Меню Рубрики

Результат пцр анализа на гепатит положительный

Гепатит С является одним из наиболее распространенных заболеваний печени у человека. Диагностировать его можно своевременно. Соответственно, от этого будет зависеть скорость и эффективность лечения. Далее будет рассказано, как правильно сдавать анализ на гепатит С. Расшифровка тех или иных исследований тоже будет предложена нашему вниманию. Какие именно анализы необходимо сдать? Какие отклонения могут наблюдаться у человека, заболевшего гепатитом C? Обо всем этом будет рассказано далее. В действительности все намного труднее, чем кажется.

Гепатит С является довольно распространенным заболеванием. Оно появляется вследствие заражения человека соответствующим вирусом гепатита. Передается он в основном при попадании крови зараженного в организм здорового гражданина.

Различают две формы заболевания — хроническую и острую. Обычно при втором типе болезни у пациента отсутствуют всякие проявления недуга. Лишь изредка наблюдается желтушный оттенок кожи, тошнота, рвота, изменение цвета кала и мочи, потеря аппетита, повышенная утомляемость и боли в животе.

Чтобы точно диагностировать заболевание на ранних стадиях, необходимо сдать анализ на гепатит С. Расшифровка данного исследования будет предложена позже. Для начала придется узнать, какие методы диагностики будут использоваться.

На самом деле их очень много. Заболевшему придется сдать огромное количество анализов. К счастью, почти все они сводятся к исследованию венозной крови. Поэтому большинство анализов удастся сдать за один раз.

Итак, среди основных методов диагностики гепатита С выделяют следующие исследования:

  • общий анализ крови;
  • общий анализ мочи;
  • биохимия крови;
  • ПЦР;
  • выявление антител к HVC;
  • анализ крови к антителам печени;
  • биопсия печени.

На практике чаще всего именно первые 5 анализов делаются всегда. А вот исследование на антитела печени и биопсия являются крайне редкими. Они зачастую требуются не для подтверждения диагноза, а для правильного лечения и поиска причины заболевания. Далее будет более подробно рассказано о каждом методе.

Но для начала необходимо понять, в каких случаях потребуется сделать анализ на гепатит С. Расшифровка всех полученных результатов должна проводиться только опытным врачом. Иначе можно ошибиться в показаниях. Для некоторых категорий граждан подобные ошибки не допускаются.

Сдавать анализ на гепатит С должны:

  • планирующие беременность пары;
  • беременные женщины;
  • люди, у которых есть подозрения (признаки) на заболевание;
  • доноры органов/крови;
  • наркоманы;
  • люди с ВИЧ-заболеванием;
  • граждане, ведущие беспорядочную половую жизнь;
  • медицинские работники;
  • сотрудники МВД.

Остальные люди сдают данный анализ по желанию. Рекомендуется проверять здоровье раз в год. Этот прием поможет вовремя диагностировать заболевание, если оно появится.

Хочется сдать анализ на гепатит С? Расшифровка данного исследования на самом деле не такая уж и трудная. Но многое зависит от того, какой именно анализ будет сдаваться.

К каждому методу диагностики необходимо правильно подготовиться. К счастью, анализ на гепатит С никаких особенностей не имеет. Если речь идет о сдаче крови, необходимо просто делать это натощак. Придется не принимать пищу около 8-10 часов.

При сдаче мочи рекомендуется за несколько дней до сбора биологического материала отказаться от жирной и жареной пищи и вредных привычек. Потребуется принести в лабораторию первую утреннюю урину. Именно она является наиболее информативной. Больше никаких особенностей подготовка к исследованиям не имеет.

Теперь немного о каждом типе анализа и его расшифровке. Что должно насторожить человека в том или ином случае? Желательно не заниматься самолечением и самодиагностикой. Как уже было сказано, опытные врачи смогут быстро определить наличие гепатита С у пациента. Но по каким признакам?

Начнем с общих анализов крови и мочи. Как было подчеркнуто ранее, цвет урины меняется. Он темнеет. А какие еще изменения могут быть заметны?

Для этого необходимо изучить результаты проведенных исследований. При гепатите C наблюдаются следующие изменения (преимущественно в анализе крови):

  • уменьшаются такие составляющие, как гемоглобин, лейкоциты и тромбоциты;
  • лимфоциты повышаются;
  • наблюдается нарушение свертываемости крови;
  • увеличивается СОЭ.

Также в моче может быть обнаружен уробелин. Данное вещество указывает на наличие нарушений в работе печени. И не более того.

Как обнаружить маркеры гепатита С? Расшифровка анализов поможет понять, есть ли у человека данное заболевание. После общих исследований необходимо сдать кровь на биохимию. Это расширенный метод диагностики большинства болезней.

При гепатите C наблюдаются следующие изменения:

  • ферменты печени повышаются (АЛТ и АСТ);
  • повышается уровень глутамилтранспептидазы щелочной фосфатазы;
  • билирубин возрастает;
  • альбумины снижаются;
  • гамма-глобулины повышаются;
  • триглицериды в крови увеличиваются.

Именно так будет меняться биохимический анализ крови при гепатите С. Расшифровка подобного плана действительно помогает судить о наличии заболевания. А какие существуют нормы перечисленных веществ? Какие ограничения помогают судить о повышении или понижении той или иной составляющей?

В целом ситуация складывается неоднозначная. На сегодняшний день у мужчин и женщин в крови содержится разное количество перечисленных составляющих. Человек сдал на гепатит С анализы? Расшифровка (норма веществ) биохимии крови будет такой:

  • ферменты печени у мужчин должны содержаться в количестве до 41 МЕ/л, у женщин — до 31 МЕ/л;
  • уровень содержания глутамилтранспептидазы щелочной фосфатазы не превышает 150 МЕ/л;
  • желтый пигмент в норме — до 27-34 мкмоль/л.

Именно на такие нормы необходимо ориентироваться человеку. При сдаче крови на биохимический анализ в частных клиниках предельные значения нормы обязательно будут указаны непосредственно в результатах.

Следующий весьма информативный тест — это проведение анализа ПЦР. Данный вариант предлагает количественный анализ на гепатит С. Расшифровка исследования подразумевает поиск клеток вируса даже при их минимальной концентрации. Точный результат можно получить уже через 5 дней с момента предполагаемого инфицирования.

Немного о расшифровке. Если результат проведенного анализа положительный, это значит, что гепатит С имеется в организме. На момент забора крови из вены заболевание находится в активной фазе.

Особенностью ПЦР-диагностики является то, что она может быть как качественной, так и количественной. Существенной разницы в этом нет. Расшифровка результатов будет одинаковой. Если будет обнаружен гепатит С (качественный анализ), расшифровка результата исследования укажет на положительную реакцию. То есть тест окажется положительным. В противном случае он будет отрицательным.

Теперь немного о количественном анализе ПЦР на гепатит С. Дело все в том, что такой вариант выбирается после обнаружения клеток заболевания в крови. Он помогает устанавливать степень развития болезни. Прекрасный способ подбора правильного лечения.

Найден вирус гепатита С? Количественный анализ, расшифровка которого будет приведена ниже, показывает степень вирусной нагрузки на организм. Она может быть высокой и не очень.

Так, если качественный ПЦР-анализ положительный, рекомендуется отдать предпочтение количественному. Он поможет понять, как правильно лечить человека.

