Меню Рубрики

Вирусный гепатит с количественный анализ расшифровка

Учитывая бессимптомное течение и высокую вероятность передачи HCV-инфекции, большое значение имеет диагностика на ранних стадиях патологии. Наиболее точной считается постановка полимеразной цепной реакции. В отличие от методов выявления серологических маркеров, ПЦР мало зависит от сопутствующих заболевания и общего состояния организма пациента. Но если подтвержден вирус гепатита С, количественный анализ, расшифровка которого проводится врачом, обязателен.

HCV – тяжелое заболевание, требующее серьезной дорогостоящей и опасной побочными реакциями терапии. Поэтому диагноз никогда не ставят на основании результатов одного исследования. При подозрении на наличие вирусного заболевания пациенту приходится пройти несколько тестов. Но чтобы избежать лишних затрат и потери времени, анализы крови и инструментальные обследования проводят поэтапно.

Основные стадии диагностического процесса приведены в таблице:

Проводимое исследование Цели выполнения
Биохимический анализ крови и печеночные пробы Позволяет оценить функциональную активность печени, уровень билирубина, показатели печеночных трансаминаз. Превышение нормы в 2 раза и более указывает на наличие заболевания
Клинические анализы крови, мочи и кала Данные исследования неспецифичны, но по результатам можно установить наличие воспалительного процесса, оценить общее состояние пациента. Обнаружение билирубина в моче, изменение оттенка кала говорит в пользу поражения печени
Иммуноферментный анализ (ИФА) Позволяет определить как наличие вирусной инфекции в организме, так и ее форму (острую или хроническую). Недостатком исследования является вероятность ложных результатов
Полимеразная цепная реакция Дорогостоящий, сложный в проведении, но вместе с тем наиболее точный метод диагностики HCV. Позволяет подтвердить наличие вируса в организме человека, количественно установить уровень копий РНК, определить генотип HCV
Инструментальные обследования печени Необходимо проведение УЗИ органов брюшной полости, установление стадии фиброза, оценка тяжести цирроза, исключение гепатоцеллюлярной карциномы

Окончательный диагноз доктор ставит только по результатам, указанным во всех исследованиях. Некоторые препараты, например, гепатопротекторы, витамины показаны уже в начале диагностического процесса. Но таргетные противовирусные средства назначают после получения всех данных.

Техника проведения полимеразной цепной реакции известна достаточно давно и успешно используется для диагностирования ряда вирусных заболеваний, и HCV не является исключением.

В настоящее время существует несколько методик постановки ПЦР, но в принципиальном плане этот процесс состоит из нескольких этапов:

  1. Разрушение двойной нити ДНК под воздействием нагревания либо определенных химических веществ.
  2. Присоединение к разделенным основанием ДНК так называемых праймеров – остатков нуклеотидной цепи РНК вируса (в большинстве современных тест-систем используются 5`-NTR-области генома HCV).
  3. Специфический фермент, ДНК-полимераза, распознает праймер, провоцирует присоединение других нуклеотидных остатков.

По окончании третьего этапа полимеразной цепной реакции ДНК между двумя праймерами удваивается, а впоследствии происходит амплификация участка генома в геометрической прогрессии (2–4–8 и т.д.).

Чувствительность современных тест систем составляет 10–50 копий РНК в 1 мл крови.

Расшифровка ПЦР на гепатит С должна проводиться квалифицированным специалистом. В соответствии с Международным стандартом ВОЗ для количественного определения вирусного генома служит образец плазмы крови в лиофилизированном виде, содержащий РНК первого генотипа вируса в концентрации 105 МЕ/мл.

При этом обращают внимание на количественные единицы, в которых выражены результаты исследований. Обычно количество копий РНК HCV указывают в абсолютном или логарифмическом выражении. Затем, в соответствии с международными стандартами, эту цифру пересчитывают при помощи специального коэффициента в международные единицы (МЕ). Таким образом конечные результаты обозначаются в МЕ/мл.

Для проведения количественного исследования применяют различные тест-системы и методики постановки полимеразной цепной реакции. Некоторые предназначены для оценки уровня виремии в плазме или сыворотке. Другие более эффективны и показательны при исследовании цельной крови.

Говорить о норме при интерпретации указанных в лабораторном бланке результатов не совсем корректно. Дело в том, что у здорового человека РНК вируса в организме отсутствует, а наличие частиц HCV вне зависимости от количественного показателя свидетельствует об инфицировании. В дальнейшем при помощи ПЦР оценивают эффективность лечения. При отрицательном результате на 4 неделе приема медикаментов, а затем и после окончания противовирусной терапии (на протяжении 48 недель) говорят о выздоровлении.

Проведение полимеразной цепной реакции предполагает определение не только наличия РНК HCV в крови, но и определение количества копий вируса и анализ структуры генома. Такие возможности делают ПЦР одним из наиболее информативных и точных методов диагностики вирусного гепатита C.

Все применяемые на практике методы постановки полимеразной цепной реакции приведены ниже в порядке проведения (каждый последующий тест назначают при положительном результате предыдущего):

  1. Анализ ПЦР на гепатит С качественный, проводится только для обнаружения РНК вируса в крови.
  2. Количественное исследование ПЦР. Расшифровка проводится согласно общепринятым нормам. В зависимости от результата вирусологическая нагрузка может быть низкой, умеренной или высокой. Данный показатель является одним из предикторов исхода терапии HCV.
  3. Генотипирование (во многих частных лабораториях предлагается в комплексе с количественным анализом, что снижает общую стоимость). Обозначение генотипа HCV осуществляется одной из арабских цифр (с 1 по 6). На территории России чаще выявляют генотип 1 или 3, несколько реже – 2, 4–6 диагностируют в единичных случаях. Ранее при использовании интерфероновых схем лечения разновидность HCV определяла длительность и эффективность терапии. Современные противовирусные средства отличаются широким спектром действия, но некоторые из них прописывают только при 1–4 генотипах HCV.

Генотипирование проводится только один раз, перед началом терапии. По мере приема медикаментов количественные нормы гепатита С необходимы врачу для оценки эффективности противовирусных препаратов. После окончания курса лечения проводят качественное исследование ПЦР.

Количественный анализ методом ПЦР проводится для определения вирусной нагрузки. Под этим термином подразумевают количество копий РНК возбудителя в 1 мл крови.

Благодаря такому исследованию врач сможет оценить ряд факторов, играющих ключевую роль как в самом течении заболевания, так и исходе терапии. Это:

  • вероятность развития осложнений (цирроза и гепатоцеллюлярной карциномы), так как чем активнее патологический процесс, тем выше риск появления патологий печени уже на начальных стадиях гепатита С;
  • эффективность стандартной схемы терапии (в тяжелых случаях требуется дополнительное назначение противовирусных средств);
  • риск для окружающих (особенно если пациент относится к социально благополучным слоям населения, имеет семью, детей);
  • риск внепеченочных осложнений (развитие аутоиммунных заболеваний, поражения нервной, сердечно-сосудистой системы и т.д.).

Количественное определение РНК HCV важно и для контроля эффективности проводимого лечения. По мере продолжения приема противовирусных средств полученные цифры снижаются. Целью терапии является достижение отрицательного результата качественного анализа методом ПЦР.

До появления большого количества частных лабораторий, где пациент может сдать практически любой анализ без документов от врача, направление на выполнение количественной ПЦР давали на определенном этапе диагностики или лечения.

В соответствии с нормами и протоколами ВОЗ, показаниями к проведению такого исследования служат:

  • положительные серологические маркеры HCV (anti-HCV Total, наличие иммуноглобулинов класса G и/или М);
  • положительный результат качественной ПЦР;
  • контроль проводимого лечения.

При желании пациент может самостоятельно обратиться в частную клинику и выполнить подобное исследование. Но при отсутствии гепатита С проведение такого лабораторного теста считают нецелесообразным.

Для определения вирусной нагрузки установлены следующие сроки:

  • до начала терапии (возможно, одновременно с генотипированием);
  • 4 неделя лечения (отрицательные данные свидетельствуют о быстром вирусологическом ответе и служат предикторами благоприятного исхода);
  • последняя неделя терапевтического курса (12 или 24 в зависимости от подобранной схемы), негативный результат подтверждает эффективность терапии, позитивный требует продолжения лечения, но уже с применением других медикаментов;
  • 24 и 48 неделя после окончания лечебного курса (вне зависимости от его продолжительности), отсутствие вирусной нагрузки подтверждает выздоровление.

