Анализ антитела к белку миелина

Определение в крови аутоантител к антигенам миелина, используемое для диагностики, оценки прогноза и контроля лечения рассеянного склероза и других демиелинизирующих заболеваний центральной нервной системы.

Аутоантитела к антигенам миелина

Myelin specific autoantibodies

Непрямая реакция иммунофлюоресценции.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Как правильно подготовиться к исследованию?

Не курить в течение 30 минут до исследования.

Общая информация об исследовании

Демиелинизирующие заболевания центральной нервной системы – это гетерогенная группа болезней, характеризующихся разрушением миелиновой оболочки (демиелинизацией) нервных волокон головного и спинного мозга. Наиболее ярким представителем этой группы заболеваний является рассеянный склероз. В настоящий момент демиелинизирующие заболевания рассматриваются как аутоиммунные заболевания, преимущественно опосредованные Т-клетками, однако в последнее время появляются новые данные и о роли гуморального ответа, опосредованного аутоантителами к антигенам ЦНС. Наиболее хорошо изучены антитела к антигенам миелина – белково-липидной оболочки аксонов нейронов. Определение в крови аутоантител к антигенам миелина может использоваться для диагностики, оценки прогноза и контроля лечения рассеянного склероза и других демиелинизирующих заболеваний ЦНС. Различают несколько вариантов антител к антигенам миелина:

1. Антитела к гликопротеину миелина олигодендроцитов (anti-myelin oligodendrocyte glycoprotein, Anti-MOG)

На долю белка под названием гликопротеин миелина олигодендроцитов (MOG) приходится всего лишь 0,05 % всех белков в составе миелина. MOG, однако, располагается во внешнем слое миелиновой оболочки, что делает его легкодоступным антигеном для атаки аутоантителами. В действительности MOG является мишенью как для гуморального, так и для клеточного аутоиммунного ответа. Физиологическая роль MOG до конца неясна, хотя, по-видимому, он необходим для «склеивания» миелиновых волокон. MOG также способен связывать C1q фрагмент комплемента и, таким образом, участвовать в регуляции классического пути активации комплемента. Показано, что антитела к MOG непосредственно приводят к демиелинизации, то есть обладают энцефалитогенными свойствами. Важно отметить, что антиген MGO имеет несколько конформаций, различающихся между собой по степени иммуногенности. Наиболее выраженную демиелинизацию вызывают антитела, направленные против гликозилированных эпитопов MGO.

Антитела к MGO обнаруживаются в крови и спинномозговой жидкости пациентов с рассеянным склерозом, но также могут быть выявлены и у здоровых людей. Интересно, что анти-MGO чаще обнаруживаются в случаях детского рассеянного склероза (у детей младше 10 лет).

Некоторыми исследованиями доказано, что уровень анти-MGO отражает активность рассеянного склероза и поэтому может быть использован для прогноза и контроля лечения заболевания. Также показано, что здоровые люди, в крови которых обнаруживаются анти-MGO, имеют несколько повышенный риск развития рассеянного склероза в будущем.

2. Антитела к основному белку миелина (anti-myelin basic protein, anti-MBP)

Основной белок миелина (MBP) – это один из главных компонентов внутреннего слоя миелиновой оболочки. Располагаясь внутри, MBP менее доступен для аутоантител при условии, что миелиновое волокно не повреждено. Антитела к MBP обнаруживаются в повышенной концентрации в крови и спинномозговой жидкости пациентов с рассеянным склерозом. В отличие от анти-MGO, анти-MBP не обладают энцефалитогенными свойствами и их роль в патогенезе рассеянного склероза не ясна. Некоторыми учеными показано, что анти-MBP в сочетании с анти-MGO могут быть использованы в качестве маркеров ранней трансформации клинического изолированного синдрома (КИС) в рассеянный склероз.

3. Антитела к миелин-ассоциированному гликопротеину (anti-myelin associated glycoprotein, anti-MAG)

На долю белка под названием миелин-ассоциированный гликопротеин (MAG) приходится около 3 % всех белков в составе миелина. Однако MAG, как и гликопротеин миелина олигодендроцитов MOG, располагается во внешнем слое миелиновой оболочки и поэтому доступен для аутоантител. Анти-MAG хорошо известен в качестве клинико-лабораторного маркера периферических нейропатий, связанных с моноклональными гаммапатиями и другими лимфопролиферативными заболеваниями. Показано, что эти аутоантитела также обнаруживаются у пациентов с рассеянным склерозом и могут быть связаны с прогрессированием этого заболевания.

4. Антитела к галактоцереброзидазе (anti-galactocerebrosidase, anti-Galc)

Галактоцереброзидаза (Galc) – это самый главный липидный компонент миелина, на долю которого приходится около 30 % миелина. Так же как и анти-MGO, анти-Galc способны непосредственно приводить к демиелинизации. Анти-Galc более характерны для ремитирующего-рецидивирующего варианта рассеянного склероза и не обнаруживаются у здоровых лиц. Так как анти-Galc нехарактерны для ранних стадий рассеянного склероза (клинически изолированный синдром) и чаще выявляются при прогрессировании заболевания, некоторыми учеными предложено использовать этот маркер для определения стадии заболевания.

5. Антитела к протеолипидному протеину (anti-proteolipid protein, anti-PLP)

Протеолипидный протеин (PLP) – еще один из основных компонентов миелина. Антитела к PLP обнаруживаются в повышенной концентрации в крови и спинномозговой жидкости пациентов с рассеянным склерозом.

6. Антитела к фосфатидилхолину (anti-phosphatidylcholine)

В составе олигоклональных иммуноглобулинов, определяемых в ликворе больных рассеянным склерозом, могут быть обнаружены специфические антитела класса IgM, избирательно взаимодействующие с фосфатидилхолином. Эти аутоантитела связаны с более агрессивным течением болезни и поэтому могут использоваться в качестве прогностического маркера.

Следует еще раз подчеркнуть, что антитела к антигенам миелина неспецифичны для рассеянного склероза. Они также обнаруживаются и при некоторых других демиелинизирующих заболеваниях (например, при болезни Марбурга и остром диссеминированном энцефаломиелите) и в постинсультном состоянии. По этой причине их используют в качестве дополнительных клинико-лабораторных маркеров рассеянного склероза и других заболеваний центральной нервной системы.

Для чего используется исследование?

Для диагностики, прогноза и контроля лечения рассеянного склероза и других демиелинизирующих заболеваний центральной нервной системы.

Когда назначается исследование?

При наличии симптомов рассеянного склероза: нарушения зрения (помутнение, двоение в глазах), чувства слабости, онемения, покалывания в руках и ногах, нарушения равновесия, учащения мочеиспускания, особенно если симптомы носят перемежающий характер и наблюдаются у молодой женщины;
при получении неоднозначных результатов магнитно-резонансного исследования головного мозга (МРТ).

Титр: Что может влиять на результат?

Возраст: антитела к антигенам миелина более характерны для детского рассеянного склероза;
наличие сопутствующих заболеваний: антитела к антигенам миелина могут длительно обнаруживаться после инсульта.

Антитела к антигенам миелина являются неспецифичными маркерами рассеянного склероза и других демиелинизирующих заболеваний;
результаты анализа следует интерпретировать с учетом дополнительных клинических, лабораторных и инструментальных данных.

[13-058] Диагностика рассеянного склероза (изоэлектрофокусирование олигоклонального IgG в ликворе и сыворотке)

Кто назначает исследование?

Невролог, врач общей практики.

Lalive PH. Autoantibodies in inflammatory demyelinating diseases of the central nervous system. Swiss Med Wkly. 2008 Nov 29;138(47-48):692-707. doi: /aop/smw-aop12283. Review.
Marie Cathrin Mayer, Edgar Meinl. Glycoproteins as targets of autoantibodies in CNS inflammation: MOG and more. Ther Adv Neurol Disord. 2012 May; 5(3): 147–159.
Mirshafiey A, Kianiaslani M. Autoantigens and autoantibodies in multiple sclerosis. Iran J Allergy Asthma Immunol. 2013 Aug 28;12(4):292-303.

