Меню Рубрики

Иммуноферментный анализ и его нормы

Методика иммуноферментного анализа применяется в различных отраслях медицины. Но в большинстве случаев данным методом диагностируют широкий круг инфекционных заболеваний, таких как вирус иммунодефицита человека, гепатит, герпес и прочих инфекций половых органов. Также иммуноферментный анализ применяют для выявления онкомаркеров различного происхождения, определения гормонов и при диагностике репродуктивной функции организма. Материалом для иммуноферментного исследования является кровь человека.

Иммуноферментный анализ крови – это лабораторное иммунологическое исследование крови, при котором происходят качественные и количественные измерения антител (антигенов), а также гормонов. Этот метод предоставляет до 90% точности при установлении диагноза заболевания.

Медицинские лаборатории используют несколько вариантов его проведения, что влияет на срок готовности результатов. Но в среднем выдача результатов исследования происходит в период 1-10 дней после сдачи крови.

При данном виде анализа крови устанавливаются антитела разных видов – это иммуноглобулины класса M, A, G (JgM, JgA, JgG). Их накопление происходит в различные временные промежутки. Первыми начинают проявляться иммуноглобулины класса М (пятый день после начала болезни). Такие иммуноглобулины задерживаются в организме пять-шесть недель, после чего начинают исчезать из крови организма. Именно в данный период времени выявляются антитела класса М.

Вторыми проявляются иммуноглобулины класса G (через три-четыре недели). Они задерживаются в организме несколько месяцев или лет. Во время проведения иммуноферментного анализа крови и расшифровки его результата можно обнаружить возрастание антител класса G. Это свидетельствует о наличии инфекции или реинфекции.

Антитела класса А проявляются в крови на протяжении двух-четырех недель. Но всего лишь 20% из них присутствуют в сыворотке крови. Остальные же входят в состав секрета слизистых оболочек. Иммуноглобулины класса А начинают исчезать в промежутке времени от двух недель до двух месяцев. Данный процесс является свидетельством уничтожения инфекции в организме. Если после выздоровления человека проводился повторный иммуноферментный анализ крови и расшифровка результата показала наличие антител класса А – это свидетельство хронической инфекции.

Расшифровка результатов анализа может принимать такие значения:

  • JgM (-), JgG (-), JgA (-) – отсутствие иммунитета к инфекции;
  • JgM (-), JgG (+), JgA (-) – наличие поствакционного или постинфекционного иммунитета;
  • JgM (+), JgG (-/+), JgA (-/+) – наличие острой инфекции;
  • JgM (+), JgG (+), JgA (+) – наличие обострения хронической инфекции;
  • JgM (-), JgG (+/-), JgA (+/-) – наличие хронической инфекции;
  • JgM (-) – выздоровление.

В расшифровке (+) является положительным результатом, а (–) – отрицательным результатом.

Помимо уточнения классов антител в расшифровке встречаются количественные их показатели. Но обширное их объяснение может предоставить только лечащий врач.

Сыворотка крови – это прозрачная жидкость с желтым оттенком. После свертывания крови она отделяется от кровяного сгустка. Не содержит фибрина и форменных элементов.

Иммуноферментный анализ сыворотки крови основан на взаимодействии антигена с антителом, причем один из них содержит в своей структуре фермент. При взаимодействии двух компонентов содержимое пробирки должно менять свой цвет. Результаты сравниваются со стандартной цветовой шкалой, и далее устанавливается антиген, который присутствует в материале. Другими словами принцип иммуноферментного анализа сыворотки крови можно объяснить так:

  1. подготавливаются наборы антигенов (например, возбудители инфекционных заболеваний, аллергены или гормоны);
  2. пациент сдает кровь на анализ, из которой в лаборатории выделяется сыворотка;
  3. материал для исследования добавляется в лунки готовых наборов, после чего возникает реакция антиген-антитело;
  4. оставшаяся сыворотка крови убирается, а обнаруженные антитела распознаются при помощи индикаторов.

Иммуноферментный анализ сыворотки крови считается достоверным. Но в тех случаях, когда произошло неправильное взятие крови для анализа, или была нарушена техника проведения исследования, или же имеются у человека скрытые системные заболевания, результаты иммуноферментного анализа сыворотки крови могут оказаться ложными.

Иммуноферментный анализ сыворотки крови исследует практически все гормоны щитовидной железы, онкомаркеры и различные виды инфекций.

К гормонам щитовидной железы относятся тиреоглобулин (ТГ), тироксин (Т4), трийодтиронин (Т3), свободный тироксин (Т4), свободный трийодтиронин (Т3).

Иммуноферментный анализ крови в норме считается, если присущи такие допустимые нормы гормонов щитовидной железы:

  • тиреоглобулин (ТГ) – допустимые границы 70 МЕ/мл;
  • тироксин (Т4) – 64-146 нмоль/л (50-113 нг/мл);
  • трийодтиронин (Т3) – 1,8-2,8 нмоль/л (0,8-2,0 нг/мл);
  • свободный тироксин (Т4) – 11-25 пмоль/л (10-27 пг/мл);
  • свободный трийодтиронин (Т3) – 4,49-9,3 пмоль/л (2,5-5,8 пг/мл).

В случае исследования половых гормонов иммуноферментный анализ крови в нормедля женщин считается, если в организме выделяется лютеинизирующий гормон (ЛГ) в таких пределах:

  • фолликулярная фаза цикла (с первого дня месячных до двенадцатого-четырнадцатого) – 2-14 мЕд/л;
  • овуляционная фаза цикла (с двенадцатого дня по четырнадцатый день) – 24-150 мЕд/л;
  • лютеиновая фаза цикла (с пятнадцатого-шестнадцатого дня и до начала следующих месячных) – 2-17 мЕд/л.

В норме для мужчин принимается, если половой гормон вырабатывается в пределах 0,5-10 мЕд/л.

При исследовании хронического гонадотропина (ХГ) референсные значения зависят от пола человека.

  • У взрослых мужчин и небеременных женщин нормой считается уровень ХГ ниже 5мЕд/мл.
  • У беременных женщин результат зависит от срока беременности и может колебаться в пределах 25-49000 мЕд/мл.

Иммуноферментный анализ крови исследует множество онкологических показателей. К ним можно отнести наличие пролактина, эстрадиола, прогестерона, тестостерона, стероид связывающего глобулина (ССГ) и других маркеров. Но интерпретация результата анализа и норм этих показателей должна проводиться только лечащим врачом.

Кроме того, данный метод диагностирует инфекционные (например, краснуха, корь, туберкулез, герпес, сифилис, гепатит, псевдотуберкулез) и аутоиммунные заболевания разного вида, а также устанавливает иммунный статус человека. Но все показатели и полученные результаты должны расшифровываться квалифицированным специалистом.

источник

ИФА анализ — что это такое, расшифровка иммуноферментного анализа крови на паразитов, сифилис, ВИЧ, туберкулез. Норма в таблице, результаты

Благодаря развитию современной медицины, врачу при постановке диагноза больше не нужно ориентироваться на косвенные проявления заболеваний или проводить многоступенчатые лабораторные исследования. Достаточно провести один анализ, который подтвердит или опровергнет предполагаемый первоначальный диагноз.

Таким методом является иммуноферментный анализ (ИФА) — это исследование позволяет обнаружить специфические антитела и антигенны свойственные при разнообразных патологиях, что во многом ускоряет установку диагноза.

ИФА анализ — это такое лабораторное исследование (метод), которое помогает определить присутствие или отсутствие определённых антител в организме для борьбы с вирусом и их количество.

Основой исследования является естественная реакция антиген (вредоносный организму объект) – антитело (белок уничтожающий вредоносные объекты), позволяющая выявить присутствие разнообразных вирусов, бактерий.

ИФА представляет собой естественный иммунный ответ организма – взаимодействие антитела с соответствующим антигеном. Так во время ИФА в пробирку с материалом добавляются поочередно антигены или антитела, после чего происходит выявление концентрации получившихся комплексов антиген-антитело.

Если совпадения образовались, то возникают иммунные комплексы, далее происходит ферментная реакция красящего вещества с объединённой молекулой. Именно благодаря изменению цвета в ходе ферментативной индикации происходит идентификация заболевания после исследования уровня определяемого соединения.

Иммуноглобулины человека дифференцируются на несколько классов, отличающихся друг от друга свойствами, структурой и антигенными особенностями тяжелых цепей (Н-цепи). У всех млекопитающих, в том числе и человека, выделяют пять Н-цепей, которые и определяют принадлежность иммуноглобулинов к соответствующему классу: G, М, A, D, Е.

