Распространение паразитарных болезней среди населения во многом зависит от эколого-паразитологического состояния среды обитания. Возбудители паразитарных болезней (яйца и личинки гельминтов, цисты кишечных патогенных простейших) способны длительное время персистировать в окружающей среде, создавая угрозу новых заражений. Они обнаруживаются в почве, поверхностных водоемах, овощах, ягодах, предметах обихода и т.д. [10]. Так в результате проведенных паразитологических исследований объектов окружающей среды на урбанизированных территориях Курской области было зарегистрировано 5 таксономических групп паразитарных агентов: цисты лямблий, ооцисты криптоспоридий, яйца аскарид, токсокар и власоглавов [5].
Одной из причин, благодаря которой происходит распространение паразитарных болезней, является несовершенство системы очистки сточных вод и их осадков от возбудителей паразитозов [4]. В Кабардино-Балкарской Республике ежегодно сбрасывается до 47,5–66,4 млн. кубометров неочищенных сточных вод. В неочищенных сточных водах обнаруживаются яйца аскарид, токсокар, власоглавов, остриц, онкосферы тениид, при исследовании сточные воды подвергнутых очищению, так же обнаруживаются яйца гельминтов [1].
Основные методы дезинвазии, применяемые на очистных сооружениях канализации, обеспечивают биоцидное действие и не гарантируют эпидемиологическую безопасность воды в отношении возбудителей паразитозов. В результате проведения широкомасштабных исследований по паразитологической паспортизации очистных сооружений канализации (ОСК) на юге России выявлено, что сточные воды обсеменены паразитарными патогенами, в том числе жизнеспособными, с различной интенсивностью контаминации [11]. В Липетской области при аналогичных исследованиях ОСК в 9,1% от всех отобранных проб выявлены жизнеспособные возбудители паразитарных заболеваний. Анализ состояния процессов дезинвазии сточных вод Липетской области свидетельствовал о значительном риске заражения населения паразитозами [9]. В Красноярском крае в результате проведения мониторинга за дезинвазией сточных вод установлено, что 7,55% проб не отвечают санитарно-гигиеническим нормативам [6]. На сегодняшний день для эффективной очистки сточных вод в очистных канализационных сооружениях применяются различные технологии, в том числе с доочисткой в биопрудах которые засажены высшими водными растениями (ВВР). Качество сточных вод после очистки в биопрудах, как правило, отвечает нормативным требованиям по сбросу их в открытые водоемы. [2].
Сточные воды г. Тюмени поступают на очистные сооружения, где происходит их механическая (по принципу отстаивания), биологическая (по принципу поглощения микроорганизмами активного ила растворимых загрязнений) и конечная очистка (станция ультрафиолетового обеззараживания). Однако, в ряде случаев, качество активного ила может снижаться, в результате чего он перестает выполнять свои основные функции — биологическую очистку сточных вод [4].
Целью нашей работы явилось выявление паразитологического загрязнения городских сточных вод на всех этапах их очистки в условиях очистных сооружений п. Антипино.
Материалы и методы исследований
Исследования проводились в летний (июль) и осенний (сентябрь) периоды 2010 года на базе канализационных очистных сооружений в п. Антипино (КОС п. Антипино), а также в условиях клинико-гематологической лаборатории ИБиВМ ФГБУ ВПО «ГАУ Северного Зауралья» и лаборатории энтомозов животных «Всероссийского НИИ ветеринарной энтомологии и арахнологии».
Забор простых (одноразовых) проб проводился из распределительных чаш первичных и вторичных отстойников: первый образец проб из распределительного канала аэротенков коридорного типа; второй образец — после механической очистки из первого отстойника; третий образец — после биологической обработки активным илом; четвертый образец — во вторичном отстойнике после биологической очистки. Образцы забирались согласно инструкции по отбору проб для анализа сточных вод [3], паразитологические исследования проводились согласно методическим указаниям «Методы санитарно-паразитологических исследований» методами по Романенко И.Л. и Падченко К.И. [7,8]. Оценку жизнеспособности обнаруженных яиц, личинок и ооцист возбудителей паразитарных болезней оценивали по подвижности и сохранности оболочек.
Смесь производственных и хозяйственно-бытовых сточных вод г. Тюмени поступает в приемный резервуар городских очистных сооружений, откуда пройдя грубую механическую очистку на механизированных решетках, самотеком поступает в песколовки, где происходит выделение из стоков крупных загрязнений минерального происхождения. Механическая очистка производится для выделения из сточной воды находящихся в ней нерастворимых примесей. Для задержания крупных загрязнений применяется процеживание воды через решетки. Для выделения из сточной воды взвешенных веществ, которые имеют плотность большую или меньшую, чем плотность воды, применяют отстаивание. Взвешенные частицы минерального происхождения, главным образом песок, выделяют из стоков путем осаждения в песколовках. Осаждение коллоидных частиц и более мелкой взвеси осуществляется в первичных отстойниках, здесь же осуществляется удаление плавающих веществ. Далее стоки попадают в распределительную чашу первичных отстойников.
Осветленные в первичных отстойниках стоки отводятся в распределительный канал аэротенков коридорного типа, где смешиваются с активным илом. Перемешивание стоков и ила производится при помощи воздуха. Дальше иловая смесь поступает во вторичный отстойник, где происходит разделение иловой смеси на активный ил и очищенную воду. Часть ила возвращается в регенератор аэротенка (циркуляционный активный ил) при помощи эрлифта и рециркуляционной насосной станции, а часть направляется в первичные отстойники для биокоагуляции. Интенсивность биохимических процессов зависит от ряда факторов: температуры, обеспеченности кислородом, состава активного ила, наличия питательных и токсичных веществ. Для биологического окисления необходимо присутствие биогенных элементов, из которых особое внимание уделяется азоту аммонийных солей и фосфору в виде фосфатов. Для поддержания ила и загрязнений во взвешенном состоянии, а также для насыщения жидкости кислородом, в аэротенки подается воздух. Из аэротенка смесь ила и очищенных стоков подается на вторичные отстойники, где отстаивается, после чего часть разделенной смеси подается обратно в аэротенк (возвратный активный ил) в первый коридор – регенератор, где ил подвергается регенерации (восстановлению окислительных способностей без притока питательных веществ), другая часть, равная его приросту в аэротенках, удаляется на обработку и утилизацию.
При паразитологическом анализе сточных вод отобранных из распределительного канала аэротеков в летний период (июль) были обнаружены жизнеспособные яйца и подвижные личинки стронгилоидного типа, неповрежденные яйца аскарид, а также поврежденные ооцисты простейших, в сентябре обнаруживались только подвижные личинки стронгилоидного типа (рис. 1,2).
а б
Рисунок 1. Яйцо (а) и личинка стронгилоидного типа (б)
В образцах сточных вод после механической очистки из первичных отстойников в летний период (июль) были обнаружены подвижные личинки стронгилоидного типа и нежизнеспособные ооцисты простейших, в сентябре обнаруживались только яйца стронгилоидного типа с поврежденной оболочкой.
а б
Рисунок 2. Ооцисты кокцидий (а) и яйца аскаридоидного типа (б)
При анализе проб из вторичных отстойников после биологической обработки активным илом нами были выявлены нежизнеспособные яйца аскаридоидного типа и жизнеспособные личинки стронгилоидного типа, в сентябре паразитарных патогенов в данных отстойниках выявлено не было.
В образцах сточных вод из вторичных отстойников после биологической обработки в летний (июль) и осенний (сентябрь) периоды, яиц, личинок и ооцист возбудителей паразитарных заболеваний выявлено не было.
Анализ паразитологических исследований сточных вод в канализационных очистных сооружениях п. Антипино показал, что система обеззараживания сточных вод предусмотренная на данном предприятии позволяет освободится от возбудителей паразитозов в летний период после биологической очистки стоков во вторичных отстойниках, а в осенний период после биологической обработки активным илом во вторичных отстойниках.
Таким образом, на канализационных очистных сооружениях г.Тюмени, находящихся в п. Антипино, в результате комплекса мер, предусматривающих поэтапное механическое и биологическое обеззараживание сточных вод, удается полностью освободить их от яиц, личинок и ооцист возбудителей паразитарных заболеваний. По нашему мнению, более позднее освобождение канализационных сточных вод от паразитарных патогенов в летний период, по сравнению с осенним, происходит из-за более высокой первоначальной степени загрязнения и возможного снижения эффективности активного ила вследствие перегрузки вторичных отстойников или повышения концентрации поверхностно-активных веществ, жиров, нефтепродуктов и других соединений, отрицательно влияющих на биологические процессы.
Пашаян С.А., д.б.н., профессор кафедры анатомии и физиологии Института биотехнологии и ветеринарной медицины ФГБОУ ВПО Государственного аграрного университета Северного Зауралья, г.Тюмень.
Домацкий В.Н., д.б.н., профессор, зам. директора ГНУ Всероссийский научно-исследовательский институт ветеринарной энтомологии и арахнологии, г.Тюмень.
источник
Многие источники пресной воды в настоящее время отвечают требованиям санитарной безопасности далеко не в полной мере.
Поэтому, чтобы обеспечить её соответствующую обработку, выполняется комплекс санитарно-микробиологических анализов, в число которых входит и анализ паразитологический.
О порядке его проведения пойдет речь в статье.
