ВИЧ называют чумой современного мира неспроста. Коварство этого вируса в том, что он долгие годы может не давать о себе знать. Носитель этой инфекции может передавать ее другим людям при половых отношениях, даже не зная об этом. Сдерживать распространение ретровируса можно только профилактикой. Также важно своевременно диагностировать его в организме. Поэтому, если предлагают сдать анализ на ВИЧ, отказываться не стоит.
Есть категории профессий, которым необходимо периодически сдавать кровь на ВИЧ. Постоянно проверяются доноры, сдающие кровь для переливаний и препаратов крови, яйцеклеток и спермы. Обязательно обследуются люди, которые пересекают границу и иностранцы, претендующие на гражданство.
Если нет специальных показаний, сдавать анализы на ВИЧ и СПИД нужно при таких обстоятельствах:
- планируется беременность;
- перед предстоящей операцией;
- при резкой потере массы тела без видимой на то причины;
- если была незащищенная половая связь с незнакомым человеком;
- при инъекциях нестерильной иглой;
- если произошла авария, при которой медицинский работник укололся инъекционной иглой, загрязненной биоматериалом.
Пациенту всегда интересно знать, через какое время сдавать кровь на ВИЧ после возможного инфицирования. Произвести исследование с целью исключения его присутствия в организме можно двумя методами. Каждый анализ на СПИД проводят в определенный период отдаления от времени контакта с предполагаемым зараженным. Если прошло более трех месяцев с момента подозрительной связи или аварии на рабочем месте, то можно уже делать иммуноферментное исследование. Этот анализ очень показателен, с его помощью выявляют даже совсем небольшое число антител. Если сделать анализ раньше этого срока, то результат можно получить отрицательный, даже если человек заражен.
Вторая методика более современна. Основана она на полимеразной цепной реакции. Этот так называемый экспресс-анализ. Узнать результат этого исследования на ВИЧ можно уже через 21 день после контакта. Это исследование довольно-таки сложное и проводится в специально оборудованных лабораториях. Перед анализом необходимо ознакомиться с отзывами о работе данного центра.
Узнать о том, есть ли в организме смертельно опасная инфекция, можно совершенно анонимно. Направление для исследования от врача брать не нужно. Необходимо просто запомнить, под каким номером находится пробирка. Таким образом можно узнать и результат просто по номеру.
Многим приходилось сталкиваться с проблемой, где можно сдать кровь, какой нужен анализ на ВИЧ, чтобы узнать свой статус или получить справку. Сейчас немало возможностей для желающих обследоваться на инфицирование этим вирусом. Наверное, каждому приходилось видеть выездные лаборатории, где делают экспресс-анализ на носительство опасной инфекции и где сдать на ВИЧ бесплатно можно без проблем. Стоит ли им доверять?
Доверять таким центрам можно, но только не лишним будет попросить у них сертификаты и лицензии. Тем более это хороший вариант для тех, кто интересуется, где можно пройти бесплатный тест на ВИЧ. Трактовать самостоятельно результат нельзя, даже если он получился позитивным. Это еще ничего не значит. Он всего лишь подтверждает необходимость глубокого обследования с последующей консультацией врача.
Наиболее результативным будет исследование в специализированной лаборатории. Естественным в этом случае будет вопрос, сколько стоит сдать анализ на ВИЧ. В зависимости от сложности, чувствительности используемой методики и квалификационного уровня учреждения, стоимость колеблется от 600 до 4000 руб.
Сейчас уровень носительства и даже смертности от СПИДа необычайно высок, поэтому не стоит долго задумываться, где можно сдать анализы на ВИЧ-инфекцию. Ведь практически у каждого в жизни могли быть обстоятельства, при которых возможно заражение. Людям, которые никогда не обследовались, нужно хотя бы бесплатно сдать экспресс, который есть в каждом лечебном учреждении и аптеке, где можно недорого его купить.
Уверенным в отрицательном результате быть невозможно, поэтому лучше обследоваться анонимно. Как же сдать кровь на ВИЧ, чтобы о результате знал только тот, кто обследуется? Для этого в медицинских учреждениях созданы все условия. Пробирка, в которую отбирается биологический материал, номеруется, что исключает риск перепутать результаты. После того как пациент сдал тест на ВИЧ, ему говорят этот номер, который он должен запомнить. Результат он сможет узнать по этому номеру.
Большинство лабораторий практикуют именно такую систему, поэтому обследоваться инкогнито совершенно несложно. Никто из медицинских работников не будет знать, какой именно Ваш результат. Даже бесплатное обследование проводится анонимно. Таким образом, пациент может избежать ненужных вопросов со стороны близких и знакомых.
Сдать и экспресс-анализ, и ИФА, и другие виды исследований на ВИЧ совсем несложно. Наибольшее количество вопросов можно услышать касательно подготовки к сдаче. Пользователей интересует, анализ на ВИЧ нужно сдавать натощак или нет. Никакой особенной подготовки не нужно. Надо явиться в лабораторию или манипуляционный кабинет лечебного учреждения, где произведут забор крови. Для этого следует придерживаться некоторых нехитрых правил:
- обследуются на ВИЧ на голодный желудок. Тем, кого интересует, можно ли пить чай и кофе перед тем, как идти на исследование, можно ответить, что этого делать не рекомендуется. Понятие «натощак» подразумевает полное исключение любой пищи и питья. Не желательно пить даже воду в большом количестве. Лучше прекратить прием любой пищи в шесть часов вечера накануне сдачи крови;
- исключить прием алкоголя за три дня до сдачи анализа. Спиртовые настойки лекарственных препаратов также не стоит употреблять накануне;
- за день до исследования лучше исключить острое, соленое, кислое;
- на вопрос можно ли сдавать кровь во время месячных, есть только один ответ – нет, это нежелательно;
- необходимо исключить любые лекарственные препараты и физпроцедуры;
- если интересует, можно ли курить перед сдачей крови, ответ будет: рекомендуется не курить один час перед обследованием.
Многих волнует, откуда же берут кровь для данного вида диагностики. Чаще всего для диагностики используется кровяная сыворотка. Для этой цели нужно сдать кровь из вены. Для экспресс-методик может использоваться капиллярная кровь, которую берут из пальца на руке.
Чаще всего для диагностики используется кровяная сыворотка.
Если возникли подозрения по поводу своего статуса на ВИЧ И СПИД, многие задумываются, какие анализы сдают для проверки. Наиболее точны исследования, которые могут выявить опасный вирус на первых этапах его внедрения. С того момента, как возбудитель попал в организм и до появления антител к нему, проходит определенное время – этот период в среднем составляет один-три месяца. По истечении этого срока, если человек заражен, маркеры крови на чувствительность к ВИЧ-инфекции будут позитивны.
Существуют качественные и количественные анализы на наличие ретровируса. У каждого из них свои плюсы и минусы. Качественные исследования:
- это исследование называется по-медицински ИФА или иммуноферментный анализ и выявляет наличие антител к антигенам I и II типа;
- иммунный блотинг – это варификационный анализ крови. Основываясь на данных этого исследования и ИФА, специалисты могут получить наиболее точные данные. В этом случае вирусные антигены разделяют по молекулярной массе.
- ИХЛА – иммунохемилюминесцентный анализ на наличие ретровируса обладает практически 99-процентной точностью. Для исследования необходимы специальные реактивы и планшетка с ячейками;
- ПЦР или полимеразная цепная реакция указывает на концентрацию РНК ретровируса в крови. На вопрос, какой точный анализ сдать, чтобы подтвердить или опровергнуть наличие ВИЧ, можно ответить, что эта методика одна из самых точных и ранних. Он может применяться даже через неделю от предполагаемого сомнительного контакта. Он отлично подойдет во время беременности и малышам сразу после рождения, а также для контроля проводимых лечебных мероприятий;
- исследование, позволяющее оценить число Т-лимфоцитов в 1 мм3 крови. Это достигается за счет выделения маркеров CD4. У здоровых людей количество Т-клеток равно 1200-3000 единиц в одном микролитре.
Кроме специфических исследований пациенту необходимо сделать полное обследование организма и сдать весь стандартный набор анализов. Ретровирус, попадая в организм, оказывает влияние на многие показатели, в том числе изменения состояния здоровья покажет клинический и биохимический анализ крови.
Общий анализ крови не относится к специфическим исследованиям на СПИД, но это самая первая процедура, на которое направляет любой доктор при каждом обращении и даже обычном профосмотре. Отклонения в работе той или иной системы практически всегда отражается в общем анализе крови.
При внедрении в организм ретровируса, как покажет общий анализ крови, сразу же увеличивается число лейкоцитов. В начальной стадии ВИЧ-инфекции иммунная система еще сильна и активно реагирует на смертоносного возбудителя. При развитии СПИДа иммунитет начинает постепенно слабеть и логично ожидать лейкопению.
