Анализы пцр на сифилис в

Диагностика сифилиса методом ПЦР получило широкое распространение в практической медицине, в частности в дерматовенерологии.

Как проводится исследование?

ПЦР на сифилис основывается на выявлении генетического материала ДНК возбудителя данной половой инфекции – специфической бактерии бледной трепонемы (Treponema pallidum) в исследуемом материале. Реакция представляет собой множественное копирование нуклеотидных оснований (амплификация) с их накоплением и последующей идентификацией. Для проведения анализа используется различный биологический материал, выбор которого зависит от стадии течения сифилиса.

ПЦР диагностика сифилиса проводится не всегда, а по определенным медицинским показаниям.

Диагностика серонегативного сифилиса, который характеризуется развитием инфекционного воспалительного процесса в органах половой системы без образования антител в крови. По этой причине другие исследования (РМП, реакция Вассермана) могут быть ложноотрицательными.
Выявление нейросифилиса – патологический процесс, который характеризуется попаданием возбудителя в структуры центральной нервной системы с их поражением.
Диагностика врожденного сифилиса, при котором бледная трепонема проникает в организм развивающегося плода от зараженной беременной женщины.
Выявление сифилиса при других патологических состояниях, сопровождающихся снижением функциональной активности иммунитета (вторичный иммунодефицит при развитии СПИДа) – в основном используется исследование ПЦР ВИЧ, сифилис.

Определяет целесообразность данного метода лечащий врач на основании результатов клинического обследования, а также лабораторных и инструментальных методов диагностики.

Первичный сифилис методом ПЦР диагностируется при помощи исследования биологического материала, взятого со слизистых оболочек в области возможного проникновения возбудителя. Для этого у женщин берется мазок со слизистой оболочки уретры (мочеиспускательный канал), влагалища и шейки матки. У мужчин материалом для исследования служит мазок из уретры.

После незащищенного орального секса также может исследоваться мазок со слизистой оболочки рта, а после анального секса – со слизистой оболочки прямой кишки. В сомнительных случаях дополнительно может исследоваться моча у мужчин и женщин, а также сперма и простатический сок у мужчин.

Поздние стадии развития инфекционного процесса характеризуются проникновением бледной трепонемы в кровь и ее распространением в организме с поражением структур нервной системы, внутренних органов.

В этом случае проводится ПЦР крови. Сифилис выявляется таким способом не всегда, поэтому исследование проводится совместно с другими методиками лабораторной диагностики.

ПЦР является высокочувствительным и специфическим методом исследования, при котором для выявления и идентификации бледной трепонемы достаточно наличие единичных клеток бактерий в исследуемом материале.

Эффективность такой диагностики сифилиса достигает 98%. В сомнительных случаях врач обязательно назначает дополнительные методики диагностики, включающие серологические, бактериологические исследования, а также микроскопию.

Выявить заболевание даже на ранней стадии можно в нашей клинике.

источник

Сифилис – это хроническое системное инфекционное заболевание, при котором поражается кожа, слизистые оболочки, органы и в конечном итоге – нервная система.

Возбудитель заболевания — Treponema pallidum. Считается «не живучей», но во влажной биологической среде может сохраняться длительное время (сперма, гной, слизь, влагалищный секрет).

Болезнь может передаваться через интимную связь, предметы личной гигиены больного сифилисом, от матери к плоду или через зараженную кровь при переливании.

Инфекции, что передаются половым путем (хламидиоз, герпес, папилломавирусная инфекция) и разнообразные повреждения слизистой оболочки при анальных контактах способны повышать вероятность заболевания сифилисом.

Заразиться от больного сифилисом человека можно в каждый из периодов протекания болезни. Наиболее инфекционными принято считать первичный и вторичный сифилис,когда явны сифилитические активные высыпания на коже или слизистой оболочке.

В таком случае Бледная трепонема попадает внутрь организма через мелкие повреждения кожи сначала в лимфатические сосуды, а потом – в лимфатические узлы, откуда уже возбудитель сможет распространиться в органы и определятся в слюне, молоке, сперме и других биологических средах.

При первых подозрительных симптомах, врач назначает исследование крови. В иных случаях врач может настаивать на обследовании даже при отсутствии внешних признаков заражения.

Анализ на наличие сифилиса совершают в случаях:

Донорского забора крови;
Трудоустройства в учреждения, связанные с дошкольным воспитанием, общественным питанием, здравоохранением;
Госпитализации;
Общения с людьми группы риска (чаще всего это наркоманы или заключенные).

Поскольку на некоторых стадиях болезни результаты анализов крови могут показывать отрицательные результаты (или в период выздоровления – ложноположительные), существует несколько видов анализов крови для обнаружения сифилиса в организме.

Специалисты рекомендуют использовать несколько разных анализов для точного определения наличия или отсутствия болезни в организме.

Исследование начинается из первого посещения врача и результатов скрининговых диагностик.

Поскольку при заболевании сифилисом в организме человека вырабатывается огромное количество антител, то на принципе их обнаружения построены серологические исследования.

Виды анализов крови на сифилис:

Анализ Вассермана
Реакцию РИБТ
ИФА
Исследование РПГА
ПЦР

Первый вид – анализ Вассермана сдают беременные женщины, доноры крови или просто люди, которым необходимо пройти медкомиссию.

Такой вид исследования дает возможность не только обнаружить сифилис, но и узнать приблизительное время заражения.

Принцип работы анализа крови прост: при положительном результате проявляются антитела, которые в количественном числе вырабатываются при попадании в организм бледной трепонемы.

Правда, иногда результаты могут быть ложноположительными – это, как правило, происходит во время сильного ослабления иммунитета (после перенесения тяжелых заболеваний крови, печени или во время беременности).

По этой причине специалисты часто назначают повторное исследование другого вида.

Другой вид – реакция РИБТ отличается от первого способа тем, что РИБТ обладает высокой специфичностью и чувствительностью.

Ее часто используют при распознавании скрытого сифилиса, поскольку она может отсеять осадочные реакции от истинных, что проявляются при анализе Вассермана.

Также такой вид анализа крови принято считать критерием излеченности сифилиса. Отрицательный результат РИБТ обозначает исчезновение специфических антител из сыворотки.

Третий вид – ИФА (расшифровывается как иммуноферментный анализ). Суть этого вида анализа крови на наличие сифилиса состоит в его возможности определить активность антител (титр).

Диагностика ИФА используется при подозрении на инфекционные заболевания разной локализации для определения стадии патологического процесса; для определения уровня гормонов при исследовании возможных патологий эндокринных органов; для выяснения причин интоксикации при укусах змей, отравлениях.

Четвертый вид — РПГА. Чаще всего анализ назначается для подтверждения сифилиса на любой из стадий. Принцип его исследования основан на определении агглютинацииэритроцитов, на которых имеются гены бледной трепонемы.

Пятый вид – ПЦР. Суть метода раскрывается уже в расшифровке «полимерная цепная реакция».

Этот метод имеет преимущество – он может определять ДНК, РНК даже в тех случаях, когда иным способам анализа это не под силу. Это делает его мощным и эффективным видом лабораторного исследования инфекционных заболеваний.

Сдать анализ на сифилис можно в любом государственном или приватном учреждении.

Разница между ними может сказываться только на цене и времени, которое вам придется тратить при сдаче анализов и ожидании результатов.

Большое количество пациентов выбирают частные клиники из-за отсутствия очередей, подборе квалифицированного персонала и индивидуальном подходе к клиенту.

Цени на разные виды анализов отличаются, но в целом остаются доступными. Можно пройти исследование за оплату от 240 руб.

Реакцию Вассермана можно сделать почти у всех частных и государственных клиниках:

Лаборатория «Invitro» предоставляет такую услугу за 370 руб. + взятие крови из вены – 199 руб.
Клиника «Onclinic» — от 400 руб.
Лаборатория«Гемотест»- 545 руб. с взятием биоматериала.