Данные виды работ проводятся в строгом соответствии с требованиями действующих в настоящее время методических указаний, зарегистрированных под № МУК 4.2.1884-04. Указанный документ, 03.03.04, был утверждён главным государственным (ГГСВ) санитарным врачом РФ. На сегодня действует редакция документа от 23.12.10.
Третья глава документа регламентирует собственно паразитологические исследования. В комплекте с указанным документом в обязательном порядке рассматриваются требования иных действующих нормативных актов. Например, СанПиН 2.1.5.980-00.
Методика указанных исследований для различных источников водоснабжения имеет свою специфику. Например, если забор осуществляется из поверхностных водоёмов, используют методики, ориентированные на выявление в воде наличия цист простейших кишечных патогенов (дизентерийных амёб, криптоспоридий, балантидий, лямблий), а также яиц гельминтов, которые непосредственно угрожают здоровью и жизни человека при попадании внутрь организма.
Выполняя микроскопические исследования тех осадков, которые получаются после центрифигурирования раствора флотанта, разведённого минимум в четыре раза (исходная плотность — 1,26) можно получить выпадающих из данного осадка паразитных агентов.
Осаждение указанной патогенной микрофлоры достигается тем, что плотность флотанта резко понижается (1,03 и меньше). Этот показатель гораздо ниже плотности самих паразитных агентов.
Мембраны этого типа производятся из прозрачной тонкой полиэтилентеренфалатной плёнки, имеющей сквозные поры, диаметр которых лежит в диапазоне 0,1 – 5,0 мкм.
Выполнить дифференциацию пор указанных мембран с осевшими на них объектами паразитологии несложно. Объясняется это тем, что яйца гельминтов почти в 20 раз, а цист лямблий почти в 4 раза по своим размерам больше размеров пор.
Главным назначением данной методики является, как видно из названия, выявление наличия ооцист криптоспоридий. Метод позволяет определить наличие яиц гельминтов и цист лямблий.
Указанный метод предусматривает последовательную фильтрацию воды через специальную систему аналитических трековых (АТМ) мембранных фильтров.
Идентификация возбудителей паразитарных болезней кишечника, выявленных в процессе вышеперечисленных исследований
Выполняется микроскопирование, в процессе, которого проводится подсчёт паразитарных патогенов, содержащихся в полном объёме выпавших осадков. Таким образом, получается число паразитических организмов во всей пробе, взятой на исследование. Параллельно с этим обнаруженных паразитов систематизируют и идентифицируют.
Для этого руководствуются рядом характерных признаков, присущих тому или иному паразиту. А также учитывают тот факт, что весьма часто природная вода содержит формы цисты Entamoeba dispar, которые практически неотличимы от дизентерийной амёбы, на патогенного влияния на организм человека они не оказывают.
В таких случаях поступают следующим образом. Их отмечают в протоколе, не указывая видовой принадлежности. А для более точной идентификации выполняют дополнительную серию исследований.
Если в результате анализа на наличие в воде паразитов получены отрицательные результаты, это далеко не всегда означает реальное отсутствие патогенов в пробах. Поэтому в протоколе просто проставляется термин «не обнаружено».
Наиболее часто применяемыми для целей паразитологического анализа воды приборами являются сегодня приборы напорного и вакуумного фильтрования. С их помощью концентрируется осадок и осуществляется выделение в исходном продукте паразитарных объектов. Далее исследуемая проба проходит фильтрацию через специальный мембранный фильтр.
По завершению процесса фильтрации из прибора изымается фильтр. С поверхности его мембраны смывают сконцентрировавшийся на ней осадок, либо сразу проводят микроскопирование.
Это изделие позволяет выполнить быстрое фильтрование с последующим сливом отфильтрованной воды. Прибор изготовлен специально под мембранный фильтр, диаметр которого составляет 142мм.
Потребитель получает ПВФ-142 в следующей комплектации:
- собственно вакуумная станция;
- ячейка фильтровальная;
- устройство заборно-фильтровальное;
- устройство заборное;
- шланги соединительные в комплекте.
Габариты прибора 180*210*310. Масса – 3,2 кг.
В указанной комплектации можно одновременно выполнять фильтрование не одной, а двух проб:
- первая проба на фильтре мембранном, диаметр которого составляет 142мм. Здесь выполняются исследования на цисты лямблий, личинки гельминов, яйца;
- вторая – на мембранном фильтре, диаметр которого составляет 35мм (вариант – 47мм). Осуществляется выявление ооцисты криптоспоридий.
Потребитель получает прибор в следующей комплектации:
- ячейка фильтровальная с воронкой для установки фильтра 47/35 мм (объём воронки 300мл);
- ячейка фильтровальная для установки основного фильтра диаметром 142мм;
- собственно вакуумная станция;
- ячейка фильтровальная;
- устройство заборно-фильтровальное;
- устройство заборное;
- шланги соединительные в комплекте.
Габариты прибора 180*210*310. Масса – 3,2 кг.
Изделие функционирует без потребления электричества, исключительно под давлением воды, поступающей из водопроводной сети. После прибора вода сбрасывается в канализацию. Оснащается стандартным фильтром диаметром 142 мм.
Прибор поставляется потребителю в следующей комплектации:
- ячейка фильтровальная;
- насос водоструйный;
- устройство заборно-фильтровальное;
- устройство заборное;
- шланги соединительные в комплекте.
Габариты прибора 180*210*310. Масса – 3,2 кг.
Прибор ПВФ-142П Б (вакуумного фильтрования)
Это мобильный прибор, работоспособность которого не зависит от внешних источников питания. Он представляет собой узел фильтрации для выполнения работ непосредственно на исследуемом водоёме. В нём вакуумная станция и фильтровальная ячейка смонтированы на переносной раме. Такие приборы дают возможность выполнять предварительную обработку проб непосредственно во время их забора.
Используется для выполнения фильтрования воды, поступающей непосредственно из водоёма на объект надзора.
Комплектация прибора: ячейка фильтровальная; насос ножной; устройство заборно-фильтровальное; шланги соединительные в комплекте.
Позволяет фильтровать воду из крана водопровода. Работает от давления водопроводной сети. Рассчитан на работу с фильтром, диаметр которого составляет 70мм. Изделие состоит из: ячейки фильтровальной; насоса ручного; ёмкости мерной.
Паразитологический анализ позволяет своевременно выявить угрозу жизни и здоровья человека, исходящую от потребления зараженной патогенной микрофлорой питьевой воды и принять необходимые меры для её обеззараживания.
источник
«Т. А. Дружинина ОБЩАЯ ПАРАЗИТОЛОГИЯ И ПАРАЗИТОЛОГИЧЕСКАЯ ЭКСПЕРТИЗА Учебное пособие Рекомендовано Научно-методическим советом университета для студентов, обучающихся по направлениям . »
Обеспечение охраны окружающей среды от загрязнения возбудителями паразитарных болезней осуществляется в соответствии с действующими нормативными актами и обеспечивается проведением следующих мероприятий:
— благоустройством населенных мест, фермерских, крестьянских хозяйств, мест отдыха, содержания и убоя скота;
— поддержанием чистоты территорий населенных мест, животноводческих ферм и комплексов, фермерских и крестьянских хозяйств;
— сбором, хранением и обеззараживанием твердых бытовых отходов;
— исключением паразитарного загрязнения продукции при сборе, транспортировании, хранении и реализации овощей, ягод, столовой зелени и другой сельскохозяйственной продукции растительного и животного происхождения в торговой сети, на рынках и организациях общественного питания;
— исключением сброса необеззараженных сточных вод и их осадков, стоков животноводческих ферм и комплексов, сточных вод речного и морского транспорта в поверхностные водоемы;
— эффективной очисткой и обеззараживанием сточных вод, их осадков на различного типа очистных сооружениях населенных мест, отдельно стоящих зданий, водного транспорта, животноводческих ферм и комплексов;
— использованием обеззараженных сточных вод, их осадков, стоков животноводческих ферм и комплексов на земледельческих полях орошения;
— эффективной уборкой помещений жилищ, производственных помещений по заготовке, хранению, выделке шкур, пошиву меховых изделий;
— обеззараживанием шкур и меховых изделий;
— уборкой помещений детских дошкольных и школьных учреждений;
— регулированием сброса поверхностного стока с территорий населенных мест, животноводческих ферм и комплексов в поверхностные водоемы;
— исключением паразитарного загрязнения окружающей среды продуктами растительного и животного происхождения;
— соблюдением агротехники и санитарии при выращивании плодов открытого грунта в коллективных, индивидуальных, фермерских и крестьянских хозяйствах;
— соблюдением режимов откорма и убоя общественного и индивидуального скота, содержания домашних животных, а также животных клеточного содержания;
— эксплуатацией утильзаводов, биотермических площадок для обеззараживания трупов животных в соответствии с технологическими и санитарно-гигиеническими требованиями, скотомогильников в соответствии с санитарно-эпидемиологическим режимом;
— эффективной работой водоочистных сооружений и качеством питьевой воды.
Гигиеническое воспитание населения по профилактике паразитарных болезней. Работу по гигиеническому воспитанию населения в эндемичных по паразитарным болезням районах проводят медицинские работники с привлечением работников общеобразовательных организаций после предварительного инструктажа в органах и учреждениях государственной санитарноэпидемиологической службы вне зависимости от уровня заболеваемости населения. Программы гигиенического воспитания разрабатывают с учетом особенностей производственной и социальной структуры обслуживаемых групп населения.
