегося в крови, то есть определяет вирусную нагрузку. Под данным понятием подразумевается объем РНК HVC, присутствующий в крови (например, в 1 мл). В расшифровке количественного анализа на гепатит С это значение выражено в цифровом эквиваленте, измеряется в МЕ/мл.

Кровь на ПЦР при гепатите С сдают перед проведением терапевтических мероприятий. После анализ выполняют на 1, 4, 12 и 24 неделях. Исследование на 12 неделе является показательным и выполняется с целью оценки эффективности проводимых лечебных процедур.

Если анализ на гепатит С при беременности положительный и при этом значения вирусной нагрузки превышены, то риск передачи болезнетворных микроорганизмов от больной матери к ребенку увеличивается в несколько раз. Также при повышенных значениях вирусной нагрузки осуществление лечебных мероприятий затруднительно.

Согласно расшифровке анализов на гепатит С, если значения вирусной нагрузки превышают 800 000 МЕ/мл, то она является высокой. Если показатели ниже 400 000 МЕ/мл, уровень вирусной нагрузки считается низким.

Анализ на гепатит С методом ПЦР считается самым точным и обладает рядом преимуществ перед другими вариантами исследований, а именно:

  • прямая диагностика возбудителя болезни. При выполнении традиционных исследований определяются наличие белковых маркеров, являющихся продуктами жизнедеятельности болезнетворных веществ. Это говорит только о том, что инфекция присутствует в крови. При сдаче анализа на гепатит С методом ПЦР возможно определить вид возбудителя опасной патологии.
  • специфичность методики. В ходе такой процедуры в биоматериале определяется уникальный участок ДНК, соответствующий лишь одному типу возбудителя. Это позволяет минимизировать вероятность получения недостоверных результатов.
  • высокая чувствительность. При выполнении ПЦР-анализа можно обнаружить минимальное количество вируса. Это важно, если выявляются условно-патогенные вещества, представляющие угрозу только в случае повышения их уровня.
  • при использовании такой методики в одном образце биоматериала можно выявить сразу несколько возбудителей.
  • можно обнаружить скрыто протекающие инфекции. Помимо этого, анализ позволяет диагностировать болезнетворные микроорганизмы, обитающие внутри клеток и имеющие высокую антигенную изменчивость.

Если результаты исследования положительные, значит в биоматериале обнаружены следы вируса, то сеть в организме имеется инфекция.

Отрицательный анализ ПЦР на гепатит С означает, что следы инфекции в биоматериале отсутствуют.

Данный способ позволяет определить антитела ко всем видам вируса гепатита, а также антитела к печеночным клеткам собственного организма, возникновению которых способствует развитие аутоиммунного гепатита.

Результаты, полученные в ходе исследования, актуальны на протяжении 3 месяцев, затем следует повторно сдавать кровь на гепатит С.

Возможно также выполнение экспресс-исследования с применением специальных тестовых полосок. Данный анализ дает возможность определить в составе крови и слюны антитела к вирусу С. Такую процедуру можно осуществить самостоятельно, на дому.

Для выполнения такого анализа берут элемент паренхимы печени и выполняют гистологическое исследование полученного биоматериала. Это позволяет оценить состояние органа: выявить воспалительные, некротические очаги, стадию фиброза и прочее.

Сегодня используются тесты, которые заменяют гистологический анализ печеночной паренхимы.

Для оценки стадии поражения печени и интенсивности процесса воспаления применяют специфические биомаркеры венозной крови. С помощью Фибротеста можно оценить степень разрастания фиброзной ткани.

При выполнении Актитеста можно получить информацию об интенсивности патологических процессов в паренхиме печени. С помощью Стеатотеста можно диагностировать жировое перерождение ткани печени и оценить степень этого процесса. Фибромакс состоит из всех вышеуказанных тестов и может включать в себя некоторые другие исследования.

Какие анализы сдают при гепатите С и как выполняется тот или иной вид исследования мы выяснили. Не менее важно знать, как нужно подготовиться к проведению анализа.

Для получения достоверных результатов рекомендуется придерживаться следующих требований:

  • анализы при гепатите С необходимо сдавать в утренние часы, на голодный желудок. Последний раз пищу следует употреблять минимум за 8 часов до выполнения исследования.
  • Забор биоматериала можно осуществлять и в дневное или вечернее время. В таком случае важно, чтобы между последним приемом пищи и выполнением анализа прошло не меньше 5-6 часов.
  • перед сдачей крови на гепатит С следует отказаться от чая, кофе, сока или других напитков, разрешена только вода.
  • за 48 часов до проведения исследования необходимо исключить употребление жирных, жареных продуктов и спиртсодержащих напитков.
  • на протяжении минимум часа до выполнения анализа нужно воздержаться от табакокурения.
  • не следует выполнять анализ сразу после проведения ультразвукового, инструментального, рентгенологического обследования, сеанса массажа или физиотерапии.
  • за сутки до осуществления исследования требуется исключить прием медикаментозных средств и интенсивную физическую активность. Эмоциональные нагрузки также противопоказаны.
  • 15 минут перед выполнением исследования рекомендуется провести в спокойном состоянии.