У большинства пациентов в общем анализе крови уже в первые месяцы инфицирования отмечается небольшая анемия, которая по мере развития болезни увеличивается. Анемию диагностируют, когда снижается уровень гемоглобина в клинической картине крови. Под гемоглобином понимают белок, содержащий железо. Он переносит кислород по организму. Являясь частью эритроцита, он чутко реагирует на любые нарушения в организме.
Важным показателем является повышение СОЭ. Но это происходит при любом серьезном воспалении в организме.
По мере развития ретровируса в организме, снижается уровень тромбоцитов, которые участвуют в свертываемости крови. Это приводит к различным по интенсивности кровотечениям, как наружным, так и внутренним.
Характерен сдвиг лейкоцитарной формулы. Вначале отмечается лимфоцитоз, а в дальнейшем – лимфопения. У инфицированных диагностируют нейтропению. Появляются мононуклеары – атипичные клетки, призванные бороться с попавшей в организм микробной и бактериальной флорой.
Конечно, такие изменения в общей картине крови являются не только симптомом ВИЧ-инфекции, но и большинства других патологических процессов в организме. Но врач, глядя на эти показатели и совместив их с анамнезом, жалобами и другими показателями назначит дополнительное обследование, в том числе и маркеры ВИЧ.
Экспресс-исследование обозначает, что анализ на ВИЧ займет минимальное количество времени
Экспресс-исследование обозначает, что анализ на ВИЧ займет минимальное количество времени. Чтобы сделать его, можно взять кровь из пальца, что не оказывает никакого влияние на точность результата. Особенность такого тестирования в том, что определяется не сам ретровирус, а наличие антител к ним. Чем больше период от момента предполагаемого инфицирования, тем точнее результат. Для большей надежности следует обследоваться не ранее десятой-двенадцатой недели от дня возможного заражения.
Иммуноферментный анализ наиболее показателен среди других методов исследования, так как результат анализа крови на ВИЧ будет точным через короткий срок от дня предполагаемого инфицирования. Антитела при ИФА могут появляться практически сразу с момента заражения – на второй-третьей неделе. А в более поздние периоды при этом исследовании они обнаруживаются наиболее точно. Это один из ранних методов диагностики ретровируса.
Результат ПЦР будет иметь точность 80% через 5 дней от момента предполагаемого инфицирования
Смысл полимеразной цепной реакции в определении генетического материала вируса ДНК или РНК. Диагностическое значение этого метода исследования достаточно высоко. Его используют для исключения ВИЧ-инфекции в крови доноров и ранней диагностики при сомнительной связи или возможном профессиональном заражении. Результат будет иметь точность восемьдесят процентов через пять дней от момента предполагаемого инфицирования и 98 процентов – через две недели.
Существует качественное и количественное исследование при помощи ПЦР. Качественный анализ определяет комплементарный участок в клеточном геноме. Выявляют не вирус, а встраиваемый им в клетку материал, который копируется и размножается.
При помощи количественного исследования выясняют, сколько копий РНК у ретровируса. Это исследование имеет смысл проводить только у людей с подтвержденным носительством ВИЧ для определения тяжести процесса, при подборе лекарственных средств и контроля терапевтических мероприятий у лиц с подтвержденным диагнозом ВИЧ.
Многих пользователей волнует, каков срок действия исследования и когда необходимо повторение анализа на ВИЧ. Человек мог сдать кровь спустя неделю после контакта с зараженным, получив отрицательный результат, но в это время нельзя быть уверенным в стопроцентной точности.
Но если говорить, какой срок годности справки анализа на ВИЧ, то ее считают действительной до полугода. Такие сроки ставить нельзя беременным и тем, у кого были реальные риски заразиться. В этих случаях действуют другие схемы проведения исследований. Тому, кто хочет быть уверенным, что не заразился смертельным вирусом, следует обследоваться каждые полгода.
Редко, кто будет спокойно ждать результатов. Даже если не было ситуаций для заражения, практически каждого беспокоит, сколько времени уйдет на выполнение анализа. Ждать ответа на сданную кровь на ВИЧ придется по-разному, в зависимости от метода. Экспресс-методы дают ответ буквально за несколько минут. Их можно сделать и самостоятельно, приобретя тест в аптеке и не ждать результата слишком долго. Но необходимо помнить, что для постановки диагноза этого не достаточно. Положительный результат не всегда подтверждает присутствие ВИЧ-инфекции в организме, как и отрицательный – его отсутствие.
ПЦР делают около часа, но ответ на руки можно получить через два-десять дней. Дело в том, что анализ ставят не по одному, а собирают партию, и только после этого проводят реакцию. Всему виной большой наплыв желающих обследоваться при малом количестве лабораторий, которые занимаются такими исследованиями. То же касается и ИФА, результат которого выдают через три-девять дней. Иммуноблоттинг проводится в различных лабораториях в сроки от трех дней до нескольких недель.
Итак, ВИЧ положительный – что делать? Главное — не спешить с выводами. Результат может быть ложным. Но думать, если результат отрицателен, что это значит – в организме нет смертельно вируса – слишком смело. Виной этому может быть человеческий фактор неверная подготовка, наличие хронических заболеваний. В любом случае, расшифровка любого анализа, тем более на ВИЧ – это дело врача.
Чтобы быть уверенным в результате, необходимо правильно подготовиться и сдавать кровь в те сроки, которые рекомендованы той или иной методикой. Считать, что человек инфицирован, можно только после серьезного досконального обследования и нескольких положительных результатов. Их количество определяет только специалист. И диагноз может выставить тоже только врач.
Вероятность ложных данных зависит от многих обстоятельств. Перед тем как доверить себя обследовать той или иной лаборатории, нужно почитать отзывы о ней. Желательно ознакомиться с сертификатами. Если это анонимный анализ, номер пробирки лучше записать, на память слишком надеяться не стоит. Так как один результат ничего еще не значит, то даже если пробирку с биологическим материалом случайно перепутали, диагноз по этому результату никто не выставит, нужно будет пройти еще не один тест, чтобы подтвердить позитивный результат.
Анализ мочи делают для оценки работы почек, при ВИЧ это особенно важно. Это необходимо для отслеживания состояния почек, нет ли в них воспалительного или гнойного процесса. Если ВИЧ-инфицированному необходимо сдать мочу, нужно правильно к этому подготовиться. Наружные половые органы нужно помыть в теплой воде с мылом. Сдается только средняя порция биологической жидкости. Не стоит перед исследованием употреблять алкоголь, острую и соленую пищу. Это может искажать результат.
Если обнаружена инфекция, пациенту назначают противомикробные и общеукрепляющие препараты. Следует провести дополнительное исследование, чтобы врачу было понятно, не прогрессирует ли в организме СПИД. Также проводят дополнительный курс ретровирусной терапии. Важно психологическое состояние человека и его настроенность на хороший результат.
Анализ на ВИЧ дает возможность выявить или исключить наличие опасного возбудителя в организме. К подготовке к исследованию нужно подойти со всей серьезностью. Результат анализа не стоит трактовать самостоятельно, в особенности, если он положителен. Нужно набраться терпения и пройти все рекомендуемое обследование, что даст возможность быть осведомленным о состоянии своего здоровья и при необходимости своевременно начать необходимое лечение.
Анализы на ВИЧ (СПИД): через сколько времени и какие анализы крови сдать?
источник
Основная задача врачей состоит в том, чтобы выявить ВИЧ как можно раньше.
Проблема заключается в том, что заболевание долгое время не имеет симптомов.
В начальной острой фазе оно протекает как под маской гриппа.
В дальнейшем наступает латентный период, который может продолжаться 10 лет и более.
На протяжении этого времени нет никаких симптомов.
И даже в фазе преСПИДа не всегда удается заподозрить патологию.
Поэтому в России больше половины больных получают диагноз, когда количество CD4 лимфоцитов ниже 200 в мкл.
В этот период уже развиваются выраженные нарушения клеточного иммунитета.
Присоединяются оппортунистические инфекции.
Даже в развитых странах с современной медициной, таких как США и Германия, до 30% пациентов получают диагноз лишь на стадии СПИДа.
В этот период уже прогрессируют инфекционные поражения легких у больных и других органов.
Массовое обследование всех людей на ВИЧ не проводится ни в одной стране.
Есть лишь определенные категории пациентов, для которых проведение диагностики является обязательным.
Также некоторым людям оно рекомендовано, но не обязательно.
В первую очередь на ВИЧ обследуют:
- пациентов, которым предстоит хирургическое вмешательство
- тем, кто контактировал с носителем ВИЧ тем или иным способом
- людей, имеющих клинические и лабораторные признаки дефицита клеточного иммунитета
- у детей, рожденных от серопозитивных матерей
- доноров крови или любого другого биоматериала
Рекомендовано обследование:
- при госпитализации в стационар
- при наступлении беременности
- инъекционным наркоманам
- в случае выявления любых ИППП в кожно-венерологическом диспансере (сифилис, вирусные гепатиты, гонорея и другие)
- при высокой половой активности и частой смене партнеров
В перечисленных ситуациях анализ на ВИЧ берут далеко не всегда.
Только если пациент сам считает, что это необходимо.