источник

Миелин – это многослойная мембрана, которая окружает нервные волокна центральной и периферической нервной системы и образуется из плазматической мембраны олигодендроцитов центральной нервной системы и леммоцитов периферической нервной системы. Антитела ( IgG , IgA и IgM ) к основному белку миелина наблюдаются у значительной части детей с расстройствами аутичного спектра. Положительный результат говорит об аутоиммунности. [14]

Расширенная вирусная/иммунологическая панель при расстройствах аутичного спектра

Работая с Аристо Вождани, к. м. н., директором лаборатории Immunosciences Lab ., я обнаружила, что следующие анализы могут помочь в оценке иммунной системы детей с расстройствами аутичного спектра и подборе эффективного лечения.

Главная панель исследований при аутизме[15]

— пептиды стрептококка, IgG (М5, М12, М19)
— антитела к глиадину ( IgG , IgM , IgA )
— антитела к казеину ( IgG , IgM , IgA )
— антитела к Hg -связывающему антигену (фибрилларину) ( IgG , IgM , IgA )
— антитела к дипептидилпептидазе ( DPP IV ) ( IgG , IgM , IgA )
— антитела к основному белку миелина ( IgG , IgM , IgA )
— антитела к анти-нейрофиламенту
— металлотионеин (клеточный уровень)
— активность НК-клеток
— антитела к кори ( IgG , IgM )
— иммуноглобулины ( IgG , IgM , IgA )
— вирусная панель #3:
вирус Варицелла-зостер ( IgG )
Цитомегаловирус ( IgG , IgM )
Вирус Эпштейна-Барра или VGA ( IgG , IgM )
Вирусы герпеса 1 и 2 типа ( IgG , IgM )
Вирус герпеса 6 типа ( IgG , IgM )

Стоимость $1544, 50% скидка за весь комплекс анализов = $772 при предварительной оплате (по состоянию на 03/2004). Необходимое количество крови: 2 желтых пробирки (обе вакуумные), 1 красная пробирка (вакуумная)

История болезни — Сьюзи

В 1998 году меня попросили заняться высокофункционирующей 16-летней аутичной девочкой, мать которой считала, что ее дочь, возможно, страдает от какого-то «вируса в мозге». Я сказала матери, что никогда раньше не лечила никого от «вирусов в мозге» и посоветовала обратиться к другому доктору в этом районе, который занимался иммунными расстройствами и вирусами как одной из причин аутизма, но она упорствовала. Я всегда буду благодарна этой матери, так же как и остальным дотошным родителям, которые вынудили меня читать и учиться, чтобы помочь их детям. Я вернулась к учебникам, исследованиям и некоторым новым источникам, таким как публикации и неформальные заметки Терезы Бинсток по патогенам, вирусам и аутоиммунности. Пока я готовилась работать со Сьюзи, я начала изучать всю возможную информацию по этой сложной проблеме.

Сьюзи была (и остается) симпатичной хрупкой девушкой, которой я на вид дала бы скорее 14 лет, чем 16 – ее возраст на тот момент. Ее мать, учитель/писатель, которая стала домохозяйкой после рождения Сьюзи, описала мне целую команду репетиторов, которые приходили ежедневно, включая выходные, а также прочие мероприятия и огромные усилия, которые она прикладывала годами, чтобы ее дочь училась в общеобразовательной школе. Хотя Сьюзи и соответствовала уровню своего класса, она, как первоклашка, прилагала огромные усилия, чтобы не расстроить родителей и учителей. При этом в социальном плане она была замкнутой, не имела друзей, молодые люди никогда не интересовались ей, хотя она была миловидна и обладала привлекательной, хотя и юношеской фигурой. Она казалась немного мечтательной и рассеянной, хотя довольно неплохо отвечала на вопросы по существу. У нее были странные пристрастия в еде – она годами отказывалась есть вместе со всеми и ограничивала себя всего лишь несколькими продуктами. Что касается ее истории болезни, ее мать сказала, что Сьюзи развивалась нормально примерно до четырех лет, когда она заболела краснухой, обычно легко и быстро протекающей детской болезнью, которая вызывается вирусом герпеса 6 типа и характеризуется сыпью. После болезни она стала вести себя по-другому и, хотя она не перестала говорить, казалось, что она учится не так хорошо, как другие дети в ее классе. Мать показала мне фотографии Сьюзи за все годы — на руках и ногам Сьюзи можно было заметить периодически появлявшуюся небольшую сыпь, похожую на короткие обострения краснухи. (Оказалось, что у нее была хроническая бессимптомная инфекция вируса герпеса 6 типа, которая периодически обострялась).

Я назначила стандартные анализы, которые все были в пределах нормы, ввела Сьюзи комплекс пищевых добавок (на что она согласилась) и предложила изменить рацион (на что ее было трудно уговорить). Гораздо легче посадить трех- или четырехлетних детей на БГБК-диету, чем подростка! Я консультировалась с доктором Ари Вождани, директором лаборатории Immunosciences в Беверли Хиллз, — он оказался еще одним человеком, который очень помог мне разобраться с вирусами и иммунной системой. Он порекомендовал мне сделать расширенную вирусную панель и анализ на цитотоксичность НК-клеток помимо общего анализа крови, биохимии и гормонов щитовидной железы, которые я уже назначила. Ее анализы показали положительный IgG (прошлое или хроническое инфицирование) и IgM (недавнее инфицирование или обострение) к вирусу герпеса 6 типа (краснуха). У нее также оказались слишком низкие показатели цитотоксичности НК-клеток, что означало, что в иммунной системе имелось нарушение первой линии защиты, которая борется с вирусами. Я была удивлена, но мать Сьюзи – нет. Она одна из многих умных матерей, которые встречались мне с тех пор, как я начала работать с «особыми» детьми.

Я уже ввела Сьюзи небольшую дозу SSRI , надеясь немного снять ее страх перед общением, и казалось, она стала чуть более коммуникабельной. Она уже несколько месяцев получала SSRI и комплекс питательных веществ, когда я ввела ей Ацикловир (антивирусный препарат, эффективный при многих вирусов герпеса и Варицелла-Зостер, и в разной степени эффективный при вирусе Эпштейна-Барра и вирусе герпеса 6 типа). Затем мы перешли на модификацию Ацикловира, Вальтрекс, который имеет другую степень усвоения и, по имеющимся данным, в 6 раз эффективнее. Я назначала Вальтрекс многим взрослым пациентам с герпесными инфекциями в течение многих лет и знала, что он очень безопасен.

Примерно через неделю или десять дней после начала Вальтрекса в Сьюзи произошли поразительные изменения. Ее глаза прояснились, она стала менее отрешенной, более сообразительной и в целом более эмоциональной, завела друзей. Казалось, как будто ее одноклассники никогда не видели ее раньше. В течение трех месяцев она стала нормальным непослушным подростком, что совершенно поразило ее родителей и удивило репетиторов, которые занимались с ней годами. Вскоре она стала протестовать против такого количества занятий и, несмотря на то, что большую часть из них отменили, она как обычно продолжала получать оценки В и С, что приятно удивило ее родителей. Впервые в жизни она начала привлекать внимание мальчиков и, как и все нормальные школьники, участвовать в обычных школьных интригах со своими радостями и несчастьями. У нее все еще оставались некоторые трудности в обучении, но положительные изменения во всех сферах ее жизни были очевидны для всех, кто знал ее до лечения. Ее родители были в восторге и благодарны за ее «возвращение». Интуитивные догадки матери, что у Сьюзи были проблемы медицинского характера, наконец были оправданы в глазах отца Сьюзи, врача, который видел причину поведения Сьюзи исключительно в ее низкой обучаемости, которую нужно было скорректировать при помощи дополнительных занятий (как они поступили и с ее старшей сестрой).

Сьюзи принимала SSRI всего несколько месяцев, а Вальтрекс (1500 мг в сутки) 18 месяцев; ее титры к вирусам снижались, тогда как количество НК-клеток увеличилось. Периодически в ходе лечения она принимала Transfer Factor и натуральное антивирусное средство Монолаурин (Лаурицидин). Даже после стабилизации показателей мать Сьюзи не хотела прекращать прием Вальтрекса несмотря на то, что Сьюзи ненавидела стандартные анализы крови, которые она сдавала для проверки состояния печени в ходе лечения (печень была в порядке). Наконец, к моменту окончания школы мы постепенно отменили все лекарства. Она также устала он необходимости принимать такое количество пищевых добавок, когда стала чувствовать лучше. Когда осенью прошлого года она уезжала сдавать экзамен в один частный художественный колледж, у нее все еще оставались несколько эксцентрические привычки в еде, но мы все примирились с этим. Несколько месяцев назад родители звонили мне и сообщили, что Сьюзи получала оценки «В» в колледже и постоянно встречалась с парнем, который нравился ее родителям. Я считаю, что диагноз «аутизм» больше неприменим к ней, хотя некоторые странности в еде все еще сохраняются. Что интересно, я считаю, что такие странные привычки в еде не очень отличаются от привычек многих девушек ее возраста, которых больше заботит стройность, чем правильное питание.