Где сдать анализ на гепатит С? Забор биоматериала для дальнейшего исследования проводится в лаборатории медицинского учреждения или же на дому у пациента.

Кровь из вены берут следующим образом:

  • при помощи специального жгута, обернутого вокруг предплечья больного, приостанавливается венозный кровоток. Благодаря таким манипуляциям вены наполнятся кровью и будут более заметными, что значительно облегчит процесс введения иглы.
  • участок кожи, куда будет вводиться игла, тщательно обрабатывается спиртом или спиртсодержащей жидкостью.
  • в вену осторожно вводится игла, затем к ней прикрепляется пробирка, специально предназначенная для сбора крови.
  • сразу после того, как игла введена в вену сдавливающий жгут снимается с руки пациента.
  • после того, как собран необходимый для выполнения анализа объем крови, игла плавно вынимается из вены.
  • к месту укола обязательно прикладывается стерильный ватный или марлевый тампон, смоченный в спирте.
  • для предупреждения возникновения гематомы тампон следует с некоторым усилием прижать к области введения иглы, согнуть руку в локтевом суставе и держать в таком положении несколько минут. Такие действия также помогут быстрее остановить кровь.

При условии хорошей техники внутреннего введения данная процедура абсолютно безопасна и прочти не вызывает болезненных ощущений.

В редких случаях после забора крови возможно опухание вен. Данное явление носит название «флебит». Устранить проблему поможет компресс (не горячий), прикладывать его следует к опухшим участкам кожи несколько раз в сутки.

Также могут возникать определенные проблемы, если имеется нарушение свертываемости крови. Прием аспирина, варфарина и иных средств, разжижающих кровь, может спровоцировать кровотечение. Именно поэтому перед выполнением анализа требуется отказаться от приема любых медикаментов. Если же лечение отменить нельзя, следует сообщить об этом специалисту.

Сколько делается анализ на гепатит С? Результаты исследования крови на гепатит могут быть готовы и через несколько часов, и через несколько дней (как правило, не более 8 дней). Длительность подготовки результатов зависит от вида вируса и выбранной методики анализа. Более быстрым является исследование, проводимое способом ПЦР. Результаты в этом случае будут готовы всего через несколько часов.

Сколько стоит анализ на гепатит С? В зависимости от клиники и сложности осуществления исследования цена процедуры может варьироваться от 400 до 11 000 рублей.

Следует знать, что для формирования достаточного объема антител к HVC может потребоваться несколько недель. Поэтому на раннем этапе развития патологии результат исследования может быть ложноотрицательным.

Кроме этого, получение недостоверных данных возможно при некачественном выполнении анализа и нарушении условий транспортировки полученного биоматериала (образцы должны быть доставлены в лабораторию максимум через 2 часа после забора крови).

Если результат исследования окажется положительным, необходимо незамедлительно обратиться к врачу-инфекционисту. Специалист проведет дополнительное обследование и назначит соответствующее лечение.

источник

До 1990-х годов для определения инфекционного гепатита С в медицинской литературе использовали термин «гепатит ни А, ни В с парентеральным механизмом заражения». Но в 1989 году был впервые выделен Hepatitis C virus (аббревиатура – HCV), однако достоверные методы диагностики, включая ПЦР на гепатит С, появились гораздо позже.

Полимеразная цепная реакция (расшифровка аббревиатуры ПЦР) с целью выявления HCV-инфекции является одной из составляющих общего скрининга, который в обязательном порядке назначается людям и больным при:

  • беременности (исследование проводят несколько раз – при постановке на учет и в последнем триместре);
  • донорстве крови и органов;
  • у реципиентов перед и после переливания/трансплантации;
  • работе, связанной с повышенным риском инфицирования;
  • планировании хирургического вмешательства и других инвазивных манипуляций;
  • поражении печени (анализ выполняют в ходе первичного обследования);
  • проведении постоянных процедур гемодиализа;
  • сопутствующем ВИЧ;
  • онкологических заболеваниях;
  • контакте с инфицированным человеком.

Проведение скрининга рекомендовано людям, употребляющим наркотические средства, предоставляющим сексуальные услуги, неразборчивым в половых связях. При этом такое же обследование необходимо пройти и их сожителям или постоянным партнерам. В обязательном порядке анализ на HCV показан детям, рожденным от инфицированных матерей.

Читайте также:  Гепатит а время ответа анализа

Сам возбудитель болезни представляет собой РНК-содержащий вирус, покрытый липидной оболочкой. За трансляцию генома «отвечает» терминальный участок, состоящий из порядка 340 нуклеотидных субъединиц. Его структурное строение схоже у 90% различных подтипов HCV. Именно он и является основной мишенью для проведения анализа на гепатит С методом ПЦР.

Дополнительно состав вирусного генома представлен ядерным (core) и неструктурными (NS) участками. Первый регулирует репликацию возбудителя заболевания, а NS обеспечивают быстрое проникновение вируса в здоровую клетку. Зачастую на участке NS E2 отмечают вариабельность структуры, чем объясняют отсутствие должного иммунного ответа у некоторых пациентов, скрытое развитие патологии и склонность к хроническому течению (до 80% случаев).