Алгоритм диагностики ВИЧ следующий:
- пациенту проводят скрининговое исследование
- в случае положительного результата назначается подтверждающий тест
Любые диагностические тесты имеют определенную чувствительность и специфичность.
Для скрининговых тестов основным требованием является чувствительность.
Это означает, что риск ложноотрицательных результатов минимальный.
Очень важно не пропустить инфекцию, если она присутствует в организме.
При этом специфичность играет меньшую роль.
Специфичность – это показатель, отражающий вероятность ложноположительного результата.
Ложнореактивный тест в процессе скринингового обследования не страшен.
Потому что после скрининга в любом случае требуется подтверждение диагноза.
Для подтверждающего теста на первом месте уже стоит специфичность.
Потому что нельзя допустить, чтобы человек, не страдающий ВИЧ, ошибочно получил этот диагноз.
Скрининговые тесты обычно предполагают одновременное выполнение анализа на:
- антитела к ВИЧ-1 и ВИЧ-2
- антиген р24
Преимущества этих методов состоят в том, что вместе они обладают высокой чувствительностью.
Данные способы полностью автоматизированы, проводятся быстро и недорого стоят.
Для окончательной диагностики применяют иммуноблоттинг.
Этот тест тоже серологический.
То есть, он основан на определении антител.
Но, в отличие от ИФА, имеет более высокую специфичность.
Суть метода состоит в том, что антигены вируса разделяются по молекулярной массе при помощи электрофореза.
Затем они переносятся на мембрану.
Она используется как индикатор.
Также существует ещё один метод – ПЦР.
Он редко используется как подтверждающий.
Но в некоторых ситуациях ПЦР необходима.
Она позволяет оценить вирусную нагрузку.
Это дает возможность вовремя определить, что антиретровирусная терапия стала неэффективной.
ПЦР позволяет подобрать оптимальное лечение и дать прогноз дальнейшему развитию заболевания.
Также ПЦР применяется в случае перинатального пути заражения.
У новорожденных серологическая диагностика малоинформативна.
Потому что у них в крови циркулируют материнские антитела к ВИЧ.
Они не имеют защитного значения.
Но способны проникать в кровь ребенка уже с 32 недели гестации.
Эти антитела определяются в крови в течение 1-1,5 лет после рождения.
Соответственно, все серологические тесты (анализы на антитела) всегда будут положительными.
И не важно, страдает ли реально ребенок этой инфекцией, или же это материнские иммуноглобулины, и малыш полностью здоров.
В этом случае методом выбора остается ПЦР.
Он определяет не антитела, а РНК вируса иммунодефицита.
Ранняя диагностика возможна только при проведении скринингового обследования.
То есть, до возникновения каких-либо специфических симптомов дефицита клеточного иммунитета.
Скрининговые исследования имеют чувствительность до 100%, если проводится комботест.
То есть, одновременное проведение ИФА и выявления антигена р24.
При этом специфичность стандартного исследования составляет 99,5%.
Это означает, что у одного человека из 200 результат будет ложноположительным.
В последующем он будет опровергнут в ходе подтверждающего теста.
Для подтверждения используется иммуноблоттинг.
Некоторые клиники используют также ПЦР.
Но этот метод менее эффективен.
Он имеет меньшую чувствительность, чем серологические исследования.
Поэтому ПЦР не используется как основной способ подтверждения диагноза.
Иммуноблоттинг тоже может выдавать ложноотрицательные результаты.
Но только в случаях, когда диагностика проводится слишком рано.
Бывают ситуации, когда скрининговый тест положительный за счет выявления антигена р24.
Он начинает определяться раньше, чем вырабатываются антитела.
В этом случае иммуноблоттинг может быть отрицательным.
Потому что он не определяет антиген р24.
В такой ситуации (положительный скрининговый тест при отрицательном подтверждающем) рекомендовано повторное обследование.
Его нужно пройти через 3 недели.
Если же наблюдаются клинико-иммунологические признаки острой фазы ВИЧ, показано проведение ПЦР.
В нашей клинике вы можете пройти диагностику инфекции без очередей, по предварительной записи.
О том какие анализы
на ВИЧ сдать
рассказывает подполковник
медицинской службы, врач
Ленкин Сергей Геннадьевич
Содержание данной статьи проверено и подтверждено на соответствие медицинским
стандартам врачем дерматовенерологом, урологом, к.м.н.
Симптомы заболевания имеют определенное диагностическое значение.
В данной статье не будет обсуждаться этиология, патогенез, эпидемиология, профилактика ВИЧ – это темы отдельных публикаций.
А вот клинические симптомы стоит упомянуть.
Они возникают:
То есть, клинические признаки появляются в самом начале и в самом конце заболевания.
В начальный период симптомы неспецифичны.
Это повышенная температура тела, увеличение лимфоузлов, ломота в теле.
У человека может снижаться масса тела.
Обычно человек получает диагноз грипп или инфекционный мононуклеоз.
Редко его направляют на лабораторную диагностику с целью определения ВИЧ.
В дальнейшем симптомы появляются уже на стадии нарушения клеточного иммунитета.
Эти клинические признаки связаны с возникновением кандидоза, опоясывающего герпеса.
В дальнейшем могут присоединяться пневмоцистная пневмония, сепсис, появляются онкологические образования.
В 50% случаев ВИЧ обнаруживают уже на стадии клинических признаков дефицита клеточного иммунитета.
Скрининговым методом диагностики является ИФА.
Также проводится определение антигена р24.
Альтернативой являются экспресс-тесты на ВИЧ.
Большинство из них используют в качестве клинического материала капиллярную кровь.
Её берут либо из пальца, либо из мочки уха.
Такая кровь не требует центрифугирования.
Поэтому экспресс-тесты проводятся быстро, без специального оборудования.
Преимущества таких тестов:
- возможность проведения на дому или в клинике, где не оборудована клинико-диагностическая лаборатория
- быстрые результаты (через 15 минут)
- возможность сразу же обследовать потенциального носителя инфекции в случае контакта с ним (например, при травме иглой)
- возможность быстрой диагностики перед экстренными операциями
Недостатки таких тестов:
- стоят дороже, чем ИФА
- менее достоверны (тесты старых поколений не определяют антиген р24, а оценивают только уровень антител)
- недостаточно информативны в острой фазе ВИЧ (реактивность теста ниже, чем ИФА)
Экспресс тесты дают ориентировочные результаты.
В дальнейшем они должны быть подтверждены с помощью других методов (иммуноблоттинга или РИФ).
Существуют также домашние тесты.
Но они дают большое количество ложноотрицательных результатов.
Во-первых, по причине меньшей чувствительности.
Во-вторых, из-за частых ошибок пациентов, которые проводят тестирование без участия медицинского персонала.
Еще один метод, достойный обсуждения, называется полимеразная цепная реакция.
С помощью ПЦР редко осуществляется подтверждение диагноза.
Метод имеет недостаточно высокую чувствительность.
Основные причины:
- 1. Тест проверяет наличие РНК ВИЧ 1 типа. В подавляющем большинстве случаев именно этот вирус вызывает заболевание в России. Тем не менее, 0,5% клинических случаев приходится на ВИЧ-2. Данный тип вируса обнаруживается с помощью серологических методов. Но он не определяется при ПЦР. Потому что для этого требуется проведение отдельного исследования на ВИЧ-2. Но оно удваивает стоимость диагностики, а потому большинству пациентов не назначается.
- 2. ВИЧ постоянно мутирует. В связи с этим появляются новые фрагменты РНК. Их изменение приводит к тому, что ПЦР может дать ложноотрицательный результат. Данный недостаток компенсируется, если проводится ПЦР с двойной мишенью. То есть, в процессе диагностики ведется поиск не одного, а двух специфичных фрагментов РНК. В этом случае вероятность отрицательного результата у ВИЧ-инфицированного пациента стремится к нулю.
- 3. Организм некоторых людей сдерживает ВИЧ-инфекцию. Их называют элитные контроллеры. Даже без антиретровирусной терапии репликация вируса подавляется. В результате его количество может снижаться ниже определяемого уровня. Кроме того, контроль ВИЧ-инфекции иммунитетом может быть временным. Он встречается гораздо чаще, чем постоянный. Тогда результат будет ложноотрицательным лишь в определенный период. А при повторном тестировании через несколько месяцев он может выдать положительный результат.
- 4. Успешная антиретровирусная терапия. Целью лечения является подавление репликации ВИЧ и снижение вирусной нагрузки до неопределяемого уровня. В случае успеха, ПЦР становится отрицательной. Хотя в реальности вирус в организме присутствует.
Таким образом, для первичной диагностики инфекции у взрослых пациентов молекулярный метод применяется редко.
Для ПЦР существует 5 основных показаний:
- 1. Оценка вирусологической нагрузки. Потому что ПЦР определяет не только сам факт наличия вируса в организме. Оценивается также количество копий РНК в мл. По этому показателю можно судить об эффективности лечения и стадии патологического процесса.
