Выявляют ли анализы пцр сифилис

Сифилис — инфекционное заболевание, вызываемое бледной трепонемой (Treponema pallidum), передаваемое преимущественно половым путем. Заболевание характеризуется поражением кожи, слизистых оболочек, нервной системы, внутренних органов и опорно-двигательного аппарата, может протекать в скрытой форме. Продолжительность инкубационного периода в среднем составляет от 2 недель до 2 месяцев.

В диагностике заболевания применяют прямые методы (обнаружение возбудителя или его ДНК) и косвенные методы лабораторной диагностики (выявление в крови специфических антител).

Косвенные методы определения подразделяются на нетрепонемные (RPR, РМП) и трепонемные (ИФА, ИХЛА, РПГА, РИФ, иммуноблотинг).

Обнаружение ДНК Treponema pallidum методом ПЦР в соскобах эрозивно-язвенных элементов информативно на ранних стадиях заболевания (первичном и вторичном сифилисе). В качестве образца используется серозное отделяемое сифилидов, в связи с этим тест не информативен на стадии разрешения элементов. Тест необходимо проводить одновременно с определением антител в крови (методы RPR, РПГА, ИФА).

Референсные значения (вариант нормы):

Выявление ДНК Treponema pallidum является подтверждением сифилиса.

Обращаем Ваше внимание на то, что интерпретация результатов исследований, установление диагноза, а также назначение лечения, в соответствии с Федеральным законом № 323-ФЗ «Об основах охраны здоровья граждан в Российской Федерации» от 21 ноября 2011 года, должны производиться врачом соответствующей специализации.

источник

ПЦР на сифилис – это высокоточный метод диагностики заболевания, основанный на новейших достижениях молекулярной биологии. Чаще всего для выявления возбудителя в организме человека используется ДНК патогена, но в последнее время появилась возможность работать и с РНК возбудителя.

Благодаря практически 100% вероятности выявления вида микрофлоры, ПЦР считается «золотым стандартом» в диагностике практически всех инфекционных заболеваний. С этого метода, как правило, обычно начинается диагностика инфекционных заболеваний, в том числе и сифилиса.

В данной статье мы разберем технологию проведения пцр, плюсы и минусы метода, а также узнаем как расшифровываются результаты при сифилисе.

ПЦР – это полимеразная цепная реакция, используемая для работы с генетическим материалом, в частности с дезоксирибонуклеиновой кислотой. ДНК является внутренней структурой каждого организма, хранящей всю информацию о нем.

Для выявления вида патогенной микрофлоры при проведении ПЦР на любое инфекционное заболевание, в том числе и сифилис, достаточно минимального фрагмента возбудителя. Оборудование современных клинических лабораторий позволяет досконально исследовать клеточную ДНК.

Для проведения анализа биологический материал проходит следующие этапы обработки:

• внутренний генетический материал патогенного микроорганизма многократно синтезируется (клонируется), увеличивая количество имеющихся один или несколько фрагментов ДНК в миллионы раз. Для этого пробирки с материалом помещаются в специальные приборы, где по сложному алгоритму происходит изменение температуры. Таки образом оказывается влияние на процесс синтезирования. Через определенное время после завершения реакции можно получить результат о выявленном генетическом материале;
• из всей массы полученной ДНК берется образец и сравнивается с эталоном (маркером или праймером). Такой анализ позволяет выявить наличие генетического материала, идентичного эталонному. Визуализация результата зависит от разновидности метода. Это может быть ультрафиолетовое облучение, использование геля в качестве основы для электрофореза, оценка на скорость реакции в реальном времени и другие способы.

Методика также позволяет провести количественный анализ ПЦР. Для этого высчитывается, сколько материала приходится на единицу количества клеток в содержащемся образце.

В настоящее время количественное определение возбудителя сифилиса методом полимеразной цепной реакции не проводится. Это связано с тем, что количество возбудителя в мазках или другом материале может ежедневно изменяться под влиянием защитных сил организма, предпочтений в питании, сексуальных связей и других факторов.

В случае необходимости методом ПЦР также можно выявить генетические особенности пациента, которые могут повлиять на течение заболевания. Это исследование поможет подобрать наиболее эффективные методы терапии.

Метод цепной полимерной реакции имеет ряд преимуществ перед другими способами диагностики сифилиса. Для пациентов большое значение имеет невысокая стоимость исследования.

А для врачей наибольшую ценность имеют такие показатели:

• высокая оперативность. Результат исследования можно получить в течение одного дня. ПЦР позволяет синтезировать единичную молекулу патогена в течение 3 минут. Для получения нужного количества материала для качественной визуализации и постановки точного диагноза достаточно 30-40 циклов. Такой метод позволяет за короткий промежуток времени выявить микрофлору, для роста и развития которой в обычных условиях в целях идентификации потребуется намного больше времени;
• специфичность. Для получения достоверных результатов анализа ПЦР на сифилис для определения инфекции достаточно присутствие одного фрагмента возбудителя. Также полимеразный анализ, в случае необходимости, дает возможность одновременно выявить и другие болезнетворные организмы;
• сверхчувствительность. Методика позволяет обнаружить патогенную микрофлору в организме даже тогда, когда другие методы диагностики не выявили присутствия или следов возбудителя болезни;
• высокая точность. Диагностическая ценность полимеразной реакции достаточно высокая и составляет 98%;
• избирательность метода. ПЦР позволяет идентифицировать ДНК конкретного микроорганизма в присутствии генной информации миллионов других носителей.