Дополнительно исследование проводят только по показаниям (например, ухудшение самочувствия, ошибки в приеме таблеток, выявление сопутствующих инфекций и т.д.). Выполнение ПЦР не исключает необходимости в других анализах – клинических исследованиях крови и мочи, печеночных проб, УЗИ и прочих.

Чтобы расшифровка анализа ПЦР не была ошибочной, необходимо соответствующим образом подготовиться к забору крови. За некоторым исключением правила не отличаются от таковых при других исследованиях.

  • сдавать кровь строго натощак (последний прием пищи за 12 часов до посещения лаборатории);
  • процедуру проводить в первой половине дня (как можно раньше);
  • в день анализа после пробуждения пить можно только воду; чай, кофе, газированные и/или сладкие напитки, соки и т.д. противопоказаны;
  • за 3–5 часов до сдачи крови нельзя курить;
  • если невозможно прервать прием каких-либо медикаментов, сообщить названия принимаемых лекарств лаборанту и врачу, который будет интерпретировать полученные данные.

Наличие гепатита С уже подразумевает полный отказ от спиртного и строгую диету (стол №5). Но если анализ проводится на этапе диагностики, за 5–7 дней до забора крови обязателен контроль питания с исключением тяжелых для печени продуктов и алкоголя.

Обычно, когда пациент получает на руки результаты анализов, в бланке приведены показатели нормы, полученные значения и краткая интерпретация. Однако расшифровка анализа крови на гепатит С должна проводиться только врачом. Количественная ПЦР – один из этапов диагностики, поэтому врач сопоставляет приведенные цифры с полученными ранее результатами.

В зависимости от полученных показателей определяется степень вирусной нагрузки или полное отсутствие РНК HCV в организме.

Если проведен количественный анализ на гепатит С, расшифровка проводится в соответствии с таблицей:

Значение показателя Уровень вирусной нагрузки
РНК вирус не обнаружены (либо количество копий меньше чувствительности тест-системы) Норма, человек здоров либо анализ проведен в инкубационный период патологии
1,8×102–7,9×105 МЕ/мл Низкая вирусная нагрузка. Указывает на недавнее инфицирование, латентное течение либо эффективность противовирусных препаратов
8×102–2,3×107 МЕ/мл Умеренная вирусная нагрузка. Обычно отмечается при хронической форме HCV. Прогноз лечения благоприятный при условии соблюдения рекомендаций врача
2,4×107 МЕ/мл и выше Высокая виремия. Очень вероятны тяжелые осложнения (вплоть до рака печени)

Чтобы точно расшифровать анализ и не допустить ошибочных результатов, оценивать данные количественной ПЦР можно только после выявления серологических маркеров качественной ПЦР. При ИФА обязательно указывается коэффициент позитивности. Также принимают во внимание данные ультразвукового обследования, эластографии и биопсии, если исследование проводилось.

Количественный анализ ПЦР проводят только в том случае, если положительны другие показатели крови при гепатите С.

Получение отрицательного результата возможно при:

  • самостоятельном выздоровлении (в медицинской литературе приведена статистика, по которой порядка 15% случаев инфицирования HCV остаются незамеченными, иммунная система человека полностью устраняет вирус);
  • раннем вирусологическом ответе (при оценке результатов в ходе противовирусной терапии);
  • при ошибочных данных предыдущих исследований (маловероятно, так как предварительно обычно назначают ИФА, качественную ПЦР, печеночные пробы).

Когда сдается анализ на гепатит С для оценки вирусологической нагрузки, расшифровка проводится врачом. Считается, что показатели нормы – это полное отсутствие РНК HCV в крови. Но для исключения скрытой инфекции исследование рекомендуют повторить через несколько недель.

Перед началом диагностического обследования необходимо точно знать, какие показатели крови указывают на HCV. С одной стороны это позволит избежать пациенту лишних финансовых трат на ненужные анализы, с другой – сэкономит время.

Так, при гепатите С показательны такие данные:

  • позитивный ИФА вне зависимости от класса обнаруженных антител; но данный параметр оценивают на фоне других результатов, так как некоторые особенности работы иммунной системы могут повлиять на правильность исследования;
  • позитивная качественная ПЦР (чувствительность и специфичность метода достигает 100%);
  • определение количества копий вируса при количественной ПЦР.

Косвенными признаками HCV является превышение норм печеночных трансаминаз, билирубина, лейкоцитоз, ускорение СОЭ, наличие билирубина в моче.

При расшифровке результатов принимают во внимание сокращения, как обозначается гепатит С в анализах. Обычно вирусную нагрузку указывают в МЕ/мл или IU/ml, а РНК вируса английской аббревиатурой RNA HCV.

В отличие от ИФА вероятность ложного результата ПЦР практически нулевая. Ошибки возможны только в результате человеческого фактора, то есть при нарушении правил забора крови, хранения образцов и непосредственно проведении исследования.

Специалисты в области гепатологии подчеркивают, что количественная ПЦР не имеет аналогов и является одним из основных исследований для пациентов с HCV. Механизм проведения анализа сводит к минимуму вероятность ложноположительных или ложноотрицательных результатов.

Для получения результатов требуется несколько дней. Забор крови не требует особой подготовки, возможен практически в любой клинической лаборатории и не сопровождается какими-либо значимыми болевыми ощущениями. Но основным преимуществом такого анализа является высокая точность, достигающая 100%.

источник

Заболевание под названием гепатит может серьезно поразить печень и вызвать сильное воспаление. Существует несколько типов гепатита, а вирусы, которые провоцируют развитие заболевания могут делиться по генотипу в зависимости от мутации и географического расположения. Один из распространенных видов заболевания это тип С. Количественный анализ на гепатит С, расшифровка которого проводится лечащим врачом, может протекать в острой форме или перейти в хроническую.

Для определения диагноза проводится соответствующее лабораторное исследование. В качестве первого поверхностного теста может быть использован качественный анализ, который покажет есть ли в организме возбудитель гепатита. Но для установления точной стадии заболевания и назначения лечения необходимо провести количественный тест.

Вирус гепатита передается от человека к человеку. Заболевание имеет инкубационный период, в который симптомы практически не проявляются. Время скрытого течения болезни зависит от иммунной системы человека и количества вируса, которое попало в организм. Медики установили следующие основные пути передачи гепатита С:

  • 47% вероятность заразиться вирусом через кровь при использовании общих нестерильных шприцов во время введения внутривенных наркотиков. Организм, ослабленный влиянием наркотических веществ, не может сопротивляться вирусу и болезнь распространяется.
  • 22% шанс подхватить гепатит при переливании крови. В связи с высоким риском заражения гепатитом, ВИЧ и другими заболеваниями через донорскую кровь, медучреждения подвергают все биологически образцы обязательной проверке перед использованием. Если соблюдается это правило, то риск заражения минимален.
  • 16% риск заражения гепатитом при использовании нестерильных медицинских инструментов. Как правило, все врачи тщательно следят за оборудованием и инвентарем. Но если техника безопасности не соблюдается, возможно заражение гепатитом или другими заболеваниями.
  • 13% шанс передачи вируса от инфицированной матери растущему плоду.
  • 12% вероятность заразиться вирусом при сексуальном контакте без использования презерватива со случайным половым партнером. По статистике для гомосексуальных пар риск выше.

Нормальным, тое есть здоровым состоянием считается отсутствие каких-либо серьезных проявления недомогания. Опасность вируса гепатита состоит в том, что заболевание может не давать сильных симптомов. Явные признаки заболевания, (рвота, резкое похудение и пр.) проявляются только в 15% случаев. У остальных 85% больных симптомы проявляются достаточно слабо. Необходимо следить за своим самочувствием и реагировать на ухудшение состояния.

  • Наиболее характерный признак проблем с печенью, это желтушность кожи и белка глаз. Эти признаки соответствуют не только вирусу гепатита, но и другим заболеваниям печени.
  • Появление сосудистых звездочек на коже. Мелки капилляры, которые находятся у кожного покрова расширяются в результате присутствия вируса в крови, и появляются «звездочки».
  • «Печеночные ладони» это симптом, который сопровождается покраснением ладоней, а иногда и стоп. Это явление также называется пальмарной эритемой и появляется обычно вместе с сосудистыми звездочками.
  • Раздражающее токсическое воздействие вируса на организм может вызвать кожный зуд.
  • Из-за изменения химического состава крови может быть нарушен показатель свертываемости.
  • Длительное воздействие вируса на организм приводит к нарушению функций мозга (приобретенная энцефалопатия).
  • Возможно появление внутренних кровотечений.
  • Нарушения функций печени может привести к скоплению жидкости в брюшной полости (асцит).
  • В конце дня на ногах больного появляются отеки.