- 2. Первичная диагностика ВИЧ у новорожденных. У младенцев в крови циркулируют антитела матери. Поэтому ИФА будет всегда положительным. У новорожденных предпочтительным методом, позволяющим установить диагноз, остается ПЦР.
- 3. Диагностика на ранних сроках. Как уже говорилось, РНК вируса – это наиболее ранний маркер ВИЧ. ПЦР становится положительной за 2 недели и более до того, как начнут определяться антитела в крови.
- 4. Уточнение спорных результатов серологических тестов.
- 5. Проверка донорской крови.
Иногда требуется дифференциальная диагностика между ВИЧ-1 и ВИЧ-2.
Для этой цели тоже можно использовать ПЦР.
Но следует заметить, что иммуноблотинг тоже дает возможность диф диагностики.
И даже экспресс-тесты последних поколений различают два типа вируса.
Существуют сроки, через какое время становятся положительными разные исследования на ВИЧ.
Слишком рано после контакта с больным сдавать анализы нет смысла.
Потому что они будут отрицательными.
Период, когда можно выявить вирус и подтвердить ВИЧ, называют серологическим окном.
Оно «открывается» не раньше чем через 2 недели.
Через такой промежуток времени только начинается выработка антител.
Они определяются через 1 месяц только у 60% больных.
Через 8 недель – у 90%, а через 12 недель – у 95% людей, заразившихся ВИЧ.
Именно через 3 месяца рекомендуют проходить обследование большинству людей.
Потому что тогда результат теста будет с большой вероятностью правильным.
Антиген р24 начинает определяться немного раньше, чем антитела к ВИЧ (приблизительно на 5 дней).
На ранних стадиях для диагностики может применяться только ПЦР.
В среднем РНК вируса начинает определяться за 2 недели до появления антител.
Бывают случаи, когда ПЦР дает положительный результат через 14 дней после инфицирования.
При этом следует понимать, что отрицательный ПЦР на 2-3 неделе не исключает заражения.
При таком результате теста следует провести диагностику повторно через некоторое время.
Обычно диагностика не проводится раньше 3 недель после вероятного заражения.
Но бывают исключения из этого правила.
Например, если имел место контакт с потенциальным вирусоносителем.
Тогда его можно проверить на ВИЧ.
Это позволяет убедиться в отсутствии вируса на момент контакта.
Высокая достоверность исследования возможна только через 3 месяца.
При отрицательном результате теста человек считается здоровым.
Проведение повторного исследования через 6 месяцев после возможного заражения возможно лишь в исключительных случаях.
Например, если появились признаки острой фазы инфекции.
Следует также учесть, что результаты диагностики через 12 недель после контакта достоверны только тогда, когда на протяжении данного периода не было других контактов с ВИЧ-инфицированным.
При сдаче анализов ответ центра диагностики человек получает достаточно быстро.
Он может узнать результаты через сутки.
Исключение – проведение ПЦР.
В этом случае приходится ожидать итогов 1-2 недели.
Все диагностические тесты на ВИЧ вы можете сделать в нашей клинике.
Вы получите высокоточную диагностику и быстрые результаты.
источник
Инфекция «вирус иммунодефицита человека» — ВИЧ, представляет собой вирусное заболевание. Оно постепенно разрушает определенные лейкоциты и может вызвать синдром приобретенного иммунодефицита — СПИДа.
Вирус иммунодефицита человека (ВИЧ) относится к типу ретровирусов.
- Что такое ретровирус?
- Лабораторная диагностика ВИЧ
- Клиника заболевания: как себя проявляет ретровирус
- Начальная стадия инфекции (острая фаза)
- Бессимптомная фаза
- Стадия начала СПИДа
- Методы диагностики ВИЧ
- ИФА (иммуноферментный анализ)
- Иммунный блотинг (Western Blot)
- ПЦР (полимеразная реакция)
- Экспресс-тестирование
- Сроки и цена диагностики ВИЧ
Представляет собой геномный ДНК и хранит генетическую информацию не только как ДНК (большинство других организмов использует только ДНК), но и как РНК (рибонуклеиновая кислота).
На сегодня принято разделять следующие пути инфицирования ВИЧ:
- половой контакт без использования средств защиты
- перинатальный путь заражения (наблюдается у детей)
- в ходе гемотрансфузии (переливания крови)
- при использовании зараженных шприцев (чаще у инъекционных наркозависимых больных)
Когда ВИЧ проникает в клетки человека, он высвобождает рибонуклеиновую кислоту и реплицирует (копирует) ДНК из РНК ВИЧ с помощью фермента, называемого обратной транскриптазой.
Образовавшаяся ДНК включается в ДНК инфицированных клеток. Этот процесс является обратным, так как задействованы человеческие клетки для репликации РНК и ДНК.
Другие вирусы (инфекции) РНК, такие как полиовирус, вирус гриппа, вирус кори, в отличие от ретровируса не производят репликации ДНК после проникновения в клетку. Эти вирусы производят реплики рибонуклеиновой кислоты исходной РНК.
В ВИЧ-инфицированных клетках каждый раз, когда происходит деление клеток, ДНК интегрированного ВИЧ также реплицируется в дополнение к собственной ДНК клетки.
Репликация ДНК ВИЧ находится в одном из следующих состояний:
- Неактивное (скрытое) состояние: вирус существует, но не оказывает пагубного воздействия на организм человека
- Состояние активации: вирус доминирует над функцией инфицированных клеток, он производит большое количество новых репликаций ВИЧ, которые поражают другие клетки организма, провоцируя состояние стойкого приобретенного иммунодефицита
Важным аспектом терапевтического воздействия остается точная и своевременная диагностика заболевания.
Первые лабораторные исследования ВИЧ- патологии проводились более тридцати пяти лет назад.
Современная диагностика включает использование иммунологических, гематологических и молекулярных методов обнаружения вирусного патогена. Используемые тест-системы прошлого столетия имели достаточно ограниченные возможности и определяли ретровирус первого типа.
Их технические возможности не выходили за рамки определения иммуноглобулина G.
По мере развития лабораторной диагностики и усовершенствования методик исследования появилась возможность обнаружения обоих типов вируса. Появление систем тестирования третьего поколения значительно расширило диагностические возможности.
Теперь обнаружение вируса 1-2 типа возможно уже спустя несколько недель после инфицирования. Такая современная диагностика позволяет быстро назначить антиретровирусное лечение.
В десятки раз сокращает риск развития более тяжелой стадии вируса — СПИД. К последним изобретениям можно отнести системы тестирования 4 поколения. Они являющиеся комбинированными методами исследования.
Система используется для обнаружения антител к ВИЧ обоих типов и одновременного выявления антигена р24 (белка стенки эфира нуклеозидов ретровируса). Такие возможности тест-систем 4 поколения сокращают время «серологического окна» минимум на неделю. (Это период наличия в организме ВИЧ еще без появления антител).
Проведение лабораторных анализов является основным аспектом диагностирования ВИЧ-заболевания и назначения адекватной терапии. Кроме того, диагностика является мониторингом качества лечения и состояния здоровья пациента.
Регулярное проведение лабораторных анализов дает возможность:
- контролировать течение инфекционного процесса
- корректировать схему терапии
- проводить мониторинг побочных реакций от приема медикаментозных средств
Стандартный анализ на ВИЧ подразумевает исследование крови пациента.
Основной биологический материал — венозная кровь, забор которой проводится утром, до приема пищи. Предварительной, особой подготовки от пациента не требуется.
Основной подготовкой является исключение приема алкоголя за несколько дней. При возможности прекращение приема антибиотиков и противовирусных средств за 5-7 дней до анализа.
Клинико-иммунологическая экспертиза может проводиться в государственной поликлинике. Но в таком случае потребуется направление от врача-терапевта или семейного доктора.
Сегодня все чаще практикуется диагностика ВИЧ, СПИДа и ЗППП в независимых лабораторных центрах, где имеется возможность сдать анализ анонимно.
В ходе диагностики пациенту присваивается особый номер, известный только ему и персоналу учреждения. Однако в данном случае имеется определенный минус.
Результаты тестирования не могут быть переданы в клинику для последующей госпитализации больного. Не предоставляются гинекологу/венерологу/ инфекционисту, не могут быть занесены в реестр инфекционных патологий (ОРУИБ).
Основной способ передачи ВИЧ-заболевания:
- половой контакт
- от матери к ребенку (трансплацентарно, через родовой путь, грудное молоко)
- в ходе процедуры переливания крови, трансплантации органа
- при введении внутривенных наркотиков нестерильным шприцем
Другими словами, до тех пор, пока нет контакта с кровью или жидкостями организма, вероятность инфицирования ВИЧ в повседневной жизни почти равна нулю.
Количество вируса, содержащегося в секреторной жидкости, такой как слюна или слезы, очень мало. Даже если вирус находится в данных выделениях, то до сих пор не сообщалось о заражении при использовании общей ванны или полотенца.