Лаборатория «Onclinic» — от 1300 руб.
МедЦентр Сервис — от 350 руб.
КВД (кожно венерологический диспансер) — от 300 руб.

источник

ПЦР на сифилис – точный метод выявления сложных, нетипично протекающих форм заболевания. В основе его лежит молекулярная биология. В ходе реакции удается определить наличие болезни по фрагментам ДНК возбудителя в плазме крови или ином материале. Метод диагностики проводится в крупных специализированных лабораториях. При направлении врачом на обследование обязательно пройти его в течение 5 дней.

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) была открыта в 1983 году Кэри Муллисом. 10 годами позже, в 1993 году, Муллис получил за это Нобелевскую премию по химии. Инновационный метод основан на образовании множества копий ДНК выявляемого объекта в биологическом материале. Полученный в необходимом объеме наследственный материал предполагаемого возбудителя сравнивается с образцом. На основе этого делается заключение.

Сегодня ПЦР применяют для:

Реакция на сифилис – это частный вариант ПЦР. Возбудитель заболевания – бледная трепонема – содержит свою специфическую ДНК. В ходе лабораторной диагностики части генетического материала бактерии увеличиваются до объемов, которые можно идентифицировать.

Клинически сифилис протекает в несколько стадий. Материал для исследования берут из разных очагов в зависимости от периода болезни.

После полового контакта для проведения цепной реакции должно пройти 2-3 недели. За это время сформируется первичный очаг заболевания – твердый шанкр. Это безболезненная язва на половых органах. Забор материала берут непосредственно из нее. Обыкновенные мазки из уретры или влагалища не информативны.

При вторичном сифилисе методом ПЦР исследуют кровь или содержимое кожных высыпаний. В случае генерализованного процесса с множественным поражением органов для исследования достаточно взять плазму крови.

В практике реакция назначается при:

Серонегативном процессе. Это вариант болезни, когда на возбудителя не формируются специфические антитела. Есть клинические проявления, включая твердый шанкр, а стандартный тест на сифилис дает ложный отрицательный результат. Единственным диагностически точным методом в данном случае является ПЦР.
Сифилитическом повреждении нервной системы. Диагностика обыкновенными методами невозможна. Болезнь протекает вначале бессимптомно, быстро прогрессирует с момента появления первых жалоб. Может осложняться сифилитическим менингитом, потерей памяти, инсультами. Болезнь развивается постепенно. С момента заражения проходит 20 и более лет. Поставить точный диагноз можно только с помощью ПЦР.
Выявлении врожденного сифилиса. Вариант внутриутробного заражения плода от больной матери. Дети рождаются недоношенными или с дефицитом массы тела. Характерны пороки развития органов и систем, возможны обильные кожные высыпания. Из-за полиорганной патологии поставить диагноз сложно. Точный результат дает только ПЦР.
Сочетании СПИДА и сифилиса. Прогностически самая неблагоприятная ситуация. Оба заболевания снижают иммунитет, поэтому клиническая картина стертая. Поставить правильный диагноз в данном случае сложно. ПЦР в ряде случаев – единственный способ выявления сразу двух этих заболеваний.

ПЦР-анализ на сифилис не требует длительной специальной подготовки.

В зависимости от места забора биологического материала необходимо соблюдать несколько несложных правил:

Если для выявления возбудителя берется кровь, анализ сдается строго на голодный желудок. Оптимальный интервал между сдачей анализа и последним приемом пищи составляет 12 часов. Накануне лучше не есть жирную и острую пищу.
Если берется содержимое папул, необходимо найти очаги сыпи на теле, которые не смазывались никакими мазями и кремами. Лучше, если высыпания будут 2-3-х-дневной давности. В выделениях будут содержаться возбудители и продукты их жизнедеятельности.
При взятии материала с пораженной поверхности половых органов необходимо перед процедурой выполнить правила личной гигиены, но не спринцеваться. В течение 48 часов избегают половых контактов. Перед забором образца рекомендуют не мочиться как минимум 2 часа. Забор материала у мужчин проводится более деликатно, при взятии ткани возможны неприятные ощущения.

При всех способах взятия проб результат будет более достоверным при отсутствии самолечения антибактериальными, противовирусными препаратами и мазями, особенно гормональными. Любое лечение сифилиса в домашних условиях без точного диагноза переводит болезнь в хроническую форму. В течение 10-15 лет трепонема поражает весь организм. Возможно развитие менингитов, пороков сердца, почечной недостаточности.

Результат при ПЦР бывает двух видов – положительный или отрицательный.

Диагностическая ценность заключения ПЦР сегодня наиболее высокая среди прочих лабораторных методов. Достоверность приближается к 100%. По разным источникам находится в промежутке от 98 до 99%.

Метод отличается высокой точностью и специфичностью. Позволяет выявить возбудителя сифилиса по единичным фрагментам ДНК.
Быстрый в исполнении. Заключение готово после 15:00 в день сдачи анализа.
Параллельно с бледной трепонемой методика позволяет определить генный материал других возбудителей, что необходимо при подозрении на смешанную инфекцию.

При получении заключения необходимо понимать:

Если ПЦР дал положительный результат, а все остальные тесты отрицательные, человек болен сифилисом. В собранном материале обнаружены частицы ДНК возбудителя. Отсутствие выявления заболевания при прочих пробах говорит об особенностях иммунного ответа больного. Специфические антитела на трепонему организм в силу разных причин не вырабатывает.
Если ситуация противоположная, серологический анализ положительный, а ПЦР отрицательный, человек не болен. Необходимо выявление причины ложного положительного результата реакции Вассермана. Аутоиммунные заболевания могут вызывать это искажение.
Контрольный ПЦР проводят через 2-2,5 месяца после первого. За это время больной успевает получить полный курс специфической терапии. Убитые антибиотиками бактерии, включая их ДНК, полностью выводятся из организма. При излечении в плазме нет фрагментов ДНК бактерии.

При положительном заключении ПЦР требуется специфическое лечение. Назначить его может только узкий специалист – уролог, гинеколог или дерматовенеролог. Самолечение категорически запрещено. Всех лиц, вступавших в половой контакт с пациентом на протяжении полугода, выявляют и пролечивают. Сифилис передается еще и бытовым путем. Поэтому профилактический курс проходят все члены семьи.

ПЦР относится специфическому методу, требующему современного оборудования и дорогостоящих реактивов. Реакцию делают в крупных лабораториях специализированных государственных или частных центров.

Сдать пробу можно от 347 руб. за анализ. По такому прайсу обследование можно пройти по направлению от врача в кожно-венерологическом диспансере. В частных клиниках при анонимном обследовании средняя цена составляет 1340 руб.

Сифилис – заболевание, которое при отсутствии своевременной диагностики и лечения поражает весь организм. Тяжелые поражения нервной системы, формирование пороков сердца, поражение почек – часто бывают проявлениями третичного этапа болезни.

Сдавать кровь на ПЦР рекомендуют раз в год лицам с повышенным риском инфицирования.

медицинские работники, особенно оперирующие хирурги и сотрудники, работающие с кровью;
больные после обширных оперативных вмешательств, переливания крови;
сотрудники донорских пунктов и станций переливания крови.

Сдавать на сифилис ПЦР обязаны сотрудники пунктов общественного питания, школ, детских садов для исключения бытового пути распространения болезни.

Полимеразная цепная реакция на сифилис – единственный метод, позволяющий определить, есть болезнь или нет. Заболевание полностью излечивается современными антибиотиками. При запущенных случаях поражаются все жизненно важные органы. Сифилис необходимо выявлять на ранних этапах инфицирования. Это гарантирует полное излечение без осложнений.

ПЦР необходимо раз в год сдавать лицам, попавшим в группы риска. В случае, если специалист назначает данное обследование, обязательно выполнить его в течение 5 дней.

Полимеразная цепная реакция на сифилис гарантирует точную диагностику.