Полимеразная цепная реакция позволяет обнаружить ДНК бледной трепонемы и, следовательно, наличие самой патогенной микрофлоры, а не антитела или другие следы присутствия возбудителя, которые могут оставаться в организме длительное время после лечения сифилиса. Поэтому после излечения в контрольных анализах присутствия дезоксирибонуклеиновой кислоты быть не должно.

В случае заражения инфекцией анализ ПЦР становится положительным на порядок раньше, что помогает своевременно обнаружить не только сифилис, но и другие опасные инфекции. Этот факт имеет большое значение в раннем выявлении заболевания, когда важную роль играет время начала лечения и присутствует высокая опасность стремительного распространения патологии в силу повышенной заразности.

Для получения достоверных результатов лаборатория должна иметь современное высокотехнологичное оснащение. Также обязательно наличие фильтра биологического очищения воздуха, чтобы патогенный материал не попал в образцы других пациентов.

Преимущества метода ПЦР в ранней диагностике инфекционных заболеваний, передающихся при половых контактах, очень важны в раннем выявлении такого высоко заразного заболевания, как сифилис.

К недостаткам метода можно отнести влияние человеческого фактора. Забор материала для анализа и само исследование должны проводиться в строгом соответствии с инструкцией.

Для полимеразной реакции на сифилис врач может назначить исследование крови, смывов, соскобов. Но наибольшей популярностью пользуется анализ мазков из урогенитальных путей. Это связано с тем, что именно в этом материале легче всего обнаружить присутствие возбудителя в высокой концентрации.

У женщин берут мазки из шейки матки, влагалища и уретры. У мужчин при сифилисе материал берут из уретры или используют, если пациент боится боли во время процедуры, мочу или сперму.

Для получения достоверного результата мазка на ПЦР надо:

• за двое суток воздержаться от интимных контактов;
• женщинам за двое суток до исследования не проводить спринцевания;
• не мочиться 2-3 часов до посещения врача.

Если для исследования берется кровь, особой подготовки проводить не требуется.

Важным правилом при сдаче любого материала на анализ является полное исключение приема любых антибактериальных, противогрибковых и противовирусных препаратов минимум за неделю до забора материала. Это требуется для того, чтобы дать возможность возбудителю накопиться в организме в достаточном количестве и исключить появление ложноотрицательных результатов.

ПЦР на сифилис проводится по назначению лечащего врача при наличии явных симптомов заболевания, у лиц, имевших половые контакты с больным человеком, при подозрении на скрытые формы патологии. Анализ назначается с целью ранней диагностики заболевания, а также при явных сифилитических симптомах при отрицательных результатах серологических методов исследования. ПЦР поможет выявить патологию у новорожденных в случае имеющегося сифилиса у матери, определить наличие болезни у ВИЧ-инфицированных пациентов.

При проведении ПЦР на сифилис результат может быть положительным или отрицательным. Если ДНК искомого организма обнаружен, значит, человек болен сифилисом. Если пациент здоров, то никаких следов присутствия патогенной микрофлоры выявлено не будет, и ответ является отрицательным.

При диагностике также надо учитывать следующие нюансы:

• если ПЦР положительная, а кровь на антитела дала отрицательный результат, все равно требуется проводить лечение, потому что в материале обнаружен сам микроорганизм. Отсутствие позитивных серологических реакций может быть обусловлено особенностями иммунной системы;
• если при отрицательной ПЦР серологический анализ крови показывает положительный результат, требуется провести дополнительные исследования для детализации и выявления провоцирующего агента;
• при получении положительного результата также надо иметь в виду возможность образования копий ДНК уже погибших возбудителей сифилиса. Поэтому для исключения ложной интерпретации анализа через один-два месяца ПЦР надо провести повторно.

Если возникает необходимость проведения исследования, интерпретации результатов и получения адекватного лечения, надо обращаться только к узкопрофильному специалисту. Это может быть дерматовенеролог, гинеколог, уролог.

Анализ полимеразной цепной реакции проводят лаборатории венерологических диспансеров, а также коммерческие диагностические центры. Стоимость исследования составляет от 360 до 700 рублей и зависит от региона страны.

источник

Сифилис – венерологическое заболевание, вызываемое бледной трепонемой.

Оно передается как половым путем, через любой вид сексуального контакта, так и бытовым (что происходит реже).

Сифилис может передаться бытовым путем через губную помаду, мокрое полотенце, постельное белье и так далее.

У врачей-венерологов, сифилис, из-за контакта с пациентами, может развиться на руках.

Сифилис делится на три стадии, разделенные длительными промежутками:

1. I. Первичный сифилис. Появление твердого шанкра в местах локализации бледной трепонемы.
2. II. Вторичный сифилис. Инфекция распространяется по всему человеческому организму вместе с лимфатической жидкостью. Увеличиваются лимфоузлы, появляются папулы и пустулы на коже, а также участки депигментации, повышается температура.

1. III. Третичный сифилис – последняя стадия. Появляются новообразования, оставляющие после себя рубцы. Выявляются тяжелые органные поражения, в том числе, нервной системы.

О том как проходят анализы на
сифилис рассказывает
подполковник медицинской службы,
врач Ленкин Сергей Геннадьевич

Содержание данной статьи проверено и подтверждено на соответствие медицинским
стандартам врачем дерматовенерологом, урологом, к.м.н.