Каждый класс отличается друг от друга биологическими свойствами, и способностями связывать антигены, и скоростью и прочностью связи с молекулой.

Функции каждых иммуноглобулинов (lg) различны:

Кол-во в организме Функции Период полураспада (дней) Значение
G 70% Формируют пассивный иммунитет у новорожденного;

необходимы для иммунного ответа

улучшают фагоцитоз,

21-24 обеспечивают длительный гуморальный иммунитет при инфекционных заболеваниях
М 5-10% нужны для активации фагоцитоза,

способны связать 5 молекул антигена,

5 Обеспечивает первичную иммунную реакцию
А 10-15 Нейтрализуют токсины и вирусы

нужны для формирования раннего иммунитета

Образование местного иммунитета

4-5 Защита слизистых оболочек
Е 0,2% вызывают аллергию и анафилаксию активируют тканевые базофилы 2 Защита от паразитов
D 0,2% задействованы в выработке лимфоцитов, необходим как мембранный рецептор для антигенов; 3 Их роль малоизучена

Возникновение иммуноглобулинов происходит по своеобразной «цепочке» — lgM lgG, именно так реагирует организм на появление в организме антигена. Во время лабораторной диагностики проводится оценка концентрации трех основных иммуноглобулинов – G, M, A.

ИФА-анализ с каждым годом становится все более популярным.

Такое исследование ускоряет постановку диагноза, а это очень важно для терапии таких патологий как:

  • вирусный гепатит;
  • ВИЧ-инфекция;
  • цитомегаловирус,
  • вирус Эпштейна-Барр,
  • вирус герпеса,
  • корь
  • краснуха,
  • туберкулез,
  • сальмонеллёз,
  • дизентерия,
  • клещевой энцефалит,
  • бактерии хеликобактер,
  • боррелиоз,
  • столбняк,
  • сифилис,
  • дифтерия,
  • лептоспироз,
  • хламидиоза,
  • уреаплазмоз,
  • микоплазмоз,
  • коклюш.

Так же анализ позволяет определить инфицирование паразитами:

  • плоскими червями
  • аскаридами
  • гистолическими амебами,
  • печеночными тремадами,
  • лямблиями,
  • токсоплазмами,
  • трихинеллами,
  • двуусткой,
  • цестодозами.

ИФА является своеобразным маркером аутоиммунных патологий и злокачественных новообразований.

При подготовке к исследованию следует придерживаться таких правил:

  • за сутки до забора крови нельзя курить и употреблять алкоголь,
  • не заниматься спортом или другими физическими нагрузками,
  • стараться не допускать стрессов,

Перед тем как сдать ИФА анализ, нужно избегать стрессов.

  • прекратить употребление лекарственных средств не позже чем за 10 дней до манипуляции.
  • Так же врачи рекомендуют придерживаться специальной диеты – исключить жирную и жареную пищу, а если исследование проводится на гепатиты, то необходимо не употреблять любые оранжевые овощи и особенно цитрусовые. Сдавать кровь следует с утра на голодный желудок.

    Ложноположительным анализ бывает из-за невыполненных рекомендаций, особенно употребления жирной пищи, что приводит к слишком большой концентрации триглицеридов в плазме, из-за чего проводимость ИФА снижается.

    В качестве исследуемого материала может использоваться цельная кровь, сыворотка или плазма венозной крови. Забор материала, обычно проводится из локтевой вены, для этого применяется одноразовая игла и вакуумная пробирка, необходимо 5-10 мл крови.

    Для точности результата важно придерживаться правильной техники взятия пробы – прокол самого сосуда и окружающих тканей должен быть произведен одной манипуляцией, поэтому используется короткая игла с большим диаметром, благодаря чему не травмируется противоположная стенка вены и не повреждаются эритроциты.

    Так же для сохранения целостности эритроцитов, нужно чтобы кровь стекала по стенкам пробирки.

    Во время хранения материала следует избегать возможной его ионизации, кроме того материал не должен контактировать с остатками дезинфицирующих средств, поэтому используется только одноразовая пластиковая пробирка, с маркировкой ФИО пациента, датой и временем сдачи материала.

    Если необходимо непродолжительное хранение исследуемого материала, то используется холодильная камера с температурой 2-4 о С, если необходимо более продолжительное хранение, то материал замораживается при температуре -20 о С.

    После подготовки исследуемого материала врач-лаборант приступает к необходимым манипуляциям. Для этого используются ряд специальных наборов антигенов, обдающих свойством спровоцировать ответные реакции организма на раздражитель, это разнообразные инфекции, гормоны, аллергены.

    Схема ожидаемой реакции «антиген-антитело» выглядит приблизительно так:

    • Первичная реакция — определяемый Ig (Ab) и очищенный антиген возбудителя (Ag).
    • Для обнаружения получившихся иммунных комплексов далее следует новая иммунологическая реакция, где антигеном выступает связанный специфический Ig, а антителом для него выступает коньюгат- Ig (Ab).
    • Последний этап — ферментативная реакция, вместе с катализатором молекулой коньюгата. Субстратом выступает хромоген (не окрашенный), который в процессе протекания реакции окрашивается, и интенсивность цвета и определяется количественный показатель иммуноглобулина в пробе.

    В настоящий момент разработано множество разнообразных вариантов ИФА, четкая классификация их отсутствует. Обычно, методы рассматриваются исходя из разделения её на гетеро- и гомогенные — все фазы анализа происходят с применением твердой фазы или с использованием только раствора.

    Современные клинико-диагностические лаборатории обычно используют гетерогенный (твердофазный) ИФА, в нем под твердой фазой подразумевается абсорбция антигенов или антител на твердой поверхности специальных лунок, расположенных на полистироловом микропланшете, метод подразделяется на прямой и непрямой ИФА.

    При прямом ИФА, вносимый антиген закрепляет в период инкубационного процесса на поверхности пустых лунок, для этого исследуемые пробы материал помещают в чистые лунки на 20-25 минут, это нужно для прикрепления антигена к их поверхности. После этого происходит добавление необходимого антитела. Далее материал остается на определенное время для образования связей.

    Антитела всегда добавляют в избытке, поэтому даже при их наличии в пробе остаются не связанные антигены, а если антигенов нет совсем, то связей не будет. Чтобы удалить«лишние» антитела проводится декантация, после чего остаются только те антитела, которые создали связь с антигеном.

    После этого следует ферментативная реакции – добавление в лунки раствора с ферментом, после чего происходит окрашивание полученных связей.

    При непрямом методе ИФА используемые антитела, заранее соединенные с субстратом ферментативной реакции; в этом случае связь антител с антигеном происходит в период инкубационного процесса, после чего происходит мобилизация связей на поверхности лунок, а вносимый после конъюгат и субстратно-хромогенный реагент окрашивают реакцию.

    Таким образом, главным отличием непрямого от прямого метода является не приклеивание материала к поверхности чистых лунок, а связывание с антигеном, иммобилизованным на планшете.

    Останавливается протекание реакции с применением специализированных устройств, далее каждая лунка подвергается процессу фотометрирования, за которым следует сравнительная характеристика полученного результата с проведенными ранее контрольными пробами.

    Если обнаруживается повышение оптической плотности в пробе, то завышена и концентрация специфических антител в исследуемом результате.

    Проведение исследования не занимает много времени, от забора крови до получения результата проходит от 1 до 10 дней, в зависимости от диагностических мероприятий.

    На полученном пациентом бланке-результате диагностики указывается отрицательный либо положительный результат на определенные классы иммуноглобулинов, так же указывается количественный показатель различных классов антител.

    Возможны различные интерпретации результатов:

    1. IgM (+) (IgA, IgG не определялись) – процесс выздоровления;
    2. IgM (-) ;IgG (+), IgA (+) – хроническая инфекционная патология;
    3. IgM, IgG, IgA (все с – значением) – отсутствие защитных механизмов к инфекциям;
    4. IgG (+/-) и IgA (+/-), IgM (+) – острый процесс;
    5. IgM (-), IgA(-),IgG(+) – постинфекционный иммунитет;
    6. IgM, IgG, IgA (+) – хроническая патология в стадии обострения.

    Так, например, если были обнаружены IgG и IgM, то возможно у пациента одно из таких заболеваний:

    • вирусный гепатит;
    • цитомегаловирус;
    • герпес;
    • ветряная оспа;
    • хламидиозом;
    • стафилококковая или стрептококковая инфекция.

