Для лечения печени наши читатели успешно используют Leviron Duo. Видя, такую популярность этого средства мы решили предложить его и вашему вниманию.
Подробнее здесь…
Причиной болезни является вирусный агент, который относится к РНК-содержащим возбудителям. Он имеет отличительную черту – способность мутировать, то есть изменять свою структуру. Благодаря этому инфекция ускользает от атаки иммунной системы и в большинстве случаев приводит к хронизации воспалительного процесса в печени.
Учитывая существование различных подтипов вируса, подбор лекарственных средств должен проводиться с учетом результатов генотипирования. Несмотря на длительное изучение болезни и особенностей строения HCV, до сих пор не удалось разработать специфическую прививку от заболевания.
Трудности ранней диагностики заключаются в бессимптомном течении гепатита, вследствие чего человек обращается к врачу на стадии цирроза. Чтобы вовремя обнаружить заболевание, требуется регулярное проведение медосмотров. Только путем лабораторного исследования крови удается выявить HCV и предупредить заражение окружающих. Дело в том, что носитель инфекции может длительное время не догадываться о патологии и продолжать передавать вирус здоровым людям.
Вирус в большинстве случаев распространяется через кровь, так как в ней содержится наибольшая концентрация патогенных агентов. Таким образом, инфекция передается:
- при гемодиализе;
- при уколе зараженной иглой;
- в процессе драки, когда травмируются кожные покровы, и происходит гемоконтакт;
- при гемотрансфузии (переливании крови).
Вероятность заражения при интимной близости незначительная, так как в сперме и выделениях из влагалища содержится небольшое количество возбудителей. Риск инфицирования существенно увеличивается при нарушении целостности слизистой гениталий. Такое наблюдается при агрессивном и анальном сексе.
Что касается вертикального способа передачи инфекции, то он осуществляется в процессе родовой деятельности. В периоде вынашивания плода возбудитель не может проникнуть через плаценту к эмбриону. При естественных родах патогенный агент передается ребенку при травмировании его кожи, когда наблюдается контакт с кровью матери.
После проникновения возбудителя в здоровый организм начинается синтез антител, которые являются защитой от инфекции и относятся к иммунным структурам. Именно они обнаруживаются при первичном исследовании человека с помощью ИФА.
Для подтверждения диагноза пациенту проводится полимеразная цепная реакция. Она представляет собой анализ на выявление генетического материала патогенного агента и определение вирусной нагрузки.
Лабораторная диагностика начинается с проведения иммуноферментного анализа. Основная его задача заключается в обнаружении антител, вырабатывающихся против возбудителя. Его эффективность – почти 95%. Благодаря этому исследованию на доклинической стадии удается выявить вирусоносителя и направить его на дальнейшее обследование.
Качественный анализ ИФА указывает на наличие или отсутствие иммуноглобулинов в крови пациента. Его результат может быть «положительный» или «отрицательный». Получив первый вариант ответа, человек направляется на следующее обследование – ПЦР. Его цена зависит от качества реактивов и лаборатории. Стоимость полимеразной цепной реакции может достигать 4 тысяч рублей.
С помощью полимеразной цепной реакции даже небольшой объем биологического материала позволяет оценить вирусную нагрузку в крови, то есть подсчитать концентрацию возбудителей в одном миллилитре жидкости.
С появлением ПЦР диагностика гепатита значительно упростилась. Анализ дает возможность выявить РНК HCV, установить стадию инфекционного процесса и заразность вирусоносителя.
Существует несколько разновидностей генетической диагностики:
- качественный анализ ПЦР на гепатит С – подтверждает факт наличия или отсутствия HCV в крови обследуемого:
- количественный, благодаря которому можно подсчитать концентрацию вирусов и установить стадию болезни. Результат выдается в МЕ/мл или копии/мл (в зависимости от лаборатории);
- генотипирование – необходимо для определения генотипа HCV. Это требуется для точного подбора лекарственных средств, которые будут максимально эффективны в данном случае. Анализ косвенно указывает на тяжесть патологического процесса в печени. Так, при третьем генотипе возбудителя чаще всего наблюдается стеатоз, в основе развития которого лежит накопление жира в гепатоцитах (ее клетках). Помимо этого, тип вируса влияет на результат и продолжительность терапевтического курса.
Первым делом в лаборатории биологический материал исследуется на наличие РНК HCV. Важно помнить, что качественный анализ на гепатит С имеет определенный уровень чувствительности, в связи с чем не всегда может давать верный ответ. В таком случае рекомендуется повторное проведение лабораторной диагностики с применением других реактивов.
Для получения достоверных результатов следует использовать тест-системы с чувствительностью – не ниже 50 МЕ/мл.
