Анализ на антитела к нуклеосомам

Online диагноз
© ООО «Интеллектуальные медицинские системы», 2012—2019 гг.
Все права защищены. Информация сайта юридически защищена, копирование преследуется по закону.

Размещение рекламы, сотрудничество: info@online-diagnos.ru

Сайт не несет ответственность за содержание и достоверность размещенного пользователями на сайте контента, отзывы посетителей сайта. Материалы сайта носят исключительно информационно-ознакомительный характер. Содержание сайта не является заменой профессиональной консультации врача-специалиста, диагностики и/или лечения. Самолечение может быть опасно для здоровья!

источник

Антитела к нуклеосомам (anti-DNA-Ab, NCA) – группа антиядерных иммуноглобулинов, взаимодействующих со структурными единицами хроматина. Рассматриваются как маркер системной красной волчанки с люпус-нефритом. Анализ применяется для диагностики СКВ, лекарственного волчаночного синдрома, волчаночного гломерулонефрита и контроля течения этих патологий. Показан при характерной клинической картине, высоких титрах антинуклеарных иммуноглобулинов. Кровь забирается из вены, исследование выполняется методом ИФА или иммуноблоттинга. Референсные значения составляют 0-20 Ед/мл («отрицательно»). Подготовка данных занимает до 12 рабочих дней. Всего в Москве нашлось 107 адресов, где можно сделать этот анализ.

Антитела к нуклеосомам (anti-DNA-Ab, NCA) – группа антиядерных иммуноглобулинов, взаимодействующих со структурными единицами хроматина. Рассматриваются как маркер системной красной волчанки с люпус-нефритом. Анализ применяется для диагностики СКВ, лекарственного волчаночного синдрома, волчаночного гломерулонефрита и контроля течения этих патологий. Показан при характерной клинической картине, высоких титрах антинуклеарных иммуноглобулинов. Кровь забирается из вены, исследование выполняется методом ИФА или иммуноблоттинга. Референсные значения составляют 0-20 Ед/мл («отрицательно»). Подготовка данных занимает до 12 рабочих дней.

Нуклеосомы – структурные элементы хромосом, выстроенные из ДНК и белков-гистонов. В свободной форме они образуются в процессе программированной гибели клеток – эпителиоцитов, лимфоцитов. В норме апоптоз завершается фагоцитированием всех атопических телец, при аутоиммунной реакции запускается процесс производства антител, приводящий к воспалению и повреждению тканей. Свободные нуклеосомы являются основными иммуногенами при системной красной волчанке. Специфические к ним иммуноглобулины синтезируются на начальных этапах заболевания, участвуют в патогенезе люпус-нефрита. Преимуществом исследования anti-DNA-Ab является высокая чувствительность, недостатком – длительность выполнения теста.

Антитела к нуклеосомам являются чувствительным и специфическим маркером СКВ. Они вырабатываются раньше, чем аутоантитела к двуспиральной ДНК, и выявляются у 40-90% больных. Анализ показан в следующих случаях:

• Симптомы СКВ. С целью диагностики и дифференциации заболевания от других ревматических болезней исследование назначается при жалобах на мышечные и суставные боли, повышение температуры, беспричинную слабость, высыпания на коже.
• Признаки волчаночного гломерулонефрита. Поражение почек выражается уменьшением объема мочи (на поздних стадиях – увеличением), появлением отеков, повышением артериального давления. В данных клинического анализа мочи – повышенный уровень белка, эритроцитов. Определение NCA позволяет выявить люпус-нефрит, определить характер его течения.
• Проявления лекарственной волчанки. Тест назначается пациентам с симптомами системной патологии, развивающимися на фоне приема лекарств: противоаритмических, противотуберкулезных, антигипертензивных, противосудорожных средств, антибиотиков, сульфаниламидов, нейролептиков.
• Высокие титры антинуклеарных АТ. При повышении данных скринингового исследования ANA (ИФА), антинуклеарного фактора тест выполняется с целью подтверждения диагноза СКВ.
• Диагноз СКВ. Выявление NCA назначается периодически, частота определяется характером течения патологии. Результат позволяет оценить эффективность применения иммуносупрессоров, риск развития люпус-нефрита. Титры коррелируют с активностью аутоиммунного процесса.

Биоматериалом является венозная кровь. Процедуру забора предпочтительно выполнять утром. Рекомендуется соблюсти правила подготовки:

1. Воздержаться от приема пищи минимум 4 часа. Ограничений в употреблении воды нет.
2. Отказаться от алкогольных напитков, тяжелых физических нагрузок, избегать стрессовых ситуаций за сутки до процедуры.
3. Сообщить врачу о принимаемых лекарствах за 7-10 дней до сдачи биоматериала.
4. За 30 минут до входа в процедурный кабинет не курить.

Кровь забирается методом венепункции, хранение и транспортировка осуществляется в герметичных пробирках. В лаборатории биоматериал центрифугируют, выводят факторы свертывания – получают сыворотку. Исследование проводится методом иммуноблоттинга или иммуноферментным методом с использованием высокоочищенных антигенов. Данные подготавливаются за 7-12 дней.

Коридор референсных значений для теста – 0-20 Ед/мл. Верхняя граница нормы одинакова для взрослых и детей. При интерпретации итогового показателя необходимо учитывать:

• У людей, чьи родственники имеют аутоиммунное заболевание, возможно выявление NCA при отсутствии болезни.
• Отрицательный результат не исключает аутоиммунную патологию, но снижает ее вероятность.
• При мониторинге болезни показатель в рамках нормы является благоприятным прогностическим признаком.

Антитела к нуклеосомам производятся Т- и В-клетками при активном апоптозе эпителиоцитов и лимфоцитов. Причинами повышения уровня anti-DNA-Ab являются:

• Системная красная волчанка. Отклонение результата от нормы определяется у 40-70% людей с классической формой, поражающей внутренние органы и кожу, у 80-90% больных с люпус-нефритом. Продукция специфических иммуноглобулинов стойкая, ее активность отражает прогрессирование болезни.
• Лекарственный волчаночный синдром. АТ обнаруживаются у 40-60% пациентов, производство антител напрямую связано с приемом препаратов и потому обратимо.
• Синдром Шегрена, синдром Шарпа. Повышенное значение анализа выявляется в 5-8% случаев.
• СКВ у родственников. 15-20% людей, родственники которых страдают данным заболеванием, имеют повышенный уровень NCA.
• Склеродермия. Производство АТ увеличивается у 30% больных.
• Антифосфолипидный синдром. Высокие показатели теста отмечаются редко, рассматриваются как маркеры высокого риска развития СКВ.
• Инфекции, злокачественные новообразования. Образование NCA умеренное, носит транзиторный характер. Повышение показателя теста определяется редко, не имеет диагностического значения.

Снижение показателя при повторных исследованиях у пациентов с системной красной волчанкой свидетельствует об уменьшении риска поражения почек, развития обострений. После курса иммуносупрессивных препаратов – подтверждает положительный ответ на терапию.

Антитела к нуклеосомам – специфический маркер системной красной волчанки. Исследование применяется для диагностики и контроля заболевания, выявления люпус-нефрита, лекарственного волчаночного синдрома. За интерпретацией полученных данных и назначением лечения нужно обратиться к ревматологу, дерматовенерологу, нефрологу.

источник

Системная красная волчанка (СКВ) — это аутоиммунное заболевание из группы системных заболеваний соединительной ткани (коллагенозов), неизвестной этиологии, характеризующееся гиперпродукцией широкого спектра иммунных комплексов и органоспецифических аутоантител к различным компонентам ядра.

Системная красная волчанка (СКВ) включает в себя:

• кожную форму с доброкачественным течением и благоприятным прогнозом
• системное поражение соединительной ткани и сосудов, захватывающее многие внутренние органы

Образующийся комплекс аутоантител с нуклеиновыми кислотами и гистонами оседает повсеместно на стенках малых сосудов и почечных клубочков, что приводит в присутствии комплемента к развитию воспалительных процессов, особенно опасных в тех случаях, когда комплекс локализуется в почках или в мозге.

