Анализ на гепатит с ложноотрицательный результат

Для лечения печени наши читатели успешно используют Leviron Duo. Видя, такую популярность этого средства мы решили предложить его и вашему вниманию.
Подробнее здесь…

Если возникает ложноположительный анализ на гепатит С, причины могут крыться в различных заболеваниях, определенных состояниях, человеческих ошибках. Поэтому для правильного проведения лабораторных обследований врачами рекомендуются дополнительные анализы, они и дают полную картину состояния организма.

Одним из наиболее опасных патологических процессов вирусного происхождения считается гепатит С. Заболевание коварно тем, что на ранних этапах развития протекает бессимптомно, а в запущенной форме инфекцию непросто вылечить, могут развиваться различные осложнения. В определенных ситуациях бывает анализ на гепатит с положительный. В том случае, если обследование показало такой исход, провоцирующими факторами могут выступать различные заболевания и ошибки по вине медперсонала.

В процессе сдачи разных анализов могут возникать ошибки. Чтобы подтвердить или опровергнуть положительный анализ, следует обязательно повторно сдать кровь на маркеры гепатита. Первый этап диагностики – метод ИФА. С его помощью определяются в венозной крови антитела к возбудителю (маркеры гепатита). При получении отрицательного результата можно судить о том, что инфекция в организме пациента отсутствует.

Если обнаруживаются такие маркеры, это может быть реакцией организма на внедрение возбудителя, сигналом о том, что произошло излечение либо ответом, который дается иммунной системой организма на наличие других типов вируса. Поэтому специалисты всегда назначают дополнительные виды диагностики:

Ультразвуковое исследование печени.
Общий анализ крови.
Ультразвуковое исследование органов брюшной полости.
Метод полимеразной цепной реакции. Исследование методом пцр определяет наличие инфекции в организме. Но в том случае, если концентрация патологических агентов низкая, результат можно считать негативным или ошибочным.

Рекомбинантный иммуноблот эссей (тест RIBA) — нестандартное обширное тестирование на присутствие возбудителя в организме, с помощью которого можно обнаружить антигены к нему.

Ошибка анализа на гепатит B встречается очень редко. Чаще по вине самого исследуемого или по вине врачей происходит ошибка на гепатит C. Метод полимеразной цепной реакции является очень точным, показывает достоверные результаты.

Гораздо чаще встречается ошибка при проведении диагностики крови, печеночных показателей, а также маркеров на гепатит и на антитела к нему.

Сомнительный анализ случается по причине человеческого фактора. К тому, почему отрицательный тест на гепатит, могут привести такие обстоятельства:

Неопытность сотрудника, который занимается проведением забора крови.
Случайная замена пробирок.
Ошибки лаборантов, проводящих диагностику, опечатки в документации.
Неправильная перевозка исследуемого материала.
Воздействие на биологические жидкости высоких температур.
Неправильно проведенная подготовка материалов к диагностике.

Ложный ПЦР на гепатит практически не встречается, поскольку такой анализ является достоверным и максимально точным.

Ложноположительный результат может обнаруживаться при развитии определенных патологических процессов в организме.

К болезням и другим состояниям, которые вызывают подобное явление, относят:

Заболевания аутоиммунного происхождения.
Опухолевидные процессы доброкачественного или злокачественного характера.
У беременных женщин этот показатель существенно увеличен. Это связано с изменением гормонального фона.
Запущенные инфекционные процессы в организме, о которых пациент не проинформировал лечащего врача.
Различные дисфункции в деятельности иммунитета.
Прием определенных медикаментозных средств, в составе которых присутствует гепарин.
Прием иммуностимулирующих средств.
Новорожденные дети, у которых диагностированы внутриутробные инфекции.
Повышенная концентрация криоглобулина в кровяной жидкости.
Обострения заболеваний органов верхней дыхательной системы.
Развитие аутоиммунного гепатита.
Предварительно проведенная вакцинация против гриппа или столбняка.
Прохождение курса лечения с помощью интерферона альфа.
Врожденное повышение билирубина в крови.

Также в некоторых случаях результат может быть недостоверным, если инфицирование произошло совсем недавно, вирус находится в стадии инкубации. В данном случае следует прислушиваться к своему организму, при появлении каких-либо сомнительных симптомов сразу же обращаться к доктору и проходить все назначенные диагностические мероприятия.