В расшифровке анализов будет подразумеваться объем РНК HVC, содержащийся в крови. Если результаты показали 400 000 МЕ/л, то такой результат можно считать средним. Соответственно, показания ниже указанного минимума — это низкая вирусная нагрузка. А при значении количественного анализа на гепатит С выше 800 000 МЕ/л, предполагается сильная нагрузка заболевания на организм.

Помимо всего прочего, можно определить антитела к гепатиту С. Расшифровка анализа сводится к указанию антител не только ко всем типам изучаемого заболевания, но и к печеночным антигенам.

Такой вариант диагностики может проводиться как в виде обычного исследования, так и посредством экспресс-теста. Для последнего используют как кровь, так и слюну. При окрашивании полоски в определенный цвет (согласно инструкции), можно говорить о наличии антител к гепатиту C у человека. Преимуществом экспресс-тестов является то, что их разрешается выполнять на дому.

Обычно расшифровка исследования сводится к указанию наличия/отсутствия антител к изучаемому заболеванию. Если пришел положительный результат, в организме они имеются. В противном случае говорить о наличии антител к гепатиту и печеночным клеткам нельзя.

Теперь понятно, как подготовиться к той или иной диагностике, а также каким образом расшифровать результаты проведенных исследований. На самом деле все намного проще, чем кажется.

Наиболее простым решением при наличии изучаемого заболевания является анализ крови при гепатите C. Расшифровка ПЦР-диагностики (самый информативный способ) сводится к определению наличия/отсутствия вируса, а также к выяснению его нагрузки на организм. Ничего трудного в этом нет.

Как правило, все перечисленные методы диагностики могут оказаться ложноположительными или ложноотрицательными. Поэтому рекомендуется при подозрениях на гепатит сдать несколько разных анализов. Только так удастся 100% подтвердить результаты.

На практике неверные итоги диагностики встречаются не очень часто. Обычно они возникают при нарушении процедуры забора биоматериала для дальнейшего исследования. Например, при загрязнении мочи или крови. Если в крови есть гепарин, результаты могут прийти неверные. Химические или белковые субстанции — это еще несколько причин, по которым анализ на гепатит С не позволяет точно понять, болен ли человек. При подозрительных результатах рекомендуется повторить исследование через некоторое время.

источник

  1. Анти–HCV.
    Это скрининговое иммуноферментное исследование (ИФА), которое выявляет антитела к этому вирусу. Данный анализ доступен, проводится во всех медицинских лабораториях.
  2. РИБА.
    Рекомбинантный иммуноблотинг. Применяется в случае положительного ИФА для подтверждения его специфичности. Это развернутое исследование, направленное на идентификацию обнаруженных антител.
  3. ПЦР.
    Полимеразная цепная реакция относится к наиболее информативным методам диагностики. С помощью такого обследования определяют наличие вируса, количество возбудителя. По его результатам судят, насколько эффективным было лечение. Динамика вирусной нагрузки позволяет судить об активности процесса.
  4. Генотипирование.
    Относится к разновидности полимеразной цепной реакции. Проводится при выявлении положительных результатов. После определения генотипа вируса назначается соответствующее лечение.

Рекомендуется сдавать кровь на маркеры гепатитов В и С каждые 6 месяцев медицинским работникам, военнослужащим и сотрудникам полиции.

Также обязательно такое исследование для пациентов, перенесших трансплантацию органов или находящихся на гемодиализе.

Если во время первичного исследования ИФА выявляется положительный анализ на гепатит С, имеет значение вид обнаруженных антител (Ig). Эти вещества появляются при попадании вируса в организм человека. Их обнаружение определяет стадию и степень заболевания. Выделяют 2 вида иммуноглобулинов:

  • Ig М.
    Обнаружение таких белков указывает на острую фазу болезни, недавнее заражение и сильное поражение гепатоцитов. При проведении ИФА в динамике наблюдается нарастание титра антител. У пациента проявляется характерная клиническая симптоматика: желтуха, тяжесть в правом подреберье, немотивированная усталость, изменение цвета мочи и фекалий.
  • Ig G.
    Свидетельствуют о хроническом, вялотекущем или латентном течении гепатита. Никаких проявлений заболевания в этот период не наблюдается. Человек чувствует себя хорошо. Такой положительный результат выявляется при подготовке больных к хирургическим вмешательствам, скрининге беременных или при случайном обследовании.

Если антитела к гепатиту с положительные, это означает, что в организме есть специфические антигены. Следовательно, у больного уже присутствовал этот вирус.

Получение такого ответа свидетельствует о том, что антитела или вирус гепатит С не обнаружен либо концентрация вируса ниже допустимого предела чувствительности, определяемого данным методом.

Отрицательный результат бывает получен при генотипировании. В этом случае на бланке анализа указывается «не типируется». Такое встречается редко и означает, что генотип вируса не может быть определен или не соответствует ни одному из имеющихся. Врачи рекомендуют такое исследование переделать.

Причиной ложноположительных результатов являются:

  • Онкологические процессы в организме.
  • Беременность или период лактации у женщин.
  • Аутоиммунные заболевания соединительной ткани.
  • Туберкулез.

Нельзя сдавать кровь во время острых респираторных вирусных инфекций, сразу после еды. Это тоже приводит к получению ложных положительных обследований.

Иногда бывает так, что при взятии крови на гепатит C обнаруживается положительный результат. При последующей пересдаче, исследовании другими способами выясняется, что первый анализ выполнен ошибочно.

  • Не соблюдении условий транспортировки или хранения образцов крови.
  • В результате использования просроченных или несертифицированных реактивов.
  • При случайной ошибке или халатности лаборанта.
  • При воздействии горячей или холодной температуры.

Для опровержения или подтверждения полученных положительных результатов, необходимо пересдать их, желательно в другой лаборатории. Параллельно с этим рекомендуется выполнить биохимический анализ крови УЗИ или МРТ брюшной полости

Этот результат обследования свидетельствует о том, что у пациента обнаружены антитела к вирусу, но при повторной сдаче крови с помощью полимеразной цепной реакции этот вирус не определяется.

Такое встречается в нескольких случаях:

  • При неправильном заборе крови либо некачественном выполнения самого анализа.
  • Если такое выявлено при беременности, то назначается повторное ПЦР. Если она положительна, то диагноз гепатита C подтверждается.
  • Подобное наблюдается у больных, перенесших ранее это заболевания. Активная вирусная нагрузка отсутствует, но циркулируют уже имеющиеся антитела.

Если у пациента выявлен положительный результат, то для многих это является шокирующим известием. В такой ситуации рекомендуется повторно пересдать ПЦР, ИФА. Затем необходимо сделать следующее:

  • Обратиться к гепатологу, терапевту или инфекционисту.
  • Сдать клинический анализ крови и мочи, биохимию ( трансаминазы, белок, билирубин прямой, непрямой, гамма – глутамилтрансфераза).
  • Сделать УЗИ печени, МРТ брюшной полости.
  • Выполнить фиброэластометрию печени для определения степени фиброза.
  • Обязательно сделать прививку от гепатита В.

Диагноз гепатита C совсем не является приговором. Он успешно лечится. В зависимости от генотипа применяют 24-х или 48-и недельный курс терапии. После проведенного лечения ИФА всегда положительное, а при проведении ПЦР будет наблюдаться снижение или полное отсутствие вирусов в крови.