    Иммуноферментный анализ часто назначается при гормональных исследованиях, нормы показаны в таблице:

    Название гормона Пол Норма
    1 тиреоглобулин м/ж До 70 МЕ/мл
    2 тироксин м/ж 64-146 нмоль/л
    3 трийодтиронин м/ж 1,8-2,8 нмоль/л
    4 Свободный тироксин м/ж 11-25 пмоль/л
    5 Свободный трийодритонин м/ж 4,49-9,3 пмоль/л
    6 Тестостерон, дегидротестостерон Ж 0,5-10 мЕд/л

    ИФА анализ — это такое диагностическое исследование, которое позволяет оценить вероятность образования онкологических патологий. Однако интерпретация результатов проводится только лечащим врачом.

    ИФА подходит для выявления разнообразных форм половых инфекций, в том числе сифилиса, часто используется и для скрининга беременных.

    Благодаря этому исследованию можно узнать, как давно произошло заражение и стадия заболевания на момент исследования:

    • иммуноглобулины М говорят о длительности заболевания;
    • IgA — пациент заразился более 30 дней назад;
    • IgG обнаруживается на «пике» заболеваний, или же в тот момент, когда терапия окончилось недавно.
    Читайте также:  Допустимая норма алт в анализах

    В процессе исследования лунки на планшете с отрицательным показателем остаются бесцветные, а положительные окрашиваются в ярко-желтый цвет. Если цвет положительных лунок не совпадает с цветом контроля, то результат считается сомнительным и необходимо повторное исследование.

    Иммуноферментный анализ — это первая ступень в диагностике ВИЧ. Проводить анализ нельзя сразу же после предполагаемого заражения необходимо дождаться окончания инкубационного периода (от 14 дней до 6 месяцев).

    В ходе анализа определяются антитела к ВИЧ-1 и ВИЧ-2, происходит поиск АТ класса G, который обычно появляется на более поздних сроках и АТ класса А и М, они могут быть определены на ранних стадиях (во время инкубационного периода).

    При получении положительных проб далее следует:

    • если первый тест дал положительный результат, то кровь вновь перепроверяется другим лаборантом;
    • повторный положительный результат предполагает пересдачу материала,
    • при повторении результата, пациенту назначается иммуноблотинг.

    Окончательный вывод о наличии ВИЧ-инфекции выдается только после результата иммуноблотинга.

    ИФА также применяется в качестве диагностического исследования туберкулеза, но если у пациента даже и были выявлены антитела к данной патологии, то это не всегда подтверждает наличие у него туберкулеза, поэтому ИФА часто применяется качестве уточняющей методики, либо же для диагностики скрытой внелегочной формы.

    ИФА анализ — это такое исследование, позволяющее обнаружить у пациента заражения паразитами и простейшими, в ходе диагностики можно определить даже время заражения.

    Цитомегаловирус IgM обнаруживаются через 30-45 дней после заражения, либо во время реактивации инфекции в течение 4-6 месяцев

    источник

    Перечень доступных методик диагностики в последние десятилетия быстро расширяется, диагносты пытаются в новых методах объединить преимущества всех прежних анализов, избавившись от всех их прежних недостатков.

    В последнее время все чаще в перечне диагностических процедур фигурирует иммуноферментный анализ — современный и достаточно новый тест, о котором мало известно обычному человеку, не связанному с медициной. Тем не менее эта методика стремительно пополняет ряды своих приверженцев среди квалифицированного медперсонала. Что она представляет собой и в каких случаях ее следует использовать, можно попытаться разобраться, ознакомившись с ее особенностями и главными характеристиками.

    Иммуноферментное исследование — инструментально-лабораторная методика, построенная на молекулярной реакции «антиген-антитело», позволяющая обнаруживать специфичные белки в биологических материалах (образцах для исследования). Такими белками могут быть энзимы, разнообразные микроорганизмы (вирусы, бактерии, грибки), простейшие и т. д.

    После открытия метода ему было дано название ELISA-тест, что не имеет отношения к имени первооткрывателей, а является аббревиатурой полного названия в английском варианте — enzyme-linked immunosorbent assay. Медики всего мира используют это название, некоторые врачи в русскоязычных странах тоже так называют этот тип исследования.

    Основной принцип метода заключается в молекулярной реакции «антиген-антитело».

    Антигеном является любая чужая молекула, попавшая в человеческий организм в составе микроба-возбудителя болезни. Антигены представляют собой, как правило, белковые молекулы. Кроме микроорганизмов таким «чужаком» могут быть клетки чужой крови, не совпадающие по группе или резус-фактору.

    В ответ на попадание такого антигена в организме запускается иммунная реакция, которая направлена на защиту от любых чужих молекул. Это происходит за счет синтеза специальных агентов иммунной системы — антител (иммуноглобулинов). Каждое антитело подходит только к определенному антигену, и нейтрализует патогенного «чужака», связываясь с ним в единый комплекс. Именно процесс такого связывания и называют реакцией «антиген-антитело».

    Все антитела (иммуноглобулины) делятся на 5 видов в зависимости от того, на каком этапе иммунного ответа они появляются:

    • Класс М (IgM). Всплеск таких иммуноглобулинов наблюдается в течение нескольких первых суток после внедрения инфекции или другого патогенного агента. Приблизительно через 6 недель они начинают растворяться и исчезать.
    • КлассG (IgG). Синтезируются на втором этапе, чтобы побороть болезнь. После полной ликвидации чужих молекул они продолжают присутствовать в крови в небольшом количестве для обеспечения иммунитета на случай повторного заражения.
    • Класс А (IgА). Такие иммуноглобулины отвечают за защитные функции слизистых оболочек организма, через которые патогенным элементам проникнуть легче всего, так как слизистый эпителий гораздо тоньше и нежнее обычных кожных покровов.
    • Класс Е (IgЕ). Эти специфические глобулины направляют свое действие против паразитарных инфекций, поражающих организм человека. Они появляются вне зависимости от того, какая система органов поражена паразитами.
    • КлассD (IgD). Этот класс всегда обнаруживается даже у здоровых людей. У детей до 10 лет он постепенно нарастает, после чего его количество при условии абсолютного здоровья не изменяется. Если же показатель увеличивается выше нормы, то это может свидетельствовать о наступившей беременности, астмы, иммунодефицита и пр.

    Для ИФА-диагностики чаще всего важны уровни иммуноглобулинов IgG, IgM и IgA. По их титрам можно узнать, переболел ли человек болезнью раньше или заразился в недавнем времени, выработался ли у него иммунитет или его организм беззащитен перед патологией.

    На данный момент ИФА — один из самых точных и чувствительных методов. Он взят на вооружение специалистами в разных областях медицины и продолжает расширять сферы применения.

    • Высокая точность полученных данных.
    • Чувствительность (позволяет обнаружить необходимое вещество даже при минимальном присутствии возбудителя в образце).
    • Возможность диагностики в первые дни болезни или в инкубационном периоде.
    • Скорость получения данных в сравнении с другими методиками подобной точности.
    • Высокая автоматизация процесса и минимальное участие человека, что снижает погрешность исполнителя.
    • Получение данных о стадии патологического процесса и эффективности выбранной терапии.
    • Безболезненность и малая инвазивность при отборе материала.
    • В большинстве случаев позволяет определять ответ организма на патогенный агент, а не самого возбудителя.
    • Перед исследованием должно быть точно известно предполагаемое заболевание, так как тест высокоспецифичен.
    • Вероятность ложных показателей, вызванных техническими моментами, приемом лекарственных средств, одновременным присутствием нескольких хронических заболеваний или нарушениями обменных процессов в организме больного.
    • Интерпретацию результатов должен делать только высококвалифицированный специалист, так как для трактовки полученных данных необходимо владеть специальной подготовкой и большим запасом медицинских знаний в определенной области.
    • ИФА — достаточно редкий анализ, поэтому выполняют его далеко не во всех диагностических лабораториях.
    • Метод довольно дорогой, так как помимо реактивов в лаборатории должно быть дорогостоящее многочисленное оборудование и образцы антигенов, изготавливаемых в специальных институтах.

    Полный перечень показаний к назначению иммуноферментного исследования очень широк, он включает в себя практически все отрасли медицины.

    Чаще всего ИФА применяют для таких целей:

    • выявление инфекционных заболеваний;
    • диагностика венерических болезней;
    • определение иммунного статуса или отдельных аутоиммунных заболеваний;
    • идентификация онкомаркеров;
    • определение гормонов.