Папиллярные узоры пальцев рук — маркер спортивных способностей: дерматоглифические признаки формируются на 3-5 месяце беременности, не изменяются в течение жизни.

источник

Согласно приказу Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации от 25 июля 20011 года № 808н «О прядке получения квалификационных категорий медицинскими и фармацевтическими работниками» утверждено Положение о порядке получения квалификационных категорий медицинскими и фармацевтическими работниками, определяющее порядок получения квалификационных категорий специалистами.

Обращаем внимание на некоторые пункты данного Положения:

— квалификационная категория действительна в течении пяти лет, со дня издания приказа о ее присвоении.

— квалификационные категории присваиваются специалистам, имеющим уровень теоретических и практических навыков, соответствующих квалификационным характеристикам специалистов, и стаж работы по специальности:

вторая — не менее 3 лет для специалистов с высшим и средним профессиональным образованием;

первая — не менее 7 лет для специалистов в высшим и не менее 5 лет для специалистов со средним профессиональным образованием;

высшая — не менее 10 лет для специалистов в высшим и не менее 7 лет для специалистов со средним профессиональным образованием.

В случае утери квалификационной категории (истек срок) присвоение начинается со второй квалификационной категории.

Порядок получения квалификационных категорий для женщин, вышедших из отпуска по беременности и родам, и лицами, находящимися в отпуске по уходу за ребенком в возрасте до трех лет следующий: документация направляется в аттестационную комиссию также не позднее четырех месяцев до окончания срока действия квалификационной категории, с предоставлением отчета о профессиональной деятельности за фактически отработанные — три года — для специалистов с высшим профессиональным образованием, и за последний год работы для работников со средним профессиональным образованием.

Кроме того, в настоящее время данная процедура проводится только с участием специалиста (не предусмотрено проведение заочной формы аттестации).

Специалисты, изъявившие желание получить (подтвердить) квалификационную категорию, представляют в аттестационную комиссию квалификационную документацию за 4 месяца до окончания срока категории.

необходимых для предоставления государственной услуги

Для присвоения (подтверждения) квалификационной категории в аттестационную комиссию министерства предоставляются следующие документы:

а) заявление специалиста на имя председателя аттестационной комиссии министерства, в котором указывается квалификационная категория, на которую он претендует, наличие или отсутствие ранее присвоенной квалификационной категории, дату ее присвоения, личная подпись специалиста и дата по форме (см. приложение);

б) заполненный в печатном виде квалификационный лист, заверяемый отделом кадров медицинской организации, в которой работает специалист, по форме (см. приложение);

в) отчет о профессиональной деятельности специалиста, согласованный с руководителем организации и заверенный ее печатью, и включающий анализ профессиональной деятельности за последние три года работы — для специалистов с высшим профессиональным образованием и за последний год работы — для работников со средним профессиональным образованием с их личной подписью (отчет должен содержать выводы специалиста о своей работе, предложения по улучшению организации оказания и качества медицинской помощи населению; отчет должен содержать достоверные данные в описании работ, выполненных специалистом, рационализаторских предложений, патентов). В случае отказа руководителя медицинской организации в согласовании отчета о профессиональной деятельности специалиста руководитель выдает письменное разъяснение о причинах отказа, которое прилагается к аттестационной документации;

г) копии документов об образовании (диплом, удостоверение об интернатуре (ординатуре), свидетельство о повышении квалификации, диплом о профессиональной переподготовке, сертификат специалиста по заявленной специальности), трудовой книжки, заверенные в установленном порядке;

д) в случае смены фамилии, имени, отчества — копия документа, подтверждающего факт смены фамилии, имени, отчества;

е) копию удостоверения о присвоении квалификационной категории (при наличии) или копию правового акта о присвоении квалификационной категории.

Образцы квалификационных документов прилагаются (образец заявления, квалификационный лист, титульный лист отчета).

Все документы подшиваются в порядке указанном в перечне документов.

Обращаем Ваше внимание на правильность заполнения следующих пунктов:

— наименование учреждения не сокращается;

— в строке «специальность» указывается специальность, а не занимаемая должность;

— заполняются все виды профессионального образования (специализации, тематические усовершенствования, профессиональная переподготовка);

— обратите внимание, на отсутствие расхождений мест работы и учебы с записями в трудовой книжке;

— в стаж работы по специальности не включается стаж работы по другим специальностям;

— в строке служебный и домашний адрес указывается индекс, наименование города, поселка, улицы, номера дома и телефон;

— квалификационный лист заполняется в печатном виде.

Характеристика на специалиста должна быть полной, раскрывающая профессиональные качества специалиста, отражающая навыки и умения, профессиональный рост.

Общий объем отчета составляет не более 10-15 страниц. Отчет должен быть напечатан на принтере через 1,5 интервал, иметь поля. Таблицы, рисунки и графики выполняются на стандартных листах. Страницы отчета, включая иллюстрации и приложения, нумеруются по порядку.

График приема квалификационных документов в ОГБУЗ «МИАЦИО»:

Понедельник 8.30-17.00 (перерыв 12.30-13.00)

Вторник 8.30-17.00 (перерыв 12.30-13.00)

Среда обработка поступивших документов

Четверг 8.30-17.00 (перерыв 12.30-13.00)

Пятница 8.30-17.00 (перерыв 12.30-13.00)

Суббота, воскресенья — выходные дни.

Согласно приказу № 808 Административного регламента предоставления государственной услуги « Присвоение, подтверждение или снятие квалификационных категорий специалистов, работающих в системе здравоохранения Иркутской области» в рамках проведения квалификационных процедур предусмотрено тестирование медицинских работников.

-после регистрации квалификационных документов специалисту выдается уведомление о проведении тестирования с указанием сроков его прохождения ( 1 месяц со дня регистрации документов);

— тестирование можно пройти в день сдачи квалификационной документации;

— время проведения тестирования 1 час на 100 вопросов;

— тестирование признается пройденным при условии — не менее 70% правильных ответов;

— в случае результата тестирования 69% и менее правильных ответов предоставляется вторая попытка через 5 рабочих дней ( и третья попытка через 14 календарных дней);

— с тестами можно ознакомиться на сайте http :// miac — io . ru в разделе «Отдел ведения медицинских регистров» во вкладке « Тестирование»

Тестирование проводится в компьютерном классе ОГБУЗ «МИАЦИО», по адресу: г. Иркутск, ул. Каландаришвили, 12. т. (3952) 24-19-61

Понедельник 8.30-17.00 (перерыв 12.30-13.00)

Вторник 8.30-17.00 (перерыв 12.30-13.00)

Среда обработка документов ( тестирование не проводится)

Четверг 8.30-17.00 (перерыв 12.30-13.00)

Пятница 8.30-17.00 (перерыв 12.30-13.00)

В случае, если с 1 сентября 2012 года специалист прошел тестирование после цикла повышения квалификации или профессиональной переподготовки в государственных учреждениях высшего и среднего профессионального образования, необходимо предоставить результаты в ОГБУЗ «МИАЦИО». Результаты действительны в течении 1 года.

За протоколом тестирования, пройденного до 1 сентября 2012 года в образовательные учреждения не обращаться.

источник

Основной белок миелина (получение моноклональных антител, разработка иммуноферментного анализа и клинико-лабораторное применение) тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.04, кандидат медицинских наук Семенова, Анна Вячеславовна

Основной белок миелина ■ диагностике демиелинизирующнх процессов ЦВСИ

1.1. Структура и функции миелина

1.2. Основной белок миелина. Структура, функции, физико-химические свойства.

1.3. Биологическая роль ОБМ.

1.4. ОБМ в филогенезе и онтогенезе.

1.5. Клинико-диагностическое значение ОБМ

2.1. Характеристика изучаемого материала

2.2. Методы очистки антигенов

2.3. Получение антисывороток к ОБМ и их анализ.

2.4. Методы иммунохимического анализа.

2.5. Методы количественного определения белков.

2.6. Иммуноферментный анализ.