Результат диагностики может быть как «положительный», так и «отрицательный». Если возбудитель не найден в крови, исследование завершается. При выявлении патогенного агента в образце далее проводится количественный подсчет вирусной нагрузки.
Ложноотрицательный ответ получается, когда нарушается технологический процесс, например, в среду попадают активные компоненты, угнетающие построение копий возбудителя. Таким образом не удается отобразить истинную картину крови, из-за чего инфицирование человека не диагностируется.
Ложноположительный результат можно получить, если пробирка для забора биологического материала, а также среда для проведения исследования были загрязнены. Помимо этого, такой ответ анализа возможен при микст-инфекции, когда печень поражается несколькими вирусами, например, гепатитом С и D.
Врач может назначать пациенту качественное исследование на выявление РНК вируса гепатита С:
- при получении положительного или сомнительного ответа иммуноферментной диагностики;
- для верификации диагноза;
- определения вирусной нагрузки;
- постановки стадии заболевания;
- диагностики микст-инфекции. Зачастую гепатит С поражает печень одновременно с вирусом «D»;
- определения терапевтической тактики с учетом генотипа возбудителя;
- оценки динамики изменений на фоне лечения противовирусными медикаментами.
К преимуществам полимеразной цепной реакции относится:
- высокая чувствительность методики, что позволяет установить факт инфицирования на доклинической стадии;
- выявление генетического материала возбудителя, а не антител к нему;
- возможность установления субтипа патогенного агента;
- высокая скорость диагностики, так как не требуется посев материала на питательную среду, а достаточно использовать специфические тест-системы. Человек получает результат спустя 5 часов;
- универсальность. Анализ позволяет выявить любой генетический материал (РНК, ДНК). Благодаря этому врач может подтвердить гепатит С и другие виды болезни (В);
- возможность выявления скрытой инфекции.
При исследовании крови с помощью полимеразной цепной реакции удается подсчитать количество возбудителей в фиксированном объеме биологического материала. Показатель представлен в МЕ/мл. Благодаря анализу можно установить степень заразности пациента, определить стадию инфекционного процесса, а также оценить эффективность лекарственной терапии.
На основании ПЦР специалист решает, какие дозы медикаментов позволяют блокировать размножение возбудителей. Кроме того, определяется длительность противовирусного лечения и прогноз для жизни. Важно помнить, что тест-системы имеют высокую чувствительность, поэтому метод дает возможность подтвердить инфицирование человека еще на доклинической стадии.
Учитывая способность возбудителя мутировать, для определения тактики лечения и выбора противовирусных лекарств необходим его генотип. Например, лечение гепатита HCV 1 длится 48 недель, при этом положительная динамика отмечается лишь в 60% случаев. Генотипы 2 и 3 имеют более благоприятный прогноз. Противовирусные лекарства назначаются на 8 месяцев, а их эффективность достигает 85%.
Согласно статистическим данным, в большинстве случаев на территории Российской Федерации регистрируется HCV 1, 2 и 3.
При расшифровке лабораторного исследования может быть указан такой ответ – «не типируется». Это значит, что в кровеносной системе больного циркулирует вирус, которого не удается распознать тест-системой. Результат анализа в данном случае свидетельствует о заражении человека нетипичным для данной географической зоны возбудителем.
Чтобы качественное исследование ПЦР по выявлению РНК возбудителя гепатита С показало правильные результаты, необходимо соблюдать требования по подготовке к лабораторной диагностике:
- забор крови осуществляется натощак, причем «голодный» промежуток не должен быть короче 8-ми часов;
- за два дня до исследования рекомендуется прекратить распитие спиртных напитков и отказаться от острых, жирных и копченых блюд;
- отменить введение лекарственных средств, снижающих свертываемость крови, например, гепарина. Если данные медикаменты назначены по жизненным показаниям, необходимо предупредить об этом врача. Кроме того, специалист должен знать о приеме других препаратов, которые могут повлиять на результат лабораторного исследования;
- накануне забора биологического материала не следует проводить физиотерапевтические процедуры и подвергать себя тяжелой физической нагрузке.
На результаты анализа может влиять не только человек, сдающий кровь, но и другие факторы, а именно:
- некачественный забор крови;
- несоблюдение рекомендаций по транспортировке биологического материала;
- недостаточная профессиональная подготовка работников лаборатории;
- несоблюдение техники проведения исследования;
- введение антикоагулянтов (гепарина) накануне забора крови. Данная группа лекарств снижает свертываемость, тем самым замедляя работу реактивов.
В разных лабораториях ответ диагностики может несколько отличаться, однако эти погрешности не влияют на конечный результат исследования.