    В случае инфекционных и вирусных заболеваний методика позволяет выявить следующие патологии:

    • все типы вирусных гепатитов;
    • вирус Эпштейна-Барра;
    • все TORCH-инфекции;
    • все типы кишечных инфекций;
    • ВИЧ;
    • сифилис;
    • большинство паразитарных инфекций;
    • хеликобактериоз и пр.

    Кроме того, ИФА позволяет быстро и эффективно определить инфарктное состояние, оценить репродуктивный потенциал организма, выявить аллергию, ее источник и пр.

    Иммуноферментная методика используется для проведения клинических исследований в ходе разработки новых лекарственных препаратов и в оценке их влияния на организм человека.

    Чаще всего исследуемым материалом для иммуноферментного анализа служит кровь, которую берут из локтевой вены пациента. Отбор пробы проводится натощак, преимущественно в утреннее время. После отбора из крови отделяют и убирают те форменные клетки, которые мешают проведению исследования, оставляя только сыворотку.

    При диагностировании мочеполовых инфекций часто материалом становятся мазки из слизистых тканей половых органов, слизь из уретры или шейки матки, образцы из прямой кишки, соскобы с эрозий или язв в области паха и с других участков тела. Мазки могут брать и с ротовой полости, а также с носоглотки.

    Иногда иммуноферментное обследование используется в акушерской и гинекологической практике во время беременности для определения состояния околоплодных вод. В таком случае образцом становится амниотическая жидкость. Для этого отбирают небольшое количество жидкости, проколов плодный пузырь длинной иглой. Все манипуляции проводят стерильным инструментом, чтобы минимизировать возможные риски.

    Нередко материалом становится спинномозговая или серозная жидкость. Это происходит при местной анестезии, которая вводится инъекционно.

    Уточнить, какой тип материалов необходим для иммуноферментного анализа, должен специалист, направляющий на исследование. Часто берутся образцы сразу нескольких типов или из разных мест. Про подготовку к сдаче биоматериала пациенту тоже должен рассказать врач, выдающий направление на этот тип обследования.

    Для увеличения точности данных, полученных после иммуноферментного обследования, подготовка к отбору материала должна быть такой:

    • за 10 суток до исследования исключить антибиотики, противовирусные и антимикотические препараты;
    • за сутки необходимо исключить спиртное, курение и прием наркотических веществ;
    • в этот же период необходимо избегать физического перенапряжения;
    • предупредить специалиста, выписывающего назначение, о всех лекарствах, которые пациент принимает;
    • оповестить врача в случае беременности или подозрении на беременность.

    Лучше всего, если материалы для тестирования будут отобраны утром натощак.

    Если диагностика ставит цель определить состояние гормонального фона, то важно обеспечить себе спокойное состояние накануне и избегать нервного напряжения. Для женщин сдача крови на гормоны четко определяется периодом месячного цикла, о чем будет сказано врачом в момент назначения.

    За 2-3 дня до отбора материала нужно исключить из меню жареное и жирное, а перед анализом на гепатит не есть цитрусовые и любые другие фрукты и овощи оранжевого и желтого цвета.

    Результат качественного исследования, как правило, обозначается знаками «+» (обнаружено) или «-» (не обнаружено).

    По наличию или отсутствию определенных групп иммуноглобулинов можно делать такие выводы:

    • JgM (-), JgG (-), JgA (-) — иммунитет к заболеванию полностью отсутствует (с таким типом антигена организм ранее не сталкивался);
    • JgM (-), JgG (+), JgA (-) — ранее было столкновение с данным антигеном или с вакциной;
    • JgM (+), JgG (-/+), JgA (-/+) — острый патологический процесс (скорее всего первичный);
    • JgM (-), JgG (+/-), JgA (+/-) — процесс хронического течения;
    • JgM (+), JgG (+), JgA (+) — рецидив;
    • JgM (-) — стадия выздоровления.

    Количественные значения несут большую информационную нагрузку, но трактовать их способен только лечащий врач, исходя из предыдущих показаний, возраста пациента, норм для каждого конкретного заболевания. Именно по этой причине оценивать результаты самостоятельно нельзя.

    Данная методика имеет много разновидностей, в зависимости от которых и определяется срок получения данных на руки. Средняя продолжительность ИФА-диагностики составляет 4-6 часов, что позволяет выдать результаты уже на следующий день.

    Самые продолжительные методики занимают до 10 дней, например, в случае выявления ВИЧ-инфекции.

    При острой необходимости возможно применение экспресс-методик, при которых ответ получают уже через 1-2 часа.

    Поскольку оборудование для проведения такого типа диагностики довольно дорогое, то приобрести его могут не все лаборатории. Кроме того, тесты, содержащие специфические антигены, имеют ограниченный срок годности (обычно около 1 года), поэтому нуждаются в постоянном обновлении.

    По этим причинам в государственных медицинских учреждениях ИФА-лаборатории есть далеко не всегда. Чаще всего необходимо обращаться в большие частные медицинские или крупные диагностические центры.

    Для проведения ИФА-исследования лаборатория должна иметь специальную лицензию, а персонал и лаборанты должны пройти специальное обучение.

    Чаще всего конкретный диагностический центр или лабораторию рекомендует врач, направляющий пациента на обследование.

    Цена на данное исследование зависит от региона страны и от уровня клиники, предоставляющей услугу. В Москве минимальная цена за определение одного антигена стартует от 700 руб. Если необходимо выявить сразу несколько иммуноглобулинов, то цена будет суммироваться.

    В случае срочного анализа стоимость увеличивается на 150-200 руб. за каждый антиген.

    Несмотря на достаточно высокую стоимость, иммуноферментный анализ позволяет сделать обследование пациента максимально информативным и быстрым, что сокращает время до начала лечения и позволяет быстрее стабилизировать состояние человека.

    На данном видео представлен фильм «Основы иммуноферментного анализа».

    источник

    Иммуноферментный анализ крови является распространенным методом выявления различных патологий. Результат анализа крови, расшифровка ИФА которого была интерпретирована врачом лабораторной диагностики, является достоверным в большинстве случаев.

    ИФА — современный диагностический метод, который применяется для диагностики инфекций, гормональных и иммунных нарушений, онкологических заболеваний в лабораторных условиях. Метод позволяет выявить антитела к инфекции уже на ранних сроках заболевания. Данный метод относится к непрямым диагностическим методам, так как он выявляет иммунный ответ организма. Среди преимуществ ИФА в сравнении с другими методами диагностики можно выделить высокий уровень технологичности, что уменьшает вероятность ошибок. Метод является высокочувствительным и применяется для диагностики заболеваний как у детей, так и у взрослых. Существует обширное количество различных модификаций ИФА.

    Метод ИФА основывается на специфичности иммунохимических реакций, а также физико-химических закономерностях реакций комплексов антиген-антитело. Реакции производятся с участием специфических ферментов, которые являются метками для определения антител. В результате иммунохимической реакции строго определенные антитела связываются с соответствующими антигенами. Исследование крови методом иммуноферментного анализа почти исключает возможность получения ложноположительного результата. О положительном или отрицательном результате специалисты лабораторной диагностики судят исходя из того, произошло ли окрашивание раствора в ходе ферментативной индикации комплекса антиген-антитело. Если раствор окрасился, то произошло взаимодействие антигена с антителом, результат ИФА положителен.

    Исследование методом иммуноферментного анализа позволяет:

    • выявить ряд инфекционных заболеваний;
    • диагностировать аутоиммунные заболевания;
    • выявить наличие онкологии;
    • определить гормональные нарушения;
    • произвести иные исследования.

    Анализ крови методом ИФА позволяет определить наличие следующих инфекций:

    • вирусные гепатиты;
    • ВИЧ;
    • цитомегаловирус;
    • вирус Эпштейн-Барра;
    • герпетические инфекции;
    • краснуха;
    • боррелиоз;
    • паразитарные инфекции;
    • ЗППП;
    • иные инфекции.

    Метод применяется для выявления антигенов возбудителей ряда инфекций, а также для выявления антител различных классов. Большую популярность метод ИФА получил для выявления сифилиса, ВИЧ, вирусных гепатитов. Определять наличие и уровень антител в сыворотке крови с целью первичной диагностики ИППП не рекомендуется. В данном случае наличие антител в крови может быть лишь признаком того, что организм пациента контактировал с возбудителем инфекции в прошлом.