Антиядерные антитела — это гетерогенная группа аутоантител, реагирующих с различными компонентами ядра.

К настоящему времени описано более 100 разновидностей АЯА, направленных против структур цитоплазмы и ядра (против нуклеиновых кислот, гистонов, белков ядерной мембраны, компонентов сплайсосомы, рибонуклеопротеинов, белков ядрышек и центромер).

Ядерные антигены могут быть разделены на 3 группы:

1. истинные ядерные антигены — двуспиральная ДНК, односпиральная ДНК, гистоны, ядерная РНК
2. экстрагируемые ядерные антигены — Sm, n-RNP, Scl-70
3. цитоплазматические антигены — SS-A (Ro), SS-B (La), Jo-1

Отличие тест-систем для скрининга состоит в том, что в исследуемой сыворотке определяются антитела к смеси антигенов – ядерному экстракту (ENA). Положительный результат указывает на наличие у больного одного или сочетания нескольких разновидностей АЯА.

У пациентов с положительными результатами определения АЯА рекомендуется проведение подтверждающих тестов на специфические АЯА к отдельным ядерным и цитоплазматическим антигенам.

Антитела к дсДНК являются высокоспецифичным маркером СКВ, обнаруживаются в активной фазе заболевания и имеют положительную корреляцию с тяжестью заболевания. При эффективной и успешной терапии их концентрация значительно снижается.

Титры антител к дсДНК тесно коррелируют с концентрацией IgG-содержащих циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) в сыворотке крови больных системной красной волчанкой (СКВ).

Антитела к односпиральной ДНК встречаются приблизительно у 70% больных СКВ, однако эти антитела неспецифичны для системной красной волчанки (СКВ) и присутствую в организме при разнообразных заболеваниях соединительной ткани.

Обнаружение антител к односпиральной ДНК класса IgM имеет значение для диагностики дискоидной красной волчанки, а также лекарственной системной красной волчанки (СКВ), при которой уровень антител к осДНК повышается более чем в 50% случаев. Данные антитела обнаруживаются также в сыворотке больных мононуклеозом, гепатитом и различными формами лейкозов.

Гистоны — основные белковые компоненты ядра клетки, подразделяющиеся на 5 классов.

Около 80% больных системной красной волчанкой (СКВ) имеют антитела к гистонам. Кроме того эти антитела можно обнаружить у пациентов с лекарственной системной красной волчанкой (СКВ), возникающей после приема гидралазина и прокаинамида, пациентов с первичным билиарным циррозом, ревматоидным артритом и склеродермией.

Антитела к нуклеосомам появляются значительно раньше, чем антитела к дсДНК и обнаруживаются у 85% пациентов с системной красной волчанкой (СКВ). Антинуклеосомные IgG-антитела находят практически только при системной красной волчанке (СКВ), склеродермии и смешанном заболевании соединительной ткани.

Sm-антиген образует около 9 белков, ассоциированных с РНК, которые входят в состав сплайсосомы – белкового комплекса, осуществляющего перестройку мРНК. Антитела к компоненту Sm отмечаются у 20-30% больных системной красной волчанкой (СКВ), при этом они абсолютно специфичны при этом заболевании и их концентрация не изменяется при терапии системной красной волчанки (СКВ). Клиническими признаками, связанными с присутствием Sm-антител, являются прежде всего более агрессивное течение заболевания, поражение центральной нервной системы, волчаночные психозы и относительная сохранность функции почек.

Эти антитела взаимодействуют с фосфопротеинами рибосом и встречаются преимущественно у больных системной красной волчанкой (СКВ) с поражением центральной нервной системы (ЦНС).

источник

Антинуклеарные антитела (анти-Sm, RNP, SS-A, SS-B, Scl-70, PM-Scl, PCNA, CENT-B, Jo-1, к гистонам, к нуклеосомам, Ribo P, AMA-M2), иммуноблот

Специфичные аутоантитела к различным компонентам клеточного ядра, которые образуются при некоторых тяжелых аутоиммунных патологиях и имеют большое значение в диагностике системных ревматических заболеваний.

Для чего используется этот анализ?

• Для диагностики системных заболеваний соединительной ткани.

Когда назначается анализ?

• При выявлении антинуклеарных антител, антинуклеарного фактора в крови.

Специфичные АНА, антитела к экстрагируемым ядерным (нуклеарным) антигенам.

Синонимы английские

Antinuclear Antibodies (ANA) Comprehensive Profile, ANA-specific Antibodies, Extractable Nuclear Antigen Antibodies (ENA Panel).

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Как правильно подготовиться к исследованию?

Не курить в течение 30 минут до сдачи крови.

Общая информация об исследовании

Антинуклеарные антитела (АНА) к экстрагируемым ядерным антигенам представляют собой антитела к растворимым компонентам ядра клетки (рибонуклеопротеинам). В норме АНА отсутствуют в организме. При аутоиммунной патологии иммунная система начинает вырабатывать специфические иммуноглобулины к собственным клеткам и их компонентам.

Основной метод определения специфичности антител при положительном антинуклеарном факторе – это иммуноблотинг, позволяющий дифференцировать системные заболевания соединительной ткани. Данный метод исследования дает возможность одновременно выявить антитела к нескольким различным внутриклеточным антигенам, которые могут встречаться как сочетанно, так и изолированно.

Анти-Sm (Smith) – антитела к U1-, U2-, U4-рибонуклеопротеинам – специфичны для системной красной волчанки (СКВ). Они редко встречаются при других системных заболеваниях соединительной ткани и являются одним из критериев диагностики СКВ. При этом, однако, концентрация анти-Sm не коррелирует с активностью системной красной волчанки.

Антитела к антигенам RNP (anti-ribonucleoprotein) – это антитела к белковым компонентам малого ядерного нуклеотида – U-1-РНК. Они обнаруживаются при смешанных заболеваниях соединительной ткани (синдроме Шарпа), реже при системной красной волчанке и других ревматических заболеваниях.

Антитела к SS-A (Ro) направлены на белки, связанные с РНК Y1-Y5 в составе сплайсосомы. Эти антитела наиболее часто обнаруживаются при синдроме Шегрена и системной красной волчанке. При СКВ их продукция ассоциируется с определенным набором клинических проявлений и лабораторных нарушений: светочувствительностью, синдромом Шегрена, гиперпродукцией ревматоидного фактора. Присутствие анти-SS-A-антител в крови беременной женщины связано с высоким риском развития неонатального волчаночного синдрома у ребенка.

Анти-SS-B(La)-антитела к белку, связанному с РНК-полимеразой-3, выявляются при болезни Шегрена и в начальном периоде системной красной волчанки, развивающейся в пожилом возрасте и ассоциирующейся с низкой частотой развития нефрита.

Антитела к Scl-70 (антисклеродермальные антитела с молекулярной массой 70 кДа, антитела к топоизомеразе I) чаще появляются при диффузной (40 %), реже при ограниченной (20 %) форме системной склеродермии, CREST-синдроме. Они высокоспецифичны для склеродермии и являются плохим прогностическим признаком относительно развития легочного фиброза.

Антитела anti-PM/Scl – специфический серологический маркер для подгруппы больных склеродермией (Scl), полимиозитом (PM) и особенно для тех, у кого наблюдается совокупность симптомов обоих заболеваний (PM/Scl).

Антитела к ядерному антигену пролиферирующих клеток (PCNA) – один из высокоспецифичных тестов для выявления системной красной волчанки.

Антицентромерные антитела (анти-CENT-B) обнаруживаются у больных склеродермией, системной красной волчанкой и ревматоидным артритом. У больных системной склеродермией выявление данных антител указывает на благоприятный прогноз и низкую вероятность поражения внутренних органов.

Анти-Jo-1-антитела (антитела к гистидин-тРНК-синтетазе) впервые были обнаружены в сыворотке крови больных миозитом. У большинства больных с повышенным уровнем антисинтетазных антител выявляется интерстициальная болезнь легких, феномен Рейно. Данное исследование может быть использовано как прогностический маркер прогрессирования болезни.