источник

Вопрос к доктору Сухову Ю.А.
Здравствуйте. Я вам уже задавала вопрос на сайте «Здоровье Украины» очень кратко. Я полно напишу свою историю. Пожалуйста, проконсультируйте. Какие анализы нужно ещё сдать?
2 года назад был случайный половой контакт открытый.
Через 1,5 месяца начался какой то ужас: длительная лихорадка, в области щитовидки как будто шла какая то работа, что то гудело, потом головные боли, ангины, сильные боли в костях и мышцах сначала колющего характера, потом как кипяток шёл по мышцам,тошнота,Сыпь разовая,частые ОРВИ,которые длительное время не поддавались лечению,отдышка,трудности при дыхании,неприятный запах изи рта, невралгии, ночное потоотделение,сильная слабость, снижение работоспособности. Я превратилась почти в труп. До этого я была здоровой и цветущей девушкой, профессионально занималась танцами.Физически была достаточно вынослива и активна. Простудами вообще практически не болела.Была практически здорова.
Через 1год и 10 месяцев после незащищённого полового контакта сдала тест на вич в 2 разных лабораториях ИФА на антитела к вич отрицательно.
Гепатит В и С отрицательно.
ВЭБ ПЦР отрицательно
ЦМВ ПЦР отрицательно
Вирус герпеса 6 типа отрицательно
Токсоплазмоз ПЦР отрицателно
Сифилис отрицательно
ИППП отрицательно.

флюрография норма
Иммунограмма:
иммуноглобулин А 3,78 г/л (норма 0.70-4.00)
иммуноглобулин М 4,04 г/л (норма 0.40-2.30)
иммуноглобулин G 12,74г/л (норма 7.00-16.00)
Иммуноглобулин Е 8,49 г/л (норма до 100)
компонент комплемента С3 1,54 г/л (норма 0.9-1.8)
компонент комплемента С4 0,43 г/л (норма 0,1-0,4)
ЦИК
-спонтанная 112 оптич.единицы 80.0-125.0
-индуцированная 212 оптич.единицы 150.0-380.0
— фагоцитарный индекс 1,9 (1.5-3.0)
Пролифер.активность лимф.(РБТЛ)с
митогеном Кон.А 1,36 оптич.единицы (1.2-1.68)
ЦИК крупные 18 оптич.единицы (до 20)
ЦИК средние 99 оптич.единицы (60.0-90.0)
ЦИК мелкие 182 оптич.единицы (130.0-160.0)
Т-лимфоциты (СД3+,СД19-) 84,7 %проценты (норма 54-83)
Т-хелперы/Т-индукторы (СД4+,СД8-) 66.1% (норма 26-58)
Т-супрессоры/Т-цитотокс.клетки(СД4-,СД8+) 17.4%(21-35)
Иммунорегуляторный индекс
(СД4+,СД8-/СД4-,СД8+) 3.8 % (норма 1.2-2.3)
Цитотоксическте клетки
(СД3+,СД56+) 5 % (норма 3-8)
NK клетки (СД3-, СД56+) 5,3 % (норма 5-15)
В-лимфоциты (СД3-,СД19+) 9,5% (норма 5-14)
Моноциты (СД14) 1,4% (норма6-13)
Общий лейкоцитарный антиген,СД45 99,8 % (норма 95-100

В общем анализе крови: СОЭ 30; остальное норма.
Биохимия положительное СРБ, остальное норма.

Что мне делать? Я в отчаянии.Я уже на всё сдала, на все инфекции, а причина так и не найдена.Сдавать снова на вич?Уже прошло 2 года после контакта. Некоторые симптомы ушли, но чувствую себя очень плохо,сильная слабость,невралгии постоянные, потливость в области грудной клетки по ночам.Я не понимаю , чем я больна.Может, нужно сдать ещё какие то анализы и прийти к вам на приём?Я уверена, что этот молодой человек меня заразил, больше я его не видела. Помогите. Посоветуйте, что делать?

Сдавал анализы ИФА инфекционная панель.
герпес Ig G результат: 40,88 Норма: 11 Mo/мл позитивный, 9-11 гр.концентрация.

микоплазма не обнаружена.
сифилис не обнаружен.
трихомониаз Ig G результат: 0,04 норма: 1,0 позитивный.

уреаплазма — не обнаружена.
токсоплазма Гондии результат 30Mo/ml, гран.конц. 1-30, негативный 500 норма: 1,0 обнаружено.

Подскажите какой диагноз у этих анализов? Беспокоит результат трихомониаз Ig G и цитомегаловирус.

Анализы ПЦР инфекционная панель ни один вирус не обнаружен.
Анализ выделений из мочевых органов так же инфекций не обнаружено.

Добрый день 6.03.2011г. был не защищенный половой акт (оральный) на следующий день побежал сдавать анализ на гепатит В,С и ВИЧ брали кровь из вены . Результат был отрицательный интересует достоверность этих результатов ?И где можно пройти точные(ПЦР анализ ВИЧ,Гепатит,Сифилис)Днепропетровск?
А так же хотел узнать следующие тесты эффективные? Хотел бы сразу на все проверится..

Комплексная диагностика урогенитальных инфекций (мужской): микроскопия урогенитального мазка, трепонемные антитела — TPHA; обнаружение ДНК Ureaplasma sp. методом ПЦР; обнаружение ДНК Mycoplasma genitalium методом ПЦР; обнаружение ДНК Chlamydia trachomatis методом ПЦР; обнаружение ДНК Trichomonas vaginalis методом ПЦР; Обнаружение ДНК Mycoplasma hominis методом ПЦР; обнаружение ДНК Neisseria gonorrhoeae методом ПЦР

источник

ПЦР на сифилис – это высокоточный метод диагностики заболевания, основанный на новейших достижениях молекулярной биологии. Чаще всего для выявления возбудителя в организме человека используется ДНК патогена, но в последнее время появилась возможность работать и с РНК возбудителя.

Благодаря практически 100% вероятности выявления вида микрофлоры, ПЦР считается «золотым стандартом» в диагностике практически всех инфекционных заболеваний. С этого метода, как правило, обычно начинается диагностика инфекционных заболеваний, в том числе и сифилиса.

В данной статье мы разберем технологию проведения пцр, плюсы и минусы метода, а также узнаем как расшифровываются результаты при сифилисе.

ПЦР – это полимеразная цепная реакция, используемая для работы с генетическим материалом, в частности с дезоксирибонуклеиновой кислотой. ДНК является внутренней структурой каждого организма, хранящей всю информацию о нем.

Для выявления вида патогенной микрофлоры при проведении ПЦР на любое инфекционное заболевание, в том числе и сифилис, достаточно минимального фрагмента возбудителя. Оборудование современных клинических лабораторий позволяет досконально исследовать клеточную ДНК.

Для проведения анализа биологический материал проходит следующие этапы обработки:

внутренний генетический материал патогенного микроорганизма многократно синтезируется (клонируется), увеличивая количество имеющихся один или несколько фрагментов ДНК в миллионы раз. Для этого пробирки с материалом помещаются в специальные приборы, где по сложному алгоритму происходит изменение температуры. Таки образом оказывается влияние на процесс синтезирования. Через определенное время после завершения реакции можно получить результат о выявленном генетическом материале;
из всей массы полученной ДНК берется образец и сравнивается с эталоном (маркером или праймером). Такой анализ позволяет выявить наличие генетического материала, идентичного эталонному. Визуализация результата зависит от разновидности метода. Это может быть ультрафиолетовое облучение, использование геля в качестве основы для электрофореза, оценка на скорость реакции в реальном времени и другие способы.

Методика также позволяет провести количественный анализ ПЦР. Для этого высчитывается, сколько материала приходится на единицу количества клеток в содержащемся образце.

В настоящее время количественное определение возбудителя сифилиса методом полимеразной цепной реакции не проводится. Это связано с тем, что количество возбудителя в мазках или другом материале может ежедневно изменяться под влиянием защитных сил организма, предпочтений в питании, сексуальных связей и других факторов.

В случае необходимости методом ПЦР также можно выявить генетические особенности пациента, которые могут повлиять на течение заболевания. Это исследование поможет подобрать наиболее эффективные методы терапии.