Проявление одного или двух симптомов характерно для самых различных заболеваний. Чаще всего недомогание объясняется физической усталостью или сильной психологической нагрузкой и стрессом. При обнаружении нескольких характерных симптомов из представленного списка имеет смысл сделать количественный анализ на гепатит С.

Читайте также:  Анализ на спид гепатит натощак сдается

Одним из самых надежных и достоверных способов диагностики гепатита это полимеразная цепная реакция или ПЦР. В отличие от других типов исследования (ИФА или РИФ) анализ ПЦР на гепатит позволяет обнаружить непосредственно генетический материал вируса, а не антитела для борьбы с ним. Это дает возможность для точной диагностики. Антитела к вирусу сохраняются в человеческом организме и после полного выздоровления. В таком случае ИФА обнаружит антитела у совершено здорового человека, то есть результат будет положительным. С анализом ПЦР такой проблемы нет.

Норма для показателя составляет число, близкое к нулю. То есть, у здорового человека в принципе не должно быть клеток вируса в организме. ПЦР количественный отражает то число, вирусных клеток, которое обнаружено в исследуемом биологическом образце. Исходя из полученных данных, врач может сделать вывод о степени зараженности организма в целом. Концентрация вируса указывает на стадию заболевания и позволяет отследить приблизительное время заражения.

Важно не только правильно подготовиться к анализу и сдать биологический образец в лабораторию, но и расшифровать полученные данные. Это должен делать только квалифицированный врач. Конечно, на бланке с результатом уже имеется информация о принятых нормах и проставлены значения пациента. Однако цифры это еще не все, опыт и медицинские знания позволяют получить больше информации. Таблица показывает, какой результат может показать анализ ПЦР на гепатит тип С количественный:

Содержание вируса
(Ме/мл)
Значение
Нет Вирус в организме человека отсутствует, это нормальный показатель для здорового человека. Также такой результат может быть, если концентрация вируса ничтожно мала и находится ниже чувствительности теста.
Менее 1,8×10 2 Содержание вируса в исследуемом биологическом образце ниже линии границы.
Менее 8×10 5 Обнаружено незначительное количество вируса, заболевание в начальной стадии. Для пациента это хороший прогноз, возможность назначения эффективного лечения и полное выздоровление в большинстве случаев.
Более 8×10 5 Концентрация вируса высокая, требуется немедленное лечение. Организм подвергается серьезной нагрузке.
Более 2,4×10 7 Концентрация вируса очень высокая, выше линейного диапазона. При составлении прогноза учитываются все факторы, лечение может быть длительным, а болезнь может перейти в хроническую форму.

Для лечения гепатита С количественный анализ имеет первостепенное значение. От того, насколько сильно вирус поразил организм, зависит назначение препаратов и дальнейший прогноз для пациента. Кроме концентрации гепатита С в крови, с помощью ПЦР можно определить генотип вируса. И если данный тип возбудителя болезни не характерен для местности, в которой проживает больной, можно отследить путь заражения и предотвратить вспышку гепатита в регионе.

Расшифровка анализа не менее важна, чем сама процедура. Количественный ПЦР может быть ложным только в результате ошибки, так называемого человеческого фактора. По различным данным вероятность получения ложного результата анализа составляет около 5%. Порча биологического образца возможна при транспортировке и неправильном хранении.

Также имеет место загрязнение рабочего места лаборанта и ошибки во время взятия крови для анализа.

От пациента в данном случае мало что зависит. Но следует уделить максимум внимания выбору лаборатории, в которой будет проводиться исследование. Сегодня любой человек может ознакомиться с отзывами о медицинских учреждениях в интернете и составить мнение о компетентности и профессионализме сотрудников лаборатории. Оснащенность современным оборудованием и положительная реакция людей снижает шансы на получение ложного результата.

Согласно медицинской статистике в 30% случаев заражения гепатитом типа С иммунная система человека может самостоятельно побороть заболевание без использования медицинских препаратов. В остальных 70% случаев без врачебного вмешательства болезнь перетекает в хроническую форму и остается навсегда, постепенно разрушая печень и сокращая длительность жизни человека. Количественный анализ на гепатит С с расшифровкой позволяет, как диагностировать заболевание в начальной стадии, так и отслеживать периоды обострений хронической формы заболевания.

источник

Гепатит С – вирусная инфекция, которая попадает в организм при контакте с кровью или выделениями половых органов больного человека. Вирус разрушает клетки печени, вызывая ее воспаление. Отсутствие специфических симптомов затрудняет его обнаружение. При подозрении на гепатовирус назначают ряд обследований, в том числе и тест на определение вирусной нагрузки. Расшифровка количественного анализа на вирус гепатита С определяет стадию болезни и учитывается при подборе лекарств.

Если качественный анализ определяет наличие или отсутствие РНК гепатита С в крови, то количественный выявляет количество вирионов на 1 мл крови. Его называют тестом на определение вирусной нагрузки, поскольку по результатам можно понять, насколько тяжело протекает болезнь.

Тест выполняют по методу полимеразной цепной реакции. Кровь, взятую из вены, подвергают воздействию специальных реактивов, а затем изучают с помощью оборудования.

Если норма содержания частиц вируса нарушена, определяют тяжесть вирусной нагрузки по международным стандартам.

Метод используется на этапе диагностики болезни. Его результаты нужны лечащему врачу, чтобы определить прогресс гепатита и назначить противовирусные лекарства.

Во время лечения результат обследования нужен для контроля за процессом борьбы против гепатита. Его проводят через неделю от начала лечения, затем – через месяц, квартал и полгода после назначения терапии.

Другие методы ПЦР-диагностики:

  • Качественный тест. Делают перед количественным. С его помощью обнаруживают частицы вируса в крови больного. Анализ показан пациентам, у которых в крови есть антитела к С-вирусу (их определяет анализ ИФА).
  • Генотипирование. Выполняется после теста на вирусную нагрузку. Определяет специфику строения РНК вируса. В зависимости от нее гепатит относят к одному из известных генотипов.

Определение генотипа – обязательная часть подготовки к терапии. Некоторые генотипы, например, третий, устойчивы к интерфероновой терапии. Для их лечения назначают другие препараты – Даклатасвир, Софосбувир и т.д.

Количественный анализ на гепатит достоверен на 95% только при соблюдении условий сдачи крови. Чтобы избежать ошибки, пациенту потребуется:

  1. При поражении острыми вирусными инфекциями или обострении хронических аутоиммунных болезней отказаться от сдачи анализа. Состав крови при таких болезнях изменяется, как и уровень гепатовируса в ней. Сдавать биоматериал можно через 2 недели после выздоровления.
  2. Отказаться от употребления алкоголя и жирной пищи. Они повышают нагрузку на печень, что приводит к ослаблению органа и активизации вируса.
  3. Не принимать накануне исследования никаких лекарств. Если прием отменить невозможно, уведомить о нем врача в лаборатории.

Кровь берут из вены на локтевом сгибе. Сдачу биоматериала проводят через 8 часов после еды. Для соблюдения этого правила удобно сдавать материал с утра натощак.

Таблица международных стандартов расшифровки результатов анализа:

Количество вируса (МЕ/мл) Принятое определение уровня нагрузки
Отсутствие
0-180 Минимальная
180-800 тыс. Низкая концентрация
800 тыс. – 25 млн. Высокая концентрация
Свыше 25 млн. Критическая

Даже при высокой достоверности исследований методом ПЦР остается риск ошибочного теста. Его причины:

  • несоблюдение пациентов правил сдачи анализа;
  • халатность персонала, случайно испортившего материал;
  • низкая квалификация врача в лаборатории, который неверно провел исследования;
  • путаница в документах.

Чтобы избежать этих ошибок, стоит выбирать проверенные клиники для обследования.

Лучше всего сдать тест в 2-3 учреждениях одновременно, чтобы получить на руки достоверные результаты.

По направлению лечащего врача в государственном учреждении тест делают бесплатно. Проблема таких исследований – высокий риск ошибки из-за устаревшего оборудования в муниципальных поликлиниках. Поэтому люди, у которых есть возможность сдать анализ в частном порядке, выполняют тест платно. Стоимость зависит от политики учреждения, используемых реактивов. В клиниках Москвы она достигает 4 тыс. рублей.