Санитарно-просветительные мероприятия включают в региональные целевые программы субъектов Российской Федерации по борьбе и профилактике паразитарных болезней.
Методы лабораторного паразитологического контроля безопасности питьевой воды по нормируемым показателям представлены в СанПиН 2.1.4.1074-01 «Питьевая вода. Гигиенические требования к качеству воды централизованных систем питьевого водоснабжения. Контроль качества».
Метод определения яиц гельминтов и цист лямблий в питьевой воде основан на исследовании концентрированного осадка полученного при фильтрации воды через трековые мембраны.
Предварительно на заборное устройство прибора для фильтрования воды ПВФ-35 крепят предфильтр в виде капроновой сетки с размерами ячейки 67–70 мкм. Аналитическую трековую мембрану (ATM) с диаметром пор 5,0 мкм помещают на фритту фильтродержателя прибора для фильтрования и сверху укладывают фильтр с размером пор 25,0 мкм, уплотняют кольцом из эластичной резины. Для плотного (без складок) прилегания ATM к фритте рекомендуется смочить мембрану дистиллированной водой и плотно уложить на фритту фильтродержателя.
После фильтрации обе мембраны последовательно по одной осторожно снимают пинцетом с фритты фильтродержателя на заранее подготовленные тонкие пластмассовые квадратные пластинки размером 150150 мм (поставляются в комплекте с ATM) и переносят в лоток.
ATM осторожно снимают пинцетом с фритты на пластиковый диск, который должен быть помещен в лоток. Со всех фильтров аккуратно и тщательно, придерживая диск с мембраной пинцетом за край, производят смыв осадка с обеих поверхностей мембран и с пластиковых дисков, на которых эти фильтры лежали. Смыв проводят плоской, средней жесткости кисточкой в лоток с дистиллированной водой. При этом периодически споласкивают мембраны и диски дистиллированной водой из химического стакана. Общий объем дистиллированной воды при смыве осадка со всех трех фильтров не должен превышать 300–500 мл.
Полученный концентрированный смыв сливают из лотка в воронки прибора для фильтрации типа ПВФ-35 или ПВФ-47 и фильтруют через аналитические мембраны ATM с диаметром пор 3,0–2,5 мкм. В зависимости от первоначальной загрязненности воды фильтруют последовательно, меняя мембраны.
После фильтрации мембраны ATM осторожно снимают пинцетом с фильтродержателя (фритты) фильтровального прибора и переносят на предметное стекло, предварительно обработав его 50 %-ным раствором глицерина (для этого на поверхность предметного стекла наносят одну-две капли 50 %-го раствора глицерина и стеклянной палочкой распределяют по всей поверхности тонким слоем), затем сверху мембраны наносят каплю 1 %-го раствора Люголя и накрывают покровными стеклами (2424 мм) всю поверхность мембраны.
Микроскопируют препарат при увеличениях: окуляр 7 или 10; объектив 10; для идентификации яиц гельминтов и исследования на цисты лямблий – объектив 40.
При микроскопировании подсчитывают число паразитарных патогенов во всем объеме осадка, что соответствует их числу во всей исследованной пробе. Одновременно определяется систематическая принадлежность обнаруженных паразитических организмов и их идентификация. Результат выявления записывают обнаружено или (не обнаружено) в исследуемом объеме пробы, с указанием при обнаружении видовой принадлежности яиц гельминтов.
Исследование сточной воды. Пробы сточных вод отбирают на входе и выходе с очистных сооружений (механическая очистка, аэро- и биостанции, компактные установки, биологические пруды, поля фильтрации), на полях орошения и в местах сброса их в поверхностные водоемы. Количество сточных вод на одну пробу должно быть не менее: неочищенной (до поступления на очистные сооружения) – 1 л, после сооружений механической очистки – 3 л, в остальных случаях – 10 л. Отбор проб сточных вод проводят в резиновых перчатках при помощи емкостей на 200–500 мл. Отдельные порции сточных вод сливают в широкогорлые пластиковые или стеклянные емкости соответствующего объема.
При определении эффективности работы очистных сооружений по паразитологическим показателям следует строго соблюдать следующее правило: после отбора проб входящей на очистные сооружения сточной воды, последующие пробы отбирают с учетом времени ее нахождения на каждом этапе очистки, т. е. после первичных отстойников – через 2,5 часа, аэротенков – 8,5 часов, вторичных отстойников – 10,5 часов, хлораторной – 11 часов.
Пробы этикетируют, регистрируют в журнале и доставляют в лабораторию, где их хранят в прохладном месте не более суток.
Метод исследования сточной воды на яйца гельминтов по Н. А. Романенко. В каждую пробу сточных вод добавляют один из следующих коагулянтов: сульфат алюминия, сульфат железа, сульфат меди в дозе 0,5–0,6 г/л и тщательно размешивают. Полное осветление стоков наступает через 40–50 мин. После слива надосадочной жидкости, осадок помещают (равномерно распределяя) в пробирки объемом 250 мл и центрифугируют в течение трех минут при 1000 об/мин. Воду сливают, а к осадку добавляют 2–4 мл 1–3 %-ного раствора соляной кислоты для растворения хлопьев коагулянта.
Смесь размешивают и центрифугируют, жидкость сливают, а осадок обрабатывают по методике Романенко для исследования почвы. Для облегчения доставки проб сточных вод и сокращения времени на ее первичную обработку внесение коагулянта можно производить или после доставки сточной воды в лабораторию, или до отбора проб воды. Коагуляция начинается сразу же после заполнения посуды водой. В лабораторию доставляют только осадок сточных вод, который и обрабатывают.
Эффективность метода от 82 до 91 %, в среднем – 86 %.
Метод исследования сточной воды на цисты кишечных простейших по К. И. Падченко. Пробы сточных вод отстаивают в течение 12–16 часов, затем надосадочную жидкость сливают, осадок переносят в центрифужные пробирки и центрифугируют 5 мин при 1000 об/мин. Надосадочную жидкость удаляют, осадок переносят на предметное стекло, добавляют консервант и исследуют под световым микроскопом. Жизнеспособные цисты кишечных простейших остаются в составе этих консервантов неокрашенными.
Дегенерирующие цисты окрашиваются красителем в фиолетовый цвет. Эффективность метода в среднем 90 %.
Разработка экспертного заключения по открытым водоемам. Обследование водоема (серии водоемов, отдельных их зон) должно завершаться экспертным заключением: «Об опасности водоема(ов) в отношении риска заражения людей церкариозами».
Прежде всего, это необходимо в отношении водоемов, имеющих рекреационное значение, т. е. расположенных в зонах отдыха людей и разрешенных для купания.
Для составления экспертного заключения необходима первичная информация, получаемая при комплексном обследовании водоема. Обследования проводят в середине дня при солнечной погоде (т. е. при условиях максимальной активности промежуточных хозяев и церкарий шистосоматид). Информацию по нижеприведенным показателям заносят в лабораторный журнал или компьютерную базу данных. Учитывают следующие показатели:
1. Географическое положение водоема и его название.
2. Дата проведения обследования и метеоусловия.
3. Тип водоема (одиночное озеро; одиночный пруд; система сообщающихся прудов или озер; участок реки; участок канала, система водоемов, образованных в результате зарегулирования русла реки; участок водохранилища; отстойник и др.).
4. Площадь обследуемой акватории.
5. Число обследованных стаций (число обследованных в водоеме прибрежных участков длиной 5 м, шириной 1–2 м).
6. Видовой состав легочных моллюсков, обнаруженных в водоеме и собранных для лабораторных исследований с целью определения пораженности церкариями шистосоматид.
7. Плотность популяций моллюсков (рассчитывается по среднему числу особей на 1 кв. м).
8. Число моллюсков, взятых для лабораторных исследований (указывается отдельно для каждого вида моллюсков).
9. Экстенсивность инвазии моллюсков шистосоматидами (число инвазированных от числа исследованных в процентах для каждого вида моллюсков).
10. Степень зарастания водоема: растительности нет; зарастание слабое (менее 10 стеблей на 1 кв. м); зарастание умеренное и сильное (более 10 стеблей на 1 кв. м); наличие плавающей растительности.
11. Характер фоновой растительности: элодея, осоки, роголистник, нимфеи, частуха, стрелолист, плавающая растительность (прежде всего – ряска), крупные макрофиты (тростник, камыш, рогоз, аир).
12. Наличие в водоеме утиных птиц (прежде всего – кряквы).
Указывают численность птиц на момент обследования.
13. Степень загрязненности водоема (остатки пищи, остатки предметов быта, промышленные отходы, строительный мусор и др.). Водоем (его участок) загрязнен слабо: менее 3 указанных выше предметов загрязнения на 10 м прибрежной акватории шириной 3 м; водоем (его участок) загрязнен умеренно или сильно:
более 3 предметов загрязнения в той же акватории.
14. Использование водоема в рекреационных целях (по принципу «да» или «нет»; отдельно указывают, используется ли водоем или отдельный его участок как официально разрешенное место для купания людей).