Что делать в такой ситуации? Прежде всего, не поддаваться панике. Обязательно назначается повторный анализ и дополнительные обследования в виде УЗИ, общего анализа крови, ПЦР-теста.

Перед повторным исследованием следует соблюдать все мероприятия по подготовке к процедуре забора крови. Нельзя сдавать кровь при наличии гриппа, острых респираторно-вирусных заболеваний, при обострении хронических инфекционных процессов в организме. Также медицинские сотрудники должны соблюдать все меры предосторожности, правильную транспортировку материала. Рекомендуется повторить анализ в нескольких медицинских учреждениях. Также обязательно следует проинформировать врача о том, что имеются какие-либо заболевания, инфекции, вирусы в организме. Обязательно контролировать то, чтобы все инструменты при процедуре использовались только стерильные.

Гепатит С: ошибочные анализы.

Причиной болезни является вирусный агент, который относится к РНК-содержащим возбудителям. Он имеет отличительную черту – способность мутировать, то есть изменять свою структуру. Благодаря этому инфекция ускользает от атаки иммунной системы и в большинстве случаев приводит к хронизации воспалительного процесса в печени.

Учитывая существование различных подтипов вируса, подбор лекарственных средств должен проводиться с учетом результатов генотипирования. Несмотря на длительное изучение болезни и особенностей строения HCV, до сих пор не удалось разработать специфическую прививку от заболевания.

Трудности ранней диагностики заключаются в бессимптомном течении гепатита, вследствие чего человек обращается к врачу на стадии цирроза. Чтобы вовремя обнаружить заболевание, требуется регулярное проведение медосмотров. Только путем лабораторного исследования крови удается выявить HCV и предупредить заражение окружающих. Дело в том, что носитель инфекции может длительное время не догадываться о патологии и продолжать передавать вирус здоровым людям.

Вирус в большинстве случаев распространяется через кровь, так как в ней содержится наибольшая концентрация патогенных агентов. Таким образом, инфекция передается:

при гемодиализе;
при уколе зараженной иглой;
в процессе драки, когда травмируются кожные покровы, и происходит гемоконтакт;
при гемотрансфузии (переливании крови).

Вероятность заражения при интимной близости незначительная, так как в сперме и выделениях из влагалища содержится небольшое количество возбудителей. Риск инфицирования существенно увеличивается при нарушении целостности слизистой гениталий. Такое наблюдается при агрессивном и анальном сексе.

Что касается вертикального способа передачи инфекции, то он осуществляется в процессе родовой деятельности. В периоде вынашивания плода возбудитель не может проникнуть через плаценту к эмбриону. При естественных родах патогенный агент передается ребенку при травмировании его кожи, когда наблюдается контакт с кровью матери.

После проникновения возбудителя в здоровый организм начинается синтез антител, которые являются защитой от инфекции и относятся к иммунным структурам. Именно они обнаруживаются при первичном исследовании человека с помощью ИФА.

Для подтверждения диагноза пациенту проводится полимеразная цепная реакция. Она представляет собой анализ на выявление генетического материала патогенного агента и определение вирусной нагрузки.

Лабораторная диагностика начинается с проведения иммуноферментного анализа. Основная его задача заключается в обнаружении антител, вырабатывающихся против возбудителя. Его эффективность – почти 95%. Благодаря этому исследованию на доклинической стадии удается выявить вирусоносителя и направить его на дальнейшее обследование.

Качественный анализ ИФА указывает на наличие или отсутствие иммуноглобулинов в крови пациента. Его результат может быть «положительный» или «отрицательный». Получив первый вариант ответа, человек направляется на следующее обследование – ПЦР. Его цена зависит от качества реактивов и лаборатории. Стоимость полимеразной цепной реакции может достигать 4 тысяч рублей.

С помощью полимеразной цепной реакции даже небольшой объем биологического материала позволяет оценить вирусную нагрузку в крови, то есть подсчитать концентрацию возбудителей в одном миллилитре жидкости.

С появлением ПЦР диагностика гепатита значительно упростилась. Анализ дает возможность выявить РНК HCV, установить стадию инфекционного процесса и заразность вирусоносителя.