С помощью метода полимеразной цепной реакции можно определить уровень других гепатовирусов в крови больного. Его часто назначают при проверке на гепатит Б. Только в этом случае ищут ДНК вируса гепатита, используя другие реактивы.

Анализ выполняется и при диагностике G-типа. При лечении A и E болезней тест на вирусную активность не проводится, поскольку они нуждаются только в симптоматическом лечении. Гепатиты типов А и Е не провоцируют хронического поражения и других осложнений. Исключение – гибель плода, если вирусом типа E заразилась беременная. Для здоровья самой матери он не опасен.

источник

Гепатит С. Чем он опасен для человека. Как диагностировать инфекцию. Что нужно для проведения анализа

Вирус гепатита С или ВГС – инфекционное заболевание, которое несет в себе молекулу рибонуклеиновой кислоты.

Этот тип вируса умеет легко приспосабливаться к условиям обитания и часто трансформируется в разные формы болезни, поэтому нашей защитной системе организма так сложно с ним справиться. Классифицируют шесть главных генетических типов инфекции и десятки подтипов. В наших краях зачастую встречаются первые три типа вируса.

По статистике лишь четверть случаев заболевания ВГС протекают без осложнений, во всех остальных случаях норма, если инфекция перерастает в хронический процесс, который пагубно влияет на внутренние органы. Так гепатит может осложняться печеночным фиброзом – процесс замены печеночных клеток. Дальше осложнения развиваются по цепной реакции: вследствие фиброза появляются раковые опухоли, болезнь печени перерастает в цирроз.

В большинстве случаев инфекция попадает в организм человека по кровеносным сосудам. Диагностируют вирус гепатита С несколькими методами. Отслеживают уровень концентрации антител к ВГС. Инфицирование не произошло, если в крови пациента не будут найдены антитела к ней. В противном случае вирус изучается более глубоко, проводят еще один тест – ПЦР. Только этот метод позволяет идентифицировать РНК вируса спустя всего полторы недели после заражения, во время, когда организм не успевает начать производство антител к инфекции, и последствия заражения никак не отражены на общем состоянии, тем более в результатах других исследований, таких как БАК и биопсия.

Вирусная нагрузка или количественный анализ ПЦР – анализ на определение уровня содержания инфекции в плазме. По сути, количественный анализ – это число молекул инфекционной рибонуклеиновой кислоты в одном миллилитре крови.

Р-ДНК – быстрый, дешевый и не самый точный количественный способ определения вируса на основе выявления клеток разветвленной ДНК. Этот тест может не идентифицировать заражение, присутствующее в организме из-за плохой чувствительности – около 450 МЕ/мл.

Количественный метод транскрипционной амплификации позволяет найти в организме клетки РНК. Этот способ появился сравнительно недавно, он стоит недорого и является достаточно эффективным средством диагностики. Чувствительность теста около 10 МЕ/мл.

Попробуем объяснить результаты анализов. Ниже приведена таблица и расшифровка.

Норма для каждого случая

Обнаруженная концентрация молекул инфекции, МЕ/мл Описание
отсутствует Результат – норма. Инфекция не присутствует в организме или присутствует в настолько малом количестве, что находится ниже порога чувствительности теста
0-1,8х10^2 Норма. Количество молекул инфекции меньше допустимых границ
1,8х10² – 8х10^5 Не норма. Инфекция присутствует в небольшом количестве.
8х10^5 – 2,4*10^7 Не норма. Инфекция в большом количестве
Свыше 2,4*10^7 Не норма. Большая опасность. Инфекция сильно выражена

Результат анализа может быть предоставлен исходя и другой классификации – по концентрации копий молекул вируса в единице жидкости. Усредненно можно полагать, что в одной единице МЕ 4 копии на один миллилитр.

Чтобы определить степень активности инфекции в организме, применяют метод исследования виремии. На основе такого анализа специалист дает заключение о возможности заражения пациентом окружающих, вступающих с ним в тесный контакт. Особой значимости набирает этот анализ при опасности передачи инфекции во время беременности от матери к плоду.

Данный тест проходят пациенты, у которых в крови нашлись антитела к инфекции. Примерно четверть больных острым гепатитом С излечиваются самостоятельно, то есть при клинических исследованиях следов вируса не выявляется. По итогам теста врач прогнозирует дальнейшее протекание болезни и назначает соответственное лечение.

Лечебные процедуры назначаются после проведения исследования ПЦР. Высокие показатели по результатам ПЦР снижают шансы на беспрепятственное восстановление здорового состояния организма, низкие же наоборот – повышают.

Также данный тест проходят пациенты уже параллельно с терапевтическими процедурами: в начале первого месяца, конце первого месяца, в конце квартала и через пол года.

Если уровень заражения с течением времени, а в частности в конце первого квартала лечения, не снижается, значит, лечение малоэффективно. Врачу следует изменить вектор терапии.

Снижение активности заражения определяется понижением в десять раз количеством молекул вируса в крови. То есть если на первой неделе было найдено10000 единиц, а в конце квартала 1000 единиц, инфекция считается угасающей, а лечение стоит продолжать.

После окончания курса терапии все равно необходимо отслеживать состояние инфекции, так как существует опасность рецидивной инфекции, т.е. вирус может снова распространяться, а болезнь прогрессировать.

Результат теста может быть некорректным из-за присутствия человеческого фактора при исследовании материала. Лаборантом может быть не соблюдены условия содержания опытных проб, например:

  • попадание грязи на испытуемую пробу
  • присутствие в плазме гепарина
  • наличие в плазме специальных веществ, действующих на реагенты, входящие в состав ПЦР.

В разных клиниках по одному и тому ж анализу могут предоставить отличающиеся результаты. Причина в различном подходе исследований, работе с разными реагентами. Это вполне обычная ситуация. Уберечь себя от неточного результата анализа можно, если сдавать анализы только в своей проверенной клинике.

В дополнение к уровню виремии необходимо идентифицировать генетический тип инфекции, особенно в период назначения и прохождения курса лечения. Стоит понимать, что характер болезни невозможно выявить путем проведения анализа ПЦР. Для этого служат и обязательны к применению другие тесты, такие как биохимический анализ крови (БАК), биопсия печени и так далее.

Материал для проведения опыта при гепатитах забирают из локтевой вены. Пациент сдает кровь рано утром до приема еды. Настоятельно рекомендуется ограничить физическую работу, организовать рациональное питание, воздержаться от вредных превычек за день до сдачи анализа. Тогда степень достоверности теста будет значительной. Как правило, исследование материала занимает не больше суток, то есть на следующий день после сдачи можно забирать результаты анализа.

источник

Вирусный гепатит С — тяжелое заболевание, которое протекает с поражением печени. У восьмидесяти процентов больных оно переходит в хроническую форму. Вирус размножается в клетках печени — гепатоцитах — и вызывает их гибель. Отмершая ткань замещается очагами соединительной ткани, развивается фиброз.

По мере развития фиброза печень оказывается неспособна выполнять свои функции, начинается цирроз печени, который опасен своими осложнениями: повышением давления в системе портальной вены, желудочно-кишечными кровотечениями, нарушением свертывания крови, изменениями психики из-за повреждения ядер головного мозга токсическими продуктами.

Причина заболевания — заражение вирусом из семейства Flaviviridae, который относится к типу РНК-вирусов. Это значит, что генетический материал, по которому синтезируются белки возбудителя, закодирован в молекуле рибонуклеиновой кислоты. Заражение происходит через кровь, половым путем, и от беременной женщины к плоду. К сожалению, между инфицированием и началом выработки антител может пройти достаточно большое количество времени — от двух недель до шести месяцев. Это не дает определить заражение методом иммуноферментного анализа и начать лечение на ранних стадиях.

ПЦР — метод молекулярного анализа, который позволяет обнаружить генетический материал возбудителя уже на первой неделе после инфицирования с помощью полимеразной цепной реакции. Исследование обладает высокой специфичностью, точностью, и позволяет не только определить наличие или отсутствие вируса, но и его концентрацию и генотип.

Для исследования берут кровь пациента, в которой потенциально может находиться РНК вируса. В кровь добавляют праймеры — искусственно синтезированные участки искомого гена малой длины, и РНК-полимеразу — специальный фермент, который многократно увеличивает количество генетического материала возбудителя. С помощью специального аппарата проводят несколько циклов нагревания и охлаждения. Затем материал анализируют и сопоставляют с известными генами вируса, на основе чего делают заключение о наличии или отсутствии заражения.