Метод цепной полимерной реакции имеет ряд преимуществ перед другими способами диагностики сифилиса. Для пациентов большое значение имеет невысокая стоимость исследования.

А для врачей наибольшую ценность имеют такие показатели:

высокая оперативность. Результат исследования можно получить в течение одного дня. ПЦР позволяет синтезировать единичную молекулу патогена в течение 3 минут. Для получения нужного количества материала для качественной визуализации и постановки точного диагноза достаточно 30-40 циклов. Такой метод позволяет за короткий промежуток времени выявить микрофлору, для роста и развития которой в обычных условиях в целях идентификации потребуется намного больше времени;
специфичность. Для получения достоверных результатов анализа ПЦР на сифилис для определения инфекции достаточно присутствие одного фрагмента возбудителя. Также полимеразный анализ, в случае необходимости, дает возможность одновременно выявить и другие болезнетворные организмы;
сверхчувствительность. Методика позволяет обнаружить патогенную микрофлору в организме даже тогда, когда другие методы диагностики не выявили присутствия или следов возбудителя болезни;
высокая точность. Диагностическая ценность полимеразной реакции достаточно высокая и составляет 98%;
избирательность метода. ПЦР позволяет идентифицировать ДНК конкретного микроорганизма в присутствии генной информации миллионов других носителей.

Полимеразная цепная реакция позволяет обнаружить ДНК бледной трепонемы и, следовательно, наличие самой патогенной микрофлоры, а не антитела или другие следы присутствия возбудителя, которые могут оставаться в организме длительное время после лечения сифилиса. Поэтому после излечения в контрольных анализах присутствия дезоксирибонуклеиновой кислоты быть не должно.

В случае заражения инфекцией анализ ПЦР становится положительным на порядок раньше, что помогает своевременно обнаружить не только сифилис, но и другие опасные инфекции. Этот факт имеет большое значение в раннем выявлении заболевания, когда важную роль играет время начала лечения и присутствует высокая опасность стремительного распространения патологии в силу повышенной заразности.

Для получения достоверных результатов лаборатория должна иметь современное высокотехнологичное оснащение. Также обязательно наличие фильтра биологического очищения воздуха, чтобы патогенный материал не попал в образцы других пациентов.

Преимущества метода ПЦР в ранней диагностике инфекционных заболеваний, передающихся при половых контактах, очень важны в раннем выявлении такого высоко заразного заболевания, как сифилис.

К недостаткам метода можно отнести влияние человеческого фактора. Забор материала для анализа и само исследование должны проводиться в строгом соответствии с инструкцией.

Для полимеразной реакции на сифилис врач может назначить исследование крови, смывов, соскобов. Но наибольшей популярностью пользуется анализ мазков из урогенитальных путей. Это связано с тем, что именно в этом материале легче всего обнаружить присутствие возбудителя в высокой концентрации.

У женщин берут мазки из шейки матки, влагалища и уретры. У мужчин при сифилисе материал берут из уретры или используют, если пациент боится боли во время процедуры, мочу или сперму.

Для получения достоверного результата мазка на ПЦР надо:

за двое суток воздержаться от интимных контактов;
женщинам за двое суток до исследования не проводить спринцевания;
не мочиться 2-3 часов до посещения врача.

Если для исследования берется кровь, особой подготовки проводить не требуется.

Важным правилом при сдаче любого материала на анализ является полное исключение приема любых антибактериальных, противогрибковых и противовирусных препаратов минимум за неделю до забора материала. Это требуется для того, чтобы дать возможность возбудителю накопиться в организме в достаточном количестве и исключить появление ложноотрицательных результатов.

ПЦР на сифилис проводится по назначению лечащего врача при наличии явных симптомов заболевания, у лиц, имевших половые контакты с больным человеком, при подозрении на скрытые формы патологии. Анализ назначается с целью ранней диагностики заболевания, а также при явных сифилитических симптомах при отрицательных результатах серологических методов исследования. ПЦР поможет выявить патологию у новорожденных в случае имеющегося сифилиса у матери, определить наличие болезни у ВИЧ-инфицированных пациентов.

При проведении ПЦР на сифилис результат может быть положительным или отрицательным. Если ДНК искомого организма обнаружен, значит, человек болен сифилисом. Если пациент здоров, то никаких следов присутствия патогенной микрофлоры выявлено не будет, и ответ является отрицательным.

При диагностике также надо учитывать следующие нюансы:

если ПЦР положительная, а кровь на антитела дала отрицательный результат, все равно требуется проводить лечение, потому что в материале обнаружен сам микроорганизм. Отсутствие позитивных серологических реакций может быть обусловлено особенностями иммунной системы;
если при отрицательной ПЦР серологический анализ крови показывает положительный результат, требуется провести дополнительные исследования для детализации и выявления провоцирующего агента;
при получении положительного результата также надо иметь в виду возможность образования копий ДНК уже погибших возбудителей сифилиса. Поэтому для исключения ложной интерпретации анализа через один-два месяца ПЦР надо провести повторно.

Если возникает необходимость проведения исследования, интерпретации результатов и получения адекватного лечения, надо обращаться только к узкопрофильному специалисту. Это может быть дерматовенеролог, гинеколог, уролог.

Анализ полимеразной цепной реакции проводят лаборатории венерологических диспансеров, а также коммерческие диагностические центры. Стоимость исследования составляет от 360 до 700 рублей и зависит от региона страны.

источник

Сифилис – венерологическое заболевание, вызываемое бледной трепонемой.

Оно передается как половым путем, через любой вид сексуального контакта, так и бытовым (что происходит реже).

Сифилис может передаться бытовым путем через губную помаду, мокрое полотенце, постельное белье и так далее.

У врачей-венерологов, сифилис, из-за контакта с пациентами, может развиться на руках.

Сифилис делится на три стадии, разделенные длительными промежутками:

I. Первичный сифилис. Появление твердого шанкра в местах локализации бледной трепонемы.
II. Вторичный сифилис. Инфекция распространяется по всему человеческому организму вместе с лимфатической жидкостью. Увеличиваются лимфоузлы, появляются папулы и пустулы на коже, а также участки депигментации, повышается температура.

III. Третичный сифилис – последняя стадия. Появляются новообразования, оставляющие после себя рубцы. Выявляются тяжелые органные поражения, в том числе, нервной системы.

О том как проходят анализы на
сифилис рассказывает
подполковник медицинской службы,
врач Ленкин Сергей Геннадьевич

Содержание данной статьи проверено и подтверждено на соответствие медицинским
стандартам врачем дерматовенерологом, урологом, к.м.н.

ПЦР на сифилис

ПЦР (полимеразная цепная реакция) — метод диагностики инфекций, передающихся половым путем.

Как и любой другой метод диагностики венерических заболеваний, полимеразная цепная реакция обладает своими плюсами и минусами.

Высокая чувствительность, которую показывает анализ ПЦР на сифилис. Данный метод может обнаружить инфекцию, даже если в биологическим материале, содержится только одна клетка возбудителя. С помощью ПЦР обнаруживаются ДНК или ее обломки даже после полного излечения от инфекции

Универсальность данного метода. ПЦР-метод может находить инфекцию практически в любом материале: моче, крови, сперме, простатическом секрете, отделяемом конъюнктивы, соскобах эпителия урогенитального тракта, прямой кишки или ротоглотки.
Прямое определение возбудителя. К примеру, метод ИФА (иммуноферментный анализ), определяет присутствие возбудителя по косвенному признаку – антителам к тому или иному возбудителю.

Быстрый результат. Результат ПЦР диагностика сифилиса дает уже через четыре-пять часов.

Все вышеперечисленные плюсы доказывают

Теперь перейдем к минусам, которые имеет любой метод диагностики:

Возможность получения ложного результата. Это может произойти, когда инфекция уже мертва, но в организме все еще содержится ее ДНК.

Специальной подготовки для этого вида обследования не требуется.

