Метод анализа ифа на гепатит

Анализ на гепатит С необходимо сдавать всем пациентам с подозрением на подобное расстройство. Существует несколько разновидностей подобной диагностической меры. Они указывают, какой именно вирус, а точнее, его разновидность, стала возбудителем недуга.

Необходимость проведения лабораторных обследований заключается в том, что в некоторых случаях подобная болезнь может протекать без выражения каких-либо признаков. Кроме этого, стоит учесть, что вирусный гепатит не имеет специфической симптоматики, отчего его можно ошибочно принять за ряд других патологий ЖКТ. Из этого следует, что диагностика гепатита С основывается на данных лабораторного и инструментального обследования пациентов.

Для окончательного утверждения или отрицания инфицирования человека этим вирусом необходимо проведение следующих тестов:

общий анализ крови – показывающий нарушение функционирования поражённого органа;
биохимический анализ крови на АЛТ, АСТ и билирубин. Такое исследование даст возможность получить информацию о разрушении печёночных клеток;
иммуноферментный анализ – это наиболее эффективная процедура, указывающая на стадию протекания подобного поражения печени, тип вируса и его количественные значения;
ПЦР-диагностика – укажет на наличие вируса и его происхождение;
иммунохроматографический анализ – представляет собой экспресс-тест, который позволяет в короткие сроки установить наличие у пациента антител.

Показаниями к осуществлению вышеописанных анализов на гепатит С выступают:

незащищенный половой акт с заражённым человеком;
появление одного или нескольких симптомов подобного недуга. К основным из них стоит отнести желтуху, тяжесть, дискомфорт и боль в зоне правого подреберья, снижение аппетита, нарушение сна, частые приступы тошноты и рвоты;
переливание крови;
недавнее нанесение татуировок или пирсинга;
наркомания – инфицироваться можно через использование одного шприца для инъекционного введения наркотиков;
наличие у человека в близком окружении людей с подобным диагнозом – высока вероятность инфицирования при пользовании бытовыми предметами с переносчиком вируса.

Проводить расшифровку анализов должен только тот врач, который их назначил. Это обуславливается тем, что клиницист владеет необходимой информацией о состоянии больного.

Общий анализ крови при гепатите даёт возможность получить клиницисту полную информацию об общем состоянии и функционировании внутренних органов пациента. Изменения в таких показателях не будут специфическими, но при различном протекании вирусного гепатита они будут иметь особенные изменения. Для гепатита С характерны такие отклонения:

снижение содержания лейкоцитов и уровня гемоглобина;
повышение лимфоцитов среди всего количества лейкоцитов;
нарушение процесса свёртываемости крови;
уменьшение концентрации тромбоцитов;
возрастание СОЭ.

Биохимический анализ крови направлен на отражение функционирования печени. В анализе особо важными являются следующие показатели:

АЛТ и АСТ – они попадают в кровь в случаях уничтожения клеток печени. При скрытой форме протекания подобного заболевания такие показатели нередко выступают единственными признаками протекания в организме патологического процесса. Нормой для представительниц женского пола является 31 МЕ/л, а у мужчин – 37. При наличии гепатита подобные показатели будут повышены;
билирубин – указывает на тяжесть проявление такого симптома, как желтуха. Лёгкой форме будут соответствовать значения до 85 мкмоль/л, а на тяжёлую укажут показатели свыше 170 мкмоль/л для представителей обоих полов.
активность других ферментов печени.

С помощью анализа ПЦР на гепатит С клиницисты смогут выявить генетический материал возбудителя недуга и его количество. Преимуществом такой методики является возможность определения вируса при его минимальном количестве.

Такое исследование входит в список тех анализов, которые нужно сдать абсолютно всем пациентам, обратившимся за консультацией по поводу возможного наличия вирусного поражения печени.

Анализ может определить наличие инфицирования уже через пять дней со времени предполагаемого заражения. Положительный результат укажет на протекание патологии в организме, однако такой исход — ещё не повод для отчаяния и паники. Это обуславливается несколькими причинами:

анализ крови иногда может дать ложноположительный анализ на гепатит С. Такой итог может говорить о развитии аутоиммунной патологии, формировании злокачественных или доброкачественных образований, широком спектре других расстройств вирусной этиологии. Помимо этого, он нередко является следствием индивидуальных особенностей иммунной системы;
подобный результат, помимо всего прочего, указывает и на наличие инфекции в прошлом;
данное заболевание является излечимым – оно хорошо поддаётся консервативной терапии.

Полимеразная цепная реакция существует нескольких разновидностей:

качественный и количественный анализы на гепатит С;
генотипирование.

Анализ на гепатит С ПЦР качественный – позволяет понять, присутствует ли вирус в крови или нет. Стандартной чувствительностью такого теста будут показатели от 10 до 500 МЕ/мл. Его исходами могут быть два результата:

присутствует – говорит об активном размножении вируса;
отсутствует – количество возбудителя в крови человека находится ниже уровня восприимчивости такого лабораторного исследования.

ПЦР количественный – это значение вирусной нагрузки, отображающее содержание РНК вируса один кубический сантиметр крови. Такая методика не только является частью диагностических мероприятий, но также даёт возможность контролировать эффективность противовирусной терапии. Таким образом, при помощи такого теста уточняется несколько важных факторов:

инфекционность – это возможность передачи возбудителя от одного человека к другому. Чем выше количество РНК гепатита, тем больше шансы заразить здорового человека, в частности, во время полового контакта, а также при пользовании одной бритвой или маникюрными принадлежностями;
выбор тактики терапии;
продолжительность приёма противовирусных препаратов и прогноз.

Количественный ПЦР-анализ на гепатит зависит от разновидности лабораторного теста и границ его восприимчивости. Нижним значением является не более 600.000 МЕ/мл, средние показатели находятся в пределах от 600.000 до 700.000 МЕ/мл. Результаты от 800.000 МЕ/мл и более уже считаются высокой степенью содержания РНК вируса.

Генотипирование позволяет выявить, каким именно из одиннадцати генотипов возбудителя заразился человек.

После расшифровки анализов клиницист может назначить индивидуальную схему медикаментозной терапии.

ИФА – иммуноферментный тест, являющийся наиболее распространённым и наиболее точным тестом, который позволяет определить наличие или отсутствие антител к возбудителю гепатита.

ИХА – иммунохроматографическое исследование, представляющее собой экспресс-тест для выявления антител. Он осуществляется при помощи специальных полосок и кассет. Несмотря на то что такая методика является довольно новой и только в начале пути своего совершенствования, выделяют один её недостаток, а именно низкую точность. Индикаторные полоски далеко не во всех случаях способны показать итог теста с точностью до сотых.

В независимости от того, какие анализы нужно сдать, они требуют тщательной подготовки пациента. Для получения достоверных результатов анализов на гепатит С, пациенту рекомендуется:

сдавать анализы в первой половине дня, обязательно на голодный желудок;
непосредственно перед лабораторной диагностикой запрещается пить кофе, чаи, соки или другие напитки. Можно принимать внутрь только очищенную воду без газа;
за двое суток до осуществления исследований стоит отказаться от употребления жирных и острых блюд, а также от распития спиртного;
минимум за два часа до какого-либо анализа нужно ограничиться от выкуривания сигарет.