ВИЧ является достаточно «хрупким» вирусом, который инактивируется, как только он попадает из организма во внешнюю среду. Клинические проявления патологического процесса зависят от стадийности инфекции.
Первое проявление инфекции наблюдается спустя 2-3 недели после заражения.
В этот период симптомы ВИЧ такие: лихорадка, боль в горле, мышечная боль, сыпь, лимфаденопатия, головная боль, усталость и т. д. Появляются симптомы гриппа или ангины (как правило, моноцитарного типа).
Ранние признаки болезни могут сопровождать пациента от нескольких дней до месяца и более, во многих случаях спонтанно исчезают.
Диагностировать заболевание в данный период считается максимально выгодным для больного. Лечение антиретровирусными препаратами на начальном этапе инфекции показывает наиболее положительные результаты.
Важно! Пациентам, имеющим любые инфекции, передающиеся половым путем (сифилис, гонорея, ВПЧ, хламидии и т. д.) в обязательном порядке рекомендуется сдача анализа на ВИЧ. У больных ретровирусом довольно часто выявляют параллельное течение ЗППП.
Количество вируса в крови, достигшего пика из-за иммунного ответа (индукция ЦТЛ или продуцирование антител) после заражения, снижается до определенного уровня, спустя 6-8 месяцев, и приобретает фазу бессимптомного течения. Подобная фаза может длиться несколько лет.
После чего сменяется периодами обострения: симптомы гриппа, недомогание, увеличение лимфатических узлов. В этот период пациент как никогда уязвим перед другими инфекционными патологиями: ЗППП, гепатит, герпес, туберкулез.
Без анти-ВИЧ-терапии после заражения, инфекция прогрессирует, а CD4-положительные Т-клетки стремительно снижаются. Когда число лимфоцитов CD4 составляет 200 / мм 3 или менее, оппортунистические инфекционные заболевания, такие как пневмония, туберкулез, развиваются с вероятностью в 90%.
Кроме того, если количество лимфоцитов CD4 ниже 50 / мм 3 — высокий шанс развития цитомегаловирусной инфекции, атипичного микобактериоза (в 93% случаев), первичных лимфом ЦНС, злокачественных образований. У больных отмечается резкое снижение аппетита, потеря массы тела вплоть до анорексии, постоянные нарушение дефекации с преобладанием диареи, слабость и тому подобное.
Этиология, патогенез, эпидемиология: ВИЧ — вирус из семейства РНК-содержащих патогенов, поражает клетки иммунной системы, провоцирует развитие СПИДа, оппортунистических инфекций, онкологию. Согласно статистическим данным, приведенным на 2011 год, в мире зарегистрировано 62 миллиона пациентов с диагнозом ВИЧ.
Пока пациент прибегает к антиретровирусной терапии, можно подавить вирусную нагрузку в значительной мере.
Но, к сожалению, полностью ликвидировать вирус из организма невозможно. Поэтому крайне важно как можно быстрее диагностировать заболевание и начать соответствующее лечение.
Диагностические мероприятия по выявлению ВИЧ-инфекции включают два этапа:
- выявление факта заражения (наличие в организме ретровируса)
- определение стадии процесса (как давно произошло инфицирование и как сильно поражены клетки иммунной системы)
Результаты диагностики позволят определиться с тактикой терапии и спрогнозировать дальнейшее течение болезни.
Существуют различные серологические методики выявления инфекционных, вирусных и бактериальных патологий. При диагностировании ВИЧ, как правило, применяются следующие серологические анализы.
Является наиболее часто назначаемым анализом при необходимости подтвердить/опровергнуть наличие в организме ретровируса.
Анализ основан на определение антител к вирусу, которые образуются в ходе попадания патогена в организм человека. Информативность диагностического метода достигает 96%.
Однако, если исследование проводится на этапе еще отсутствия антител, можно получить ложноположительный результат. В таком случае назначается повторное исследование ИФА через 2-3 месяца.
Но гораздо целесообразней проведение ПЦР-анализа, способного выявить заражение на самых ранних сроках.
Также получить ложноположительный результат можно при наличии у пациента:
- патологий аутоиммунного характера
- инфекций, протекающих в хронической форме
- заболеваний онкологического типа
В другом случае, данный результат может быть получен при наличии ранних сроков беременности.
Специфика анализа направлена на выявление белков ВИЧ-инфекции.
Как правило, диагностика проводится в качестве подтверждающего теста. При положительном результате дает возможность поставить окончательный диагноз «вирус иммунодефицита человека».
Стандартно иммуноблоттинг выдает три варианта результата: положительно, отрицательно, сомнительно. В первых двух случаях расшифровка проста — ВИЧ отсутствует/присутствует.
Сомнительный вариант, как правило, означает присутствие в организме ВИЧ. Но с инфицированием не более трех месяцев назад, когда организм не успел выработать весь спектр антител.
Также, получение сомнительного результата свойственно для пациентов с туберкулезом, злокачественными патологиями, прошедших многократные манипуляции по переливанию крови.
Суть метода заключается в определении ДНК вируса и его РНК. Является наиболее информативным и точным методом обнаружения патогена.
Может обнаружить ВИЧ на ранних сроках инфицирования, еще до образования антител к ретровирусу. Чувствительность ПЦР составляет 99%, получить ложный результат практически невозможно.
Полимеразная реакция назначается пациенту с целью:
- указать присутствие или отсутствие вируса ВИЧ в организме человека при сомнительных результатах, полученных в ходе других лабораторных тестов
- идентификации типа ретровируса (ВИЧ-1, ВИЧ-2), а также для установления нагрузки на организм, спровоцированной вирусом
- установления статуса рожденного ребенка от матери, имеющей заболевание
- выявления патогена в крови, которая в дальнейшем будет использована для переливания
ПЦР является наиболее точным анализом, способным выявить ретровирус спустя 7-10 дней после попадания в организм.
При этом точность результата на данном сроке будет составлять 98-99%.
Однако, ПЦР имеет некоторые особенности, по этой причине может назначаться несколько раз. В связи с высокой чувствительностью анализ способен реагировать не только на ретровирус. Но и на самые незначительные инфекционные процессы, происходящие в организме. Поэтому окончательный диагноз после одноразового проведения полимеразной реакции не ставится.
Следующая особенность ПЦР — необходимость современной и дорогостоящей аппаратуры. Поэтому анализ не проводится в государственных клиниках. Осуществляется тестирование в современных лабораториях, где стоимость анализа может стартовать от 1000 рублей.
Назначается в экстренных ситуациях, когда срочно требуется проведение оперативного вмешательства.
Биологическим материалом для исследования является моча. Экспресс-тест, по мнению некоторых специалистов, имеет точность до 96%, но, тем не менее, является дополнительным тестированием. На основании полученных результатов данного исследования, диагноз не ставится.
В обязательном случае проводится ИФА или ПЦР.
Через какое время можно получить готовый анализ?
Ответ лабораторного центра о результатах анализа можно получить спустя несколько дней, в зависимости от загруженности учреждения.
Также во многих центра имеется дополнительного услуга «срочное тестирование», что позволяет получить результат спустя несколько часов.
Относительно ценовой политики, то стоимость будет зависеть от выбранной лаборатории и методики исследования. Так, стоимость может стартовать от 500 рублей и достигать 10 000-15 000.
Цена Western Blot стартует от 2500 рублей и может достигать 3000-4000. Получить готовый результат можно спустя 2-5 дней.
Если проводится ПЦР в реальном времени с определением обоих типов ретровируса, а также их РНК и ДНК, стоимость может достигать 5000 рублей и выше. Длительность диагностирования от 5 до 10 дней.
Согласно действующему закону РФ, иммунологические исследования, проводимые в государственных учреждениях, предоставляются на бесплатной основе. Анализ на ВИЧ в обязательном порядке назначается пациенткам в период беременности, больным в предоперационный период, донорам органов или части ткани.
- ВИЧ
- Гарднереллез
- Кондиломатоз
- Молочница
- Сифилис
- Трихомониаз
- Баланопостит
- Герпес
- Гонорея
- Микоплазмоз
- Уреаплазмоз
- Уретрит
- Хламидиоз
- ЗППП
источник
В диагностике ВИЧ важную роль играет как можно более раннее обнаружение заболевания у человека. Назначается ряд анализов. Покажет ли общий анализ крови СПИД и ВИЧ? По одному этому анализу невозможно поставить диагноз, необходимо будет проведение других высокоспецифичных исследований.
Однако в развернутом анализе существуют некоторые показатели, изменения которых характерны для заражения этим вирусом. Общий анализ крови не может быть в норме, если человек заражен ВИЧ-инфекцией.
Любое заболевание отражается на качественном и количественном составе биоматериалов пациента (крови, мочи, слюны и др.). И общий анализ крови (ОАК) при ВИЧ – не исключение. Задача данного лабораторного исследования – определить состояние иммунитета, которое значительно изменяется при поражении ВИЧ-инфекцией.
ОАК является начальным скрининговым методом обследования пациентов на предмет инфицирования вирусом ВИЧ. Его преимущества:
- низкая цена проведения исследования;
- быстрое получение результата;
- изменения в биоматериале при ВИЧ-инфекции весьма показательны.