Особое внимание уделяется видам тест-систем, которые используются в лаборатории. Зачастую предпочтение отдается реактивам с высокой чувствительностью. Это важно для пациентов с низкой вирусной нагрузкой, поскольку ее сложно обнаружить.
Первично полимеразная цепная реакция проводится людям, у которых при иммуноферментном анализе были выявлены антитела к возбудителю гепатита. В данном случае она назначается для подтверждения факта заражения человека и установления стадии болезни. Кроме того, анализ позволяет определить субтип вируса, что особенно важно для выбора лекарственных средств.
Следующим периодом для обязательного лабораторного исследования является 3 месяца от начала противовирусной терапии. Диагностика дает возможность оценить эффективность медикаментов, откорректировать дозу или заменить их.
Помимо основных анализов, ПЦР может дополнительно проводиться на 4 и 24 неделях от начала лечения. Положительный прогноз болезни подтверждается уменьшением вирусной нагрузки по истечении трех месяцев терапии. Так, например, она должна снизиться с 1 миллиона МЕ/мл до нескольких сотен тысяч.
Если концентрация патогенных агентов в крови остается на прежнем уровне или несколько нарастает, это указывает на неэффективность противовирусных средств и требует их замены. С помощью ПЦР в конце лечения удается подтвердить выздоровление пациента.
Чтобы правильно трактовать результаты лабораторной диагностики, требуется консультация гепатолога или инфекциониста. Учитывая большую частоту ложных ответов при ИФА, анализ используют исключительно для первичного скрининга. Для более тщательного обследования пациента применяется полимеразная цепная реакция.
- 1 Вирусная нагрузка, зачем ее определяют при гепатите?
- 2 Как определяется?
- 3 Расшифровка результатов
- 4 Может ли быть ошибка в таблицах?
- 5 Сроки проведения анализа и пределы
- 6 Как снизить вирусную нагрузку?
Определяется вирусная нагрузка при гепатите С для того, чтобы установить концентрацию патогенных микроорганизмов в крови. Вирусная инфекция может протекать бессимптомно, анализ показывает динамику вирусных тел и вероятность ремиссивного состояния. Нагрузка позволяет проследить реакцию организма и назначить дальнейшую схему лечения. Гепатит С имеет острую форму и хроническую, но при каждом состоянии болезнь требует к себе особого внимания.
Вирусная нагрузка — это определение концентрации вирусных рибонуклеиновых кислот в крови, очень важно контролировать уровень нагрузки. В медицинской практике используют несколько тестов для ее определения. Вирусы — это неполноценные микроорганизмы, они встраиваются в клеточную структуру и начинают их разрушать. Так происходит и с клетками печени при заболевании, именно поэтому вовремя поставленный диагноз убережет от необратимых процессов.
Если в организме пациента выявлены антитела РНК к гепатиту С, возникает необходимость установить их количество. Кровь забирается с вены утром натощак, курящие должны воздержаться от сигарет за 40 минут до сдачи образцов. Для диагнострования используют 3 распространенных теста:
- Метод ДНК. Направлен на установление нагрузки, при показателе не ниже 5000 международных единиц на миллилитр. К сожалению, он обладает маленькой чувствительностью, но доступен для всех людей и прост в проведении.
- Определение вирусной нагрузки с помощью транскрипционной амплификации. Метод основан на обнаружении генетического материала. Основное преимущество — высокая чувствительность даже к несущественным показателям.
- Полимеразная цепная реакция. Также относится к ряду сверхчувствительный тестов, он помогает выявить заболевание на ранних стадиях развития. Если в крови обнаружены РНК, значит лечение движется в правильном направлении. После исследования обязательно назначается УЗИ печени и забор биоматериала.
Всего различают два вида определения нагрузки: качественный и количественный. Качественная направлена на выявление наличия вирусной инфекции. Соответственно ответ будет получен положительный либо отрицательный. Количественный используется для получения результатов в единицах, используется на более поздних стадиях болезни. Это необходимо для корректирования терапии и выявления общей картины.
РНК в капле крови свидетельствует о вирусной нагрузке.
Норма у взрослых на вирусную нагрузку является отсутствие РНК в крови. Если они все же были выявлены, сдается образец повторно. Высокий показатель свидетельствует о структурно-функциональном нарушении печени. Отрицательный показатель говорит о мизерном содержании либо неправильно выполненном хранении материала. Рекомендуется проводить тест в одном и том же месте, во избежание существенно разных результатов.
Чем выше нормы концентрация вируса гепатита С, тем опаснее человек для окружающих людей. Средняя концентрация позволяет проводить адекватную терапию, что приведет к скорому выздоровлению.