Основу лабораторной диагностики составляет ПЦР, во время расшифровки которого, учитываются:

положительный или отрицательный результат качественного анализа;
количество копий вируса, которое при подобном недуге всегда будет показывать выше 800.000 МЕ/мл.

Во время расшифровки особое внимание обращают на значение второго пункта.

В некоторых случаях наблюдается такая ситуация, когда антитела к гепатиту С положительны, а ПЦР — отрицательный. Это свидетельствует о ранее перенесённом заболевании данной этиологии.

Для прохождения лабораторной диагностики необходимо обратиться к инфекционисту. Только этот специалист сможет провести грамотное первичное обследование и расшифровку результатов анализов.

источник

Для диагностики вирусного гепатита в рамках медицинского протокола используется несколько лабораторных и инструментальных методик. Одной из самых достоверных является иммуноферментный анализ (ИФА). Метод помогает определить наличие антигена к тому или иному виду вируса. Для этого выполняется стандартная процедура забора крови из вены пациента. Результаты становятся известны уже через неделю после взятия анализа.

Термин расшифровывается как «иммуноферментный анализ». Он подразумевает определение в крови комплексов антиген-антитело для уточнения этиологии возбудителя. Если это вирус, определяются его виды и подвиды. Антигены — это частички на поверхности клеток возбудителей, связывающиеся с определенными участками антител. Последние являются иммунными молекулами, вырабатываемыми организмом для собственной защиты. Антигены и антитела неповторимы, поэтому определение их структуры с помощью иммуноферментного анализа свидетельствует о наличии конкретной патологии в организме больного. В качестве меток используются ферменты, которые и дали название методике.

ИФА — это высокоточная методика, ее чувствительность достигает 90%. Она помогает проводить скрининг парентеральных гепатитов. Эти заболевания передаются путем инъекции, или через переливание крови. ИФА помогает выявить пациентов, у которых отсутствуют симптомы. Таковыми является большинство хронических больных. Они имеют риск развития цирроза. Его обнаружение на поздних стадиях — это плохой прогноз. Поэтому иммуноферментная методика позволяет своевременно определить заболевание и сэкономить деньги на лечение. ИФА верифицирует этиологию возбудителя и определяет прогноз недуга. Диагностические наборы для нее стоят недорого и длительно хранятся. За быстроту, удобство и точность данных ИФА называют экспресс-методом.

ИФА необходим, когда требуется уточнить этиологию вирусного возбудителя для определения схемы лечения. У пациента идентифицируют наличие хронического гепатита B и C, или перенесенного заболевания вирусом подтипа A. Методику нужно применять у членов семьи больного, которые могут заразиться. В инфекционном стационаре анализ выполняется всем пациентам, у которых присутствуют такие симптомы:

Желтуха. Желтушность кожных покровов не сопровождается болями в правом подреберье и изменением цвета стула и мочи.
Повышение температуры тела. Она вырастает до субфебрильных цифр, иногда наступает лихорадка.
Диспепсия. Присутствуют тошнота и рвота, которая не приносит облегчение.
Немотивированная слабость.
Мелкоточечные высыпания на теле. Это мелкие кровоизлияния вследствие печеночной недостаточности.
Тяжесть в правом подреберье. Симптом возникает вследствие растяжения увеличенной печенью собственной капсулы, содержащей множество нервных окончаний.

Основным показанием к выполнению анализа является наличие определенных анамнестических данных. Если пациент ранее страдал инъекционной наркоманией, ему переливали кровь или пересаживали органы — это повод выполнить ИФА.

Чтобы результаты ИФА были достоверными, требуется предварительно подготовиться. За день до сдачи крови пациенту рекомендуется перестать употреблять жирную и жареную пищу, продукты с высокой концентрацией красителей, стабилизаторов, консервантов, усилителей вкуса и аромата. Нежелательно непосредственно перед выполнением метода заниматься тяжелым физическим трудом и спортивными упражнениями. В день сдачи крови необходимо воздержаться от завтрака. Забор материала натощак позволит получить точный результат. Необходимо исключить из употребления некоторые лекарственные средства. Но самостоятельно это делать не рекомендуется, поскольку есть вероятность вреда для здоровья. Нужна предварительная консультация лечащего доктора.

Метод ИФА состоит из двух этапов. На первом выполняется забор материала, на втором последний исследуется в лаборатории. Начальный этап проходит стандартно. Ему предшествует подготовка пациента к сдаче крови. В стерильном помещении проводится забор биоматериала, отправляемый в герметических контейнерах на лабораторное исследование. Дальнейшее определение комплексов антиген-антитело происходит с помощью ферментов и тест-систем на специализированном оборудовании. Результат становится известен в течение недели и отправляется пациенту на электронную почту.

Интерпретация данных подразделяется на качественную и количественную. При качественном определении результаты анализа считаются позитивными, если обнаружены суммарные антитела к определенному подтипу вируса. Выявление anti-НАV IgМ свидетельствует про острый, а anti-НАV IgG — хронический гепатит А. Позитивный маркер НВsAg — признак инфицирования вирусом подтипа В. Он наблюдается в острой и хронической фазах заболевания. Если же выявлен HBCAg, у человека присутствует хронический гепатит С. А anti-НDV сигнализирует про инфицирование подвидом D. Пациенты, у которых определен положительный маркер к вирусу, нуждаются в дальнейшем обследовании для более точной верификации диагноза.

источник

Чтобы оценить работоспособность защитных функций организма и выявить точные диагностические данные, проводят иммуноферментный анализ. В случаях инфицирования человека обнаруживаются кардинальные изменения в крови и получают результат ИФА на гепатит С положительный.

Метод изучения биологического материала ИФА относят к определению иммунохимических реакций, открывающих взаимосвязи антигенов и антител. В ходе проведения анализа к молекуле антитела химическим способом подсаживают антиген-экзим, служащий маркером, который указывает на компоненты процесса.

К компонентам иммуноферментного анализа относят:

антитела:
антитела промаркированные;
antibodies-attacking-a-virus1-440×264 антиген;
субстрат фермента;
краситель-индикатор.

Процесс выработки антител и иммуноглобулинов запускается в момент проникания в организм пациента посторонних генов или болезнетворных бактерий.

Задачей иммуноглобулинов считают нейтрализацию антигенов, происходящую при их взаимодействии. В ходе взаимодействия иммуноглобулины формируют комплект антиген-антител, которые имеют количественные и качественные характеристики. Эти значения и изучаются в процессе исследования анализа.

Для регистрации результата в ходе тестирования иммуноферментного анализа у человека забирают биологический материал. Обычно для этих целей используют венозную кровь, но в определенных ситуациях необходим анализ спинномозговой жидкости, стекловидного тела или околоплодных вод беременной женщины. Главной особенностью этого теста является его высокая достоверность, которая составляет порядка 80%.

К плюсам иммуноферментного анализа также относят:

метод ИФА превосходит прочие тесты по точности определения важных показателей в десятки раз;
для выполнения ИФА не требуется много времени, результаты, подтверждающие или опровергающие наличие вируса в организме, получают довольно быстро;
стоимость проведения ИФА доступна большинству категорий населения, в отличие от прочих тестов;
проведение ИФА дает возможность обнаружить проблему при начальных проявлениях, что значительно облегчает последующий процесс лечения человека;
все стадии проведения этого анализа автоматизированы;
высокая степень унификации теста.

