Меню Рубрики

Методы иммуноферментного анализа гепатит в

Для диагностики вирусного гепатита в рамках медицинского протокола используется несколько лабораторных и инструментальных методик. Одной из самых достоверных является иммуноферментный анализ (ИФА). Метод помогает определить наличие антигена к тому или иному виду вируса. Для этого выполняется стандартная процедура забора крови из вены пациента. Результаты становятся известны уже через неделю после взятия анализа.

Термин расшифровывается как «иммуноферментный анализ». Он подразумевает определение в крови комплексов антиген-антитело для уточнения этиологии возбудителя. Если это вирус, определяются его виды и подвиды. Антигены — это частички на поверхности клеток возбудителей, связывающиеся с определенными участками антител. Последние являются иммунными молекулами, вырабатываемыми организмом для собственной защиты. Антигены и антитела неповторимы, поэтому определение их структуры с помощью иммуноферментного анализа свидетельствует о наличии конкретной патологии в организме больного. В качестве меток используются ферменты, которые и дали название методике.

ИФА — это высокоточная методика, ее чувствительность достигает 90%. Она помогает проводить скрининг парентеральных гепатитов. Эти заболевания передаются путем инъекции, или через переливание крови. ИФА помогает выявить пациентов, у которых отсутствуют симптомы. Таковыми является большинство хронических больных. Они имеют риск развития цирроза. Его обнаружение на поздних стадиях — это плохой прогноз. Поэтому иммуноферментная методика позволяет своевременно определить заболевание и сэкономить деньги на лечение. ИФА верифицирует этиологию возбудителя и определяет прогноз недуга. Диагностические наборы для нее стоят недорого и длительно хранятся. За быстроту, удобство и точность данных ИФА называют экспресс-методом.

ИФА необходим, когда требуется уточнить этиологию вирусного возбудителя для определения схемы лечения. У пациента идентифицируют наличие хронического гепатита B и C, или перенесенного заболевания вирусом подтипа A. Методику нужно применять у членов семьи больного, которые могут заразиться. В инфекционном стационаре анализ выполняется всем пациентам, у которых присутствуют такие симптомы:

  • Желтуха. Желтушность кожных покровов не сопровождается болями в правом подреберье и изменением цвета стула и мочи.
  • Повышение температуры тела. Она вырастает до субфебрильных цифр, иногда наступает лихорадка.
  • Диспепсия. Присутствуют тошнота и рвота, которая не приносит облегчение.
  • Немотивированная слабость.
  • Мелкоточечные высыпания на теле. Это мелкие кровоизлияния вследствие печеночной недостаточности.
  • Тяжесть в правом подреберье. Симптом возникает вследствие растяжения увеличенной печенью собственной капсулы, содержащей множество нервных окончаний.

Основным показанием к выполнению анализа является наличие определенных анамнестических данных. Если пациент ранее страдал инъекционной наркоманией, ему переливали кровь или пересаживали органы — это повод выполнить ИФА.

Чтобы результаты ИФА были достоверными, требуется предварительно подготовиться. За день до сдачи крови пациенту рекомендуется перестать употреблять жирную и жареную пищу, продукты с высокой концентрацией красителей, стабилизаторов, консервантов, усилителей вкуса и аромата. Нежелательно непосредственно перед выполнением метода заниматься тяжелым физическим трудом и спортивными упражнениями. В день сдачи крови необходимо воздержаться от завтрака. Забор материала натощак позволит получить точный результат. Необходимо исключить из употребления некоторые лекарственные средства. Но самостоятельно это делать не рекомендуется, поскольку есть вероятность вреда для здоровья. Нужна предварительная консультация лечащего доктора.

Метод ИФА состоит из двух этапов. На первом выполняется забор материала, на втором последний исследуется в лаборатории. Начальный этап проходит стандартно. Ему предшествует подготовка пациента к сдаче крови. В стерильном помещении проводится забор биоматериала, отправляемый в герметических контейнерах на лабораторное исследование. Дальнейшее определение комплексов антиген-антитело происходит с помощью ферментов и тест-систем на специализированном оборудовании. Результат становится известен в течение недели и отправляется пациенту на электронную почту.

Интерпретация данных подразделяется на качественную и количественную. При качественном определении результаты анализа считаются позитивными, если обнаружены суммарные антитела к определенному подтипу вируса. Выявление anti-НАV IgМ свидетельствует про острый, а anti-НАV IgG — хронический гепатит А. Позитивный маркер НВsAg — признак инфицирования вирусом подтипа В. Он наблюдается в острой и хронической фазах заболевания. Если же выявлен HBCAg, у человека присутствует хронический гепатит С. А anti-НDV сигнализирует про инфицирование подвидом D. Пациенты, у которых определен положительный маркер к вирусу, нуждаются в дальнейшем обследовании для более точной верификации диагноза.

источник

Поверхностный антиген гепатита В в сыворотке крови в норме отсутствует.
Обнаружение поверхностного антигена (HBsAg) гепатита В в сыворотке подтверждает острое или хроническое инфицирование вирусом гепатита В.

При остром заболевании HBsAg выявляется в сыворотке крови в последние 1-2 недели инкубационного периода и первые 2-3 недели клинического периода. Циркуляция HBsAg в крови может ограничиваться несколькими днями, поэтому следует стремиться к раннему первичному обследованию больных. Метод ИФА позволяет выявить HBsAg более чем у 90% больных. Почти у 5% больных самые чувствительные методы исследования не обнаруживают HBsAg, в таких случаях этиология вирусного гепатита В подтверждается наличием анти-HBсAg JgM или ПЦР.

Концентрация HBsAg в сыворотке крови при всех формах тяжести гепатита В в разгар заболевания имеет значительный диапазон колебаний, вместе с тем имеется определенная закономерность: в остром периоде существует обратная связь между концентрацией HBsAg в сыворотке и тяжестью болезни.

Высокая концентрация HBsAg чаще наблюдается при легких и среднетяжелых формах болезни. При тяжелых и злокачественных формах концентрация HBsAg в крови чаще низкая, причем у 20% больных с тяжелой формой и у 30% со злокачественной антиген в крови может вообще не обнаруживаться. Появление на этом фоне у больных антител к HBsAg расценивается как неблагоприятный диагностический признак; он определяется при злокачественных формах гепатита В.

При остром течении гепатита В концентрация HBsAg в крови постепенно снижается вплоть до полного исчезновения этого антигена. HBsAg исчезает у большинства больных в течение 3 месяцев от начала острой инфекции.

Снижение концентрации HBsAg более чем на 50% к концу 3-й недели острого периода, как правило, свидетельствует о близком завершении инфекционного процесса. Обычно у больных с высокой концентрацией HBsAg в разгар болезни он обнаруживается в крови в течение нескольких месяцев.
У больных с низкой концентрацией HBsAg исчезает значительно раньше (иногда через несколько дней после начала заболевания). В целом срок обнаружения HBsAg колеблется от нескольких дней до 4-5 мес. Максимальный срок обнаружения HBsAg при гладком течении острого гепатита В не превышает 6 месяцев от начала заболевания.

HBsAg может быть обнаружен у практически здоровых людей, как правило, при профилактических или случайных исследованиях. В таких случаях исследуют другие маркеры вирусного гепатита В – анти HBсAg JgM, анти- HBсAg JgG, анти HBеAg и изучают функцию печени.