Читайте также:  Анализ на пцр гепатит с качество

Различают три вида ПЦР-анализа:

    Качественный анализ ПЦР . Первая стадия исследования. Он позволяет выявить генетический материал вируса в крови.

Количественный анализ ПЦР . Позволяет определить вирусную нагрузку — концентрацию генетического материала возбудителя в одном миллилитре крови. Это исследование проводят перед началом терапии, а затем на первой, четвертой, двенадцатой и (если курс длительный) двадцать четвертой неделе лечения, чтобы оценить его эффективность.

  • Генотипирование . Возбудитель гепатита С часто и быстро мутирует. На планете было обнаружено семь вариантов генотипа этого вируса. В России распространены первой, второй и третий тип. Каждый из генотипов обладает различной устойчивостью к терапии, например эффективность лечения первого типа составляет шестьдесят процентов, а для второго и третьего этот показатель достигает восьмидесяти пяти. Поэтому, для того чтобы подобрать подходящие препараты и назначить курс лечения достаточной длительности необходимо точно определить, каким типом вируса заражен пациент.
  • ПЦР-исследование назначают в следующих случаях:

    • контакт с больным человеком, при котором могло произойти заражение;
    • положительный результат иммуноферментного анализа;
    • признаки цирроза печени: изменение размеров печени, увеличение селезенки, появление на животе подкожного венозного сплетения;
    • появление симптомов поражения печени: боли в правой части живота, пожелтение кожных покровов;
    • повышение активности АЛТ и АСТ в биохимическом анализе крови;
    • перед началом лечения для определения вирусной нагрузки;
    • с целью контроля за эффективностью антивирусной терапии;
    • после окончания лечения для контроля за рецидивами;
    • при наличии диагностированного гепатита B, для исключения смешанного поражения печени.

    Расшифровкой ПЦР-анализа и иммуноферментного анализа на гепатит С должен заниматься гепатолог или инфекционист. Анализировать результаты ПЦР необходимо в комплексе с данными биохимического анализа крови, биопсии и УЗИ. Только квалифицированный врач сможет проанализировать результаты исследований и, основываясь на них, назначить правильное лечение.

    В анализируемом биологическом материале обнаружен генетический материал возбудителя. Инфицирование подтверждено.

    Инфицирование отсутствует, либо количество РНК возбудителя ниже границы чувствительности.

    Нормальный показатель для здоровых людей. Означает, что в исследуемом материале отсутствует РНК гепатита С, либо его концентрация ниже порога чувствительности исследования.

    Концентрация РНК ниже диапазона количественного определения. Такие результаты интерпретируют очень осторожно, соотносят их с данными других исследований, часто проводят повторное исследование.

    Уровень вирусной нагрузки при данной концентрации считается низким. Обычно снижение количества вируса означает, что терапия идет успешно.

    Уровень вирусной нагрузки при данной концентрации считается высоким.

    Количество РНК выше верхнего предела диапазона количественного определения. Делать выводы о степени вирусной нагрузки при таком результате нельзя. Обычно в таких случаях тест повторяют с разведением образца крови.

    Обнаружена РНК определенного генотипа

    В биоматериале обнаружен вирус гепатита С определенного генотипа и субтипа. Результат кодируется римскими цифрами и латинскими буквами, например — 1а, 2b. Всего существует семь генотипов и шестьдесят семь субтипов, однако в России встречаются только три первых типа.

    Обнаружена РНК вируса гепатита С

    В крови обнаружена РНК редкого для России генотипа, который нельзя отнести к первому, второму или третьему типу. Необходимы дополнительные исследования.

    Данный результат говорит о том, что пациент здоров, или о том, что колчество РНК возбудителя слишком мала.

    Возможна ситуация, когда ПЦР-анализ на гепатит С отрицательный, а иммуноферментный анализ распознает антитела против вируса. Это значит, что пациент переболел гепатитом С в острой форме и излечился самостоятельно. Примерно двадцать случаев инфицирования заканчиваются самопроизвольным излечением, если организм пациента оказывает достаточное сопротивление инфекции.

    Несмотря на то, что ПЦР — высокоточный анализ, его результаты могут быть искажены в следующих ситуациях:

    • кровь транспортировалась в лабораторию в ненадлежащих условиях, был нарушен температурный режим;
    • образец биоматериала был загрязнен;
    • в крови находились остаточные следы гепарина и других антикоагулянтов;
    • в исследуемом веществе оказались ингибиторы — вещества, которые замедляют или останавливают полимеразную цепную реакцию.

      Диагностика на ранних стадиях . ПЦР обнаруживает генетический материал возбудителя заболевания. С помощью иммунофлюоресцентного анализа можно определить только иммуноглобулины — вещества, которые организм вырабатывает в ответ на инфекцию. В случае заражения гепатитом С промежуток между заражением и началом иммунного ответа может составлять несколько недель и месяцев, в это время ИФА будет неэффективна. ПЦР даст ответ уже на первой неделе после заражения.

    Низкая вероятность ошибки . В исследуемом материале определяют участок генетического материала, который характерен только для одного вида возбудителей. Это позволяет исключить ложные результаты. При ИФА возможны ошибки, так как один и тот же вид антител может выделяться против разных вирусов — такие антитела называют перекрестными.

  • Высокая чувствительность . ПЦР позволяет обнаружить РНК возбудителя даже в минимальных количествах. Это дает возможность выявить скрытые инфекции.
  • Для ПЦР-анализа на гепатит С собирают венозную кровь. Обычно из вены пациента за один раз берут две порции крови: первую отправляют на ПЦР, а вторую на ИФА. Это делают для того чтобы более точно оценить, насколько сильно пациент заражен вирусом, и как иммунитет борется с ним.

    Обычно от пациента требуют соблюдения следующих правил:

    • анализ крови сдают с утра;
    • перерыв между последним приемом пищи и сдачей крови должен составлять восемь-десять часов;
    • за два-три дня до анализа нужно отказаться от жареной и жирной пищи, и алкоголя;
    • в течение двадцати четырех часов перед анализом пациент должен избегать физических нагрузок: не переносить тяжестей, не посещать спортзал или бассейн.

    источник

    Существует множество субтипов HCV, из-за чего не всегда удается подобрать эффективные противовирусные лекарства и достичь желаемых результатов в лечении. Разнообразие возбудителей обусловлено их способностью изменять свою структуру, то есть мутировать. Вследствие этого иммунитет не успевает сформировать мощный ответ против патогенного агента, а медикаменты оказываются неэффективными.

    Зачастую гепатит диагностируется на стадии цирроза, чему предрасполагает позднее выявление болезни из-за отсутствия клинических признаков. Только путем лабораторного исследования удается обнаружить HCV в инкубационном периоде.

    Количественный анализ на гепатит С дает возможность не только установить факт присутствия возбудителя в крови, но и подсчитать его концентрацию.

    Специфической подготовки к лабораторной диагностике не требуется. Достаточно придерживаться следующих рекомендаций:

    1. количественный анализ проводится натощак, при этом последний прием пищи – за 8 часов до забора крови;
    2. за двое суток следует отказаться от спиртного и «тяжелых» блюд;
    3. особое значение имеют лекарственные средства, которые принимает пациент. Они могут повлиять на результат исследования, поэтому врач должен знать о них.

    Также не желательна тяжелая физическая нагрузка и физиотерапевтические процедуры накануне забора крови. Чтобы расшифровка количественного анализа на гепатит С получилась достоверной, не стоит пренебрегать вышеперечисленными рекомендациями.

    Зачастую результат анализа пациент получает через сутки. Цена исследования на определение концентрации возбудителя в крови зависит от лаборатории и качества реактивов и может достигать 4 тысяч рублей.

    К числу первостепенных методов диагностики относится ИФА, или иначе иммуноферментный анализ. Он назначается для обнаружения специфических антител к HCV. Его эффективность достигает 95%. Если расшифровка исследования дает положительный результат, стоит заподозрить присутствие возбудителя в крови.

    Заметим, что у половины обследуемых при «+» тесте в ходе дальнейшей диагностики вирусный агент в крови не выявляется. ИФА в данном случае указывает на перенесенный контакт с HCV в прошлом, что подтверждается циркулирующими антителами.

    Более точным исследованием является полимеразная цепная реакция, или иначе ПЦР. Она позволяет определить концентрацию РНК возбудителя в крови. Обнаружив генетический набор вируса в биологическом материале, врач подтверждает гепатит С.