К негативным проявлениям данного анализа относят возможность ложноположительных и отрицательных результатов. Сомнительные итоги могут регистрироваться при различных патологических состояниях, беременности и при употреблении медикаментозных средств, которые влияют на выработку организмом антител.

С помощью проведения иммуноферментного анализа подсчитывается количество антител к вирусу гепатита С. В ходе исследования определяется число этих образований по IgM типу, который соответствует острому течению недуга и IgG, обнаруживаемому при хронической форме.

Антитела IgM регистрируют в течение двух недель после инфицирования организма пациента вирусом гриппа С в острой форме, срок существования этих образований от 3 до 5 месяцев.

Антитела IgG вырабатываются спустя несколько месяцев после поражения организма, но их существование подтверждается в течение десяти лет, даже при условии полного выздоровления пациента.

Отрицательный результат тестирования дает возможность утверждать, что антитела обоих типов отсутствуют в организме и на данный момент гепатит С не обнаружен. Следует учитывать, что если человек заразился в течение последних двух недель, определение патологии невозможно.

Положительный результат теста показывает наличие того или иного типа антител в организме пациента. Данный показатель характеризует инфицирование гепатитом С в острой или хронической форме. Следует учитывать, что фиксация этих образований не дает возможность однозначно указывать на заражение человека, вполне допустимо, что он является только носителем. Бывают случаи, когда при расшифровке данных фиксируется ложноположительный результат.

Это происходит в результате фиксирования лабораторными приборами антител, которые производятся защитной системой человека в ответ на следующие патологии:

аутоиммунное воспаление;
проникновение в организм пациента прочих инфекций;
при беременности.

Статистика проведения иммуноферментного исследования показывает, что ложноположительный вывод регистрируется в 15% всех результатов, подтверждающих наличие вируса. Для беременных женщин данный показатель еще выше.

Недостоверный вывод тестирования на гепатит С выявляется при сбоях функционирования внутренних органов и технических сбоев, то есть халатного отношения медицинского персонала к своим обязанностям. Ошибки обнаруживаются не более чем в 15% случаев, но их можно избежать, выполняя следующие правила:

Перед сдачей анализа нельзя курить

для сдачи анализа необходимо выбирать только проверенные, сертифицированные лаборатории с обученным медицинским персоналом;
накануне проведения анализов следует прекратить употребление любых медикаментозных препаратов, если прием лекарства обусловлен состоянием пациента, он должен предупредить персонал лаборатории об этом факте;
процедура обычно проводится утром натощак, но перед этим пациенту не следует проявлять излишнюю физическую активность и курить;
непосредственно перед проведением анализа рекомендуется определить температуру тела, она не должна превышать норму.

При сомнении в правильности выводов тестирования, назначается повторный анализ. В идеале требуется проведение трех исследований биологического материала на гепатит С.

Если первый тест показал наличие антител в крови пациента, а последующие два не выявили эти образования, можно утверждать, что инфицирования организма вирусом гепатита С нет. Существует ряд заболеваний, которые влияют на результат тестирования крови на наличие вируса гепатита С.

Некоторые патологии сопровождаются выработкой антител, и в этом случае подтверждение наличия вируса гепатита С в организме пациента производится с помощью других методов исследования, так как многократно повторяющиеся ошибки при ИФА анализе не дают гарантии правильного диагноза.

Комплексное изучение с применением исследования биологического материала человека в лабораторных условиях и с использованием инструментальных методов позволит выявить истинную причину недомогания, и исключить гепатит С.

Чаще всего причиной ложноположительного результата анализа являются следующие патологии:

инфекционные заболевания острого или хронического типа;
рак или доброкачественные новообразования во внутренних органах;
заболевания аутоиммунного типа, при течении которых образуются антитела к собственным клеткам организма пациента;
туберкулез;
малярия;
склеродермия;
герпес;
рассеянный склероз;
артрит.

Все перечисленные заболевания являются причиной возникновения сбоев в иммунной системе человека, в результате чего иммуноглобулины начинают вырабатываться с превышением нормы, что и становится помехой для постановки точного диагноза и подтверждения наличия вируса гепатита С в организме пациента.

После соприкосновения с источником инфекции организм человека может успешно подавить воспаление, но антитела, при проведении ИФА, все еще обнаруживались в крови, что стало причиной ложноположительного результата теста.

Довольно часто такой результат тестирования регистрируется у беременных женщин, поэтому без повторного анализа, подтверждение заболевания у такого пациента, не проводится.

Причиной отклонений от нормы становится изменения в организме женщины, которая ждет ребенка. В этот период у нее происходит перестройка внутренних органов, что выражается в следующих процессах:

изменяется гормональный фон;
в крови формируются специфические белки, вследствие чего меняется ее состав;
уровень цитокинов увеличивается.

Помимо перечисленных факторов, влияющих на итоги иммуноферментного анализа, нужно отметить ошибки медицинского персонала, приводящие к обнаружению ложноположительных выводов тестирования:

недостаточная квалификация персонала, проводящего забор биологического материала;
сбои в функционировании лабораторного оборудования;
подмена проб по халатности;
ненадлежащее хранение биологического материала (нарушение температурного режима).

При проведении иммуноферментного анализа следует учитывать, что пациент мог недавно получить прививку против гриппа, гепатита или столбняка. Этот факт нужно обязательно довести до сведения лечащего врача или медицинского персонала в лаборатории, чтобы была назначена другая дата исследования.

Регистрация антител в биологическом материале пациента, указывающая на присутствие вируса гепатита С в организме, не всегда является окончательным диагнозом заболевания. Ложноположительные результаты иммуноферментного анализа нередки, и повторные тесты часто опровергают первоначальные выводы.

При положительных анализах нужно обратиться к гепатологу

Нужно понимать, что ИФА тест дает возможность выявить количественные и качественные изменения в биологическом материале человека и определить характер течения заболевания. Делать окончательное заключение об инфицировании гепатитом С можно только после комплексного изучения состояния пациента с применением других лабораторных и инструментальных исследований.

Если положительный результат выявлен надлежащим образом, человеку следует отправиться к специалистам: инфекционисту и гепатологу. Только профильный врач сможет определить, какие тесты необходимо пройти дополнительно до назначения курса терапии

По данным медицинской статистики, в мире инфицировано гепатитом С почти 4% населения, но этот показатель явно занижен, так как многие носители недуга не подозревают о своей проблеме. Поэтому проведение ИФА теста в качестве профилактической меры поможет выявить заболевание на начальной стадии и быстро справиться с болезнью.

источник

Своевременная диагностика гепатита С минимизирует риски развития тяжелых последствий болезни. Вирус, размножаясь в организме, приводит к уничтожению гепатоцитов и развитию стойкого аутоиммунного воспаления. Основные методы диагностики помогают выявить вирус на ранних стадиях инфицирования. Если заболевание обнаружено, необходимо более полное обследование. Для этого проводятся инструментальные виды проверки течения болезни.

Если болезнь протекает в безжелтушной смазанной форме, то практически невозможно понять, что у тебя гепатит С. В 80% случаев заболевание остается незамеченным, а возбудитель вируса постепенно разрушает печеночные клетки и весь организм.