При отрицательных результатах необходимы повторные исследования на HBsAg.
Если повторные исследования крови в течение более 3 месяцев выявляют HBsAg, такого пациента относят к хроническим больным вирусным гепатитом В.
Наличие HBsAg – довольно распространенное явление. В мире насчитывается более 300 млн. носителей, а у нас в стране – около 10 млн. носителей.
Прекращение циркуляции HBsAg с последующей сероконверсией (образование анти-HBs) всегда свидетельствует о выздоровлении — санации организма.

Исследование крови на наличие HBsAg применяется в следующих целях:

  • для диагностики острого гепатита В:
    • инкубационный период;
    • острый период заболевания;
    • ранняя стадия реконвалесценции;
  • для диагностики хронического вирусного гепатита В;
  • при заболеваниях:
    • персистирующем хроническом гепатите;
    • циррозе печени;
  • для скрининга и выявления больных в группах риска:

  • больные с частыми гемотрансфузиями;
  • больные с хронической почечной недостаточностью;
  • больные с множественным гемодиализом;
  • больные с иммунодефицитными состояниями, в том числе СПИДом.
  • Результаты исследования выражаются качественно – положительный или отрицательный. Отрицательный результат исследования указывает на отсутствие HBsAg в сыворотке крови. Положительный результат – выявление HBsAg свидетельствует об инкубационном или остром периоде острого вирусного гепатита В, а также при хроническом вирусном гепатите В.

    В норме анти-HBcAg JgG в сыворотке отсутствует.
    У больных анти-HBcAg JgG появляются в острый период вирусного гепатита В и сохраняются на протяжении всей жизни. Анти-HBcAg JgG – ведущий маркер перенесенного ВГВ.

    Исследование крови на наличие анти-HBcAg JgG применяются для диагностики:

  • хронического вирусного гепатита В при наличии HBs антигена в сыворотке крови;
  • перенесенного вирусного гепатита В.
  • Результат исследования выражается качественно – положительный или отрицательный. Отрицательный результат исследования указывает на отсутствие анти-HBcAg JgG в сыворотке крови. Положительный результат – выявление анти-HBcAg JgG свидетельствует об острой инфекции, реконвалесценции или ранее перенесенном вирусном гепатите В.

    В норме HBeAg в сыворотке крови отсутствует.
    HBeAg можно обнаружить в сыворотке крови большинства больных острым вирусным гепатитом В. Он обычно исчезает в крови раньше HBs-антигена. Высокий уровень HBeAg в первые недели заболевания или обнаружение его на протяжении более 8 недель дает основание заподозрить хроническую инфекцию.

    Этот антиген часто обнаруживается при хроническом активном гепатите вирусной этиологии. Особый интерес к определению HBeAg связан с тем, что его обнаружение характеризует активную репликативную фазу инфекционного процесса . Установлено, что высокие концентрации HBeAg соответствуют высокой ДНК-полимеразной активности и характеризуют активную репликацию вируса.

    Наличие HBeAg в крови свидетельствует о высокой ее инфекциозности, т.е. присутствии в организме обследуемого активной инфекции гепатита В, и обнаруживается только в случае присутствия в крови HBs-антигена. У больных хроническим активным гепатитом противовирусные препараты применяются только при обнаружении в крови HBeAg. HBeAg – антиген – маркер острой фазы и репликации вируса гепатита В.

    Исследование крови на наличие HBe-антигена применяется для диагностики:

  • инкубационного периода вирусного гепатита В;
  • продромального периода вирусного гепатита В;
  • острого периода вирусного гепатита В;
  • хронического персистирующего вирусного гепатита В.
  • Результат исследования выражается качественно – положительный или отрицательный. Отрицательный результат исследования указывает на отсутствие HBeAg в сыворотке крови. Положительный результат – выявление HBeAg свидетельствует об инкубационном или остром периоде острого вирусного гепатита В или продолжающейся репликации вируса и инфекциозности больного.

    Анти-HBeAg в сыворотке в норме отсутствует. Появление анти-НВeAg антител указывает обычно на интенсивное выведение из организма вируса гепатита В и незначительное инфицирование больного.

    Эти антитела появляются в острый период и сохраняются до 5 лет после перенесенной инфекции. При хроническом персистирующем гепатите анти-НВeAg обнаруживаются в крови больного вместе с НВsAg. Сероконверсия, т.е. переход HBeAg в анти-НВeAg, при хроническом активном гепатите, чаще прогностически благоприятна, но такая же сероконверсия при выраженной цирротической трансформации печени прогноза не улучшает.

    Исследование крови на наличие анти-НВeAg применяются в следующих случаях при диагностике вирусного гепатита В:

  • установление начальной стадии заболевания;
  • острый период инфекции;
  • ранняя стадия реконвалесценции;
  • реконвалесценция;
  • поздняя стадия реконвалесценции.
  • диагностика недавно перенесенного вирусного гепатита В;
  • диагностика хронического персистирующего вирусного гепатита В.
  • Результат исследования выражается качественно – положительный или отрицательный. Отрицательный результат исследования указывает на отсутствие антител к HBeAg в сыворотке крови. Положительный результат – выявление антител к HBeAg, которые могут свидетельствовать о начальной стадии острого вирусного гепатита В, остром периоде инфекции, ранней стадии реконвалесценции, реконвалесценции, перенесенном недавно вирусном гепатите В или персистирующем вирусном гепатите В.

    Критериями наличия хронического гепатита В являются:

  • бнаружение или периодическое выявления ДНК ВГВ в крови;
  • постоянное или периодическое повышение активности АЛТ/АСТ в крови;\
  • морфологические признаки хронического гепатита при гистологическом исследовании биоптата печени.
  • Вирус гепатита В в крови в норме отсутствует.
    Качественное определение вируса гепатита В методом ПЦР в крови позволяет подтвердить наличие вируса в организме больного и тем самым устанавливает этиологию заболевания.

    Данное исследование дает полезную информацию для диагностики острого вирусного гепатита В в инкубационном и раннем периоде развития заболевания, когда основные серологические маркеры в крови у пациента могут отсутствовать. Вирусную ДНК в сыворотке крови обнаруживают у 50% больных при отсутствии HBeAg. Аналитическая чувствительность метода ПЦР составляет не менее 80 вирусных частиц в 5 мкл, прошедшей выявление ДНК пробы, специфичность – 98%.

    Этот метод имеет важное значение для диагностики и мониторинга течения хронического ВГВ. Примерно 5-10% случаев цирроза и других хронических заболеваний печени обусловлены хроническим носительством вируса гепатита В. Маркерами активности таких заболеваний является наличие HBeAg и ДНК вируса гепатита В в крови.

    Метод ПЦР позволяет определять в крови ДНК вируса гепатита В как качественно, так и количественно. Определяемым фрагментом в обоих случаях служит уникальная последовательность ДНК гена структурного белка вируса гепатита В.

    Обнаружение ДНК вируса гепатита В в биоматериале с помощью ПЦР необходимо для:

  • разрешения сомнительных результатов серологических исследований;
  • выявление острой стадии заболевания по сравнению с перенесенной инфекцией или контактом;
  • контроля эффективности противовирусного лечения.
  • Исчезновение ДНК вируса гепатита В из крови – признак эффективности терапии

    Этот метод дает важную информацию об интенсивности развития заболевания, об эффективности лечения и о развитии резистентности к активным препаратам.
    Для диагностики вирусного гепатита методом ПЦР в сыворотке крови применяются тест-системы, чувствительность которых составляет 50-100 копий в пробе, что позволяет детектировать вирус при его концентрации 5 Х 10^3 -10^4 копий/мл. ПЦР при вирусном гепатите В безусловно необходима для суждения о вирусной репликации.