Антитела к гистонам представляют собой одну из разновидностей антитуклеарных антител и определяются в основном при системной красной волчанке, являясь ее ранними маркерами.

Антитела к нуклеосомам – чувствительный маркер системной красной волчанки. Они определяются исключительно при СКВ, нередко осложненной поражением почек (люпус-нефритом).

АТ к рибосомальному белку Р (Ribo P) встречаются у 10-20 % больных с СКВ. Они взаимодействуют с фосфоропротеинами рибосом и встречаются преимущественно у больных СКВ с поражением центральной нервной системы, почек и печени. Их обнаружение специфично для СКВ, протекающей с волчаночным психозом.

Анти-AMA-M2 – антитела к антигенам митохондрий М-2, расположенным на внутренней мембране органеллы в виде комплекса ферментов. Данные антитела синтезируются при первичном билиарном циррозе и указывают на его тяжелое течение.

Некоторые разновидности АНА встречаются при одном заболевании или при перекрестных синдромах. Например, антитела к SS-A и SS-B или к RNP и Sm-антигенам часто выявляются совместно, поскольку входят в один белковый комплекс, выступающий антигеном для данных типов аутоантител.

Для чего используется исследование?

• Для диагностики системных заболеваний соединительной ткани;
• для мониторинга течения и оценки прогрессирования ревматических заболеваний;
• для дифференциальной диагностики некоторых аутоиммунных заболеваний.

Когда назначается исследование?

• При выявлении антинуклеарного фактора и антинуклеарных антител в крови;
• при симптомах аутоиммунных заболеваний (длительное повышение температуры тела, потеря массы тела, миалгии, артропатии, фоточувствительность, синдром Рейно (побледнение с последующим посинением и покраснением сосудов пальцев кистей и стоп), лейкопения и гемолитическая анемия);
• при мониторинге течения системных заболеваний соединительной ткани.

Референсные значения: отрицательно.

Причины повышения специфичных АНА

• Системная красная волчанка (у 10-40 % пациентов)
• Смешанное заболевание соединительной ткани (редко)
• Синдром Шегрена (редко)

• Смешанное заболевание соединительной ткани (95-100 %)
• СКВ (25-50 %)
• Склеродермия (30 %)
• Синдром Шегрена (15%)
• Ревматоидный артрит (10 %)

• СКВ (15-35 %)
• Неонатальный волчаночноподобный синдром (100 %)
• Склеродермия (60 %)
• Ревматоидный артрит (10 %)
• Синдром Шегрена (40-75 %)
• Смешанное заболевание соединительной ткани (менее 5 %)

• Синдром Шегрена (15-60 %)
• СКВ (10-15 %)
• Склеродермия (25 %)
• Ревматоидный артрит (5 %)

• Склеродермия, диффузная форма (20-60 %) в сочетании с легочным фиброзом
• CREST-синдром
• Изолированный синдром Рейно с последующим развитием склеродермии

• Волчаночный нефрит (люпус-нефрит)

• Полимиозит, дерматомиозит (антитела выявляются у половины больных) в сочетании с легочным фиброзом

• СКВ
• Склеродермия
• Лекарственная волчанка

• СКВ, ассоциированная с люпоидным церебритом (волчаночным психозом)

Что может влиять на результат?

• Лекарственные препараты, способные повышать уровень Scl-70: аминосалициловая кислота, изониазид, метилдопа, пенициллин, пропилтиоурацил, стрептомицин, тетрациклин.
• Антитела к гистонам могут появляться при лекарственной волчанке, вызванной приемом гидралазина, прокаинамида, хинидина.

• Результаты данного исследования должны интерпретироваться только комплексно, в сочетании с клиническими данными. Системное аутоиммунное заболевание при отсутствии клинической картины не может быть диагностировано только на основании выявления специфичных антинуклеарных антител.
• Отрицательный результат иммуноблота не исключает системного аутоиммунного заболевания соединительной ткани.

Кто назначает исследование?

• Назаренко Г. И., Кишкун А. Клиническая оценка результатов лабораторных исследований. – М.: Медицина, 2000. – 533 с.
• Fischbach F.T., Dunning M.B. A Manual of Laboratory and Diagnostic Tests, 8th Ed. Lippincott Williams & Wilkins, 2008: 1344 p.
• Wilson D. McGraw-Hill Manual of Laboratory and Diagnostic Tests 1st Ed. Normal, Illinois, 2007: 666 p.
• Sabatine. M. Pocket Medicine. 3d ed. USA, Philadelphia: LWW; 2008.

Оставьте ваш E-mail и получайте новости, а также эксклюзивные предложения от лаборатории KDLmed

источник

Автореферат и диссертация по медицине (14.00.39) на тему: Клиническое значение антител к нуклеосомам и белкам теплового шока при системной красной волчанке

Автореферат диссертации по медицине на тему Клиническое значение антител к нуклеосомам и белкам теплового шока при системной красной волчанке

КОТОВСКАЯ Мария Андреевна

КЛИНИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ АНТИТЕЛ К НУКЛЕОСОМАМ И БЕЛКАМ ТЕПЛОВОГО ШОКА ПРИ СИСТЕМНОЙ КРАСНОЙ ВОЛЧАНКЕ

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Работа выполнена в Государственном Учреждении Институте ревматологии Российской академии медицинских наук

Официальные оппоненты: доктор медицинских наук, профессор

Ведущая организация: Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Российский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию».

Защита состоится 21 сентября 2007 г. в 12 часов на заседании диссертационного совета Д 001.018 01 при Государственном учреждении Институте ревматологии Российской академии медицинских наук (115522, Москва, Каширское шоссе, 34А)

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Государственного учреждения Института ревматологии Российской академии медицинских наук (115522, Москва, Каширское шоссе, 34А)

доктор медицинских наук, профессор, академик РАМН НАСОНОВ Евгений Львович

доктор медицинских наук, профессор БАРАНОВ Андрей Анатольевич

Ученый секретарь диссертационного совета, кандидат медицинских наук

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ДИССЕРТАЦИИ

Системная красная волчанка (СКВ) — системное аутоиммунное заболевание неизвестной этиологии, патогенетически связанное с такими нарушениями иммунорегуляции, которые являются причиной гиперпродукции широкого спектра органонеспецифических аутоан-тител к различным компонентам ядра и иммунных комплексов, вызывающих иммуновоспалительное повреждение тканей и нарушения функций внутренних органов (Насонова В А., Насонов Е.Л.,2003)

Основным компонентом лабораторной диагностики СКВ является выявление аутоантител к клеточным антигенам, преимущественно к ядерным, таких как антитела к гистонам (anti-HST), односпи-ральной и двухспиральной ДНК Антитела к двухспиральной ДНК (дсДНК) в настоящее время являются наиболее распространенным диагностическим маркерам СКВ Однако они выявляются, не более чем в 50 % случаев, а уровень антител к дсДНК не всегда коррелирует с активностью заболевания (Simon J. и соавт., 2004) Другой, широко известный маркер СКВ — антинуклеарные антитела (АНФ), имеют достаточно низкий уровень специфичности в связи с высокой частотой выявления АНФ не только при СКВ, но и при других аутоиммунных заболеваниях (Cairns А.Р и соавт,, 2003)

В широком спектре антиядерных антител, выявляемых при СКВ, особое внимание уделяется антителам к нуклеосомам. Нуклеосома состоит из двойной спирали ДНК, обмотанной вокруг специфического комплекса из восьми нуклеосомных гистонов (гистонового окта-мера). Нуклеосома представляет собой дисковидную частицу с диаметром около 11 нм, содержащую по две копии каждого из нуклеосомных гистонов (Н2А, Н2В, НЗ, Н4) (Foumel S. и соавт., 2002).

