Качественный анализ на гепатит с ифа

Появление большого количества заболеваний, в том числе иммунных и инфекционных, спровоцировало появление огромного количества тестов для их выявления. Больше всего успехов наблюдается в молекулярной биологии. Именно к этой отрасли и относятся анализы ИФА и ПЦР.

Для того чтобы выяснить отличия между ПЦР и ИФА, а также их сходства, необходимо рассмотреть в отдельности каждое обследование.

ИФА #8212; это иммуноферментный анализ, который проводится в лаборатории и основан на избирательной реакции специфических иммунологических реакций в паре антиген-антитело.

Для того чтобы провести ИФА-диагностику, необходимо сдать кровь, над которой проведут исследования и смогут выяснить, есть ли в организме возбудители инфекций.

Наиболее часто встречающиеся инфекции можно представить в виде списка, в который входят в основном половые заболевания:

• сифилис;
• вирус иммунодефицита человека или ВИЧ;
• гепатит;
• хламидиоз, уреаплазмоз, микоплазмоз;
• инфекция цитомегаловируса;
• герпес.

Кроме того, по результатам ИФА возможно определить и другие инфекционные заболевания, уровень гормонов, антител и даже начальные стадии онкозаболеваний.

Главное, чем отличается ИФА от ПЦР заключается в том, что результаты метода ИФА нельзя использовать как первичные данные. Перед выяснением инфекционных заболеваний, передающихся половым путем, и уровня антител в крови стоит провести анализ ПЦР.

Как исключение, можно назвать только анализ на сифилис, но и здесь нужно проводить метод ИФА в комплексе с микропреципитацией.

Также ИФА отличается тем, что даже если по результатам найдены антитела в организме человека, то нельзя однозначно сказать, что человек болен, так как их наличие может говорить только о контакте с возбудителем в недавнем времени (иногда в далеком прошлом).

Даже, несмотря на то что метод ИФА не очень достоверный, есть вероятность, что ряд заболеваний не выяснит и ПЦР. К таким заболеваниям относят незаметные для иммунной системы человека болезни, например, уреаплазмоз, микоплазмоз или трихомонада.

ПЦР #8212; это полимеразная цепная реакция, которая относится к методам молекулярной диагностики и так называемого золотого стандарта. Именно этот метод является наиболее точным в определении иммунных заболеваний, передающихся половым путем. А является он настолько действенным благодаря проверке временем и многоразовым тщательным клиническим апробированиям, обследованию не одной тысячи людей.

Важным отличием является то, что для изучения ПЦР используется клинический материал больного или материал, полученный из внешней среды, которой является вода или почва.

Метод ПЦР лучше тем, что даже если в пробе есть несколько молекул ДНК, которые принадлежали возбудителю инфекции, как результат все равно будет найдено заболевание.

Еще одной особенностью этого метода считается и то, что можно определить и медленно развивающиеся заболевания. Кроме того, не нужно использовать трудоемкие микробиологические методы.

Наиболее часто при помощи ПЦР определяются гинекологические, урологические заболевания, такие как:

• урогенитальные инфекции, которые передаются половым путем;
• гепатит;
• вирус иммунодефицита человека или ВИЧ;
• папилломы;
• туберкулез;
• хеликобактериоз;
• сальмонеллез;
• дифтерия.

Хоть и полагают, что метод ПЦР дает наиболее точные данные обследования, но это касается только той части материала (ткани), клеточный материал которого берется на обследование. Таким образом, даже в этом методе возникают погрешности и затруднения в диагнозе, которые связаны со скоростью распространения болезни.

Как пример можно привести наличие хламидий в канале шейке матки, но их отсутствие в маточных трубах, ткани яичников и т. д.

Главное отличие между ПЦР и ИФА заключается в оборудовании для проверки и используемом материале. Из-за этого и может возникнуть ситуация, в которой ИФА-тест будет положительным, а ПЦР-тест отрицательным или наоборот.

Например, взяли ПЦР из области предполагаемой инфекции, а ИФА в любом другом месте организма (поскольку для этого теста нет разницы в месте, так как антитела есть везде, а ИФА реагирует именно на них). Далее проводят тест, и результат ПЦР показывает, что заболевания нет, а ИФА дает положительный ответ. Это будет обозначать, что вирус в организме есть, но не конкретно в той части ткани, которую исследовали при методе ПЦР.

Таким образом, важно запомнить то, что выбирать лучшее между ПЦР или ИФА не стоит, а стоит делать совместно два теста и получать 100% результат.

Также можно отметить, что ПЦР #8212; это достоверная информация о зараженном (инфицированном) участке (конкретной ткани), которая получена благодаря высокой чувствительности. А ИФА #8212; косвенный метод получения информации о состоянии всего организма и наличия в нем инфекции, а еще о процессе инфицирования вовлеченных тканей и органов, которые не подлежат прямой диагностике. Кроме видимых расхождений, есть и кое-что общее в этих двух методах. Например, высокая скорость получения результата и универсальность, результаты которых можно проверить уже через 4 или 5 часов.

Более подробную информацию о том, чем отличается обследование ИФА от ПЦР, какой метод лучше для человека и его организма, в частности, или конкретно для его заболевания, выбирает доктор. Так что лучше обратиться к врачу за направлением на проведение анализа, чем заниматься самолечением, поскольку иногда даже личное желание провериться чаще чем нужно приводит к неожиданным последствиям, ведь каждый анализ крови и тканей несет за собой последствия и если переусердствовать, то они будут непредвиденными.

Возможно Вас заинтересуют Реклама на сайте ✆

Гепатит С в хронической или острой фазе представляет собой одно из самых часто диагностируемых заболеваний печени, возникающее в результате заражения вирусом гепатита С (HCV), который попадает в организм в основном с кровью инфицированного человека.

Более чем у 70% больных острым гепатитом С практически отсутствуют какие-либо признаки болезни. Только в редких случаях после заражения могут встречаться такие проявления заболевания, как желтуха, тошнота, изменение цвета мочи и кала, рвота, потеря аппетита, усталость, боли в животе. Обычно симптомы возникают спустя 45 дней после инфицирования, однако, этот срок может варьироваться от 15 до 180 дней. При проявлении подобных симптомов нужно обязательно обратиться в больницу для прохождения анализа крови на гепатит С.

Своевременно проведенная диагностика предоставляет возможность обнаружить заболевание на ранней стадии, что намного повышает шансы на выздоровление.

Какие же следует сдать анализы для этого? Какова их норма? И каким врачом будет произведена их расшифровка и вынесен точный диагноз?

Обязательная сдача анализа на гепатит С – норма для:

1. Женщин в период планирования и вынашивания беременности;
2. Пациентов с симптомами хронического или острого гепатита;
3. Людей, находящихся в группе риска, в том числе:
   • медицинских работников;
   • сотрудников правоохранительных органов;
   • наркоманов;
   • больных СПИДом.