    Вирусную ДНК в сыворотке крови обнаруживают у 50% больных при отсутствии HBeAg. Материалом для выявления ДНК вируса гепатита В могут служить сыворотка крови, лимфоциты, гепатобиоптаты.

    • Оценку уровня виремии осуществляют следующим образом:
    • менее 2.10^5 копий/мл (менее 2.10^5 МЕ/мл) – низкая виремия ;
    • от 2.10^5 копий/мл (2.10^5 МЕ/мл) до 2.10^6 копий/мл (8.10^5 МЕ/мл) – средняя виремия;
    • более 2.10^6 копий/мл – высокая виремия.

    Существует зависимость между исходом острого вирусного гепатита В и концентрацией ДНК ВГВ в крови больного. При низком уровне виремии процесс хронизации инфекции близок к нулю, при средней – хронизация процесса наблюдается у 25-30% больных, а при высоком уровне виремии острый вирусный гепатит В чаще всего переходит в хронический.

    Читайте также:  Анализы для подтверждения диагноза гепатит с

    Показаниями для лечения хронического ВГВ интерфероном-альфа следует считать наличие маркеров активной репликации вируса (выявление HBsAg, HBeAg и ДНК ВГВ в сыворотке крови в течение предшествующих 6 месяцев.).

    Критериями оценки эффективности лечения служат исчезновение HBeAg и ДНК ВГВ в крови, что обычно сопровождается нормализацией уровня трансаминаз и долговременной ремиссией заболевания, ДНК ВГВ исчезает из крови к 5-му месяцу лечения у 60%, к 9-му месяцу – у 80% больных. Снижение уровня виремии на 85% и более к третьему дню от начала лечения по сравнению с исходным служит быстрым и достаточно точным критерием для прогнозирования эффективности терапии.

    источник

    Чтобы оценить работоспособность защитных функций организма и выявить точные диагностические данные, проводят иммуноферментный анализ. В случаях инфицирования человека обнаруживаются кардинальные изменения в крови и получают результат ИФА на гепатит С положительный.

    Метод изучения биологического материала ИФА относят к определению иммунохимических реакций, открывающих взаимосвязи антигенов и антител. В ходе проведения анализа к молекуле антитела химическим способом подсаживают антиген-экзим, служащий маркером, который указывает на компоненты процесса.

    К компонентам иммуноферментного анализа относят:

    • антитела:
    • антитела промаркированные;
    • antibodies-attacking-a-virus1-440×264 антиген;
    • субстрат фермента;
    • краситель-индикатор.

    Процесс выработки антител и иммуноглобулинов запускается в момент проникания в организм пациента посторонних генов или болезнетворных бактерий.

    Задачей иммуноглобулинов считают нейтрализацию антигенов, происходящую при их взаимодействии. В ходе взаимодействия иммуноглобулины формируют комплект антиген-антител, которые имеют количественные и качественные характеристики. Эти значения и изучаются в процессе исследования анализа.

    Для регистрации результата в ходе тестирования иммуноферментного анализа у человека забирают биологический материал. Обычно для этих целей используют венозную кровь, но в определенных ситуациях необходим анализ спинномозговой жидкости, стекловидного тела или околоплодных вод беременной женщины. Главной особенностью этого теста является его высокая достоверность, которая составляет порядка 80%.

    К плюсам иммуноферментного анализа также относят:

    • метод ИФА превосходит прочие тесты по точности определения важных показателей в десятки раз;
    • для выполнения ИФА не требуется много времени, результаты, подтверждающие или опровергающие наличие вируса в организме, получают довольно быстро;
    • стоимость проведения ИФА доступна большинству категорий населения, в отличие от прочих тестов;
    • проведение ИФА дает возможность обнаружить проблему при начальных проявлениях, что значительно облегчает последующий процесс лечения человека;
    • все стадии проведения этого анализа автоматизированы;
    • высокая степень унификации теста.

    К негативным проявлениям данного анализа относят возможность ложноположительных и отрицательных результатов. Сомнительные итоги могут регистрироваться при различных патологических состояниях, беременности и при употреблении медикаментозных средств, которые влияют на выработку организмом антител.

    С помощью проведения иммуноферментного анализа подсчитывается количество антител к вирусу гепатита С. В ходе исследования определяется число этих образований по IgM типу, который соответствует острому течению недуга и IgG, обнаруживаемому при хронической форме.

    Антитела IgM регистрируют в течение двух недель после инфицирования организма пациента вирусом гриппа С в острой форме, срок существования этих образований от 3 до 5 месяцев.

    Антитела IgG вырабатываются спустя несколько месяцев после поражения организма, но их существование подтверждается в течение десяти лет, даже при условии полного выздоровления пациента.

    Отрицательный результат тестирования дает возможность утверждать, что антитела обоих типов отсутствуют в организме и на данный момент гепатит С не обнаружен. Следует учитывать, что если человек заразился в течение последних двух недель, определение патологии невозможно.

    Положительный результат теста показывает наличие того или иного типа антител в организме пациента. Данный показатель характеризует инфицирование гепатитом С в острой или хронической форме. Следует учитывать, что фиксация этих образований не дает возможность однозначно указывать на заражение человека, вполне допустимо, что он является только носителем. Бывают случаи, когда при расшифровке данных фиксируется ложноположительный результат.

    Это происходит в результате фиксирования лабораторными приборами антител, которые производятся защитной системой человека в ответ на следующие патологии:

    • аутоиммунное воспаление;
    • проникновение в организм пациента прочих инфекций;
    • при беременности.

    Статистика проведения иммуноферментного исследования показывает, что ложноположительный вывод регистрируется в 15% всех результатов, подтверждающих наличие вируса. Для беременных женщин данный показатель еще выше.

    Недостоверный вывод тестирования на гепатит С выявляется при сбоях функционирования внутренних органов и технических сбоев, то есть халатного отношения медицинского персонала к своим обязанностям. Ошибки обнаруживаются не более чем в 15% случаев, но их можно избежать, выполняя следующие правила:

    Перед сдачей анализа нельзя курить

    • для сдачи анализа необходимо выбирать только проверенные, сертифицированные лаборатории с обученным медицинским персоналом;
    • накануне проведения анализов следует прекратить употребление любых медикаментозных препаратов, если прием лекарства обусловлен состоянием пациента, он должен предупредить персонал лаборатории об этом факте;
    • процедура обычно проводится утром натощак, но перед этим пациенту не следует проявлять излишнюю физическую активность и курить;
    • непосредственно перед проведением анализа рекомендуется определить температуру тела, она не должна превышать норму.

    При сомнении в правильности выводов тестирования, назначается повторный анализ. В идеале требуется проведение трех исследований биологического материала на гепатит С.

    Если первый тест показал наличие антител в крови пациента, а последующие два не выявили эти образования, можно утверждать, что инфицирования организма вирусом гепатита С нет. Существует ряд заболеваний, которые влияют на результат тестирования крови на наличие вируса гепатита С.

    Некоторые патологии сопровождаются выработкой антител, и в этом случае подтверждение наличия вируса гепатита С в организме пациента производится с помощью других методов исследования, так как многократно повторяющиеся ошибки при ИФА анализе не дают гарантии правильного диагноза.

    Комплексное изучение с применением исследования биологического материала человека в лабораторных условиях и с использованием инструментальных методов позволит выявить истинную причину недомогания, и исключить гепатит С.

    Чаще всего причиной ложноположительного результата анализа являются следующие патологии:

    • инфекционные заболевания острого или хронического типа;
    • рак или доброкачественные новообразования во внутренних органах;
    • заболевания аутоиммунного типа, при течении которых образуются антитела к собственным клеткам организма пациента;
    • туберкулез;
    • малярия;
    • склеродермия;
    • герпес;
    • рассеянный склероз;
    • артрит.