В связи с широким распространением гепатита С во многих клинических центрах проводятся бесплатные анализы. Предоставление результатов исследования является обязательным требованием для оформления санитарной книжки.

Помимо подтверждения HCV-инфекции, современные методы диагностики позволяют оценить тяжесть течения заболевания, определить генотип вируса. Это влияет на схему терапии (подбор комбинации лекарственных препаратов, их дозировки, продолжительности приема) и прогноз патологии.

Анализ крови на гепатит С можно сделать несколькими методиками, причем каждая отличается по информативности и надежности.

Все способы диагностических исследований можно разделить на несколько групп:

  1. Серологические, способные обнаружить определенные антитела (иммуноглобулины), которые вырабатываются в организме в ответ на проникновение патогена, выполняется по методу ИФА либо иммуноблоттинга.
  2. Молекулярные, направленные на определение РНК вируса гепатита С. Результаты исследования демонстрируют вирусологическую нагрузку, часто используются для контроля эффективности проводимой терапии, позволяют определить генотип HCV, что важно для подбора медикаментозного лечения. К данной группе диагностических тестов относят ПЦР, ПЦР с гибридизационно-флуоресцентной детекцией (метод real time).
  3. Генотипирование, назначается всем без исключения пациентам до начала приема противовирусных медикаментов. Необходимо для планирования продолжительности, иногда – для подбора дозировки лекарственной терапии.

В последнее время получает распространение анализ для определения генотипа пациента относительно интерлейкина IL28В. По данным клинических исследований, подобный тест позволяет прогнозировать время, необходимое для достижения устойчивого вирусологического ответа у пациентов с HCV I генотипа на фоне лечения ингибиторами протеаз первого поколения.

Проблемы, где сдать кровь на ПЦР или другие тесты для выявления HCV, в настоящее время нет. Срочный анализ можно сделать в платной лаборатории. В районных поликлиниках и больницах исследования выполняют в порядке очереди (за исключением проведения по строгим показаниям).

У пациентов часто возникает вопрос, что такое ПЦР анализ при гепатите С, и чем он отличается от других способов диагностики? Данная методика заключается в воспроизведении множества копий ДНК на основе РНК вируса. Это самый точный анализ, позволяющей определить генотип патогена и его количественное содержание как в сыворотке крови, так и в биоптате тканей печени.

Диагностика HCV-инфекции включает комплекс различных исследований. Биохимический анализ крови не может показать заражение. Отклонение результатов (уровня печеночных ферментов, билирубина и т.д.) от физиологических параметров свидетельствует о нарушении работы печени, и задача врача – установить причину подобной проблемы.

Для начала сдают ряд простых исследований, к числу которых относится:

  • общий анализ крови (при HCV-инфекции возможно изменение уровня лейкоцитов, гемоглобина, количества форменных элементов крови и других показателей);
  • биохимия (повышение концентрации печеночных ферментов, билирубина свидетельствует о тяжести поражения печени);
  • тесты на сопутствующие инфекции (обязательно на ВИЧ, иногда – на некоторые венерические заболевания).

Для оценки общей клинической картины доктор выдает направления на анализ мочи, ультразвуковое обследование внутренних органов, рентгенографию или флюорографию грудной клетки. Другие диагностические процедуры делают по показаниям.

Какие анализы на гепатит С необходимо сдавать для точного определения диагноза ? В соответствии с рекомендациями ВОЗ, диагностику HCV начинают с серологического исследования методом ИФА (при наличии выраженных отклонений в биохимии). Если данный тест покажет положительный результат, необходимо проведение дальнейшего обследования пациента. Помимо ПЦР и общеклинических анализов, назначают HBS ag HCV. Некоторые противовирусные препараты могут спровоцировать обострение гепатита В, поэтому перед началом лечения эту патологию необходимо исключить.

Основным преимуществом ПЦР для определения HCV является возможность ранней диагностики (через 18–21 день после инфицирования). Выявление РНК вируса в крови позволяет однозначно трактовать неубедительные данные ИФА. Положительный результат служит однозначным показанием для дальнейшего обследования и назначения лечения, а отрицательный (при отклонениях от нормы анализов на биохимию) – поводом для повторного обследования через 3–4 недели.