15. Благоустроенность водоема: бетонирован ли водоем, полностью или частично бетонирована береговая линия; производится или нет регулярная очистка от мусора и растительности; имеются или нет оснащенные пляжные территории и огороженные от остальных мест акватории для купания с песчаным грунтом без растительности; имеются или нет (на остальных береговых участках или в целом на несанкционированных для купания водоемах) знаки, запрещающие купание, подкормку птиц, свалку мусора.
На основании проведенных полевых и лабораторных исследований, составляют экспертное заключение об эпидемической опасности водоема (серии водоемов, отдельных их участков) в отношении риска заражения людей церкариозом. При этом делают один из следующих выводов:
1. Риск заражения отсутствует (либо нет экологических условий, благоприятных для обитания промежуточных хозяев возбудителей, и нет легочных моллюсков, либо нет источника заражения, либо отсутствуют оба эти фактора);
2. Имеется потенциальный риск заражения. На исследуемой территории в принципе имеется источник инвазии (водоплавающие, прежде всего утиные, птицы), и имеются популяции промежуточных хозяев возбудителя (одного или нескольких видов легочных моллюсков). Однако на период обследования водоема в изученной выборке моллюсков не выявлены особи, зараженные церкариями шистосоматид.
3. Риск заражения присутствует (имеются популяции легочных моллюсков, и в исследованной выборке обнаружены особи, зараженные шистосоматидами).
Во избежание ошибочного суждения о степени риска и, учитывая, что этот показатель изменчив в зависимости от целого ряда условий, определением «риск заражения присутствует», как правило, целесообразно ограничиться.
Когда ряд факторов со всей очевидностью указывает на высокий риск заражения в конкретных водоемах или их отдельных участках (обнаружена высокая численность популяций промежуточных хозяев, выявлена высокая пораженность моллюсков церкариями шистосоматид, имеется обильное зарастание водоема при одновременно его слабо выраженной загрязненности, водоем фактически используется для купания, особенно детьми, даже в тех случаях, когда он официально не признан рекреационной зоной), в экспертном заключении этот факт следует особо подчеркнуть.
Основные методы санитарно-паразитологических исследований представленные в методических указаниях МУК 4.2.796-99 «Методы санитарно-паразитологических исследований».
Отбор проб для паразитологических анализов проводят не менее одного раза в год для оценки качественного состояния почв естественного и нарушенного сложения. Для аналогичных исследований почв детских, лечебно-профилактических учреждений и зон отдыха отбор проб проводят не менее двух раз в год – весной и осенью. При изучении динамики самоочищения от яиц гельминтов, цист кишечных простейших отбор проб проводят в течение первого месяца еженедельно, а затем ежемесячно в течение вегетационного периода до завершения активной фазы самоочищения.
Для оценки качества по паразитологическим показателям почв сельскохозяйственных угодий, в зависимости от характера источника загрязнения, возделываемой культуры и рельефа местности на каждые 0,5–20,0 га территории закладывают не менее одной пробной площадки размером 10х10 м; на территории расположения детских и лечебно-профилактических учреждений, игровых площадок, выгребов, мусорных ящиков и других объектов, занимающих небольшие площади, размер пробной площадки должен быть не более 5х5 м.
Отбор проб почвы. Точечные пробы отбирают в соответствии с МУ 2.1.7.730-99 на модельной площадке из одного или нескольких слоев или горизонтов методом конверта, по диагонали или любым другим способом с таким расчетом, чтобы каждая проба представляла собой часть почвы, типичной для генетических горизонтов или слоев данного типа.
Точечные пробы отбирают ножом, совком или шпателем из прикопок или почвенным буром Некрасова. Объединенную пробу составляют путем смешивания точечных проб, отобранных на одной пробной площадке.
Для паразитологического анализа с каждой пробной площадки берут одну объединенную пробу массой 200 г, составленную из 10 точечных проб массой 20 г каждая, отобранных послойно с поверхности и глубины 10–20 см. При необходимости отбор проб проводят из более глубоких (40–60 см) слоев почвы послойно.
Пробы помещают в банки с крышками или пакеты из клеенки, пластика, этикетируют с указанием места отбора, даты, глубины, характера исследуемого участка (в тени или на солнце, состав почвы, наличие растительности и т. д.). Все объединенные пробы должны быть зарегистрированы в журнале, пронумерованы. В процессе транспортирования и хранения почвенных проб должны быть приняты меры по предупреждению возможности их загрязнения.
Паразитологический анализ проб почвы проводят в день доставки их в лабораторию. При невозможности немедленного проведения исследований пробы почвы хранят в холодильнике при температуре до +50C. Для исследования на цисты кишечных патогенных простейших почву без обработки хранят не более двух суток; на яйца биогельминтов – до семи суток, а на яйца геогельминтов – не более одного месяца.
Для предотвращения высыхания и развития личинок в яйцах геогельминтов почву увлажняют и аэрируют один раз в неделю, для чего пробы вынимают из холодильника и оставляют на три часа при комнатной температуре, увлажняют водой по мере потери влаги и снова помещают для хранения в холодильник.
При необходимости хранения проб почвы более месяца применяют консервирующие средства: почву пересыпают в кристаллизатор, заливают раствором формалина с массовой долей 3 %, приготовленным на изотоническом растворе натрия хлористого с массовой долей 0,85 % (жидкость Барбагалло), или раствором соляной кислоты с массовой долей 3 %, а затем ставят в холодильник.
Подготовка проб почвы к анализу. Пробы почвы в лаборатории рассыпают на бумаге или кальке и разминают пестиком крупные комки. Затем из нее выбирают корни растений, камни, насекомых, стекло, уголь, кости животных, друзы гипса, известковые журавчики и др. Затем почву переносят в ступку, растирают пестиком и просеивают через сито с ячейками диаметром 1 мм.
Метод исследования почвы на яйца гельминтов по Н. А. Романенко. Из объединенной пробы берут 25 г почвы, помещают в центрифужные пробирки объемом 250 мл (в случае отсутствия таковых можно пользоваться пробирками объемом 80– 100 мл, но помещать в них следует 15 г почвы) и заливают 3%-ным раствором натриевой или калиевой щелочи (в соотношении 1:1).
После этого содержимое пробирок тщательно размешивают при помощи электромешалки или стеклянных палочек, отстаивают в течение 20–30 мин, и центрифугируют пять минут при 800 об/мин.
Надосадочную жидкость сливают, а почву промывают водой (1– 5 раз в зависимости от типа почвы: для песчаных и супесчаных достаточно одной промывки, для глинистых, суглинистых, черноземных – от двух до пяти) до получения прозрачной надосадочной жидкости. После промывки к почве добавляют 150 мл (45 мл в пробирки объемом 100 мл) насыщенного (плотность 1,38–1,40) раствора нитрата натрия, тщательно размешивают и центрифугируют. Пробирки устанавливают в штатив, доливают тем же раствором соли до уровня на 2–3 мм ниже краев пробирок и накрывают предметными стеклами. Яйца гельминтов всплывают и концентрируются в поверхностной пленке насыщенного раствора. Поэтому очень важно исключить какую-либо потерю ее.
Для этого между краем пробирки и предметным стеклом оставляют пространство шириной не более 10 мм, куда с помощью пипетки вносят насыщенный раствор соли до его соприкосновения с нижней стороной стекла, последнее осторожно передвигают до полного покрытия центрифужной пробирки.
Через 20–25 минут отстоя стекла снимают, переворачивая нижней поверхностью вверх, а на их место ставят другие (при необходимости и третьи). На предметные стекла наносят несколько капель 30 %-ного раствора глицерина и накрывают их покровными стеклами, а затем микроскопируют. Для обнаружения яиц гельминтов препарат просматривают при увеличении в 80, а для определения степени их развития или деформации – в 400 раз. При необходимости приготовленные препараты можно хранить в холодильнике до 5–7 суток. При подсыхании препаратов по краям покровных стекол добавляют несколько капель 30 %-ного раствора глицерина. Эффективность метода колеблется в пределах 59,6–83,1 %, в среднем – 73,0 %.
Для определения истинной обсемененности почвы яйцами аскарид и власоглава необходимо определить ее тип, а затем умножить число обнаруженных яиц гельминтов на коэффициент для этого типа почвы и для данного вида гельминтов (табл. 5).
Для обнаружения в почве яиц гельминтов, имеющих более высокую плотность (яйца описторхисов, клонорхисов), чем яйца аскарид и власоглавов, следует использовать насыщенный раствор хлорида цинка (плотность 1,78); яйца токсокар лучше выявляются при обработке почвы насыщенным раствором сульфата цинка или сульфата магния в смеси с 5%-ным раствором йодата калия.
При работе по данной методике необходимо строго соблюдать следующие требования:
1. Обязательность применения обезжиренных предметных стекол.
2. Обязательность контроля плотности насыщенного раствора с помощью ареометра (плотность должна быть не ниже 1,38–1,40).
В случае нарушения указанных требований, в первом случае поверхностная пленка с яйцами гельминтов не прилипнет к стеклу, во втором случае скорость всплывания яиц гельминтов замедлится, и в указанные сроки они не достигнут поверхностной пленки.
После окончания проведения анализов использованную посуду (центрифужные пробирки, предметные и покровные стекла, стеклянные палочки) замачивают в стиральном порошке и кипятят 15–20 мин, затем моют в чистой воде.