    Все перечисленные заболевания являются причиной возникновения сбоев в иммунной системе человека, в результате чего иммуноглобулины начинают вырабатываться с превышением нормы, что и становится помехой для постановки точного диагноза и подтверждения наличия вируса гепатита С в организме пациента.

    После соприкосновения с источником инфекции организм человека может успешно подавить воспаление, но антитела, при проведении ИФА, все еще обнаруживались в крови, что стало причиной ложноположительного результата теста.

    Довольно часто такой результат тестирования регистрируется у беременных женщин, поэтому без повторного анализа, подтверждение заболевания у такого пациента, не проводится.

    Причиной отклонений от нормы становится изменения в организме женщины, которая ждет ребенка. В этот период у нее происходит перестройка внутренних органов, что выражается в следующих процессах:

    • изменяется гормональный фон;
    • в крови формируются специфические белки, вследствие чего меняется ее состав;
    • уровень цитокинов увеличивается.

    Помимо перечисленных факторов, влияющих на итоги иммуноферментного анализа, нужно отметить ошибки медицинского персонала, приводящие к обнаружению ложноположительных выводов тестирования:

    • недостаточная квалификация персонала, проводящего забор биологического материала;
    • сбои в функционировании лабораторного оборудования;
    • подмена проб по халатности;
    • ненадлежащее хранение биологического материала (нарушение температурного режима).

    При проведении иммуноферментного анализа следует учитывать, что пациент мог недавно получить прививку против гриппа, гепатита или столбняка. Этот факт нужно обязательно довести до сведения лечащего врача или медицинского персонала в лаборатории, чтобы была назначена другая дата исследования.

    Регистрация антител в биологическом материале пациента, указывающая на присутствие вируса гепатита С в организме, не всегда является окончательным диагнозом заболевания. Ложноположительные результаты иммуноферментного анализа нередки, и повторные тесты часто опровергают первоначальные выводы.

    При положительных анализах нужно обратиться к гепатологу

    Нужно понимать, что ИФА тест дает возможность выявить количественные и качественные изменения в биологическом материале человека и определить характер течения заболевания. Делать окончательное заключение об инфицировании гепатитом С можно только после комплексного изучения состояния пациента с применением других лабораторных и инструментальных исследований.

    Если положительный результат выявлен надлежащим образом, человеку следует отправиться к специалистам: инфекционисту и гепатологу. Только профильный врач сможет определить, какие тесты необходимо пройти дополнительно до назначения курса терапии

    По данным медицинской статистики, в мире инфицировано гепатитом С почти 4% населения, но этот показатель явно занижен, так как многие носители недуга не подозревают о своей проблеме. Поэтому проведение ИФА теста в качестве профилактической меры поможет выявить заболевание на начальной стадии и быстро справиться с болезнью.

    источник

    Специфическая лабораторная диагностика вирусных гепатитов основывается на применении иммунохимических и молекулярно-биологических методов исследований. Основными иммунохимическими методами являются радиоизотопный или радиоиммунный (РИА) и иммуноферментный (ИФА). В основе иммунохимических методов диагностики лежит специфическое взаимодействие антиген — антитело с последующим выявлением комплекса при помощи специальных меток. Наиболее распространенным является иммуноферментный анализ.

    Первые сообщения о применении иммуноферментного анализа. как метода для определения каких-либо веществ были опубликованы в 1971 году одновременно двумя исследовательскими группами — В. Van Weemen, A. Schuurs и Е. Engvall, P. Perlmann. В основе иммуноферментного анализа лежит следующий принцип: на твердой фазе, в качестве которой используется, главным образом, поверхность лунок полистиролового планшета, фиксируется антиген возбудителя инфекции или антитела (часто смесь антител) к антигенам, которые необходимо обнаружить. Этот антиген или антитела, которые зафиксированы на твердой фазе, называются иммуносорбентом.

    В результате инкубации иммуносорбента и испытуемой сыворотки при наличии определяемого агента происходит их связывание в комплекс антиген — антитело. После процедуры промывки, в ходе которой удаляются несвязанные антигены и антитела, проводится инкубация с конъюгатом. В качестве конъюгата при детекции HBsAg используют анти-HBs, при детекции антител к вирусу гепатита С —антитела к иммуноглобулинам человека (антивидовой конъюгат), меченные пероксидазой хрена. В итоге этой инкубации происходит присоединение к уже имеющимся комплексам антиген — антитело дополнительно внесенного конъюгата. После удаления несвязавшегося конъюгата (отмывки) в лунки вносится субстрат. При использовании пероксидазного конъюгата в качестве субстрата используют перекись водорода в сочетании с индикатором, в качестве которого наиболее часто применяют ортофенилендиамин (ОФД) или тетраметилбензидин (ТМБ). Результат оценивается фотометрически.

    Качество и надежность аналитических возможностей иммуноферментного метода характеризуются рядом критериев, к числу которых относятся чувствительность, специфичность, правильность и воспроизводимость.

    Чувствительность — то минимальное количество вещества, которое может быть обнаружено при помощи иммуноферментного анализа. При этом нижним пределом чувствительности данного метода является концентрация исследуемого вещества в образце, которая соответствует наименьшему положительному результату определения, статистически достоверно отличающемуся от показателей заведомо отрицательных образцов. Чувствительность ИФТС зависит от ряда обстоятельств, связанных как с конструкцией тест-системы (аффинность иммуносорбента, качества экстракционных и буферных систем), так и разрешающей способностью и точностью метода регистрации.

    Специфичность — способность выявлять именно те компоненты, для определения которых предназначена данная иммуноферментная тест-система. Специфичность ИФА определяется во многом перекрестной реакцией антител или антигенов (то есть композиции, используемой в качестве иммуносорбента), с близкородственными соединениями, а также составом инкубационной среды (матрикс-эффект).

    Правильность — соответствие среднего значения результатов повторных определений одного и того же контрольного образца с истинной величиной измеряемого параметра. Правильность определения в ИФА зависит от качества самой тест-системы и контрольного образца. Для хороших иммуноферментных тест-систем показатели правильности лежат в пределах 90-110 %. Особенностью медико-биологических исследований в ИФА является невозможность установления точной величины, и поэтому за истинную величину принимается средняя от нескольких экспертных лабораторий. Статистическим критерием правильности служит средняя арифметическая и степень ее отклонения от истинного значения, выраженная в процентах.

    Воспроизводимость — способность тест-системы показывать одни и те же значения при повторных исследованиях одного и того же образца. Воспроизводимость зависит как от случайных погрешностей (ошибок) при проведении процедуры постановки реакции, так и от качества тест-систем и точности метода регистрации результатов. Считается, что воспроизводимость одних и тех же контрольных образцов одной фирмы в разных лабораториях не должна превышать величину коэффициента вариации в 15%.

    Существует несколько специфических схем ИФА для определения маркеров вирусных гепатитов: а) прямой иммуноферментный анализ; б) непрямой иммуноферментный анализ; в) конкурентное ингибирование; в) «ловушеч-ный», или «capture» метод.

    Из молекулярно-биологических методов диагностики вирусных гепатитов чаще используются полимеразная цепная реакция и гибридизация. Эти методы, особенно ПЦР, позволяют выявлять очень малые количества специфической вирусной ДНК или РНК и, таким образом, судить о репликации, а в ряде случаев и об активности репликации.