Благодаря этому исследованию делают заключение о состоянии здоровья человека и либо отправить его на дальнейшее обследование, либо выставить диагноз «Здоров».
Анализы крови на ВИЧ назначают в следующих случаях:
- Госпитализация в стационар для планового оперативного вмешательства. При этом необходимо сдавать кровь с целью минимизирования риска заражения медицинского персонала. Проведение операций ВИЧ-инфицированным людям выполняется при повышенных мерах защиты.
- При наступлении или в процессе планирования беременности. Для беременных норма сдачи анализа на ВИЧ – три раза за период вынашивания ребенка. Диагностика делается с целью предотвращения заражения плода внутриутробно, при родах и в процессе грудного вскармливания. В вышеперечисленных случаях вирус передавется ребенку с большой долей вероятности.
- Наличие признаков других инфекционных заболеваний, часто сопутствующих ВИЧ- инфекции. К ним относятся: пневмоцистная пневмония, герпес-инфекция, туберкулезные поражения внутренних органов.
- После возможного инфицирования при незащищенном половом контакте. Человек самостоятельно обращается в поликлинику, где ему в условиях полной анонимности проводят исследование.
- Появление у пациента без видимой причины таких симптомов, как резкое исхудание, апатия, постоянная усталость, потливость по ночам, периодическое беспричинное повышение температуры тела до 37,5°С, диарея.
- Диагностика крови для тестирования ВИЧ-инфекции делают ежегодно медицинским работникам, имеющим непосредственный контакт с биологическими жидкостями пациентов.
В выше перечисленных ситуациях вне зависимости от того, что показывает общий анализ крови, дополнительно проводят специфические исследования на ВИЧ: ИФА или иммуноблот.
Присутствие возбудителей ВИЧ-инфекции нельзя определить в общем анализе крови, но видны некоторые признаки развития болезни.
Нормальное содержание этих клеток – 25-40% или 1,2-3×10 9 /л. В начале развития заболевания наблюдается увеличение этого показателя (лимфоцитоз) за счет усиленной борьбы организма с вирусной инфекцией. Когда болезнь прогрессирует и поражает иммунную систему человека, выявляется критическое снижение уровня лимфоцитов в крови (лимфопения). При ВИЧ уменьшается в основном фракция Т-лимфоцитов.
Данная разновидность лейкоцитов активизируется непосредственно после заражения вирусом. Нейтрофилы осуществляют процесс фагоцитоза (поглощения вирусных клеток). Это впоследствии приводит к их разрушению и уменьшению их количества – нейтропении. Норма содержания данных клеток – 45-70% или 1,8-6,5×10 9 /л. Снижение количества нейтрофилов в крови не специфично для ВИЧ-инфекции, так как феномен наблюдается при всех инфекционно-воспалительных заболеваниях.
Данные атипичные клетки (лимфоциты с одним ядром) являются разновидностью лейкоцитов. Появляются мононуклеары в анализе крови при попадании в организм инфекционных агентов (вирусов или бактерий). В норме этих иммунных клеток в биоматериале быть не должно.
Тромбоциты играют важную роль в процессах свертывания крови. В норме у взрослого человека присутствует от 150 до 400×10 9 /л кровяных пластинок. При заражении ВИЧ количество тромбоцитов снижается. Клинически данный факт проявляется развитием различных видов кровотечений: внутренних, наружных; возникновением петехий (мелкоточечная сыпь) на коже и кровоизлияний на слизистых.
Данный показатель не столь специфичен при заражении вирусом иммунодефицита человека. Количество красных кровяных телец чаще при этой патологии уменьшается. Происходит данное действие за счет влияния вируса на костный мозг, в котором происходит кровообразование. Нормой считается содержание эритроцитов в биоматериалах в количестве 3,7-5,1×1012/л.
Однако иногда в ОАК при иммунодефиците выявляется повышение количества эритроцитов. Происходит это при легочных заболеваниях, сопутствующих развитию ВИЧ-инфекции. К таким болезням относят пневмонию и туберкулез.
Часто при ВИЧ выявляется снижение уровня гемоглобина, что свидетельствует о развитии железодефицитной анемии. Гемоглобин – железосодержащий белок –располагается на поверхности эритроцитов и участвует в доставке кислорода ко всем клеткам организма. При снижении его количества ткани страдают от гипоксии (дефицита кислорода). Клинически анемия проявляется слабостью, головокружением, бледностью кожи, учащением сердцебиения. В норме уровень гемоглобина у мужчин составляет 130-160 г/л, у женщин – 120-140 г/л.
При инфицировании ВИЧ наблюдается значительное повышение этого показателя. В норме у мужчин СОЭ составляет от 1 до 10 мм/ч, у женщин – от 2 до 15 мм/ч. Ускорение СОЭ не является специфичным для вирусного поражения. Подобный признак характерен для любых инфекционно-воспалительных процессов в организме.
Иногда при ВИЧ-инфекции СОЭ может несколько лет не повышаться, а затем резко увеличиться.
Таким образом, общий анализ крови не позволяет на 100% выявить наличие и определить стадию развития ВИЧ-инфекции. Однако данный метод исследования важен для врачей на начальных этапах диагностирования заболевания.
источник
Анализ крови на ВИЧ или тест на ВИЧ включает в себя несколько методов лабораторной диагностики, позволяющих выяснить присутствие вируса иммунодефицита (ВИЧ), обнаружить антитела к его белкам (иммуноглобулины) или антигены (белки вируса) в крови больного, слюне или моче. Вирусу иммунодефицита человека присуща уникальная антигенная изменчивость, что связано с большой скоростью транскрипции (размножения), в связи с чем затрудняется как диагностика ВИЧ-инфекции, так и ее профилактика.
В основе диагностики ВИЧ-инфекции, как и любого другого инфекционного заболевания лежит:
- эпидемиологический анамнез,
- характерные жалобы больного,
- клиническая картина заболевания,
- данные лабораторных методов исследования.
Как только диагноз ВИЧ-инфекции установлен, с целью уточнения характера течения основного заболевания и вторичных заболеваний проводится дальнейшее обследование больного и назначается соответствующее лечение.
Тяжесть заболевания оценивается по уровню концентрации вирусов в крови, количеству CD4-лимфоцитов и определению антигена р24.
Вирусологическая диагностика основана на выявлении ВИЧ в тканях и биологических жидкостях больного.
Полимеразная цепная реакция (ПЦР) применяется с целью выявления вируса и оценки вирусной нагрузки, что позволяет судить об эффективности специфического лечения и прогнозировать течение инфекционного заболевания.
Серологическая диагностика ВИЧ-инфекции предполагает выявление антигенов вируса и антител в сыворотке крови. Обнаружение антител к вирусу иммунодефицита человека с помощью ИФА (иммуноферментного анализа) является основным методом лабораторной диагностики. Все положительные результаты подтверждаются методом иммуноблоттинга. Экспресс тест на ВИЧ основан на выявлении антител в крови и биологических жидкостях исследуемого. Используются в случаях, когда необходимо быстро получить результат.
Уровень иммуносупрессии определяется методикой подсчета СD4 и СD8-лимфоцитов, с последующим определением соотношения CD4 : CD8.
Каждый из лабораторных методов диагностики ВИЧ-инфекции характеризуется определенной чувствительностью (% верно определенных среди заведомо (+) образцов) и специфичностью (% правильно определенных тестов среди заведомо отрицательных образцов). Результаты теста на ВИЧ интерпретируются как отрицательные, положительные или сомнительные.
Рис. 1. На фото слева ВИЧ заражают иммунную клетку (обозначено желтым). На фото справа лимфоцит, поражённый ВИЧ. Вытянутые структуры на поверхности клетки вызваны гиперпродукцией белка.
Рис. 2. На фото зафиксирован процесс выхода (отпочкования) вирионов из инфицированной клетки.
Анализ крови на ВИЧ может сделать любой житель нашей страны по своему желанию анонимно и бесплатно. Но есть категории лиц, которые обследуется на ВИЧ в обязательном порядке. К ним относятся:
- все доноры крови и ее компонентов, а также тканей и других биологических жидкостей;
- лица, которым была проведена трансфузия или осуществлена трансплантация (проводится в течение первых 3-х месяцев после проведения процедуры);
- беременные;
- лица, пострадавшие в результате аварии;
- лица, имеющие клинические показания — лихорадку, диарею, постоянный кашель и увеличение более 2-х групп лимфатических узлов, длящиеся более 1-го месяца, необъяснимую потерю веса, СПИД-ассоциированные и оппортунистические инфекционные заболевания, соматическая и онкопатология;
- иностранные граждане;
- лица из группы риска (наркоманы и страдающие венерическими заболеваниями).
Тест на ВИЧ необходимо проводить всем, кто был подвергнут риску заражения.
Рис. 3. Анализ крови на ВИЧ в нашей стране можно сдать анонимно и бесплатно.