    Диагностика различных аутоиммунных заболеваний методом ИФА производится посредством исследования:

    • антинуклеарных тел;
    • антител к двухспиральной ДНК;
    • антител к растворимым нуклеарным антигенам (ENA скрин);
    • антикардиолипиновых антител;
    • IgG к цитрулиновому пептиду;
    • ревматоидного фактора;
    • С-реактивного белка;
    • аутоантител к цитоплазматическим антигенам нейтрофилов (ANCA скрин).

    Специфические иммунные комплексы характерны для определенных аутоиммунных заболеваний. Например, антитела двуспиральной ДНК являются характерными для такого заболевания, как системная красная волчанка.

    Определение онкологических заболеваний производится при иммуноферментном исследовании сыворотки крови на специфические онкомаркеры, такие как ПСА, СА-125.

    ПСА свидетельствует о наличии аденомы простаты и рака простаты. СА-125 — это онкомаркер злокачественной опухоли яичника. Значение повышается и при раковых опухолях матки, молочных желез, эндометрия.

    Чтобы обеспечить максимальную точность результатов, нужно следовать определенным правилам подготовки к исследованию. Анализ для лабораторной диагностики методом ИФА, как правило, сдается утром из локтевой вены. Сдавать кровь необходимо строго натощак. Кроме этого простого предписания, следует выполнять следующие рекомендации по подготовке:

    • за 24 часа до исследования необходимо исключить прием алкоголя и курение;
    • избегать тяжелых физических нагрузок;
    • пребывать в спокойном состоянии;
    • избегать нервного напряжения;
    • сдавать кровь на ИФА не ранее, чем через 10 дней после отмены лекарств;
    • предупредить врача о приеме необходимых лекарств.

    Кроме того, за несколько дней до сдачи анализа рекомендуется придерживаться диеты. При этом из рациона исключить жирные продукты, жареную пищу. Перед анализом на вирусные гепатиты из рациона исключить не только жирное и жареное, но и цитрусовые, а также оранжевые овощи.

    Следует отметить, что на результаты определенного спектра гормональных исследований влияет такой фактор, как фаза менструального цикла. Необходимость сдавать анализ в ту или иную фазу менструального цикла следует заранее обговорить с лечащим врачом. В противном случае можно получить неожиданные показатели. Так, например, нормальный уровень лютеинизирующего полового гормона у женщин варьируется в зависимости от дня цикла:

    • 1-12 день — 2-14 мЕд/л;
    • 12-14 день — 24-150 мЕд/л;
    • с 15 дня до начала нового цикла — 2-17 мЕд/л.

    Анализ позволяет установить наличие в организме антител различных классов. Существуют антитела 3 классов:

    Выработка этих антител происходит на различных стадиях заболевания. Самыми первыми после заражения в организме начинают вырабатываться антитела IgM. Их наличие является показателем болезни в любом случае. В организме здорового человека этот класс антител отсутствует.

    Эти иммуноглобулины присутствуют в сыворотке крови около 5-6 недель.

    Иммуноглобулины класса G, присутствующие в крови, говорят о том, что человек либо уже перенес заболевание, либо является носителем инфекции. Эти антитела начинают вырабатываться после антител класса М, при большинстве заболеваний на 3-4 неделю после заражения. Их присутствие в организме возможно в течение нескольких лет. А при некоторых болезнях (например, сифилисе) IgG присутствуют в крови пожизненно.

    Если в организме присутствуют IgA, необходимо как можно интенсивнее бороться с инфекцией. Антитела этого класса появляются лишь в случае хронического инфекционного заболевания. Исчезновение IgA говорит об уничтожении инфекции.

    Если анализ ИФА производится в детском возрасте до 1,5 лет, должна учитываться следующая особенность: кровь ребенка содержит IgG матери к различным инфекциям. Это совсем не означает, что ребенок болен. В таком случае это скорее норма. Наличие IgM является свидетельством внутриутробной инфекции либо инфекции, приобретенной уже после рождения. IgM матери не могут проникнуть в организм ребенка через плаценту.

    В таблице представлены возможные комбинации наличия или отсутствия в организме антител 3 классов и их интерпретации.

    Таблица 1
    IgM IgG IgA Расшифровка
    Иммунитет к инфекции отсутствует
    + Имеется поствакцинальный или постинфекционный иммунитет
    + -/+ -/+ Острая инфекция
    + + + Обострение хронической инфекции
    +/- +/- Наличие хронической инфекции

    При расшифровке анализов (+) свидетельствует о положительном результате, а (-) говорит об обратном, то есть об отрицательном. Результат, показывающий наличие или отсутствие какого-либо вещества в организме, называется качественным. Он может быть дополнен количественным. Количественный результат отображает количественное содержание различных веществ в организме.

    Стоит отметить, что тест-системы имеют собственные, определенные изготовителем, референтные значения, которые характеризуют показатели. Превышения референтных значений, как правило, означают наличие тех или иных патологий в организме исследуемого.

    После получения результатов ИФА расшифровку полученных значений должен производить лечащий врач. Только он сможет произвести правильную оценку полученных результатов и определить стадию заболевания.

    источник

    Для проведения комплексной оценки состояния организма применяется ИФА-метод проведения диагностики. Иммуноферментный анализ крови предназначен для диагностирования инфекционных, гематологических, первичных и вторичных иммунодефицитов.

    Многие пациенты интересуются методом ИФА: что это, для чего проводится исследование. Иммуноферментный анализ начал использоваться сравнительно недавно. Изначально с его помощью изучались антигенные структуры, и он проводился только в научных целях. Затем ученые пришли к выводу, что при помощи ферментов можно выявить специфические антитела, возникающие в ответ на протекающее заболевание.

    На сегодняшний день этот метод имеет широкую сферу применения. Современные лаборатории используют его для диагностирования:

    • опухолей;
    • гормональных нарушений;
    • инфекций;
    • хронических или перенесенных ранее инфекционных процессов;
    • гельминтов.

    Если в организме протекает инфекционный процесс, то этот вид диагностики считается наиболее оптимальным для определения типа заболевания.

    Метод ИФА — что это, какова суть этого вида исследования? Этот и многие другие вопросы интересуют пациентов. Основой этого способа диагностики считается связывание иммунных клеток организма с антигенами возбудителей инфекции. Получившийся комплекс определяют при помощи специального фермента.

    Реакцию на наличие таких иммунных комплексов проводят в лабораторных условиях, применяя уже готовые соединения, чтобы определить, есть ли в крови подобные им.

    Суть метода ИФА достаточно простая, однако из-за того, что анализ крови проводится для выявления многих инфекций и болезней, существует несколько его разновидностей. Каждый отличается схемой проведения и областью применения. Может быть прямой или непрямой ИФА. Прямой метод подразумевает под собой то, что применяются обездвиженные антитела, реагирующие с антигенами. Основным плюсом такого метода является то, что все процессы можно автоматизировать, а значит, диагностика занимает немного времени.

    Непрямой метод подразумевает, что применяются антитела вторичного характера. А на твердой фазе обездвиживается антиген. Анализ позволяет определить антитела к различным антигенам. Это помогает достигнуть более точного результата, однако метод отличается сложностью.

    Лабораторные исследования методом ИФА имеют множество преимуществ в сравнении с другими способами диагностики. К основным можно отнести такие:

    • высокая чувствительность;
    • стабильность при хранении ингредиентов;
    • скорость проведения диагностики;
    • можно применять небольшое количество исследуемого материала;
    • есть возможность автоматизации всех процессов;
    • можно выявить инфекцию на самых ранних стадиях.

    Проведение исследования при помощи метода ИФА могут назначить при подозрении на множество болезней:

    • острые и хронические инфекции, венерические болезни;
    • наличие паразитов;
    • аутоиммунные патологии;
    • онкологические заболевания;
    • для определения уровня гормонов.

    На наличие антител исследуется венозная кровь. Перед проведением анализа из нее выделяют элементы, которые могут осложнять исследование. Может проводиться забор и других биологических жидкостей.

    Использование метода ИФА помогает определить наличие многих инфекций в организме, в частности и сифилиса. Для проведения исследования берется кровь из вены натощак. Затем осуществляется исследование, помогающее определить не только наличие болезни в организме, но и точные сроки ее начала, так как в течение болезни одни антитела заменяются другими в строго определенном порядке.

    При острой фазе, свидетельствующей о продолжительном течении болезни, или при обострении хронической инфекции в крови будут обнаружены иммуноглобулины типа M. Наличие иммуноглобулинов типа A свидетельствует о том, что инфекция обитает в организме более 4 недель. Иммуноглобулины группы G говорят о разгаре болезни или о ранее проведенной терапии.