2.7. Иммунофлюоресцентный анализ

2.8. Общая клиническая характеристика обследованных детей.

РАЗРАБОТКА СПОСОБА ПОЛУЧЕНИЯ ОБМ И ИЗУЧЕНИЕ ЕГО ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКИХ СВОЙСТВ.

3.2. Изучение физико-химических свойств и химической характеристики ОБМ

ПОЛУЧЕНИЕ ГИБРИДНЫХ КЛЕТОК, ПРОДУЦИРУЮЩИХ МОНОКЛОНАЛЬНЫЕ АНТИТЕЛА К ОБМ.

4.1 Получение гибридом продуцирующих моноклональные анти-ОБМантитела.

4.2. Получение моноклональных аити-ОБМ-антител из асцитической жидкости.

ИММУНОФЕРМЕНТНЫЙ АНАЛИЗ ОБМ В БИОЛОГИЧЕСКИХ ЖИДКОСТЯХ ЧЕЛОВЕКА.

5 1. Разработка иммуноферментного анализа ОБМ в биологических жидкостях и экстрактах из тканей человека и животных

5.2. Разработка иммуноферментного анализа анти-ОБМ-АТ в биологических жидкостях человека и животных.

5.3. Результаты иммунохимического определения ОБМ и антител к нему в сыворотке крови детей с перинатальной патологией ЦНС.

Моноклональные антитела к нейроспецифическим белкам (НСБ). Получение, иммунохимический анализ, исследование гематоэнцефалического барьера 2005 год, доктор медицинских наук Гурина, Ольга Ивановна

Нейроспецифические белки в оценке проницаемости гематоэнцефалического барьера человека и животных 2004 год, доктор медицинских наук Рябухин, Игорь Александрович

Совершенствование иммунодиагностики кишечного иерсиниоза на основе моноклональных антител 2004 год, кандидат биологических наук Уткин, Денис Валерьевич

Поли- и моноклональные антитела в анализе гуморального иммунного ответа, структуры и функциональных свойств иммуноглобулинов животных 1998 год, доктор биологических наук Верховский, Олег Анатольевич

Теоретико-экспериментальные аспекты изучения белковых и углеводсодержащих антигенов возбудителей чумы и холеры с использованием поли- и моноклональных антител 2004 год, доктор медицинских наук Федорова, Валентина Анатольевна

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Основной белок миелина (получение моноклональных антител, разработка иммуноферментного анализа и клинико-лабораторное применение)»

Основной белок миелина — доминирующий структурный компонент мембраны мие-линобразующих клеток, справедливо рассматривается сегодня, в качестве одного из наиболее информативных маркеров патологических состояний, сопровождающихся нарушением целостности миелиновой оболочки [2, S, 9, 21, 103, 108, 146, 147, 249, 261]. Иммуно-химический анализ ОБМ широко применяется в клинике демиелинизирующих заболеваний с целью оценки остроты процесса и вероятности возникновения рецидивов [1, 5, 7, 9, 26, 103, 200, 231, 257]. Комплексная оценка уровня ОБМ и анти-ОБМ-антител в биологических жидкостях человека открывает возможность детального анализа процессов, сопровождающихся нарушением миелинизации [7, 21, 230, 272, 273, 274, 275]. Прогностическая значимость ОБМ и анти-ОБМ-антител в качестве маркеров, отражающих состояние белого вещества головного мозга, отмечается при травматическом повреждении головного мозга, воспалительных и опухолевых процессах в нервной ткани, преимущественно затрагивающих ее глиальный компонент [192, 198, 256, 292]. Динамический мониторинг ОБМ при ишемических и геморрагических повреждениях головного мозга позволяет не только характеризовать степень вовлечения в патологический процесс миелин-продуцирующих клеток, но и осуществлять контроль эффективности проводимой терапии [249].

В педиатрической практике помимо вышеперечисленных направлений, детекция ОБМ и анти-ОБМ-антител приобретает особую актуальность в клинике постгеморрагической гидроцефалии, позволяя решать вопрос о целесообразности проведения операции шунтирования [88, 108, 142, 143, 154, 155, 217]

Крайне важной проблемой, приобретающей с каждым днем все большее значение, является патология плода и новорожденного, вызванная хронической внутриутробной гипоксией и острой асфиксией. Задержка процессов миелинизации, отражающаяся на темпах моторного и психического развития таких детей становится острейшей проблемой, с которой практически ежедневно сталкиваются педиатры Оценка уровня ОБМ в данном аспекте является прогностически ценной с позиции решения принципиального вопроса об органическом или функциональном повреждении вещества ЦНС [22, 54, 108, 120, 143, 217].

Резюмируя вышесказанное, становится очевидной необходимость создания тест-систем детекции ОБМ и анти-ОБМ-антител в биологических жидкостях человека

Специфичность иммуноферментных тест-систем обуславливается, прежде всего, качеством препаратов антител к исследуемому антигену. Наиболее простыми с точки зрения получения и разработки метода являются поликлональные антитела, которые получают путем иммунизации животных высокоочищенными препаратами антигенов. Поликлональные антитела представляют собой комплекс различных иммуноглобулинов, специфичных по отношению к исследуемому антигену, однако способных взаимодействовать с его различными эпитопами. Такая особенность поликлональных антител обеспечивает высокую чувствительность метода, но не исключает возможности перекрестно реагировать со сходными иммунохимическими детерминантами других биологически активных соединений, что является их несомненным недостатком

Разработанная KohlerG. и MilsteinC. в 1975 году технология получения монокло-нальных антител, обладающих специфичностью по отношению только к одному эпитопу антигена, открыла широкие перспективы для разработки на их основе иммуноферментных тест-систем, лишенных недостатков, наблюдаемых при применении поликлональных антител [141].

Целью настоящей работы явились разработка иммуноферментного метода определения ОБМ и анти-ОБМ-АТ в биологических жидкостях человека на основе моноклональ-ных антител, обладающего высокой специфичностью и чувствительностью, а также проведение количественного анализа ОБМ и анти-ОБМ-АТ к нему в сыворотке крови пациентов с заболеваниями, сопровождающимися нарушением метаболизма миелина.

В связи с этим перед нами стояли следующие задачи: 1 Разработка способа получения препарата ОБМ высокой степени чистоты, достаточной для дальнейшего использования его при получении моноклональных антител

2. Разработка способа получения моноклональных анти-ОБМ-антител

3 Разработка иммуноферментной тест-системы количественного анализа ОБМ на основе моноклональных антител в биологических жидкостях человека и ее клинико-лабораторная апробация,

4 Разработка иммуноферментной тест-системы количественного анализа анти-ОБМ-АТ в биологических жидкостях человека и ее клинико-лабораторная апробация;

5 Количественный анализ ОБМ и анти-ОБМ-АТ в биологических жидкостях пациентов с заболеваниями, сопровождающимися нарушением метаболизма миелина

1 Разработан новый способ очистки препарата ОБМ из ткани спинного мозга крупного рогатого скота, позволяющий применять его для иммунизации с целью получения поликлональных и моноклональных анти-ОБМ-АТ

2 Разработана на основе моноклональных антител и стандартизована высокоспецифичная иммуноферментная тест-система анализа ОБМ в биологических жидкостях человека, с пределом чувствительности 0,5 нг/мл

3. Разработана и стандартизована высокочувствительная иммуноферментная тест — система анализа анти-ОБМ-АТ в биологических жидкостях человека, с пределом чувствительности 1,0 нг/мл.

4. Впервые в педиатрической практике применен количественный динамический анализ ОБМ и анти-ОБМ-АТ в сыворотке крови для оценки степени тяжести перинатального поражения ЦНС новорожденных детей различного гестационного возраста.