Анализ на ВИЧ можно сдать бесплатно в учреждениях здравоохранения, работающих на бюджетной основе при наличии паспорта и медицинской страховки. Врачи при этом обязаны хранить врачебную тайну. Бесплатно и анонимно можно сдать анализ в Центрах профилактики и борьбы со СПИДом и там же получить врачебную консультацию до и после обследования. На платной основе проводится тестирование на ВИЧ в коммерческих лечебных учреждениях. Тест на ВИЧ может пройти любой человек, временно проживающий на данной территории.
В лаборатории будет сделан анализ крови на ВИЧ иммуноферментным методом (ИФА).
В государственных учреждениях здравоохранения (поликлиниках и больницах) анонимно сдать анализ крови на ВИЧ нельзя. Сведения о результатах исследования будут известны узкому кругу медиков, которые обязаны хранить врачебную тайну.
Кабинеты анонимного тестирования существуют на базах Центров СПИДа, где каждому исследованию присваивается номер.
Рис. 4. Пробирки с кровью отправляются на серологическое исследование.
Существует четыре группы населения, тестирование на ВИЧ которых является обязательным, но не насильственным:
- Доноры крови и другого биологического материала.
- При устройстве на работу в учреждения, где работник может иметь контакт с заведомо инфицированным материалом и больными.
- Иностранные граждане при получении виз для проживания (более 3-х месяцев) на территории РФ.
- При наличии клинических показаний лицам, находящихся в местах лишения свободы.
Принудительное тестирование населения на ВИЧ является бесперспективным и противоречит соблюдению прав человека. Принудительное тестирование населения в РФ является незаконным.
Рис. 5. Тестирование на ВИЧ осужденных проводится по клиническим показаниям.
В государственных учреждениях обследование на ВИЧ бесплатное, в частных клиниках — платное:
- Стоимость ИФА составляет от 400 до 800 руб. Ответ будет готов по истечении одних суток. Существует срочная диагностика, когда ответ можно получить в течение 2-х часов.
- Стоимость анализа на ВИЧ методом иммуноблота составляет от 3 до 5 тыс. рублей. Результат будет готов через 4 — 7 дней.
- Стоимость теста на ВИЧ методом ПЦР составляет 10 — 12 тыс. руб. Результат будет готов через 10 — 14 дней.
В государственных учреждениях срок получения результатов анализа на ВИЧ составляет:
- При применении ИФА 3-го поколения результаты дают самый достоверный результат через 12 недель от момента предполагаемого инфицирования.
- При применении ИФА 4-го поколения — 6 недель.
- При применении ПЦР — 4 недели.
- Сдавать анализ на ВИЧ необходимо не ранее, чем через 3 — 4 недели от предполагаемого заражения.
- Тестирование проводится не ранее, чем через 8 часов после приема пищи.
Из жидкости можно употреблять только обычную воду.
- Для анализа осуществляется забор 3 — 5 мл крови, взятой из локтевой вены, для чего используется обычный шприц или игла с помпой.
- До транспортировки в лабораторию сыворотка крови может храниться в холодильнике до 7-и дней. Без холодильника не более 30 минут после забора.
- Транспортировка пробирок с сывороткой крови осуществляется в специальных термоконтейнерах при температуре +4 — +8 о С.
Рис. 6. Для анализа на ВИЧ необходимо провести забор 3 — 5 мл крови, взятой из локтевой вены — для чего используется обычный шприц (фото слева) или игла с помпой (фото справа).
При заборе крови из вены вирусом иммунодефицита человека заразиться невозможно.
Результаты анализа на ВИЧ могут трактоваться как положительные, отрицательные и сомнительные.
Сомнительный результат теста на ВИЧ получается при присутствии в сыворотке крови антител, которые перекрестно реагируют с белками вируса иммунодефицита человека. Анализ в данном случае сдается повторно, а при его проведении будут применяться белее специфичные тест-системы. Если сомнительный результат сохраняется, то тестирование необходимо проводить каждые 1 — 3 месяца в течение полугода.
Положительный результат теста на ВИЧ (серопозитивный) говорит о наличии в крови исследуемого антител к вирусу. В данном случае иммуноферментный анализ (ИФА) повторяется и при получении повторного положительного результата подтверждается тестом иммуноблотинга с тем же образцом крови.
Отрицательный результат теста на ВИЧ (серонегативный) говорит об отсутствии ВИЧ-инфекции, либо инфицирование произошло совсем недавно и в крови обследуемого еще не выработались антитела (период «окна»). В таком случае обследование следует повторить через 3 и 6 месяцев.
Ложноположительный результат теста на ВИЧ регистрируется тогда, когда его причиной явился не вирус иммунодефицита человека, а беременность, аутоиммунное заболевание, аллергия, любое другое инфекционное заболевание, недавно сделанная прививка, онкопатология, трансплантация органа и даже обычная еда (семечки, острая, жирная и кислая пища, употребленная накануне, и даже минеральная сильногазированная вода). Большое количество ложноположительных результатов получается при проведении тестирование в домашних условиях.
Ложноотрицательный результат теста на ВИЧ говорит о том, что вирус в крови больного присутствует, но антитела еще не выработались. При проведении анализа ПЦР ложноотрицательный результат может быть получен у ВИЧ-инфицированных больных в период проведения специфического лечения, когда концентрация вирусов в крови настолько мала, что приводит к несрабатыванию тест-системы. В большинстве случаев ложноотрицательный результат получается при технической ошибке или браке в тест-системе, что встречается крайне редко ввиду проведения жесткого контроля качества на всех уровнях.
Анализ на ВИЧ необходимо отложить минимум на две недели после перенесенного инфекционного заболевания или вакцинации.
Рис. 7. Проведение серологического исследования крови.
При помощи тестирования на антитела к вирусу иммунодефицита человека оценивается ответ организма на инфицирование. С этой целью применяется иммуноферментный анализ (ИФА, ELISA), позволяющий обнаружить антитела к белкам вируса и подтверждающий анализ иммуноблотинг (вестерн-блот), при помощи которого определяется реакция антител на белки вируса.
Вирусы иммунодефицита человека обладают антигенными свойствами и при попадании в организм человека вызывают синтез антител — специфических иммуноглобулинов. С помощью современных тест-систем в сыворотке крови и других биологических жидкостях больного ВИЧ можно определить класс иммуноглобулинов (антител). Раньше всех (через неделю после инфицирования) появляются иммуноглобулины класса IgМ. Их рост отмечается в течение месяца и далее они сохраняются еще около 30 дней. Иммуноглобулины класса IgG циркулируют в крови несколько лет. Их выявление является показателем наличия ВИЧ-инфекции.
Антитела к ВИЧ появляются через 2 — 4 нед. после инфицирования и далее они определяются в крови на протяжении всего заболевания.
Антитела в организме инфицированного человека вырабатываются не сразу. На первых порах ВИЧ-инфекция ничем себя не проявляет. Антитела появляются в крови в среднем через 2 — 3 месяца от момента заражения (от 2-х недель до 6-и месяцев). Этот период получил названия «окна», когда анализы на антитела еще отрицательные, но вирусы интенсивно размножаются, а сам больной становится опасным в плане заражения контактных лиц. Выявить инфицированного можно через более короткий (1 — 2 недели) период после заражения, для чего применяется полимеразная цепная реакция (ПЦР). Однако из-за дороговизны данный вид исследования для скрининга не используется.
У 90 — 95% инфицированных лиц антитела в сыворотке крови появляются через 3-и месяца после заражения, У небольшой части больных (5 — 9 %) антитела появляются в период от 3 до 9 месяцев и у 0,5 — 1% — в более поздние сроки. В терминальной стадии СПИДа количество антител снижается значительно, а в некоторых случая исчезают вовсе.
С 1985 года данная методика используется на территории РФ с целью массовых исследований. Он прост в исполнении, показывает довольно точные результаты, является дешевым по сравнению с другими методиками. В связи с возможностью получения ложноположительных результатов все положительные результаты исследуются дважды, после чего сыворотка крови больного исследуется подтверждающим тестом — иммунного блота. При этом используется тот же образец крови. При наличии 2-х положительных результатов с применением ИФА и иммуноблота в одной пробе ставиться диагноз ВИЧ-инфекции.
В РФ используются обычно ИФА 4-го поколения. Исследование проводится с целью получения суммарного спектра антител против белков (антигенов) ВИЧ — р24 и gр160.
Тест видит как антитела, которые вырабатываются организмом больного, так и антигены (белки вируса) р24. «Период окна» для тестов 4-го поколения более короткий. Уже через месяц можно получать достоверные результаты. Однако более надежными, как считают специалисты здравоохранения РФ, являются сроки 6, 8 или 12 недель.
Рис. 8. На фото иммуноферментные анализаторы.
Рис. 9. На фото иммуноферментный автоматический анализатор.
Для первичного обследования групп лиц с целью выявления ВИЧ-инфекции применяется только методика ИФА.