источник

Полимеразная цепная реакция, или ПЦР, – это метод определения РНК и ДНК вируса в различных биологических образцах. Он был открыт более 30 лет назад американским исследователем Кэри Мюллисом. За эту разработку ученый получил Нобелевскую премию по химии. Сегодня ПЦР – золотой стандарт диагностики, который применяется при исследовании наследственных, инфекционных, онкологических заболеваний. ПЦР на гепатит С – самый надежный метод обнаружения вируса начиная с первой недели после инфицирования.

Читайте также:  Время анализа на гепатит с

Полимеразная цепная реакция – это технология, основанная на умножении количества ДНК вирусов в биоматериале. Для лаборатории берется мазок, соскоб, моча, сперма, кровь. Далее производится многократное клонирование содержащегося в ней генетического материала. За 20-35 таких циклов можно получить материал, достаточный для того, чтобы сравнить его с образцами, соответствующими вирусам, бактериям, грибам и т.д. Если по исследуемому пункту обнаружится совпадение, реакция считается положительной.

По результатам ПЦР можно судить не только о наличии вирусной частицы в организме, о том, к какому генотипу она принадлежит, а также о концентрации возбудителя.

ПЦР на выявление гепатита С играет огромную роль. Этот вирус быстро мутирует, обходит иммунные барьеры, не вызывает классических симптомов инфицирования. Но многих его последствий можно избежать, если обнаружить угрозу на ранней стадии.

ПЦР — метод молекулярного анализа, который позволяет обнаружить генетический материал возбудителя уже на первой неделе после инфицирования.

Анализ крови на гепатит С проводится в лаборатории медицинского учреждения или лицензированного предприятия. Это довольно дорогое исследование, кроме того, нет необходимости назначать его всем подряд в целях профилактики. Но есть ряд показаний, при которых ПЦР играет ключевую роль:

  • незащищенный половой контакт с больным;
  • донорство, использование нестерильных шприцев и игл для татуажа, бритвенных и маникюрных принадлежностей, другие формы контакта с кровью зараженного;
  • цирроз печени;
  • положительный ИФА на гепатит;
  • диагностированный гепатит В.

Кровь на ПЦР сдается утром на голодный желудок. Накануне не курите перед сном и не употребляйте алкоголь. Откажитесь от жареной и острой пищи, дайте отдых мышцам. Этих мер вполне достаточно для получения достоверных данных.

Есть около 15 методик ПЦР. Но все это узкоспециализированные, иногда экспериментальные исследования. В медицинской практике речь идет о трех исследованиях – качественный, количественный методы ПЦР гепатита С и генотипирование. Все они эффективны, но позволяют судить о разных аспектах заболевания.

ПЦР качественный дает всего два ответа: наличие или отсутствие вируса. Если РНК гепатовируса С содержится в достаточном количестве, чтобы преодолеть порог чувствительности теста, то реакция даст положительный результат, и лаборатория выдаст вердикт «обнаружено». При отсутствии патогена или его незначительных концентрациях, анализ ПЦР на гепатит выдаст результат «не обнаружено», но тогда будет сложно судить о заражении гепатитом.

Если подозрения серьезны, а тест «чист», можно провести особо чувствительное качественное исследование – ПЦР ультра. Это гибридно-флуоресцентный метод, который выделит РНК патогена, даже если его пропустил классический анализ ПЦР. Исследование имеет ряд показаний:

  • первые дни после заражения;
  • скрытый гепатит;
  • проверка отрицательного ПЦР;
  • мониторинг хода терапии.

Количественный анализ ПЦР при гепатите С позволяет определить вирусную нагрузку. Этот параметр означает концентрацию единиц болезнетворного микроорганизма в миллилитре крови, то есть позволяет судить о количестве вируса.

Если вы проходите терапию, то изменение концентрации вируса расскажет о том, эффективно ли лечение. Анализ крови проводится через 1, 3 и 6 месяцев после начала приема препаратов. Через полгода после такого курса инфекционист рекомендует контрольный ПЦР.

Этот же метод определяет степень риска для окружающих, такой параметр еще называют инфекционностью. Чем больше вирусных частиц в крови, тем выше риск заразить тех, с кем контактирует зараженный.

Медицине известны 11 генотипов гепатита С, в России чаще фигурируют 1, 2 и 3 субтипы. Исследование с генотипированием поможет уточнить, к какой именно группе принадлежит вирус гепатита.

Генотипирование имеет разные прикладные задачи. Например, оно позволяет определить, какой препарат с большей вероятностью уничтожит вирус, а к какому он окажется устойчив. Разные виды гепатовирусов по-своему поддаются терапии, например, 1 генотип требует продолжительного лечения. Курс длится около года и помогает в 6 случаях из 10. Со 2 и 3 штаммами ситуация обстоит проще – лечение занимает всего полгода, а выздоровление наступает уже у 85% пациентов.

Зная генотип гепатовируса, можно спрогнозировать осложнения. Так, при 3 штамме в гепатоцитах накапливается жир, это состояние называют стеатозом, жировым гепатозом или жировой инфильтрацией печени. В худших случаях это может стать началом цирроза печени.

Чтобы расшифровать количественный анализ ПЦР на гепатит, нужно сопоставить полученные данные с референсными значениями.

Показатель Вирусная нагрузка Значение
Не обнаружено В пределах нормы Слишком мало вирусных частиц или их полное отсутствие
До 1,8*10 2 МЕ/мл Крайне низкая Требуется повторить анализ
До 8*10 5 МЕ/мл Низкая Прогноз благоприятный
От 8*10 5 МЕ/мл до 8*10 5 МЕ/мл Средняя Хронический вирусный гепатит
Больше 8*10 5 МЕ/мл Высокая Кровь пациента крайне заразна для окружающих
Больше 2,4*10 7 МЕ/мл Выше верхнего порога чувствительности теста Требуется переделать анализ с разведением образца крови

Выявить с помощью ПЦР гепатит С можно с высокой степенью точности. Это единственный способ узнать об инфицировании спустя 5 дней после возможного заражения. Он дает точный результат, когда ИФА неэффективен, а до первых симптомов еще очень далеко. Кроме того, анализ помогает отслеживать ситуацию в динамике.

ПЦР почти исключает недостоверность. Но возможен ложноположительный или ложноотрицательный результат, что говорит об ошибке лаборатории. В случаях загрязнения используемого биоматериала анализ может показать ошибочное наличие вируса. При нарушении правил хранения и транспортировки РНК инфекции может разрушаться, и тогда тест не покажет наличие вируса у зараженного человека. Поэтому анализ проводится только в хорошо оснащенных лабораториях с применением высококачественных реагентов.

Комбинация разных анализов позволяет получить полную картину заболевания, хотя это может ввести в заблуждение неспециалистов. Нередко бывает, что ПЦР на гепатит С отрицательный, а ИФА положительный. Анализы не противоречат друг другу. Напротив, ИФА говорит о том, что пациент перенес острый гепатит и иммунитет среагировал на это – выработал антитела к инфекции. ПЦР показывает, что на момент анализа живые вирусные частицы отсутствовали. Иными словами, вы переболели и выздоровели.

Сколько стоит анализ на гепатит С? В зависимости от клиники и сложности осуществления исследования цена процедуры может варьироваться от 400 до 11 000 рублей.

В целом считается, что ИФА обладает меньшей надежностью и дает результаты, сложные в интерпретации. Этот метод используют как скрининговый, но окончательные данные можно получить с помощью ПЦР.

ПЦР – оперативный и достоверный метод диагностики. Вы получите результат в течение нескольких часов или недель. Если он окажется положительным, обратитесь к специалисту, чтобы как можно быстрее начать лечение по правильной схеме.