Существует несколько разновидностей ПЦР-диагностики HCV:

  1. Качественный. Что показывает качественный анализ ПЦР на гепатит C? Проведение подобного исследования позволяет определить, заражен ли человек. Специалисты рекомендуют делать пробу ультрачувствительным методом (с восприимчивостью тест-систем не менее 10–50 МЕ/мл). Расшифровка результатов проста – положительный указывает на инфицирование и прогрессирующее распространение вируса в организме, отрицательный – или на отсутствие заболевания, или на ничтожно малую концентрацию возбудителя (вполне возможно, что иммунная система человека справится с патогеном самостоятельно).
  2. Количественный. Количественный анализ на гепатит С методом ПЦР (в отличие от качественного теста) позволяет количественно определить вирусную нагрузку, то есть уровень РНК HCV в объемной единице крови. Расшифровать результаты можно на основе диапазона нормы и патологических значений, измеряющихся в МЕ/мл. Положительной считается вирусная нагрузка выше 75 МЕ/мл. Количественное исследование будет отрицательным при значениях ниже 75 МЕ/мл.
  3. Генотипирование. Подобный анализ сдается при установленном диагнозе HCV-инфекции для разработки индивидуального подхода к пациенту. Проводится с помощью секвенирования и обратной гибридизации. Вирусная нагрузка может меняться на протяжении болезни, однако генотип остается прежним.

Изучение различными методиками ПЦР показано на различных этапах диагностики и лечения гепатита С. Количественный повторяют чаще прочих для контроля эффективности противовирусной терапии.

Основными показаниями к сдаче крови на гепатит С служат:

  • беременность (показан плановый скрининг);
  • профилактический осмотр у людей из группы риска (медицинские работники, волонтеры в наркологических центрах);
  • ВИЧ;
  • незащищенный половой контакт с инфицированным человеком;
  • неразборчивые сексуальные связи.

С учетом высокой распространенности гепатита С специалисты рекомендуют проводить исследование с профилактической целью каждому человеку. Риск заражения присутствует при посещении стоматологического кабинета, маникюрного/педикюрного салона, где недобросовестно относятся к стерилизации инструментов и т.д.

Строгим показанием к проведению анализов служит появление характерных и неспецифических симптомов гепатита С. К наиболее распространенным признакам относят:

  • общую слабость;
  • длительно сохраняющийся субфебрилитет на фоне отсутствия других инфекций;
  • изменение цвета кала и/или мочи;
  • тошноту, рвоту.

Желтушность слизистых оболочек и эпидермального покрова встречается редко. У 80% пациентов заболевание длительное время протекает бессимптомно, часто диагностируется случайно, в ходе плановой диспансеризации.

Выполнить анализ на гепатит С методом ПЦР можно практически в любой частной лаборатории или поликлинике по месту жительства. При госпитализации обследование делают в больнице в условиях стационара.

Преимуществами лабораторного центра служат:

  1. Отсутствие необходимости в направлении от врача.
  2. Короткие сроки выполнения исследования. Сколько делают анализ, скажет лаборант при оформлении заказа. Обычно это 1–2 дня. Некоторые лаборатории за отдельную плату предоставляют услуги проведения срочного исследования.
  3. Сервис (отсутствие очередей, удобная оплата онлайн, получение результатов по электронной почте).
  4. Качество оборудования, на котором проводится исследование (для исключения ложноположительного анализа).

Однако без предварительной консультации врача сложно определить, какой именно вид ПЦР нужен. Также нельзя самостоятельно интерпретировать результаты. Некоторые лаборатории используют различные шкалы измерения вирусной нагрузки, что может стать причиной ошибки. Исследование методом полимеразной цепной реакции нередко является частью комплексного обследования, включающего как лабораторные, так и инструментальные тесты, которые дешевле выполнять в поликлинике по полису ОМС.

На результаты может повлиять незнание правил, как сдавать кровь. Основной материал для ПЦР – сыворотка. Информативно исследование биоптата печени, однако инвазивная процедура не подходит для рутинного анализа. Как сдать кровь правильно?

Для получения достоверных результатов соблюдают следующие рекомендации:

  1. Сдают кровь строго натощак: прием пищи исключается за 10–12 часов до процедуры.
  2. За 2–3 дня до анализа воздержаться от потребления алкоголя, «тяжелой» (жирной, жареной, соленой, копченой) пищи, приправ.
  3. Утром перед исследованием можно пить только воду (чай, кофе противопоказаны).
  4. За сутки ограничить тяжелую физическую активность.
  5. За 10 часов до процедуры воздержаться от курения.

Забор крови осуществляется из вены.

Необходимо проконсультироваться с врачом и поставить в известность специалиста, если пациент принимает какие-либо лекарственные препараты. По возможности, следует приостановить использование медикаментов за сутки до сдачи крови.

Конкретные сроки выполнения анализа на HCV методом ПЦР зависят от загруженности лаборатории и наличия необходимого диагностического оборудования. Например, если материал транспортируют из пункта забора крови в лабораторный центр, время выполнения исследования увеличивается.

Сколько в среднем делается анализ на гепатит С? В большинстве диагностических центров установлены следующие сроки для проведения исследования:

  • качественное определение вируса – 1–4 дня;
  • количественное выявление вирусной нагрузки методом ПЦР – 1–2 дней;
  • генотипирование – 1–4 дня.

В поликлиниках данный срок может составлять до 7–10 дней. При выполнении исследования в частном лабораторном центре на руки выдается квитанция с кодом, по которому можно загрузить полученные результаты. Как правило, при готовности пациенту приходит сообщение с уведомлением.