ПЦР на сифилис

ПЦР (полимеразная цепная реакция) — метод диагностики инфекций, передающихся половым путем.

Как и любой другой метод диагностики венерических заболеваний, полимеразная цепная реакция обладает своими плюсами и минусами.

• Высокая чувствительность, которую показывает анализ ПЦР на сифилис. Данный метод может обнаружить инфекцию, даже если в биологическим материале, содержится только одна клетка возбудителя. С помощью ПЦР обнаруживаются ДНК или ее обломки даже после полного излечения от инфекции

• Универсальность данного метода. ПЦР-метод может находить инфекцию практически в любом материале: моче, крови, сперме, простатическом секрете, отделяемом конъюнктивы, соскобах эпителия урогенитального тракта, прямой кишки или ротоглотки.
• Прямое определение возбудителя. К примеру, метод ИФА (иммуноферментный анализ), определяет присутствие возбудителя по косвенному признаку – антителам к тому или иному возбудителю.

• Быстрый результат. Результат ПЦР диагностика сифилиса дает уже через четыре-пять часов.

Все вышеперечисленные плюсы доказывают

Теперь перейдем к минусам, которые имеет любой метод диагностики:

• Возможность получения ложного результата. Это может произойти, когда инфекция уже мертва, но в организме все еще содержится ее ДНК.

Специальной подготовки для этого вида обследования не требуется.

Венозная кровь забирается натощак утром в лаборатории.

Показаниями к данному анализу являются:

Результат исследования записывается в бланке в двух варианта:

• обнаружено (найдены специфические для Трепонема паллидум ДНК),
• не обнаружено – фрагменты ДНК не обнаружены или их концентрация на грани чувствительности.

Чувствительность метода составляет 100%.

Исследования на сифилис методом ПЦР регламентированы приказами Минздрава РФ.

И проводятся в соответствии с его методиками.

очень желательны для пациентов:

1. 3) при поражениях кожи слизистых неясного происхождения у иммунодефицитных пациентов.

Для данных категорий пациентов в качестве исследуемого материала на сифилис используется соскоб эпителия урогенитального тракта, простатический секрет или эякулят, соскоб из ротоглотки, прямой кишки, отделяемое конъюнктивы.

При необходимости сдать ПЦР анализы на сифилис, обращайтесь к автору этой статьи – венерологу, урологу в Москве с 15 летним опытом работы.

источник

Сифилисом называется венерическая болезнь, которая возникает в результате размножения патогенной бактерии — бледной трепонемы (Treponema pallidum). Болезнь относится к тяжелым и поражает людей с ослабленным иммунитетом. Своевременно проведенный анализ на сифилис позволяет выявить данное заболевание и начать его лечение прежде, чем начнутся опасные осложнения.

Важно! Для выявления и подтверждения этой болезни следует сдать анализ крови на сифилис. Вместе с тем 100% достоверного результата не может гарантировать ни один тест, поэтому приходится проводить не одно, а несколько разных исследований.

От трихомонады или гонококка бледная трепонема отличается тем, что мазок на сифилис ее не обнаруживает. Если симптомы заболевания отсутствуют, то для теста с целью обнаружения болезни больше всего подходит кровь.

Внимание! Диагностика болезни состоит из 2 направлений: выявление клинических симптомов и серологический тест.

От качества подготовки к процедуре зависит точность диагностики сифилиса. Клиническая картина и лабораторные исследования, взятые в комплексе, позволяют установить правильный диагноз и подобрать адекватное лечение.

Внимание! Каждая лаборатория имеет свой метод проведения диагностики, поэтому для получения корректных результатов рекомендовано выполнение двух-трех тестов в одной и той же лаборатории.

Необходимым условием при сдаче серологического теста на сифилис является 8-часовое голодание, а еще лучше не есть 12 часов до процедуры. Запрещено также употребление спиртных напитков. За несколько дней до сдачи крови из рациона должна быть исключена:

Курильщики должны выкурить последнюю сигарету минимум за час до сдачи крови. В тех случаях, когда для исследования должна быть взята кровь из вены, нужно постараться исключить факторы, могущие оказать влияние на результат. В качестве таких факторов рассматриваются:

• физическое напряжение;
• эмоциональное возбуждение.

Для гарантии точного результата необходимо соблюдение некоторых правил, в числе которых запрет на употребление спиртных напитков перед проведением исследований.

Диагностировать болезни возможно посредством прямых и непрямых способов. Сама бледная трепонема выявляется только прямым методом. Непрямой же метод обнаруживает антитела к спирохете. Если найдены антитела, то это подтверждает наличие спирохеты в организме. К непрямым способам диагностики относятся серологические реакции, объектом исследования которых является сыворотка крови.

Антитела можно обнаружить в процессе их контактирования с антигенами. Поэтому для проведения серологической реакции употребляются вещества с содержанием заданного антигена. По типу данного антигена реакции подразделяются на трепонемные и нетрепонемные:

• Трепонемная реакция проходит с выявлением антител к антигенам трепонемы.
• К нетрепонемным относятся реакции, обнаруживающин антитела к липопротеидам разрушенных трепонем или клеток человеческого организма.

Важно! Так как последние мало чем отличаются от липопротеидов тканей животных, то итог анализа на сифилис может оказаться ложноположительным. Кардинально подтвердить диагноз заболевания может только положительная трепонемная реакция.

Для диагностики применяют весь арсенал обследований. Обычно для подтверждения диагноза необходимы несколько анализов.