источник

Гепатит С — патология воспалительного характера, при которой поражаются клетки печени. Болезнь развивается вследствие проникновения вируса гепатита С (HVC) в организм человека.

Форма заболевания может быть острой или хронической.

Чаще всего признаки острой формы патологии у большинства пациентов отсутствуют, иногда болезнь сопровождается болезненными ощущениями в области живота, снижением работоспособности, повышенной утомляемостью, нарушением аппетита, темным оттенком мочи, обесцвечиванием каловых масс, желтушностью кожных покровов и слизистых, суставными болями. Возникают такие симптомы как правило через 6-8 недель после заражения, но могут проявиться и через полгода.

При развитии подобных явлений необходимо обратиться в медицинское учреждение и пройти комплексное обследование всего организма. В рамках медицинского обследования проводят анализ крови на гепатит С.

Сегодня при помощи современных диагностических методик можно выявить данную патологию на начальной стадии развития, что значительно увеличивает шансы на полное излечение от болезни.

Анализ на гепатит С в обязательном порядке сдают следующие группы людей:

  • женщины в период вынашивания ребенка;
  • лица, имеющие признаки гепатита;
  • сотрудники медицинских учреждений;
  • потенциальные доноры органов и крови;
  • наркозависимые, вич-инфицированные, лица, ведущие беспорядочную интимную жизнь.

Какие анализы нужно сдать при гепатите С? Для точной диагностики болезни, выявления ее причин и определения состояния паренхимы печени требуется выполнение таких исследований:

  • общего анализа мочи и крови;
  • биохимического анализа крови;
  • анализа методом ПЦР;
  • анализа крови на выявление антител к HVC;
  • анализа крови на имеющиеся антитела к собственным печеночным клеткам;
  • биопсии печени.

Расшифровка анализа крови на гепатит С выполняется специалистом. Рассмотрим каждый способ исследования подробнее, а также разберемся какой анализ на гепатит С самый точный.

При выполнении общего анализа крови при гепатите С можно оценить состояние пациента. Изменения показателей крови не воспринимаются, как специфические симптомы гепатита, однако при данном заболевании происходят такие нарушения, как:

  • снижается концентрация гемоглобина, тромбоцитов и лейкоцитов;
  • повышается содержание лимфоцитов;
  • нарушается свертываемость крови;
  • увеличивается скорость оседания эритроцитов (СОЭ).

Общий анализ мочи дает возможность обнаружить в ее составе уробелин — желчный пигмент, возникающий в моче в результате нарушения функционирования печени.

Биохимический анализ крови при гепатите С позволяет выявить такие нарушения, как:

  • повышено содержание ферментов печени (аланинтрансаминазы — АЛТ и аспартатаминотрансферазы — АСТ), которые поступают в кровь при повреждении гепатоцитов. В нормальном состоянии данные показатели у мужчин не должны быть более 37 МЕ/л, у женщин — не выше 31 МЕ//л. Повышенная концентрация АЛТ и АСТ при гепатите С, протекающем бессимптомно, часто является единственным симптомом данного заболевания. Кроме этого, в составе крови увеличивается уровень глутамилтранспептидазы щелочной фосфатазы (в норме не выше 150 МЕ/л).
  • содержание билирубина (как общего, так и прямого) в крови превышено. Если уровень желтого пигмента в сыворотке крови превышает 27-34 мкмоль/л, возникает желтуха (до 80 мкмоль/л в легкой форме, 86-169 мкмоль/л — в среднетяжелой, выше 170 мкмоль/л — в тяжелой форме).
  • Понижен уровень альбуминов, концентрация гамма-глобулинов, наоборот, повышена. Гамма-глобулины состоят из иммуноглобулинов — антител, которые защищают организм от болезнетворных веществ.
  • увеличена концентрация триглицеридов в составе крови.

При помощи методики ПЦР можно диагностировать возбудителя болезни. Выполнение этого анализа дает возможность обнаружить в составе крови вирус, даже если количество его минимально. Анализ ПЦР на гепатит С позволяет определить в крови имеющуюся инфекцию уже по прошествии 5 дней с момента заражения, то есть задолго до того, как появятся антитела.

Если результат анализа крови на гепатит С методом ПЦР положительный, это говорит о присутствии активной инфекции в организме. При помощи данного метода можно провести качественное и количественное исследование РНК HVC.

В ходе качественного анализа ПЦР на гепатит С возможно обнаружить в организме человека имеющийся вирус.

Такую диагностическую процедуру выполняют в том случае, если в крови выявлены анти-HVC.

Расшифровка анализа на гепатит С содержит информацию о том, что в организме инфекция или выявлена, или не выявлена. В нормальном состоянии патологические вещества в составе крови не обнаруживаются.

Если анализ на гепатит С дает положительный результат, это говорит о том, что патогенный микроорганизм непрерывно делится и поражает печеночные клетки.

Результаты такого анализа могут оказаться недостоверными, это возможно в следующих случаях:

  • при загрязнении используемого биоматериала;
  • при наличии в крови гепарина;
  • при наличии химических или белковых субстанций (ингибиторов) в исследуемом биоматериале, влияющих на элементы ПЦР.

Количественный анализ на гепатит С дает информацию о количестве вируса, содержащегося в крови, то есть определяет вирусную нагрузку. Под данным понятием подразумевается объем РНК HVC, присутствующий в крови (например, в 1 мл). В расшифровке количественного анализа на гепатит С это значение выражено в цифровом эквиваленте, измеряется в МЕ/мл.

Кровь на ПЦР при гепатите С сдают перед проведением терапевтических мероприятий. После анализ выполняют на 1, 4, 12 и 24 неделях. Исследование на 12 неделе является показательным и выполняется с целью оценки эффективности проводимых лечебных процедур.

Если анализ на гепатит С при беременности положительный и при этом значения вирусной нагрузки превышены, то риск передачи болезнетворных микроорганизмов от больной матери к ребенку увеличивается в несколько раз. Также при повышенных значениях вирусной нагрузки осуществление лечебных мероприятий затруднительно.

Согласно расшифровке анализов на гепатит С, если значения вирусной нагрузки превышают 800 000 МЕ/мл, то она является высокой. Если показатели ниже 400 000 МЕ/мл, уровень вирусной нагрузки считается низким.

Анализ на гепатит С методом ПЦР считается самым точным и обладает рядом преимуществ перед другими вариантами исследований, а именно:

  • прямая диагностика возбудителя болезни. При выполнении традиционных исследований определяются наличие белковых маркеров, являющихся продуктами жизнедеятельности болезнетворных веществ. Это говорит только о том, что инфекция присутствует в крови. При сдаче анализа на гепатит С методом ПЦР возможно определить вид возбудителя опасной патологии.
  • специфичность методики. В ходе такой процедуры в биоматериале определяется уникальный участок ДНК, соответствующий лишь одному типу возбудителя. Это позволяет минимизировать вероятность получения недостоверных результатов.
  • высокая чувствительность. При выполнении ПЦР-анализа можно обнаружить минимальное количество вируса. Это важно, если выявляются условно-патогенные вещества, представляющие угрозу только в случае повышения их уровня.
  • при использовании такой методики в одном образце биоматериала можно выявить сразу несколько возбудителей.
  • можно обнаружить скрыто протекающие инфекции. Помимо этого, анализ позволяет диагностировать болезнетворные микроорганизмы, обитающие внутри клеток и имеющие высокую антигенную изменчивость.