    ПЦР назначается пациенту для верификации диагноза. Она дает возможность выявить РНК на стадии, когда антитела еще отсутствуют. Существует несколько видов генетических исследований:

    1. количественный анализ ПЦР на гепатит С, который не только устанавливает факт присутствия возбудителя в крови, но и предоставляет информацию о его концентрации;
    2. качественный – подтверждает инфицирование;
    3. генотипирование – позволяет определить генотип патогенного агента и подобрать наиболее эффективные лекарства против него.

    Как уже было сказано, существует несколько видов лабораторного исследования:

    • качественный анализ – свидетельствует о присутствии патогенного агента в крови. Данный вид диагностики имеет определенный «уровень реагирования», поэтому не всегда оказывается достоверным. Чтобы правильно расшифровать результаты и получить реальные показатели, для исследования рекомендуется использовать тест-систему с чувствительностью — не ниже 50 МЕ/мл. Норма анализа – это «отрицательный ответ» или «вирус не обнаружен». Это указывает на отсутствие генетического набора возбудителя в исследуемом материале. Если результат оказался положительный, требуется дальнейшее обследование пациента;
    • количественный анализ ПЦР на гепатит С определяет вирусную нагрузку, то есть концентрацию патогенного агента в крови. Результат исследования показывает число единиц РНК в фиксированном объеме биологической жидкости;

    Вирусная нагрузка – это подсчет инфекционной РНК в одном миллилитре крови исследуемого. Единицы измерения – МЕ/мл, однако некоторые лаборатории определяют «копии/мл», при этом указывая на бланке нормы анализа для сравнения и оценки результатов.

    • генотипирование. Из-за способности возбудителя изменяться выбор эффективных противовирусных лекарств для терапии должен осуществляться на основании его генотипа. От него зависит не только результат, но и длительность лечебного курса. Так, гепатит HCV 1 требует назначения медикаментов на год, однако положительная динамика наблюдается лишь в 60% случаев. Что касается второго и третьего генотипов, то они являются менее стойкими к действию противовирусных средств, из-за чего эффективность терапии превышает 85%. При получении такого результата исследования – «вирус не типируется», стоит заподозрить присутствие возбудителя, который не распознается стандартными тест-системами.

    Расшифровка количественного анализа на гепатит С необходима для:

    1. дальнейшего обследования пациента, когда при ИФА были обнаружены антитела к HCV;
    2. подтверждения диагноза;
    3. установления вирусной нагрузки при микст-инфекции, когда человек заражен несколькими видами возбудителя;
    4. определения тактики лечения (выбора противовирусных медикаментов, их замены или завершения терапии);
    5. оценки динамики прогрессирования заболевания, а также эффективности лекарств;
    6. определения стадии патологии (острая, хроническая).

    ПЦР имеет следующие преимущества:

    1. хорошая чувствительность, благодаря чему удается подсчитать даже небольшое количество вируса;
    2. определение самого возбудителя (РНК), а не антигенов;
    3. специфичность методики — установление определенного типа патогенного агента;
    4. быстрота получения результатов, ведь для анализа не требуется выращивание культур на питательной среде. Ответ готов через 5 часов;
    5. универсальность – позволяет выявить генетический набор различных возбудителей, как РНК, так и ДНК-содержащих (гепатит В);
    6. обнаружение скрытой инфекции.

    Лабораторное исследование помогает подтвердить диагноз и является неотъемлемой частью комплексного обследования (анализа клинических симптомов, результатов ИФА и биохимии).

    Кроме того, ПЦР широко используется в аллергологии, генетике, а также для установления факта отцовства.

    Оценка результатов лабораторной диагностики осуществляется врачом путем сравнения полученных данных с нормой.

    Ответ анализа (МЕ/мл) Что означает
    Не обнаружено Это норма количественного анализа на гепатит С, что свидетельствует о том, что возбудитель не найдет, или его концентрация находится ниже уровня чувствительности методики
    До 1,8*10^2 Содержание патогенного агента ниже нормы
    До 8*10^5 Низкая вирусная нагрузка, что указывает на благоприятный прогноз и эффективную терапию
    Более 8*10^5 Возбудитель обнаружен — большая нагрузка.
    Выше 2,4*10^7 Концентрация вируса значительно превышает линейный диапазон

    Концентрация патогенного агента определяется амплификатором и сравнивается с диапазоном, границы которого от 1,8*10^2 до 2,4*10^7. Благодаря регулярному обследованию вирусоносителя удается своевременно обнаружить увеличение вирусной нагрузки, что подтверждает активацию возбудителя и обострение болезни.

    На результаты ПЦР могут влиять некоторые факторы:

    • некачественный сбор материала;
    • введение гепарина накануне исследования. Он относится к лекарственным средствам, которые уменьшают свертываемость крови, тем самым замедляя действие реактивов ПЦР;
    • несоблюдение правил транспортировки материала;
    • низкий уровень профессионализма врачей-лаборантов;
    • несоблюдение техники проведения анализа.

    Норма количественного исследования на определение РНК вируса гепатита С может несколько отличаться в разных лабораториях, однако эти погрешности зачастую не влияют на конечный результат обследования. Не последнюю роль играет вид тест-систем, а именно их чувствительность. Это особенно важно для пациентов с невысокой вирусной нагрузкой, которую некоторые лаборатории могут не обнаружить.

    Лабораторная диагностика проводится на этапе обнаружения гепатита С, в процессе лечения, а также после проведенной терапии. Это дает возможность правильно установить субтип возбудителя, подобрать эффективные лекарства и отследить динамику изменений на фоне их приема.

    Кроме того, исследование крови позволяет подтвердить выздоровление или хронизацию инфекционно-воспалительного процесса. Обязательным считается анализ перед началом терапии и спустя 3 месяца, что необходимо для оценки динамики и эффективности выбранных противовирусных средств.

    Дополнительно врач назначает ПЦР на 4 и 24 неделях терапии. О благоприятном прогнозе можно говорить при снижении вирусной нагрузки к концу третьего месяца. Например, при ее уменьшении с 1 млн МЕ/мл до 100 тысяч. Если концентрация возбудителей остается на прежнем уровне или несколько увеличивается, значит, противовирусные медикаменты неэффективны, и требуется их замена или добавление новых.

    В случае медленного снижения уровня патогенных агентов в крови врач может продлить лечение или наоборот, отменить препараты, получив отрицательный ответ ПЦР.

    При получении положительного результата лабораторной диагностики следует немедленно обратиться к инфекционисту, поскольку успех в лечении напрямую зависит от стадии, на которой был поставлен диагноз гепатита С и начата терапия. Кроме того, необходимо помнить о риске заражения окружающих, поэтому прием противовирусных препаратов важен не только для инфицированного, но и для его родственников.

    источник

    Вирус гепатита С способен размножаться в клетках крови и вызывать лимфопролиферативные болезни. Благодаря множественным мутациям иммунная защита организма ослабевает, возникают генотипы и субтипы вируса. При правильном и своевременном определении конкретного вида зависит эффективность противовирусной терапии. Опасность инфицирования состоит в том, что болезнь протекает бессимптомно. Всего в 15 процентах из 100 могут наблюдаться тошнота и рвота, похудением и повышением температуры.

    Стандартная норма гепатита С – это размеры от 40 до 60 нм, с большинством липидов, поражение печени в результате острого или хронического течения болезни. Гепатит С, а именно РНК-вирус семейства Togaviridae, крайне стойкий, передается путем переливания крови или использования нестерильных предметов, неправильная гигиена ванных принадлежностей и др. Количественный анализ позволяет исследовать кровь и выявить генетическую структуру инфицируемого вируса.

    Чтобы гепатит С и его генотипы были определены, проводят количественный анализ. В зависимости от анализатора могут определить три уровня заболеваемости РНК-вирусом.

    Исследование на гепатит С будет точнее при изучении таких показателей:

    Обратив внимание на результаты этих показателей и общее состояние организма, выводится результат, показывающий степень зараженности, форму, а также количество клеток гепатита С в крови. Это способствует процессу выздоровления и эффективности противовирусной терапии.

    Полиразмерная цепная реакция (ПЦР) дает представление о количестве частиц ДНК во взятых у пациента анализах, при этом правильно определит возбудителя инфекции.

    При том, что длительное время симптомы вируса могут маскироваться, человек может не ощущать начала течения болезни. Но при тщательном обследовании в 60–70% случаев выявляется гепатит С, первоочередный анализ, при котором – это ИФА, затем следует ПЦР диагностика. Анализ проводится в определенные периоды, чтобы определить стадию заболевания и назначить соответствующее лечение. Обойтись без этого, не применяя все эти процедуры, можно, прививаясь от гепатита.