Существует несколько разновидностей генетической диагностики:

качественный анализ ПЦР на гепатит С – подтверждает факт наличия или отсутствия HCV в крови обследуемого:
количественный, благодаря которому можно подсчитать концентрацию вирусов и установить стадию болезни. Результат выдается в МЕ/мл или копии/мл (в зависимости от лаборатории);
генотипирование – необходимо для определения генотипа HCV. Это требуется для точного подбора лекарственных средств, которые будут максимально эффективны в данном случае. Анализ косвенно указывает на тяжесть патологического процесса в печени. Так, при третьем генотипе возбудителя чаще всего наблюдается стеатоз, в основе развития которого лежит накопление жира в гепатоцитах (ее клетках). Помимо этого, тип вируса влияет на результат и продолжительность терапевтического курса.

Первым делом в лаборатории биологический материал исследуется на наличие РНК HCV. Важно помнить, что качественный анализ на гепатит С имеет определенный уровень чувствительности, в связи с чем не всегда может давать верный ответ. В таком случае рекомендуется повторное проведение лабораторной диагностики с применением других реактивов.

Для получения достоверных результатов следует использовать тест-системы с чувствительностью – не ниже 50 МЕ/мл.

Результат диагностики может быть как «положительный», так и «отрицательный». Если возбудитель не найден в крови, исследование завершается. При выявлении патогенного агента в образце далее проводится количественный подсчет вирусной нагрузки.

Ложноотрицательный ответ получается, когда нарушается технологический процесс, например, в среду попадают активные компоненты, угнетающие построение копий возбудителя. Таким образом не удается отобразить истинную картину крови, из-за чего инфицирование человека не диагностируется.

Ложноположительный результат можно получить, если пробирка для забора биологического материала, а также среда для проведения исследования были загрязнены. Помимо этого, такой ответ анализа возможен при микст-инфекции, когда печень поражается несколькими вирусами, например, гепатитом С и D.

Врач может назначать пациенту качественное исследование на выявление РНК вируса гепатита С:

при получении положительного или сомнительного ответа иммуноферментной диагностики;
для верификации диагноза;
определения вирусной нагрузки;
постановки стадии заболевания;
диагностики микст-инфекции. Зачастую гепатит С поражает печень одновременно с вирусом «D»;
определения терапевтической тактики с учетом генотипа возбудителя;
оценки динамики изменений на фоне лечения противовирусными медикаментами.

К преимуществам полимеразной цепной реакции относится:

высокая чувствительность методики, что позволяет установить факт инфицирования на доклинической стадии;
выявление генетического материала возбудителя, а не антител к нему;
возможность установления субтипа патогенного агента;
высокая скорость диагностики, так как не требуется посев материала на питательную среду, а достаточно использовать специфические тест-системы. Человек получает результат спустя 5 часов;
универсальность. Анализ позволяет выявить любой генетический материал (РНК, ДНК). Благодаря этому врач может подтвердить гепатит С и другие виды болезни (В);
возможность выявления скрытой инфекции.

При исследовании крови с помощью полимеразной цепной реакции удается подсчитать количество возбудителей в фиксированном объеме биологического материала. Показатель представлен в МЕ/мл. Благодаря анализу можно установить степень заразности пациента, определить стадию инфекционного процесса, а также оценить эффективность лекарственной терапии.

На основании ПЦР специалист решает, какие дозы медикаментов позволяют блокировать размножение возбудителей. Кроме того, определяется длительность противовирусного лечения и прогноз для жизни. Важно помнить, что тест-системы имеют высокую чувствительность, поэтому метод дает возможность подтвердить инфицирование человека еще на доклинической стадии.

Учитывая способность возбудителя мутировать, для определения тактики лечения и выбора противовирусных лекарств необходим его генотип. Например, лечение гепатита HCV 1 длится 48 недель, при этом положительная динамика отмечается лишь в 60% случаев. Генотипы 2 и 3 имеют более благоприятный прогноз. Противовирусные лекарства назначаются на 8 месяцев, а их эффективность достигает 85%.

Согласно статистическим данным, в большинстве случаев на территории Российской Федерации регистрируется HCV 1, 2 и 3.

При расшифровке лабораторного исследования может быть указан такой ответ – «не типируется». Это значит, что в кровеносной системе больного циркулирует вирус, которого не удается распознать тест-системой. Результат анализа в данном случае свидетельствует о заражении человека нетипичным для данной географической зоны возбудителем.