Практическая значимость: 1 Способ очистки ОБМ может быть применен с целью выделения препарата антигена, пригодного для получения моноклональных и поликлональных антител и разработки им-муноферментных тест-систем

2. Получены гибридомы — продуценты моноклональных анти-ОБМ-АТ, пригодных для разработки иммуноферментного анализа ОБМ в биологических жидкостях млекопитающих

3 Иммуноферментные тест-системы анализа ОБМ и антител к нему в биологических жидкостях могут быть рекомендованы для клинико-лабораторного применения с целью диагностики и контроля эффективности проводимой терапии заболеваний, сопровождающихся нарушением метаболизма миелина

4 Динамический мониторинг уровня ОБМ и анти-ОБМ-АТ может применяться в педиатрической практике в качестве достоверного критерия оценки степени тяжести перинатальных поражений ЦНС, а также параметра, прогнозирующего возможный исход таких поражений

Апробация работы проведена на совместном заседании кафедр биохимии и детских болезней № 2 РГМУ и лабораторий нейрохимии и иммунохимии ГНЦССП им В П Сербского

Основные положения работы были представлены в периодической печати, на межлабораторных конференциях ГНЦССП им В П Сербского (2000-2002 гг ), III Международной конференции «Биологические основы индивидуальной чувствительности к психотропным препаратам» (Суздаль 2001 г ), II Российской Конференции «Иммунопатология» (Москва, 2002 г ), V Европейском Симпозиуме «Glial Cell Function in Health and Disease» — (Rome, Italy 2002)

Объем и структура диссертации: Диссертация изложена на 133 машинописных страницах, состоит из введения, 6 глав, выводов, практических рекомендаций, библиографического указателя В основных главах работы приведены данные обзора литературы, характеристика объекта, методов исследования, а также используемого материала, результаты собственных исследований и их обсуждение

источник

Марья,у вас врач инфекционист или иммунолог?
Можете порекомендовать

Марья,у вас врач инфекционист или иммунолог?Можете порекомендовать

Возникают очаги ишемии, которые со временем могут превратиться в очаги демиелинизации. Это не РС, если нет аутоиммунного компонента (антител к миелину), очаги остаются маленькими (меньше 0,5 см),
Вот такая ситуация у меня по МРТ.Рс нет, а признаки астроглиоза.

А с чего вы взяли, что это вирус?? Если сильная болт в горле пора начинать антибиотики, и не поможет ничего про бактериальной инфекции.

Возникают очаги ишемии, которые со временем могут превратиться в очаги демиелинизации. Это не РС, если нет аутоиммунного компонента (антител к миелину), очаги остаются маленькими (меньше 0,5 см),Вот такая ситуация у меня по МРТ.Рс нет, а признаки астроглиоза.

Тая, не могу подсказать так как я в Украине

Да, Тая, я из Москвы. Врач иммунолог-аллерголог.Напишите Вашу почту.

Получил анализы после опытов ИЛ 8- ИФНы.
Сначала немного теории.
Общаясь с ОНКОЛОГОМ из КУРСКА,запомнил некоторые его мысли.
Тема его кандидатской-Г КСФ.Гранулоцитный колониестимулирующий фактор.
В своих опытах он установил,что нейтрофилов точно есть 4 подвида,а может быть и 5. Г КСФ три вида. Один постоянно секретируется костным мозгом,второй-иммунными клетками при воспалении,третий-самими нейтрофилами. Из основ иммунологии мы знаем,что каждое иммунное действие имеет два воздействия. Каждый вид Г КСФ имеет одно общее основное воздействие-рост нейтрофилов. А вот второе второстепенное воздействие у каждого вида свое.
У меня по анализам нейтропения. Абсолютная и относительная. То бишь интерфероновая гипертермия убила нейтрофилы. Основной сигнал на выживание клетки при гипертермии идет еще при дифференцировке клеток в костном мозге. И это ГМ КСФ. Об этом писал FAKIR неделю назад.Я ставил еще ИЛ 2,поэтому лейкоциты в норме. Скорее всего в РОНКОЛЕЙКИНе,которым я воспользовался есть фракция,которая стимулирует выживаемость Т клеток при гипертермии. А в ИММУНОМАКСе такой фракции нет. Все это надо учитывать при терапии. То бишь при создании полного иммунного ответа ИММУНОМАКС без минимальных доз ГМ КСФ бесполезен.

Да, Тая, я из Москвы. Врач иммунолог-аллерголог.Напишите Вашу почту.

Таблетки, уколы иммуномодулирующие (галавит, панавир), Бады, травы для иммунитета, витамины, интерферон. А сначала лет 10 почти без перерыва пила капли (забыла название) — 15 трав и прополис, заряженные энергетически. Поняла от чего сыпятся только много лет спустя, когда про ВЭБ узнала.

От этого как то не легче. если честноА где сдать этот анализ в мск не подскажите?

несколько лет назад анализ на антитела к миелину можно было сдать в институте вакцин и сывороток

С волосами вот уже несколько лет беда
Были очень густые
Скоро по-моему вообще ничего не останется
Дико сыпятся
Ну естественно никакие втирания и уход не помогают
Думаю причина как раз в скрытой инфекции

С волосами вот уже несколько лет бедаБыли очень густыеСкоро по-моему вообще ничего не останетсяДико сыпятсяНу естественно никакие втирания и уход не помогаютДумаю причина как раз в скрытой инфекции

Буду благодарна контакта. Почта выше

Смоленск, онколог из Курска может помочь с лечением ВЭБ?
Напишите, пжл, его ФИО, я недалеко от Курска живу

ЛЬВУ.
Телефон и данные дать не могу. Могу только отвести лично за ручку,но с условием. Надо набрать группу типичных ВЭБников и сдать анализы на ГМ КСФ.

У меня после 8таблеток амексина болит печень начиталась о его токсичности..поэтому даже не знаю что выбратьКак думаете-лучше терпеть и как вы рекомендовали повторить еще 2 курса амекс?

Из Луги никого нет? Мне рассказывали про девушку из Луги, у которой от стресса половина тела немеет. Я сразу про 6-ку подумал.

Смоленск, я вроде ВЭБник, но мне кажется что меня еще что-то долбит. Про анализы, киньте ссылку, пжл. В инвитро есть такой?

Я не могу давать такие рекомендации.Скажу только, что я одновременно принимал Урдоксу — желчегонное и гепапротекторное. Может быть поэтому переносил амиксин нормально.

Интересно, а ГМ-КСФ может как-то соотноситься с кальпротектином? Как думаете, Смоленск?

И у меня как раз шестой есть

Это именно для него характерно?для шестого?У меня правая половина немеет и слабая

Видела в инвитро есть анализ на чувствительность к амексину Надо сдать

кто писал про антитела к миелину. по миелину я так поинмаю есть 2 вида тестов: антитела к общему белку миелина (ОБМ) и антитела к миелин-ассоциированному гликопротину (MAG).
сдать в обычных лабах — искала — нет. возможно этот анализ есть в нии и неврологических клиниках каких-то или спец центрах. не смотрела, не знаю. но эти показатели есть в ЭЛИ-висцеро-тесте. подробно тест называется Эли -Висцеро-тест-24. там есть антитела к ОБМ ,что надо. плюс еще куча всяких аутоиммунных показателей по разным органам. Есть еще и антитела к белку S-100, который тоже используется в диагностике РС и проблемах с миелином. ссылку если выложу потрут. Такой тест делают в москве в некоорых лабах, точно знаю ,что делают в лаборатории KDL ( я там делала эли-тест но не висцеро а другой, намного уже ,миелина в нем не было). KDL к счастью сть и в Мрскве и в других городах . В Питере нет — нужно искать другие лабы. Возмоно в лаборатории МЧС есть такие анализы. надо посмотреть. сама намерена сделать тако, .к. понимаю ,что МРт инчего не показывает ,а воспаление в мозгу точно есть.
насчет РС. есть в дополнение еще вот такой анализ
в хеликсе. [13-058]Диагностика рассеянного склероза (изоэлектрофокусирование олигоклонального IgG в ликворе и сыворотке)
плюс еще можно сдать и сам миелин , но это сложно ,т.к. нужно забирать цереброспинальную жидкость. Но без этого РС, я так понимаю ,не дигностируют.

и еще. кто интересуется аутоиммунками. сегодня вот такое случайно видела мнение:
Давайте размышлять логически. Антитела к миелину могут быть повышенными первично — при аутоиммунном заболевании нервной системы и вторично — при разрушении/распаде структур нервной системы. Если есть антитела к миелину и слегка повышенный белок в ликворе — значит какое-то медленное разрушение в ЦНС все-таки идет. Воспалительная картина крови — значит, скорее всего, процесс инфекционной или аутоиммунной природы. Недавно видел очень похожую картину у пациентки с инфекцией вирусом гепатита G. Этот вирус на печень почти не действует, но может работать как раздражитель аутоиммунных реакций.
Я бы посмотрел антитела антитела к хламидиям и микоплазмам, Т-лимфотропному вирусу, менингококку (та еще гадость, причем носительства в носоглотке достаточно для такой картины), бруцелле, листерии, антистрептолизин, антинуклеарный фактор, рентген грудной клетки на туберкулез и саркоидоз, ПЦР на вирусы гепатита.