Особой подготовки к сдаче анализа на гепатит С не требуется. Забор крови производится натощак из вены спустя не менее 10 часов после еды.

Норма, регламентирующая сроки выполнения исследования, составляет не более 2 суток.

Первоначально назначаемый для диагностики заболевания анализ – это ИФА тест, или иммуноферментный анализ, который позволяет выявить в крови наличие и количество специфических антител Anti-HCV в 95% случаев. Данные антитела бывают 2 видов – IgM и IgG. В случае если результат положительный, это свидетельствует о наличии контакта организма с HCV. Однако у 40% людей с положительным ИФА в крови вируса не обнаруживается – это сомнительный, или ложноположительный, результат.

Чтобы подтвердить положительные результаты ИФА, используется метод рекомбинантного иммуноблотинга (RIBA), который представляет собой более точное исследование наличия антител к вирусу гепатита С. Однако положительный результат также не определяет наличие HCV в организме пациента, а лишь подтверждает присутствие в нем антител.

Анализ РНК HCV, часто называемый анализом полимеразной цепной реакции, или ПЦР – более точный метод исследования крови, позволяющий обнаружить непосредственно генетический материал вируса гепатита (каждый вирус представляет собой одну частицу РНК). Анализ ПЦР на гепатит С выявляет его до возникновения антител в сроки, не превышающие пяти суток после заражения.

Современная медицина использует следующие вариации анализа ПЦР:

• Количественный ПЦР, который определяет не только сам факт присутствия вируса, но и его количество.
• Генотипирование, позволяющее установить генотип вируса гепатита С, что дает возможность определить, какие методы терапии необходимо применить в каждом конкретном случае.

Существует более 10 генотипов HCV, однако для клинической практики достаточно определения 5 наиболее распространенных из них.

Рассмотрим подробнее количественный и качественный анализы на РНК HCV.

Качественный анализ указывает на наличие вируса в крови. Это довольно сомнительный анализ, поскольку у него есть предел границы чувствительности. При проведении качественного ПЦР желательно использовать для диагностики систему, норма чувствительности которой составляет не ниже 50 международных единицах на мл (МЕ/мл). Референсное значение, или норма – отрицательный результат («не обнаружено»), который говорит о том, что в анализируемом образце не выявлены специфичные для HCV фрагменты РНК. Положительный результат ПЦР («обнаружено») означает наличие активной инфекции.

Количественный анализ ПЦР, или вирусная нагрузка, представляет собой тест на концентрацию вируса (виремию) в крови, который показывает количество единиц вирусной РНК в определенном объеме крови.

1. Более 800 МЕ/мл – норма высокой вирусной нагрузки;
2. Менее 800 МЕ/мл – норма низкой вирусной нагрузки.
3. Количественный анализ ПЦР нужно проводить, если:
4. Качественный тест на наличие в сыворотке РНК вируса гепатита С имеет положительные результаты;
5. Определяется тактика и оценка эффективности терапии больного.

Количественный показатель вируса в крови и тяжесть заболевания не имеют между собой прямой зависимости.

Концентрация вируса влияет на:

• инфекционность болезни, что предполагает более высокий риск передачи вируса при большем содержании его в крови больного;
• эффективность проведения терапии, которая тем выше, чем ниже вирусная нагрузка.

Анализ генотипирования делается при качественном положительном тесте на присутствие в сыворотке РНК вируса гепатита С, а также для:

1. Определения прогрессирования заболевания;
2. Выработки тактики лечения;
3. Оценивания эффективности терапии;
4. Прогнозирования хронизации протекающего инфекционного процесса.

Продолжительность лечения, зависящая от выявления генотипа вируса, является важным фактором, поскольку применяемые для лечения препараты имеют целый ряд побочных эффектов и плохо переносится больными.

Расшифровка тестов проводится квалифицированным специалистом. Норма предполагает полное отсутствие РНК вируса, антител к ним и антигенов. Содержание антител в крови может указывать как на наличие острого или хронического гепатита С, так и на протекание периода выздоровления. Наличие в крови RNA HCV, выявленное при ПЦР, свидетельствует о присутствии в крови вируса.

При нарушениях забора и транспортировки крови, а также техники выполнения исследования анализ ПЦР иногда показывает ложноположительный, или сомнительный, результат. Анализы RIBA и ИФА могут показывать ложноположительные результаты в случае ранней стадии заболевания, когда организму еще не удалось выработать достаточного количества антител.

Если расшифровка тестов на гепатит С показывает положительные результаты, пациенту необходимо обратиться к гепатологу и врачу-инфекционисту, которые подскажут, какие дополнительные анализы нужно сдать для дальнейшего диагностического обследования и лечения.

Медицинская статистика свидетельствует, что в настоящее время около 4% населения планеты инфицировано вирусом гепатита С. Однако эта цифра не отражает объективной реальности, ведь многие люди даже не догадываются о том, что являются носителем данного вируса. Вот почему так важно регулярно проводить обследование у врача и периодически делать анализ крови на гепатит. Каждый в отдельности тест может давать сомнительный результат, и только в комплексе они позволяют окончательно определиться с диагнозом и начать адекватно лечить гепатит.

Автор. Загороднюк Михаил Петрович,
специально для сайта moizhivot.ru

В настоящее время признанным в мире и самым оптимальным по сочетанию цена-эффективность методом лечения является комбинированная терапия с использованием препаратов интерферона и рибавирина. Эффективность такой терапии примерно от 40% до 85%. Эффективность терапии зависит от: генотипа вируса, генотипа больного, веса, пола, возраста, давности инфицирования, применяемых препаратов и др.

Новые методы лечения дженериками Софосбувир. Асунапревир. Даклатасвир дает эффективность до 100%.

О Гепатите С — обычно он вызывается вирусом, попавшим в организм с половым контактом или кровью зараженного человека.

Заболевание протекает в двух вариантах — если вирус активно размножается, он при этом повреждает клетки печени,а печень не успевает восстановится (регенерировать). т.к. скорость повреждения выше скорости восстановления,при этом клетки замещаются рубцами, страдают функции печени. Если репликация (размножение вируса) медленное, печень успевает регенерировать.

При заболевании необходимо контролировать Трансаминазы- маркеры повреждения гепатоцитов. ALT (АЛТ, АлАТ), AST (АСТ, АсАТ)- катализируемые ими реакции осуществляют связь между белковым и углеводным обменом. Не понятно что побуждает перейти гепатиту С из вялотекущей в активную форму, которая является смертельно опасной и полностью разрушает печень за 10-20 лет. Поэтому считается, что опасность представляет именно гепатит, который протекает с повышением трансаминаз

Пациентам с положительным анализом крови на наличие РНК (Рибонуклеиновые кислоты) вируса гепатита С в крови методом Полимеразной цепной реакции (ПЦР. PCR) и Иммуноферментным анализом, ИФА (Enzyme immunoassay) необходимо контролировать активность вирура по уровню АЛТ (Аланин — аминотрансфераза). АЛТ считается индикаторным ферментом, и к его определению постоянно ссылаются при постановке диагноза различных гепатитов.