Метод исследования почвы на цисты кишечных простейших по И. К. Падченко. Из объединенной пробы берут 25 г почвы, помещают в фаянсовую ступку, постепенно добавляют к ней водопроводную воду, тщательно растирают пестиком до гомогенной кашицы и выливают ее в цилиндр емкостью 1 л, предварительно наполненный на 3/4 объема чистой водой. Смесь размешивают стеклянной палочкой и отстаивают в течение 15 мин.
Образовавшуюся на поверхности смеси пленку удаляют петлей, а жидкую часть ее отсасывают сифоном в чистый цилиндр. Осадок повторно промывают (не менее трех раз), собирая промывные воды в одном цилиндре. Промывные воды отстаивают, через 24 часа надосадочную жидкость удаляют сифоном, а осадок исследуют в нативных мазках и окрашенных раствором Люголя препаратах. С этой целью осадок тщательно встряхивают и одну каплю полученной взвеси наносят пастеровской пипеткой на предметное стекло, накрывают покровным стеклом и исследуют под световым микроскопом. Микроскопируют не менее 1 мл осадка с последующим пересчетом на его общий объем. Анализ осадка проводят в течение первых двух-трех суток после его получения.
Для того чтобы осадок длительное время оставался пригодным к исследованию (до двух месяцев), к нему добавляют консервант, содержащий мертиолят, 40%-ный раствор формалина, спирт этиловый 96-градусный и физиологический раствор (соотношение компонентов в %: мертиолят – 0,0016–0,0018; 40 %-ный формалин – 4,1–4,4; спирт этиловый – 10,4–10,9; физиологический раствор – остальное). Консервант добавляют к осадку в соотношении 1:2 и хранят в холодильнике.
Для приготовления мазков каплю исследованной смеси осадка с консервантом после встряхивания наносят пипеткой на предметное стекло, смешивают ее с каплей акридинового оранжевого, разведенного 1:500, накрывают покровным стеклом и исследуют под световым или люминесцентным микроскопом, подсчитывают число неокрашенных (живых) и окрашенных (мертвых и дегенерирующих) цист кишечных простейших каждого вида. При изучении исследуемого материала под световым микроскопом жизнеспособные цисты кишечных простейших остаются неокрашенными, а дегенерирующие и мертвые цисты окрашиваются в желтый цвет. Погибшие цисты под люминесцентным микроскопом красные.
Среди возбудителей гельминтозов, встречающихся в мясе и мясопродуктах, опасными для здоровья человека являются личиночные стадии возбудителей трихинеллеза и тениидозов (тениаринхоза и тениоза). Трихинеллез вызывается возбудителями двух видов: Trihinella spiralis с вариететами T.s. spiralis, T.s.
nativa, T.s. nelsoni и Trihinella pseudospiralis. Заражение человека происходит при употреблении инвазированного личинками трихинелл. Весь цикл развития проходит в организме одного хозяина: половозрелая стадия паразита локализуется в кишечнике, а личиночная – в мышечной ткани (T. spiralis в капсульной форме, T. pseudospiralis – в бескапсульной).
Тениаринхоз вызывается бычьим цепнем – Taeniarhynchus saginatus. Заражение человека происходит при употреблении инвазированного мяса крупного рогатого скота (КРС), который является промежуточным хозяином возбудителя тениаринхоза. В мышечной ткани КРС формируется инвазионная личинка (финна) – Cysticercus bovis. Промежуточным хозяином бычьего цепня на ряде территорий Российской Федерации является также северный олень, у которого инвазионные личинки локализуются в головном мозге.
Тениоз вызывается свиным цепнем – Taenia solium. Заражение человека происходит при употреблении инвазированного мяса свиней, которые являются промежуточными хозяевами возбудителя тениоза. В межмышечной соединительной ткани этих животных формируются инвазионные личинки – цистицерки (Cysticercus cellulosae).
Отбор проб для исследования на наличие личинок трихинелл. Отбор материала для исследования осуществляется от каждой туши животного (в том числе, от поросят с трехнедельного возраста). Для исследования отбирают пробы мышечной ткани из ножек диафрагмы (на границе перехода мышечной ткани в сухожилие), при их отсутствии берут части межреберных, шейных, жевательных, поясничных, икроножных мышц, сгибателей и разгибателей пясти, а также мышцы языка, пищевода и гортани; от туш морских млекопитающих – мышцы глаз и кончика языка.
Отбор проб для исследования на наличие цистицерков (финн). Перед отбором проб на наличие цистицерков проводится визуальный осмотр туш крупного рогатого скота и свиней.
Для исследования на наличие цистицерков крупного рогатого скота и свиней забор проб мышечной ткани осуществляется путем разрезов мышц головы и сердца. При обнаружении цистицерков дополнительно исследуют мышцы шеи, лопатко-локтевые, спинные, тазовой конечности и диафрагмы. При обнаружении цистицерков производят отбор материала в объеме не менее 0,5 кг из мест наибольшего их скопления.
Количество проб и вес их представлены в МУК 4.2.2747Методы контроля. Биологические и микробиологические факторы. Методы санитарно-паразитологической экспертизы мяса и мясной продукции: Методические указания».
Пробы следует упаковывать во влагонепроницаемую тару. Их нумеруют и с сопроводительными документами (акт отбора, направление) доставляют в лабораторию в контейнере в день отбора проб. Пробы хранят до момента исследования в холодильнике (при температуре 2–40C не более трех суток). При необходимости хранения проб более трех суток их консервируют насыщенным раствором поваренной соли или 3 %-ным раствором формалина, содержащим 1 % поваренной соли, и другими методами, в том числе замораживанием образцов при температуре -100C.
Метод компрессорной трихинеллоскопии. От каждой пробы мышц изогнутыми ножницами Купера следует делать 24 среза (по ходу мышечных волокон) величиной с овсяное зерно, стараясь брать пробу вблизи сухожилия.
Для приготовления препарата из шпика требуется брать мышечные прослойки. Делают 24 среза от каждого куска, помещают в 10%-ный раствор фуксина в 5 %-ном растворе едкого натра на 5–8 мин и просматривают в компрессории. Трихинеллы могут локализоваться в подкожных жировых отложениях, в которых макроскопически не видно мышечных прослоек. Шпик без видимых мышечных прослоек разрезают на всю толщину и срезы берут с внутренней поверхности шпика по линии его расслоения (такие линии образуются в местах атрофированных мышц). Делают не менее пяти срезов толщиной около 0,5 мм и погружают в раствор, названный выше. При микроскопическом исследовании на фоне неокрашенных жировых клеток резко выделяются трихинеллы в виде светло-красных или желто-красных включений.
Оболочка трихинелл при этом ясно выражена.
При исследовании консервированной (мороженой, соленой) свинины ее сначала оттаивают. Толщина срезов не должна превышать 1,5 мм. После размещения срезов на нижнем стекле компрессория их слегка раздавливают верхним стеклом. Затем нижнее стекло снимают и на каждый срез наносят пипеткой каплю 0,5 %-ного раствора соляной кислоты или раствора метиленового синего (5 мл насыщенного спиртового раствора и 195 мл дистиллированной воды). Продолжительность обработки срезов – 1 мин.
После этого вновь накладывают верхнее стекло и срезы исследуют в обычном порядке. Обработанные соляной кислотой мышечные срезы становятся прозрачными или сероватого цвета. Капсула имеет вид серебристого ободка, жидкость внутри полости трихинеллы – нежно-голубого цвета, личинка гельминта не окрашивается и становится хорошо видимой. Если мясо вследствие длительного хранения потеряло часть влаги, полость трихинеллы окрашивается в более темные тона, чем мышечные волокна.
Мышечные срезы из солонины делают в 2 раза тоньше, чем при трихинеллоскопии консервированной свинины. Их также следует слегка раздавить верхним стеклом компрессория, после чего на каждый срез наносят каплю глицерина, разведенного пополам с водой, или 5 %-ного раствора молочной кислоты (для просветления срезов). Время обработки и порядок исследования такие же, как и мороженой свинины.
Иногда встречаются обызвествленные капсулы, в которых личинки трудно рассмотреть. Для их просветления срезы мышц следует поместить в чашку Петри с 5–10 %-ным раствором соляной кислоты и поставить в термостат при 370C на 20–30 мин. Затем срезы мышц переносят в компрессорий и микроскопируют.
Личинки трихинелл необходимо дифференцировать от саркоспоридий (саркоцисты) и цистицерков (финн). Для обработки срезов применяют 3–5 %-ный раствор едкого калия при экспозиции 3–5 минут. Известь саркоспоридий растворяется, капсула трихинеллы не растворяется. Молодые цистицерки (финны) в отличие от личинок трихинелл располагаются не в мышечных волокнах, а между ними. Финны чаще обнаруживаются в мышце сердца, тогда как трихинеллы в нем не выявляются.
Метод переваривания мышечной ткани в искусственном желудочном соке позволяет брать более значительную массу мышц (20–30 г фарша и более), что повышает чувствительность индикации до 0,1 личинки на 1 г мышечной ткани. Метод предназначен для исследования таких мясопродуктов, как колбаса, солонина, копчености, мороженое мясо, мясные полуфабрикаты, например пельмени, и другие продукты.