Для верификации диагноза и осложнений заболевания у взрослых и у детей обязательно используют аппаратные и лабораторные методы диагностики. Аппаратные процедуры позволяют визуализировать страдающий орган, определить степень разрушения гепатоцитов, отсутствие или наличие тяжелых осложнений (опухоли, фиброза, жирового гепатоза и т. д). Лабораторные анализы – часть дифференциальной диагностики. По анализу крови можно выявить самого возбудителя или наличие антител к нему.

Как определить гепатит С в домашних условиях? Для этого существуют новейшие экспресс-тесты (подробнее о них можно почитать в данной статье). Они помогают с высокой точностью обнаружить заболевание после самостоятельно проведенного анализа дома. Для проверки необходима капля крови или слюны. Однако окончательный диагноз ставится только после проведения лабораторных исследований в медицинском учреждении.

В настоящее время лабораторная диагностика HCV позволяет не только с точностью определить наличие вируса в организме человека, но и установить, сколько приблизительно времени прошло с момента заражения, насколько активно происходит развитие заболевания.

Первичные диагностические исследования проходят в несколько этапов и позволяют получить ответы на ряд вопросов, необходимых для определения дальнейшей тактики терапии:

насколько эффективно иммунная система отреагировала на контакт с вирусом;
как давно HCV находится в организме человека;
какова фаза инфекции (острая или хроническая в стадии обострения);
насколько тяжело протекает заболевание (чем выше вирусная нагрузка, тем активнее патологический процесс);
генотип и подтип вируса (имеет решающее значение для назначения конкретных препаратов).

Но перечисленные исследования целесообразно проводить только после окончательного подтверждения диагноза. Для этого сдают несколько лабораторных анализов.

После попадания в организм начинается активная репликация вируса. Однако до достижения определенного уровня, HCV в крови не обнаруживается. Самые современные высокочувствительные тест-системы ПЦР способны выявить болезнь спустя 3–4 недели. Но при подозрении на возможность заражения и отрицательном результате исследования рекомендуют провести повторный тест.

Анализ на гепатит Ц путем проведения иммуноферментного исследования (ИФА) информативен на сроке 10–16 недель после заражения. За это время антитела к вирусу вырабатываются в достаточном для определения количестве.

Но при этом необходимо учитывать возможность как ложноотрицательных, так и ложноположительных результатов ИФА. Такая вероятность существует при:

беременности (вне зависимости от срока);
иммунодефицитных состояниях;
аутоиммунных заболеваниях;
онкологии, затрагивающей систему кроветворения.

Кроме того нельзя исключать и человеческий фактор, то есть лабораторную ошибку, допущенную при выполнении анализа. Поэтому при положительном результате доктора рекомендуют сделать исследование повторно. Аналогичной тактики придерживаются и в том случае, если специфические симптомы прогрессируют на фоне отрицательных ИФА и/или ПЦР.

Диагностическое обследование пациента с возможной HCV-инфекцией регламентировано международными медицинскими протоколами.

В соответствии с рекомендациями ВОЗ, анализы проводят в таком порядке:

печеночные пробы (на начальной стадии заболевания или латентном течении гепатита С показатели могут укладываться в физиологические границы нормы);
ИФА (на первом этапе рекомендуют сделать суммарный ИФА, определяющий совокупность иммуноглобулинов типа G и M, при положительном результате выполняют отдельно анализы на IgG и IgM к HCV);
полимеразная цепная реакция (ПЦР), делится на качественный (определяет только наличие патогенной РНК в крови), количественный (оценивает уровень РНК) и генотипирование (выявляет точную разновидность HCV – генотип и подтип).

В дополнение врач назначает и стандартный перечень анализов. Он включает исследование на ВИЧ и другие виды вирусного и инфекционного гепатита, ОАК и ОАМ, оценку липидного и белкового профиля крови, иммунограмму и др. При подозрении на наличие фиброза, цирроза или гепатоцеллюлярной карциномы показана биопсия печени.

Исследования, проводимые методом ПЦР, считаются наиболее достоверными способами диагностики гепатита C. Проведение полимеразной цепной реакции позволяет выявить специфические вирусные РНК в крови человека, оценить их количество и структуру нуклеотидной цепи.

ПЦР диагностика может проводиться несколькими методами (каждый отличается по технологии проведения и стоимости для пациента):

Разновидность ПЦР	Описание анализа
Качественный	Направлен только на выявление РНК вируса гепатита C
Количественный	Проводится для оценки вирусной нагрузки (расшифровку проводит только врач)
Генотипирование	Необходимо для определения разновидности инфекции

ПЦР рекомендуют проводить после исследования анти HCV методом ИФА, который позволяет определить специфические антитела к гепатиту С. Наличие IgM свидетельствует об остром течении инфекции, IgG – о хроническом или латентном. По титру антител можно предположить активность патологического процесса, однако точную вирусную нагрузку определяют только методом ПЦР.

Качественный анализ является своего рода проверкой, есть ли РНК HCV в крови человека. В отличие от результатов ИФА, которые зависят от определенных факторов (например, наличия беременности или состояния иммунной системы) данные ПЦР однозначны. Но при помощи этого исследования можно выявить, есть ли РНК гепатита С или нет.

Для полной клинической картины необходимы другие тесты. Поэтому в бланке лаборатории указано только наименование анализа и полученный результат. Средняя стоимость качественного ПЦР в частных клинических кабинетах составляет порядка 1000 рублей.

Проводится для определения уровня вирусной нагрузки, то есть количество копий вируса гепатита С в определенном объеме плазмы крови. Единицы измерения МЕ/мл. Высокие показатели указывают на острое течение заболевания и часто свидетельствуют о риске серьезных поражений печени.

Данные для расшифровки результатов анализа приведены в таблице, но интерпретировать исследования и ставить окончательный диагноз должен только инфекционист-гепатолог.

Полученный результат	Расшифровка
Отрицательный	Человек не заражен HCV или количество РНК в крови слишком низко для определения при помощи лабораторных тест-систем (возможно в течение 1–4 недель после инфицирования)
1,5 МЕ/мл	Низкая вирусная нагрузка, прогноз благоприятен
4ˑ106 –2ˑ108МЕ/мл	Средняя вирусная нагрузка, служит показанием к немедленному началу терапии
Выше 2ˑ108МЕ/мл	Высокая вирусная нагрузка, прогноз неблагоприятен. Необходима противовирусная терапия после всесторонней оценки состояния печени

В лабораториях могут отличаться марки тест-систем и, соответственно, используемые единицы измерения и нормы. Поэтому при расшифровке рекомендуют ориентироваться на референсные значения.

Стоимость исследования в платной лаборатории достигает 2500 рублей.

Генотипирование один из основных анализов на этапе подготовки пациента к началу курса противовирусной терапии. Исследование основано на отличиях в структуре известных 6 разновидностей (и около 100 подтипов) HCV. В бланке с результатами указывают выявленный генотип и субтип, например, 1b или 3a и т.д. Полученные данные позволяют врачу определить перечень назначаемых препаратов и продолжительность лечения, объяснить пациенту возможные исходы терапии.

Цена проведения генотипирования в частной клинике колеблется в пределах 1000 рублей.

Экспресс-тест на вирусный гепатит С рассчитан на выявление антител, которые вырабатывает иммунная система после попадания вируса в организм.