Если уровень АЛТ в пределах нормы, то противовирусная терапия обычно не рекомендуется.

Необходимо повторять биохимический анализ крови один раз в 3-6 месяцев. А также регулярное обследование состояния печени. Рекомендуется биопсия печени (извлечение фрагмента-биоптата печеночной ткани) которая покажет полную картину в печени на текущий день, а также поможет определить стадию развития фиброза (рубцевания) печени. Также возможно проведение других анализов на фиброз, или применение неинвазивного метода эластографии печени с аппаратом Фиброскан.

Различают 5 стадий (от 0 до 4) развития поражения печени (стадий фиброза печени). последней стадией является цирроз печени (сильное поражение печени, при котором она утрачивает свои функции). По этим обследованиям и результатам анализов принимается решение о необходимости лечения.

Для стадий 0-1 лечение не обязательно. Возможно начало лечения при персональной рекомендации врача при внепеченочных проявлениях вируса.

Для стадий 2 и выше рекомендуется безотлагательно начинать терапию.

В любом случае, даже при откладывании лечения необходимо пациенту находиться под контролем гепатолога. Один раз в полгода проводить тесты на трансаминазы, один раз в 3-4 года контролировать стадию развития фиброза печени.

ИТОГО: АЛТ + ИФА + ПЦР — для диагностики гепатита С. К лечению вируса гепатита С мы обычно переходим при повышенной АЛТ, положительном ПЦР анализе и наличии маркеров ИФА. Лечение начинается после:

• получения ИФА-маркеров (когда выявлены антитела к вирусу гепатита С)
• методом ПЦР в крови выявлено наличие РНК вируса гепатита С

Желательно это сделать в двух разных лабораториях.

Гепатита С без ИФА маркеров не бывает! Но они появляются по завершении, инкубационного периода, и сохраняются в дальнейшем вне зависимости от результатов лечения. Обычно, после срока инкубационного периода, если нет маркеров — нет гепатита!

Внимание. По последним исследованиям, если говорить о гепатите С у коинфицированных ВИЧ / ВГС могут отсутствовать антитела к вирусу. Соответственно ИФА маркеры отсутствуют, а вирус гепатита С есть, который подтверждается положительным результатом при анализе методом ПЦР.

Метод ПЦР- Полуколичественный анализ крови для прогноза гепатита С — это уже устаревший вид анализа, дающий очень расплывчатый результат. Лучше используйте количественный анализ крови методом ПЦР для определения вирусной нагрузки.

Качественный ПЦР анализ может быть только либо положительным, либо отрицательным (анализ, котторый устанавливает факт наличия РНК вируса гепатита С). «полуположительный и полуотрицательный», не имеет никакого смысла.

Смотрим на результаты биохимического анализа крови и трансаминазы. Но надо учитывать, что эти показатели, по оценке активности гепатита С, имеют погрешность около 20%.

Самую точную картину сможет дать биопсия печени. Но это тяжело и она доступна не везде. Также сужествуют другие методы обследования, они менее точные, но безболезненные, например фибросканирование (эластометрия) печени и фибротест.

Внепеченочные проявления — результаты исследований с участием мед.работников, с гепатитом С, показали, что 74% больных испытывали различные формы. Наиболее часто наблюдались боли в суставах -74%; нечувствительность или покалывание — 17%; боли в мышцах – 15%; нестерпимый зуд — 15%; сухость слизистых рта и глаз – 11%.

Схемы лечения (выбор препаратов, дозировка и частота приема) подбирается в соответствии с генотипом вируса гепатита С. Сейчас существует 6 основных генотипов вируса, которые дают более детальную информацию о гепатите С (обозначаемых цифрами: 1,2,3,4,5,6), а также обозначаются подтипы/субтипы ( которые обозначаются латинскими буквами, присоединенными к цифре генотипа: 1b, 3a,…). Вирусы с разными генотипами-субтипами отличаются по чувствительности к терапии интерфероном, по содержанию вируса в крови (виремии ), по распространению в теле.

Генотипирование диктует длительность терапии и ее интенсивность.

Первый и четвертый генотип ( которые встречающийся редко), примерно вдвое устойчивее при антивирусной терапии. Подтип генотипа вируса — при этом не существенен.

Количественная оценка вирусной нагрузки (наличие вируса) — относительно новое понятие,введеное европейскими гепатологами. Суть сравнения показателей вирусной нагрузки до лечения и через 4, 8, 12 недель терапии, соответственно, это сравнение позволяет уточнять схему терапии, а также рекомендовать отмену или продолжение терапии (при снижении загрузки в 100 и более раз) с большой вероятностью на успех.

Плюс такой оценки — если терапия не работает пациент узнает об этом быстро.

Минусы- нужны качественные и постоянные анализы.

Это все относится к стандартной интерфероновой терапии.

Контрацепция в период терапии, а также в течение 6 месяцев после окончания терапии обязательна для обоих партнеров.

источник

Анализ на гепатит С необходимо сдавать всем пациентам с подозрением на подобное расстройство. Существует несколько разновидностей подобной диагностической меры. Они указывают, какой именно вирус, а точнее, его разновидность, стала возбудителем недуга.

Необходимость проведения лабораторных обследований заключается в том, что в некоторых случаях подобная болезнь может протекать без выражения каких-либо признаков. Кроме этого, стоит учесть, что вирусный гепатит не имеет специфической симптоматики, отчего его можно ошибочно принять за ряд других патологий ЖКТ. Из этого следует, что диагностика гепатита С основывается на данных лабораторного и инструментального обследования пациентов.

Для окончательного утверждения или отрицания инфицирования человека этим вирусом необходимо проведение следующих тестов:

• общий анализ крови – показывающий нарушение функционирования поражённого органа;
• биохимический анализ крови на АЛТ, АСТ и билирубин. Такое исследование даст возможность получить информацию о разрушении печёночных клеток;
• иммуноферментный анализ – это наиболее эффективная процедура, указывающая на стадию протекания подобного поражения печени, тип вируса и его количественные значения;
• ПЦР-диагностика – укажет на наличие вируса и его происхождение;
• иммунохроматографический анализ – представляет собой экспресс-тест, который позволяет в короткие сроки установить наличие у пациента антител.

Показаниями к осуществлению вышеописанных анализов на гепатит С выступают:

• незащищенный половой акт с заражённым человеком;
• появление одного или нескольких симптомов подобного недуга. К основным из них стоит отнести желтуху, тяжесть, дискомфорт и боль в зоне правого подреберья, снижение аппетита, нарушение сна, частые приступы тошноты и рвоты;
• переливание крови;
• недавнее нанесение татуировок или пирсинга;
• наркомания – инфицироваться можно через использование одного шприца для инъекционного введения наркотиков;
• наличие у человека в близком окружении людей с подобным диагнозом – высока вероятность инфицирования при пользовании бытовыми предметами с переносчиком вируса.