Венозная кровь забирается натощак утром в лаборатории.

Показаниями к данному анализу являются:

Результат исследования записывается в бланке в двух варианта:

обнаружено (найдены специфические для Трепонема паллидум ДНК),
не обнаружено – фрагменты ДНК не обнаружены или их концентрация на грани чувствительности.

Чувствительность метода составляет 100%.

Исследования на сифилис методом ПЦР регламентированы приказами Минздрава РФ.

И проводятся в соответствии с его методиками.

очень желательны для пациентов:

3) при поражениях кожи слизистых неясного происхождения у иммунодефицитных пациентов.

Для данных категорий пациентов в качестве исследуемого материала на сифилис используется соскоб эпителия урогенитального тракта, простатический секрет или эякулят, соскоб из ротоглотки, прямой кишки, отделяемое конъюнктивы.

При необходимости сдать ПЦР анализы на сифилис, обращайтесь к автору этой статьи – венерологу, урологу в Москве с 15 летним опытом работы.

источник

Внимание: для получения достоверных результатов, данный вид исследования должен проводиться не ранее, чем через 2 недели после последнего приема антибактериальных препаратов.

Не рекомендуется взятие биоматериала ранее 24-48 часов после полового контакта.

Соскоб из уретры (для мужчин): рекомендуется сдавать через 2 часа после последнего мочеиспускания.

Соскоб из урогенитального тракта (для женщин):

во время менструации;
ранее 5 дней после использования вагинальных свечей, тампонов или спермицидов;
после вагинального исследования (УЗИ малого таза, кольпоскопия), спринцевания;

» [«opisanie»]=> string(3320) «

Сифилис — инфекционное заболевание, вызываемое бледной трепонемой (Treponema pallidum), передаваемое преимущественно половым путем. Заболевание характеризуется поражением кожи, слизистых оболочек, нервной системы, внутренних органов и опорно-двигательного аппарата, может протекать в скрытой форме. Продолжительность инкубационного периода в среднем составляет от 2 недель до 2 месяцев.

В диагностике заболевания применяют прямые методы (обнаружение возбудителя или его ДНК) и косвенные методы лабораторной диагностики (выявление в крови специфических антител).

Косвенные методы определения подразделяются на нетрепонемные (RPR, РМП) и трепонемные (ИФА, ИХЛА, РПГА, РИФ, иммуноблотинг).

Обнаружение ДНК Treponema pallidum методом ПЦР в соскобах эрозивно-язвенных элементов информативно на ранних стадиях заболевания (первичном и вторичном сифилисе). В качестве образца используется серозное отделяемое сифилидов, в связи с этим тест не информативен на стадии разрешения элементов. Тест необходимо проводить одновременно с определением антител в крови (методы RPR, РПГА, ИФА).

Референсные значения (вариант нормы):

Параметр	Референсные значения
ДНК Treponema pallidum	Не обнаружено

Выявление ДНК Treponema pallidum является подтверждением сифилиса.

Обращаем Ваше внимание на то, что интерпретация результатов исследований, установление диагноза, а также назначение лечения, в соответствии с Федеральным законом № 323-ФЗ «Об основах охраны здоровья граждан в Российской Федерации» от 21 ноября 2011 года, должны производиться врачом соответствующей специализации.

» [«serv_cost»]=> string(3) «365» [«cito_price»]=> NULL [«parent»]=> string(2) «25» [10]=> string(1) «1» [«limit»]=> NULL [«bmats»]=> array(1) array(3) string(1) «N» [«own_bmat»]=> string(2) «12» [«name»]=> string(12) «Соскоб» > > >

Не рекомендуется взятие биоматериала ранее 24-48 часов после полового контакта.

Соскоб из уретры (для мужчин): рекомендуется сдавать через 2 часа после последнего мочеиспускания.

Соскоб из урогенитального тракта (для женщин):

во время менструации;
ранее 5 дней после использования вагинальных свечей, тампонов или спермицидов;
после вагинального исследования (УЗИ малого таза, кольпоскопия), спринцевания;

Референсные значения (вариант нормы):

Параметр	Референсные значения
ДНК Treponema pallidum	Не обнаружено

Выявление ДНК Treponema pallidum является подтверждением сифилиса.

источник

Анализ на сифилис является одним из самых распространенных среди лабораторных исследований. Широко используются анализы на сифилис при проведении профилактических обследований. При помощи микроскопии выявляется возбудитель сифилиса — бледная трепонема. При помощи серологических реакций подтверждается диагноз сифилиса, устанавливается диагноз скрытого сифилиса, проводится контроль эффективности лечения, определяется излеченность больных.

Диагноз сифилиса устанавливается на основании клинических данных, обнаружении возбудителей сифилиса в образцах материала и подтверждении диагноза серологическими методами исследования. Проявления сифилиса многочисленны и многообразны, ввиду чего болезнь выявляется врачами разных специальностей. Дифференциальная диагностика первичного сифилиса проводится с целым рядом заболеваний.

Рис. 1. На фото первичное проявление сифилиса — твердый шанкр.

При заражении сифилисом в организме больного образуются антитела. Серологическая диагностика помогает врачу изучать динамику образования антител в организме больного сифилисом в начальных стадиях заболевания, в период лечения и после его окончания, решить вопрос рецидив заболевания у больного или повторное заражение (реинфекция), поставить диагноз сифилиса при массовых медицинских условиях.

Первыми после заражения начинают вырабатываться антитела IgM. Они начинают выявляться при помощи серологических реакций уже со второй недели после заражения. На 6 — 9 неделях заболевания их количество становится максимальным. Если больной не лечился, то антитела исчезают через полгода. Антитела IgM исчезают через 1 — 2 мес. после лечения раннего сифилиса, через 3 — 6 мес. — после лечения позднего сифилиса. Если регистрируется их рост, то это служит признаком рецидива сифилиса или говорит о повторном заражении. Молекулы IgM крупные и через плаценту к плоду не переходят.

Антитела иммуноглобулины IgG появляются в конце первого месяца (на 4-й неделе) от момента заражения. Их титр выше, чем титр IgM. IgG сохраняются после излечения достаточно длительное время.

Существует множество серологических реакций. Это объясняется антигенной множественностью бледных трепонем. В сыворотке крови больного человека на разных стадиях сифилиса кроме специфических образуются те или иные неспецифические антитела — агглютинины, комплементсвязывающие, иммобилизины, антитела, вызывающие иммунную флюоресценцию, преципитины и др. Серологические реакции по выявлению неспецифических антител обладают относительной специфичностью поэтому, чтобы избежать диагностических ошибок, следует пользоваться не одним, а комплексом серологических реакций (КСР).

Отличительной особенностью нетрепонемных тестов является получение ложноположительных реакций. Антитела-реагины, которые вырабатываются в крови человека против кардиолипинового антигена, регистрируются не только при сифилисе, но и при других заболеваниях: коллагенозах, гепатитах, заболеваниях почек, тиреотоксикозе, онкозаболеваниях, при инфекционных заболеваниях (лепра, туберкулез, бруцеллез, малярия, сыпной тиф, скарлатина), при беременности и месячных циклах, при приеме жирной пищи и алкоголя. Отмечено, что с возрастом количество ложноположительных реакций возрастает.

Рис. 2. На фото первичный сифилис у женщин.

Серологические тесты на сифилис подразделяются на трепонемные и нетрепонемные.

В качестве антигена в этой группе тестов используется кардиолипиновый антиген. Липидные антигены возбудителей сифилиса самые многочисленные. Они составляют 1/3 сухой массы клетки. С помощью нетрепонемных тестов выявляются антитела-реагины, которые вырабатываются против кардиолипинового антигена. В эту группу входит реакция связывания комплемента (РСКкард), реакция микропреципитации (РМП), реакция быстрого определения реагинов плазмы (RPR) и др. С помощью нетрепонемных тестов проводится первичный скрининг на сифилис (обследование групп населения), а возможность получения результатов в количественном варианте позволяет использовать эти тесты с целью контроля эффективности лечения. Положительные результаты нетрепонемных тестов должны подтверждаться трепонемными тестами. Отличительной особенностью нетрепонемных тестов является получение ложноположительных реакций.