    ИФА-метод применяется и для проведения анализа на ВИЧ-инфекции. Диагностика в таком случае имеет определенные особенности, которые связаны с протеканием и прогрессированием болезни. Этот метод исследования считается наиболее приемлемым для определения, однако проводить его нужно не ранее чем через месяц после воздействия факторов риска. Это связано с наличием инкубационного периода, протекающего от 45 дней и до 6 месяцев. Именно поэтому анализ нужно повторить через полгода.

    Положительным результат считается, если при первичном исследовании были обнаружены антитела. В таком случае анализ повторяется через полгода, если снова результат положительный, то исследование проводится с применением высокоспецифичных тестовых систем.

    Достаточно часто доктора назначают проведение иммуноферментного анализа для определения наличия паразитов в организме. При помощи такого метода исследования можно определить:

    Несмотря на все преимущества, существуют также недостатки метода ИФА. Основным недостатком считается то, что при проведении исследования доктор должен заранее иметь предположение о заболевании.

    При диагностике инфекционных болезней нет возможности случайно найти возбудителя и определить его иммуноферментные свойства. Тест только указывает на наличие антител в крови больного. Кроме того, это достаточно дорогостоящий анализ.

    Результатом качественного ИФА будет либо наличие антител, либо их отсутствие в крови. Если проводится количественный анализ, то концентрация антител может выражаться или в цифровом значении, или в определенным количеством знаков +.

    Кроме того, анализируются такие показатели, как:

    Показатель IgM указывает на протекание острого инфекционного процесса в организме. Полное его отсутствие может говорить об отсутствии возбудителя болезни или переходе ее в хроническую стадию.

    Сейчас существуют специальные тесты ИФА, которые можно провести самостоятельно.

    источник

    Многие годы безуспешно боретесь с ПАРАЗИТАМИ?

    Глава Института: «Вы будете поражены, насколько просто можно избавиться от паразитов просто принимая каждый день.

    Токсоплазма (Toxoplasma gondii) – один из наиболее широко распространенных внутриклеточных паразитов, обитающих в организме человека во всем мире. Частота заболеваемости токсоплазмозом варьирует от 10% до 90% и имеет региональную зависимость.

    Для избавления от паразитов наши читатели успешно используют Intoxic. Видя, такую популярность этого средства мы решили предложить его и вашему вниманию.
    Подробнее здесь…

    • Жизненный цикл токсоплазмы
    • Кто более подвержен заболеванию
    • Патогенез токсоплазмоза
    • Диагностика заболевания
      • Расшифровка анализа на токсоплазмоз
    • Профилактика токсоплазмоза
    • Заключение

    Наиболее высокая численность больных токсоплазмозом зарегистрирована в Африке, Южной и Латинской Америке. В Северной Америке и Европе данный показатель составляет 25-50% населения. В России токсоплазмоз встречается у 20% населения. Токсоплазмоз чаще встречается в регионах с более теплым климатом. Также существуют данные о более частом инфицировании особей женского пола.

    Toxoplasma gondii имеет сложный жизненный цикл с переменой хозяина. Согласно некоторым данным в качестве промежуточных хозяев могут выступать множество птиц и млекопитающих. Основным хозяином Toxoplasma gondii является кошка. Известно, что примерно 10% всех кошек заражены токсоплазмой. Характерной особенностью является то, что Toxoplasma gondii в организме кошки размножается в клетках эпителия тонкого кишечника. Вместе с фекалиями кошка распространяет токсоплазм повсеместно.

    Для Toxoplasma gondii характерно три формы существования:

    Эндозиты наименее устойчивы, и могут находиться в окружающей среде в неизменном виде нескольких часов. Наиболее высокой устойчивостью обладают ооцисты. Норма для их существования – 1-2 года. Однако для того, чтобы ооцисты стали способны к инфицированию, они должны пройти процесс споруляции – дозревание вне организма.

    Скорость этого процесса зависит от температуры. Ооцисты функционально активны в температурных пределах от +4°С до +37°С. При +4°С ооцисты дозревают 2-3 суток. Повышение температуры до 11°С, продлевает споруляцию до 5-8 суток. Максимально длительно период (14-21 сутки) споруляции происходит при +15°С., Кроме того, жизнеспособность ооцист зависит от влажности воздуха. Повышение уровня влажности способствует их высокой жизнеспособности.

    Способность цист к пролонгированной жизнеспособности вне организма повышает вероятность заражения токсоплазмозом посредством употребления, в пищу плохо прожаренного мяса, некипяченого молока, не тщательно вымытых овощей и фруктов. Кроме того, инфицирование возможно при непосредственном контакте с кошкой. Человек может быть заразным только через кровь при трансплантации органов или конгенитально, то есть внутриутробно.

    В случае компетентности иммунной системы у человека, в 80% случаев токсоплазмоза симптоматика заболевания отсутствует, поскольку здоровый организм без особых проблем справляется с этим заболеванием. При сниженной иммунореактивности симптомы токсоплазмоза сходны с таковыми при различных простудных заболеваниях. Наблюдается преодоление субфебрильного температурного барьера, увеличение лимфоузлов, повышенная слабость и боль в мышцах. Как и при простуде, через 7 дней наступает облегчение.

    При тяжелом течении заболевания, что возможно у людей с иммунодефицитом, заражение токсоплазмозом может привести к энцефалиту или менингоэнцефалиту, сопровождающемуся сильной головной болью, судорожными приступами, обмороками. Первичное заражение токсоплазмозом во время беременности грозит многочисленными врожденными аномалиями у плода.

    Нередко медики настаивают на прерывании беременности у женщин после выявления данного заболевания. Поэтому особого внимания заслуживает конгенитальный токсоплазмоз. Анализ на токсоплазмоз – это норма при планировании и на максимально ранних сроках беременности. Диагностируется токсоплазмоз в комплексе репродуктивно значимых инфекций, называемом TORCH-комплексом, который позволят выявить также такие тератогенные инфекции, как краснуха и цитомегаловирус.

    Конгенитальный путь передачи Toxoplasma gondii, вызывает серьезные последствия. Заражение на ранних сроках беременности грозит апоптозом клеток плаценты и рассасыванием плода. Вероятность заражения Toxoplasma gondii, является наиболее высокой в конце беременности. Риск заражения токсоплазмозом увеличивается с повышением гестационного возраста и составляет 10-25% в первом триместре, 30-50% – во втором триместре, и 60-90% – в третьем триместре.

    Существует предположение, что такая тенденция связана с увеличением массы плаценты. Во время беременности, под действием женских гормонов снижается активность иммунной системы с целью защитить плод как чужеродный объект от иммунных клеток матери. Это приводит к увеличению восприимчивости к инфекции и неблагоприятному прогнозу относительно развития токсоплазмоза. Восприимчивость к токсоплазмозу обусловлена также гормональными перестройками.

    Для второго и третьего триместра беременности характерно значительное увеличение уровня 17?-эстрадиола и прогестерона, и это совпадает с возрастанием распространенности Toxoplasma gondii у беременных. Экспериментально было доказано, что введение фармакологических доз эстрогенов повышает восприимчивость к токсоплазмозу. А уровень прогестерона снижается у беременных женщин в случае заражения Toxoplasma gondii.

    Также был доказан антипаразитический эффект пролактина. Женщины с гиперпролактинемией обладают более низкой распространенностью токсоплазмоза. Неутешительные статистические данные гласят о том, что внутриутробное заражение токсоплазмозом чревато серьезными системными поражениями, а именно: центральной нервной системы, органов слуха и зрения. Также нередко регистрируют случаи гепато — и спленомегалии. Такие дети значительно отстают в развитии. Однако своевременная диагностика и грамотное лечение токсоплазмоза позволяют родить здоровых детей в 80% случаев.

    Патогенетическая картина выглядит следующим образом. В местах поражения токсоплазмой наблюдаются воспалительные гранулемы. Прогрессирующий токсоплазмоз приводит к образованию некротических участков, на месте которых в дальнейшем образуются кальцификаты. Степень выраженности повреждений пропорциональна не функциональности пораженного органа.

    Для диагностики токсоплазмоза у человека исследуют кровь. На сегодняшний день успешно используют два основные лабораторных метода, это:

    • иммуноферментный анализ (ИФА);
    • полимеразная цепная реакция (ПЦР).

    Использование двух методов более информативно и позволяет составить полную картину о наличии и течении заболевания.