При получении бланка с результатами будет приведена таблица с количественными данными:
Ответ анализа (МЕ/мл) | Что означает |
---|---|
Не обнаружено | Это норма количественного анализа на гепатит С, что свидетельствует о том, что возбудитель не найдет, или его концентрация находится ниже уровня чувствительности методики |
До 1,8*10^2 | Содержание патогенного агента ниже нормы |
До 8*10^5 | Низкая вирусная нагрузка, что указывает на благоприятный прогноз и эффективную терапию |
Более 8*10^5 | Возбудитель обнаружен — большая нагрузка. |
Выше 2,4*10^7 | Концентрация вируса значительно превышает линейный диапазон |
Концентрация патогенного агента определяется амплификатором и сравнивается с диапазоном, границы которого от 1,8*10^2 до 2,4*10^7. Благодаря регулярному обследованию вирусоносителя удается своевременно обнаружить увеличение вирусной нагрузки, что подтверждает активацию возбудителя и обострение болезни.
На результаты ПЦР могут влиять некоторые факторы:
- некачественный сбор материала;
- введение гепарина накануне исследования. Он относится к лекарственным средствам, которые уменьшают свертываемость крови, тем самым замедляя действие реактивов ПЦР;
- несоблюдение правил транспортировки материала;
- низкий уровень профессионализма врачей-лаборантов;
- несоблюдение техники проведения анализа.
Норма количественного исследования на определение РНК вируса гепатита С может несколько отличаться в разных лабораториях, однако эти погрешности зачастую не влияют на конечный результат обследования. Не последнюю роль играет вид тест-систем, а именно их чувствительность. Это особенно важно для пациентов с невысокой вирусной нагрузкой, которую некоторые лаборатории могут не обнаружить.
Лабораторная диагностика проводится на этапе обнаружения гепатита С, в процессе лечения, а также после проведенной терапии. Это дает возможность правильно установить субтип возбудителя, подобрать эффективные лекарства и отследить динамику изменений на фоне их приема.
Кроме того, исследование крови позволяет подтвердить выздоровление или хронизацию инфекционно-воспалительного процесса. Обязательным считается анализ перед началом терапии и спустя 3 месяца, что необходимо для оценки динамики и эффективности выбранных противовирусных средств.
Дополнительно врач назначает ПЦР на 4 и 24 неделях терапии. О благоприятном прогнозе можно говорить при снижении вирусной нагрузки к концу третьего месяца. Например, при ее уменьшении с 1 млн МЕ/мл до 100 тысяч. Если концентрация возбудителей остается на прежнем уровне или несколько увеличивается, значит, противовирусные медикаменты неэффективны, и требуется их замена или добавление новых.
В случае медленного снижения уровня патогенных агентов в крови врач может продлить лечение или наоборот, отменить препараты, получив отрицательный ответ ПЦР.
При получении положительного результата лабораторной диагностики следует немедленно обратиться к инфекционисту, поскольку успех в лечении напрямую зависит от стадии, на которой был поставлен диагноз гепатита С и начата терапия. Кроме того, необходимо помнить о риске заражения окружающих, поэтому прием противовирусных препаратов важен не только для инфицированного, но и для его родственников.
источник
Гепатит Ц — вирусное заболевание, поражающие жизненно важный орган человека. Для того чтобы определить степень и тип болезни, а также назначить эффективное лечение, стоит пройти качественный анализ на гепатит С в крови.
ПЦР проводимый качественный анализ на гепатит С изучает ДНК вируса. Размер вириона данного теста равен 30-60 нм. Врачи отмечают, что данный микроорганизм способен мутировать за неопределенный промежуток времени. Более информативными результаты теста являются в утренние часы: с 08:00 до 11:00 и натощак.
Стоит отметить, что ПЦР делится на три вида: количественный, качественный и генотипирование. По мнению специалистов, количественный более информативен, так как указывает на вирусную нагрузку, определяющую объем РНК инфекции. Также такой тест назначается пациента в начале назначения лечения и контроля на 12 неделе уже выбранного метода борьбы с вирусом.
Генотипирование устанавливает разновидность генотипа, располагающегося в крови больного.
Согласно медицинской практике, качественный анализ особо применяем при установлении факта зараженности на 1-3 неделе инфицирования. Но даже пройдя тест, результаты которого окажутся отрицательными, человек может быть переносчиком болезни. Поэтому врачи рекомендуют повторить исследование через 10 дней.
Анализ ПЦР на гепатит С качественный имеет основное преимущество — можно сдавать спустя полторы-две недели после инфицирования, тогда когда количественный можно проводить спустя 4,12,24 недели. Врачи отмечают, что иногда результаты обоих исследований могут сами себе противоречить. Этому способствует, например, состояние больного: беременность, или загрязнение приборов для забора крови, или несоблюдение преддианостических правил пациентом.