Тест-полоски бывают:

Для диагностики по крови. В коробке содержится набор всех необходимых инструментов, сразу после вскрытия система готова к работе. Прилагается инструкция, описывающая пошаговый алгоритм действия, начиная с забора крови, заканчивая оценкой полученного результата.
Диагностика по слюне. Специальным одноразовым аппаратом собирают небольшое количество слюны или десневой жидкости. Результат оценивают через 20 минут.

Cito-тесты можно купить в аптеке без рецепта. Их достоверность выше 96%. Все зависит от правильности забора биоматериала, соблюдения правил проведения тестирования, фирмы-изготовителя, способа хранения и т. д. Цены на изделия разнятся от 300 до 1600 рублей.

Для выработки антител в организме требуется как минимум 2–3 недели. В некоторых случаях это процесс удлиняется до полугода.

Общий анализ крови сдают в любое время, по истечении часа от приема пищи. Анализ крови на биохимические показатели строго натощак утром, с 9 до 11 часов. Причина в биологическом ритме организма. Ночной голод должен быть не менее 10 часов.

При использовании тест-полосок дома, важно чтобы гематокрит (текучесть крови) был в пределах нормы. Густая кровь искажает полученные результаты.

Вирусологический анализ на гепатит (определение антигенов и антител) делают из венозной крови, она обладает большей диагностической ценностью. Между забором биоматериала и последним приемом пищи должно пройти 4–6 часов. Накануне лучше отказаться от слишком жирной пищи, алкоголя, переедания.

Если недавно проходили Rg-графию, ректальный осмотр прямой кишки, физиопроцедуры, присутствовал прием сильнодействующих препаратов и антибиотиков, то необходимо сказать об этом своему доктору или лаборанту.

Покажет ли общий анализ крови гепатит С? Нет, в нем отсутствуют показатели для дифференциальной диагностики вируса. Но опытного врача-гепатолога должен насторожить лейкоцитоз и резкое увеличение показателей СОЭ (скорость оседания эритроцитов). Развернутый анализ на биохимию, выявит характерные для болезни изменения в работе печение, появление грозных осложнений хронического и острого гепатита С.

Приведем типичные лабораторные тесты и их диагностическую ценность:

>нормы при циррозах и вирусных гепатитах

Аппаратные исследования имеют высокую диагностическую ценность, особенно для выявления хронического гепатита С. Это важно для скорейшего начала терапии и в борьбе с недопущением печеночной недостаточности.

Исследование предусматривает забор биоптата для дальнейшего гистологического анализа полученной печеночной ткани. Биопсия печени – один из самых точных анализов дифференциальной диагностики хронического вирусного гепатита С, позволяющих проверить наличие вируса в тканях, возможные злокачественные процессы, степень фиброза и т. д.

Чаще всего прибегают к трем видам биопсии:

Чрескожная. Прокалывают переднюю брюшную полость, далее под контролем УЗИ или вслепую достигают печени, где и производят забор биоптата. Манипуляция не требует общего обезболивания, малотравматичная с минимальным периодом нахождения в стационаре.
Лапароскопическая. Выполняют под общим наркозом, посредством лапароскопа – аппарата с видеотехникой. Операция инвазивная, но доктор будет видеть состояние органа на экране, а биоптат возьмут из самых пораженных участков печеночной ткани.
Трансъюгулярная. Подходит для пациентов с повышенным риском кровотечения. Прокол делают в области крупных кровеносных сосудов, исследование проводят под ЭКГ-контролем.

Противопоказания:

тяжелые нарушения в системе свертывания крови;
наличие единичных или множественных эхинококковых кист;
сосудистые опухоли печеночной ткани;
присутствие гноя или гнойное расплавление желчевыводящих путей;
эмпиема плевры справа, поддиафрагмальный абсцесс;
синдром хилаидити;
запущенная форма эмфиземы легких;
желтуха, как результат формирования участка обструкции в области дренирования желчного протока;
нежелание пациента давать письменное разрешение на проведение процедуры.

Большинство осложнений возникают в первые 24 часа после биопсии. Поэтому пациента оставляют в клинике до следующего утра. Ведется мониторинг артериального давления и частоты сердечных сокращений.

Это поможет своевременно диагностировать кровотечение из пункционного канала. Рекомендуют постельный режим 6–8 часов. О подготовке к биопсии подробно расскажет доктор, все его рекомендации следует строго выполнять.

УЗИ – распространенная доступная по цене аппаратная диагностическая процедура для исследования органов брюшной полости. Ультразвук, дополненный портальной системой Doppler, и с контрастным усилением являются основными методами оценки состояния паренхимы печени, портальной венозной гипертензии и других изменений, характерных для течения гепатита С.

Подготовка к УЗИ несложная, но требующая тщательного выполнения всех рекомендаций. На исследование приходят строго натощак, с периодом голода не меньше 10 часов. За несколько дней отказываются от всех продуктов, вызывающих метеоризм.

Если кишечник остается вздутым, показано ветрогонное средство. Накануне разрешено сделать высокую очистительную клизму.

Фибросканирование – неинвазивная диагностическая процедура для обнаружения участков ремоделирования соединительной ткани печени. Измерение проводится с помощью специального датчика, размещенного на уровне печени между двумя ребрами. Во время измерения пациент ощущает только легкие, безвредные, безболезненные вибрации на коже.

Под аппаратом больной находится всего несколько минут, манипуляцию повторяют при первой необходимости. Приблизительно за 2–3 часа до осмотра пациенту запрещают принимать пищу. Эластометрия противопоказана при тяжелых формах ожирения, асцита и дыхательной недостаточности.

Если УЗИ дало неопределенный результат, то назначают КТ (компьютерную томографию) или МРТ (магнитно-резонансная томография) печени.

Эти исследования имеют общие предосторожности и противопоказания:

масса тела >150 кг;
металлические украшения, молнии, пуговицы снимают;
обязательно скажите своему врачу о случаях аллергии, длительно применяемых медикаментах, фобиях закрытого пространства;
психические расстройства, неадекватное поведение пациента;
некоторые заболевания, такие как миелома и почечная недостаточность, требуют коррекции плана Rg-облучения;
ношение брекет-систем.

КТ не назначают при беременности, если в кишечнике имеется бариевая смесь или последний прием пищи был раньше, чем за 4 часа до процедуры. МРТ не делают, если на место исследования наложен гипс, имеется металлический протез или водитель сердечного ритма.

Компьютерную томографию делают, используя Rg-лучи, МРТ – магнитные волны. Полученные послойные снимки помогают визуализировать структурные изменение (фиброз, цирроз, жировой гепатоз) и размер органа. Если используют контрастное вещество, то на снимках становятся видны очаговые изменения, диаметром >1 см.

Ранняя диагностика болезни особенно полезна при беременности. Гепатит С способен серьезно осложнять течение беременности, увеличивает риск развития внутриутробных патологий, может привести к нарушениям функций печени. Золотым стандартом является обследование за полгода до планирования малыша. Если присутствие инфекции будет обнаружено, то нужно пройти курс терапии до беременности.

Если беременная не была обследована до зачатия, то от специфических анализов нельзя отказываться ни в коем случае. Первый раз исследование на гепатит С проводят в женской консультации при постановке на учет, второй раз – во втором триместре, третий – в третьем. При наличии жалоб, позволяющих заподозрить заболевание, назначают внеплановое лабораторное тестирование.