В венерологии принято деление всех серологических исследований крови на две группы:

• Неспецифические (RW).
• Специфические (РИФ, ИФА, РИБТ, РНГА).

Какие же анализы сдают на сифилис?

• Исследование крови RW (реакция Вассермана), позволяющее обнаружить наличие возбудителя и его активность, а также оценить перспективы назначенного лечения. В некоторых случаях тест может выдать ошибочный результат.
• Тест крови РИФ — является более чувствительным, позволяющим выявить заболевание уже на начальной стадии. Особенно полезен для обнаружения скрытых симптомов заболевания.
• ИФА делается для определения наличия в организме антител к бледной трепонеме.
• Тест РПГА может подтвердить стадию патологии. Его применяют не самостоятельно, а лишь в совокупности с иными.
• РИБТ применяют для того, чтобы распознать ложноположительную реакцию Вассермана.

Для любого теста необходим забор крови. Подготовка к сдаче анализа на сифилис включает стандартный перечень правил.

Важно! Ни один тест не является 100% доказательством того, что пациент заражен сифилисом. Положительная реакция не является абсолютным свидетельством о наличии болезни у человека.

Кроме диагностирования в лабораторных условиях, возможно проведение экспресс теста на сифилис в домашних условиях. Набор для теста можно приобрести в аптеке. Время анализа на сифилис в данном случае сокращается до 20 минут. Тест на дому имеет достаточно высокую чувствительность.

Многие люди слышали и знают, как называется один из известных анализов на сифилис — реакция Вассермана. Такой тест покажет положительный результат уже на 5-8 неделе с момента заражения. Суть метода заключается в том, что в сыворотку крови вносят искусственный белок — заменитель трепонемы, и комплемент — связывающий белок. Если в крови имеются соответствующие антитела, то они связываются с антигенами и выпадают в осадок.

Результат исследования определяется визуально:

• Нет осадка — значит, отсутствуют белки для защиты, соответственно, нет и болезни.
• Осадок выпал — реакция положительная, то есть в крови, возможно, происходит борьба с недугом.
• Незначительное число мелких хлопьев — результат сомнительный (ни да, ни нет).

Одним из показателей реакции является ее интенсивность. Ее принято обозначать в плюсах (или крестах):

++++ — реакция резко положительная.

Далее речь пойдет о том, какие еще анализы сдают на сифилис. Диагностировать раннее проявление болезни способен иммуноферментный анализ (ИФА). С его помощью возможно обнаружить антитела IgM, IgA, IgG. Для этого используют иммуноглобулины, помеченные энзимом, и особый реагент. Результат оценивается по насыщенности цвета полученных проб: много антител — цвет смеси более насыщен.

Важно! Метод является достаточно специфичным и чувствительным. Результат ИФА на сифилис основан на компьютерном анализе, при котором исключается субъективная оценка. Для теста применяют специально разработанные и автоматизированные комплексы.

Анализ ИФА на сифилис считается одним из наиболее совершенных способов диагностирования.

Недостатком этого метода являются:

• сложность проведения;
• длительность;
• необходимость сложного оборудования;
• наличие обученного персонала.

Еще одним существенным недостатком метода ИФА на обнаружение сифилиса выступают сравнительно частые ложноположительные результаты. ИФА часто используют после неспецифических тестов или в связке со специфическими.

РИФ, или реакция иммунофлюоресценции, является чувствительной реакцией, поэтому у многих больных она показывает положительный результат уже в начальном серонегативном периоде болезни.

Сущностью исследования является соединение специфического антигена (бледной трепонемы) с антителами сыворотки крови пациента и флюоресцирующей сывороткой (соединение кроличьей сыворотки со светящимся веществом). Если реакция положительная, то в микроскопе видно желтовато-зеленое свечение бледных трепонем.

Свечение оценивается в степенях:

• Положительная реакция фиксируется, как 4+, 3+, 2+.
• Отрицательная констатируется, как 1+ (свечение отсутствует).

Важно. Любой случай вторичного сифилиса отмечен положительной реакцией, так же, как и латентный сифилис. Положительная реакция наблюдается и при наличии врожденного сифилиса.

Насыщенность свечения в качестве способа диагностики: свечение наблюдают в люминесцентный микроскоп.

Реакция пассивной гемагглютинации — тест, который основан на методике, при помощи которой определяется агглютинация эритроцитов в случаях, когда в них имеются антигены возбудителя заболевания — бледной трепонемы.

Агглютинации не происходит, если в материале отсутствуют антитела трепонемы. РПГА как один из основных анализов, предназначенных для выявления и последующего лечения сифилиса, проводится около 50 лет, при этом он широко применяется в серодиагностике.

Достоинством РПГА признается высокая, почти 100% специфичность. Благодаря этому анализ используется как подтверждение положительного результата одного из неспецифических, нетрепонемных исследований. Чувствительность теста составляет не менее 99-100%, причем положительная реакция высока и при скрытых формах болезни.

Примечание. Трепонемные тесты, в том числе и РПГА, намного чувствительнее неспецифических, нетрепонемных. В связи с этим трепонемные тесты стали использоваться чаще.

Положительный результат исследования с помощью РПГА должен быть обязательно подтвержден. Для этого применяют другой трепонемный тест, к примеру, метод ИФА при сифилисе.

РИБТ, реакция иммобилизации бледных трепонем, представляет собой наиболее специфический тест крови. Он отличается высокой точностью и качеством, однако это — дорогостоящая процедура, и выполнить ее могут только лаборатории, оснащенные по последнему слову медицинской техники.