про белок S100. S100 — Белок S100 — регулятор множества клеточных функций (регуляция апоптоза, трофический фактор серотонинергических нейронов и др.); повышение АТ к нему часто сопровождается изменениями эмоционального статуса.
интересно?

Скажите кто в курсе для ХАВЕБ инфекции характерны ли проблемы с кишечиком(сильное урчание,не полное переваривание пищи,мягкий стул)??и как бы интоксикация организма??

. Тая, не тратьте деньги на определение чувствительности к амиксину. пустое дело. уже давно известно ,что чуствительность в теле и в пробирке разная. даже в нии иммунологии уже дотумкали и писали мне еще в прошлом году на мой запрос ,что чувствительность к ифн ,их индукторам — пустой анализ.

кто писал про антитела к миелину. по миелину я так поинмаю есть 2 вида тестов: антитела к общему белку миелина (ОБМ) и антитела к миелин-ассоциированному гликопротину (MAG). сдать в обычных лабах — искала — нет. возможно этот анализ есть в нии и неврологических клиниках каких-то или спец центрах. не смотрела, не знаю. но эти показатели есть в ЭЛИ-висцеро-тесте. подробно тест называется Эли -Висцеро-тест-24. там есть антитела к ОБМ ,что надо. плюс еще куча всяких аутоиммунных показателей по разным органам. Есть еще и антитела к белку S-100, который тоже используется в диагностике РС и проблемах с миелином. ссылку если выложу потрут. Такой тест делают в москве в некоорых лабах, точно знаю ,что делают в лаборатории KDL ( я там делала эли-тест но не висцеро а другой, намного уже ,миелина в нем не было). KDL к счастью сть и в Мрскве и в других городах . В Питере нет — нужно искать другие лабы. Возмоно в лаборатории МЧС есть такие анализы. надо посмотреть. сама намерена сделать тако, .к. понимаю ,что МРт инчего не показывает ,а воспаление в мозгу точно есть. насчет РС. есть в дополнение еще вот такой анализ в хеликсе. [13-058]Диагностика рассеянного склероза (изоэлектрофокусирование олигоклонального IgG в ликворе и сыворотке) плюс еще можно сдать и сам миелин , но это сложно ,т.к. нужно забирать цереброспинальную жидкость. Но без этого РС, я так понимаю ,не дигностируют.[/по идее конечно если есьь такие подозрения-то нужно делать пункцию,но это очень тяжелая процедура и сомневаюсь в её надобности,ну если по мрт все-таки все чисто

Интересно, а ГМ-КСФ может как-то соотноситься с кальпротектином? Как думаете, Смоленск?

ЛЬВу.
Я тут вспомнил. Онколог из Курска-ученый,а не врач. Его интересуют интересные случии. Если у Вас LgGEBNA отрицательный,ФНО сниженый и есть ВЭБ в крови—это его случай. Здесь возможна ситуация запуска злокачественной инфекции. Его это явно заинтересует. Я тут,мягко говоря,немного с ним поругался. Есть возможность восстановить отношения.

[quote=»Виолетта» [/по идее конечно если есьь такие подозрения-то нужно делать пункцию,но это очень тяжелая процедура и сомневаюсь в её надобности,ну если по мрт все-таки все чисто

ЛЬВу.Я тут вспомнил. Онколог из Курска-ученый,а не врач. Его интересуют интересные случии. Если у Вас LgGEBNA отрицательный,ФНО сниженый и есть ВЭБ в крови—это его случай. Здесь возможна ситуация запуска злокачественной инфекции. Его это явно заинтересует. Я тут,мягко говоря,немного с ним поругался. Есть возможность восстановить отношения.

Виолетта, я говорила про МРТ в связи именно с рс
Я тоже думаю что идет поражение ЦНС
Просто пока организм как то компенсирует это но надолго ли его хватит
И так прогрессировала идет
И самое печальное диагноза нет
И никто не хочет и не может разобраться ни платные ни бесплатные врачи

Хотела еще спросить мнение про ритуксимаб. Интерсует в первую очредь мнение Факира и Смоленска. Идея уничтожить зараженные в-лимфоциты в принципе мне импонирует. Но. что потом. Новые лимфоциты образуются (если еще образуются ,ведь у многих проблемы с костным мозгом ,у меня , например) и снова будут заражены вирусом? читала исследовнаия по ритуксимабу оч поверхностно. Да ,он убирает сху вполне успешно ( даже если не кошмарить себя его побочками вполне серьезными), но при этом исследователи никак не связывают сху с вирусами ,рассматривают сху как болезнь неясной этиологии ,как тот же НЯК, например. . Ну и следовательно при этом исследователи громко заявляют ,что ритуксимаб якобы борется с причиной сху — и этот вывод они делают практически голословно — лишь потому что достигается длительная и довольно сойкая ремиссия. это глупо на мой взгляд . мы то наем ,что причина сху вирусы и инфекции. вирус все равно вернется после терапии ритуксимабом. Ритуксимаб — это лишь способ уничтожить заражнные клетки ,а вот в тот момент когда будут нарождаться новые клетки — как не допустить их повтороного заражения? какую противовирусную схему применять? с ксф тоже спорная очеь тема. стоит ли его ставить и как ставить. И не понятно, что будет с организмом на практике, если устроить ему такие качели — ритуксимаб (цитостатик) — КСФ (гемпоэтик).

Виолетта это я написала
У меня онемение сейчас и объективная слабость правой стороны тела( вплоть до того что роняю все правой рукой)
Но неврологи говорят у тебя всд
Ну как тут быть?
Рс отрицают ТК МРТ чисто
Ну а дальше никто не разбирается
Я так понимаю надо дождаться что не дай Бог уже инвалидом станешь тогда кто то, что то увидит

источник

зарегистрируйте свою электронную почту на сайте и получайте дополнительные информационные материалы по аутоиммунной диагностике

где сдать анализ крови на тест анализы спб СПб инвитро Петербург Питер на целиакию аутоиммунные заболевания аутоантитела аутоиммунная диагностика Лапин autoimmun антиядерные лабораторная антинуклеарный фактор антинуклеарные антитела HEp-2 тип волчанка свечения амилоидоз склеродермия иммуноблот ревматоидный цитруллиновый расшифровка экстрагируемые скрининг заболевания смешанное системная СКВ артрит дсДНК CCP ССР АЦЦП саркоидоз антинейтрофильные криоглобулины гранулематозные АНФ АНЦА ANCA ENA иммунофиксация васкулиты Крона целиакия аутоиммунный печени язвенный колит глиадину трансглутаминазе стероидпродуцируюшим Вегенера яичника эндокринопатии пузырные пузырчатка пемфигоид рассеянный склероз миастения миелина белок олигоклональный изоэлектрофокусирования IgG IgA IgM легкие цепи полиневрит ганглиозидам полимиозит парапротеин миелома неоптерин островковые GAD антимитохондриальные гладкие скелетные мышцы ASCA колит антигену фосфолипидный синдром кардиолипину фосфолипидам гликопротеину нуклеосомам SSA SSB RNP Sm CENT Scl Jo-1 АМА антикератиновые антиперинуклеарный MCV LKM-1 рецептору иммунофлюоресценция ИФА иммунологическая лаборатория университет санкт-петербург павлова Чардж-Стросса полиангиит микрокристаллические первичный билиарный цирроз трансглутаминаза трансглютаминаза критерии ревматоидного артрита 2010 года СПб Питер Петербург нейрогенетика

антитела к gad, pm scl75, Анализ крови на витамин b1 b9 b12, анализ кала на кальпротектин, аспергиллез, Метилмалоновая кислота, Кастла обнаружены антитела, Генетический анализ целиакии типи, Плакоидная, кальпротектин, Иммуноглобулины А Е G, аутоиммунные энцефалиты, ТЗ свободный, паратиреоидный гормон, положительно к МПО LgG, односпиральная ДНК, хL клетка, Ku антиген, Анализ кала на фекальный кал прите, Антитела к экстрагируемому нуклеа, иммунология.