Как показывает практика, у врачей в арсенале есть все необходимые диагностические возможности для своевременного обнаружения инфекции. Потому, как только человек заподозрит или поймет, что он инфицирован, следует незамедлительно отправляться на прием к инфекционисту, терапевту или гепатологу.

Только своевременное начало правильно подобранной схемы терапии приведет к полному излечению или длительной ремиссии.

источник

Поверхностный антиген гепатита В в сыворотке крови в норме отсутствует.
Обнаружение поверхностного антигена (HBsAg) гепатита В в сыворотке подтверждает острое или хроническое инфицирование вирусом гепатита В.

При остром заболевании HBsAg выявляется в сыворотке крови в последние 1-2 недели инкубационного периода и первые 2-3 недели клинического периода. Циркуляция HBsAg в крови может ограничиваться несколькими днями, поэтому следует стремиться к раннему первичному обследованию больных. Метод ИФА позволяет выявить HBsAg более чем у 90% больных. Почти у 5% больных самые чувствительные методы исследования не обнаруживают HBsAg, в таких случаях этиология вирусного гепатита В подтверждается наличием анти-HBсAg JgM или ПЦР.

Концентрация HBsAg в сыворотке крови при всех формах тяжести гепатита В в разгар заболевания имеет значительный диапазон колебаний, вместе с тем имеется определенная закономерность: в остром периоде существует обратная связь между концентрацией HBsAg в сыворотке и тяжестью болезни.

Высокая концентрация HBsAg чаще наблюдается при легких и среднетяжелых формах болезни. При тяжелых и злокачественных формах концентрация HBsAg в крови чаще низкая, причем у 20% больных с тяжелой формой и у 30% со злокачественной антиген в крови может вообще не обнаруживаться. Появление на этом фоне у больных антител к HBsAg расценивается как неблагоприятный диагностический признак; он определяется при злокачественных формах гепатита В.

При остром течении гепатита В концентрация HBsAg в крови постепенно снижается вплоть до полного исчезновения этого антигена. HBsAg исчезает у большинства больных в течение 3 месяцев от начала острой инфекции.

Снижение концентрации HBsAg более чем на 50% к концу 3-й недели острого периода, как правило, свидетельствует о близком завершении инфекционного процесса. Обычно у больных с высокой концентрацией HBsAg в разгар болезни он обнаруживается в крови в течение нескольких месяцев.
У больных с низкой концентрацией HBsAg исчезает значительно раньше (иногда через несколько дней после начала заболевания). В целом срок обнаружения HBsAg колеблется от нескольких дней до 4-5 мес. Максимальный срок обнаружения HBsAg при гладком течении острого гепатита В не превышает 6 месяцев от начала заболевания.

HBsAg может быть обнаружен у практически здоровых людей, как правило, при профилактических или случайных исследованиях. В таких случаях исследуют другие маркеры вирусного гепатита В – анти HBсAg JgM, анти- HBсAg JgG, анти HBеAg и изучают функцию печени.

При отрицательных результатах необходимы повторные исследования на HBsAg.
Если повторные исследования крови в течение более 3 месяцев выявляют HBsAg, такого пациента относят к хроническим больным вирусным гепатитом В.
Наличие HBsAg – довольно распространенное явление. В мире насчитывается более 300 млн. носителей, а у нас в стране – около 10 млн. носителей.
Прекращение циркуляции HBsAg с последующей сероконверсией (образование анти-HBs) всегда свидетельствует о выздоровлении — санации организма.

Исследование крови на наличие HBsAg применяется в следующих целях:

для диагностики острого гепатита В:

инкубационный период;
острый период заболевания;
ранняя стадия реконвалесценции;

для диагностики хронического вирусного гепатита В;

при заболеваниях:

персистирующем хроническом гепатите;
циррозе печени;

для скрининга и выявления больных в группах риска:

больные с частыми гемотрансфузиями;

больные с хронической почечной недостаточностью;

больные с множественным гемодиализом;

больные с иммунодефицитными состояниями, в том числе СПИДом.

Результаты исследования выражаются качественно – положительный или отрицательный. Отрицательный результат исследования указывает на отсутствие HBsAg в сыворотке крови. Положительный результат – выявление HBsAg свидетельствует об инкубационном или остром периоде острого вирусного гепатита В, а также при хроническом вирусном гепатите В.

В норме анти-HBcAg JgG в сыворотке отсутствует.
У больных анти-HBcAg JgG появляются в острый период вирусного гепатита В и сохраняются на протяжении всей жизни. Анти-HBcAg JgG – ведущий маркер перенесенного ВГВ.

Исследование крови на наличие анти-HBcAg JgG применяются для диагностики:

хронического вирусного гепатита В при наличии HBs антигена в сыворотке крови;

перенесенного вирусного гепатита В.

Результат исследования выражается качественно – положительный или отрицательный. Отрицательный результат исследования указывает на отсутствие анти-HBcAg JgG в сыворотке крови. Положительный результат – выявление анти-HBcAg JgG свидетельствует об острой инфекции, реконвалесценции или ранее перенесенном вирусном гепатите В.

В норме HBeAg в сыворотке крови отсутствует.
HBeAg можно обнаружить в сыворотке крови большинства больных острым вирусным гепатитом В. Он обычно исчезает в крови раньше HBs-антигена. Высокий уровень HBeAg в первые недели заболевания или обнаружение его на протяжении более 8 недель дает основание заподозрить хроническую инфекцию.

Этот антиген часто обнаруживается при хроническом активном гепатите вирусной этиологии. Особый интерес к определению HBeAg связан с тем, что его обнаружение характеризует активную репликативную фазу инфекционного процесса . Установлено, что высокие концентрации HBeAg соответствуют высокой ДНК-полимеразной активности и характеризуют активную репликацию вируса.

Наличие HBeAg в крови свидетельствует о высокой ее инфекциозности, т.е. присутствии в организме обследуемого активной инфекции гепатита В, и обнаруживается только в случае присутствия в крови HBs-антигена. У больных хроническим активным гепатитом противовирусные препараты применяются только при обнаружении в крови HBeAg. HBeAg – антиген – маркер острой фазы и репликации вируса гепатита В.

Исследование крови на наличие HBe-антигена применяется для диагностики:

инкубационного периода вирусного гепатита В;

продромального периода вирусного гепатита В;

острого периода вирусного гепатита В;

хронического персистирующего вирусного гепатита В.

Результат исследования выражается качественно – положительный или отрицательный. Отрицательный результат исследования указывает на отсутствие HBeAg в сыворотке крови. Положительный результат – выявление HBeAg свидетельствует об инкубационном или остром периоде острого вирусного гепатита В или продолжающейся репликации вируса и инфекциозности больного.

Анти-HBeAg в сыворотке в норме отсутствует. Появление анти-НВeAg антител указывает обычно на интенсивное выведение из организма вируса гепатита В и незначительное инфицирование больного.

Эти антитела появляются в острый период и сохраняются до 5 лет после перенесенной инфекции. При хроническом персистирующем гепатите анти-НВeAg обнаруживаются в крови больного вместе с НВsAg. Сероконверсия, т.е. переход HBeAg в анти-НВeAg, при хроническом активном гепатите, чаще прогностически благоприятна, но такая же сероконверсия при выраженной цирротической трансформации печени прогноза не улучшает.

Исследование крови на наличие анти-НВeAg применяются в следующих случаях при диагностике вирусного гепатита В:

установление начальной стадии заболевания;

острый период инфекции;

ранняя стадия реконвалесценции;

реконвалесценция;

поздняя стадия реконвалесценции.