Данный тест применяется только в тех случаях, когда имеются:

• сомнения в данных других серологических исследований;
• подозрения на ложноположительные результаты (например, у беременных).

К одному из высокочувствительных трепонемных тестов относится иммуноблоттинг (Western Blot), метод, сочетающий электрофорез и ИФА. Электрофорез разделяет бледные трепонемы на отдельные антигенные группы. Материал после этого обрабатывается сывороткой пациента.

Для крови больного человека характерно наличие специфических иммуноглобулинов IgM и IgG. К последним добавляется сыворотка с антителами, помеченная с помощью радиоизотопов или ферментов. Участки с иммуноглобулинами отличаются специфическими полосками. Иммуноблоттинг является современным достоверным и чувствительным способом диагностики. Однако для его проведения необходима дорогая медтехника.

источник

Вопрос к доктору Сухову Ю.А.
Здравствуйте. Я вам уже задавала вопрос на сайте «Здоровье Украины» очень кратко. Я полно напишу свою историю. Пожалуйста, проконсультируйте. Какие анализы нужно ещё сдать?
2 года назад был случайный половой контакт открытый.
Через 1,5 месяца начался какой то ужас: длительная лихорадка, в области щитовидки как будто шла какая то работа, что то гудело, потом головные боли, ангины, сильные боли в костях и мышцах сначала колющего характера, потом как кипяток шёл по мышцам,тошнота,Сыпь разовая,частые ОРВИ,которые длительное время не поддавались лечению,отдышка,трудности при дыхании,неприятный запах изи рта, невралгии, ночное потоотделение,сильная слабость, снижение работоспособности. Я превратилась почти в труп. До этого я была здоровой и цветущей девушкой, профессионально занималась танцами.Физически была достаточно вынослива и активна. Простудами вообще практически не болела.Была практически здорова.
Через 1год и 10 месяцев после незащищённого полового контакта сдала тест на вич в 2 разных лабораториях ИФА на антитела к вич отрицательно.
Гепатит В и С отрицательно.
ВЭБ ПЦР отрицательно
ЦМВ ПЦР отрицательно
Вирус герпеса 6 типа отрицательно
Токсоплазмоз ПЦР отрицателно
Сифилис отрицательно
ИППП отрицательно.

флюрография норма
Иммунограмма:
иммуноглобулин А 3,78 г/л (норма 0.70-4.00)
иммуноглобулин М 4,04 г/л (норма 0.40-2.30)
иммуноглобулин G 12,74г/л (норма 7.00-16.00)
Иммуноглобулин Е 8,49 г/л (норма до 100)
компонент комплемента С3 1,54 г/л (норма 0.9-1.8)
компонент комплемента С4 0,43 г/л (норма 0,1-0,4)
ЦИК
-спонтанная 112 оптич.единицы 80.0-125.0
-индуцированная 212 оптич.единицы 150.0-380.0
— фагоцитарный индекс 1,9 (1.5-3.0)
Пролифер.активность лимф.(РБТЛ)с
митогеном Кон.А 1,36 оптич.единицы (1.2-1.68)
ЦИК крупные 18 оптич.единицы (до 20)
ЦИК средние 99 оптич.единицы (60.0-90.0)
ЦИК мелкие 182 оптич.единицы (130.0-160.0)
Т-лимфоциты (СД3+,СД19-) 84,7 %проценты (норма 54-83)
Т-хелперы/Т-индукторы (СД4+,СД8-) 66.1% (норма 26-58)
Т-супрессоры/Т-цитотокс.клетки(СД4-,СД8+) 17.4%(21-35)
Иммунорегуляторный индекс
(СД4+,СД8-/СД4-,СД8+) 3.8 % (норма 1.2-2.3)
Цитотоксическте клетки
(СД3+,СД56+) 5 % (норма 3-8)
NK клетки (СД3-, СД56+) 5,3 % (норма 5-15)
В-лимфоциты (СД3-,СД19+) 9,5% (норма 5-14)
Моноциты (СД14) 1,4% (норма6-13)
Общий лейкоцитарный антиген,СД45 99,8 % (норма 95-100

В общем анализе крови: СОЭ 30; остальное норма.
Биохимия положительное СРБ, остальное норма.

Что мне делать? Я в отчаянии.Я уже на всё сдала, на все инфекции, а причина так и не найдена.Сдавать снова на вич?Уже прошло 2 года после контакта. Некоторые симптомы ушли, но чувствую себя очень плохо,сильная слабость,невралгии постоянные, потливость в области грудной клетки по ночам.Я не понимаю , чем я больна.Может, нужно сдать ещё какие то анализы и прийти к вам на приём?Я уверена, что этот молодой человек меня заразил, больше я его не видела. Помогите. Посоветуйте, что делать?

Сдавал анализы ИФА инфекционная панель.
герпес Ig G результат: 40,88 Норма: 11 Mo/мл позитивный, 9-11 гр.концентрация.

микоплазма не обнаружена.
сифилис не обнаружен.
трихомониаз Ig G результат: 0,04 норма: 1,0 позитивный.

уреаплазма — не обнаружена.
токсоплазма Гондии результат 30Mo/ml, гран.конц. 1-30, негативный 500 норма: 1,0 обнаружено.

Подскажите какой диагноз у этих анализов? Беспокоит результат трихомониаз Ig G и цитомегаловирус.