Данные лабораторного исследования выдаются пациенту в виде таблицы, где обязательно указаны следующие параметры:

  • вид ПЦР (качественная, количественная или генотипирование);
  • какие результаты анализов получены;
  • референсные значения и расшифровка отклонения от нормы (данная графа может присутствовать не на всех бланках во избежание ошибочной диагностики и последующего самолечения).

Также указывают дату забора крови и выдачи результатов, координаты и печать лабораторного центра, ФИО и роспись медицинского работника, проводившего исследование.

Расшифровка, т. е. что означает полученный результат, должна проводиться только квалифицированным врачом.

Данные, которые может показать исследование методом ПЦР, приведены в таблице ниже:

Показатели во многом зависят от чувствительности лабораторного оборудования

  1. Отрицательный (образцы РНК вируса gepatit C отсутствуют).
  2. Менее 600 МЕ – низкая вирусологическая нагрузка, прогноз при гепатите С благоприятный.
  3. 600–700 000 МЕ – умеренная вирусологическая нагрузка, требуется лечение, пациент заразен для окружающих.
  4. Более 700 000 МЕ – очень высокая вирусологическая нагрузка, прогноз неблагоприятен даже при проведении терапии, высока вероятность, что диагностируется хронический гепатит С.
Вид ПЦР Описание полученных значений
Качественный В бланке указывают «обнаружено» или «не обнаружено»
Количественный
Генотипирование Проводится, если обнаружено присутствие вируса в организме. В бланке показывают выявленный подтип HCV

Расшифровкой результатов должен заниматься квалифицированный специалист. Так, иногда возникают ситуации, когда ИФА на гепатит С положительный, а ПЦР отрицательный. Подобное расхождение объясняют несколькими причинами. Это может быть ошибкой лаборатории, поэтому одно из исследований необходимо повторить спустя 2–3 недели.

Иногда такие результаты возникают вследствие скрыто перенесенной острой HCV-инфекции. ИФА определяет наличие антител, но по факту, РНК вируса в организме или отсутствует, или не выявляется из-за ничтожно малой концентрации. В любом случае пациент с подобными данными исследований нуждается в дальнейшем наблюдении и консультациях врача.

Качественный анализ ПЦР является относительно быстрым и наиболее точным методом первичной диагностики гепатита С. По результатам исследования можно определить, заражен человек или нет, а затем проводить более детальные лабораторные методы. Ложноотрицательный результат вероятен в первые 14–21 день после заражения, когда количества РНК вируса недостаточно, для выявления даже высокочувствительными тест-системами.

Ложноположительный результат возможен по вине сотрудников лаборатории. Иногда такие данные получают при беременности, активном течении онкологических и/или аутоиммунных заболеваний.

Чтобы исключить вероятность неправильной расшифровки, качественный анализ рекомендуют повторить через 3–4 недели.

Количественный анализ методом ПЦР на гепатит С обычно назначают для определения вирусемии в ходе противовирусной терапии. В норме, по мере приема лекарственных средств вирусологическая нагрузка постепенно снижается. Цель лечения – отрицательные или минимально допустимые показатели исследования.

Расшифровка результатов зависит от единиц измерения, используемых в лаборатории, поэтому обычно в бланке указывают полученные данные, референсные значения и описание отклонений от нормы.

Количественный анализ ПЦР необходим для оценки эффективности лечения, подбора схемы терапии (сочетание нескольких противовирусных препаратов), определения продолжительности приема медикаментов. Исследование периодически проводится и после окончания курса лечения для своевременного выявления рецидива.

Одно из основных исследований, которые проводятся на этапе диагностики и обязательно до начала терапии, так как генотип – главный фактор, влияющий на подбор лекарственных средств.

К настоящему моменту известно об 6 генотипах HCV (каждый имеет свои подтипы), но в России и странах Европы у подавляющего числа больных выявляют:

  • 1b – один из самых неблагоприятных в плане прогноза, быстро переходит в хроническую форму, агрессивен по отношению к тканям печени, сложно поддается терапии;
  • 4 – плохо «отвечает» на терапию, требует тщательного подбора схемы приема препаратов;
  • 2а, 3а – успешное лечение отмечают в 70% случаев и чаще (при использовании современных противовирусных медикаментов).

Остальные генотипы диагностируют реже. В отличие от количественного анализа, генотипирование выполняют один раз и не повторяют в процессе лечения (исключение составляют устойчивые формы HCV, не поддающиеся терапии.

Несмотря на то, что ВОЗ рекомендует ИФА как основной метод выявления HCV-инфекции, исследование методом ПЦР имеет ряд «плюсов»:

  • высокая точность;
  • возможность первичной диагностики;
  • оценка эффективности лечения по определению вирусологической нагрузки;
  • точное установление генотипа вируса, что предопределяет тактику дальнейшего лечения;
  • доступная стоимость.

Пункты забора крови для проведения исследования есть в любом городе, что дополнительно облегчает диагностику и делает сдачу анализов доступными для каждого пациента.