    Методом ИФА возможно определить наличие или отсутствие антител к токсоплазмозу в крови. Для этого определяют авидность иммуноглобулинов: lgg, igm. Авидность характеризует прочность связывания антитела с антигеном. В начале болезни авидность иммуноглобулинов низкая, и возрастает с течением заболевания. ПЦР дает результат положительный или отрицательный.

    ПЦР обладает высокой чувствительностью и позволяет определить даже очень низкое содержание ДНК возбудителя. Суть метода ПЦР в выявлении в биологических жидкостях, таких как кровь, мокрота, слюна, моча, амниотическая жидкость, ДНК инфекционного агента. В случае токсоплазмоза чаще используют кровь из вены и мочу. Единственным недостатком метода ПЦР является дороговизна и сложность в обслуживании необходимого оборудования. В связи с этим ПЦР назначают при необходимости после проведения анализа на токсоплазмоз igg методом ИФА.

    Выявление иммуноглобулинов различных классов зависит от стадии заболевания. lgg используется как показатель хронической фазы заболевания, а igm – острой фазы. lgg начинает вырабатываться на несколько дней позже по сравнению с igm, а количество lgg достигает максимальных значений спустя месяц после начала заболевания. В отличие от igm, lgg остается в крови, и пожизненно обеспечивают специфический иммунитет. Исходя из этого, возможны четыре варианта результатов анализа на токсоплазмоз в крови.

    1. Отрицательный igm на фоне положительного lgg – это норма и свидетельствует о наличии сформировавшегося иммунитета к токсоплазме. По статистике около 65% населения имеет стойкий иммунитет к данному возбудителю. Дальнейшее проведение ПЦР анализа не требуется.
    2. Положительный igm на фоне отрицательного lgg — свидетельствует о первичном заражение токсоплазмозом. Необходимо провести ПЦР анализ для выявления возбудителя и спустя 2 недели повторно сдать кровь на анализ lgg методом ИФА. При наличии возбудителя на данном сроке этот показатель уже должен быть положительным. Возможны также случаи, когда повторный анализ на lgg остается отрицательным и методом ПЦР ДНК токсоплазмы не обнаруживаются. В таких случаях результат признают как норма и относят к ошибочно положительным.
    3. Положительный как igm, так и lgg свидетельствует о первичном инфицировании. igm может быть положительным до 2 лет после заражения.
    4. Отрицательный как igm, так и lgg – это норма, то есть признак отсутствия заболевания, но также и иммунитета к нему. Беременным женщинам при таком анализе рекомендуется наблюдаться в поликлинике и с определенной периодичностью сдавать анализы для выявления igm и ДНК токсоплазм.

    Специфических мер профилактики токсоплазмоза не существует. В качестве профилактики рекомендуется соблюдение общепринятых норм гигиены. К ним относится: термическая обработка продуктов животного происхождения и тщательное мытье растительных продуктов, обязательное мытье рук после контактов с животными, земляных работ и игр в песочнице у детей, снижение численности беспризорных кошек, лечение и соблюдение санитарно-гигиенических норм при содержании домашних кошек.

    На ранних сроках беременности каждая женщина должна обследоваться на токсоплазмоз. При выявлении у беременной антител к токсоплазмозу класса igm, проводится необходимое лечение или, в крайнем случае, после проведения дополнительных исследований прерывание беременности.

    Таким образом, токсоплазмоз относится к тем заболеванием, наступление которых в большинстве случаев остается незамеченным. В результате формируется иммунитет к данному заболеванию. Однако, последствия заражения токсоплазмой далеко не безобидно в случае снижения защитных иммунных свойств организма. В особую группу следует выделить лиц, страдающих иммунодефицитом.

    Наиболее опасно заражение токсоплазмозом во время беременности, поскольку может привести либо к прерыванию беременности при заражении на ранних сроках, либо к развитию различных патологий у ребенка в случае более позднего заражения матери. При этом не исключается вероятность рождения здоровых детей у больных токсоплазмозом матерей при своевременном лечении, которое должно назначаться на основе высокоуровневых методов диагностики, таких как ИФА и ПЦР. Тем не менее, наиболее эффективным методом борьбы с данной болезнью – это ее профилактика.

    • Что такое ИФА крови
    • Механизм формирования специфических антител
    • Как расшифровать результаты ИФА
    • Видео

    Иммуноферментный анализ крови является одним из самых эффективных методов диагностики инфекционных, вирусных, паразитарных заболеваний. Он основан на выявлении специфических антигенов и антител в биологических жидкостях больного (моча, слюна, молоко, спинномозговая жидкость и др.).

    Чтобы поставить правильный диагноз, найти причину сбоя в работе организма, врачи используют много методов. Одним из самых высокоточных (до 99%) является иммуноферментное исследование крови (ИФА). Во время его проведения лаборант выявляет наличие антигенов, а также антител, которые вырабатывает иммунная система человека. Полноценную расшифровку конкретного анализа сможет сделать только лечащий врач, но понять направленность результата сможет каждый.

    Высыпания на коже при глистах – это тоже ответ иммунной системы на продукты жизнедеятельности паразитов. Такой симптом часто является одним из первых признаков наличия в организме гельминтов, которые замечает человек.

    Для определения разных болезней (ВИЧ, TORCH-инфекции, гепатиты и др.) в рамках ИФА медицинские учреждения используют специальные тест-системы. Во время исследования взятый у пациента образец метят с помощью ферментов, например, пероксидазы хрена, щелочной фосфатазы, β-D-галактозидазы, создавая комплексы антиген-антитело. Высокую точность анализа обеспечивает уникальная специфичность иммунохимической реакции, которая создается во время его проведения.

    Антитела, вырабатываемые иммунной системой в ответ на деятельность определенного вируса, бактерии, аллергена, могут связываться исключительно с определенными антигенами, что исключает вероятность ложного результата. Каждая лаборатория разрабатывает свои стандарты касательно норм, в зависимости от используемого оборудования, препаратов. Границы нормальных, превышенных значений будут указаны на бланке лаборатории с результатом ИФА.

    Проведение иммуноферментного анализа состоит из 3 стадий:

    • формирование комплекса антиген-антитело;
    • присоединение к нему метки-фермента (используют разные методы: биохимические, иммунологические, генно-инженерные);
    • визуализация комплекса и его обработка.

    После получения очищенного антигена (клетка микроорганизма, полисахарид), антитела и подбора фермента в качестве метки для них, можно проводить иммунохимические реакции. Иммунный ответ на введение одного антигена сопровождается синтезом антител, которые имеют разную структуру и предназначение, ведь организм строит несколько линий защиты от внедрения чужеродного микроорганизма. Они делятся на иммуноглобулины Ig классов G, D, E, A, M. Кишечные паразиты у человека тоже провоцируют формирование таких антител.

    Есть несколько десятков модификаций ИФА: ELISA (с ферментами связывают иммуносорбенты), EIA (используют фермент-иммуноопределения), EMIT (в основе исследования – связь с ферментами).

    В ответ на первичную инфекцию организм сначала продуцирует антитела класса М, и анализ крови ИФА соответственно покажет высокое значение IgM. Их можно обнаружить уже через 5 дней после инфицирования. Максимальная концентрация наблюдается в период между 1-4 неделями, а потом их количество снижается настолько, что не имеет диагностического значения. Эти антитела свидетельствуют о течении острой инфекции, но их отсутствие во взятом образце еще не говорит о 100% отсутствии болезни, ведь у пациента может протекать уже хроническая форма болезни, во время которой выделяются антитела уже другого класса – IgG.

    Иммуноглобулины этого вида появляются в крови через 10-14 дней после начала недуга. Сначала их можно выявить даже в семенной жидкости, вагинальном секрете. Через 2-4 месяца после лечения их уровень снижается. Если этого не происходит, значит, терапия была неуспешной или заболевание перешло в хроническую форму.

    Совет: для определения текущей инфекции у взрослых уровень антител IgA имеют более высокую диагностическую ценность, чем титр IgM.

    При повторном заражении болезнью быстро повышается количество иммуноглобулинов IgG, IgA (последние чаще обнаруживаются у взрослых, людей пожилого возраста). Во время выздоровления концентрация IgA (IgG) существенно снижается, а антитела IgM исчезают еще раньше. Если организм человека уже был поражен инфекцией, другим источником воспаления в прошлом, кровь содержит иммуноглобулины IgG в небольшом количестве, антител класса М, А быть не должно.