Анализы ПЦР инфекционная панель ни один вирус не обнаружен.
Анализ выделений из мочевых органов так же инфекций не обнаружено.

Добрый день 6.03.2011г. был не защищенный половой акт (оральный) на следующий день побежал сдавать анализ на гепатит В,С и ВИЧ брали кровь из вены . Результат был отрицательный интересует достоверность этих результатов ?И где можно пройти точные(ПЦР анализ ВИЧ,Гепатит,Сифилис)Днепропетровск?
А так же хотел узнать следующие тесты эффективные? Хотел бы сразу на все проверится..

Комплексная диагностика урогенитальных инфекций (мужской): микроскопия урогенитального мазка, трепонемные антитела — TPHA; обнаружение ДНК Ureaplasma sp. методом ПЦР; обнаружение ДНК Mycoplasma genitalium методом ПЦР; обнаружение ДНК Chlamydia trachomatis методом ПЦР; обнаружение ДНК Trichomonas vaginalis методом ПЦР; Обнаружение ДНК Mycoplasma hominis методом ПЦР; обнаружение ДНК Neisseria gonorrhoeae методом ПЦР

источник

Анализ на сифилис является одним из самых распространенных среди лабораторных исследований. Широко используются анализы на сифилис при проведении профилактических обследований. При помощи микроскопии выявляется возбудитель сифилиса — бледная трепонема. При помощи серологических реакций подтверждается диагноз сифилиса, устанавливается диагноз скрытого сифилиса, проводится контроль эффективности лечения, определяется излеченность больных.

Диагноз сифилиса устанавливается на основании клинических данных, обнаружении возбудителей сифилиса в образцах материала и подтверждении диагноза серологическими методами исследования. Проявления сифилиса многочисленны и многообразны, ввиду чего болезнь выявляется врачами разных специальностей. Дифференциальная диагностика первичного сифилиса проводится с целым рядом заболеваний.

Рис. 1. На фото первичное проявление сифилиса — твердый шанкр.

При заражении сифилисом в организме больного образуются антитела. Серологическая диагностика помогает врачу изучать динамику образования антител в организме больного сифилисом в начальных стадиях заболевания, в период лечения и после его окончания, решить вопрос рецидив заболевания у больного или повторное заражение (реинфекция), поставить диагноз сифилиса при массовых медицинских условиях.

Первыми после заражения начинают вырабатываться антитела IgM. Они начинают выявляться при помощи серологических реакций уже со второй недели после заражения. На 6 — 9 неделях заболевания их количество становится максимальным. Если больной не лечился, то антитела исчезают через полгода. Антитела IgM исчезают через 1 — 2 мес. после лечения раннего сифилиса, через 3 — 6 мес. — после лечения позднего сифилиса. Если регистрируется их рост, то это служит признаком рецидива сифилиса или говорит о повторном заражении. Молекулы IgM крупные и через плаценту к плоду не переходят.

Антитела иммуноглобулины IgG появляются в конце первого месяца (на 4-й неделе) от момента заражения. Их титр выше, чем титр IgM. IgG сохраняются после излечения достаточно длительное время.

Существует множество серологических реакций. Это объясняется антигенной множественностью бледных трепонем. В сыворотке крови больного человека на разных стадиях сифилиса кроме специфических образуются те или иные неспецифические антитела — агглютинины, комплементсвязывающие, иммобилизины, антитела, вызывающие иммунную флюоресценцию, преципитины и др. Серологические реакции по выявлению неспецифических антител обладают относительной специфичностью поэтому, чтобы избежать диагностических ошибок, следует пользоваться не одним, а комплексом серологических реакций (КСР).

Отличительной особенностью нетрепонемных тестов является получение ложноположительных реакций. Антитела-реагины, которые вырабатываются в крови человека против кардиолипинового антигена, регистрируются не только при сифилисе, но и при других заболеваниях: коллагенозах, гепатитах, заболеваниях почек, тиреотоксикозе, онкозаболеваниях, при инфекционных заболеваниях (лепра, туберкулез, бруцеллез, малярия, сыпной тиф, скарлатина), при беременности и месячных циклах, при приеме жирной пищи и алкоголя. Отмечено, что с возрастом количество ложноположительных реакций возрастает.

Рис. 2. На фото первичный сифилис у женщин.

Серологические тесты на сифилис подразделяются на трепонемные и нетрепонемные.

В качестве антигена в этой группе тестов используется кардиолипиновый антиген. Липидные антигены возбудителей сифилиса самые многочисленные. Они составляют 1/3 сухой массы клетки. С помощью нетрепонемных тестов выявляются антитела-реагины, которые вырабатываются против кардиолипинового антигена. В эту группу входит реакция связывания комплемента (РСКкард), реакция микропреципитации (РМП), реакция быстрого определения реагинов плазмы (RPR) и др. С помощью нетрепонемных тестов проводится первичный скрининг на сифилис (обследование групп населения), а возможность получения результатов в количественном варианте позволяет использовать эти тесты с целью контроля эффективности лечения. Положительные результаты нетрепонемных тестов должны подтверждаться трепонемными тестами. Отличительной особенностью нетрепонемных тестов является получение ложноположительных реакций.

В трепонемных тестах используются антигены трепонемного происхождения, выделенные из культуры бледных трепонем. С их помощью подтверждаются положительные результаты нетрепонемных тестов. В группу входят: РСКтреп — реакция связывания комплемента, РИФ — реакция иммунофлюоресценции и ее модификации, РИТ, РИБТ — реакция иммобилизации бледных трепонем, РПГА — реакция пассивной гемагглютинации, ИФА — иммуноферментный анализ.