К основным плюсам количественного метода можно отнести:
- выявление генетической предрасположенности к болезни,
- определение источника возбудителя вируса,
- высокая чувствительность компонентов исследования.
Самым основным недостатком качественного метода считается ложноположительный или ложноотрицательный результат.
Для того чтобы расшифровать результат, полученный качественным методом, следует обратить особое внимание на их интерпретацию: “положительный”, и “отрицательный”. Первый свидетельствует о том, что в организме есть РНК вируса. Тем, у кого диагностировали инфекцию в будущем назначают и количественную диагностику.
Но интерпретировать показания результата способен только врач.
Если у человека установили результат “отрицательный”, то в организме у пациента не обнаружено тел вируса, следовательно обратившийся человек здоров. Но врачи рекомендуют сдавать данный анализ повторно, через 10 дней, для того чтобы всецело убедиться в постановке результата.
Специалисты обращают внимание на то, что необходимо проводить исследование с использованием высокого порога чувствительности компонентов диагностики — 50 МЕ/мл. Данной цифре соответствуют Cobas test, РеалБест (15 МЕ/мл).
Показатель при особой чувствительности не должен превышать 600 МЕ/мл, тогда пациент полностью здоров. Если показатели зашкаливают, то необходимо провести количественный анализ, который поможет узнать очаг появления вируса.
Разновидность систем исследования присутствия или отсутствия болезни зависит от цели диагностики: тест проводится впервые или вторично. Это необходимо для получения максимально точного результата.
Например: если больной уже проходит лечение от гепатита С, но врач его сомневается в эффективности назначенного лечения или наоборот хочет определить степень прогрессии, то в таком случае специалист ПЦР будет использовать систему с 50 МЕ/мл чувствительностью и более. К примеру, анализаторы: Cobas Ampicolor — Test и РеалсБест ВГС.
Также помимо ПЦР актуален и метод ТМА (транскрипционной амплификации), при котором степень диагностируемой чувствительности намного выше. Но и стоит он намного дороже.
Чаще всего данный анализ назначают при появлении первых симптомов патологии печени, обследовании, диагностике гепатита, при установлении активности/пассивности формы протекания болезни, циррозе печени или определении эффективности уже назначенного метода лечения.
Если у вас есть подозрения на гепатит С, то данный анализ сможет подтвердить или развеять опасения. Так же ознакомьтесь с возможными путями инфицирования гепатитом С в этой статье.
Качественный анализ помогает выявить присутствие/отсутствие болезни. Но как и в любой диагностике существуют свои отклонения: антитела JgM обнаружены в крови, то болезнь протекает остро и мучительно. Если при уже имеющемся лечении данный показатель снижается, то это говорит о том, что пациент на этапе выздоровления.
Лучше всего сдавать анализ в лаборатории при больнице, где Вы наблюдаетесь. Но если есть возможность, то и в любой платной лаборатории тоже можно. Главное, повторяющиеся или иные анализы, сдавать только в одной клинике, если, конечно, там не поставили ошибочный диагноз. Это обусловлено тем, что у каждой лаборатории свои нормативные показатели, которые зависят от технике, на которой проводят исследование. Поэтому даже тот же показатель 600 МЕ/мл в одной лаборатории будет считаться нормой, а в другой — уже сигналом для установления диагноза “гепатит С”. Поэтому следите за соблюдением таких элементарных вещей, из-за которых Вам могут поставить ошибочный диагноз.
На сегодняшний день, в мире уже появились препараты от гепатита С с эффективностью приближенной к 100% Современная фарм промышленность создала лекарства, которые практически не имеют побочных эффектов. Многие пациенты получают первые результаты в виде облегчения симптомов и снижения вирусной нагрузки уже через неделю приёма. Как действуют дженерики от гепатит с из Индии можно узнать тут.
источник
Вирусный гепатит С — тяжелое заболевание, которое протекает с поражением печени. У восьмидесяти процентов больных оно переходит в хроническую форму. Вирус размножается в клетках печени — гепатоцитах — и вызывает их гибель. Отмершая ткань замещается очагами соединительной ткани, развивается фиброз.
По мере развития фиброза печень оказывается неспособна выполнять свои функции, начинается цирроз печени, который опасен своими осложнениями: повышением давления в системе портальной вены, желудочно-кишечными кровотечениями, нарушением свертывания крови, изменениями психики из-за повреждения ядер головного мозга токсическими продуктами.
Причина заболевания — заражение вирусом из семейства Flaviviridae, который относится к типу РНК-вирусов. Это значит, что генетический материал, по которому синтезируются белки возбудителя, закодирован в молекуле рибонуклеиновой кислоты. Заражение происходит через кровь, половым путем, и от беременной женщины к плоду. К сожалению, между инфицированием и началом выработки антител может пройти достаточно большое количество времени — от двух недель до шести месяцев. Это не дает определить заражение методом иммуноферментного анализа и начать лечение на ранних стадиях.