Проводить расшифровку анализов должен только тот врач, который их назначил. Это обуславливается тем, что клиницист владеет необходимой информацией о состоянии больного.

Общий анализ крови при гепатите даёт возможность получить клиницисту полную информацию об общем состоянии и функционировании внутренних органов пациента. Изменения в таких показателях не будут специфическими, но при различном протекании вирусного гепатита они будут иметь особенные изменения. Для гепатита С характерны такие отклонения:

• снижение содержания лейкоцитов и уровня гемоглобина;
• повышение лимфоцитов среди всего количества лейкоцитов;
• нарушение процесса свёртываемости крови;
• уменьшение концентрации тромбоцитов;
• возрастание СОЭ.

Биохимический анализ крови направлен на отражение функционирования печени. В анализе особо важными являются следующие показатели:

• АЛТ и АСТ – они попадают в кровь в случаях уничтожения клеток печени. При скрытой форме протекания подобного заболевания такие показатели нередко выступают единственными признаками протекания в организме патологического процесса. Нормой для представительниц женского пола является 31 МЕ/л, а у мужчин – 37. При наличии гепатита подобные показатели будут повышены;
• билирубин – указывает на тяжесть проявление такого симптома, как желтуха. Лёгкой форме будут соответствовать значения до 85 мкмоль/л, а на тяжёлую укажут показатели свыше 170 мкмоль/л для представителей обоих полов.
• активность других ферментов печени.

С помощью анализа ПЦР на гепатит С клиницисты смогут выявить генетический материал возбудителя недуга и его количество. Преимуществом такой методики является возможность определения вируса при его минимальном количестве.

Такое исследование входит в список тех анализов, которые нужно сдать абсолютно всем пациентам, обратившимся за консультацией по поводу возможного наличия вирусного поражения печени.

Анализ может определить наличие инфицирования уже через пять дней со времени предполагаемого заражения. Положительный результат укажет на протекание патологии в организме, однако такой исход — ещё не повод для отчаяния и паники. Это обуславливается несколькими причинами:

• анализ крови иногда может дать ложноположительный анализ на гепатит С. Такой итог может говорить о развитии аутоиммунной патологии, формировании злокачественных или доброкачественных образований, широком спектре других расстройств вирусной этиологии. Помимо этого, он нередко является следствием индивидуальных особенностей иммунной системы;
• подобный результат, помимо всего прочего, указывает и на наличие инфекции в прошлом;
• данное заболевание является излечимым – оно хорошо поддаётся консервативной терапии.

Полимеразная цепная реакция существует нескольких разновидностей:

• качественный и количественный анализы на гепатит С;
• генотипирование.

Анализ на гепатит С ПЦР качественный – позволяет понять, присутствует ли вирус в крови или нет. Стандартной чувствительностью такого теста будут показатели от 10 до 500 МЕ/мл. Его исходами могут быть два результата:

• присутствует – говорит об активном размножении вируса;
• отсутствует – количество возбудителя в крови человека находится ниже уровня восприимчивости такого лабораторного исследования.

ПЦР количественный – это значение вирусной нагрузки, отображающее содержание РНК вируса один кубический сантиметр крови. Такая методика не только является частью диагностических мероприятий, но также даёт возможность контролировать эффективность противовирусной терапии. Таким образом, при помощи такого теста уточняется несколько важных факторов:

• инфекционность – это возможность передачи возбудителя от одного человека к другому. Чем выше количество РНК гепатита, тем больше шансы заразить здорового человека, в частности, во время полового контакта, а также при пользовании одной бритвой или маникюрными принадлежностями;
• выбор тактики терапии;
• продолжительность приёма противовирусных препаратов и прогноз.

Количественный ПЦР-анализ на гепатит зависит от разновидности лабораторного теста и границ его восприимчивости. Нижним значением является не более 600.000 МЕ/мл, средние показатели находятся в пределах от 600.000 до 700.000 МЕ/мл. Результаты от 800.000 МЕ/мл и более уже считаются высокой степенью содержания РНК вируса.

Генотипирование позволяет выявить, каким именно из одиннадцати генотипов возбудителя заразился человек.

После расшифровки анализов клиницист может назначить индивидуальную схему медикаментозной терапии.

ИФА – иммуноферментный тест, являющийся наиболее распространённым и наиболее точным тестом, который позволяет определить наличие или отсутствие антител к возбудителю гепатита.

ИХА – иммунохроматографическое исследование, представляющее собой экспресс-тест для выявления антител. Он осуществляется при помощи специальных полосок и кассет. Несмотря на то что такая методика является довольно новой и только в начале пути своего совершенствования, выделяют один её недостаток, а именно низкую точность. Индикаторные полоски далеко не во всех случаях способны показать итог теста с точностью до сотых.

В независимости от того, какие анализы нужно сдать, они требуют тщательной подготовки пациента. Для получения достоверных результатов анализов на гепатит С, пациенту рекомендуется:

• сдавать анализы в первой половине дня, обязательно на голодный желудок;
• непосредственно перед лабораторной диагностикой запрещается пить кофе, чаи, соки или другие напитки. Можно принимать внутрь только очищенную воду без газа;
• за двое суток до осуществления исследований стоит отказаться от употребления жирных и острых блюд, а также от распития спиртного;
• минимум за два часа до какого-либо анализа нужно ограничиться от выкуривания сигарет.

Основу лабораторной диагностики составляет ПЦР, во время расшифровки которого, учитываются:

• положительный или отрицательный результат качественного анализа;
• количество копий вируса, которое при подобном недуге всегда будет показывать выше 800.000 МЕ/мл.

Во время расшифровки особое внимание обращают на значение второго пункта.

В некоторых случаях наблюдается такая ситуация, когда антитела к гепатиту С положительны, а ПЦР — отрицательный. Это свидетельствует о ранее перенесённом заболевании данной этиологии.

Для прохождения лабораторной диагностики необходимо обратиться к инфекционисту. Только этот специалист сможет провести грамотное первичное обследование и расшифровку результатов анализов.

источник

Учитывая бессимптомное течение и высокую вероятность передачи HCV-инфекции, большое значение имеет диагностика на ранних стадиях патологии. Наиболее точной считается постановка полимеразной цепной реакции. В отличие от методов выявления серологических маркеров, ПЦР мало зависит от сопутствующих заболевания и общего состояния организма пациента. Но если подтвержден вирус гепатита С, количественный анализ, расшифровка которого проводится врачом, обязателен.

HCV – тяжелое заболевание, требующее серьезной дорогостоящей и опасной побочными реакциями терапии. Поэтому диагноз никогда не ставят на основании результатов одного исследования. При подозрении на наличие вирусного заболевания пациенту приходится пройти несколько тестов. Но чтобы избежать лишних затрат и потери времени, анализы крови и инструментальные обследования проводят поэтапно.