По данным Amoura Z и соавт, 2000, нуклеосомы играют роль превалирующих патогенетических антигенов у больных СКВ, а появление антител к нуклеосомам ассоциируется с органньми поражениями (Simon и соавт, 2004) Важно отметить, что у пациентов с СКВ при скрининговом исследование было отмечена корреляционная связь между уровнем антител к нуклеосомам и поражением почек и центральной нервной системы (Wilhams R и соавт , 2001) Более того, антитела к нуклеосомам, так же как и аутореактивные Т — хелпе-

ры, специфичные к нуклеосомам были определены в сыворотоках больных СКВ (Chabre и соавт , 1995, Lu L., 1999). На биологических моделях СКВ было показано, что антитела к нуклеосомам выявляются до развития заблевания Однако до настоящего времени вопрос о специфичности антител к нуклеосомам при СКВ остается дискуссионным (Rumore А и соавт., 1990) До настоящего времени нет убедительных данных о преимуществах этого теста перед выявлением дсДНК (Mm D J , 2002).

В процессе разработки новых тестов, которые давали бы представление о характере нарушения гуморального иммунитета при СКВ, обратила на себя внимание группа сравнительно недавно открытых внутриклеточных белков, получивших название «белки теплового шока» (БТШ (Hsp)) или «стрессовые белки» Эти белки недостаточно изучены, но уже имеющиеся данные свидетельствуют о том, что они высоко консервативны в процессе филогенеза (Lindqulst S., 1986), необычно полифункциональны и играют важную роль во многих внутриклеточных иммунобиохимических процессах как в экстремальных, так и в нормальных условиях (Polla В S , 1988).

Таким образом, поиск новых диагностических маркеров является актуальным направлением в исследованиях, посвященных системной красной волчанке

Изучить клиническое значение антител к нуклеосомам и белкам теплового шока при системной красной волчанке больных

1 Определить частоту повышения антител к нуклеосомам в сыворотках больных СКВ и их связь с клинико — лабораторными проявлениями СКВ

2 Проанализировать связь уровня антител к нуклеосомам с антителами к дсДНК

3 Выявить уровень и частоту повышения антител к связанным гис-тонам в сыворотках больных СКВ, их связь с клинико-лабораторными параметрами СКВ

4 Исследовать уровень и частоту повышения антител к белкам теплового шока в сыворотках больных СКВ

Впервые в настоящей работе на большом клиническом материале проведено одновременное исследование сывороточных концентраций антител к нуклеосомам, компонентам нуклеосом — гистонам и белкам теплового шока у больных СКВ, и проведено их сопоставление с клинико — лабораторными проявлениями и активностью этого заболевания

Выявлена связь антител к нуклеосомам у больных СКВ с поражением почек, центральной нервной системы и активностью заболевания

Впервые проведен детальный анализ клинических проявлений СКВ в зависимости от степени повышения уровня антител к гистонам Выявлена связь антител к гистонам Н2А и Н2В с поражением почек и центральной нервной системы у больных СКВ.

Впервые отмечена ассоциация уровня антител к пептиду убик-витина 42-76 с активностью СКВ

1 Определение антител к нуклеосомам имеет диагностическое значение при СКВ

2 Определение уровня антител к нуклеосомам целесообразно для определения активности СКВ

3. У больных СКВ с поражением почек целесообразно определение антител к нуклеосомам для оценки активности почечного процесса

Положения, выносимые на защиту

1. При СКВ с высокой частотой выявляются антитела к нуклеосомам

2 Одновременное определение антител к нуклеосомам и к дсДНК позволяет повысить чувствительность и специфичность лабораторной диагностики СКВ

3 У больных СКВ уровень антител к нуклесомам достоверно связан с клиническими и лабораторными параметрами, характеризующими активность заболевания

4. Повышение уровня антител к нуклеосомам у больных СКВ ассоциируется с поражением почек, ЦНС и активностью заболевания

Основные результаты работы используются в клинике ГУ Института ревматологии РАМН

По материалам диссертации опубликовано 4 печатные работы 1 статья, 3 тезиса.

Основные положения диссертации доложены и обсуждены на 6-ой Европейской конференции по СКВ (Лондон, 2005), на заседании ревматологической секции Московского научного терапевтического общества (Москва, 2006) Первичная экспертиза диссертации проведена на заседании Ученого Совета ГУ Института ревматологии РАМН 19 июня 2007 года.

Объем и структура диссертации

Диссертация изложена на 94 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, глав с изложением материала и методов исследования, результатов собственных исследований, обсуждения, выводов, практических рекомендаций и указателя лите-

ратуры, содержащего 7 отечественных и 123 зарубежных источников Диссертация проиллюстрирована 24 таблицами и 21 рисунком

Материалы и методы исследования

Работа проводилась в рамках совместного научного исследования «Роль антител к нуклесомам при СКВ» между ГУ Институт ревматологии РАМН и Институтом молекулярной и клеточной биологии (Франция)

В основу работы положены результаты клинико — иммунологического обследования 85 больных с системной красной волчанкой, находившихся на стационарном лечении в клинике ГУ Институт ревматологии РАМН, а так же 85 пациентов с СКВ, проходивших обследование в клинике University of New Mexico School of Medicine, Albuquerque (США) за период с 2002 по 2004 год Все больные имели достоверный диагноз СКВ. Достоверность диагноза подтверждалась наличием не менее 4-х критериев Американской Коллегии Ревматологов (1997 г), поражение центральной нервной системы при СКВ диагностировалось согласно классификации Американской Коллегии Ревматологов (1999 г) (Hochberg М.С, 1997, ACR, 1999) В группу сравнения были включены пациенты с ревматоидным полиартритом (РА) (п=36) и болезнью Шегрена (БШ) (п=31). Группа контроля состояла из 45 здоровых доноров, сопоставимых по полу и возрасту

Группа больных СКВ состояла из 19 (11,1%) мужчин и 151(88,9%) женщины в возрасте от 14 до 81 года. Средний возраст больных на момент включения в исследование равнялся 34,6+13,8 лет (m±SD) Основную часть обследованных больных — 61,1 % — представляли пациенты в возрасте от 21 до 40 лет На время обследования 26 больных (15,2%) были моложе 20 лет и 17 больных (10%) — старше 50 лет Продолжительность заболевания варьировала от 1 месяца до 17 лет, составляя в среднем 86 + 59,9 месяца

Частота клинических и лабораторных проявлений СКВ у больных на момент обследования представлена в таблицах 1, 2

ЭРИТЕМАТОЗНЫЕ ПОРАЖЕНИЯ КОЖИ 50 29,4

ПОРАЖЕНИЕ СЛИЗИСТЫХ ОБОЛОЧЕК (язвенный стоматит) 36 21,1

ПОЛИСЕРОЗИТ (перикардит и/или плеврит) 28 16,4

— из них с нефротиче-ским синдромом 10 5,8

Анемия (гемоглобин 25 ЕД/мл отмечено у 112 пациентов СКВ (65,8%), 1 пациента с РА (2,8%), а у 5 пациентов с БШ (16,1%). Уровень антител к нуклеосомам достоверно превышали показатели контрольной группы и групп больных РА и первичным БШ (р 25 ЕД/мл) п = 112 и с нормальным уровнем ( 25’ЕД/мл 1 ‘ Антитела ч ■кнуклеосомам Г „ ■ •

ЭРИТЕМАТОЗНЫЕ ПОРАЖЕНИЯ КО- 21 (18,7%) 29 (50%) нд

ПОРАЖЕНИЕ СЛИЗИСТЫХ ОБОЛО- 17 (15,2%) 19 (32,7%) н д

АРТРИТ/ АРТРАЛ-ГИИ 38 (34%) 18(31%) Н.Д

ПОЛИСЕРОЗИТ 21 (18,7%) 7 (12%) 0,028

НЕФРИТ 46 (41%) 15 (25,8%) 0,0034

— из них с нефроти- 8 (7,1%) 2 (3,4%) 0,05

ПОРАЖЕНИЕ ЦНС 27 (24,1%) 9 (15,5%) 0,021

(гемоглобин 25 ЕД/мл) и антител к дсДНК (>20 ЕД/мл) статистически значимые различия между группами больных выявлены не были. В обеих группах были отмечены поражения почек, центральной нервной системы и полисерозита (р 0,20 ЕД о.п. отмечено у 74 пациентов СКВ (43,5%). 1 пациентов с РА (0,5%), а у 5 пациентов с БШ (2,9%). Содержание антител к гистону Н2В у больных СКВ варьировало от 0,16 до 0,415 ЕД о.п., а их средние показатели 0,212 + 0,174 ЕД о.п. Увеличение уровня антител к гистону Н2В > 0,20 ЕД о.л. отмечено у 85 пациентов СКВ (50%), у ни одного из пациентов с РА (0%), а у 3 пациентов с БШ (1,7%). Уровни антител к

гистонам НЗ и Н4 не превышали показатели контрольной группы и групп больных РА и БШ (р>0,05).