Классический метод переваривания мясного фарша по Ю. А. Березанцеву. Искусственный желудочный сок готовят согласно прописи: кислоты соляной концентрированной – 7 мл, пепсина свиного – 15 г, воды дистиллированной – 1000 мл. Пепсин добавляют в последнюю очередь. Желудочный сок наливают в стеклянный сосуд (стакан, банку), помещают туда фарш в соотношении 1:20–1:25 (40–50 г) и тщательно размешивают. Затем сосуд помещают в термостат при температуре 390C на 16–18 часов.
За это время содержимое сосуда несколько раз тщательно перемешивают стеклянной палочкой или с помощью магнитной мешалки.
После окончания переваривания всю массу выливают в аппарат Бермана на сито из мельничного газа № 13 или центрифугируют в стаканах или пробирках. Через 15–20 мин все личинки оседают на дне сосуда. Надосадочную жидкость отсасывают пипеткой с резиновой грушей, а осадок микроскопируют в чашках Петри с использованием бинокулярных стереоскопических микроскопов.
Метод визуального исследования мышц на наличие цистицерков (финн) на стандартных разрезах. Исследование следует начинать с головы, жевательных мышц и сердца. Голову животных исследуют следующим образом: прощупывают губы и язык, жевательные мышцы с каждой стороны разрезают пластами на всю ширину параллельно их поверхности (наружные – двумя разрезами, а внутренние – одним) и просматривают. При исследовании сердца вскрывают околосердечную сумку, осматривают состояние миокарда, разрезают по большой кривизне правый и левый отделы сердца, осматривают состояние эндокарда, производят один-два продольных и один несквозной поперечный разрез мышцы сердца. При обнаружении финн на разрезах мышц головы и сердца производят дополнительно по два параллельных разреза шейных мышц в выйной области, лопаточно-локтевых, спинных, тазовой конечности и диафрагмы. Для оттягивания мышц во время разрезов пользуются крючком-вилкой. У северных оленей на наличие цистицерков осматривают головной мозг.
Метод микроскопического исследования мяса на наличие цистицерков (финн). Полученный материал с пузырьками круглой или овальной формы серовато-белого цвета, содержащими прозрачную жидкость, следует тщательно осмотреть. При надавливании на пузырек из него должна выворачиваться головка (сколекс). Далее проводят верификацию видовой принадлежности паразита, используя лупу или малое увеличение микроскопа (4×10; 10×10).
Учет результатов при исследовании мяса и мясопродуктов на наличие личинок трихинелл. Инкапсулированные трихинеллы – это спирально свернутые паразиты, заключенные в полости, окруженные капсулой. Форма капсулы лимонообразная, бутылкообразная, овальная или круглая. Полость заполнена прозрачной жидкостью, в ней помещается, как правило, один паразит, реже – два или три. Поперечный диаметр полости равен 0,2 мм, поэтому трихинеллы хорошо видны, если раздавленные мышцы рассматривать при малом увеличении.
Оценка. При обнаружении в 24 срезах компрессория или в осадке при переваривании проб мяса и мясопродуктов в искусственном желудочном соке хотя бы одной личинки трихинелл (капсульных и бескапсульных) независимо от ее жизнеспособности проба считается не соответствующей санитарно-гигиеническим нормативам. Мясо и мясопродукты при этом переводят в разряд «непригодной продукции».
Учет результатов при исследовании мяса и мясопродукции на наличие цистицерков (финн) тениид. Цистицерки бовисные (финны) представляют собой пузырьки круглой или овальной формы, серовато-белого цвета и величиной от булавочной головки до горошины (0,5–0,8 см), содержащие прозрачную жидкость. Снаружи у них нежная соединительнотканная капсула, сквозь которую просвечивает паразит. Головка и шейка его завернуты внутрь заполненного жидкостью овального пузырька. При надавливании на пузырек из него выворачивается головка (сколекс), при рассмотрении которой под лупой или малым увеличением микроскопа хорошо видны четыре сильноразвитых присоски, не вооруженные крючьями.
Цистицерк целлюлозный (свиной) – полупрозрачный пузырек шарообразной или овальной формы размером 0,5–0,8 см.
Внутрь пузырька вогнут сколекс, просвечивающийся в виде белой точки. Исследуя сколекс финны при малом увеличении микроскопа, обнаруживают ротовую щель (ботрикс), четыре присоски и хитиновые крючья (28–32), расположенные в два ряда.
При обнаружении финн (цистицерков) необходимо произвести подсчет их количества. При количественном содержании обнаруженных финн до трех хотя бы на одном из разрезов площадью 40 кв. см мясо и мясопродукты переводят в разряд «условно годной» продукции. Обнаружение более трех финн хотя бы на одном из разрезов площадью 40 кв. см – в разряд «непригодной».
При необходимости определяют жизнеспособность выявленных цистицерков. Для этого цистицерки максимально очищают от мышечной ткани и помещают в разбавленную физиологическим раствором желчь крупного рогатого скота в соотношении 1:1. Выдерживают в термостате при температуре 37–380C на протяжении 30–90 мин. Жизнеспособные цистицерки выворачивают наружу сколекс и проявляют подвижность.
Интерпретацию результатов и санитарно-эпидемиологическую экспертизу безопасности продукции проводят в соответствии с СанПиН 3.2.1333-03 «Профилактика паразитарных заболеваний на территории Российской Федерации», МУ 3.2.1756-03 «Эпидемиологический надзор за паразитарными болезнями».
Результаты санитарно-паразитологического исследования мяса и мясной продукции на наличие цистицерков и личинок трихинелл отражают в санитарно-эпидемиологическом заключении об исследовании образцов мяса, мясопродукции, составленном в соответствии с Приказом ФС Роспотребнадзора № 224 от 19.07.2007.
При оценке паразитологического состояния водоема (района промысла) следует начинать исследовать виды гидробионтов, наиболее подверженные заражению. Так, наилучшими индикаторами неблагополучия водоема в отношении инвазии личинками описторхисов являются язь, далее по убывающей – елец, линь и т. д., а в отношении Diphyllobothrium latum – щука и налим.
Для исследования на наличие метацеркарий Opisthorchis felineus и плероцеркоидов D. latum целесообразнее отбирать рыб старших возрастов, т. к. личинки паразитов живут несколько лет и их число увеличивается с возрастом рыб. Метацеркарии Metorchis bilis (albidus) чаще встречаются у сеголеток и рыб младших возрастов, а Echinochasmus perfoliatus – преимущественно у мальков.
До начала исследования рыбы, а также моллюсков, ракообразных, земноводных и пресмыкающихся следует точно определить видовую принадлежность исследуемого экземпляра. Следует помнить, что один и тот же вид позвоночного или беспозвоночного может служить дополнительным или резервуарным (факультативным) хозяином для нескольких видов гельминтов.
Сохранять свежевыловленную рыбу и нерыбных промысловых гидробионтов до исследования следует в охлажденном состоянии (в холодильнике), не допуская кристаллизации, либо в слегка подвяленном на воздухе виде не более трех-пяти дней.
Перед исследованием рыбу (или нерыбный объект промысла) отмывают от слизи, протирают, взвешивают, измеряют длину.
Методика неполного гельминтологического вскрытия рыбы Рыбу вскрывают в большой эмалированной кювете или на широкой гладкой доске. Прежде всего, проводят наружный осмотр рыбы для выявления личинок, просвечивающих через кожу, извлекают их препаровальной иглой. Затем вырезают левую стенку полости тела и открывают доступ к последней. Для этого, повернув рыбу брюхом кверху, делают короткий надрез вперед от анального отверстия, куда затем вводят тупой конец ножниц и разрезают рыбу вдоль срединной линии брюшка до угла нижней челюсти. Делают дугообразный надрез, вырезают левую брюшную стенку, отделяют ее. Рыбу кладут на правый бок. При внимательном осмотре полости тела и внутренних органов могут быть обнаружены свободно лежащие под серозой или в капсулах личинки цестод, нематод, скребней, видимые невооруженным глазом.
Накладывают лигатуры на кишечник близ анального отверстия и на пищевод в его начальном отделе, чтобы содержимое пищеварительного тракта не вышло наружу. Затем извлекают внутренние органы. Вырезают яичники (икру) или семенники (молоки), помещая их в отдельные чашки Петри, и просматривают.
Осматривают плавательный пузырь снаружи и внутри. Вырезают и осматривают сердце, а также сердечную полость. Компрессорным способом исследуют содержимое, оставшееся в полости тела.
Последнюю протирают марлевой салфеткой, соскабливают брюшину. Затем препарируют комплекс органов пищеварительной системы. В первую очередь выделяют желчный пузырь, лежащий на поверхности печени, так, чтобы его содержимое (в том числе и паразиты) не залило остальные внутренние органы. Затем выделяют пищеварительный тракт, печень, селезенку, поджелудочную железу. Эти органы отделяют друг от друга и от окружающей их жировой ткани и осматривают. Жировую ткань разрезают на тонкие пластинки толщиной около 3 мм или исследуют компрессорно между стеклами на темном фоне или в полупроходящем свете.
Исследуют освобожденный от жировой ткани пищеварительный тракт, отыскивая личинок в капсулах на его поверхности или просвечивающих через серозные покровы (Diphyllobothrium dendriticum, Diphyllobothrium latum, Dioctophyme renale, Eustrongylides exicisus, Corynosoma strumosum, Corynosoma semerse, Bolbosoma caenoforme, личинки сем. Anisakidae). Пилорические придатки (развитые у налима, сиговых, лососевых) расправляют и осматривают снаружи (Pyramicocephalus phocarum). Стенки желудка и пищевода после наружного осмотра исследуют под бинокулярной лупой, подбирая степень увеличения в зависимости от объекта.