    Совет: чтобы поставить окончательный диагноз, рекомендуют сделать ИФА на выявление антител классов А, G одновременно, а через 8-14 дней определить уровень IgG.

    Для избавления от паразитов наши читатели успешно используют Intoxic. Видя, такую популярность этого средства мы решили предложить его и вашему вниманию.
    Подробнее здесь…

    Результаты иммуноферментного исследования должны рассматриваться в контексте информации, полученной с помощью других диагностических процедур. Правильная расшифровка анализа крови поможет назначить правильное лечение, подтвердить или опровергнуть наличие недуга, ускорит выздоровление. Энтеробиоз у взрослых, вызываемый острицами, диагностируют чаще всего с помощью метода липкой ленты, но иногда прояснить ситуацию может только иммуноферментное исследование крови. Для профилактики гельминтозов, избавления от шлаков и токсинов врачи-гомеопаты рекомендуют проводить очищение организма овсом в домашних условиях несколько раз в год.

    Иммуноферментный анализ возник благодаря тесной взаимосвязи двух дисциплин – иммунохимии и инженерной энзимологии (раздел биохимии, изучающий ферменты). Его проведение позволяет уточнить диагноз определенного заболевания, определить стадию инфекционного процесса. Правильная расшифровка анализа позволит начать своевременное и эффективное лечение.

    Совет: если в крови у новорожденного или плода после 14 недели развития обнаружены специфические антитела IgM, это говорит о врожденном инфицировании, потому что эти иммуноглобулины не проникают через плаценту и не могут быть материнскими.

    Стадия заболевания IgM IgA IgG
    Первичная фаза
    Не более 14 дней с момента инфицирования +
    2,5 — 3 недели + +
    3 — 4 недели + + +
    Обострение хронической фазы + +
    2 недели от начала обострения воспалительного процесса
    Хроническое течение +/- +
    Излеченная инфекция +
    Выздоровление титр (количественный показатель) снижается в 2-4 р. в сравнении с предыдущим Титр уменьшается в 4-8 раз через месяц-полтора после успешного лечения
    Отрицательный результат

    Количественное определение антител не всегда позволяет однозначно поставить диагноз и не влияет на дозирование, длительность приема лекарств. Чтобы правильно расшифровать результат, нужно понять механизм формирования антител и ориентироваться на указанные лабораторией значения «норма-превышение».

    Иммуноферментный анализ – один из самых точных и распространенных методов диагностики многих заболеваний. Высокая чувствительность в сочетании с быстротой исполнения облегчают процесс исследования и позволяют пациенту быстро узнать результат. Расшифровать результат можно самостоятельно, но чтобы увидеть полноценную картину состояния здоровья, лучше обратится к врачу.

    Возбудителем лямблиоза являются самые простые микроорганизмы. Их название –лямблии. Жить они могут в разной среде. Иногда такой средой для них может послужить организм человека. Последствием проживания «квартирантов» такого рода являются проблемы со здоровьем. В частности – с кишечником. Поскольку лямблии живут в тонком кишке, то их присутствие ведет к нарушению пристеночного пищеварения и перистальтики.

    Хотя о подобном недуге врачи знают очень давно, это не избавляет от проблем при диагностике, поскольку лямлиоз может протекать не только с симптомами различного характера, но и полностью бессимптомно. Как же можно выявить наличие паразитов у взрослых? Как обнаружить паразитов у ребенка? Такое заболевание выявляется только при диагностике. Выявить заболевание поможет анализ на лямблии. Для этого нужно сдать на обследование кал и кровь.

    Есть несколько видов анализов, которые являются весьма эффективными в обнаружении лямблий в организме человека, будь то взрослый или ребенок.

    1. Анализ крови на лямблии. Уже через неделю после того, как паразиты попадут в организм, инфекция от них попадает в кровь, поэтому именно анализ крови на лямблии поможет обнаружить паразитов и безошибочно укажет на их наличие.
    2. Анализ кала. Помогает выявить не только инфекцию в организме, но и яйца паразитов. К сожалению, этот метод диагностирования имеет некоторые сложности – от сбора кала до его поступления в лабораторию должно пройти не больше 20 минут, чтобы материал сохранил первоначальную температуру, в противном случае обнаружить гельминтов будет сложно. Идеальное время – от 5 до 8 минут. Кроме того, для достоверности результата масса должна быть жидкой.

    Чтобы получить наиболее точный результат, необходимо сдавать кал трижды через три дня. Если провести обследование только однократно, то точность результата кратна 50-60%. Только трехкратная сдача дает гарантию, что анализы на лямблии имеют точный результат и их расшифровка указывает на наличие или отсутствие паразитов.

    Как определить лямблии, используя другие варианты обследования? Обычно этот вопрос интересует молодых родителей, так, как у детей очень сложно брать кровь на анализ. Так почему бы не взять на исследование слюну ребенка, что гораздо легче.

    Подтвердить наличие гельминтов у детей можно, используя метод ПЦР, который является самым высокоточным способом диагностики для выявления болезней самого разного рода. Для этой цели можно использовать любой биоматериал не только взрослых, но и детей:

    Затем материал помещают в пробирку. К нему помещают ферменты, синтезирующие копию ДНК гельминтов.

    Для ИФА (иммуноферментного анализа) используется совершенно другое оборудование, да и сам материал тоже. Неоднократно бывали случаи, когда у взрослых или детей тесты обеих видов диагностики отличались. Поэтому, если после ПЦР был получен положительных результат, то ребенка можно диагностировать повторно на ИФА, поскольку этот метод является наиболее качественным и может обнаружить заболевание на ранней стадии.

    К преимуществам ИФА относится:

    1. Высокая точность.
    2. Доступность.
    3. Возможность определить динамику процесса.

    Подготовка к сдаче крови на лямблии предусматривает некоторые особенности:

    1. Отказ от пищи. Нельзя кушать на протяжении 10-и часов. Причем, речь идет даже о легкой пище.
    2. Непозволительно ничего пить. А это значит, что не разрешается употребление никаких жидкостей, включая молоко, соки, компоты, чай и даже кофе. Разрешается пить только воду.

    Чтобы соблюсти данное условие, необходимо привести ребенка утром сразу после сна. Тогда сдача материала на анализ произойдет согласно требованиям. Взрослые могут посещать лабораторию, чтобы сдать материал в любое время дня.

    Если рекомендации по каким-то причинам нарушены, что особенно часто происходит, когда на диагностику приводят детей, но обязательно нужно об этом уведомить врача. Скорее всего, придется сдавать анализы в другой раз, иначе может произойти ошибка в диагностировании.

    Расшифровывается анализ следующим образом. Определяются антитела к антигенам гельминтов. Каждая из систем, которые проводят тест, выявляет антитела суммарно либо раздельно.

    Антитела IgM появляются в крови после заражения через пол месяца. Позже появляются антитела IgG. Причем, их высокая концентрация сохраняется все время, пока организм заражен. Затем, когда будет проведена элиминация лямблий, начнется уменьшаться количество антител. Это период занимает от 1 до 2 месяцев. Остатки их присутствия из кровиисчезнет через 3-6 месяцев. Из-за этого расшифровка полученных результатов не может служить точным индикатором заражения или его отсутствия, поэтому сдать кровь на лямблии придется тоже минимум два раза через несколько месяцев.

    При расшифровке необходимо обратить внимание на результат ОПд. Если его показатель выше единицы, это гарантия того, что инвазия или имела место, или организм заражен в настоящее время. Норма – 0,85 ОПд и ниже.

    Если ОПД колеблется от 0,85 до 1, то обследование необходимо повторить через месяц. Чтобы поставить точный диагноз, можно дополнительно сдать кал на обнаружение личинок паразитов.

    Один из вариантов проверить ребенка на наличие лямблиоза – посетить лабораторию «Инвитро». Это независимая организация, в которой медицинские исследования предлагаются в достаточно широком спектре. Более того, благодаря наличию современного оборудования, обследование детей провести намного проще. Сдавать кровь на лямблии и другие биоматериалы могут в «Инвитро» не только дети, но и взрослые.

    Какова стоимость услуг в «Инвитро»? Цена анализов на антигены паразитов — около 130 грн. Диагностика антител к антигенам в «Инвитро» стоит немного дороже. Так, если необходимо у ребенка выявить лямблиоз, то цена на диагностику на суммарные антитела — около 150 грн.

    Кроме того, в «Инвитро» можно пройти и многие другие виды обследований и хотя цена несколько выше, чем в обычных лабораториях, точность результата того стоит.

    источник