Статистически значимые различия повышенного уровня антител к гистонам Н2А и Н2В по сравнению с нормальным уровнем были отмечены в отношении поражения почек и центральной нервной системы, и активности заболевания (р .п. ВШ ‘ , » Котовская, Мария Андреевна :: 2007 :: Москва

Глава 1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР.

1.1. Антитела к нуклеосомам.

Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

2.1. Общая характеристика обследованных больных.

2.2. Характеристика активности и течения СКВ.

2.3. Клинические, лабораторные и инструментальные методы исследования

2.4. Статистическая обработка результатов.

Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ.

3.1. Уровень антител к нуклеосомам в исследуемых группах.

3.2. Уровень антител к дсДНК в исследуемых группах.

3.3. Сравнительная характеристика уровня антител к нуклеосомам и антител к дсДНК в группе больных СКВ.

3.4. Связь уровня антител к нуклеосомам и дсДНК с активностью СКВ.

3.5. Анализ уровней антител к нуклеосомам и антител к дсДНК у больных СКВ с поражением почек.

3.6. Анализ уровней антител к нуклеосомам и антител к дсДНК у больных СКВ с поражением центральной нервной системы.

3.7. Уровень антител к гистонам в исследуемых группах.

3.8. Уровень антител к белкам теплового шока в исследуемых группах.

3.9. Связь антител к нуклеосомам, дсДНК, гистонам и белкам теплового шока с клинико-лабораторными параметрами.

Глава 4.0БСУЖДЕНИЕ ПОЛУЧЕННЫХ РЕЗУЛЬТАТОВ.

Системная красная волчанка (СКВ) — системное аутоиммунное заболевание неизвестной этиологии, патогенетически связанное с такими нарушениями иммунорегуляции, которые являются причиной гиперпродукции широкого спектра органонеспецифических аутоантител к различным компонентам ядра и иммунных комплексов, вызывающих иммуновоспалительное повреждение тканей и нарушения функций внутренних органов (Насонова В.А., Насонов ЕЛ,2003).

Основным компонентом лабораторной диагностики СКВ является выявление аутоантител к клеточным антигенам, преимущественно к ядерным, таких как антитела к гистонам (anti-HST), односпиральной и двухспиральной ДНК. Антитела к двухспиральной ДНК (дсДНК) в настоящее время являются наиболее распространенным диагностическим маркерам СКВ, однако по некоторым данным они выявляются не более чем в 50 % случаев, а уровень антител к дсДНК не всегда коррелирует с активностью (Simon et al., 2004). Другой, широко известный маркер СКВ — антинуклеарные антитела (АНФ), имеют достаточно низкий уровень специфичности, в связи с высокой частотой выявления АНФ не только при СКВ, но и при других аутоиммунных заболеваниях.

В достаточно широком спектре антиядерных антител, выявляемых при СКВ, особое внимание уделяется антителам к нуклеосомам. Нуклеосома состоит из двойной спирали ДНК, обмотанной вокруг специфического комплекса из восьми нуклеосомных гистонов (гистонового октамера). Нуклеосома представляет собой дисковидную частицу с диаметром около 11 нм, содержащую по две копии каждого из нуклеосомных гистонов (Н2А, Н2В, НЗ, Н4).

По данным Amoura Z et al. 2000, нуклеосомы играют роль превалирующих патогенетических антигенов у больных СКВ, а появление антител к нук-леосомам ассоциируется с органными поражениями (Simon et al., 2004). Более того, антитела к нуклеосомам, так же как и аутореактивные Т — хелперы, специфичные к нуклеосомам были определены в сыворотках больных СКВ (Chabre et al., 1995, Lu L., 1999). У пациентов с СКВ при скрининговом исследование была отмечена корреляционная связь между уровнем антител к нуклеосомам и поражением почек и центральной нервной системы (Williams et al., 2001). На биологических моделях СКВ было показано, что антитела к нуклеосомам выявляются до развития заболевания, однако до настоящего времени остается дискуссионным вопрос о специфичности этих аутоантител при СКВ (Rumore et al., 1990). Нет убедительных данных о преимуществах этого теста перед выявлением антител к дсДНК (Simon et al., 2004).

При поиске новых тестов, которые давали бы представление о состоянии иммунокомпетентных клеток крови при СКВ, обратила на себя внимание группа сравнительно недавно открытых внутриклеточных белков, получивших название «белки теплового шока» (БТШ или Hsp) или «стрессовые белки». Эти белки недостаточно изучены, но уже имеющиеся данные говорят, что они высоко консервативны в процессе филогенеза (Lindqulst S., 1986), необычно полифункциональны — играют важную роль во многих внутриклеточных иммуно-биохимических процессах как в экстремальных, так и в нормальных условиях (Polla B.S., 1988), что позволяет предположить об участии белков теплового шока в формировании патобиохимических внутриклеточных связей.

Таким образом, совершенствование диагностики заболевания является на сегодняшний день наиболее актуальным направлением в исследованиях, посвященных СКВ.

Изучить клиническое значение антител к нуклеосомам и белкам теплового шока при системной красной волчанке.

1. Определить частоту повышения антител к нуклеосомам в сыворотках больных СКВ и их связь с клинико — лабораторными проявлениями СКВ.

2. Проанализировать связь уровня антител к нуклеосомам с антителами к дсДНК.

3. Выявить уровень и частоту повышения антител к связанным гистонам в сыворотках больных СКВ, их связь с клинико-лабораторными параметрами СКВ.

4. Исследовать уровень и частоту повышения антител к белкам теплового шока в сыворотках больных СКВ.

Впервые в настоящей работе на большом клиническом материале проведено одновременное исследование сывороточных концентраций антител к нуклеосомам, компонентам нуклеосом — гистонам и белкам теплового шока у больных СКВ, и проведено их сопоставление с клинико — лабораторными проявлениями и активностью этого заболевания.

Выявлена связь антител к нуклеосомам у больных СКВ с поражением почек, центральной нервной системы и активностью заболевания.

Впервые проведен детальный анализ клинических проявлений СКВ в зависимости от степени повышения уровня антител к гистонам. Выявлена связь антител к гистонам Н2А и Н2В с поражением почек и центральной нервной системы у больных СКВ.

Впервые отмечена ассоциация уровня антител к пептиду убиквитина 4276 с активностью СКВ. !

1. Определение антител к нуклеосомам имеет диагностическое значение при СКВ

2. Определение уровня антител к нуклеосомам целесообразно для определения активности СКВ

3. У больных СКВ с поражением почек целесообразно определение антител к нуклеосомам для оценки активности почечного процесса

Положения, выносимые на защиту

1. При СКВ с высокой частотой выявляются антитела к нуклеосомам.

2. Одновременное определение антител к нуклеосомам и к дсДНК позволяет повысить чувствительность и специфичность лабораторной диагностики СКВ.

3. У больных СКВ уровень антител к нуклесомам достоверно связан с клиническими и лабораторными параметрами, характеризующими активность заболевания.

4. Повышение уровня антител к нуклеосомам у больных СКВ ассоциируется с поражением почек, ЦНС и активностью заболевания.

По теме диссертации опубликовано 4 работы: 3 — в отечественной печати, 1 -в зарубежной.

Материалы диссертации доложены на: •S Lupus meeting, London, UK, 2005;

S Заседание ревматологической секции Московского научного терапевтического общества, Москва, 2006;

Первичная экспертиза проведена на заседании Ученого совета ГУ Институт ревматологии РАМН.