    Гепатит С является одним из самых распространенных заболеваний печени, которое возникает при инфицировании вирусом гепатита С (HСV), проникающим в организм преимущественно при контакте с кровью инфицированного человека. Встречается хронический и острый гепатит С. У 70-80 процентов пациентов с острым гепатитом С нет никаких симптомов заболевания, только в некоторых случаях через какое-то время после заражения бывают проявления болезни, которые выражаются в усталости, боли в животе, потере аппетита, потемнении мочи, рвоте, тошноте, осветлении кала, желтухе, боли в суставах. Как правило, симптомы возникают спустя 6-7 недель после заражения, но срок появления признаков заболевания варьируется от 2 недель до полугода. При возникновении вышеперечисленных симптомов нужно обратиться к врачу-инфекционисту и сдать анализ крови на гепатит С. Диагностика гепатита, проведенная своевременно, позволяет обнаружить заболевание еще на ранних стадиях и существенно увеличить шансы на выздоровление.

    Читайте также:  Анализы для проверки печени гепатит с

    Ситуации, когда обязательно назначается анализ на гепатит С:

    • во время вынашивания беременности и при планировании семьи;
    • пациентам с симптомами хронического или острого гепатита;
    • человек находится в группе риска. Это медицинские работники, лица, пребывающие в местах лишения свободы, сотрудники правоохранительных органов, лица, которые употребляют наркотики, имеют большое число половых партнеров, страдают СПИДом, находятся на гемодиализе и прочие.

    Специальной подготовки к анализу на гепатит С не требуется. Для анализа производится забор крови из вены натощак, при этом после последнего приема пищи должно пройти не менее восьми часов.

    Первый анализ, обычно назначаемый для диагностики гепатита С – ИФА тест (иммуноферментный анализ). Анализы ИФА на гепатит С позволяют обнаружить в крови наличие антител к вирусу гепатита С (anti-HCVAb). Если результат ИФА теста положительный, то это указывает на наличие контакта организма с вирусом гепатита С. Но у 40 процентов людей, у которых положительный ИФА, в крови тест вируса не обнаруживается. Это явление называется ложноположительным результатом. Также при помощи ИФА проверятся донорская кровь.

    Анализ RIBA на гепатит С используется для подтверждения положительного результата ИФА. Метод рекомбинантного иммуноблотинга (RIBA) является более точным исследованием наличия антител к вирусу гепатита С. Наличие в организме вируса гепатита С положительный результат этого анализа также не определяет, а только подтверждает присутствие антител.

    С целью выявить наличие в крови вирусов гепатита С (RNA HCV) и поставить диагноз, чаще всего пользуются анализом методом полимеразной цепной реакции (ПЦР). Это исследование дает возможность обнаружить с высокой точностью присутствие в крови даже малого количества вируса. Анализ ПЦР на гепатит С может выявить наличие вируса уже спустя 5 дней после заражения, задолго до возникновения антител. Когда результат анализа ПЦР положительный, то это означает наличие активной инфекции.

    Существуют такие вариации анализа ПЦР:

    • количественный ПЦР, позволяющий определить не только сам факт наличия вируса, но и вирусную нагрузку (количество вируса). Этот показатель имеет большое значение для определения эффективности лечения;
    • генотипирование, устанавливающее генотип вируса гепатита С, что важно для определения продолжительности и тактики лечения. Вируса гепатита С существует более 10 генотипов, но для клинической практики достаточно определения пяти, наиболее распространенных типов: 1a, 1b, 2,3а/3b.

    Количественный анализ ПЦР проводится:

    • при качественном положительном тесте на присутствие в сыворотке РНК вируса гепатита С;
    • для точной оценки эффективности лечения;
    • для определения тактики лечения пациента.

    Прямой взаимосвязи между тяжестью гепатита С и количеством вируса в крови не существует. Концентрация вируса влияет на инфекционность заболевания, то есть, чем больше количество вируса в крови больного, тем больше риск передачи вируса, к примеру, при половом контакте или от матери ребенку. Также от концентрации вируса зависит эффективность лечения. При проведении терапии благоприятным фактором является низкая вирусная нагрузка, а очень высокая – неблагоприятным.

    Анализ генотипирования делается:

    • при качественном положительном тесте на присутствие в сыворотке РНК вируса гепатита С;
    • для точной оценки эффективности лечения;
    • для определения тактики лечения пациента;
    • для прогнозирования хронизации инфекционного процесса;
    • для определения прогрессирования заболевания.

    Выявление генотипа вируса имеет большое значение для определения продолжительности лечения, что важно, поскольку интерферону присущи широкий спектр побочных действий и низкую переносимость больными.

    В норме РНК вируса, антитела к ним и антигены полностью отсутствуют. Присутствие антител в крови свидетельствует о наличии хронического или острого гепатита С либо о периоде выздоровления. Если в крови присутствует RNA HCV, который определяется при анализе ПЦР, это указывает на наличие в крови вируса.

    При неправильной технике проведения исследования, нарушениях транспортировки и забора крови анализ ПЦР иногда может показывать ложноположительные результат. Анализы ИФА и RIBA на ранних стадиях заболевания, когда организмом еще не выработано достаточное количество антител, могут показывать ложноотрицательный результат.

    Если при расшифровке анализа на гепатит С получены положительные результаты, необходимо обращение к врачу-инфекционисту и гастроэнтерологу для дальнейшей диагностики и лечения.

    Нейтрофилы сегментоядерные понижены

    Тромбоциты у ребенка — норма, повышены, понижены

    Определить присутствие в организме гепатита одной из форм можно не сразу, поскольку инкубационный период заболевания может длиться до четырех недель. Когда же появляются первые признаки болезни, то в пораженном организме происходят радикальные изменения состава крови: биохимический анализ сообщает о серьезной проблеме со здоровьем и присутствии болезнетворного вируса. Однако для постановки окончательного диагноза вовсе недостаточно сдать кровь на гепатит, также необходима подробная диагностика гепатитов.

    Лабораторная диагностика гепатитов

    Проводить ее желательно после окончания инкубационного периода, чтобы врач с предельной точностью смог определить присутствующее в организме заболевание печенки. В противном случае назначенное лечение не даст желанного терапевтического эффекта и даже усугубит преобладающую клиническую картину.

    Как правило, диагностика гепатита A начинается с подробного расспроса пациента и назначения ряда анализов, которые необходимо выполнить в самые кратчайшие сроки. Это:

    • биохимический анализ крови;
    • полный клинический анализ крови;
    • метод ПЦР;
    • ИФА;
    • коагулограмма.

    Если прогрессирует болезнь Боткина, то по результатам биохимического анализа крови наблюдается аномальный скачок билирубина, АлАТ и АсАТ, тимоловой пробы. Мало того, вырабатываются специфические анти-ВГА IgМ, которые являются неопровержимым фактом присутствия в организме гепатита A.
    В общем анализе крови определяется спад лейкоцитов, скачок СОЭ и лимфоцитоз. И, тем не менее, самым надежным является метод ПЦР, который определяет показатель РНК болезнетворного вируса.
    Дополнительно врач изучает симптоматику заболевания, после чего может поставить окончательный диагноз и преступить к наиболее эффективной терапии. Необходимость в инструментальном обследовании возникает крайне редко. После успешного консервативного лечения в условиях госпитализации и карантина пациента ожидает окончательное выздоровление, причем повторно гепатит A не рецидивирует.