ПЦР — метод молекулярного анализа, который позволяет обнаружить генетический материал возбудителя уже на первой неделе после инфицирования с помощью полимеразной цепной реакции. Исследование обладает высокой специфичностью, точностью, и позволяет не только определить наличие или отсутствие вируса, но и его концентрацию и генотип.
Для исследования берут кровь пациента, в которой потенциально может находиться РНК вируса. В кровь добавляют праймеры — искусственно синтезированные участки искомого гена малой длины, и РНК-полимеразу — специальный фермент, который многократно увеличивает количество генетического материала возбудителя. С помощью специального аппарата проводят несколько циклов нагревания и охлаждения. Затем материал анализируют и сопоставляют с известными генами вируса, на основе чего делают заключение о наличии или отсутствии заражения.
Различают три вида ПЦР-анализа:
- Качественный анализ ПЦР . Первая стадия исследования. Он позволяет выявить генетический материал вируса в крови.
Количественный анализ ПЦР . Позволяет определить вирусную нагрузку — концентрацию генетического материала возбудителя в одном миллилитре крови. Это исследование проводят перед началом терапии, а затем на первой, четвертой, двенадцатой и (если курс длительный) двадцать четвертой неделе лечения, чтобы оценить его эффективность.
ПЦР-исследование назначают в следующих случаях:
- контакт с больным человеком, при котором могло произойти заражение;
- положительный результат иммуноферментного анализа;
- признаки цирроза печени: изменение размеров печени, увеличение селезенки, появление на животе подкожного венозного сплетения;
- появление симптомов поражения печени: боли в правой части живота, пожелтение кожных покровов;
- повышение активности АЛТ и АСТ в биохимическом анализе крови;
- перед началом лечения для определения вирусной нагрузки;
- с целью контроля за эффективностью антивирусной терапии;
- после окончания лечения для контроля за рецидивами;
- при наличии диагностированного гепатита B, для исключения смешанного поражения печени.
Расшифровкой ПЦР-анализа и иммуноферментного анализа на гепатит С должен заниматься гепатолог или инфекционист. Анализировать результаты ПЦР необходимо в комплексе с данными биохимического анализа крови, биопсии и УЗИ. Только квалифицированный врач сможет проанализировать результаты исследований и, основываясь на них, назначить правильное лечение.
В анализируемом биологическом материале обнаружен генетический материал возбудителя. Инфицирование подтверждено.
Инфицирование отсутствует, либо количество РНК возбудителя ниже границы чувствительности.
Нормальный показатель для здоровых людей. Означает, что в исследуемом материале отсутствует РНК гепатита С, либо его концентрация ниже порога чувствительности исследования.
Концентрация РНК ниже диапазона количественного определения. Такие результаты интерпретируют очень осторожно, соотносят их с данными других исследований, часто проводят повторное исследование.
Уровень вирусной нагрузки при данной концентрации считается низким. Обычно снижение количества вируса означает, что терапия идет успешно.
Уровень вирусной нагрузки при данной концентрации считается высоким.
Количество РНК выше верхнего предела диапазона количественного определения. Делать выводы о степени вирусной нагрузки при таком результате нельзя. Обычно в таких случаях тест повторяют с разведением образца крови.
Обнаружена РНК определенного генотипа
В биоматериале обнаружен вирус гепатита С определенного генотипа и субтипа. Результат кодируется римскими цифрами и латинскими буквами, например — 1а, 2b. Всего существует семь генотипов и шестьдесят семь субтипов, однако в России встречаются только три первых типа.
Обнаружена РНК вируса гепатита С
В крови обнаружена РНК редкого для России генотипа, который нельзя отнести к первому, второму или третьему типу. Необходимы дополнительные исследования.
Данный результат говорит о том, что пациент здоров, или о том, что колчество РНК возбудителя слишком мала.
Возможна ситуация, когда ПЦР-анализ на гепатит С отрицательный, а иммуноферментный анализ распознает антитела против вируса. Это значит, что пациент переболел гепатитом С в острой форме и излечился самостоятельно. Примерно двадцать случаев инфицирования заканчиваются самопроизвольным излечением, если организм пациента оказывает достаточное сопротивление инфекции.
Несмотря на то, что ПЦР — высокоточный анализ, его результаты могут быть искажены в следующих ситуациях:
- кровь транспортировалась в лабораторию в ненадлежащих условиях, был нарушен температурный режим;
- образец биоматериала был загрязнен;
- в крови находились остаточные следы гепарина и других антикоагулянтов;
- в исследуемом веществе оказались ингибиторы — вещества, которые замедляют или останавливают полимеразную цепную реакцию.