В трепонемных тестах используются антигены трепонемного происхождения, выделенные из культуры бледных трепонем. С их помощью подтверждаются положительные результаты нетрепонемных тестов. В группу входят: РСКтреп — реакция связывания комплемента, РИФ — реакция иммунофлюоресценции и ее модификации, РИТ, РИБТ — реакция иммобилизации бледных трепонем, РПГА — реакция пассивной гемагглютинации, ИФА — иммуноферментный анализ.

Антигены для данной группы тестов получают генно-инженерным путем и используют в реакциях — РПГА и ИФА, в анализах иммуноблоттинга (ИБ) и иммунохроматографическом анализе.

Рис. 3. Для диагностики сифилиса используется комплекс серологических тестов.

Для выявления сифилиса используются нетрепонемные тесты или комплекс серологических реакций (КСР). Серологическая диагностика применятся с 5-й недели от момента заражения или с 2-3 недели после появления твердого шанкра. Антитела выявляются практически у всех больных со свежим первичным, вторичным и рецидивным сифилисом. Серологические реакции положительные у 70 — 80% больных с третичным активным сифилисом, в 50 — 60% случаев у больных третичным скрытым сифилисом.

Серологические реакции с применением нетрепонемных тестов могут давать ложноположительные результаты.

Рис. 4. Забор крови для проведения анализа на сифилис.

Реакция Вассермана (RW, РВ), изобретенная А. Вассерманом более 100 лет назад, сегодня претерпела множество изменений, однако, как дань традиции, сохранила свое название по настоящее время. Реакция связывания комплемента с применением кардиолипинового антигена предназначена не только для выявления антител, но и выполняется в количественном варианте — с разными разведениями сыворотки, что позволяет использовать ее для контроля эффективности лечения. Низкая чувствительность и специфичность, получение ложноположительных результатов — отрицательные стороны данного вида исследования.

Суть реакции Вассермана заключается в следующем: антигены, которые применяются при постановке реакции Вассермана, в случае наличия антител к возбудителям сифилиса в крови человека посредством комплимента связываются с ними и выпадают в осадок. Интенсивность реакции обозначают знаком (+). Реакция может быть отрицательной (-) — отсутствие осадка, сомнительной (небольшой осадок или +), слабоположительной (++), положительной (+++) и резко положительной (++++).

Более чувствительной является видоизмененная реакция Вассермана — реакция Колмера. С ее помощью выявляются антитела в сыворотках, где реакция Вассермана дала отрицательный результат.

При резко положительных реакциях проводится количественное определение реагинов, для чего используется сыворотка в разведениях от 1:10 до 1: 320, что позволяет использовать данный вид исследования для контроля эффективности лечения. Например, снижение титра антител и последующая их серонегативация (получение отрицательных результатов), говорит об успешном излечении заболевания.

Рис. 5. Анализ крови на сифилис — реакция Вассермана.

Микрореакция преципитации применяется для массовых обследований отдельных групп населения, диагностики сифилиса и контроля над эффективностью лечения. Для проведения данного вида исследования необходимо небольшого количества исследуемого материала. В основе микрореакции преципитации лежит иммунологическая реакция антиген-антитело. В случае наличия антител в сыворотке крови обследуемого комплекс антиген-антитело выпадает в осадок с образованием хлопьев. Реакция проводится в лунках специальной стеклянной пластины. Оценивается по интенсивности выпавшего осадка и величине хлопьев в (+) как реакция Вассермана. При обследовании беременных, доноров и для контроля эффективности лечения не применяется. VDRL и RPR являются разновидностями микрореакций.

Рис. 6. Вид реакции преципитации в капле на стекле.

Рис. 7. Анализ крови на сифилис — реакция микропреципитации.

Рис. 8. Набор для проведения реакции быстрого определения реагинов плазмы (Тест на сифилис RPR).

Все положительные тесты, полученные при проведении неспецифических серологических реакций, требуют подтверждения специфическими реакциями — трепонемными тестами.

При проведении трепонемных тестов используются антигены трепонемного происхождения. Их отрицательной стороной является невозможность использования для контроля эффективности проводимого лечения, получение положительных результатов при спирохетозах и невенерических трепонематозах и получение ложноположительных результатов при онкологических заболеваниях, лепре, некоторой эндокринной патологии. Такие тесты, как РПГА, ИФА и РИФ остаются положительными многие годы после излечения сифилиса, а в некоторых случаях и пожизненно.

РИБТ и РИФ являются более специфическими из всех серологических реакций, применяемых для диагностики сифилиса. Они позволяют различать ложноположительные реакции, выявлять поздние формы сифилиса, протекающие с отрицательными реакциями. При помощи РИБТ распознаются ложноположительные реакции у беременных, когда необходимо решить вопрос об инфицированности ребенка.

Суть реакции заключается в том, что антитела, находящиеся в сыворотке крови больного, обездвиживают бледные трепонемы. Отрицательной считается реакция при иммобилизации до 20% возбудителей, слабоположительная — 21 — 50%, положительная — 50 — 100%. РИБТ иногда дает ложноположительные результаты. Тест сложный и трудоемкий, однако, является незаменимым при проведении дифференциальной диагностики скрытых форм заболевания и ложноположительных результатов серологических реакций, в том числе у беременных. РИБТ дает 100% положительный результат при вторичном, раннем и позднем сифилисе, в 94 — 100% случаев — при других формах сифилиса.

Суть реакции заключается в том, что бледные трепонемы (антигены), соединенные с антителами, меченными флюорохромами, издают в люминесцентном микроскопе желто-зеленое свечение. Результат оценивается знаком (+). С помощью РИФ выявляются иммуноглобулины класса А. Реакция иммунофлюоресценции становится положительной раньше, чем реакция Вассермана. Она всегда положительная при вторичном и латентном сифилисе, в 95 — 100% случаев положительная при третичном и врожденном сифилисе. Техника проведения данного вида исследования проще, чем у РИБТ, но заменить РИФ на РИБТ невозможно, так данная реакция уступает РИБТ по специфичности. РИФ-10 (модификация РИФ) более чувствительна, РИФ-200 и РИФ-абс более специфичны.

Рис. 9. Анализ крови на сифилис — реакция иммунофлюоресценции (РИФ).

Суть реакции заключается в том, что сенсибилизированные сывороткой больного бледные трепонемы в присутствии комплемента прилипают к поверхности эритроцитов. Полученные комплексы при цетрофугировании выпадают в осадок. Чувствительность данного теста и специфичность близки к РИФ и РИБТ.

С помощью ИФА определяются иммуноглобулины класса М и G. Методика IgM – ИФА может быть использована в качестве скринингового и подтверждающего теста. Чувствительность ИФА и его специфичность аналогичны РИФ. При сифилисе ИФА дает положительные результаты с третьего месяца инфицирования и довольно долго (иногда всю жизнь) остается положительным.

Рис. 10. Иммуноферментный анализатор.

РПГА основана на способности эритроцитов, на которых адсорбированы антигены бледной трепонемы, в присутствии сыворотки больного склеиваться (гемагглютинация). РПГА применяется для диагностики всех форм сифилиса, в том числе скрытого. При применении высокого качества антигена данный вид серологической реакции превышает все остальные тесты по специфичности и чувствительности.

Рис. 11. РПГА применяется для диагностики всех форм сифилиса.

Рис. 12. Анализ на сифилис — реакция пассивной (непрямой) гемагглютинации (схема).

Рис. 13. Вид перевернутого зонтика, занимающего все дно пробирки, свидетельствует о положительной реакции. В случае, когда эритроциты оседают столбиком («пуговка») в центре дна пробирки говорят об отрицательной реакции.

Рис. 14. Тест РПГА в лабораторных условиях.