диагностика недавно перенесенного вирусного гепатита В;

диагностика хронического персистирующего вирусного гепатита В.

Результат исследования выражается качественно – положительный или отрицательный. Отрицательный результат исследования указывает на отсутствие антител к HBeAg в сыворотке крови. Положительный результат – выявление антител к HBeAg, которые могут свидетельствовать о начальной стадии острого вирусного гепатита В, остром периоде инфекции, ранней стадии реконвалесценции, реконвалесценции, перенесенном недавно вирусном гепатите В или персистирующем вирусном гепатите В.

Критериями наличия хронического гепатита В являются:

бнаружение или периодическое выявления ДНК ВГВ в крови;

постоянное или периодическое повышение активности АЛТ/АСТ в крови;\

морфологические признаки хронического гепатита при гистологическом исследовании биоптата печени.

Вирус гепатита В в крови в норме отсутствует.
Качественное определение вируса гепатита В методом ПЦР в крови позволяет подтвердить наличие вируса в организме больного и тем самым устанавливает этиологию заболевания.

Данное исследование дает полезную информацию для диагностики острого вирусного гепатита В в инкубационном и раннем периоде развития заболевания, когда основные серологические маркеры в крови у пациента могут отсутствовать. Вирусную ДНК в сыворотке крови обнаруживают у 50% больных при отсутствии HBeAg. Аналитическая чувствительность метода ПЦР составляет не менее 80 вирусных частиц в 5 мкл, прошедшей выявление ДНК пробы, специфичность – 98%.

Этот метод имеет важное значение для диагностики и мониторинга течения хронического ВГВ. Примерно 5-10% случаев цирроза и других хронических заболеваний печени обусловлены хроническим носительством вируса гепатита В. Маркерами активности таких заболеваний является наличие HBeAg и ДНК вируса гепатита В в крови.

Метод ПЦР позволяет определять в крови ДНК вируса гепатита В как качественно, так и количественно. Определяемым фрагментом в обоих случаях служит уникальная последовательность ДНК гена структурного белка вируса гепатита В.

Обнаружение ДНК вируса гепатита В в биоматериале с помощью ПЦР необходимо для:

разрешения сомнительных результатов серологических исследований;

выявление острой стадии заболевания по сравнению с перенесенной инфекцией или контактом;

контроля эффективности противовирусного лечения.

Исчезновение ДНК вируса гепатита В из крови – признак эффективности терапии

Этот метод дает важную информацию об интенсивности развития заболевания, об эффективности лечения и о развитии резистентности к активным препаратам.
Для диагностики вирусного гепатита методом ПЦР в сыворотке крови применяются тест-системы, чувствительность которых составляет 50-100 копий в пробе, что позволяет детектировать вирус при его концентрации 5 Х 10^3 -10^4 копий/мл. ПЦР при вирусном гепатите В безусловно необходима для суждения о вирусной репликации.

Вирусную ДНК в сыворотке крови обнаруживают у 50% больных при отсутствии HBeAg. Материалом для выявления ДНК вируса гепатита В могут служить сыворотка крови, лимфоциты, гепатобиоптаты.

Оценку уровня виремии осуществляют следующим образом:
менее 2.10^5 копий/мл (менее 2.10^5 МЕ/мл) – низкая виремия ;
от 2.10^5 копий/мл (2.10^5 МЕ/мл) до 2.10^6 копий/мл (8.10^5 МЕ/мл) – средняя виремия;
более 2.10^6 копий/мл – высокая виремия.

Существует зависимость между исходом острого вирусного гепатита В и концентрацией ДНК ВГВ в крови больного. При низком уровне виремии процесс хронизации инфекции близок к нулю, при средней – хронизация процесса наблюдается у 25-30% больных, а при высоком уровне виремии острый вирусный гепатит В чаще всего переходит в хронический.

Показаниями для лечения хронического ВГВ интерфероном-альфа следует считать наличие маркеров активной репликации вируса (выявление HBsAg, HBeAg и ДНК ВГВ в сыворотке крови в течение предшествующих 6 месяцев.).

Критериями оценки эффективности лечения служат исчезновение HBeAg и ДНК ВГВ в крови, что обычно сопровождается нормализацией уровня трансаминаз и долговременной ремиссией заболевания, ДНК ВГВ исчезает из крови к 5-му месяцу лечения у 60%, к 9-му месяцу – у 80% больных. Снижение уровня виремии на 85% и более к третьему дню от начала лечения по сравнению с исходным служит быстрым и достаточно точным критерием для прогнозирования эффективности терапии.

источник

Вирусом гепатита С заражено около 170 миллионов человек по всему миру. Болезнь коварная – при смазанной симптоматике начала заболевания ее дебют проходит незамеченным. Часто развиваются хронические формы, которые приводят к разрушению клеток печени.

Исходом гепатита С становятся цирроз или рак печени. Для выявления маркеров заболевания в первую очередь назначают иммуноферментный анализ – ИФА на гепатит С.

Анализ основан на способности специфических антител (белков крови) связываться с антигеном (частицами вируса), при этом один из них «помечен» ферментом. Образовавшийся комплекс реагирует с подкрашенным субстратом, что фиксируется спектрофотометрическими методами.

Иммуноферментный анализ (ИФА) на гепатит С показывает не присутствие самого вируса-возбудителя в крови, а ответ иммунной системы на столкновение с ним. Количество вируса в крови на момент проведения ИФА может быть ничтожно мало, за порогом определения. А антитела – иммуноглобулины, которые выработались при встрече с «агрессором», продолжают циркулировать в кровеносной системе.

Именно присутствие антител определяется при ИФА. Появляются они в срок от нескольких дней до нескольких недель после заражения гепатитом С.

ИФА выявляет циркулирующие иммуноглобулины даже в малой концентрации. По их типу можно судить о давности заболевания. В острый период, когда вирус гепатита активно размножается, определяют иммуноглобулины класса М.

В хронической стадии (спустя 6 мес. от начала заболевания) при ИФА обнаруживают иммуноглобулины класса G. Последний тип также может свидетельствовать не о хронизации процесса, а о самом факте столкновения иммунной системы с вирусом гепатита С в прошлом.

Обследование на маркеры гепатита С, к которым относятся антитела – иммуноглобулины, давно стала рутинной процедурой. ИФА назначают при:

острых и хронических заболеваниях печени;

желтухе неясного генеза;

обследовании перед хирургическими вмешательствами;

стандартном обследовании доноров крови;

постановке на учет в женской консультации при беременности. Повторно анализ сдают за 2-4 недели до предполагаемой даты родов;

прохождении гемодиализа;

профилактических осмотрах медработникам, контактирующим с компонентами крови и другими биологическими жидкостями;

незащищенном сомнительном половом контакте;

рождении детей от инфицированных матерей.

В порядке рекомендаций анализ на гепатит С назначают родственникам больного, близко с ним контактирующим. В 50% случаев парентеральный источник заражения выявить не удается. Инфекционисты предполагают бытовой путь передачи, когда зараженная кровь может попадать в кровоток здорового человека через кожные ранки и трещины. У этой версии много противников.

За 48 часов до ИФА исключают из пищи алкоголь, жареное, жирное и соленое. За 12 часов до забора крови из вены пациенту необходимо воздержаться от приема каких-либо лекарств. Анализ сдают утром натощак.