Стоимость анализа ПЦР на гепатит С зависит от ряда факторов:

  1. Ценовая политика лабораторного центра и его местонахождение (так, в Москве подобные услуги обходятся дороже).
  2. Разновидность исследования (цена на качественный, количественный анализ и генотипирование отличается).
  3. Сроки выполнения (ряд лабораторий предлагают доплатить определенную сумму за срочное получение результатов).
Читайте также:  Гепатит а покажут ли анализы

Узнать, сколько стоит ПЦР на гепатит С можно либо по телефону, либо на интернет-сайте лаборатории.

Средняя цена по России составляет:

  • качественное определение РНК вируса – 700–1000 рублей и до 3000 рублей с использованием ультрачувствительных тест-систем;
  • генотипирование – 1000–1200 рублей (в комплексе с количественным определением – до 4000 рублей);
  • количественное определение вирусологической нагрузки – 2300–3000 рублей.

В поликлинике по месту жительства подобные исследования проводят бесплатно (при наличии полиса ОМС). Но лаборанту обязательно предъявляют направление от лечащего врача.

источник

Анализ ПЦР на гепатит С: где и как правильно сдать, что означает положительный и отрицательный результат

ПЦР на гепатит С – обязательный анализ при обследовании пациента с симптомами поражения печени. Исследование назначают для подтверждения диагноза и получения максимально полной информации о возбудителе болезни, активности вирусной инфекции. Результаты служат основанием для назначения противовирусной терапии, определения ее продолжительности и оценки эффективности.

Диагностика с применением методики полимеразной цепной реакции получила распространение сравнительно недавно. Исследования на эту тему велись с середины 1970-х годов. Но первые публикации относительно возможности использования ПЦР в практической медицине появились только в середине 1980-х гг.

При объяснении, что такое ПЦР, врачи подчеркивают, что это самый надежный и достоверный анализ при гепатите С. Данный тест позволяет не только выявить частицы РНК вируса, но и установить его концентрацию (указывает на активность инфекционного процесса) и генотип. Полученные результаты играют ключевую роль для определения тактики и схемы дальнейшей терапии.

В чем состоит суть постановки реакции? При помощи определенных биологически активных веществ добиваются увеличения количество частиц РНК вируса в небольшом объеме крови. Впоследствии участки генома определяются разнообразными физико-химическими методами.

Постановка ПЦР осуществляется при помощи нескольких компонентов:

  • Праймер. Это искусственно синтезированное соединение, в котором последовательность нуклеотидов полностью идентична конкретному участку РНК вируса, не подвергающегося мутациям и изменением в зависимости от генотипа. Определение РНК вируса гепатита С выполняется с использованием строго специфичного праймера.
  • РНК-полимераза. Фермент, отличающийся устойчивостью и структурной стабильностью на фоне изменений температуры, необходимых для правильного протекания химической реакции. Обеспечивает построение цепочки РНК на одном из этапов ПЦР.
  • Смесь протеинов. Для построения дополнительных участков РНК необходим «строительный материал», для чего к биологическому образцу добавляют определенные соединения белковой структуры.
  • Буфер. Смесь, поддерживающая оптимальный уровень рН для обеспечения протекания полимеразной цепной реакции.
  • Образец биологического материала, предположительно содержащий образец РНК HCV (Hepatitis C Virus).

При некоторых способах постановки ПЦР дополнительно используются РНК-зонды и другие внутренние контроли, используемые в качестве контрольных образцов при выявлении результатов.

Сам процесс увеличения участков вирусной РНК при помощи матрицы именуют амплификацией. Реакция протекает в несколько этапов:

  1. Денатурирование. Процесс «раскручивания» нитей РНК обеспечивается повышением температуры до определенного уровня.
  2. Отжиг. После снижения температуры до необходимых показателей происходит присоединение праймеров к РНК. Данная стадия возможна только при наличии в образце крови искомых вирусных частиц.
  3. Непосредственный синтез участков вирусной РНК с участием ферментов.

Перечисленные циклы постановки ПЦР повторяются несколько десятков раз, что обеспечивает многократное увеличение количества участков РНК возбудителя гепатита С уровня, определяемого лабораторными способами.

Перед проведением анализа образец забора крови соответствующим образом подготавливается. Содержащиеся РНК адсорбируются на буфере-носителе, затем смываются и используется для постановки полимеразной цепной реакции.

Детекция результатов проводится либо методом электрофореза (горизонтального или вертикального), либо способом гибридизации. Способ расшифровки результатов реакции выбирается исходя из целей проведения исследования (просто выявление РНК, либо определение ее ориентировочного количества).

Перечень предлагаемых исследований на HCV включает несколько пунктов, отличающихся по стоимости, срокам готовности и способу выполнения.

Если обратиться к протоколам Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ), порядок диагностики инфекции включает несколько последовательных этапов.

Для начала сдают:

  • общий анализ крови и мочи;
  • биохимия крови;
  • исследование на содержание глюкозы (строго натощак);
  • анализ на ВИЧ;
  • флюорография;
  • иммунограмма (при подозрении на наличие аутоиммунных патологий).

При отклонении показателей биохимического анализа крови от физиологической нормы пациенту назначают тест, основанный на обнаружении специфических антител, вырабатываемых при контакте вируса с кровью (ИФА).