Основные стадии диагностического процесса приведены в таблице:

Окончательный диагноз доктор ставит только по результатам, указанным во всех исследованиях. Некоторые препараты, например, гепатопротекторы, витамины показаны уже в начале диагностического процесса. Но таргетные противовирусные средства назначают после получения всех данных.

Техника проведения полимеразной цепной реакции известна достаточно давно и успешно используется для диагностирования ряда вирусных заболеваний, и HCV не является исключением.

В настоящее время существует несколько методик постановки ПЦР, но в принципиальном плане этот процесс состоит из нескольких этапов:

1. Разрушение двойной нити ДНК под воздействием нагревания либо определенных химических веществ.
2. Присоединение к разделенным основанием ДНК так называемых праймеров – остатков нуклеотидной цепи РНК вируса (в большинстве современных тест-систем используются 5`-NTR-области генома HCV).
3. Специфический фермент, ДНК-полимераза, распознает праймер, провоцирует присоединение других нуклеотидных остатков.

По окончании третьего этапа полимеразной цепной реакции ДНК между двумя праймерами удваивается, а впоследствии происходит амплификация участка генома в геометрической прогрессии (2–4–8 и т.д.).

Чувствительность современных тест систем составляет 10–50 копий РНК в 1 мл крови.

Расшифровка ПЦР на гепатит С должна проводиться квалифицированным специалистом. В соответствии с Международным стандартом ВОЗ для количественного определения вирусного генома служит образец плазмы крови в лиофилизированном виде, содержащий РНК первого генотипа вируса в концентрации 105 МЕ/мл.

При этом обращают внимание на количественные единицы, в которых выражены результаты исследований. Обычно количество копий РНК HCV указывают в абсолютном или логарифмическом выражении. Затем, в соответствии с международными стандартами, эту цифру пересчитывают при помощи специального коэффициента в международные единицы (МЕ). Таким образом конечные результаты обозначаются в МЕ/мл.

Для проведения количественного исследования применяют различные тест-системы и методики постановки полимеразной цепной реакции. Некоторые предназначены для оценки уровня виремии в плазме или сыворотке. Другие более эффективны и показательны при исследовании цельной крови.

Говорить о норме при интерпретации указанных в лабораторном бланке результатов не совсем корректно. Дело в том, что у здорового человека РНК вируса в организме отсутствует, а наличие частиц HCV вне зависимости от количественного показателя свидетельствует об инфицировании. В дальнейшем при помощи ПЦР оценивают эффективность лечения. При отрицательном результате на 4 неделе приема медикаментов, а затем и после окончания противовирусной терапии (на протяжении 48 недель) говорят о выздоровлении.

Проведение полимеразной цепной реакции предполагает определение не только наличия РНК HCV в крови, но и определение количества копий вируса и анализ структуры генома. Такие возможности делают ПЦР одним из наиболее информативных и точных методов диагностики вирусного гепатита C.

Все применяемые на практике методы постановки полимеразной цепной реакции приведены ниже в порядке проведения (каждый последующий тест назначают при положительном результате предыдущего):

1. Анализ ПЦР на гепатит С качественный, проводится только для обнаружения РНК вируса в крови.
2. Количественное исследование ПЦР. Расшифровка проводится согласно общепринятым нормам. В зависимости от результата вирусологическая нагрузка может быть низкой, умеренной или высокой. Данный показатель является одним из предикторов исхода терапии HCV.
3. Генотипирование (во многих частных лабораториях предлагается в комплексе с количественным анализом, что снижает общую стоимость). Обозначение генотипа HCV осуществляется одной из арабских цифр (с 1 по 6). На территории России чаще выявляют генотип 1 или 3, несколько реже – 2, 4–6 диагностируют в единичных случаях. Ранее при использовании интерфероновых схем лечения разновидность HCV определяла длительность и эффективность терапии. Современные противовирусные средства отличаются широким спектром действия, но некоторые из них прописывают только при 1–4 генотипах HCV.

Генотипирование проводится только один раз, перед началом терапии. По мере приема медикаментов количественные нормы гепатита С необходимы врачу для оценки эффективности противовирусных препаратов. После окончания курса лечения проводят качественное исследование ПЦР.

Количественный анализ методом ПЦР проводится для определения вирусной нагрузки. Под этим термином подразумевают количество копий РНК возбудителя в 1 мл крови.

Благодаря такому исследованию врач сможет оценить ряд факторов, играющих ключевую роль как в самом течении заболевания, так и исходе терапии. Это:

• вероятность развития осложнений (цирроза и гепатоцеллюлярной карциномы), так как чем активнее патологический процесс, тем выше риск появления патологий печени уже на начальных стадиях гепатита С;
• эффективность стандартной схемы терапии (в тяжелых случаях требуется дополнительное назначение противовирусных средств);
• риск для окружающих (особенно если пациент относится к социально благополучным слоям населения, имеет семью, детей);
• риск внепеченочных осложнений (развитие аутоиммунных заболеваний, поражения нервной, сердечно-сосудистой системы и т.д.).

Количественное определение РНК HCV важно и для контроля эффективности проводимого лечения. По мере продолжения приема противовирусных средств полученные цифры снижаются. Целью терапии является достижение отрицательного результата качественного анализа методом ПЦР.

До появления большого количества частных лабораторий, где пациент может сдать практически любой анализ без документов от врача, направление на выполнение количественной ПЦР давали на определенном этапе диагностики или лечения.

В соответствии с нормами и протоколами ВОЗ, показаниями к проведению такого исследования служат:

• положительные серологические маркеры HCV (anti-HCV Total, наличие иммуноглобулинов класса G и/или М);
• положительный результат качественной ПЦР;
• контроль проводимого лечения.

При желании пациент может самостоятельно обратиться в частную клинику и выполнить подобное исследование. Но при отсутствии гепатита С проведение такого лабораторного теста считают нецелесообразным.

Для определения вирусной нагрузки установлены следующие сроки:

• до начала терапии (возможно, одновременно с генотипированием);
• 4 неделя лечения (отрицательные данные свидетельствуют о быстром вирусологическом ответе и служат предикторами благоприятного исхода);
• последняя неделя терапевтического курса (12 или 24 в зависимости от подобранной схемы), негативный результат подтверждает эффективность терапии, позитивный требует продолжения лечения, но уже с применением других медикаментов;
• 24 и 48 неделя после окончания лечебного курса (вне зависимости от его продолжительности), отсутствие вирусной нагрузки подтверждает выздоровление.

Дополнительно исследование проводят только по показаниям (например, ухудшение самочувствия, ошибки в приеме таблеток, выявление сопутствующих инфекций и т.д.). Выполнение ПЦР не исключает необходимости в других анализах – клинических исследованиях крови и мочи, печеночных проб, УЗИ и прочих.