Наибольшее распространение получил «твердофазный» ИФА. Твердая фаза – это материал, на котором фиксируют антитела или антигены. В этом качестве используют мембраны, активно собирающие на себя белки (лабораторные планшеты, стенки пробирки, шарики и бусины из полипропилена или поливинилхлорида, нитроцеллюлозу и пр.).

Вне зависимости от разновидности ИФА, в его проведении существует строгая этапность:

На первой стадии исследуемый материал «узнается» специфическим антителом и связывается с ним, образуя иммунный комплекс;
На второй стадии с образовавшимся иммунным комплексом реагирует помеченный ферментом так называемый конъюгат – антитело или антиген;
Заключительная стадия ИФА позволяет уловить и зарегистрировать сигнал от ферментной метки.

Вариантов выполнения анализа достаточно много. Их классифицируют:

По типу реагентов, используемых на первом этапе ИФА:
a) конкурентный;
b) неконкурентный;

По степени однородности среды, в которой происходят реакции ИФА:
a) гомогенные;
b) гетерогенные;

3) По принципу определения исследуемого вещества:
a) прямой;
b) непрямой. Именно непрямой метод ИФА используется при выявлении маркеров гепатита С.

При этом методе используют стандартные антитела к вирусу гепатита С, помеченные меткой – ферментом.

В лунки лабораторного планшета (если выбрали именно его в качестве твердой фазы) помещают сыворотку крови пациента. Выдерживают 20 минут, чтобы антигены (белки вируса гепатита С) успели прикрепиться к стенкам.
Добавляют стандартные помеченные ферментом антитела к гепатиту С. Выдерживают еще несколько часов – за это время образуются иммунные комплексы антиген-антитело с меткой. Чем больше антигенов в исследуемой сыворотке, тем больше таких комплексов образуется.
Содержимое лунок промывается от несвязанных белков. Затем добавляют субстрат. Это вещество при реакции с ферментом-меткой меняет цвет. Чем больше комплексов при ИФА образовалось, тем большее количество фермента может воздействовать на субстрат и тем ярче хроматографическая реакция. Она считывается ИФА-ридером и оценивается количественно.

При этом методе ИФА стандартный антиген связывается с антителами сыворотки пациента. К образовавшемуся иммунному комплексу добавляют меченые ферментом стандартные антитела к иммуноглобулинам.

В лунки лабораторного планшета помещают стандартный антиген гепатита С (частички вируса). Антиген прикрепляется к стенке, незакрепленные белки вымываются лаборантом.
В подготовленные таким образом лунки помещают исследуемый материал (сыворотку крови), инкубируют. Есть обязательные контрольные лунки со стандартными реагентами. За время инкубации образуются комплексы антиген-антитело. Непрореагировавшие компоненты опять вымывают.
В лунки добавляют меченые ферментом антитела к иммуноглобулинам М и G. Эти белки прореагируют с образовавшимся ранее комплексом, только если в исследуемом образце есть антитела к гепатиту С. Промывают.
Добавляют еще один компонент – субстрат. Это химическое соединение разрушается ферментом из комплекса антиген-антитело. При этом образуется окрашенное вещество, количество которого фиксируют специальным прибором – ИФА-ридером. Чем больше фермента, тем сильнее он прореагирует с субстратом и тем ярче будет цветовой сигнал.

Высокая чувствительность ИФА иногда играет с пациентом злую шутку. Не каждый положительный результат означает заболевание и не каждый отрицательный – гарантия свободы от вируса.

При положительном ИФА определяют генотип вируса и определяют количество циркулирующих в крови вирусов с помощью ПЦР (полимеразной цепной реакции).

При ИФА выявляют маркеры острой фазы заболевания (иммуноглобулины класса М (IgM)) и иммуноглобулины класса G (IgG). Последние могут означать, что у пациента хронический гепатит С или то, что иммунная система хотя бы раз в прошлом сталкивалась с этим вирусом и выработался иммунитет.

Выявление одновременно двух типов иммуноглобулинов при ИФА говорит об обострении хронического гепатита С.

Самый вероятный вариант – пациент не болен и его иммунная система никогда не сталкивалась с вирусом.

Псевдоотрицательный результат при ИФА можно получить в том случае, если пациент инфицировался относительно недавно и защитные антитела просто не успели выработаться. Это так называемое «диагностическое окно». Его срок – 6 месяцев.

Наконец, нельзя полностью исключить ошибку лаборатории.

ИФА реже дает погрешности по сравнению с ПЦР. Тем не менее, исследуемые вещества – белки. Реагент может связаться с неспецифическим белком сыворотки крови. Ложноположительный ИФА на гепатит С нередок в случаях:

выполненной накануне вакцинации;

при аутоиммунных патологиях или туберкулезе, рассеянном склерозе, склеродермии;

опухолевом процессе;

инфекциях, протекающих с гипертермией (грипп, ОРЗ и пр.).

Грешат ложноположительными результатами исследования на маркеры гепатита С у беременных. Довольно часто ИФА дает ложное заключение о наличии антител пациентам со II группой крови.

Полимеразная цепная реакция выявляет присутствие вируса в крови и его количество, помогает определить генотип. ИФА «видит» антитела – клетки, вырабатываемые спустя какое-то время после инфицирования и остающиеся в организме после уничтожения «врага».

Вариантов, при которых у пациентов с гепатитом С ПЦР отрицательный, а ИФА – положительный, два. Самый вероятный – сформировался иммунитет к вирусу, а сам он уничтожен иммунной системой или лекарствами.

Второй: нельзя исключить ошибку лаборатории при проведении ПЦР.

Диагностикой заболеваний должен заниматься врач. Он учитывает все нюансы обследования. А лабораторная диагностика, в том числе ИФА – только вспомогательный метод, не лишенный погрешностей.

источник

Исследуемый показатель	Диагностическая ценность
Аспартатаминотрансфераза (АсАт)	Если фермента больше нормы, то говорят о гибели гепатоцитов или миоцитов. Исключение – беременные женщины, где допускается незначительное превышение нормы
Аланинаминотрансфераза (АлАт)	При гепатитах норма фермента превышена в несколько раз
Щелочная фосфатаза (ЩФ)	>нормы при костных патологиях, туб- или онкопроцессах в печени, циррозе, любых гепатитах вирусного генеза
Лактатдегидрогеназа (ЛДГ)	> нормы при разрушении печеночной ткани
Глутаматдегидрогеназа (ГДГ)	Отклонения от нормы наблюдают при тяжелых расстройствах работы печени, желчевыводящих путей, острых токсических воздействий
Сорбитолдегидрогеназа (СДГ)	В норме практически отсутствует. Появление фермента укажет на вирусный или невирусный гепатит, цирроз
Гамма-глутамилтрансфераза (ГГТ)	>нормы при гепатитах на фоне систематических алкогольных интоксикациях
Фруктозо-монофосфат-альдолаза (ФМФА)	В норме содержится только в следовых количествах. Активное присутствие фермента наблюдают при острых формах гепатитов, особенно сопряженных с профессиональной вредностью
Общий белок	>нормы при неправильной работе печеночной ткани
Альбумин	нормы при серьезных погрешностях питания, циррозе, но особенно на фоне алкоголизма
Триглицериды