Но подобный анализ крови на гепатит С имеет существенный недостаток. Процесс синтеза антител зависит от функционирования и выработки иммунокомпетентных клеток. Индивидуальные особенности организма могут стать причиной как ложноотрицательного, так и ложноположительного ответа.

Перед назначением теста ИФА врач рассказывает пациенту о возможной ошибке, что вызывает ответный вопрос: «Какой анализ крови показывает гепатит С с минимальным риском получения неверных результатов?» Для подтверждения или опровержения диагноза самым точным лабораторным тестом является проведение ПЦР методом real time.

Дальнейшая тактика действий зависит от того, что покажет исследование. В случае подтверждения диагноза, пациенту сразу же назначают гепатопротекторы, предупреждают о важности правильного питания и здорового образа жизни. Но таргетная терапия невозможна без определения уровня вирусной нагрузки и генотипа гепатита С.

Некоторые лекарственные препараты могут спровоцировать обострение гепатита В. Поэтому для исключения осложнений, дополнительно назначают анализы на HBsAg. HCV лечат только после получения отрицательного результата исследования.

При первичной диагностике гепатита С серологическим методом определяется титр вырабатываемых антител. Такой результат приблизительно показывает активность патологического процесса. Но максимально точную информацию доктор может получить только после изучения данных ПЦР.

В настоящее время практически во всех лабораториях анализ выполняют ультрачувствительным методом. Таким образом диагностика HCV возможно уже через 10–14 дней после заражения, реже – спустя 2,5–3 недели. В зависимости от целей, преследуемых в ходе исследования, доктор назначает конкретный тип теста.

Существуют следующие разновидности ПЦР:

  1. Качественный. При назначении диагностических тестов, у пациентов возникает вопрос, что показывает подобный метод исследования. Качественный анализ способом ПЦР – высокочувствительный тест, определяющий наличие РНК вируса в крови в минимальной концентрации. Обычно подобная разновидность полимеразной цепной реакции ставится по технологии обратной транскрипции. Это один из немногих способов ПЦР, в ходе которого в качестве мишени можно использовать РНК.
  2. Количественный. Количественный анализ на гепатит С позволяет определить точный уровень РНК HCV в крови. Проведение исследования возможно только одним способом – методом real-time. В ходе подготовки материала к постановке ПЦР в образец добавляют краситель. После каждого цикла амплификации проводится автоматизированное количественное исследование в режиме реального времени. Нередко методику проводят в сочетании с обратной транскрипцией. Таким образом возможно качественное определение малого количества копий РНК вируса. Устанавливать уровень РНК HCV количественно имеет смысл, если получен положительный результат качественной ПЦР.
  3. Генотипирование. Анализ сдается проводится на конечной стадии диагностического процесса. Принцип исследования построен на разнице в последовательности нуклеотидов, что отличает один генотип вируса гепатита С от другого. Обычно анализ делают методом мультипраймерной (мультиплексной) ПЦР.

При подозрении на носительство вируса, необходимо выполнить качественную ПЦР. Если результат отрицательный, человек скорее всего здоров. Но для полного исключения заражения рекомендуют повторить исследование через 7–10 дней. Если же РНК вируса обнаружена, проводят дальнейшие тесты (количественный и генотипирование).

Основным показанием к сдаче крови на гепатит С методом полимеразной цепной реакции является положительный результат иммуноферментного анализа (вне зависимости от разновидности: Total, дифференцированный тест на IgG и IgM).

Кроме того, провериться нужно:

  • в период беременности (тест делают дважды – в первом триместре и за 7–10 недель до родов);
  • при работе, связанной с повышенным риском инфицирования (медсестры, лаборанты, работники донорских центров, косметологи и т.д.);
  • при беспорядочных половых связях и незащищенном контакте с малознакомым человеком;
  • на фоне ВИЧ, онкологических заболеваний, приема определенных медикаментозных средств и т.д.;
  • пациентам, зависимым от внутривенных наркотиков;
  • при постоянном проведении инвазивных диагностических или лечебных процедур;
  • при проведенном до 1992 года переливании крови (ранее не существовало достоверных способов проверки донорского биологического материала на наличие вируса).
  • при соприкосновении открытой раны с чужой кровью, нестерилизованным медицинским инструментарием.

Рост заболеваемости растет с каждым годом. Поэтому для раннего выявления инфекции лабораторные тесты на HCV рекомендуют сдавать один раз в год.

При обращении в поликлинику, пациент имеет право на бесплатные анализы. Но сначала сдают тест ИФА. И только при положительном либо сомнительном результате показано исследование методом ПЦР. Поэтому провести срочную диагностику можно обратившись в платную лабораторию, где сдать кровь на ПЦР можно в удобное для пациента время. Одновременно рекомендуют сразу проверить показатели печеночных ферментов, стандартные клинические параметры крови.

Как правило, изучение крови методом ПЦР доступно практически в любой лаборатории. Если пункт забора крови не оснащен должным оборудованием, биологический материал транспортируют для проведения исследования с соблюдением температурного режима и других условий. Проведение ПЦР в поликлинике возможно только после других обследований, результаты которых косвенно укажут на наличие гепатита С.