Метод иммуноблотинга является более точным, чем ИФА, по мнению большинства специалистов — эталонным. С его помощью в сыворотке крови обнаруживают антитела к белкам ВИЧ. Методика применяется с целью подтверждения результатов, полученных при проведении ИФА. Обладает высокой специфичностью. Ложноположительные результаты встречаются редко. Достоверность полученных результатов достигает 99%. Иммуноблотинг является дорогостоящей методикой и требует высокой специализации специалиста, проводящего исследование. Возможно получение сомнительных результатов.
Метод основан на разделении антигенов (белков) ВИЧ с применением электрофореза по молекулярной массе. Первыми при инфицировании выявляются антитела против капсидных белков «Gag» (р24 и р17) и прекурсор р55. Вслед за ними появляются антитела против суперкапсидных белков «Env» (гликопротеидов gр 160, gр120, gр41 и белков р88) и неструктурных белков «Pol» (р31, р51 и р66). В ряде случаев могут определяться антитела против генов «vpu», «vpr», «vif», «tat», «nef», «rev», «tat».
Сыворотка крови больных ВИЧ-1 и ВИЧ-2 содержит антитела ко всем белкам вирусов, но для подтверждения диагноза определяются у ВИЧ-1 только антитела к белкам р24, gр41, gр120 и gр160, у ВИЧ-2 — антитела к белкам gр105, gр140 и gр36.
При наличии 2-х положительных результатов с применением ИФА и иммуноблота в одной пробе ставиться диагноз ВИЧ-инфекции.
Рис. 10. Аппарат для проведения исследования методом иммуноблота.
Рис. 11. Диагноз ВИЧ-инфекции ставиться при наличии 2-х положительных результатов с применением ИФА и иммуноблота в одной пробе.
Одним из иммунологических тестов, применяемых при ВИЧ-инфекции, является методика подсчета СD4 и СД8-лимфоцитов в крови.
СD4-лимфоциты (Т-хелперы) поражаются вирусами иммунодефицита. Постепенное истощение их популяции приводит к снижению иммунитета и организм больного перестает противостоять инфекции. Подсчет CD4-лимфоцитов осуществляется методом проточной цитометрии с помощью автоматических анализаторов или вручную при оптической или флюоресцентной микроскопии. По количеству СD4-лимфоцитов определяется время начала специфического лечения (антиретровирусной терапии) и профилактики оппортунистических инфекций, оценивается эффективность лечения.
- При количестве CD4-лимфоцитов в сыворотке крови от 500 и ниже в 1 мл говорит о развитии иммунодефицита.
- При снижении количества CD4-лимфоцитов до 200 в 1 мл (норма от 600 до 1900 клеток в 1 мл) развивается синдром приобретенного иммунодефицита — СПИД.
- При снижении уровня CD4-лимфоцитов до 50 и ниже в 1 мкл СПИД переходит в терминальную стадию.
Удельный вес CD4-лимфоцитов среди всех лимфоцитов в норме составляет около 40%. Снижение показателя до 20% говорит о развитии СПИДа.
CD8-лимфоциты (Т-киллеры, на англ. killer — убийца) уничтожают вирусы ВИЧ путем цитолиза. Их пролиферация (увеличение количества) зависит от активности Т-хелперов. При ВИЧ-инфекции количество CD4 и CD8-лимфоцитов уменьшается, но более всего падает уровень CD4-лимфоцитов. Соотношение CD4/ CD8 в норме составляет 1,5 — 2,5. При снижении количества CD4- лимфоцитов отмечается снижение индекса.
Его величина менее 1 говорит о развившемся иммунодефиците, при показателе соотношения 0,6 — 0,8 развивается СПИД.
При получении положительных результатов тестирования человек должен стать на учет в государственное учреждение Центр профилактики и борьбы со СПИД, где будет установлен мониторинг за его состоянием и назначено адекватное специфическое лечение.
Рис. 12. На фото проточные автоматические анализаторы с помощью которых осуществляется подсчет CD4-лимфоцитов в крови исследуемого.
Все большее распространение в последние годы получает молекулярно-генетический метод диагностики ВИЧ-инфекции — полимеразная цепная реакция (ПЦР). С ее помощью определяется генетический материал возбудителя — РНК уже через 1 — 2 недели после предполагаемого заражения, а высокая чувствительность теста позволяет выявлять РНК вирусов даже если их в исследуемом материале находятся единицы. Данная методика является дорогостоящей и поэтому в настоящее время для скрининга не используется. К тому же значимой проблемой исследования является возможность получения ложноположительных результатов.
Суть данной методики заключается в получении множества копий РНК вируса (нуклеиновой кислоты), в последующем выявляемых как по характерному строению, так и с помощью меченых ферментов или изотопов.
С помощью ПЦР можно разрешить сомнительные результаты, полученные при применении методики иммуноблотинга, диагностировать ВИЧ-инфекцию на ранних стадиях (уже через 1 — 2 недели после предполагаемого заражения), контролировать эффективность проводимой антиретровирусной терапии, определять стадию заболевания.
Анализы ПЦР рекомендовано сдавать спустя 4 недели от момента предполагаемого риска.
Рис. 13. На фото слева нормальный Т-лимфоцит, справа — Т-лимфоцит, инфицируемый ВИЧ. Видны множественные пузыри, между которыми появились новообразованные вирусы (мелкие округлой формы образования). С помощью ПЦР ВИЧ-инфицированность выявляется уже через 1 — 2 недели после предполагаемого заражения.
- С помощью ПЦР возможно выявить сам вирус и его количество.
- Возможность использования у детей младше полутора лет.
- Проводить оценку эффективности лечения.
- Определить тяжесть и прогноз заболевания.
- Большая стоимость исследования.
- Наличие специализированных лабораторий.
- Длительность получения результатов (до 4-х недель).
- Получение результата на 7 — 10 день лицам в случае предполагаемого инфицирования, когда желателен результат, полученный в короткие сроки.
- Для определения срока начала и оценки эффективности проводимого лечения.
- ПЦР проводится инфицированным беременным за 4 недели до родов с целью решения вопроса о применения кесарево сечения.
- Новорожденным от инфицированных матерей. Дважды полученный положительный результат свидетельствует о заражении ребенка.
В обычных условиях для скрининга и диагностики ВИЧ-инфекции ПЦР не используется
- РНК ПЦР доказывает факт наличия вируса иммунодефицита в крови и объем выявленной РНК. Данное исследование применяется у диагностированных лиц с целью оценки эффективности проводимой терапии.
- С помощью ДНК ПЦР определяется наличие вируса в мононуклеарных клетках у детей, когда антитела к вирусу иммунодефицита человека у матери мешает использовать методику ИФА.
Вирусная нагрузка определяется путем подсчета количества РНК-копий в 1 мл плазмы крови, что позволяет определить стадию заболевания, провести анализ проводимого специфического лечения, определить тяжесть и прогноз заболевания. Чем выше вирусная нагрузка, тем меньше в плазме крови регистрируется CD4-лимфоцитов.
- РНК либо не выявлена, либо число копий РНК менее 20 в 1 мл. плазмы.
- РНК выявлена на пределе чувствительности — менее 20 копий/мл.
- РНК от 20 до 10 6 копий в 1 мл плазмы крови говорит о достоверности результата.
- РНК-копий более 10 6 мл — верхний предел линейного диапазона.
Увеличение вирусной нагрузки у больного с ВИЧ-инфекцией в три и более раза является клинически значимым результатом.
Контроль над вирусной нагрузкой проводится каждые 3 месяца у больных, лечение которым еще не проводится. В случае начала проведения антиретровирусной терапии контроль осуществляется через 2 — 8 недель.
Рис. 14. ПЦР в последние годы пользуется все большей популярностью.
Рис. 15. Амплификаторы для проведения ПЦР.
Тест на ВИЧ необходимо проводить на ранних сроках инфицирования и периодически при заболевании, что обеспечит своевременное назначение антиретровирусной терапии предупреждение и развития грозных инфекционных и онкологических процессов.
Обнаружить вирусы, его РНК, ДНК, антигены и антитела можно не только в сыворотке крови, но и сперме, слюне, содержимом влагалища и др. Культивируют ВИЧ в культуре клеток лимфоцитов. Методика является высокочувствительной и специфичной (до 100%), однако дороговизна исследования не позволяет его использовать в повседневной лабораторной работе.
В результате поражения вирусами иммунодефицита человека кроветворных органов отмечается угнетение кроветворения, что проявляется снижением числа лимфоцитов (лимфопения), нейтрофилов (нейтропения), тромбоцитов (тромбопения) и анемия. К тому же на разрушение клеточных популяций оказывают влияние аутоиммунные процессы, развивающиеся у ВИЧ-инфицированных больных. В сыворотке крови больных доминирут иммуноглобулины IgG.
Рис. 16. Забор крови из вены и пальца для анализов.
Сегодня сдать анализ на ВИЧ можно любому человеку анонимно и бесплатно за считанные минуты, а современное оборудование и обученный персонал позволяют получить максимально точные результаты.
источник