    Определить присутствие вируса гепатита B также можно по результатам лабораторных исследований, и для этого первым делом требуется сдать кровь на гепатит. По своей природе болезнетворный вирус имеет три главных антигена – НВsАg, НВcАg и НВеАg, к которым в организме вырабатываются антитела. Основным в данной клинической картине является ИФА – иммуноферментный анализ, который как раз и выявляет специфические маркеры гепатита B.
    Сразу стоит уточнить, что антиген НВsАg появляется в крови еще до первых симптомов гепатита и достоверно определяется в желтушном периоде. Однако отрицательный тест не исключает присутствия гепатита B, поэтому дополнительно требуется применение не менее эффективного метода полимеразной цепной реакции (ПЦР).
    При подозрении на гепатит обязательным является биохимический анализ крови, который рекомендуется сдать в самую первую очередь. Выполнение биопсии печени и УЗИ органов брюшины оговаривается индивидуально, но, когда история болезни предельно ясна, в клинических методах обследования не возникает необходимости.

    Эхограмма печени при аутоиммунном гепатите на стадиии хронического гепатита

    Для постановки этого диагноза вовсе недостаточно сдать кровь на гепатит, поскольку вирус может преобладать в организме в скрытой форме. И, тем не менее, основными лабораторными исследованиями являются все анализы, представленные выше, а также дополнительное выполнение биопсии печени. Это микроскопическое исследование биологического материала (в нашем случае кусочка ткани печени) определяет степень распространения патологического процесса и фиброз тканей. Забор материала выполняется под местным обезболивающим, осложнения такой процедуры выявляются в медицинской практике крайне редко.
    При подозрении на гепатит C основным методом клинического обследования является УЗИ органов брюшины. Объясняется это просто: болезнь часто проявляется визуальным изменением пораженной печени, переменами в ее структуре и размерах. Таким способом можно определить:

    • размеры печенки, селезенки, поджелудочной железы и желчного пузыря;
    • патологические изменения в этих органах;
    • состояние общего кровотока в органах брюшины;
    • оптимальную зону для выполнения биопсии печени.

    Этот метод клинического обследования определяет все очаговые патологии органа на микроскопическом уровне. Если на экране печень представлена в серой шкале, требуется немедленное проведение биопсии, поскольку серый цвет визуализирует пораженные ткани «человеческого фильтра».

    Поскольку болезнь проявляется не сразу, приступить к немедленному лечению получается далеко не во всех клинических картинах. Пациент может просто не знать о существовании в организме болезнетворного вируса, а тот, в свою очередь, стремительно распространяется в кровь и поражает здоровые клетки печени.
    Чтобы избежать столь трагичной участи, рекомендуется соблюдать все профилактические меры. Такая бдительность заметно сократит риск заболеваемости и избавит от серьезных проблем со здоровьем в будущем. Основные правила профилактики представлены ниже:

    • мыть руки после улицы;
    • подвергать качественной обработке свежие овощи, фрукты;
    • выполнять все профилактические прививки, указанные в ежегодном календарном плане;
    • избирательно относиться к сексуальным партнерам;
    • избегать контакта с больными людьми;
    • пользоваться только одноразовыми шприцами и проявлять особую бдительность на станциях переливания крови.

    Также рекомендуется регулярно (один раз в полгода) сдавать кровь на гепатит, чтобы удостовериться, что вирус не проник в организм, и не поражает некогда здоровые клетки печенки. Если же диагноз определен, требуется немедленно стать на диспансерный учет и следовать всем рекомендациям специалиста.

    Автор публикации:
    Сыропятов Сергей Николаевич
    Образование: Ростовский Государственный Медицинский Университет (РостГМУ), Кафедра гастроэнтерологии и эндоскопии.
    Гастроэнтеролог
    Доктор Медицинских Наук

    источник

    Специфическая лабораторная диагностика вирусных гепатитов основывается на применении иммунохимических и молекулярно-биологических методов исследований. Основными иммунохимическими методами являются радиоизотопный или радиоиммунный (РИА) и иммуноферментный (ИФА). В основе иммунохимических методов диагностики лежит специфическое взаимодействие антиген — антитело с последующим выявлением комплекса при помощи специальных меток. Наиболее распространенным является иммуноферментный анализ.

    Первые сообщения о применении иммуноферментного анализа, как метода для определения каких-либо веществ были опубликованы в 1971 году одновременно двумя исследовательскими группами — В. Van Weemen, A. Schuurs и Е. Engvall, P. Perlmann. В основе иммуноферментного анализа лежит следующий принцип: на твердой фазе, в качестве которой используется, главным образом, поверхность лунок полистиролового планшета, фиксируется антиген возбудителя инфекции или антитела (часто смесь антител) к антигенам, которые необходимо обнаружить. Этот антиген или антитела, которые зафиксированы на твердой фазе, называются иммуносорбентом.

    В результате инкубации иммуносорбента и испытуемой сыворотки при наличии определяемого агента происходит их связывание в комплекс антиген — антитело. После процедуры промывки, в ходе которой удаляются несвязанные антигены и антитела, проводится инкубация с конъюгатом. В качестве конъюгата при детекции HBsAg используют анти-HBs, при детекции антител к вирусу гепатита С —антитела к иммуноглобулинам человека (антивидовой конъюгат), меченные пероксидазой хрена. В итоге этой инкубации происходит присоединение к уже имеющимся комплексам антиген — антитело дополнительно внесенного конъюгата. После удаления несвязавшегося конъюгата (отмывки) в лунки вносится субстрат. При использовании пероксидазного конъюгата в качестве субстрата используют перекись водорода в сочетании с индикатором, в качестве которого наиболее часто применяют ортофенилендиамин (ОФД) или тетраметилбензидин (ТМБ). Результат оценивается фотометрически.

    Качество и надежность аналитических возможностей иммуноферментного метода характеризуются рядом критериев, к числу которых относятся чувствительность, специфичность, правильность и воспроизводимость.

    Чувствительность — то минимальное количество вещества, которое может быть обнаружено при помощи иммуноферментного анализа. При этом нижним пределом чувствительности данного метода является концентрация исследуемого вещества в образце, которая соответствует наименьшему положительному результату определения, статистически достоверно отличающемуся от показателей заведомо отрицательных образцов. Чувствительность ИФТС зависит от ряда обстоятельств, связанных как с конструкцией тест-системы (аффинность иммуносорбента, качества экстракционных и буферных систем), так и разрешающей способностью и точностью метода регистрации.

    Специфичность — способность выявлять именно те компоненты, для определения которых предназначена данная иммуноферментная тест-система. Специфичность ИФА определяется во многом перекрестной реакцией антител или антигенов (то есть композиции, используемой в качестве иммуносорбента), с близкородственными соединениями, а также составом инкубационной среды (матрикс-эффект).

    Правильность — соответствие среднего значения результатов повторных определений одного и того же контрольного образца с истинной величиной измеряемого параметра. Правильность определения в ИФА зависит от качества самой тест-системы и контрольного образца. Для хороших иммуноферментных тест-систем показатели правильности лежат в пределах 90-110 %. Особенностью медико-биологических исследований в ИФА является невозможность установления точной величины, и поэтому за истинную величину принимается средняя от нескольких экспертных лабораторий. Статистическим критерием правильности служит средняя арифметическая и степень ее отклонения от истинного значения, выраженная в процентах.

    Воспроизводимость — способность тест-системы показывать одни и те же значения при повторных исследованиях одного и того же образца. Воспроизводимость зависит как от случайных погрешностей (ошибок) при проведении процедуры постановки реакции, так и от качества тест-систем и точности метода регистрации результатов. Считается, что воспроизводимость одних и тех же контрольных образцов одной фирмы в разных лабораториях не должна превышать величину коэффициента вариации в 15%.