Чтобы расшифровка анализа ПЦР не была ошибочной, необходимо соответствующим образом подготовиться к забору крови. За некоторым исключением правила не отличаются от таковых при других исследованиях.

• сдавать кровь строго натощак (последний прием пищи за 12 часов до посещения лаборатории);
• процедуру проводить в первой половине дня (как можно раньше);
• в день анализа после пробуждения пить можно только воду; чай, кофе, газированные и/или сладкие напитки, соки и т.д. противопоказаны;
• за 3–5 часов до сдачи крови нельзя курить;
• если невозможно прервать прием каких-либо медикаментов, сообщить названия принимаемых лекарств лаборанту и врачу, который будет интерпретировать полученные данные.

Наличие гепатита С уже подразумевает полный отказ от спиртного и строгую диету (стол №5). Но если анализ проводится на этапе диагностики, за 5–7 дней до забора крови обязателен контроль питания с исключением тяжелых для печени продуктов и алкоголя.

Обычно, когда пациент получает на руки результаты анализов, в бланке приведены показатели нормы, полученные значения и краткая интерпретация. Однако расшифровка анализа крови на гепатит С должна проводиться только врачом. Количественная ПЦР – один из этапов диагностики, поэтому врач сопоставляет приведенные цифры с полученными ранее результатами.

В зависимости от полученных показателей определяется степень вирусной нагрузки или полное отсутствие РНК HCV в организме.

Если проведен количественный анализ на гепатит С, расшифровка проводится в соответствии с таблицей:

Чтобы точно расшифровать анализ и не допустить ошибочных результатов, оценивать данные количественной ПЦР можно только после выявления серологических маркеров качественной ПЦР. При ИФА обязательно указывается коэффициент позитивности. Также принимают во внимание данные ультразвукового обследования, эластографии и биопсии, если исследование проводилось.

Количественный анализ ПЦР проводят только в том случае, если положительны другие показатели крови при гепатите С.

Получение отрицательного результата возможно при:

• самостоятельном выздоровлении (в медицинской литературе приведена статистика, по которой порядка 15% случаев инфицирования HCV остаются незамеченными, иммунная система человека полностью устраняет вирус);
• раннем вирусологическом ответе (при оценке результатов в ходе противовирусной терапии);
• при ошибочных данных предыдущих исследований (маловероятно, так как предварительно обычно назначают ИФА, качественную ПЦР, печеночные пробы).

Когда сдается анализ на гепатит С для оценки вирусологической нагрузки, расшифровка проводится врачом. Считается, что показатели нормы – это полное отсутствие РНК HCV в крови. Но для исключения скрытой инфекции исследование рекомендуют повторить через несколько недель.

Перед началом диагностического обследования необходимо точно знать, какие показатели крови указывают на HCV. С одной стороны это позволит избежать пациенту лишних финансовых трат на ненужные анализы, с другой – сэкономит время.

Так, при гепатите С показательны такие данные:

• позитивный ИФА вне зависимости от класса обнаруженных антител; но данный параметр оценивают на фоне других результатов, так как некоторые особенности работы иммунной системы могут повлиять на правильность исследования;
• позитивная качественная ПЦР (чувствительность и специфичность метода достигает 100%);
• определение количества копий вируса при количественной ПЦР.

Косвенными признаками HCV является превышение норм печеночных трансаминаз, билирубина, лейкоцитоз, ускорение СОЭ, наличие билирубина в моче.

При расшифровке результатов принимают во внимание сокращения, как обозначается гепатит С в анализах. Обычно вирусную нагрузку указывают в МЕ/мл или IU/ml, а РНК вируса английской аббревиатурой RNA HCV.

В отличие от ИФА вероятность ложного результата ПЦР практически нулевая. Ошибки возможны только в результате человеческого фактора, то есть при нарушении правил забора крови, хранения образцов и непосредственно проведении исследования.

Специалисты в области гепатологии подчеркивают, что количественная ПЦР не имеет аналогов и является одним из основных исследований для пациентов с HCV. Механизм проведения анализа сводит к минимуму вероятность ложноположительных или ложноотрицательных результатов.

Для получения результатов требуется несколько дней. Забор крови не требует особой подготовки, возможен практически в любой клинической лаборатории и не сопровождается какими-либо значимыми болевыми ощущениями. Но основным преимуществом такого анализа является высокая точность, достигающая 100%.

источник

Антитела к вирусу гепатита С в сыворотке в норме отсутствуют
Суммарные антитела к вирусу гепатита С представляют собой антитела классов IgM и IgG, направленные к комплексу структурных и неструктурных белков вируса гепатита С.
Это исследование является скрининговым для выявления пациентов с ВСГ. Суммарные антитела к вирусу гепатита С можно выявить в первые 2 недели заболевания, и их присутствие свидетельствует о возможной инфицированности вирусом или перенесенной инфекции.

Однозначный ответ на основании результатов данного теста получить невозможно, так как тест определяет суммарные антитела IgM и IgG. Если это ранний период острого вирусного гепатита С, то об этом свидетельствуют антитела IgM, а если это период реконвалесценции или состояние после перенесенного ВГС, то на это указывают антитела IgG.

Антитела IgG к ВГС могут сохраняться в крови реконвалесцентов на протяжении 8-10 лет с постепенным снижением их концентрации. Возможно позднее обнаружение антител спустя год и более после инфицирования. При хроническом гепатите С суммарные антитела определяются постоянно. Поэтому для уточнения сроков инфицирования необходимо отдельно определить антитела класса IgM к ВГС.

Оценка результатов исследования

Результат исследования выражается качественно – положительный или отрицательный. Отрицательный результат исследования указывает на отсутствие суммарных антител (JgM и JgG) к ВГС в сыворотке крови. Положительный результат – выявление суммарных антител (JgM и JgG) к ВГС свидетельствует о начальной стадии острого вирусного гепатита С, остром периоде инфекции, ранней стадии реконвалесценции, перенесенном вирусном гепатите С или хроническом вирусном гепатите С.

Однако обнаружение суммарных антител к ВГС недостаточно для постановки диагноза ВГС и требует подтверждения для исключения ложноположительного результата исследования. Поэтому при получении положительного результата скринингового исследования на суммарные антитела к ВГС в лаборатории проводится подтверждающий тест. Окончательный результат определения суммарных антител к ВГС выдается совместно с результатом подтверждающего теста.

Антитела к вирусу гепатита С JgM в сыворотке в норме отсутствуют. Наличие антител класса JgM к ВГС в крови пациента позволяет верифицировать активную инфекцию. Антитела класса JgM могут выявляться не только при остром ВГС, но и при хроническом гепатите С.

Антитела класса JgM к ВГС появляются в крови пациента спустя 2 недели после развития клинической картины острого вирусного гепатита С или обострения хронического гепатита и обычно исчезают спустя 4-6 месяцев. Снижение их уровня может свидетельствовать об эффективности лекарственной терапии.