Если результаты исследования положительные, значит в биоматериале обнаружены следы вируса, то сеть в организме имеется инфекция.

Читайте также:  Влияют антибиотики на анализы гепатит

Отрицательный анализ ПЦР на гепатит С означает, что следы инфекции в биоматериале отсутствуют.

Данный способ позволяет определить антитела ко всем видам вируса гепатита, а также антитела к печеночным клеткам собственного организма, возникновению которых способствует развитие аутоиммунного гепатита.

Результаты, полученные в ходе исследования, актуальны на протяжении 3 месяцев, затем следует повторно сдавать кровь на гепатит С.

Возможно также выполнение экспресс-исследования с применением специальных тестовых полосок. Данный анализ дает возможность определить в составе крови и слюны антитела к вирусу С. Такую процедуру можно осуществить самостоятельно, на дому.

Для выполнения такого анализа берут элемент паренхимы печени и выполняют гистологическое исследование полученного биоматериала. Это позволяет оценить состояние органа: выявить воспалительные, некротические очаги, стадию фиброза и прочее.

Сегодня используются тесты, которые заменяют гистологический анализ печеночной паренхимы.

Для оценки стадии поражения печени и интенсивности процесса воспаления применяют специфические биомаркеры венозной крови. С помощью Фибротеста можно оценить степень разрастания фиброзной ткани.

При выполнении Актитеста можно получить информацию об интенсивности патологических процессов в паренхиме печени. С помощью Стеатотеста можно диагностировать жировое перерождение ткани печени и оценить степень этого процесса. Фибромакс состоит из всех вышеуказанных тестов и может включать в себя некоторые другие исследования.

Какие анализы сдают при гепатите С и как выполняется тот или иной вид исследования мы выяснили. Не менее важно знать, как нужно подготовиться к проведению анализа.

Для получения достоверных результатов рекомендуется придерживаться следующих требований:

  • анализы при гепатите С необходимо сдавать в утренние часы, на голодный желудок. Последний раз пищу следует употреблять минимум за 8 часов до выполнения исследования.
  • Забор биоматериала можно осуществлять и в дневное или вечернее время. В таком случае важно, чтобы между последним приемом пищи и выполнением анализа прошло не меньше 5-6 часов.
  • перед сдачей крови на гепатит С следует отказаться от чая, кофе, сока или других напитков, разрешена только вода.
  • за 48 часов до проведения исследования необходимо исключить употребление жирных, жареных продуктов и спиртсодержащих напитков.
  • на протяжении минимум часа до выполнения анализа нужно воздержаться от табакокурения.
  • не следует выполнять анализ сразу после проведения ультразвукового, инструментального, рентгенологического обследования, сеанса массажа или физиотерапии.
  • за сутки до осуществления исследования требуется исключить прием медикаментозных средств и интенсивную физическую активность. Эмоциональные нагрузки также противопоказаны.
  • 15 минут перед выполнением исследования рекомендуется провести в спокойном состоянии.

Где сдать анализ на гепатит С? Забор биоматериала для дальнейшего исследования проводится в лаборатории медицинского учреждения или же на дому у пациента.

Кровь из вены берут следующим образом:

  • при помощи специального жгута, обернутого вокруг предплечья больного, приостанавливается венозный кровоток. Благодаря таким манипуляциям вены наполнятся кровью и будут более заметными, что значительно облегчит процесс введения иглы.
  • участок кожи, куда будет вводиться игла, тщательно обрабатывается спиртом или спиртсодержащей жидкостью.
  • в вену осторожно вводится игла, затем к ней прикрепляется пробирка, специально предназначенная для сбора крови.
  • сразу после того, как игла введена в вену сдавливающий жгут снимается с руки пациента.
  • после того, как собран необходимый для выполнения анализа объем крови, игла плавно вынимается из вены.
  • к месту укола обязательно прикладывается стерильный ватный или марлевый тампон, смоченный в спирте.
  • для предупреждения возникновения гематомы тампон следует с некоторым усилием прижать к области введения иглы, согнуть руку в локтевом суставе и держать в таком положении несколько минут. Такие действия также помогут быстрее остановить кровь.

При условии хорошей техники внутреннего введения данная процедура абсолютно безопасна и прочти не вызывает болезненных ощущений.

В редких случаях после забора крови возможно опухание вен. Данное явление носит название «флебит». Устранить проблему поможет компресс (не горячий), прикладывать его следует к опухшим участкам кожи несколько раз в сутки.

Также могут возникать определенные проблемы, если имеется нарушение свертываемости крови. Прием аспирина, варфарина и иных средств, разжижающих кровь, может спровоцировать кровотечение. Именно поэтому перед выполнением анализа требуется отказаться от приема любых медикаментов. Если же лечение отменить нельзя, следует сообщить об этом специалисту.

Сколько делается анализ на гепатит С? Результаты исследования крови на гепатит могут быть готовы и через несколько часов, и через несколько дней (как правило, не более 8 дней). Длительность подготовки результатов зависит от вида вируса и выбранной методики анализа. Более быстрым является исследование, проводимое способом ПЦР. Результаты в этом случае будут готовы всего через несколько часов.

Сколько стоит анализ на гепатит С? В зависимости от клиники и сложности осуществления исследования цена процедуры может варьироваться от 400 до 11 000 рублей.

Следует знать, что для формирования достаточного объема антител к HVC может потребоваться несколько недель. Поэтому на раннем этапе развития патологии результат исследования может быть ложноотрицательным.

Кроме этого, получение недостоверных данных возможно при некачественном выполнении анализа и нарушении условий транспортировки полученного биоматериала (образцы должны быть доставлены в лабораторию максимум через 2 часа после забора крови).

Если результат исследования окажется положительным, необходимо незамедлительно обратиться к врачу-инфекционисту. Специалист проведет дополнительное обследование и назначит соответствующее лечение.

источник

Вирусный гепатит В успешно лечится, если его вовремя обнаружить и правильно определить количество антител и антигенов в крови больного. С помощью иммуноферментного анализа на гепатит можно обнаружить присутствие маркеров вируса, но не могут установить точно стадию процесса.

Для количественной оценки применяют ПЦР диагностику. С помощью теста возможно посчитать количество маркеров, спрогнозировать течение болезни и вероятность излечения при помощи противовирусных препаратов.

Главное преимущество исследования — возможность обнаружить даже минимальные концентрации вируса, идентифицировать возбудителя на видовой стадии.

Вирус гепатита В отличается большой контагиозностью и устойчивостью к внешним воздействиям. Он сохраняет активность в следах крови больного до нескольких недель. Поэтому каждый человек подвержен риску заражения даже при условии соблюдения профилактики.

Для диагностики заболевания назначают следующие исследования:

Иммуноферментный анализ крови на наличие антител к ВГВ Это быстрый и информативный тест. Его недостатком является то, что исследование только дает информацию о присутствии антител, но не уточняет их количество.
Биохимический анализ крови При начавшихся изменениях в печени в крови больного будет повышен уровень билирубина, щелочной фосфатазы и снижен уровень печеночных ферментов. Но на начальной стадии показатели будут находиться в пределах нормы.
ПЦР (полимеразная цепная реакция) С ее помощью восстанавливают ДНК вируса, подсчитывают количественные показатели антител, уточняют стадию заболевания. То есть разное количество антител может свидетельствовать об остром этапе или о постпрививочном иммунитете.