Аутоиммунные неврологические заболевания

Неврологические заболевания (рассеянный склероз и паранеопластические энцефалиты, синдром Гийена Барре, полиневриты, миастения, полимиозит)

Рассеянный склероз (РС) представляет собой наиболее частое аутоиммунное заболевание ЦНС. В основе его патогенеза лежит выраженная активация забарьерной иммунной системы, которая приводит к появлению фокусов инфильтрации в белом веществе головного (реже спинного) мозга. Системная воспалительная реакция при этом заболевании отсутствует. Иммунологическая диагностика РС состоит в исследовании местного воспалительного ответа с помощью анализа цереброспинальной жидкости (ЦСЖ). В ЦСЖ при РС отмечается ряд феноменов, таких как увеличение местной продукции иммуноглобулинов, неспецифическое увеличение синтеза антител к вирусным и бактериальным антигенам. Наиболее показательным является оценка клональности иммуноглобулинов ЦСЖ. При РС в ЦСЖ выявляется олигоклональный IgG, что указывает на хроническую антигенную стимуляцию и специфическое воспаление. На сегодняшний день выявление олигоклонального IgG с помощью изоэлектрофокусирования является «золотым стандартом» иммунологической диагностики рассеянного склероза и этот лабораторный тест входит в критерии диагностики этого заболевания. Антигенная направленность олигоклональных иммуноглобулинов является неизученной.

На забарьерную иммуноактивацию также указывают увеличение концентрации легких цепей иммуноглобулинов в ликворе. На текущую демиелинизацию в ликворе указывает также повышение концентрации основного белка миелина.

Паранеопластические энцефалиты — группа редких синдромов, при которых онкологические процессы (рак яичника, легкого) приводят к иммуноопосредованному энцефалиту, не связному с объемным процессом и протекающему как мозжечковая атаксия, энцефалит, радикулоневропатия. Рядом авторов выделяется термин «паранеопластический мозжечковый синдром». При этих заболеваниях отмечаются антитела к нейронам.

Синдром Гийена-Барре (ГБ) относится к группе полирадикулоневропатий, при которых иммунный ответ направлен на антигены миелиновой оболочки (ганглиозиды), за счет которой осуществляется проведение по быстрым (миелиновым) нервным волокнам. Разрушение миелиновой оболочки приводит к выраженным двигательным нарушениям. В сенсибилизации к антигенам ганглиозидов виновата перекрестная иммунная реакция с липополисахридами бактерий ЖКТ, в частности рода Campylobacter. Олигоклональный IgG также обычно выявляется при синдроме ГБ, причем т.к. нарушается проницаемость гематоэнцефалического барьера, то олигоклональный IgG отмечается и в сыворотке и ликворе.

Аутоиммунные заболевания являются немаловажной причиной развития полиневритов. Среди них можно выделить системные ревматические заболевания, васкулиты, антифосфолипидный синдром, аутоиммунные эндокринопатии, аутоиммунный гастрит, парапротеинемии (миелому). Серологическая диагностика представляет один из методов постановки диагноза. Мы предлагаемкомбинированное тестирование полиневритов, включающее скрининг парапротеинемий с помощью иммунофиксации, определение антинуклеарного фактора (системные заболевания соединительной ткани), антинейтрофильные антитела (АНЦА), и антитела к ганглиозидам. Для диагностики этиологической причины В12 дефицита рекомендуется выявление аутоантител к обкладочным клеткам желудка и фактору Кастла, который опосредует всасывания витамина В12 в кишечнике.

Нарушение нервно-мышечной передачи при миастении и миастеноподобных синдромах обусловлено аутоантителами, которые связываются с рецепторами нейромедиаторов, в частности, с рецептором ацетилхолина. При миастении и тимоме перекрестная реакция с миоэпителиальными клетками тимуса приводит к появлению антител к скелетным мышцам.

Воспалительные миопатии (полимиозиты) представляют собой группу заболеваний, родственных системным заболеваниям соединительной ткани. АНФ отмечается у 60% пациентов, и выявление специфических антинуклеарных антител играет большое значение в диагностике и дифференциальной диагностике этих заболеваний.

Воспалительные боли в пояснице могут быть обусловлены спондилоартропатиями и реактивным артритом. Для диагностики группы серонегативных спондилоартропатий (анкилозирующий спондилит, реактивного и псориатического артрита, артритов на фоне воспалительных заболеваний кишечника) рекомендуется типирование HLAB27 антигена.

Тест 01.02.15.155 Олигоклональный IgGв ЦСЖ и крови методом изоэлектрофокусирования

Представляет собой «золотой стандарт» иммунологической диагностики РС. Обнаружение олигоклонального белка основано на выявлении множества характерных полос в геле. Для РС типичен олигоклональный ответ в ЦСЖ (>10 полос) и поликлональный в крови.

Тест 01.02.15.400 Диагностика паранепластических энцефалитов (Yo-1, Hu, Ri, CV2, Ma2)

Аутоантитело

Неврологическая симптоматика

источник

УДК: 616.832-004.2-097:616.153.96
Год издания: 2000

СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ УРОВНЯ АНТИТЕЛ К ОСНОВНОМУ БЕЛКУ МИЕЛИНА У БОЛЬНЫХ РАССЕЯННЫМ СКЛЕРОЗОМ

Филиппович Н.Ф., Кузьменок О.И., Рукша Е.И., Филиппович А.Н.
Рубрики: 76.29.51
Белорусская медицинская академия последипломного образования
Тема НИР: «Изучение процессов де- и ремиелинизации, роли патогенетически значимых аутоантител, неспецифического воспаления и поиски способов коррекции в клинике».
Сроки выполнения НИР: январь 1998 г. — декабрь 2000 г.
Научный руководитель: д-р мед. наук, проф. Н.Ф. Филиппович.

Разработана методика определения уровня антител к основному белку миелина методом твердофазного иммуноферментного анализа. В качестве антигена использовался Myelin Basic Protein (MBP) M-1891 lot 8711781 «Sigma».

Анализы производились с применением 96-луночного планшета Linbro (lot 0140213). Вначале вносился МВР в концентрации 10 мкг/мл на лунку в буфере для сенсибилизации (0,2 моль Nа-карбонатно-бикарбонатный буфер, рН 9,6) и оставлялся на ночь при +4 єС.

После трехкратной отмывки в 0,3 моль NаСL + 0,1 моль РВS + 0,02 моль Tween-20 вносился блокирующий раствор 1% BSA + 0,3 моль NaCL по 100 мкл на лунку на 30 мин при комнатной температуре, затем добавлялись сыворотки больных рассеянным склерозом (РС) в разведении 1:4 по 100 мкл/лунку в буфере 0,3 моль NaCL + 0,1 моль PBS. Инкубация 1 час при встряхивании. Далее производилась трехкратная отмывка буфером 0,3 моль NaCL + 0,1 моль PBS + 0,02 моль Tween-20 и трехкратная отмывка Н₂О (бидистиллят).

Разводили конъюгат в 1% BSA + 0,1 моль PBS до конечной концентрации 1:600. Вносили по 100 мкл/лунку и инкубировали 1 час при комнатной температуре.

Когда появлялась цветная реакция, вносили по 100 мкл/лунку стоп-реагента (5% серную кислоту или 1 N ее раствор). Учет результатов производился на спектрофотометре при длине волны 492 нм.

При каждой серии исследований с применением 96-луночного планшета Linbro (lot 0140213) определялась оптическая плотность приготовленного раствора, сывороток доноров и больных рассеянным склерозом. При использовании различных разведений (1:2; 1:4; 1:8) сывороток больных и доноров установлено, что наиболее видоспецифичным является связывание антигена и антитела при разведении 1:4. Сыворотки больных и доноров исследовались в трехкратной последовательности, вычислялись средние значения их оптической плотности при разведении 1:4.

По разработанной нами методике обследовано 38 доноров и 62 больных РС. Выявлена тесная корреляция между уровнем распада миелина в сыворотке крови больных и наличием антител к основному белку миелина. При этом низкий распад миелина (7,6 ± 1,2 ед.) по сравнению с группой доноров (3,9 ± 0,82 ед.) сопровождался наличием антител к основному белку миелина у 11 (42,3%) из 26 больных РС; умеренно выраженный распад (22,1 ± 0,86 ед.) — у 26 (89,6%) из 29 исследуемых; высокий — у всех исследуемых (7 человек).

Полученные данные свидетельствуют о высокой диагностической значимости метода и возможности оценки активности демиелинизирующего процесса по уровню антител к основному белку миелина, а также целесообразности назначения иммунокорригирующей терапии при данной патологии.