Результат исследования выражается качественно – положительный или отрицательный. Отрицательный результат исследования указывает на отсутствие антител JgM к ВГС в сыворотке крови. Положительный результат – выявление антител JgM к ВГС свидетельствует о начальной стадии острого вирусного гепатита С, остром периоде инфекции, ранней стадии реконвалесценции или активном хроническом вирусном гепатите С.

Вирус гепатита С в крови в норме отсутствует.
В отличие от серологических методов диагностики ВГС, где обнаруживают антитела к ВГС, ПЦР позволяет выявить наличие непосредственно РНК ВГС в крови как качественно, так и количественно. Определяемым фрагментом в обоих служит консервативный участок генома гепатита С.

Обнаружение только антител к ВГС подтверждает лишь факт инфицирования пациента, но не позволяет судить об активности инфекционного процесса (о репликации вируса), о прогнозе заболевания. Кроме того, антитела к вирусу ГС обнаруживают как в крови больных острым и хроническим гепатитом,так и у тех пациентов, кто болел и выздоровел, а нередко антитела в крови появляются только спустя несколько месяцев после появления клинической картины заболевания, что затрудняет диагностику. Обнаружение вируса в крови методом ПЦР – более информативный метод диагностики.

Качественное выявление ВГС методом ПЦР в крови свидетельствует о виремии, позволяет судить о размножении вируса в организме и является одним из критериев эффективности противовирусной терапии.

Аналитическая чувствительность метода ПЦР составляет не менее 50-100 вирусных частиц в 5 мкл, прошедшей выделение ДНК-пробы, специфичность – 98%. Обнаружение РНК вируса гепатита С с помощью ПЦР на ранних этапах развития вирусной инфекции (возможно уже через 1-2 недели после заражения) на фоне полного отсутствия каких-либо серологических маркеров может служить самым ранним свидетельством инфицирования.

Однако изолированное выявление РНК вируса гепатита С на фоне полного отсутствия каких-либо других серологических маркеров не может полностью исключить ложноположительный результат ПЦР. В таких случаях требуется всесторонняя оценка клинических, биохимических и морфологических исследований и повторное неоднократное подтверждение наличия инфекции ПЦР.

Согласно рекомендациям ВОЗ для подтверждения диагноза вирусного гепатита С необходимо троекратное выявление РНК вируса гепатита С в крови пациента.

Обнаружение РНК вируса гепатита С методом ПЦР используется в целях:

разрешения сомнительных результатов серологических исследований;

дифференциация гепатита С от других форм гепатита;

выявление острой стадии заболевания по сравнению с перенесенной инфекцией или контактом; определения стадии инфицированности новорожденных от серопозитивных по вирусу гепатита С матерей;

контроля эффективности противовирусного лечения.

Количественный метод определения содержания РНК вируса гепатита С в крови дает важную информацию об интенсивности развития заболевания, об эффективности лечения и о развитии резистентности к антивирусным препаратам. Аналитическая чувствительность метода составляет от 5.102 копий/мл вирусных частиц в сыворотке крови, специфичность – 98%.

Уровень виремии оценивают следующим образом: при содержании РНК ВГС от 10^2 до 10^4 копий/мл – низкий; от 10^5 до 10^7 копий/мл – средний и выше 10^8 копий /мл – высокий.

Количественное определение содержания РНК ВГС в сыворотке крови методом ПЦР имеет важное значение для прогноза эффективности лечения интерфероном-альфа. Показано, что наиболее благоприятный прогноз заболевания и наибольшую вероятность положительного ответа на противовирусную терапию имеют лица с низким уровнем виремии. При эффективном лечении уровень виремии снижается.

Метод ПЦР позволяет не только выявить РНК ВГС в крови, но и установить его генотип. Наиболее важное значение для клинической практики имеют 5 субтипов ВГС – 1а, 1b, 2а, 2b и 3а. В нашей стране наиболее часто встречается субтип 1b, далее идут 3а, 1а, 2а.

Определение генотипа (субтипа) вируса имеет важное значение для прогноза течения ВГС и подбора пациентов с хроническим ВГС к проведению лечения интерфероном-альфа и рибавирином.

При инфицировании пациента субтипом 1b хронический ВГС развивается примерно в 90% случаев, при наличии субтипов 2а и 3а – в 33-50%. У пациентов с субтипом 1b заболевание протекает в более тяжелой форме и часто заканчивается развитием цирроза печени и гепатоцеллюлярной карциномы. При инфицировании субтипом 3а у больных более выражен стеатоз, поражение желчевыводящих путей, активность АЛТ и менее выражены фиброзные изменения в печени, чем у пациентов с субтипом 1b.

Показаниями к лечению хронического ВГС интерфероном–альфа являются:

повышение уровня трансаминаз;

наличие РНК ВГС в крови;

генотип 1 ВГС;

высокий уровень виремии в крови;

гистологические изменения в печени: фиброз, умеренные или выраженные воспалительные явления.

При лечении интерфероном-альфа больных вирусным гепатитом С с субтипом 1b эффективность терапии отмечается в среднем в 18% случаев, у инфицированных другими субтипами – в 55%. Использование комбинированной схемы лечения (интерферон-альфа + рибавирин) повышает эффективность терапии. Стойкий ответ наблюдается у 28% больных с субтипом 1b и у 66% — с другими субтипами ВГС.

источник

Существует множество субтипов HCV, из-за чего не всегда удается подобрать эффективные противовирусные лекарства и достичь желаемых результатов в лечении. Разнообразие возбудителей обусловлено их способностью изменять свою структуру, то есть мутировать. Вследствие этого иммунитет не успевает сформировать мощный ответ против патогенного агента, а медикаменты оказываются неэффективными.

Зачастую гепатит диагностируется на стадии цирроза, чему предрасполагает позднее выявление болезни из-за отсутствия клинических признаков. Только путем лабораторного исследования удается обнаружить HCV в инкубационном периоде.

Количественный анализ на гепатит С дает возможность не только установить факт присутствия возбудителя в крови, но и подсчитать его концентрацию.

Специфической подготовки к лабораторной диагностике не требуется. Достаточно придерживаться следующих рекомендаций:

1. количественный анализ проводится натощак, при этом последний прием пищи – за 8 часов до забора крови;
2. за двое суток следует отказаться от спиртного и «тяжелых» блюд;
3. особое значение имеют лекарственные средства, которые принимает пациент. Они могут повлиять на результат исследования, поэтому врач должен знать о них.

Также не желательна тяжелая физическая нагрузка и физиотерапевтические процедуры накануне забора крови. Чтобы расшифровка количественного анализа на гепатит С получилась достоверной, не стоит пренебрегать вышеперечисленными рекомендациями.

Зачастую результат анализа пациент получает через сутки. Цена исследования на определение концентрации возбудителя в крови зависит от лаборатории и качества реактивов и может достигать 4 тысяч рублей.