    Сначала идет качественный анализ, который лишь подтверждает гипотезу насчет инфицирования, а затем количественный, определяющий нагрузку на печень. Идеальным вариантом будет отрицательный результат на гепатит С в генетическом материале пациента.

    Читайте также:  Анализ на маркеры вирусных гепатит расшифровка

    Качественный и количественный анализ

    Различают анализ качественный и количественный.

    При обнаружении вируса делают количественный анализ, другими словами, вирусную нагрузку, определяющую концентрацию вируса в крови и тяжесть заболевания.

    Вирусная РНК, находящаяся в определенном количестве крови, определяется как норма из расчета 1 мл на 1 сантиметр кубический. После количественного определения вирусной нагрузки можно судить о степени заражения еще неинфицированного окружения. Как только концентрация гепатита С повышается в крови, от окружения нужно изолироваться.

    Важно на первых этапах обнаружить степень концентрации гепатита, чтобы определиться с темпами реабилитации. Если норма гепатита С превышена на более, чем 800 тысяч МЕ/мл, она считается завышенной, при увеличении до одного миллиона – критической. Если количественный диапазон менее 400 тысяч МЕ/мл, считается, что заражение окружающих произойдет с меньшей вероятностью. Такая цифра дает понять, что гепатит С в организме присутствует в очень маленьких дозах. Анализ не смог определить количественное значение РНК частиц вируса, поэтому его назначают повторно несколько раз для точности диагноза.

    Нынче существует огромное количество самых различных болезней. И не меньшее число методов их определения. Так как агенты инфекций научились с легкостью приживаться в окружающей среде и эволюционировать, то чтобы их диагностировать, применяются новейшие технологии. Полимеразная цепная реакция (ПЦР) — это более быстрый и точный метод, что направлен на поиск возбудителя заболевания, путем существенного повышения части ДНК вируса гепатита в образце. О нем часто пишут: ищет иглу в стогу сена, а потом из игл строит стог.

    Выделяют качественный и количественный анализ на гепатит. Чтобы определить, находится ли вирус в организме, и тем, у кого нашли антитела к гепатиту С, проводят качественное тестирование. Расшифровка анализа выдает итог: «положительно»; «отрицательно». Негативное значение означает: либо человек здоров, либо агентов в крови еще недостаточно и их невозможно найти. Поэтому стоит провести повторное исследование через некоторое время.

    Положительный результат говорит о существовании инфекции. Это практически всегда точное значение. Ошибочные результаты зависят обычно от человеческого фактора (неправильное хранение или несоблюдение правил проведения методики). Когда норма, итог — отрицательный. Перед проведением тестирования особых правил нет, просто берут кровь с вены.

    Ежели нашли, проводят количественный анализ (вирусная нагрузка) — он дает числовые значения: сколько РНК вируса гепатита находится на данное время в установленном объеме исследуемого материала. При активном развитии инфекции ее можно обнаружить на 1−2 неделе у зараженного человека. Обычно исследуют также кровь, потому что агенты в ней свободно циркулируют.

    Отличием количественного анализа есть то, что не все его проходят. Качественный — определяет наличие, а количественный — помогает с подтверждением заключения «вирус гепатита», прогнозом протекания болезни и определения хода лечения. Насколько эффективна терапия, смотрят по числу РНК до и во время лечения. Также с его помощью определяют назначение доз препаратов.

    Как правило, его производят до начала излечения. Основными показаниями могут быть:

    Также смотрят, какая вирусная нагрузка при гепатите: низкая — терапия проводится успешно; повышенная — лечение не эффективно и его нужно менять.

    На разных фазах заболевания исследование проводят, чтобы дать рецензию пользы лечения и планированию срока его дальнейшего проведения.

    После проведения исследования расшифровать анализ могут не в цифрах, а словами: «ниже диапазона измерений» и «не обнаружено». Количественный ПЦР более чувствителен качественного. Вывод «не обнаружено» может говорить, что инфекция не найдена. «Ниже диапазона измерений» — испытание не нашло вирус, но он есть в малой величине. В этой ситуации делают повторное исследование.

    Вирусная нагрузка — определение числа инфекционного РНК в установленном объеме крови (количественно 1мл=1куб.сан). Формулируется в интернациональных замерах МЕ/мл. Отдельные лаборатории обозначают копии/мл. Расшифровать перевод компонентов в межнациональные значения различные тест-системы могут по-своему. Таблица 1. Расшифровка количественного анализа РНК вируса

    Посредством этого исследования провести диагностику могут каждому для удостоверения факта отсутствия болезни. Но для достоверных фактов нужно четко соблюдать инструкции. ПЦР используют в разных отраслях: криминалистике, для установления отцовства, для диагностирования различных вирусов, для выявления аллергии на лекарства, клонировании генов, мутагенезе, секвенирование ДНК.

    Данное исследование назначается врачом в случае положительного ответа при диагностике гепатита С. Как правило, оно назначается одновременно с анализом на определение генотипа вируса гепатита С. О чем говорит расшифровка количественного анализа на гепатит С? В первую очередь, этот анализ говорит о том, насколько пациент инфицирован и, соответственно, заразен. Количественное определение вируса в крови позволяет также определить, насколько эффективна применяемая схема терапии. Врачи назначают его после 4, 12 и 24 недель лечения. Снижение уровня вирусной нагрузки говорит о том, что терапия выбрана правильно. Также анализ назначается после 24 недель от момента завершения терапии.

    Исследования показали, что степень вирусной нагрузки не всегда влияет на скорость развития патологических процессов в печени. Случаи носительства вируса свидетельствуют о том, что сам человек может и не болеть гепатитом С, но являться источником заражения других людей. Кроме того, носители в любой момент могут стать и больными. Вирус гепатита С активизируется при снижении иммунитета, например, после перенесенного ОРВИ, гриппа, сильного стресса или переохлаждения.

    Заразиться гепатитом С можно:

    • через кровь. Возможно инфицирование при переливании зараженной крови, при проведении операций и манипуляций с кровью, лечении зубов, удалении родинок и бородавок, если были допущены погрешности в стерилизации инструментов;
    • в салонах красоты при выполнении тату, пирсинга, обрезного маникюра и педикюра, косметологической чистки лица и др.;
    • от матери к ребенку во время родов (5%);
    • во время незащищенного секса с инфицированным человеком;
    • во время принятия инъекционных наркотических средств не одноразовыми шприцами;
    • во время оказания первой помощи инфицированному вирусом человеку, если не соблюдать меры безопасности

    В отличие от других гепатитов способы передачи гепатита С в основном связаны с кровью. Бытовым путем заразиться гепатитом С невозможно! Ни рукопожатия, ни обычные поцелуи (несексуального характера) и общение, ни пользование предметами бытового назначения не могут передать гепатит С! Не стоит только брать маникюрные и бритвенные принадлежности у человека, который страдает гепатитом С! При оказании первой помощи при травмах пациентам с гепатитом С нужно обязательно надевать перчатки! Вирус погибает при кипячении через пару минут, а при стирке при температуре 60 °С – через тридцать минут. Замораживание не убивает вирус. Убийственно воздействует на вирус УФ-излучение. Через 16 часов вирус при комнатной температуре погибает!

    ПЦР – наиболее распространенный и точный метод определения вируса и его количественных возможностей. Метод способен определять вирусы в разных формах и диагностировать малоизвестные заболевания.

    Анализ ПЦР (полимеразной цепной реакции) осуществляется путем забора крови и определения в ней вирусной РНК.

    В образцы крови добавляются специфические ферменты и определяются в специальный реактор. Там происходит клонирование клеток.

    Сначала одна клетка делится на две копии, потом каждая из копий делится еще на две. Таким образом, после синтеза копий появляются сотни клеток ДНК.

    ДНК можно сравнить с базой информации о всевозможных возбудителях и выявить инфекцию на ранних сроках заболевания.

    • многие методы диагностики выявляют только наличие вируса путем выделения в крови продуктов жизнедеятельности инфекционных микроорганизмов. Метод ПЦР напрямую указывает на возбудителя инфекции;
    • специфика ПЦР заключается в том, что в исследуемой пробе крови выявляется уникальный фрагмент ДНК. Это исключает шанс на ложный результат;
    • ПЦР способно выявить даже единичные клетки инфекции и диагностировать несколько возбудителей в одной пробе крови.