При наружном осмотре печени невооруженным глазом можно заметить плероцеркоиды цестод (Diphyllobothrium latum, Pyramicocephalus phocarum, Eustrongylides exicisus) и личинки анизакид. Поджелудочную железу, селезенку, печень осматривают снаружи и также разрезают на пластинки толщиной около 3 мм.
У яичника разрезают оболочку, содержимое соскабливают и компрессуют. Здесь часто встречаются плероцеркоиды Diphyllobothrium latum. Компрессорным методом удобно просматривать лишь мелкую икру. При исследовании крупных икринок следует разбирать их препаровальными иглами в чашке Петри с небольшим добавлением воды.
Соленую икру (зернистую, паюсную, ястыковую) после предварительной подготовки исследуют таким же способом. При исследовании семенников (молок) тщательно просматривают их поверхность.
Последними из внутренних органов исследуют почки, лежащие вдоль позвоночника. Так как ткань почек очень рыхлая, обычно не удается выделить их целиком. Их соскабливают и по частям исследуют компрессорным способом, добавляя несколько капель воды. Почки – орган наиболее вероятной локализации метацеркарий Nanophyetus salmincola.
Отрезают плавники и просматривают их с использованием микроскопа МБС при увеличении 16–48 (окуляр 8х, 12х, объектив 2х, 4х) раз в небольшом количестве воды. Здесь могут быть заметны в виде маленьких черных точек пигментированные цисты Apophallus muhlingi и Rossicotrema donicum, а также метацеркарии Metagonimus yokogawai и Metagonimus katsuradai. Мышцы плавников исследуют компрессорным способом.
Снимают жаберную крышку и ножницами вырезают все жаберные дуги. Их по очереди рассматривают в чашке Петри под бинокуляром, перебирая лепестки препаровальными иглами и следя за тем, чтобы они были покрыты водой. Затем отрезают от дуги лепестки у их основания и, разбирая препаровальными иглами, выявляют паразитов, оставшихся незамеченными. На жабрах можно обнаружить метацеркарии Echinochasmus perfoliatus, Metagonimus yokogawai, Metagonimus katsuradai, Nanophyetus salmincola, Opisthorchis felineus.
После просмотра внутренних органов с рыбы снимают кожу в направлении от головы к хвосту, подрезая ее ножницами и оттягивая хирургическим пинцетом или рукой. Осматривают внутреннюю сторону кожи, а часть мышц, отделившихся с кожей, разрезают на пластинки или соскабливают и компрессуют.
Метод исследования мускулатуры выбирается в зависимости от целей паразитологического контроля (вида гельминта).
1. Метод параллельных разрезов. Метод применяется для обнаружения в мышечной ткани рыбы личинок гельминтов, видимых без использования увеличительных приборов (цестод, нематод, скребней).
Мышечную ткань острым скальпелем разрезают на пластинки толщиной до 5 мм, которые затем раздвигают и просматривают в падающем свете невооруженным глазом. Разрезы можно делать как поперек, так и вдоль мышечных волокон. Делая разрезы мускулатуры и встречая в ее толще крупных личинок или капсулы с личинками (величиной около 1 см и более), нужно извлечь несколько экземпляров паразитов целиком для определения вида.
Выделенных личинок следует поместить в чашку Петри или часовое стекло с физиологическим раствором.
При исследовании тихоокеанских лососей, кунджи и сахалинского тайменя на наличие плероцеркоидов Diphyllobothrium luxi (D. klebanovskii) разрезы проводят поперек мышечных волокон всей дорсальной части тела, большинство личинок локализуется между жировым и спинным плавниками.
2. Метод исследования мышечной ткани на просвет. Используется также для выявления личинок нематод, цестод, скребней. Для применения этого метода необходимо изготовить специальное приспособление – столик с прозрачной крышкой (размером не менее 40 х 40 см, лучше из молочного или матового стекла) и подсветкой снизу. Можно пользоваться столиком микроскопа типа МБС с нижней подсветкой.
Мышечную ткань рыбы (или филе) острым скальпелем или ножом нарезают на пластинки толщиной не более 2–3 см. Куски мышц помещают на верхнюю крышку столика и просматривают.
Яркость подсветки и толщина ломтиков в зависимости от степени просвечиваемости мяса конкретного вида рыбы устанавливается опытным путем. Обнаруженных личинок гельминтов выделяют из мышечных тканей рыбы с помощью препаровальных игл.
Выделенных личинок помещают в чашку Петри или часовое стекло с физиологическим раствором.
3. Компрессорный метод применяется в основном для выявления метацеркарий трематод. Это очень мелкие, незаметные или малозаметные невооруженным глазом объекты, поэтому для их обнаружения и дифференциации видовой принадлежности необходимы специальные микроскопические исследования. Используют метод при просмотре мышечной ткани и внутренних органов рыб, а также мышечной ткани ракообразных. Возможно его использование при исследовании внутренних органов рыб на наличие личинок нематод и цестод. Целесообразно компрессорному исследованию подвергать органы и участки мышечной ткани наиболее вероятной локализации метацеркарий.
Участок тела наиболее вероятной локализации метацеркарий освобождают от чешуи. Затем скальпелем надрезают кожу по средней линии спины и двумя надрезами от первого надреза до боковой линии выделяют участок средней трети спины. Кожу с вычлененного участка поднимают пинцетом и с помощью скальпеля отделяют ее так, чтобы подкожная клетчатка осталась на поверхности мышц. Острым скальпелем соскабливают или срезают тонкие пластинки поверхностного слоя мышц, толщиной не более 2–3 мм, размещают их на нижнем стекле компрессория, накрывают другим стеклом и сдавливают их. Наиболее удобно использовать компрессорные стекла, нарезанные из обычного оконного стекла с краями, обработанными наждаком. Размеры стекол 6– 8х12–15 см, нижнее стекло немного больше верхнего, толщина 3– 5 мм. Срезы просматривают с помощью микроскопа типа МБС, используя увеличение в 16–48 раз (окуляр 8х, 12х, объектив 2х, 4х). Для уточнения диагноза кусочки тканей с личинками переносят на предметные стекла, накрывают покровными и исследуют при большем увеличении (например, объектив 8х, 10х, окуляр 7х или 10х, бинокулярная насадка 1,5х) с помощью микроскопа.
При обнаружении личинок можно ограничиться просмотром мышц с одной стороны тела. При отсутствии личинок необходимо просмотреть срез и с другой стороны. При исследовании молоди рыб длиной до 20–25 мм их компрессуют целиком. Более крупных сеголеток распластывают на две половинки и просматривают в компрессории со стороны разреза, не снимая кожи и не освобождая от чешуи.
4. Метод переваривания. В специальных целях при необходимости выделения личинок из тканей гидробионтов (для дифференциации видовой принадлежности, получения материала для контрольной биологической пробы, при низкой интенсивности инвазии или для ее подсчета) используется метод переваривания.
Он также более эффективен при исследовании продуктов переработки гидробионтов (фарша, пресервов). В основном используется для выделения метацеркарий трематод, реже личинок нематод.
Метод основан на том, что в кислой среде метацеркарии освобождаются от наружной оболочки, а окружающая их мышечная ткань переваривается в искусственном желудочном соке. Приготовление искусственного желудочного сока. На 1000 мл дистиллированной воды (при ее отсутствии можно использовать кипяченую, остывшую до температуры 37–380C водопроводную воду) добавляют 7 г пепсина, 9,0 г поваренной соли и 10 мл концентрированной соляной кислоты.