Область применения: невропатология, иммунология.
Рекомендации по использованию: способ внедрен в неврологических отделениях Минской областной клинической больницы, лаборатории молекулярной биологии НИИ гематологии и переливания крови и может использоваться в ЛПУ и НИИ при определении показаний к назначению дифференцированной иммуност
Предложения по сотрудничеству: консультативная помощь при внедрении.

источник

Детское здоровье (8)
Еда-лекарство (224)
- Элемент здоровья (3)
Есть проблема (155)
Женское здоровье (41)
Красота и здоровье (49)
Лекарственные растения (393)
- Траволечение (124)
Мужское здоровье (21)
Полезно знать (254)
- Диагностика (26)
- Инструкция по применению (25)
- Искусство жить здоровым (12)
- Люди-События-Факты (11)
- Секреты долголетия (11)
- Учимся на ошибках (31)
- Школа диабета (10)
Психология (75)
- Зарядка для мозгов (6)
Разговор с врачом (242)
- Диагноз на календаре (15)
- Заболевания желудка и кишечника (12)
- Заболевания крови и лимфатической системы (2)
- Заболевания нервной системы (4)
- Заболевания печени и поджелудочной железы (8)
- Заболевания почек (8)
- Заболевания сосудов (29)
- Заболевания суставов (25)
- Инфекционные заболевания (19)
Скорая помощь (16)
Традиционная медицина (337)
- Моя методика (84)
- С нами Бог (7)

. Но наука и медицина не стоят на месте и сегодня предлагают новые методы обследования, помогающие пролить свет на это заболевание.

Наш эксперт: Василий Викторович ЮРАСОВ к.м.н., заместитель директора по медицинским вопросам Независимой лаборатории ИНВИТРО, www.invitro.ru

Наш эксперт: Николай Николаевич ПРАВЕДНИКОВ врач ультразвуковой диагностики Независимой лаборатории ИНВИТРО, www.invitro.ru

Особую сложность для диагностики, как инструментальной, так и лабораторной, представляют поражения нервной системы, особенно если они имеют аутоиммунную природу.

При такого рода заболеваниях организм начинает вырабатывать антитела в отношении собственных белков, разрушая их. Поэтому, по меткому выражению великого русского патоморфолога Ипполита Васильевича Давыдовского, «инфекционный процесс можно сравнить с отечественной войной, а аутоиммунную патологию — с гражданской».

Именно к таким патологиям относится рассеянный склероз — хроническое аутоиммунное заболевание, при котором поражается миелиновая оболочка нервных волокон головного и спинного мозга.

У людей, далеких от медицины, слово «склероз» ассоциируется с нарушением памяти. Однако в случае с рассеянным склерозом речь идет не об этом неприятном и мучительном процессе, возникающем с возрастом, а о множественных, разбросанных по всей центральной нервной системе человека рубцах.

При патологоанатомическом исследовании врач-патологоанатом обнаруживает рассеянные по всей центральной нервной системе рубцы без определенной локализации — очаги замещения нормальной нервной ткани на соединительную. Отсюда, собственно, и название — рассеянный склероз. Впервые это заболевание описал в 1868 году Жан-Мартен Шарко.

. специфических лабораторных тестов, способных помочь в постановке однозначного диагноза «рассеянный склероз», до сих пор не существует? Обычно врач собирает полный анамнез и может назначить косвенные лабораторные исследования, которые могут лишь немного помочь в определении диагноза и прогноза заболевания.

Причину рассеянного склероза, как и любого другого аутоиммунного заболевания, выяснить достаточно сложно. Так же, как и при возникновении других форм аутоиммунных патологий, в качестве этиологического фактора врачи рассматривают перенесенные в прошлом вирусные или бактериальные инфекции. Но они могут предшествовать и другим аутоиммунным заболеваниям: ревматоидному артриту, системной красной волчанке, аутоиммунному повреждению кишечника, печени, поджелудочной железы, мышечной ткани.

Тем не менее в настоящее время основной этиологической причиной рассеянного склероза рассматривается предшествующая заболеванию вирусная инвазия, а именно вирусы герпеса, краснухи, Эпштейна — Барр.

В случае с рассеянным склерозом поражение начинается с повреждения белков миелиновой оболочки. Считают, что белки чужеродных организмов — в данном случае вирусов — у некоторых людей похожи на свои собственные. То есть в их структуре присутствуют так называемые полиморфизмы. Участки миелина совпадают с белками вирусов, и иммунная система начинает производить антитела, которые вступают в атаку против своих собственных белков.

На сегодняшний день в качестве инфекции, предшествующей развитию рассеянного склероза, рассматриваются вирусы герпеса 6, 7, 8 типов. Логично, что во время обследования пациентам с подозрением на рассеянный склероз проводится лабораторное исследование, направленное на поиск антител к вирусам 6, 7, 8 типов.

Кроме того, в качестве этиологического фактора рассматривают вирус Эпштейна — Барр, к которому также можно определять антитела.

Научно подтверждено, что в распознавании чужеродного антигена участвует так называемая HLA-система, расположенная на поверхности клеток иммунной системы. При рассеянном склерозе зачастую HLA-система 2 типа имеет свои особенности — в определенных участках, кодирующих гены HLA-системы, присутствуют определенные сочетания разнообразия генов, а именно DQA0102, DQB1 0602, DRB 1501. Поэтому в установлении диагноза «рассеянный склероз» может помочь HLA-типирование.

Известно, что синтез миелина не обходится без участия витамина В₁₂ и фолиевой кислоты. Кроме того, при дефиците этих витаминов растет уровень гомоцистеина, который сам по себе достаточно токсичен для организма. Существуют также гены, которые кодируют ферменты фоллатного цикла. При некоторых особенностях их строения возможны нарушения образования миелиновой оболочки. У пациентов с особенностями генов фоллатного цикла миелиновые оболочки могут быть менее плотными. Поэтому анализ генов фоллатного цикла также относится к вспомогательным исследованиям, помогающим установить диагноз «рассеянный склероз».

Метод магнитно-резонансной томографии часто используется при диагностике рассеянного склероза. Исследование позволяет выявить очаги склерозирования нервной ткани. В своей работе врачи в первую очередь используют так называемые диагностические критерии Макдональда 2010 года относительно изменений, которые мы наблюдаем при проведении МРТ. По специальной шкале врач оценивает изменения и определяет тяжесть заболевания.

Кроме того, отмечено, что у больных рассеянным склерозом выявляется низкий уровень мочевой кислоты в крови. Поэтому мочевая кислота может быть косвенным признаком, который может помочь врачу в диагностическом процессе.

Анализ спинномозговой жидкости на предмет наличия в ней антител к миелину также может помочь врачу в установлении диагноза, поскольку доказано, что синтез иммуноглобулинов, независимо от иммунной системы, может происходить и за гемато-энцефалическим барьером.

В практике врача-невролога существует еще одно заболевание, носящее название склероз — боковой амиотрофический склероз (БАС).

Это заболевание также носит название болезнь Шарко, болезнь Герига и др. Если говорить языком врачей, то это идиопатическое нейродегенеративное прогрессирующее заболевание неизвестной этиологии, обусловленное избирательным поражением периферических двигательных нейронов передних рогов спинного мозга и двигательных ядер ствола мозга, а также корковых (центральных) мотонейронов и боковых столбов спинного мозга.

Начинается БАС в 40-60 лет, средний возраст начала заболевания составляет 56 лет. Это заболевание взрослых людей, и, в отличие от рассеянного склероза, оно никогда не наблюдается у детей моложе 16 лет. Чаще БАС болеют мужчины.

Заболевание носит спорадический характер. Частота встречаемости — 1,5-5 случаев на 100 000 населения. В 10% случаев заболевание носит семейный характер.

Главным фактором риска возникновения и развития заболевания является возраст. Чем старше человек, тем выше риск развития БАС. В возрастных группах старше 55 лет частота встречаемости БАС у мужчин и женщин становится одинаковой. Замечено, что частота встречаемости БАС у женщин значительно повышается после менопаузы.

Причины возникновения БАС неизвестны. Обсуждается множество этиологических (причинных) факторов. Среди них особое место занимают вирусы, метаболические и иммунологические факторы.

Характер и прогноз развития этого заболевания также являются предметом научных споров.

источник