    Помогает обнаружить вирус в крови. При положительном результате следует продолжить обследование и провести количественный анализ, который определит стадию болезни, и предоставит врачам возможность спланировать наиболее благоприятную тактику лечения. При проведении данного анализа допускаются только два заключения:

    • «Обнаружено». Свидетельствует о наличии вируса в крови. Подобный результат считается положительным. В крови уже выявлен РНК вируса, который уже начал развиваться, заражая здоровые клетки и поражая печень.
    • «Не обнаружено». Говорит о том, что в пробе крови отсутствуют РНК гепатита С. Также существуют случаи, что в исследуемом образце концентрация вируса ничтожно мала и не попадает в рамки чувствительности анализа. Стоит заметить, что анализ выявляет инфекцию на 10-й день после инфицирования, что дает возможность определить вирус еще до его существенных внешних проявлений.

    Выявляет концентрацию генетического материала вируса в определенном объеме крови. Это не только дает возможность определить тяжесть болезни, но и позволяет увидеть полную клиническую картину заболевания (в том числе при лечении). В результате проведения данного анализа могут быть только 3 заключения:

    Результат «Положительный». Результат в числовом показателе отражает вирусную нагрузку. Концентрация вируса определяет количество вируса в 1 миллилитре, что равно 1 кубическому сантиметру крови. Единицы измерения данного анализа МЕ/мл (международные принятые единицы на миллилитр). Если концентрация вирусных частиц меньше 8х10 000 МЕ/мл, то лечение эффективно, если же наоборот, то стоит изменить тактику лечения.

    Если вирусная нагрузка в течение первых недель терапии падает до 60 %, то эффективность лечения является высокой. Низкий уровень равен до 400 000 МЕ/мл, а высокий от 1 000 000 МЕ/мл. Вирусная нагрузка определяет степень заболевания и возможность его передачи. При высоком уровне концентрации вирусных клеток в крови риск передачи заболевания вертикальным или же половым путем достаточно велик.

    • Результат «Недействительный». Этот результат означает, что при качественном анализе вирус в организме был обнаружен, но количественный анализ не смог определить его концентрацию в крови. Такое происходит, когда количество частиц РНК вируса в крови ниже диапазона определения.
    • Результат «Не обнаружено». Расшифровка анализа означает отсутствие РНК клеток гепатита С в образце крови.

    Количественный анализ ПРЦ проводится на всех стадиях болезни. Для выявления оптимального лечения анализы проводятся на сроках: (4-я, 12-я, 16-я, и 24-я неделя). Если по результатам наблюдается снижение вирусной нагрузки, то лечение можно считать эффективным. После завершения терапии количественный анализ проводится для обнаружения рецидива, то есть, обнаружения вируса после снижения его активности до минимума.

    Серологическая диагностика гепатита С основана на обнаружении в образцах плазмы крови человека уникальных маркеров вируса гепатита С: антител к антигенам ВГС, относящихся к иммуноглобулинам классов G и M (анти-ВГС-IgG и анти-ВГС-IgM), и нуклеиновой кислоты возбудителя (РНК ВГС).

    Принцип метода основан на обнаружении в исследуемом материале специфичных фрагментов ДНК (РНК) различных биологических объектов, их избирательном синтезе и дальнейшей детекции продуктов реакции амплификации этих фрагментов.

    Количественные модификации ПЦР дают представление о ВН, имеющей решающее значение для прогноза и контроля терапии вирусного гепатита С.

    Обычно РНК ВГС может определяться в крови уже в первую неделю после заражения, до появления анти-ВГС (анти-HCV), которые могут не выявляться в течение первых 8–12 недель. Оба маркера ВГС-инфекции могут обнаруживаться в крови в различных сочетаниях, что требует правильной клинической интерпретации.

    Поэтому для формирования окончательного диагноза целесообразно, особенно при выявлении только одного из двух маркеров ВГС, проводить повторное тестирование образца крови на анти-ВГС и РНК ВГС.

    В ходе исследования выполняется детекция и подсчет числа копий РНК ВГС методом ПЦР в реальном времени.

    В клинической практике наиболее совершенным методом ПЦР-диагностики является REAL-TIME ПЦР, которая исключает загрязнение образцов и дает заключение о наличии и количестве РНК ВГС через две недели после предполагаемого инфицирования. Эта методика, кроме прочего, определяет генотип вируса с вирусной нагрузкой за одно исследование. Клиническая специфичность теста составляет 100%. Стандартный интервал значений теста от 15 до 100000000 МЕ/мл. Выявляются генотипы вируса 1-6 (1, 2, 3, 4, 5, 6). Порог положительного теста, когда может быть обнаружена РНК вируса, составляет 15 МЕ/мл. Основным преимуществом метода ПЦР является очень высокая чувствительность анализа – до 1 копии геномной ДНК возбудителя инфекции в исследуемой пробе в nested-модификации ПЦР.

    ПЦР – современный, высокочувствительный метод. Но его достоинство – высокая чувствительность — является одновременно и его уязвимостью, т. е. приводит к ложным результатам даже при выполнении анализа высококвалифицированными специалистами в хорошо оснащенных лабораториях. Результаты исследований в разных лабораториях часто не совпадают, что указывает на необходимость стандартизации диагностических систем для ПЦР-диагностики и повышенного внимания к проведению данного вида исследований. Высокая стоимость, длительность анализа, сложность метода и несовпадение результатов, полученных в разных лабораториях, ограничивают использование ПЦР в широкой практике.

    Результаты исследования выдаются на бланке с таблицей, в которой указан выявленный уровень РНК вируса (количество копий или концентрация в МЕ/мл). Для выражения величины МЕ/мл могут быть использованы и другие математические символы, например, 1. 9*10^5 (1. 9 на 10 в 5 степени).

    Основными показаниями к определению вирусной нагрузки при вирусном гепатите С являются:

    • лабораторно подтвержденное качественное наличие РНК возбудителя в сыворотке крови;
    • наличие у лечащего врача вопросов в выборе схемы применения противовирусных препаратов;
    • необходимость в точной оценке эффективности лечения.

    Исследование не требует специальной подготовки пациента.

    В норме у здорового человека отсутствует РНК возбудителя, то есть ВН равна нулю. ВН выражается в Международных единицах на мл. Выделяют большую ВН (>400 000 МЕ/мл) и маленькую ВН ( 100000000 МЕ/мл

    Анализ резко положительный. РНК вируса гепатита С выявлена в концентрации, выходящей за пределы референсного диапазона

    Для мониторинга эффективности противовирусной терапии следует использовать ПЦР-анализ в режиме реального времени с минимальным уровнем определения 15 МЕ/мл. Для разграничения низкой ВН от высокой используют уровень вирусной РНК 500 000 МЕ/мл.

    Контроль уровня вирусной нагрузки проводится как при остром, так и при хроническом гепатите С. Уровень вирусной нагрузки фиксируют во время лечения, по его завершении и через 24 недели после проведенного лечения.

    У беременных этот показатель фиксируют с диагностической целью, так как противовирусная терапия при беременности не проводится.

    Данные об уровне вирусной нагрузки используются для выбора и контроля противовирусной терапии, но ни в коем случае не дают представление об исходе болезни, особенно в случае хронических форм ВГС с нормальной функцией печени.

    При диспансерном наблюдении пациентам один раз в году проводится качественное определение РНК ВГС в крови. Если качественный результат положительный, то далее проводится количественный анализ с определением вирусной нагрузки.

    На сегодняшний день для диагностики ВГС используется множество различных методов, среди них количественный подсчет уровня вирусной нагрузки является ключевым для успешного лечения пациента. Достоинствами этого метода являются высокая надежность, чувствительность и клиническая специфичность. Кроме того, уровень вирусной нагрузки является очень четким индикатором эффективности лечения противовирусными препаратами как в монотерапии, так и в комбинациях.

    Но на основании уровня вирусной нагрузки ни в коем случае нельзя судить о течении и исходе болезни. Поэтому данный показатель информативен для лечащего врача лишь в сочетании с другими данными — результатами фибросканирования и биопсии с микроскопией клеток печени. Таким образом, подсчет уровня вирусной нагрузки ни в коем случае не заменяет, а лишь дополняет существующие методы диагностики, используемые в клинической практике.

    Уровень вирусной нагрузки — наиболее надежный показатель, позволяющий достоверно установить наличие вируса у пациента и провести контроль терапии.

    источник