- Диагностика на ранних стадиях . ПЦР обнаруживает генетический материал возбудителя заболевания. С помощью иммунофлюоресцентного анализа можно определить только иммуноглобулины — вещества, которые организм вырабатывает в ответ на инфекцию. В случае заражения гепатитом С промежуток между заражением и началом иммунного ответа может составлять несколько недель и месяцев, в это время ИФА будет неэффективна. ПЦР даст ответ уже на первой неделе после заражения.
Низкая вероятность ошибки . В исследуемом материале определяют участок генетического материала, который характерен только для одного вида возбудителей. Это позволяет исключить ложные результаты. При ИФА возможны ошибки, так как один и тот же вид антител может выделяться против разных вирусов — такие антитела называют перекрестными.
Для ПЦР-анализа на гепатит С собирают венозную кровь. Обычно из вены пациента за один раз берут две порции крови: первую отправляют на ПЦР, а вторую на ИФА. Это делают для того чтобы более точно оценить, насколько сильно пациент заражен вирусом, и как иммунитет борется с ним.
Обычно от пациента требуют соблюдения следующих правил:
- анализ крови сдают с утра;
- перерыв между последним приемом пищи и сдачей крови должен составлять восемь-десять часов;
- за два-три дня до анализа нужно отказаться от жареной и жирной пищи, и алкоголя;
- в течение двадцати четырех часов перед анализом пациент должен избегать физических нагрузок: не переносить тяжестей, не посещать спортзал или бассейн.
источник
Для постановки диагноза «хронический вирусный гепатит С (ХВГС)» требуется комплексное обследование человека, которое включает клинические, лабораторные и инструментальные исследования. Важным с точки зрения диагностики для постановки правильного диагноза является метод ПЦР – полимеразная цепная реакция.
Этим лабораторным методом обнаруживают РНК вируса гепатита С в крови человека. Вместе с иммуноферментным анализом (ИФА) на антитела к вирусу, ПЦР используют для постановки диагноза ХВГС и генотипа его возбудителя. Это исследование является одним из новейших методов лабораторной диагностики. Его достоверность при ХВГС превышает 97%, что считается очень хорошим показателем для исследований.
Существует три ПЦР анализа крови при ХВГС: качественный, количественный и генотипирование вируса. Первое исследование (качественный анализ) на вирус обнаруживает его в крови, поэтому используется только для постановки диагноза.
Второе (количественное) исследование определяет степень вирусной нагрузки на организм, поэтому применяется для контроля эффективности терапии.
Третий ПЦР (генотипирование) уточняет диагноз, устанавливая генотип вируса, что очень важно для назначения правильного противовирусного лечения.
Суть методики полимеразной цепной реакции заключается в использовании ферментов, которые многократно размножают генетический материал возбудителя в биоматериале. В процессе такой репликации пробирку с кровью несколько раз подогревают и охлаждают до температуры, необходимой для ускорения ферментативной реакции. В результате этих манипуляций количество вирусного генома многократно увеличивается, что позволяет его выявить даже при минимальном количестве.
ПЦР диагностика имеет много преимуществ перед другими лабораторными исследованиями:
- высокая чувствительность – 97-98%;
- гарантированная аналитическая специфичность (выявляет именно тот возбудитель, который требуется найти, а не его родственный штамм);
- быстрота проведения (требуется не более 2 суток для получения заключения).
Качественный ПЦР анализ назначается всем пациентам, у кого ИФА-анализом были выявлены антитела к вирусу ХВГС. После проведения качественного ПЦР может быть получено два варианта ответа: «РНК обнаружено» или «РНК не обнаружено». Чтобы обнаружить в крови минимальное количество вируса, необходимы тест-системы с чувствительностью не менее 50 МЕ/мл. Если концентрация вируса в крови больного будет меньше, чем может определить диагностикум, то результат исследования может быть и ложноотрицательным. Чтобы избежать такой диагностической ошибки, лаборатории, осуществляющие ПЦР-диагностику, должны быть обеспечены высокочувствительными тест-системами. В лаборатории «Инвитро», к примеру, используются тесты с чувствительностью от 15 МЕ/мл. Информацию о чувствительности тестов работники лаборатории обязаны предоставлять пациентам и врачам по их первому требованию.
Количественный анализ ПЦР определяет степень виремии, то есть концентрацию возбудителя в крови, вирусную нагрузку. Результат этого исследования, в отличие от качественного ПЦР, выражается цифрами, например, 2×10*6 МЕ/мл, что означает 2 миллиона международных единиц в 1 мл крови. Часть лабораторий применяет другой показатель – число копий/мл. Эти два показателя легко конвертировать: 1 международная единица равна 4 копиям РНК. Таким образом, 2×10*6 МЕ/мл будет означать, что в крови больного обнаружено 8×10*6 копий вирусной РНК в 1 мл, т.е. 8 млн. копий в 1мл крови.