Американский химик К.Муллис получил Нобелевскую премию, и до сих пор применяется его метод диагностики

Родоначальником метода ПЦР (полимеразной цепной реакции) считается ученый из Норвегии Х. Клеппе. Он первый стал проводить амплификацию (восстановление) ДНК при помощи короткой цепочки ДНК, то есть синтетического праймера (своеобразной копии).

Однако, ученому не удалось реализовать свою идею. Похожие исследования сделал американский химик К.Муллис, который в 1993 был удостоен Нобелевской премии за свое изобретение. С тех пор ПЦР используют для установления отцовства, диагностики генетических болезней, обнаружения вирусов.

Суть реакции в том, что при помощи ферментов копируется определенный участок ДНК. Скопировать можно только участок, который соответствует заданным параметрам и если он есть в представленном образце. Для запуска реакции применяют следующие компоненты:

  1. Матричная ДНК с участком, подлежащим копированию.
  2. Праймеры, схожие по строению участку ДНК.
  3. Полимераза, то есть фермент, запускающий реакцию. Она должна быть термостабильной, то есть выдерживать перепады температур.
  4. Раствор с определенными параметрами, обеспечивающий прохождение реакции.

Реакция проводится в несколько этапов:

Денатурация (прогревание) Сначала раствор нагревают, в результате чего цепочки ДНК расходятся.
Стадия отжига Раствор остужают, праймеры связываются с одноцепочечной матрицей.
Этап элонгации Полимераза создает дочернюю цепь ДНК, достраиваются все фрагменты цепочки. Цепочка может расти до пределов, которые задаются количеством реагентов, затем достигает состояния плато.

Для обнаружения гепатита в применяют два типа реакции: количественную и качественную.

Количественный метод определяет количество генома ВГВ

Количественный ПЦР предполагает одновременное создание копий фрагментов ДНК и определение количества молекул. Измерение проводится после каждого этапа, то есть в режиме реального времени. Это достигается при помощи флюоресцентных зондов, которые включаются в цепочку молекул и светятся в определенный период исследования.

Данный способ применяют для обнаружения фрагментов ДНК, которые являются маркерами вируса гепатита. С помощью количественного метода удается точно выделить генотип вируса. Другими словами, подсчитывают количество копий генома ВГВ на количество клеток больного.

Количественный анализ дает ответы на следующие вопросы:

  1. С какой интенсивностью прогрессирует болезнь.
  2. Насколько эффективно проводимое лечение.
  3. Развилась ли резистентность к назначенным препаратам.

Также количественное измерение необходимо для диагностики хронической стадии инфекции. Если количество ДНК ниже 100 шт/мл при нормальном уровне трансаминаза, то человек является носителем вируса.

При острой фазе количество антител значительно выше.При антивирусной терапии повышение количества антител свидетельствует о развившейся устойчивости к лекарствам, это является сигналом для корректировки лечения.

Качественный ПЦР дает меньше информации, однако может исключить заражение

Качественный ПЦР позволяет только установить присутствие возбудителя в крови. Если они отсутствуют, то пациент не заражен, при попадании возбудителя в кровь результат будет положительным.

Однако, с помощью качественной реакции невозможно уточнить геном вируса, этап заболевания. Поэтому для диагностики ВГВ проводят как количественное, так и качественное измерение.

Для проведения анализа методом полимеразной реакции необходима венозная кровь. Это необходимо сделать утром на голодный желудок.

Пациенту следует правильно подготовиться к исследованию:

  1. За 10 часов отказаться от пищи, можно пить только чистую воду.
  2. Накануне прекратить прием алкоголя, за 4 часа не курить.
  3. Перед обследованием стоит избегать физических и эмоциональных стрессов.
  4. За 2 суток перестать употреблять лекарства, если это невозможно, то необходимо предупредить лаборанта. Некоторые препараты оказывают влияние на конечный результат.

При количественной реакции оценивают полученные показатели в зависимости от числа копий ДНК

Интерпретировать данные качественного измерения несложно. Он дает либо положительный, либо отрицательный ответ.

При количественной реакции оценить полученные показатели можно в зависимости от числа копий ДНК. Единицей измерения является копий/мл.

Расшифровываются данные следующим образом:

  1. Если количество ДНК ВГВ менее 90, то инфекция отсутствует. У пациента развился поствакцинальный иммунитет, либо он излечился от болезни.
  2. При числе копий 2х100 говорят о носительстве вируса.
  3. Количество 2х106 свидетельствует о хронической стадии болезни.
  4. При ДНК более 2х109 пациент болен острой стадией гепатита.

Преимущества метода диагностики с помощью полимеразных реакцийи заключаются в следующем:

  1. Прямое обнаружение возбудителей. В отличие от него, метод ИФА дает информацию о присутствии антител к вирусу.
  2. Специфичность. То есть копируется именно участок ДНК, который имеется в образце биоматериала.
  3. Повышенная чувствительность. Метод может обнаружить даже единичные фрагменты клеток.
  4. Диагностика болезней в острой и в скрытой стадии. То есть, можно диагностировать болезнь на этапе доклинических проявлений.

У метода есть недостатки, которые приводят к ложным результатам. Самый существенный недостаток — вероятность загрязнения материала. Основным источником загрязнения являются плохо обработанные пробирки, руки лаборанта, реактивы.

В кровь может попасть часть ДНК от предыдущей реакции. Поэтому к лабораториям предъявляются повышенные санитарные требования: раздельные помещения, пластиковые пробирки, обработка лабораторий ультрафиолетом и т. д.

Ложноотрицательные результаты могут быть следствием сниженной чувствительности реакции. Это происходит в следующих ситуациях:

  • пациент принимает лекарственные препараты, например, антикоагулянты;
  • человек перед анализом перенес физическое напряжение (занятия спортом, тяжелая работа);
  • заражение произошло недавно.

Если у пациента есть высокая вероятность инфицирования, а результат исследования отрицательный, ему необходимо повторное обследование.

Метод полимеразной цепной реакции является основным и самым информативным для диагностики ВГВ. Он позволяет не просто установить носительство инфекции, но и уточнить этап заболевания, оценить результаты лечения.

Для более точного диагноза применяют качественное и количественное измерение. К недостаткам способа можно отнести вероятность загрязнения, снижение чувствительности и довольно высокую цену.

Для того, чтобы результаты были наиболее достоверными, следует правильно подготовиться к исследованию и проводить его в клинике с соответствующей лицензией и хорошей репутацией.

Смотрите видео о ПЦР:

источник

Вирусный гепатит С — тяжелое заболевание, которое протекает с поражением печени. У восьмидесяти процентов больных оно переходит в хроническую форму. Вирус размножается в клетках печени — гепатоцитах — и вызывает их гибель. Отмершая ткань замещается очагами соединительной ткани, развивается фиброз.

По мере развития фиброза печень оказывается неспособна выполнять свои функции, начинается цирроз печени, который опасен своими осложнениями: повышением давления в системе портальной вены, желудочно-кишечными кровотечениями, нарушением свертывания крови, изменениями психики из-за повреждения ядер головного мозга токсическими продуктами.

Причина заболевания — заражение вирусом из семейства Flaviviridae, который относится к типу РНК-вирусов. Это значит, что генетический материал, по которому синтезируются белки возбудителя, закодирован в молекуле рибонуклеиновой кислоты. Заражение происходит через кровь, половым путем, и от беременной женщины к плоду. К сожалению, между инфицированием и началом выработки антител может пройти достаточно большое количество времени — от двух недель до шести месяцев. Это не дает определить заражение методом иммуноферментного анализа и начать лечение на ранних стадиях.