Наряду с серологической диагностикой методика обнаружения бледных трепонем (микробиологическая диагностика) играет важную роль, особенно в период серонегативного сифилиса, когда еще в крови отсутствуют антитела, но уже есть первые проявления свежего первичного сифилиса (твердый шанкр).

Биологическим материалом для исследования служит отделяемое с поверхности твердых язв (шанкров), содержимое пустулезных сифилидов, мокнущих и эрозивных папул, пунктаты инфицированных лимфатических узлов, ликвор и амниотическая жидкость, для проведения ПЦР — кровь.

Наилучшей методикой обнаружения возбудителей сифилиса является исследование биологического материала в темном поле микроскопа. Данная методика позволяет увидеть бледные трепонемы в живом состоянии изучить ее особенности строения и движения, отличить патогенные возбудители от сапрофитов.

Рис. 15. Анализ на сифилис — темнопольная микроскопия.

Рис. 16. При изучении сухих мазков используется окраска по Романовскому-Гимзе. Бледные трепонемы окрашиваются при этом в розовый цвет, все остальные виды спирохет — в фиолетовый.

Обнаружение бледных трепонем при микроскопии в темном поле — абсолютный критерий окончательной диагностики сифилиса.

Рис. 17. Для выявления бактерий применяется реакция иммунофлюоресценции (РИФ) — трепонемный тест. Специфический комплекс антиген- антитело при соединении со специфической сывороткой, меченной флюорохромом, в свете люминесцентного микроскопа дает свечение бактерий зеленоватым цветом.

Рис. 18. Возбудители сифилиса хорошо просматриваются в мазках, приготовленных по методике Левадити (импрегнация серебром). Бледные трепонемы темного цвета на фоне желтой окраски клеток инфицированных тканей.

Рис. 19. Возбудитель сифилиса при многократном увеличении.

Рис. 20. На фото колонии бледных трепонем. Получить культуру бактерий тяжело. Они практически не растут на искусственных питательных средах. На средах, содержащих лошадиную и кроличью сыворотки, колонии появляются на 3 — 9 сутки.

Эффективным и перспективным сегодня является методика проведения полимеразной цепной реакции. ПЦР на сифилис позволяет получить результат в течение нескольких часов, а в собранном для диагностики материале может присутствовать хотя бы несколько возбудителей заболевания.

Рис. 21. ПЦР на сифилис позволяет обнаружить ДНК или ее фрагменты бледных трепонем.

Чувствительность данного метода исследования зависит от наличия в биологическом материале бледных трепонем и достигает 98,6%. Специфичность данного теста во многом зависит от правильного выбора мишени для амплификации при проведении диагностики и достигает 100%.

Вместе с тем, в связи с недостаточно изученной сравнительной характеристики чувствительности и специфичности прямых методов диагностики сифилиса и ПЦР, данный метод обследования в РФ для диагностики заболевания пока не разрешен.

ПЦР на сифилис разрешено проводить лишь в некоторых случаях, как дополнительный метод диагностики врожденного сифилиса, нейросифилиса, при затруднениях проведения диагностики сифилиса с использованием серологических методов исследования у ВИЧ-больных.

Рис. 22. Выявление ДНК бледной трепонемы с применением ПЦР говорит либо о наличии жизнеспособных бактерий, либо об остатках погибших, но содержащих способных к образованию дополнительных копий отдельных участков хромосомной ДНК.

источник

Анализы на сифилис: виды анализов, расшифровка результатов, причины ложноположительных и ложноотрицательных результатов обследования.

Сифилис – это венерическое заболевание, возбудителем которого является бактерия Treponema pallidum (бледная трепонема). Подробнее о путях передачи сифилиса, его симптомах и возможных осложнениях читайте в статье Все о сифилисе. Симптомы и лечение.

Своевременное выявление сифилиса (с помощью специальных анализов) позволяет врачам вовремя начать лечение и предотвратить развитие опасных осложнений этой болезни.

Проведение анализов на сифилис во время беременности помогает предотвратить рождение детей с врожденным сифилисом. Подробно об анализах на сифилис во время беременности рассказано в статье Все о диагностике и лечении сифилиса во время беременности.

В подавляющем большинстве случаев у врачей нет возможности получить точные данные о сексуальной жизни пациентов (некоторые люди скрывают детали своей половой жизни или недооценивают риск заражения заболеваниями передающимися половым путем). В связи с этим, для того чтобы защитить людей от возможных последствий их собственной невнимательности или недостатка медицинских знаний, в некоторых случаях врачи назначают так называемые скрининговые анализы на сифилис (то есть анализы, которые сдают большие количества людей).

Врач может назначить вам анализы на сифилис, даже если у вас нет симптомов этой болезни, и вы уверены, что не могли им заразиться.

Необходимость проведения этих анализов связана с тем, что сифилис иногда передается бытовым путем (не через сексуальный контакт) и протекает в скрытой форме (то есть без симптомов).

При устройстве на работу (работникам здравоохранения, общественного питания, военнослужащим и пр.)
При становлении на учет по поводу беременности.
Во время поступления в больницу, при подготовке к операциям.
Донорам крови.
Лицам, заключенным в местах лишения свободы.

При обнаружении симптомов заболевания (обычно, это сыпь в области половых органов).
При получении положительных результатов скрининговых анализов на сифилис.
В случае если у вас был половой контакт с человеком, у которого был выявлен сифилис.
Новорожденным детям, матери которых больны сифилисом.

Кроме того, анализы на сифилис периодически проводятся во время лечения (для того, чтобы убедиться в том, что лечение эффективно) и даже после окончания курса лечения, для контроля излеченности.

Диагностикой и лечением сифилиса занимается врач дерматовенеролог. В диагностике заболевания могут быть использованы следующие анализы:

Осмотр кожи, наружных и внутренних половых органов производится с целью выявления основных симптомов сифилиса: твердый шанкр, увеличение лимфатических узлов, высыпания на коже и пр. (см. Симптомы сифилиса)

Для того чтобы обнаружить бледную трепонему, врачи обследуют под микроскопом мазки (или соскобы), полученные из язв, лимфатических узлов, околоплодных вод у беременных и пр. Кровь под микроскопом не обследуют.

Важно: Если в ваших анализах под микроскопом была обнаружена бледная трепонема, это означает, что вы точно больны сифилисом. Но если анализы показали, что возбудитель сифилиса не обнаружен, нельзя быть полностью уверенным в том, что сифилиса нет. Для того чтобы убедиться, что вы не больны, нужно сдать дополнительные анализы, описанные ниже.

ПЦР (полимеразная цепная реакция) – это сложный и дорогостоящий метод диагностики сифилиса, который позволяет обнаружить ДНК бледной трепонемы в крови или других исследуемых материалах (околоплодные воды, спинномозговая жидкость). Если анализ ПЦР дал отрицательный результат, то, скорее всего, вы не больны сифилисом. Однако при получении положительного результата (то есть, если ПЦР обнаружил ДНК бледной трепонемы в крови), нет 100% гарантии, что вы больны. Это связано с тем, что ПЦР иногда дает ложноположительные результаты (дает положительный результат при отсутствии заболевания). Поэтому если ПЦР дал положительный результат, рекомендуется дополнительно пройти другие методы обследования на сифилис (например, реакцию иммунофлюоресценции (РИФ) и реакцию пассивной гемагглютинации (РПГА)).

Серологический анализ – это обнаружение в крови особых белков (антител), которые вырабатываются в организме человека в ответ на инфекцию. В отличие от предыдущих методов диагностики, серологические анализы обнаруживают не саму бледную трепонему, а лишь ее «следы» в организме.

Если в вашей крови обнаружены антитела к бледной трепонеме, это говорит о том, что вы либо заражены сифилисом в данный момент, либо переболели им ранее.

Серологические анализы на сифилис делятся на 2 большие группы: неспецифические и специфические тесты. Основное различие этих анализов заключается в том, что неспецифические тесты показывают положительный результат только если человек болен сифилисом в данный момент и становятся отрицательными после излечения, а специфические тесты остаются положительными даже после излечения заболевания.