Перед тем, как сдавать кровь на обнаружения возможного вируса, следует соблюсти ряд правил подготовки к анализу.

Основные аспекты указаны в памятке:

  1. За 5–7 дней отказаться от потребления жирной, жареной пищи, алкоголя. В целом, доктора рекомендуют придерживаться правил питания по диете №5.
  2. За 12–14 часов до проведения исследования не есть. Пить можно только воду.
  3. Сдать кровь лучше в первой половине дня.
  4. До процедуры не курить.

Также следует предупредить доктора о принимаемых лекарственных препаратах, возможных проблемах со здоровьем, хронических заболеваниях.

Забор крови выполняется из вены. После окончания процедуры место прокола медсестра заклеивает стерильным пластырем, предупреждает о необходимости согнуть руку и держать ее в таком положении 10–15 минут. В противном случае высока вероятность появления болезненной гематомы.

Сколько делается анализ, зависит от лаборатории. Средний срок выполнения колеблется в пределах 1–3 дней. Некоторые клиники предоставляют платную услугу быстрой постановки ПЦР, однако время проведения ограничивается возможностями медицинской аппаратуры.

В поликлинике результаты могут передаваться врачу в течение 7–10 дней. Это связывают с большим наплывом пациентов. При этом биологический материал хранится в соответствии со всеми требованиями.

Как правило, расшифровка качественной ПЦР не представляет сложности. Но во избежание ошибочной трактовки, с полученным из лаборатории бланком следует обратиться к врачу. Варианты, что означает та или иная разновидность ПЦР, приведены в таблице.

Отрицательный: человек здоров либо концентрация вирусной РНК в крови слишком мала для детекции.

Положительный: человек инфицирован

Проводится, если обнаружено РНК вируса качественным методом исследования.

В зависимости от того, какие результаты анализов получены, определяется уровень вирусной нагрузки

Проводится при гепатите С, подтвержденном другими методами исследования.

Анализ позволяет установить точный генотип возбудителя патологии

Но нередко возникает ситуация, когда ИФА на гепатит С положительный, а ПЦР отрицательный. Расшифровать такие результаты анализов может только врач.

Однако подобные данные возможны в следующих случаях:

  • беременность;
  • перенесенный в острой форме гепатит С;
  • пройденный курс лечения от HCV;
  • наличие инфекций, повышающих вероятность ложноположительного результата ИФА.

Только полимеразная цепная реакция показывает точное наличие вирусной инфекции в организме. На фоне отрицательной ПЦР положительный ИФА в большинстве случаев говорит о том, что человек не инфицирован. Но врачу следует точно установить причину ложноположительного результата.

Анализ ПЦР качественный на гепатит С подтверждает присутствие возбудителя заболевания в крови. Если РНК вируса не обнаружена, человек здоров. Но при подозрении на инфицирование рекомендуют повторно пройти исследование. Положительный результат свидетельствует об инфицировании. Но этот анализ не позволяет дифференцировать хронический гепатит С от острого, и не может показать, насколько активен патологический процесс.

Количественный анализ методом ПЦР проводится после подтверждения диагноза и его расшифровка важна для определения тактики лечения. В зависимости от концентрации частиц возбудителя гепатита С выделяют несколько степеней вирусной нагрузки: средняя, высокая и низкая. Чем больше показатель, тем тяжелее протекает инфекция и сложнее терапия. В норме вирусная РНК отсутствует в крови.

Многие лаборатории проводят генотипирование в комплексе с количественной ПЦР, что позволяет сэкономить. Подобное исследование делают только один раз, перед началом лечения. Обычно выполняют анализ на один из четырех наиболее распространенных генотипов (1, 2, 3 или 4). Одновременно определяют и подтип HCV. Генотипирование на 5 и 6 подвид гепатита С возможно не в каждой лаборатории.

Диагностика методом ПЦР получила широкое распространение благодаря:

  • высокой точности (при условии использования тест-систем последнего поколения);
  • простоте забора биоматериала;
  • быстроте получения результатов (максимум 5 дней).

Но основное преимущество состоит в широких диагностических возможностях исследования. Анализ позволяет не только выявить вирус, но и точно определить его концентрацию в организме и установить генотип инфекции. Кроме того, количественное исследование необходимо для оценки эффективности противовирусной терапии. Основная цель лечения – достижение нормы анализов (т. е. неопределяемого уровня РНК HCV) на 4, 12 или 24 неделе противовирусного курса и сохранение этого результата.

Стоимость анализа ПЦР колеблется в зависимости от региона. Так, в Москве цены выше. Качественная ПЦР обойдется в 600–800 рублей, количественная – в 2200–3000 рублей, генотипирование – от 1000 рублей. Узнать точно, сколько стоит конкретное исследование, можно непосредственно в лаборатории, на сайте медицинской организации или по телефону.

источник

Вид исследования Возможный результат и предполагаемая расшифровка
Качественная ПЦР