Объем и структура диссертации

Диссертация изложена на 93 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, глав с изложением материала и методов исследования, результатов собственных исследований, обсуждения, выводов, практических рекомендаций и указателя литературы, содержащего 7 отечественных и 123 зарубежных источников. Диссертация проиллюстрирована 24 таблицами и 21 рисунком.

Заключение диссертационного исследования на тему «Клиническое значение антител к нуклеосомам и белкам теплового шока при системной красной волчанке»

1. У пациентов СКВ частота обнаружения и средний уровень антител к нуклеосомам, гистонам Н2А и Н2В, низкомолекулярным белкам теплового шока — пептиду 22-45 цистеин и 42-76 был достоверно выше, чем в контрольной группе (здоровые доноры), и у пациентов РА и БШ (р по медицине, диссертация 2007 года, Котовская, Мария Андреевна

1. Избранные лекции по клинической ревматологии: Учебное пособие для слушателей институтов и факультетов последипломного образования / Под ред. Насоновой В.А., Бунчука Н.В. М.: Медицина, 2001. — 272 с.

2. Лим В. И., Аглямова Г. В. Принципы формирования пространственной структуры белков и нуклеиновых кислот. Стереохимическое моделирование // Молекулярная биология. 1999. — N 6. — С. 1027-1034.

3. Насонова В.А. Системная красная волчанка. М.: Медицина, 1972. — 143 с.

4. Насонова В.А. Системные заболевания соединительной ткани: этиология и патогенез // Врач. 2000. — N 9. — С. 3-5

5. Петушкова Е. В. Гистоны и перенос генетической информации: Пер. с англ. М., Лит, 1968. — 17 с.

6. Рациональная фармакотерапия ревматических заболеваний: Руководство для практикующих врачей / Под ред. Насоновой В.А., Насонова Е.Л. — М.: Литтерра, 2003. 507 с.

7. Реброва О.Ю. Статистический анализ медицинских данных. Применение пакета прикладных программ STATISTICA. М.: МедиаСфера, 2002. — 312 с.

8. ACR Ad Hoc Committee. The American College of Rheumatology Nomenclature and Case Definition for Neuropsychiatric Lupus Syndromes // Arthrit. Rheum. 1999. — V. 42. — P. 599-608.

9. Akashi Y., Yoshizawa N. Participation of histones and ubiquitin in lupus nephritis // Nippon Jinzo Gakkai Shi. 1995. — V. 37(8). — P. 462-467.

10. Amoura Z., Koutouzov S., Piette J.C. The role of nucleosome in lupus / Curr. Opin. Rheumatol. 2000. — 12. P. 369-373.

11. Amoura Z., Piette J.C., Bach J.F. et al. The key role of nucleosomes in lupus // Arthrit. Rheum. 1999. — V. 42. — P. 833-843.

12. Arndt V, Daniel C, Nastainczyk W. et al. BAG-2 acts as an inhibitor of the chaperone-associated ubiquitin ligase CHIP // Mol. Biol. Cell. 2005. — V. 16. -P. 5891-5900.

13. Arrigo AP. Heat shock proteins as molecular chaperones // Med. Sci. (Paris). -2005.-V. 21.-P. 619-625.

14. Arrigo AP. The cellular «networking» of mammalian Hsp27 and its functions in the control of protein folding, redox state and apoptosis //Adv. Exp. Med. Biol. -2007. V. 594.-P. 14-26.

15. Bartis D., Boldizsar F., Kvell K. et al. Intermolecular relations between the glucocorticoid receptor, ZAP-70 kinase, and Hsp-90 // Biochem. Biophys. Res. Commun. -2007. V. 2. P. — 253-258.

16. Beere H.M., Wolf B.B., Cain K. et al. Heat-shock protein 70 inhibits apoptosis by preventing recruitment of procaspase-9 to the Apaf-1 apoptosome //

17. Nat. Cell. Biol. 2000. V.8. P. — 469-475.

18. Bitar KN, Kaminski MS, Hailat N. et al. Hsp27 is a mediator of sustained smooth muscle contraction in response to bombesin //

19. Biochem. Biophys. Res. Commun. 1991.-V. 31. P. — 1192-1200.

20. Bombardier С., Gladman D.D., Urowitz M.B. et al. Derivation of the SLEDAI (a disease activity index for lupus patients) // Arthrit. Rheum. 1992. — V. 35. — P. 630-640.

21. Brodsky J.L., Bauerle M., Horst M. et al. Mitochondrial Hsp70 cannot replace BiP in driving protein translocation into the yeast endoplasmic reticulum // FEBS Lett. 1998. — V.18. -P. 183-186.

22. Burlingame R.W., Boey M.L., Starkebaum G. et al. The central role of chromatin in autoimmune responses to histones and DNA in systemic lupus erythematosus // J. Clin. Invest. 1994. — V. 94. — P. 184-192.

23. Burlingame RW, Cervera R. Anti-chromatin (anti-nucleosome) autoantibodies // Autoimmun Rev. 2002. — V. 1. — P.321-328.

24. Cairns A.P., McMillan S.A., Crockard A.D. et al. Antinucleosome antibodies in the diagnosis of systemic lupus erythematosus // Ann. Rheum. Dis. 2003. — V. 62.-P. 272-273.

25. Casciola-Rosen L.A., Anhalt G., Rosen A. Autoantigen targered in systemic lupus erythematosus are clustered in two populations of surface structures on apoptotic kerarinocytes // J. Exp. Med. 1994. — V. 179. — P.1317-1330.

26. Chabre H., Amoura Z., Piette J.C. et al. Presence of nucleosome restricted antibodies in patients with systemic lupus erythematosus // Arthrit. Rheum. — 1995. -V. 38.-P. 1485-1491.

27. Chirardello A., Doria A., Zampieri S. et al. Antinucleosome antibodies in SLE: a two-year follow-up study of 101 patients // J. Autoimmun. 2004. — V. 22. — P. 235-240.

28. Conroy S.E., Faulds G.B., Williams W. et al. Detection of autoantibodies to the 90 kDa heat shock protein in systemic lupus erythematosus and other autoimmune diseases // Br. J. Rheumatol. 1994. — V.33. — P.923-926.

29. Cutforth T, Rubin G.M. Mutations in Hsp83 and cdc37 impair signaling by the sevenless receptor tyrosine kinase in Drosophila // Cell. — 1994. V.77. — P. 1027-1036.

30. Decker P. Nucleosome autoantibodies // Clin. Chim. Acta. 2006. — V.366. -P.48-60.

31. Dix D.J. Hsp70 expression and function during gametogenesis // Cell Stress Chaperones. 1997.- V.2.-P.73-7.

32. Dokladny K., Wharton W., Lobb R. et al. Induction of physiological thermotol-erance in MDCK monolayers: contribution of heat shock protein 70 // Cell Stress Chaperones. 2006. — V. 11. — P.268-275.

33. Duncan RF. Inhibition of Hsp90 function delays and impairs recoveiy from heat shock // FEBS J. 2005. — V.272. — P.5244-5256.

34. Emlen W, Neibur J, Kadera R. Accelerated in vitro apoptosis of lymphocytes from patients with systemic lupus erythematosus // J. Immunol. 1994.1. V. 152. — P.3685-92.

35. Esser C., Alberti S., Hohfeld J. Cooperation of molecular chaperones with the ubiquitin/proteasome system // Biochim. Biophys. Acta. 2004. — V.29. -P.171-188.

36. Esser C., Scheffner M., Hohfeld J. The chaperone-associated ubiquitin ligase CHIP is able to target p53 for proteasomal degradation // J. Biol. Chem. 2005.- V.22. P. 27443-27448.

37. Eversole-Cire P., Concepcion F.A., Simon M.I.et al. Synergistic effect of Bcl-2 and BAG-1 on the prevention of photoreceptor cell death // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 2000. — V.41.-P.1953-61.

38. Eato (Sato) H, Miyata M, Kasukawa R. Expression of heat shock protein on lymphocytes in peripheral blood and synovial fluid from patients with rheumatoid arthritis. J Rheumatol. 1996 Dec;23(12):2027-32.