Говоря другими словами, отрицательный результат неспецифического теста является некоторой гарантией того, что вы здоровы.

К неспецифическим анализам относят микрореакцию преципитации (МР) и реакцию Вассермана (РВ, RW). Эти тесты используются для скрининга на сифилис. После излечения сифилиса эти анализы становятся отрицательными у 90% людей.

Как работают эти тесты: в результате жизнедеятельности бледной трепонемы (при сифилисе) в организме погибают клетки. В ответ на разрушение клеток иммунная система вырабатывает особые белки (антитела, или иммуноглобулины). Неспецифические тесты направлены на выявление этих антител, а также подсчет их концентрации (определение титра антител).

Микрореакция преципитации (МР) и ее аналоги в некоторых странах: тест быстрых реагинов (RPR, Rapid Plasma Reagins) и тест VDRL (Venereal Diseases Research Laboratory) — это нетрепонемные тесты, которые назначаются при скрининге на сифилис.

Что обследуют: кровь (из пальца или из вены), спинномозговую жидкость.

Через какое время после заражения анализ становится положительным: как правило, через 4-5 недель после заражения.

Как оценивать результаты анализа: если анализ показал положительный результат, то есть вероятность, что вы больны сифилисом. Так как этот анализ может ошибочно давать положительные результаты, рекомендуется пройти дополнительное обследование с помощью специфических тестов, описанных ниже. Отрицательный результат указывает на отсутствие сифилиса, либо раннюю стадию заболевания (до появления антител в крови).

Как оценивать полученный титр антител: если в крови обнаружены антитела в титре от 1:2 до 1:320 и выше, это означает, что вы заражены сифилисом. При позднем сифилисе титр антител может быть низким (что оценивается как сомнительный результат).

Какие могут быть причины ложноположительных результатов: ложноположительные результаты МР встречаются примерно в 2-5% случаев, вот их возможные причины:

Системные заболевания соединительной ткани (системная красная волчанка, склеродермия, ревматоидный артрит, дерматомиозит, васкулиты и пр.)
Инфекционные заболевания: вирусные гепатиты, инфекционный мононуклеоз, туберкулез, некоторые кишечные инфекции и пр.
Воспалительные заболевания сердца (эндокардит, миокардит).
Сахарный диабет.
Беременность.
Недавно проведенная вакцинация (прививание).
Употребление алкоголя, наркотиков и др.
Перенесенный ранее и излеченный сифилис (примерно у 10% людей, прошедших курс лечения, анализ МР может оставаться положительным всю жизнь).

Какие могут быть причины ложноотрицательных результатов: анализ может ошибочно показать отрицательный результат, если в крови содержится много антител, если анализ взят на ранней стадии заболевания до появления антител, либо при позднем сифилисе, когда в крови остается мало антител.

Реакция Вассермана (РВ, RW) — это нетрепонемный тест, который используется для скрининга на сифилис в странах СНГ.

Что обследуют: кровь (из пальца или из вены), спинномозговую жидкость.

Через какое время после заражения анализ становится положительным: как правило, через 6-8 недель после заражения.

Как оценивать результаты анализа: «-» — отрицательная реакция, «+» или «++» это слабоположительная реакция, «+++» это положительная реакция, «++++» это резко положительная реакция. Если реакция Вассермана показала хотя бы один плюс, то вам необходимо сдать дополнительные анализы на сифилис. Отрицательная реакция не является гарантией того, что вы здоровы.

Как оценивать полученный титр антител: титр антител от 1:2 до 1:800 говорит о наличии сифилиса.

Какие могут быть причины ложноположительных результатов: реакция Вассермана может ошибочно дать положительный результат по тем же причинам, что и микрореакция преципитации (МР), а также, если незадолго до сдачи крови на анализ вы пили алкоголь или употребляли жирную пищу.

В связи с большим количеством ошибочных результатов Реакция Вассермана (РВ, RW) используется все реже и заменяется другими, более достоверными методами диагностики.

Неспецифические тесты (микрореакция преципитации (МР) и реакция Вассермана (РВ, RW)) являются хорошими методами диагностики сифилиса. Отрицательный результат обследования с большой вероятностью указывает на то, что вы здоровы. Но при получении положительных результатов этих анализов необходимо дополнительное обследование с помощью специфических (трепонемных) тестов.

К трепонемным тестам относят следующие анализы: реакция иммунофлюоресценции (РИФ), иммуноблотинг, реакция пассивной агглютинации (РПГА), реакция иммобилизации бледных трепонем (РИБТ), иммуноферментный анализ (ИФА).

Специфические тесты назначают людям, у которых выявлены положительные результаты микрореакции преципитации (МР) или реакции Вассермана (РВ). Специфические тесты остаются положительными еще долгое время после излечения сифилиса.

Как работают эти тесты: при попадании в организм возбудителей сифилиса иммунная система вырабатывает антитела, направленные на борьбу с бледной трепонемой. Эти антитела появляются в крови не сразу после заражения, а лишь спустя несколько недель. Примерно в конце второй недели после заражения в крови появляются антитела класса IgM. Антитела этого класса указывают на недавнее заражение сифилисом, однако в отсутствие лечения они сохраняются в крови в течение нескольких месяцев и даже лет (при этом их количество постепенно снижается). Через 4-5 недель после заражения сифилисом в крови начинают определяться антитела другого класса – IgG. Антитела этого типа сохраняются в крови в течение многих лет (иногда в течение всей жизни). Трепонемные тесты позволяют выявить наличие в крови антител (IgM и IgG), направленных на борьбу с бледной трепонемой.

Реакция иммунофлюоресценции (РИФ) или Fluorescent Treponemal Antibody (FTA, и его разновидность FTA-ABS) — это трепонемный тест, который применяется для подтверждения диагноза сифилиса на самых ранних стадиях (даже до появления первых симптомов).

Что обследуют: кровь из вены или из пальца.

Через какое время после заражения анализ становится положительным: как правило, через 6-9 недель.

Как оценивать результаты анализа: Результаты анализа выдаются в виде минуса или плюсов (от одного до четырех). Если в анализе стоит минус, значит антитела не выявлены, и вы здоровы. Наличие одного плюса и более говорит о наличии сифилиса.

Какие могут быть причины ложноположительных результатов: ложноположительные результаты встречаются редко, однако ошибки возможны у людей с заболеваниями соединительной ткани (системная красная волчанка, дерматомиозит и пр.), у беременных и пр.

Реакция пассивной агглютинации (РПГА), или Treponema pallidum hemagglutionation assay (TPHA) – это специфический тест, который применяется для подтверждения диагноза сифилиса практически на любой его стадии.

Что обследуют: кровь из вены или из пальца.

Через какое время после заражения анализ становится положительным: как правило, уже через 4 недели.

Как оценивать результаты анализа: положительный результат РПГА указывает на то, что вы больны сифилисом, либо здоровы, но перенесли эту болезнь в прошлом.

Как оценивать полученный титр антител: в зависимости от титра антител можно ориентировочно предположить давность заражения сифилисом. Вскоре после первого попадания трепонемы в организм титр антител, как правило, менее 1:320. Чем выше титр антител, тем больше времени прошло от момента заражения.

Иммуноферментный анализ (ИФА), или Enzyme ImmunoAssay (EIA), или ELISA (Еnzyme Linked ImmunoSorbent Assay) – это трепонемный тест, который применяется для подтверждения диагноза и определения стадии сифилиса.

Что обследуют: кровь из вены или из пальца.

Через какое время после заражения анализ становится положительным: уже через 3 недели после инфицирования.

Как оценивать результаты анализа: положительный результат ИФА указывает на то, что вы больны сифилисом, либо перенесли это заболевание ранее. Этот анализ может оставаться положительным и после излечения.

Определение давности заражения сифилисом с помощью ИФА: в зависимости от того, какие классы антител (IgA, IgM, IgG) обнаружены в крови, можно предположить давность заражения.

источник