Антигены для данной группы тестов получают генно-инженерным путем и используют в реакциях — РПГА и ИФА, в анализах иммуноблоттинга (ИБ) и иммунохроматографическом анализе.

Рис. 3. Для диагностики сифилиса используется комплекс серологических тестов.

Для выявления сифилиса используются нетрепонемные тесты или комплекс серологических реакций (КСР). Серологическая диагностика применятся с 5-й недели от момента заражения или с 2-3 недели после появления твердого шанкра. Антитела выявляются практически у всех больных со свежим первичным, вторичным и рецидивным сифилисом. Серологические реакции положительные у 70 — 80% больных с третичным активным сифилисом, в 50 — 60% случаев у больных третичным скрытым сифилисом.

Серологические реакции с применением нетрепонемных тестов могут давать ложноположительные результаты.

Рис. 4. Забор крови для проведения анализа на сифилис.

Реакция Вассермана (RW, РВ), изобретенная А. Вассерманом более 100 лет назад, сегодня претерпела множество изменений, однако, как дань традиции, сохранила свое название по настоящее время. Реакция связывания комплемента с применением кардиолипинового антигена предназначена не только для выявления антител, но и выполняется в количественном варианте — с разными разведениями сыворотки, что позволяет использовать ее для контроля эффективности лечения. Низкая чувствительность и специфичность, получение ложноположительных результатов — отрицательные стороны данного вида исследования.

Суть реакции Вассермана заключается в следующем: антигены, которые применяются при постановке реакции Вассермана, в случае наличия антител к возбудителям сифилиса в крови человека посредством комплимента связываются с ними и выпадают в осадок. Интенсивность реакции обозначают знаком (+). Реакция может быть отрицательной (-) — отсутствие осадка, сомнительной (небольшой осадок или +), слабоположительной (++), положительной (+++) и резко положительной (++++).

Более чувствительной является видоизмененная реакция Вассермана — реакция Колмера. С ее помощью выявляются антитела в сыворотках, где реакция Вассермана дала отрицательный результат.

При резко положительных реакциях проводится количественное определение реагинов, для чего используется сыворотка в разведениях от 1:10 до 1: 320, что позволяет использовать данный вид исследования для контроля эффективности лечения. Например, снижение титра антител и последующая их серонегативация (получение отрицательных результатов), говорит об успешном излечении заболевания.

Рис. 5. Анализ крови на сифилис — реакция Вассермана.

Микрореакция преципитации применяется для массовых обследований отдельных групп населения, диагностики сифилиса и контроля над эффективностью лечения. Для проведения данного вида исследования необходимо небольшого количества исследуемого материала. В основе микрореакции преципитации лежит иммунологическая реакция антиген-антитело. В случае наличия антител в сыворотке крови обследуемого комплекс антиген-антитело выпадает в осадок с образованием хлопьев. Реакция проводится в лунках специальной стеклянной пластины. Оценивается по интенсивности выпавшего осадка и величине хлопьев в (+) как реакция Вассермана. При обследовании беременных, доноров и для контроля эффективности лечения не применяется. VDRL и RPR являются разновидностями микрореакций.

Рис. 6. Вид реакции преципитации в капле на стекле.

Рис. 7. Анализ крови на сифилис — реакция микропреципитации.

Рис. 8. Набор для проведения реакции быстрого определения реагинов плазмы (Тест на сифилис RPR).

Все положительные тесты, полученные при проведении неспецифических серологических реакций, требуют подтверждения специфическими реакциями — трепонемными тестами.

При проведении трепонемных тестов используются антигены трепонемного происхождения. Их отрицательной стороной является невозможность использования для контроля эффективности проводимого лечения, получение положительных результатов при спирохетозах и невенерических трепонематозах и получение ложноположительных результатов при онкологических заболеваниях, лепре, некоторой эндокринной патологии. Такие тесты, как РПГА, ИФА и РИФ остаются положительными многие годы после излечения сифилиса, а в некоторых случаях и пожизненно.

РИБТ и РИФ являются более специфическими из всех серологических реакций, применяемых для диагностики сифилиса. Они позволяют различать ложноположительные реакции, выявлять поздние формы сифилиса, протекающие с отрицательными реакциями. При помощи РИБТ распознаются ложноположительные реакции у беременных, когда необходимо решить вопрос об инфицированности ребенка.

Суть реакции заключается в том, что антитела, находящиеся в сыворотке крови больного, обездвиживают бледные трепонемы. Отрицательной считается реакция при иммобилизации до 20% возбудителей, слабоположительная — 21 — 50%, положительная — 50 — 100%. РИБТ иногда дает ложноположительные результаты. Тест сложный и трудоемкий, однако, является незаменимым при проведении дифференциальной диагностики скрытых форм заболевания и ложноположительных результатов серологических реакций, в том числе у беременных. РИБТ дает 100% положительный результат при вторичном, раннем и позднем сифилисе, в 94 — 100% случаев — при других формах сифилиса.