Чтобы качественное исследование ПЦР по выявлению РНК возбудителя гепатита С показало правильные результаты, необходимо соблюдать требования по подготовке к лабораторной диагностике:

забор крови осуществляется натощак, причем «голодный» промежуток не должен быть короче 8-ми часов;
за два дня до исследования рекомендуется прекратить распитие спиртных напитков и отказаться от острых, жирных и копченых блюд;
отменить введение лекарственных средств, снижающих свертываемость крови, например, гепарина. Если данные медикаменты назначены по жизненным показаниям, необходимо предупредить об этом врача. Кроме того, специалист должен знать о приеме других препаратов, которые могут повлиять на результат лабораторного исследования;
накануне забора биологического материала не следует проводить физиотерапевтические процедуры и подвергать себя тяжелой физической нагрузке.

На результаты анализа может влиять не только человек, сдающий кровь, но и другие факторы, а именно:

некачественный забор крови;
несоблюдение рекомендаций по транспортировке биологического материала;
недостаточная профессиональная подготовка работников лаборатории;
несоблюдение техники проведения исследования;
введение антикоагулянтов (гепарина) накануне забора крови. Данная группа лекарств снижает свертываемость, тем самым замедляя работу реактивов.

В разных лабораториях ответ диагностики может несколько отличаться, однако эти погрешности не влияют на конечный результат исследования.

Особое внимание уделяется видам тест-систем, которые используются в лаборатории. Зачастую предпочтение отдается реактивам с высокой чувствительностью. Это важно для пациентов с низкой вирусной нагрузкой, поскольку ее сложно обнаружить.

Первично полимеразная цепная реакция проводится людям, у которых при иммуноферментном анализе были выявлены антитела к возбудителю гепатита. В данном случае она назначается для подтверждения факта заражения человека и установления стадии болезни. Кроме того, анализ позволяет определить субтип вируса, что особенно важно для выбора лекарственных средств.

Следующим периодом для обязательного лабораторного исследования является 3 месяца от начала противовирусной терапии. Диагностика дает возможность оценить эффективность медикаментов, откорректировать дозу или заменить их.

Помимо основных анализов, ПЦР может дополнительно проводиться на 4 и 24 неделях от начала лечения. Положительный прогноз болезни подтверждается уменьшением вирусной нагрузки по истечении трех месяцев терапии. Так, например, она должна снизиться с 1 миллиона МЕ/мл до нескольких сотен тысяч.

Если концентрация патогенных агентов в крови остается на прежнем уровне или несколько нарастает, это указывает на неэффективность противовирусных средств и требует их замены. С помощью ПЦР в конце лечения удается подтвердить выздоровление пациента.

Чтобы правильно трактовать результаты лабораторной диагностики, требуется консультация гепатолога или инфекциониста. Учитывая большую частоту ложных ответов при ИФА, анализ используют исключительно для первичного скрининга. Для более тщательного обследования пациента применяется полимеразная цепная реакция.

Во время планового обследования проводится сдача крови для общего и биохимического анализа. Такое исследование дает общую информацию о состоянии человека, а также может указать на наличие воспалений в определенном органе. В частности, на гепатит намекает повышение билирубина и печеночных трансаминаз (АсАт, АлАт, ЩФ). Однако для выявления гепатитных маркеров, определения типа, генотипа и вирусной нагрузки необходимо делать специальный анализ крови на гепатит C.

Сдача анализа крови на гепатит C не является обязательной при плановом медосмотре, поэтому такое исследование проводится по таким показаниям:

в биохимическом анализе наблюдается существенное повышение уровня печеночных трансаминаз и лейкоцитов, что свидетельствует об острой фазе воспалительного процесса в печени;
планирование семьи и беременность;
появление характерных астенических и диспепсических проявлений хронического гепатита;
группа риска: медперсонал, наркоманы, лица, находящиеся в местах лишения свободы, пациенты, которым необходимо частое переливание донорской крови.

Перед проведением диагностики нет необходимости придерживаться специальных правил. Достаточно отказаться от алкоголя, жирной и жареной пищи за пару дней до похода в больницу. Накануне вечером нужно съесть легкий ужин не позднее 20:00, а утром необходимо сдавать анализ натощак. Все это поможет повысить достоверность результатов.