    Существует несколько специфических схем ИФА для определения маркеров вирусных гепатитов: а) прямой иммуноферментный анализ; б) непрямой иммуноферментный анализ; в) конкурентное ингибирование; в) «ловушеч-ный», или «capture» метод.

    Из молекулярно-биологических методов диагностики вирусных гепатитов чаще используются полимеразная цепная реакция и гибридизация. Эти методы, особенно ПЦР, позволяют выявлять очень малые количества специфической вирусной ДНК или РНК и, таким образом, судить о репликации, а в ряде случаев и об активности репликации.

    источник

    При подозрении на гепатит первым делом пациент беседует с врачом, чтобы понять возможные причины заболевания. Нередко начальная стадия гепатита напоминает простуду :

    Для лечения печени наши читатели успешно используют Leviron Duo. Видя, такую популярность этого средства мы решили предложить его и вашему вниманию.
    Подробнее здесь…

    Читайте также:  Анализы для обследования гепатит в

    При подозрении на гепатит первым делом пациент беседует с врачом, чтобы понять возможные причины заболевания. Нередко начальная стадия гепатита напоминает простуду : повышенная температура тела, появление желтого оттенка кожи, хроническая усталость. После этого врач назначает сдачу анализов.

    Прежде всего, если симптомы пациента приближены к вышеописанным, назначается обследование, которое включает в себя биохимический анализ крови и анализ на антитела. Врач также может попросить сделать анализ ПЦР.

    Это анализ, позволяющий определить генетический материал вируса гепатита. ПЦР существует качественный и количественный. Качественный определяет лишь факт инфицирования пациента, но не может установить стадию и прогресс заболевания. Количественный метод дает полную картину о стадии развития гепатита, ее интенсивности, а также об эффективности лечения.

    Это специфическая диагностика, направленная на получение показателей, присущих каждому виду возбудителей болезни. Такие анализы можно разделить на 2 группы:

    Он предназначен для точной диагностики заболевания, определения стадии болезни и ее возбудителей. Такой анализ на гепатит основан на качественных и количественных измерениях антител (антигенов), а также гормонов. Наличие в крови таких антител, их процентное соотношение, дает возможность определить тип возбудителя. Для этого анализа нужно высокоэффективное, дорогостоящее оборудование и качественные реактивы. Но при большой стоимости исследования и длительности, данный метод диагностики является самым эффективным и точным.

    Данный анализ называют «экспресс-тестом». Он сравнительно молодой в применении и используется для быстрой диагностики гепатита, не требующего использования дорогостоящего оборудования. Данный тест проводится с помощью индикаторных полосок, панелей или тест-кассет. Его преимущества – это быстрое визуальное определение содержания антител, гормонов и других важных веществ в организме, а также отсутствие нужды в непосредственном присутствии пациента во время анализа. Но чувствительность и надежность теста уступает иммуноферментному анализу (ИФА).

    Итак, сдача биохимического анализа крови, анализа ИФА или ИХА, а также ПЦР позволяет своевременно и правильно диагностировать гепатит и назначить эффективное лечение. Методы ИФА и ИХА идентичны и взаимозаменяемы. Если ваши симптомы болезни слабо выражены и вы не нуждаетесь в точном определении возбудителей вируса и стадии болезни, то анализ ИХА будет подходящим для исследования. ИФА же предназначен для более точной картины заболевания. Какой именно анализ выбрать: ИФА или ИХА, лучше выбрать совместно с лечащим врачом.

    Как выполняются анализ крови на гепатит С и расшифровка результатов, каковы последующие действия? Столкнувшись с такой проблемой, как необходимость определения наличия или отсутствия данного заболевания, обратитесь к специалисту. Помимо высокой генетической изменчивости вирус гепатита имеет способность к всевозможным мутациям.

    Несмотря на большую способность иммунной системы к защите, организм зараженного не может держать под контролем продуцирование нужных антител. Пока организм вырабатывает необходимые антитела на один вирус, в крови зараженного проявляются все новые мутации. Инфицирование гепатитом С возможно гематогенным путем. Наиболее подвержено вирусу молодое поколение. В большинстве случаев гепатит С диагностируют в хронической форме, которая не излечивается самостоятельно, поэтому необходимо сдать анализы и провести расшифровку.

    Для выявления болезни используют комплексные анализы, методы иммуноферментного анализа (ИФА) и полимеразную цепную реакцию (ПЦР).

    С помощью применения метода ИФА обнаружение антител происходит не ранее 6-8 недель после заражения. На протяжении всего времени после заражения в крови активно продуцируются антитела класса IgM. Затем, спустя 11-12 недель после инфицирования, в крови пациента появляются антитела класса IgG.

    Согласно расшифровке анализа крови на гепатит С, выявление IgG в течение длительного времени указывает на хроническое течение болезни. В крови больного появляются антитела IgМ, что характеризует обострение данного заболевания. ПЦР-диагностика устанавливает присутствие инородных антител вируса в крови и уровень активности инфекционного процесса, кроме того, метод способен помочь провести высококачественную и количественную диагностику.

    В том случае, если вы контактировали с носителем гепатита С, иммунная система могла самостоятельно справиться с вирусом. Тогда необходимо сделать дополнительные тесты во избежание осложнений. Помните, что главное — сохранять спокойствие, даже если тест дал положительный результат и заболевание повредило печень. Доверьтесь хорошему специалисту и пройдите курс лечения. Существует большое количество комплексов и медикаментозных средств, с помощью которых вы сможете сохранить здоровье печени.

    Только ваш врач может интерпретировать индивидуальные результаты тестирования и устанавливать клинический диагноз.

    Вирусный гепатит является наиболее тяжёлым инфекционным заболеванием, которое способно длительное время скрытно протекать в организме человека. Благодаря анализу крови на гепатит можно выполнить своевременную диагностику этой серьёзной болезни. Сегодня существует большое количество разновидностей представленного заболевания, но все они поражают печень человека и создают нагрузку на этот орган.

    • Как происходит исследование крови на гепатит А?
    • Как сдаётся анализ крови на определение при гепатите В?
    • Вирусная нагрузка при гепатите С
    • Каким образом происходит вирусное поражение печени?
    • Наиболее распространённые симптомы гепатита
    • Диагностические методы при воспалениях печени
    • Расшифровка анализа ПЦР при гепатите С

    Вирусным гепатитам свойственная разная этиология, поэтому специалисты используют отдельные методы их быстрого обнаружения. Наиболее распространённые болезни, которые были вызваны инфекционными или вирусными факторами – это паротонит, лихорадка, герпес, цитомегаловирусная инфекция, краснуха, а также СПИД. В некоторых случаях болезни появляются по причине возникновения токсического фактора или специфическим аутоиммунным заболеванием. Нередко люди сами ухудшают своё состояние здоровья, когда употребляют алкоголь, лекарства без назначения врача, а также дышат химическими реактивами без должных мер безопасности. Это нагрузки из-за которых организм человека постепенно ослабевает и теряет свои защитные функции.

    Наилучшие методы дифференциальной диагностики – это исследование анализа крови. Каждый врач подбирает способ исследования исходя из поставленного диагноза. Для этого необходимо внимательно выслушать пациента и проанализировать все классические симптоматические проявления.

    Представленная вирусная форма заболевания является инфекционной болезнью, которая создаёт нагрузки на печень. Сами бактерии сразу же попадают в кишечник с заражёнными продуктами или водой. Инкубационный период при этой форме гепатита составляет около одного месяца, после чего появляются основные симптомы – дисперсия, лихорадка, желтуха.