Читайте также:  Возможна ли ошибка анализа на гепатит

ПЦР — метод молекулярного анализа, который позволяет обнаружить генетический материал возбудителя уже на первой неделе после инфицирования с помощью полимеразной цепной реакции. Исследование обладает высокой специфичностью, точностью, и позволяет не только определить наличие или отсутствие вируса, но и его концентрацию и генотип.

Для исследования берут кровь пациента, в которой потенциально может находиться РНК вируса. В кровь добавляют праймеры — искусственно синтезированные участки искомого гена малой длины, и РНК-полимеразу — специальный фермент, который многократно увеличивает количество генетического материала возбудителя. С помощью специального аппарата проводят несколько циклов нагревания и охлаждения. Затем материал анализируют и сопоставляют с известными генами вируса, на основе чего делают заключение о наличии или отсутствии заражения.

Различают три вида ПЦР-анализа:

    Качественный анализ ПЦР . Первая стадия исследования. Он позволяет выявить генетический материал вируса в крови.

Количественный анализ ПЦР . Позволяет определить вирусную нагрузку — концентрацию генетического материала возбудителя в одном миллилитре крови. Это исследование проводят перед началом терапии, а затем на первой, четвертой, двенадцатой и (если курс длительный) двадцать четвертой неделе лечения, чтобы оценить его эффективность.

  • Генотипирование . Возбудитель гепатита С часто и быстро мутирует. На планете было обнаружено семь вариантов генотипа этого вируса. В России распространены первой, второй и третий тип. Каждый из генотипов обладает различной устойчивостью к терапии, например эффективность лечения первого типа составляет шестьдесят процентов, а для второго и третьего этот показатель достигает восьмидесяти пяти. Поэтому, для того чтобы подобрать подходящие препараты и назначить курс лечения достаточной длительности необходимо точно определить, каким типом вируса заражен пациент.
  • ПЦР-исследование назначают в следующих случаях:

    • контакт с больным человеком, при котором могло произойти заражение;
    • положительный результат иммуноферментного анализа;
    • признаки цирроза печени: изменение размеров печени, увеличение селезенки, появление на животе подкожного венозного сплетения;
    • появление симптомов поражения печени: боли в правой части живота, пожелтение кожных покровов;
    • повышение активности АЛТ и АСТ в биохимическом анализе крови;
    • перед началом лечения для определения вирусной нагрузки;
    • с целью контроля за эффективностью антивирусной терапии;
    • после окончания лечения для контроля за рецидивами;
    • при наличии диагностированного гепатита B, для исключения смешанного поражения печени.

    Расшифровкой ПЦР-анализа и иммуноферментного анализа на гепатит С должен заниматься гепатолог или инфекционист. Анализировать результаты ПЦР необходимо в комплексе с данными биохимического анализа крови, биопсии и УЗИ. Только квалифицированный врач сможет проанализировать результаты исследований и, основываясь на них, назначить правильное лечение.

    В анализируемом биологическом материале обнаружен генетический материал возбудителя. Инфицирование подтверждено.

    Инфицирование отсутствует, либо количество РНК возбудителя ниже границы чувствительности.

    Нормальный показатель для здоровых людей. Означает, что в исследуемом материале отсутствует РНК гепатита С, либо его концентрация ниже порога чувствительности исследования.

    Концентрация РНК ниже диапазона количественного определения. Такие результаты интерпретируют очень осторожно, соотносят их с данными других исследований, часто проводят повторное исследование.

    Уровень вирусной нагрузки при данной концентрации считается низким. Обычно снижение количества вируса означает, что терапия идет успешно.

    Уровень вирусной нагрузки при данной концентрации считается высоким.

    Количество РНК выше верхнего предела диапазона количественного определения. Делать выводы о степени вирусной нагрузки при таком результате нельзя. Обычно в таких случаях тест повторяют с разведением образца крови.

    Обнаружена РНК определенного генотипа

    В биоматериале обнаружен вирус гепатита С определенного генотипа и субтипа. Результат кодируется римскими цифрами и латинскими буквами, например — 1а, 2b. Всего существует семь генотипов и шестьдесят семь субтипов, однако в России встречаются только три первых типа.

    Обнаружена РНК вируса гепатита С

    В крови обнаружена РНК редкого для России генотипа, который нельзя отнести к первому, второму или третьему типу. Необходимы дополнительные исследования.

    Данный результат говорит о том, что пациент здоров, или о том, что колчество РНК возбудителя слишком мала.

    Возможна ситуация, когда ПЦР-анализ на гепатит С отрицательный, а иммуноферментный анализ распознает антитела против вируса. Это значит, что пациент переболел гепатитом С в острой форме и излечился самостоятельно. Примерно двадцать случаев инфицирования заканчиваются самопроизвольным излечением, если организм пациента оказывает достаточное сопротивление инфекции.

    Несмотря на то, что ПЦР — высокоточный анализ, его результаты могут быть искажены в следующих ситуациях:

    • кровь транспортировалась в лабораторию в ненадлежащих условиях, был нарушен температурный режим;
    • образец биоматериала был загрязнен;
    • в крови находились остаточные следы гепарина и других антикоагулянтов;
    • в исследуемом веществе оказались ингибиторы — вещества, которые замедляют или останавливают полимеразную цепную реакцию.

      Диагностика на ранних стадиях . ПЦР обнаруживает генетический материал возбудителя заболевания. С помощью иммунофлюоресцентного анализа можно определить только иммуноглобулины — вещества, которые организм вырабатывает в ответ на инфекцию. В случае заражения гепатитом С промежуток между заражением и началом иммунного ответа может составлять несколько недель и месяцев, в это время ИФА будет неэффективна. ПЦР даст ответ уже на первой неделе после заражения.

    Низкая вероятность ошибки . В исследуемом материале определяют участок генетического материала, который характерен только для одного вида возбудителей. Это позволяет исключить ложные результаты. При ИФА возможны ошибки, так как один и тот же вид антител может выделяться против разных вирусов — такие антитела называют перекрестными.

  • Высокая чувствительность . ПЦР позволяет обнаружить РНК возбудителя даже в минимальных количествах. Это дает возможность выявить скрытые инфекции.
  • Для ПЦР-анализа на гепатит С собирают венозную кровь. Обычно из вены пациента за один раз берут две порции крови: первую отправляют на ПЦР, а вторую на ИФА. Это делают для того чтобы более точно оценить, насколько сильно пациент заражен вирусом, и как иммунитет борется с ним.

    Обычно от пациента требуют соблюдения следующих правил:

    • анализ крови сдают с утра;
    • перерыв между последним приемом пищи и сдачей крови должен составлять восемь-десять часов;
    • за два-три дня до анализа нужно отказаться от жареной и жирной пищи, и алкоголя;
    • в течение двадцати четырех часов перед анализом пациент должен избегать физических нагрузок: не переносить тяжестей, не посещать спортзал или бассейн.

    источник

    Для постановки диагноза «хронический вирусный гепатит С (ХВГС)» требуется комплексное обследование человека, которое включает клинические, лабораторные и инструментальные исследования. Важным с точки зрения диагностики для постановки правильного диагноза является метод ПЦР – полимеразная цепная реакция.