«РОССИЙСКАЯ ФЕДЕРАЦИЯ МИНИСТЕРСТВО ОБРАЗОВАНИЯ И НАУКИ Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования ТЮМЕНСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ Институт биологии Кафедра анатомии и физиологии человека и животных Ковязина О.Л. ФИЗИОЛОГИЯ ЭНДОКРИННОЙ СИСТЕМЫ. СТРЕСС Учебно-методический комплекс. Рабочая программа для студентов направления 020400.68 Биология; магистерская программа «Физиология человека и животных». Форма обучения – очная Тюменский. »
«МЕТОДИКА ОРГАНИЗАЦИИ РАБОТЫ С ИСТОЧНИКАМИ ИНФОРМАЦИИ В ПРОЦЕССЕ ОБУЧЕНИЯ БИОЛОГИИ Матюшкина М. П., Боброва Н. Г. Поволжская государственная социально-гуманитарная академия Россия, Самара Информация – сведения в письменной или устной форме и, одновременно, процесс передачи или получения сведений различными способами. Информационная деятельность – это такая деятельность школьников, при которой организуется работа с любыми источниками информации с целью получения сведений, подтверждающих положения. »
«МИНИСТЕРСТВО ОБРАЗОВАНИЯ И НАУКИ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования «ТЮМЕНСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ» Институт биологии Кафедра экологии и генетики Г.А. Петухова Основы экологии Учебно-методический комплекс. Рабочая программа для студентов по направлению подготовки 040100.62 Социология (уровень бакалавриата) форма обучения очная Тюменский государственный университет Петухова Г.А. Основы экологии. »
«МИНИСТЕРСТВО ОБРАЗОВАНИЯ И НАУКИ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования «ТЮМЕНСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ» Институт биологии Кафедра ботаники, биотехнологии и ландшафтной архитектуры Боме Н.А. ГЕНЕТИЧЕСКАЯ ИНЖЕНЕРИЯ РАСТЕНИЙ Учебно-методический комплекс. Рабочая программа для студентов по направлению подготовки 020400.68 Биология, магистерская программа Биотехнология», форма обучения очная Тюменский. »
«МИНИСТЕРСТВО ОБРАЗОВАНИЯ И НАУКИ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ Федеральное государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования ТЮМЕНСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ Институт биологии Кафедра ботаники, биотехнологии и ландшафтной архитектуры Чаббаров Р.Х. МАКЕТИРОВАНИЕ Учебно-методический комплекс. Рабочая программа для студентов направления 35.03.10 Ландшафтная архитектура очной формы обучения профиля Декоративное растениеводство и питомники Тюменский государственный. »
«Дагестанский государственный институт народного хозяйства «Утверждаю» Ректор, д.э.н., профессор Бучаев Я. Г. 30 августа 2014 г. Кафедра «Землеустройство и земельный кадастр» Методическое указание для выполнения курсового проекта по дисциплине «Государственная регистрация, учет и оценка земель» направление подготовки – 21.03.02 «Землеустройство и кадастры» профиль «Земельный кадастр» Квалификация бакалавр Махачкала – 2014 г. УДК 332.3 (100) (075.8) ББК 65.32-5:65.5 Абасова Ашура. »
«ЛИСТ СОГЛАСОВАНИЯ от 26.05.2015 Рег. номер: 108-1 (17.03.2015) Дисциплина: Межклеточные взаимодействия и рецепция Учебный план: 06.03.01 Биология/4 года ОДО Вид УМК: Электронное издание Инициатор: Кыров Дмитрий Николаевич Автор: Кыров Дмитрий Николаевич Кафедра: Кафедра анатомии и физиологии человека и животных УМК: Институт биологии Дата заседания 24.02.2015 УМК: Протокол заседания УМК: Дата Дата Результат Согласующие ФИО Комментарии получения согласования согласования Зав. кафедрой Соловьев. »
«МИНИСТЕРСТВО ОБРАЗОВАНИЯ И НАУКИ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования «ТЮМЕНСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ» Институт Кафедра зоологии и эволюционной экологии животных О.А. Алешина БАЗОВАЯ УЧЕБНАЯ ОБЩЕБИОЛОГИЧЕСКАЯ ПРАКТИКА: ЗООЛОГИЯ БЕСПОЗВОНОЧНЫХ Учебно-методический комплекс. Рабочая программа для студентов по направлению подготовки 06.03.01 – «Биология» (академический бакалавр), профиль подготовки. »
«РОССИЙСКАЯ ФЕДЕРАЦИЯ МИНИСТЕРСТВО ОБРАЗОВАНИЯ И НАУКИ Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования ТЮМЕНСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ Институт биологии Кафедра анатомии и физиологии человека и животных Соловьев В.С. НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКАЯ ПРАКТИКА Учебно-методический комплекс. Рабочая программа для студентов направления 020400.68 Биология; магистерская программа: «Физиология человека и животных». Форма обучения – очная Тюменский. »
«МИНИСТЕРСТВО ОБРАЗОВАНИЯ И НАУКИ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования «ТЮМЕНСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ» УТВЕРЖДАЮ Директор Института _ /Шалабодов А.Д./ _ 2015г. МАТЕМАТИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ В БИОЛОГИИ Учебно-методический комплекс. Рабочая программа для студентов по направлению подготовки 06.03.01 – Биология (уровень бакалавриата), форма обучения очная МИНИСТЕРСТВО ОБРАЗОВАНИЯ И НАУКИ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ. »
«МИНИСТЕРСТВО ОБРАЗОВАНИЯ И НАУКИ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования «ТЮМЕНСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ» Институт биологии Кафедра экологии и генетики О.В. Трофимов ГЕНЕТИЧЕСКИЙ ПОЛИМОРФИЗМ БЕЛКОВ И ДНК Учебно-методический комплекс. Рабочая программа для студентов по направлению подготовки 020400.68 Биология, магистерская программа «Экологическая генетика», форма обучения очная Тюменский государственный. »
«МИНИСТЕРСТВО ОБРАЗОВАНИЯ И НАУКИ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования «ТЮМЕНСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ» Институт биологии Кафедра ботаники, биотехнологии и ландшафтной архитектуры Боме Н.А. БИОТЕХНОЛОГИЯ РАСТЕНИЙ Учебно-методический комплекс. Рабочая программа для студентов по направлению подготовки 06.03.01 Биология (уровень бакалавриата), профиль подготовки «Ботаника», форма обучения очная Тюменский. »
«МИНИСТЕРСТВО ОБРАЗОВАНИЯ И НАУКИ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования «ТЮМЕНСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ» Институт биологии Кафедра анатомии и физиологии человека и животных Ковязина О.Л., Лепунова О.Н. РЕПРОДУКТИВНАЯ ФИЗИОЛОГИЯ И ЭКОЛОГИЯ ПОЛА ЧЕЛОВЕКА Учебно-методический комплекс. Рабочая программа для студентов 06.03.01 направления «Биология», профиль: физиология; форма обучения – очная Тюменский. »
«МИНИСТЕРСТВО ОБРАЗОВАНИЯ И НАУКИ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования «ТЮМЕНСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ» Институт биологии Кафедра зоологии и эволюционной экологии животных Ф.Х. Бетляева МАТЕМАТИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ В БИОЛОГИИ Учебно-методический комплекс. Рабочая программа для студентов по направлению подготовки 06.03.01 – Биология (уровень бакалавриата), форма обучения очная Тюменский государственный. »
«ЛИСТ СОГЛАСОВАНИЯ от 10.06.2015 Рег. номер: 775-1 (29.04.2015) Дисциплина: Практикум по профилю Учебный план: 06.03.01 Биология/4 года ОДО Вид УМК: Электронное издание Инициатор: Белкин Алексей Васильевич Автор: Белкин Алексей Васильевич Кафедра: Кафедра анатомии и физиологии человека и животных УМК: Институт биологии Дата заседания 24.02.2015 УМК: Протокол заседания УМК: Дата Дата Результат Согласующие ФИО Комментарии получения согласования согласования Зав. кафедрой Соловьев Рекомендовано к. »
«МИНИСТЕРСТВО ОБРАЗОВАНИЯ И НАУКИ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования «ТЮМЕНСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ» Институт биологии Кафедра зоологии и эволюционной экологии животных С.Н. Гашев ЗООГЕОГРАФИЯ И ИСТОРИЯ ФАУН Учебно-методический комплекс. Рабочая программа для студентов по направлению подготовки 06.03.01 – Биология (уровень бакалавриата), профили подготовки «Зоология», форма обучения очная Тюменский. »
«МИНИСТЕРСТВО ОБРАЗОВАНИЯ И НАУКИ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования «ТЮМЕНСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ» Институт биологии Кафедра ботаники, биотехнологии и ландшафтной архитектуры Боме Н.А. ТЕОРЕТИЧЕСКИЕ И ПРИКЛАДНЫЕ АСПЕКТЫ БИОТЕХНОЛОГИИ РАСТЕНИЙ Учебно-методический комплекс. Рабочая программа для студентов по направлению подготовки 020400.68 Биология (уровень магистратуры), магистерская программа. »
«Перспективы развития микробиологических исследований в системе клинической лабораторной диагностики в России. России. И.С.Тартаковский ФНИЦ эпидемиологии и микробиологии им. Н.Ф.Гамалеи Минздрава России Основные проблемы клинической микробиологии:-организационные;-материально-технические; материальнонаучно-методические. научноКутырев Владимир Викторович – главный бактериолог Минздрава России в 2001-2003гг. 2001Козлов Роман Сергеевич – главный внештатный специалист Минздрава России по. »
«МИНИСТЕРСТВО ОБРАЗОВАНИЯ И НАУКИ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования «ТЮМЕНСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ» Институт биологии Кафедра экологии и генетики О.В. Трофимов БИОИНЖЕНЕРИЯ Учебно-методический комплекс. Рабочая программа для студентов по направлению подготовки 020400.68 Биология, магистерская программа «Экологическая генетика», форма обучения очная Тюменский государственный университет Трофимов О.В. »
«РАБОЧАЯ ПРОГРАММА по предмету «Экология Москвы и устойчивое развитие» 10(11) КЛАСС (базовый уровень) на 2014-2015 учебный год 10 «А», «Б», «В», «Г»Учитель биологии и экологии: Смагина Нелли Александровна Количество уч. недель: 36 Количество учебных часов: 36ч. Программа: программа общеобразовательных учреждений: Экология Москвы и устойчивое развитие, 10(11) класс/составители Г.А. Ягодин, М.В. Аргунова, Т.А. Плюснина, Д.В. МоргунМосква, МИОО Комплект обучающегося: Экология Москвы и устойчивое. »
2016 www.metodichka.x-pdf.ru — «Бесплатная электронная библиотека — Методички, методические указания, пособия»
Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.
источник