39. Fawcett T.W., Sylvester S.L., Sarge K.D. et al. Effects of neurohormonal stress and aging on the activation of mammalian heat shock factor 1 // J. Biol. Chem.- 1994. V.23. — P. 32272-32278.

40. Fournel S., Muller S. Anti-nucleosome antibodies and T-cells response in systemic lupus erythematosus // Ann. Med. Interne. 2002. — V.8. — P. 513-519.

41. Fournel S., Muller S. Synthetic peptides in the diagnosis of systemic autoimmune diseases // Curr. Protein Peptide Sci. 2003. — V.4. — P.261-276.

42. Fritzler M.J., Salazar M. Diversity and origin of rheumatologic autoantibodies. Clin. Microbiol. Rev. 1991. — V.4. — P.256-269.

43. Geissler A., Rassow J., Pfanner N. et al. Mitochondrial import driving forces: enhanced trapping by matrix Hsp70 stimulates translocation and reduces the membrane potential dependence of loosely folded preproteins //

44. Mol. Cell. Biol. 2001. — V.21. — P.7097-7104.

45. Gladman DD., Ibanez D., Urowitz MB SLEDAI 2000. J Rheumatol, 2002;29:288-291.

46. Haddouk S., Ben Ayed M., Baklouti S. et al. Autoantibodies in systemic lupus erythematosus: spectrum and clinical associations // Patholog. Biolog. — 2004. — V.53. -P.311-317.

47. Haddouk S., Ben Ayed S., Baklouti S. et al. Clinical significance of antinu-cleosome antibodies in Tunisian systemic lupus erythematosus patients / Clin. Rheumatol. 2005. — V.24. — P.219-222.

48. Hmida Y., Schmit P., Gilson G. et al. Falure to detect antinucleosome antibodies in scleroderma: comment on the article by Amoura et al. // Arthrit. Rheum. -2002.-V. 46.-P. 280-282.

49. Hochberg M.C. Updating the American College of Rheumatology revised criteria for the classification of systemic lupus erythematosus // Arthrit. Rheum. -1997.-V. 40.-P. 1725-1734.

50. Holtmann H., Winzen R., Holland P. et al. Induction of interleukin-8 synthesis integrates effects on transcription and mRNA degradation from at least three different cytokine- or stress-activated signal transduction pathways //

51. Mol. Cell. Biol. 1999.-V.19.-P. 6742-6753.

52. Horvath L., Czirjak L., Fekete B. et al. Levels of antibodies against Clq and 60 kDa family of heat shock proteins in the sera of patients with various autoimmune diseases // Immunol. Lett. 2001. — V.l. — P. 103-109.

53. Kiang J.G., Bowman P.D., Lu X. et al. Geldanamycin prevents hemorrhage-induced ATP loss by overexpressing inducible HSP70 and activating pyruvate dehydrogenase // Am. J. Physiol. Gastrointest. Liver. Physiol. 2006. — V.291. -P.l 17-127.

54. Kimura Y., Rutherford S.L., Miyata Y. et al. Cdc37 is a molecular chaperone with specific functions in signal transduction // Genes Dev. 1997. — V. 15. — P. 1775-1785.

55. KogaF., Xu W., Karpova T.S. et al. Hsp90 inhibition transiently activates Src kinase and promotes Src-dependent Akt and Erk activation // Proc. Natl. Acad. Sci. USA.- 2006. V.25. — P.l 1318-11322.

56. Koutouzov S., Jeronimo AL., Campos H. et al. Nucleosomes in the pathogenesis of systemic lupus erythematosus // Rheum. Dis. Clin. North Am. 2004. V.30. -P.529-558.

57. Latchman D.S., Isenberg D.A. The role of hsp90 in SLE // Autoimmunity. -1994.-V.19.-P.211-218.

58. Lavoie J.N., Hickey E., Weber L.A. et al. Modulation of actin microfilament dynamics and fluid phase pinocytosis by phosphorylation of heat shock protein 27 // J. Biol. Chem. 1993. — V. 15. — P.24210-24214.

59. Li G.C., Mivechi N.F., Weitzel G. Heat shock proteins, thermotolerance, and their relevance to clinical hyperthermia // Int. J. Hyperthermia. — 1995. — V.l 1. — P.459-488.

60. Loes van den Berg., Nossent H., Rekvig Ole. Prior anti-ds DNA antibody status does not predict later disease manifestations in systemic lupus erythematosus // Clin. Rheumatol. 2006. — V.25. — P.347-352.

61. Lovell R., Madden L., Carroll S. et al. The time-profile of the PBMC HSP70 response to in vitro heat shock appears temperature-dependent // Amino Acids. — 2006.-V.25.-P. 10- 12.

62. Mehler M.F., Marmur R., Gross R. et al. Cytokines regulate the cellular pheno-type of developing neural lineage species // Int. J. Dev. Neurosci. 1995. -V.13.-P. 213-40.

63. Min D.J., Kim S.J., Park S.H. et al. Anti-nucleosome antibodies: significance in lupus patients lacking anti-double-stranded DNA antibody // Clin. Exp. Rheumatol. 2002. — V.20. — P. 13-18.

64. Miyata M., Sato H., Kasukawa R. et al. Significance of endogenous heat shock protein in adjuvant arthritis // J. Rheumatol. 1999. — V.26. — P.2210-2214.

65. Mohan C., Adams S., Stanik V. et al. Nucleosome: a mojor immunogen for pathogenic autoantibody-inducing T cells in lupus // J. Exp. Med. 1993. — V. 177.-P. 1367-1368.

66. Mohan C., Liu C., Xie C., Williams R. Anti subnucleosome reactivities in systemic lupus erythematosus patients and their first-degree relatives / Clin. Exp. Immunol. — 2001. — V. 123. — P. 119-126.

67. Monestier M., Decker P., Briand J.P. et al. Molecular and structural properties of three autoimmune IgG monoclonal antibodies to histone H2B // J. Biol. Chem. -2000. V.275. — P.13558 — 13559.

68. Muller S., Briand J.P., Van Regenmortel M.H. Presence of antibodies to ubiq-uitin during the autoimmune response associated with systemic lupus erythematosus // Proc. Natl. Acad. Sci. USA.- 1988. V.85. — P. 8176-8180.

69. Neckers L. Development of small molecule Hsp90 inhibitors: utilizing both forward and reverse chemical genomics for drug identification // Curr. Med. Chem. 2003. — V.10. — P.733-739.

70. Ng K.P., Manson J.J., Rahman A. et al. Association of antinucleosome antibodies with disease flare in serologically active clinically quiescent patients with systemic lupus erythematosus // Arthritis Care & Research. 2006. — V.55. — P. 900-904.

71. Norton P.M., Isenberg D.A., Latchman D.S. Elevated levels of the 90 kd heat shock protein in a proportion of SLE patients with active disease //

72. J. Autoimmun. 1989. — V.2. — P. 187-195.

73. Pak M., Hoskins J.R., Singh S.K. et al. Concurrent chaperone and protease activities of ClpAP and the requirement for the N-terminal ClpA ATP binding site for chaperone activity // J. Biol. Chem. 1999.- V.2. — P. 19316-19322.

74. Papatheodorou P., Domanska G., Oxle M. The enteropathogenic Escherichia coli (EPEC) Map effector is imported into the mitochondrial matrix by the TOM/Hsp70 system and alters organelle morphology // Cell Microbiol. 2006. -V.8.-P. 677-89.

75. Park S.J., Suetsugu S., Takenawa T. Interaction of HSP90 to N-WASP leads to activation and protection from proteasome-dependent degradation // EMBO J. — 2005.-V.20.-P. 1557-1570.

76. Parsell DA, Lindquist S. The function of heat-shock proteins in stress tolerance: degradation and reactivation of damaged proteins // Annu. Rev. Genet. 1993. -V.27. — P.437-496.

77. Peng X., Guo X., Borkan S.C. Heat shock protein 90 stabilization of ErbB2 expression is disrupted by ATP depletion in myocytes // J. Biol. Chem. 2005. -V.13. -P.13148-13152.