Генотипирование – это определение одного из шести генотипов вируса. От генотипа возбудителя зависит клиническая картина, скорость развития осложнений со стороны печени и прогноз для дальнейшей жизни пациента. Генотип вируса очень важен уже на стадии постановки диагноза, поскольку от его правильного определения зависит комбинация препаратов и длительность терапевтического курса, который будет назначен больному.
Однако даже такое казалось бы «идеальное» лабораторное исследование имеет свои минусы:
- в ходе исследования происходит репликация генетического материала всех возбудителей, даже неживых, что может исказить результат. Поэтому для осуществления контроля эффективности с помощью ПЦР повторный анализ проводят не ранее, чем через 2 месяца после предыдущего, чтобы погибшие вирусы успели «покинуть» организм больного;
- часть вирусного генома, который определяют с помощью тест-систем, теоретически может присутствовать и в других вирусах или микроорганизмах, поэтому есть вероятность ложноположительного ответа;
- вирусы быстро мутируют. Иногда скорость и степень мутирования вируса настолько высока, что тест-система перестает улавливать их геном. Как следствие, возможен ложноотрицательный результат.
Для нивелирования этих недостатков, производители лабораторных тест-систем для ПЦР диагностики постоянно проводят их испытания, в том числе на перекрестные реакции и на чувствительность к тому или иному генотипу вируса.
Чтобы заключение обследования методом ПЦР были достоверными, необходимо строго соблюдать правила подготовки к его проведению:
- исследование проводится на голодный желудок (глюкоза, жиры, минералы, попадающие в кровь из пищи, могут повлиять на скорость и качество ферментной реакции);
- разрыв между последним приемом пищи и отбором крови для анализа должен составлять не менее 8 часов;
- накануне исследования запрещено принимать алкоголь и употреблять жирную пищу, период выведения которых затяжной;
- за сутки до похода в лабораторию следует избегать сильных физических и эмоциональных нагрузок;
- до момента забора крови не рекомендуется курить.
Чтобы избежать появления ложных заключений, предполагаемому больному необходимо прийти в лабораторию немного раньше, чем будет проведен забор крови. Нужно 15-20 минут для того, чтобы человек отдышался, успокоился. Адреналин, присутствующий в крови после быстрой ходьбы, может повлиять на результат обследования.
Если направляемый на анализ пациент принимает какие-либо лекарственные препараты, об этом он должен уведомить врача. Вполне возможно, что от приема некоторых из них придется на некоторое время отказаться (если это возможно).
Расшифровкой результатов занимается врач-лаборант той лаборатории, которая проводила анализ. Расшифровка – это определение отклонения полученного результата от нормы. Норма показателей устанавливается непосредственно производителем тест-системы, которая используется лабораторией для диагностики. Поэтому не стоит удивляться, что в одних лабораториях вирусную нагрузку определяют в МЕ/мл, а в других – в копиях/мл.
Получив заключение, его нужно уметь правильно трактовать. Трактовкой результатов исследования должен заниматься лечащий врач больного гепатитом С. Только после объективного, инструментального и лабораторного обследования пациента, врач может получить достаточное количество данных для грамотной трактовки полученных результатов ПЦР.
Оценка качественного анализа, как правило, не вызывает затруднений, даже у пациентов. Результат там может быть только один: «обнаружен» или «не обнаружен». При этом второй из них является нормой.
Показатели количественного анализа трактовать сложнее. Он показывает степень вирусной нагрузки на пациента. Даже среди гепатологов нет единого мнения по поводу того, как трактовать обнаруженную виремию. Большинство врачей склоняются к тому, что высокой нужно считать нагрузку более 8×10*5 МЕ/мл. Очень высокой считается нагрузка более 1×10*7 МЕ/мл, а низкой – менее 4×10*5 МЕ/мл.
Степень вирусной нагрузки говорит о вирулентности (агрессивности) вируса: чем больше его количество в крови, тем быстрее могут развиваться осложнения со стороны печени. Высокая концентрация вируса в крови беременной женщины повышает вероятность его проникновения через гематоплацентарный барьер к плоду. Виремия также влияет на эффективность лечения: при низких цифрах результативность терапии выше, чем при высоких.
Для того, чтобы быть уверенным в достоверности проведенного анализа ПЦР на гепатит С, нужно отдавать предпочтение только тем лабораториям, которые хорошо себя зарекомендовали. Ценовая политика при этом не должна играть первостепенную роль.
источник