    В некоторых случаях гепатит А не нужно лечить, потому что он проходит самостоятельно, без приёма лекарственных препаратов. Такая болезнь достаточно тяжело переносится маленькими детьми до одного года, взрослыми и пожилыми людьми. Организму малыша трудно справиться с возникшей нагрузкой на печень. Во время лечения перед врачом стоит задача вывести все вредные вещества из организма человека, и полностью очистить печень от вирусной болезни.

    Ниже приведены основные показания при выявлении которых человек должен немедленно обратиться за квалифицированной помощью:

    • Любые клинические проявления болезни;
    • Высокие показатели содержания АсАт, а также АлАТ в проведённом биохимическом анализе крови;
    • Наличие холестаза;
    • После контакта с человеком, который болен вирусным гепатитом А.

    Кровь сдаётся в утреннее время и натощак. Бывают случаи, когда проведение сбора анализа приходится на послеобеденное время. Тогда пациентам необходимо воздержаться от приёма пищи на восемь часов. Если во время расшифровки выявлены титр анти- HAV IgG, то это говорит об остром течении заболевания. Гепатит создаёт большие нагрузки на печень и организм в целом, поэтому не нужно откладывать поход к врачу.Различные вирусные формы оказывают негативное воздействие и могу перерастать в хроническую болезнь.

    Гепатит формы В — вирусная тяжелая болезнь, которая может представлять угрозу для жизни человека. Заражение происходит несколькими распространёнными способами:

    • Вирусные инфекции попадают непосредственно в кровь;
    • Половой контакт с больным;
    • Мать заражает своего ребёнка во время родов.

    Инфицирование может происходить даже в маникюрном салоне, во время пирсинга, татуажа, а также в лечебных учреждениях. Вирусный гепатит В максимально быстро проникает в кровь через имеющиеся повреждения в кожных и слизистых покровах. Уже через несколько дней человек может почувствовать умеренную нагрузку на печень.

    Лабораторная диагностика представленного заболевания возможна двумя способами – это метод ИФА и ПЦР-диагностика. Специалисты проверяют кровь на наличие вирусного генетического материала. Представленные способы позволяют определить даже незначительное количество вируса в крови. Сдать анализы можно в любой клинике, диагностическом центре, лаборатории и других медицинских учреждениях.

    Такое заболевание может менять собственную генетику, а также подвергается к различным мутациям. Во время выработки нужных антител на конкретные вирусы, в крови человека могут развиваться новые мутации патогена. При этом организм человека испытывает сильную нагрузку. Именно поэтому иммунная система не всегда может осуществлять полный контроль продуцирования необходимого антитела. Вирусные инфекции очень быстро распространяются в крови.

    Заражение гепатитом формы С происходит при помощи гематогенного пути. В зону риска попадают молодые люди и подростки. Эта вирусная болезнь диагностируется только в хронических формах, которые уже невозможно вылечить самостоятельно. Чтобы определить гепатит С? необходимо сдать кровь на иммуноферментный анализ и полимерную цепную реакцию. Расшифровка анализа на гепатит С проводится исключительно высококвалифицированными специалистами.

    После того как в организм человека попадут вирусные частицы, то они будут быстро доставлены к печени. Она подвергается сильным нагрузкам и испытаниям, поэтому лучше всего своевременно обращаться за помощью. Особенные структуры на поверхности предоставляют все возможности для избирательного крепления бактерий к стенкам печени. Следующий этап инфицирования – это встраивание генетического материала в клетки для дальнейшего воспроизводства.

    В некоторых случаях у пациентов может наблюдаться токсическое поражение печени и нагрузки на неё. Этот орган выполняет большое количество главных функций. В первую очередь — это деактивация и устранение токсинов из организма человека. Увеличенное количество вредных веществ приводит к поражению. Клетки не в состоянии справиться с сильными нагрузками и выполнять обменные процессы, поэтому органические вещества в виде жира постепенно откладываются в печени.

    Такое негативное воздействие мешает нормальной работе клеток печени, поэтому через некоторое время у пациента отмечается частичная утрата функциональных способностей синтеза белковых молекул, трансформация и отправка белков.

    При инфицировании гепатитом человек может почувствовать следующие симптомы. После этого необходимо сразу же обратиться за квалифицированной помощью.

    • Болезненные ощущения в правом подреберье. В большинстве случаев боль носит постоянный характер, а при ощупывании она может усиливаться.
    • Ахоличный или светлый кал.
    • Моча становится тёмно-коричневого цвета.
    • Кожные покровы приобретают желтоватый оттенок;
    • Из-за сильной нагрузки печень перестаёт выполнять все возложенные на неё функции и человек чувствует тянущие боли.

    Все вышеперечисленные симптомы являются общими абсолютно для всех известных форм гепатита. Но для каждого отдельного вида существуют свои отличительные особенности.

    Для обнаружения гепатита врачи используют УЗИ и лабораторные исследования. Также наиболее распространённым и действенным способом обнаружения вируса является количественный анализ.

    Можно выделить несколько признаков гепатита:

    1. Повышенные показатели трансаминаза. Специалисты определяют ферменты неспецифической воспалительной реакции. Они высвобождаются в кровеносные сосуды во время воспалительных реакций организма. Текущее состояние уровня трансаминаза даёт полное представление про объём поражённых тканей и нагрузке на организм.
    2. Повышенные показатели уровня билирубина. На сегодняшний день такой показатель является специфическим признаком для гепатита. Всем известно, что билирубин выводится из печени в виде жирной кислоты. Если в организме человека есть воспалительный процесс, то все ткани печени работают неправильно.

    Чтобы определить в крови наличие вирусов гепатита С и поставить максимально точный диагноз врачи широко применяют метод полимеразной цепной реакции. Представленное исследование предоставляет все возможности для быстрого обнаружения небольшого количества вируса в крови.

    При этом такие анализы показывают высокую точность и являются наиболее действенными. Исследование ПЦР и количественный метод помогает определить наличие гепатита С даже на ранних стадиях, спустя пять дней с момента инфицирования. На этом сроке ещё не успели появиться антитела. Существует несколько разновидностей анализа ПЦР:

    • Количественный. Представленный метод предоставляет все возможности для определения вируса, а также возможную нагрузку на организм человека. Количественный анализ считается важным и эффективным для определения правильного лечения пациента.
    • Генотпирование. Такой метод позволяет точно установить существующий генотип вируса гепатита С. Это необходимо для того, чтобы определить продолжительность и верную тактику лечения больного. Вирус гепатита С включает в себя около десяти генотипов. Все они в некоторой степени создают нагрузку на иммунную систему человека.

    Количественный анализ на гепатит С проводится в следующих случаях:

    • Когда текст показал положительный результат, так как в сыворотке РНК присутствует вирус гепатита С.
    • Чтобы максимально точно и правильно определить эффективное лечение для пациента.
    • Назначение действенной тактики лечения больного.

    Если у человека нет данного заболевания, то в расшифровке будут полностью отсутствовать РНК вирусы, антитела и антигены к ним. Когда в крови присутствуют данные вещества, то это говорит о наличие гепатита С в хронической или острой форме. В некоторых случаях лаборанты находят РНК вирусы во время выздоровления. Наличие RNA HCV при количественном анализе говорит о присутствии вируса в крови.

    Если во время забора крови была использована неправильная техника проведения исследования, нарушены условия для транспортировки и забора анализа, то результаты могут быть ложными.

    Когда расшифровка количественного анализа на определение гепатита С дала положительный результат, то необходимо срочно обратиться за помощью к врачу-инфекционисту, а также гастроэнтерологу. Он проведёт тщательное обследование и определит дальнейшую диагностику и лечение.

    источник