К числу первостепенных методов диагностики относится ИФА, или иначе иммуноферментный анализ. Он назначается для обнаружения специфических антител к HCV. Его эффективность достигает 95%. Если расшифровка исследования дает положительный результат, стоит заподозрить присутствие возбудителя в крови.

Заметим, что у половины обследуемых при «+» тесте в ходе дальнейшей диагностики вирусный агент в крови не выявляется. ИФА в данном случае указывает на перенесенный контакт с HCV в прошлом, что подтверждается циркулирующими антителами.

Более точным исследованием является полимеразная цепная реакция, или иначе ПЦР. Она позволяет определить концентрацию РНК возбудителя в крови. Обнаружив генетический набор вируса в биологическом материале, врач подтверждает гепатит С.

ПЦР назначается пациенту для верификации диагноза. Она дает возможность выявить РНК на стадии, когда антитела еще отсутствуют. Существует несколько видов генетических исследований:

1. количественный анализ ПЦР на гепатит С, который не только устанавливает факт присутствия возбудителя в крови, но и предоставляет информацию о его концентрации;
2. качественный – подтверждает инфицирование;
3. генотипирование – позволяет определить генотип патогенного агента и подобрать наиболее эффективные лекарства против него.

Как уже было сказано, существует несколько видов лабораторного исследования:

• качественный анализ – свидетельствует о присутствии патогенного агента в крови. Данный вид диагностики имеет определенный «уровень реагирования», поэтому не всегда оказывается достоверным. Чтобы правильно расшифровать результаты и получить реальные показатели, для исследования рекомендуется использовать тест-систему с чувствительностью — не ниже 50 МЕ/мл. Норма анализа – это «отрицательный ответ» или «вирус не обнаружен». Это указывает на отсутствие генетического набора возбудителя в исследуемом материале. Если результат оказался положительный, требуется дальнейшее обследование пациента;
• количественный анализ ПЦР на гепатит С определяет вирусную нагрузку, то есть концентрацию патогенного агента в крови. Результат исследования показывает число единиц РНК в фиксированном объеме биологической жидкости;

Вирусная нагрузка – это подсчет инфекционной РНК в одном миллилитре крови исследуемого. Единицы измерения – МЕ/мл, однако некоторые лаборатории определяют «копии/мл», при этом указывая на бланке нормы анализа для сравнения и оценки результатов.

• генотипирование. Из-за способности возбудителя изменяться выбор эффективных противовирусных лекарств для терапии должен осуществляться на основании его генотипа. От него зависит не только результат, но и длительность лечебного курса. Так, гепатит HCV 1 требует назначения медикаментов на год, однако положительная динамика наблюдается лишь в 60% случаев. Что касается второго и третьего генотипов, то они являются менее стойкими к действию противовирусных средств, из-за чего эффективность терапии превышает 85%. При получении такого результата исследования – «вирус не типируется», стоит заподозрить присутствие возбудителя, который не распознается стандартными тест-системами.

Расшифровка количественного анализа на гепатит С необходима для:

1. дальнейшего обследования пациента, когда при ИФА были обнаружены антитела к HCV;
2. подтверждения диагноза;
3. установления вирусной нагрузки при микст-инфекции, когда человек заражен несколькими видами возбудителя;
4. определения тактики лечения (выбора противовирусных медикаментов, их замены или завершения терапии);
5. оценки динамики прогрессирования заболевания, а также эффективности лекарств;
6. определения стадии патологии (острая, хроническая).

ПЦР имеет следующие преимущества:

1. хорошая чувствительность, благодаря чему удается подсчитать даже небольшое количество вируса;
2. определение самого возбудителя (РНК), а не антигенов;
3. специфичность методики — установление определенного типа патогенного агента;
4. быстрота получения результатов, ведь для анализа не требуется выращивание культур на питательной среде. Ответ готов через 5 часов;
5. универсальность – позволяет выявить генетический набор различных возбудителей, как РНК, так и ДНК-содержащих (гепатит В);
6. обнаружение скрытой инфекции.

Лабораторное исследование помогает подтвердить диагноз и является неотъемлемой частью комплексного обследования (анализа клинических симптомов, результатов ИФА и биохимии).

Кроме того, ПЦР широко используется в аллергологии, генетике, а также для установления факта отцовства.

Оценка результатов лабораторной диагностики осуществляется врачом путем сравнения полученных данных с нормой.

Концентрация патогенного агента определяется амплификатором и сравнивается с диапазоном, границы которого от 1,8*10^2 до 2,4*10^7. Благодаря регулярному обследованию вирусоносителя удается своевременно обнаружить увеличение вирусной нагрузки, что подтверждает активацию возбудителя и обострение болезни.

На результаты ПЦР могут влиять некоторые факторы:

• некачественный сбор материала;
• введение гепарина накануне исследования. Он относится к лекарственным средствам, которые уменьшают свертываемость крови, тем самым замедляя действие реактивов ПЦР;
• несоблюдение правил транспортировки материала;
• низкий уровень профессионализма врачей-лаборантов;
• несоблюдение техники проведения анализа.

Норма количественного исследования на определение РНК вируса гепатита С может несколько отличаться в разных лабораториях, однако эти погрешности зачастую не влияют на конечный результат обследования. Не последнюю роль играет вид тест-систем, а именно их чувствительность. Это особенно важно для пациентов с невысокой вирусной нагрузкой, которую некоторые лаборатории могут не обнаружить.

Лабораторная диагностика проводится на этапе обнаружения гепатита С, в процессе лечения, а также после проведенной терапии. Это дает возможность правильно установить субтип возбудителя, подобрать эффективные лекарства и отследить динамику изменений на фоне их приема.

Кроме того, исследование крови позволяет подтвердить выздоровление или хронизацию инфекционно-воспалительного процесса. Обязательным считается анализ перед началом терапии и спустя 3 месяца, что необходимо для оценки динамики и эффективности выбранных противовирусных средств.

Дополнительно врач назначает ПЦР на 4 и 24 неделях терапии. О благоприятном прогнозе можно говорить при снижении вирусной нагрузки к концу третьего месяца. Например, при ее уменьшении с 1 млн МЕ/мл до 100 тысяч. Если концентрация возбудителей остается на прежнем уровне или несколько увеличивается, значит, противовирусные медикаменты неэффективны, и требуется их замена или добавление новых.

В случае медленного снижения уровня патогенных агентов в крови врач может продлить лечение или наоборот, отменить препараты, получив отрицательный ответ ПЦР.

При получении положительного результата лабораторной диагностики следует немедленно обратиться к инфекционисту, поскольку успех в лечении напрямую зависит от стадии, на которой был поставлен диагноз гепатита С и начата терапия. Кроме того, необходимо помнить о риске заражения окружающих, поэтому прием противовирусных препаратов важен не только для инфицированного, но и для его родственников.

источник