    Этим лабораторным методом обнаруживают РНК вируса гепатита С в крови человека. Вместе с иммуноферментным анализом (ИФА) на антитела к вирусу, ПЦР используют для постановки диагноза ХВГС и генотипа его возбудителя. Это исследование является одним из новейших методов лабораторной диагностики. Его достоверность при ХВГС превышает 97%, что считается очень хорошим показателем для исследований.

    Существует три ПЦР анализа крови при ХВГС: качественный, количественный и генотипирование вируса. Первое исследование (качественный анализ) на вирус обнаруживает его в крови, поэтому используется только для постановки диагноза.

    Второе (количественное) исследование определяет степень вирусной нагрузки на организм, поэтому применяется для контроля эффективности терапии.

    Третий ПЦР (генотипирование) уточняет диагноз, устанавливая генотип вируса, что очень важно для назначения правильного противовирусного лечения.

    Суть методики полимеразной цепной реакции заключается в использовании ферментов, которые многократно размножают генетический материал возбудителя в биоматериале. В процессе такой репликации пробирку с кровью несколько раз подогревают и охлаждают до температуры, необходимой для ускорения ферментативной реакции. В результате этих манипуляций количество вирусного генома многократно увеличивается, что позволяет его выявить даже при минимальном количестве.

    ПЦР диагностика имеет много преимуществ перед другими лабораторными исследованиями:

    • высокая чувствительность – 97-98%;
    • гарантированная аналитическая специфичность (выявляет именно тот возбудитель, который требуется найти, а не его родственный штамм);
    • быстрота проведения (требуется не более 2 суток для получения заключения).

    Качественный ПЦР анализ назначается всем пациентам, у кого ИФА-анализом были выявлены антитела к вирусу ХВГС. После проведения качественного ПЦР может быть получено два варианта ответа: «РНК обнаружено» или «РНК не обнаружено». Чтобы обнаружить в крови минимальное количество вируса, необходимы тест-системы с чувствительностью не менее 50 МЕ/мл. Если концентрация вируса в крови больного будет меньше, чем может определить диагностикум, то результат исследования может быть и ложноотрицательным. Чтобы избежать такой диагностической ошибки, лаборатории, осуществляющие ПЦР-диагностику, должны быть обеспечены высокочувствительными тест-системами. В лаборатории «Инвитро», к примеру, используются тесты с чувствительностью от 15 МЕ/мл. Информацию о чувствительности тестов работники лаборатории обязаны предоставлять пациентам и врачам по их первому требованию.

    Количественный анализ ПЦР определяет степень виремии, то есть концентрацию возбудителя в крови, вирусную нагрузку. Результат этого исследования, в отличие от качественного ПЦР, выражается цифрами, например, 2×10*6 МЕ/мл, что означает 2 миллиона международных единиц в 1 мл крови. Часть лабораторий применяет другой показатель – число копий/мл. Эти два показателя легко конвертировать: 1 международная единица равна 4 копиям РНК. Таким образом, 2×10*6 МЕ/мл будет означать, что в крови больного обнаружено 8×10*6 копий вирусной РНК в 1 мл, т.е. 8 млн. копий в 1мл крови.

    Генотипирование – это определение одного из шести генотипов вируса. От генотипа возбудителя зависит клиническая картина, скорость развития осложнений со стороны печени и прогноз для дальнейшей жизни пациента. Генотип вируса очень важен уже на стадии постановки диагноза, поскольку от его правильного определения зависит комбинация препаратов и длительность терапевтического курса, который будет назначен больному.

    Однако даже такое казалось бы «идеальное» лабораторное исследование имеет свои минусы:

    • в ходе исследования происходит репликация генетического материала всех возбудителей, даже неживых, что может исказить результат. Поэтому для осуществления контроля эффективности с помощью ПЦР повторный анализ проводят не ранее, чем через 2 месяца после предыдущего, чтобы погибшие вирусы успели «покинуть» организм больного;
    • часть вирусного генома, который определяют с помощью тест-систем, теоретически может присутствовать и в других вирусах или микроорганизмах, поэтому есть вероятность ложноположительного ответа;
    • вирусы быстро мутируют. Иногда скорость и степень мутирования вируса настолько высока, что тест-система перестает улавливать их геном. Как следствие, возможен ложноотрицательный результат.

    Для нивелирования этих недостатков, производители лабораторных тест-систем для ПЦР диагностики постоянно проводят их испытания, в том числе на перекрестные реакции и на чувствительность к тому или иному генотипу вируса.

    Чтобы заключение обследования методом ПЦР были достоверными, необходимо строго соблюдать правила подготовки к его проведению:

    • исследование проводится на голодный желудок (глюкоза, жиры, минералы, попадающие в кровь из пищи, могут повлиять на скорость и качество ферментной реакции);
    • разрыв между последним приемом пищи и отбором крови для анализа должен составлять не менее 8 часов;
    • накануне исследования запрещено принимать алкоголь и употреблять жирную пищу, период выведения которых затяжной;
    • за сутки до похода в лабораторию следует избегать сильных физических и эмоциональных нагрузок;
    • до момента забора крови не рекомендуется курить.

    Чтобы избежать появления ложных заключений, предполагаемому больному необходимо прийти в лабораторию немного раньше, чем будет проведен забор крови. Нужно 15-20 минут для того, чтобы человек отдышался, успокоился. Адреналин, присутствующий в крови после быстрой ходьбы, может повлиять на результат обследования.

    Если направляемый на анализ пациент принимает какие-либо лекарственные препараты, об этом он должен уведомить врача. Вполне возможно, что от приема некоторых из них придется на некоторое время отказаться (если это возможно).

    Расшифровкой результатов занимается врач-лаборант той лаборатории, которая проводила анализ. Расшифровка – это определение отклонения полученного результата от нормы. Норма показателей устанавливается непосредственно производителем тест-системы, которая используется лабораторией для диагностики. Поэтому не стоит удивляться, что в одних лабораториях вирусную нагрузку определяют в МЕ/мл, а в других – в копиях/мл.

    Получив заключение, его нужно уметь правильно трактовать. Трактовкой результатов исследования должен заниматься лечащий врач больного гепатитом С. Только после объективного, инструментального и лабораторного обследования пациента, врач может получить достаточное количество данных для грамотной трактовки полученных результатов ПЦР.

    Оценка качественного анализа, как правило, не вызывает затруднений, даже у пациентов. Результат там может быть только один: «обнаружен» или «не обнаружен». При этом второй из них является нормой.

    Показатели количественного анализа трактовать сложнее. Он показывает степень вирусной нагрузки на пациента. Даже среди гепатологов нет единого мнения по поводу того, как трактовать обнаруженную виремию. Большинство врачей склоняются к тому, что высокой нужно считать нагрузку более 8×10*5 МЕ/мл. Очень высокой считается нагрузка более 1×10*7 МЕ/мл, а низкой – менее 4×10*5 МЕ/мл.

    Степень вирусной нагрузки говорит о вирулентности (агрессивности) вируса: чем больше его количество в крови, тем быстрее могут развиваться осложнения со стороны печени. Высокая концентрация вируса в крови беременной женщины повышает вероятность его проникновения через гематоплацентарный барьер к плоду. Виремия также влияет на эффективность лечения: при низких цифрах результативность терапии выше, чем при высоких.

    Для того, чтобы быть уверенным в достоверности проведенного анализа ПЦР на гепатит С, нужно отдавать предпочтение только тем лабораториям, которые хорошо себя зарекомендовали. Ценовая политика при этом не должна играть первостепенную роль.

    источник