Суть реакции заключается в том, что бледные трепонемы (антигены), соединенные с антителами, меченными флюорохромами, издают в люминесцентном микроскопе желто-зеленое свечение. Результат оценивается знаком (+). С помощью РИФ выявляются иммуноглобулины класса А. Реакция иммунофлюоресценции становится положительной раньше, чем реакция Вассермана. Она всегда положительная при вторичном и латентном сифилисе, в 95 — 100% случаев положительная при третичном и врожденном сифилисе. Техника проведения данного вида исследования проще, чем у РИБТ, но заменить РИФ на РИБТ невозможно, так данная реакция уступает РИБТ по специфичности. РИФ-10 (модификация РИФ) более чувствительна, РИФ-200 и РИФ-абс более специфичны.

Рис. 9. Анализ крови на сифилис — реакция иммунофлюоресценции (РИФ).

Суть реакции заключается в том, что сенсибилизированные сывороткой больного бледные трепонемы в присутствии комплемента прилипают к поверхности эритроцитов. Полученные комплексы при цетрофугировании выпадают в осадок. Чувствительность данного теста и специфичность близки к РИФ и РИБТ.

С помощью ИФА определяются иммуноглобулины класса М и G. Методика IgM – ИФА может быть использована в качестве скринингового и подтверждающего теста. Чувствительность ИФА и его специфичность аналогичны РИФ. При сифилисе ИФА дает положительные результаты с третьего месяца инфицирования и довольно долго (иногда всю жизнь) остается положительным.

Рис. 10. Иммуноферментный анализатор.

РПГА основана на способности эритроцитов, на которых адсорбированы антигены бледной трепонемы, в присутствии сыворотки больного склеиваться (гемагглютинация). РПГА применяется для диагностики всех форм сифилиса, в том числе скрытого. При применении высокого качества антигена данный вид серологической реакции превышает все остальные тесты по специфичности и чувствительности.

Рис. 11. РПГА применяется для диагностики всех форм сифилиса.

Рис. 12. Анализ на сифилис — реакция пассивной (непрямой) гемагглютинации (схема).

Рис. 13. Вид перевернутого зонтика, занимающего все дно пробирки, свидетельствует о положительной реакции. В случае, когда эритроциты оседают столбиком («пуговка») в центре дна пробирки говорят об отрицательной реакции.

Рис. 14. Тест РПГА в лабораторных условиях.

Наряду с серологической диагностикой методика обнаружения бледных трепонем (микробиологическая диагностика) играет важную роль, особенно в период серонегативного сифилиса, когда еще в крови отсутствуют антитела, но уже есть первые проявления свежего первичного сифилиса (твердый шанкр).

Биологическим материалом для исследования служит отделяемое с поверхности твердых язв (шанкров), содержимое пустулезных сифилидов, мокнущих и эрозивных папул, пунктаты инфицированных лимфатических узлов, ликвор и амниотическая жидкость, для проведения ПЦР — кровь.

Наилучшей методикой обнаружения возбудителей сифилиса является исследование биологического материала в темном поле микроскопа. Данная методика позволяет увидеть бледные трепонемы в живом состоянии изучить ее особенности строения и движения, отличить патогенные возбудители от сапрофитов.

Рис. 15. Анализ на сифилис — темнопольная микроскопия.

Рис. 16. При изучении сухих мазков используется окраска по Романовскому-Гимзе. Бледные трепонемы окрашиваются при этом в розовый цвет, все остальные виды спирохет — в фиолетовый.

Обнаружение бледных трепонем при микроскопии в темном поле — абсолютный критерий окончательной диагностики сифилиса.

Рис. 17. Для выявления бактерий применяется реакция иммунофлюоресценции (РИФ) — трепонемный тест. Специфический комплекс антиген- антитело при соединении со специфической сывороткой, меченной флюорохромом, в свете люминесцентного микроскопа дает свечение бактерий зеленоватым цветом.

Рис. 18. Возбудители сифилиса хорошо просматриваются в мазках, приготовленных по методике Левадити (импрегнация серебром). Бледные трепонемы темного цвета на фоне желтой окраски клеток инфицированных тканей.

Рис. 19. Возбудитель сифилиса при многократном увеличении.

Рис. 20. На фото колонии бледных трепонем. Получить культуру бактерий тяжело. Они практически не растут на искусственных питательных средах. На средах, содержащих лошадиную и кроличью сыворотки, колонии появляются на 3 — 9 сутки.

Эффективным и перспективным сегодня является методика проведения полимеразной цепной реакции. ПЦР на сифилис позволяет получить результат в течение нескольких часов, а в собранном для диагностики материале может присутствовать хотя бы несколько возбудителей заболевания.

Рис. 21. ПЦР на сифилис позволяет обнаружить ДНК или ее фрагменты бледных трепонем.

Чувствительность данного метода исследования зависит от наличия в биологическом материале бледных трепонем и достигает 98,6%. Специфичность данного теста во многом зависит от правильного выбора мишени для амплификации при проведении диагностики и достигает 100%.

Вместе с тем, в связи с недостаточно изученной сравнительной характеристики чувствительности и специфичности прямых методов диагностики сифилиса и ПЦР, данный метод обследования в РФ для диагностики заболевания пока не разрешен.

ПЦР на сифилис разрешено проводить лишь в некоторых случаях, как дополнительный метод диагностики врожденного сифилиса, нейросифилиса, при затруднениях проведения диагностики сифилиса с использованием серологических методов исследования у ВИЧ-больных.

Рис. 22. Выявление ДНК бледной трепонемы с применением ПЦР говорит либо о наличии жизнеспособных бактерий, либо об остатках погибших, но содержащих способных к образованию дополнительных копий отдельных участков хромосомной ДНК.

источник