78. Piper P.W., Truman A.W., Millson S.H. Hsp90 chaperone control over transcriptional regulation by the yeast Slt2(Mpkl)p and human ERK5 mitogen-activated protein kinases (MAPKs) // Biochem. Soc. Trans. 2006. — V.34. — P. 783-785.

79. Pisetsky D.S. Anti-DNA and autoantibodies // Curr. Opin. Rheumatol. 2000. -V.12. -P.364-368.

80. Qing G., Yan P., Xiao G. Hsp90 inhibition results in autophagy-mediated pro-teasome-independent degradation of IkappaB kinase (IKK) // Cell Res. 2006. — V.l6.-P. 895-901.

81. Rao H.Y., Yao K., Tang X.J. et al. Expression of heat shock protein 70 and heat shock protein 27 in lens epithelial cells induced by contusion and thermotoler-ance in rat model // Zhonghua Yan Ke Za Zhi. 2006. — V.42. — P. 241-245.

82. Rhodes A.D., Spitali M., Hutchinson G. et al. Expression, characterization and purification of simian immunodeficiency virus soluble, oligomerized gpl60 from mammalian cells // J. Gen. Virol. 1994. — V.75. — P. 207-213.

83. Ripley BJ, Isenberg DA, Latchman DS. Elevated levels of the 90 kDa heat shock protein (hsp90) in SLE correlate with levels of IL-6 and autoantibodies to hsp90 // J Autoimmun. 2001. — V. 17. — P. 341-346.

84. Ritossa F.Discovery of the heat shock response // Cell Stress Chaperones. — 1996. V.l. -P.97-98.

85. Rogalla Т., Ehrnsperger M., Preville X. et al. Regulation of Hsp27 oligomeri-zation, chaperone function, and protective activity against oxidative stress/tumor necrosis factor alpha by phosphorylation // J. Biol. Chem. 1999. — V.274. — P. 8947-8956.

86. Ruchalski К., Mao H., Li Z. et al. Distinct hsp70 domains mediate apoptosis-inducing factor release and nuclear accumulation // J. Biol. Chem. 2006. -V.24.-P.-7873-7880.

87. Saisoong S, Eiam-Ong S, Hanvivatvong O. Correlations between antinu-cleosome antibodies and anti-double-stranded DNA antibodies, СЗ, C4 and clinical activity in lupus patients // Clin. Exp. Rheumatol. 2006. — V. 24. -P. 51-58.

88. Sallai K., Nagy E., Derfalvy B. et al. Antinucleosome antibodies and decreased deoxyribonuclease activity in sera of patients with systemic lupus eruthematosus // Clin. Diagn. Labor. Immunol. 2005. — V.l. — P. 56-59.

89. Sanchez Y., Parsell D.A., Taulien J. et al. Genetic evidence for a functional relationship between Hsp 104 and Hsp70 // Bacteriol. 1993. — V.20. — P. 64846491.

90. Sato S., Kodera M., Haswgawa M. et al. Antinucleosome antibody is a major autoantibody in localized scleroderma // Br. J. Dermatol. 2004. — V. 151. — P. 1182-1188.

91. Shoenfeld Y., Gershwin M.E., Meroni P.L. Autoantibodies // Elservier. 2006. -P. 169-176.

92. Simon J.A., Cabiedes J., Ortiz E. et al. Anti-nucleosome antibodies in patients with systemic lupus erythematosus of recent onset. Potential utility as a diagnostic tool and disease activity marker // Rheumatol. 2005. — V.43. — P. 220-224.

93. Sondermann H., Scheufler C., Schneider C. et al. Structure of a Bag/Hsc70 complex: convergent functional evolution of Hsp70 nucleotide exchange factors //Science. -2001.-V. 23.-P. 1553-1557.

94. Stankiewicz A.R., Lachapelle G., Foo C.P. et al. Hsp70 inhibits heat-induced apoptosis upstream of mitochondria by preventing Bax translocation // J. Biol. Chem. 2005. — V. 18. — P. 38729-38739.

95. Steiman C.R. Free DNA in serum and plasma from normal adults // J. Clin. Invest. 1975. — V.56. — P. 512-515.

96. Su Y, Jia RL, Han L, Li ZG. Role of antinucleosome antibody in the diagnosis of systemic lupus erythematosus // Clinical Immunology. 2007. — V.122. -P.l 15-120.

97. Suer W., Dahnrich C., Schumberger W., Stocker W. Autoantibodies in SLE but not in scleroderma react with protein-stripped nucleosomes // J. Autoimmun. -2004.-V. 22.-P. 325-334.

98. Swiecki С., Stojadinovic A., Anderson J. et al. Effect of hyperglycemia and nitric oxide synthase inhibition on heat tolerance and induction of heat shock protein 72 kDa in vivo // Am. Surg. 2003. — V. 69. — P. 587- 592.

99. Tasneem S, Islam N, Ali R. Crossreactivity of SLE autoantibodies with 70 kDa heat shock proteins of Mycobacterium tuberculosis // Microbiol Immunol. 200. -V.45.-P. 841-846.

100. Terasawa K., Yoshimatsu K., Iemura S. Cdc37 interacts with the glycine-rich loop of Hsp90 client kinases // Mol. Cel.l Biol. 2006. — V. 26. — P. 3378-3389.

101. Textbook of biochemistry with clinical correlations // Ed. T.M. Devlin, Willy-Lyss, N.Y. -2002. P. 750-752, 1055-1073.

102. Vamvakas E.C. Meta-analyze of studies of the diagnostic accuracy of laboratory tests: a review of the concepts and methods // Arch. Pathol. Lab. Med. -1998.-V.122.-P. 675-686.

103. Villalta D., Tozzori R., Bizzaro N. et al. The relevance of autoantigen source and cutoff definition in antichromatin (nucleosome) antibody immunoassays. Ann. NY Acad. Sci.-2005.- V.1050.-P. 176-184.

104. Wang Q., Mosser D.D., Bag J. Induction of HSP70 expression and recruitment of HSC70 and HSP70 in the nucleus reduce aggregation of a polyalanine expansion mutant of PABPN1 in HeLa cells // Hum. Mol. Genet. 2005. — V.14. — P. 3673-3684.

105. Wickner S., Maurizi M.R. Here’s the hook: similar substrate binding sites in the chaperone domains of Clp and Lon // Proc. Natl. Acad. Sci. USA.- 1999. -V.20.-P. 8318-8320.

106. Willams RC, Malone CC., Decker P., Mufler S. Detection of nucleosome particles in serum and in plasma from patients with systemic lupus erythematousus using monoclenal antibody 4H7 // J. Rheumatol. 2001. — V.28. — P. 81-94.

107. Wright L., Barril X., Dymock B. et al. Structure-activity relationships in purine-based inhibitor binding to HSP90 isoforms. Chem. Biol. 2004. — V. 11. -P. 775-85.

108. Xu W., Yuan X., Beebe K., Xiang Z., Neckers L. Loss of Hsp90 association up-regulates Src-dependent ErbB2 activity // Mol. Cell. Biol. 2007. — V. — 27.- P. 220-228.

109. Yao K., Rao H., Wu R., Tang X., Xu W. Expression of Hsp70 and Hsp27 in lens epithelial cells in contused eye of rat modulated by thermotolerance or quercetin // Mol. Vis. 2006. — V. 9. — P. 445-450.

110. Yost H.J., Lindquist S. Translation of unspliced transcripts after heat shock // Science. -1988.-V. 16.-P. 1544-1548.

111. Yun B.G., Matts R.L. Differential effects of Hsp90 inhibition on protein kinases regulating signal transduction pathways required for myoblast differentiation // Exp. Cell. Res. 2005. — V. 307. — P. 212-223.

112. Zhang W., Hirshberg M., McLaughlin S.H. et al. Biochemical and structural studies of the interaction of Cdc37 with Hsp90 // J. Mol. Biol. 2004. — V. 16.- P. 891-907.

113. Zhao C., Hashiguchi A., Kondoh K. et al. Exogenous expression of heat shock protein 90kDa retards the cell cycle and impairs the heat shock response // Exp. Cell. Res. 2002. — V. 275. — P. 200-214.

источник