Основным методом диагностики гепатита C является твердофазный иммуноферментный анализ, который определяет болезнь посредством связи «антиген – антитело». Выделяют несколько основных маркеров вирусной инфекции, имеющих разное диагностическое значение:

анти-core — считается одним из самых надежных признаков наличия болезни, поскольку ассоциируется с репликацией вируса и сопровождает РНК патогена;
анти-NS3 — эти титры наблюдаются в большом количестве в крови при острой фазе HCV-инфекции, а также при хронизации патологического процесса. Большая концентрация анти-NS3 обычно характеризует высокую вирусную нагрузку;
анти-NS4 — эти маркеры определяют длительность воспалительного процесса, а потому напрямую связаны со степенью поражения печени;
анти-E1/E2 — прогноз клинической картины зависит от того, на каком этапе заболевания были выявлены эти титры. Если они обнаружены в течение первого месяца протекания острой фазы и начинают медленно понижаться, то организм самоочищается от вируса и переходит в стадию «здорового носительства». Если же анализ показал высокие маркеры анти-E при хроническом гепатите C, то патоген активно размножается.

В отличие от других вирусных гепатитов, при HCV-инфекции медики не могут использовать в диагностических целях данные о концентрации иммуноглобулинов IgM и IgG. Это обусловлено специфичностью антителообразования при данном заболевании, в частности, IgM может проявиться гораздо позднее IgG, из-за чего данные структуры нельзя воспринимать как гепатитные маркеры. Однако обнаружение в крови человека IgM на протяжении трех лет указывает на высокую выживаемость вируса в организме либо на обострение инфекции при хронической форме.

Спрогнозировать течение заболевания по результатам ИФА можно, используя такую таблицу:

Под понятием «здоровое носительство» многие понимают выздоровление от гепатита C, однако последние исследования показывают, что у таких людей все равно остается вероятность развития болезни. Существуют данные о том, что патоген может отсутствовать в крови, но сохраняться в лимфатической системе и тканях печени. Поэтому обнаружение антител при отсутствии РНК вируса называют «здоровым носительством».

Хотя производители тест-систем для проведения иммуноферментного анализа на гепатит C стараются совершенствовать свою продукцию и повышать ее диагностическую чувствительность, частота ложных результатов остается высокой (10–30% по данным разных авторов). Это обусловлено специфичностью проявления антител при HCV-инфекции.

При ложноположительном результате тест показывает наличие обоих типов антител, что трактуется как развитие острой фазы болезни. Однако тест-система может уловить схожие белковые структуры, которые вырабатываются при других заболеваниях: опухоли, аутоиммунные процессы, бактериальные инфекции и др. К примеру, изменение молекулярного состава крови беременных приводит к ложноположительному результату, поэтому при вынашивании плода рекомендуется сделать несколько тестов и подтвердить либо опровергнуть диагноз с помощью ПЦР.

Ложноположительные результаты ИФА составляют 15% от всех положительных результатов.

Ложноположительные результаты обычно возникают, когда иммунная система начинает реагировать сразу против нескольких видов патогенов. К примеру, для людей с ревматоидным артритом достоверность ИФА снижается на 30%. У новорожденных ложный результат может наблюдаться при перекрестном синтезе иммуноглобулинов M к иммуноглобулинам G, находящимся в организме матери.

Ложноотрицательные результаты встречаются реже и, как правило, у людей с ВИЧ, а также по причине несоблюдения надлежащих лабораторных условий. Самыми частыми нарушениями во время выполнения анализа на гепатит C являются:

нарушение порядка нанесения разводящего средства и времени инкубации образца для получения соответствующей реакции;
нарушение условий подготовки, хранения и перевозки биоматериала;
использование просроченных тест-систем;
плохая стерилизация и очистка лабораторной посуды (особенно часто наблюдаются нарушения обработки наконечников, которые используются для управления активными веществами);
использование разных серийных компонентов тест-систем (разные производители применяют для производства диагностических тестов свои активные вещества);
проведение анализа на «постоявшем» биоматериале.

Самые достоверные результаты получаются, когда анализы на гепатит C делаются сразу после забора крови. Свежеприготовленные образцы являются на 100% «живыми», поэтому адекватно отвечают на биохимические воздействия. Но сейчас многие больницы сотрудничают с внешними коммерческими диагностическими центрами, куда отвозят биоматериал. Кровь, взятая для ИФА, может храниться не более 5 суток при температуре 0–4ºС либо ее замораживают. Но даже в случае соблюдения нормальных условий хранения и транспортировки такая кровь подвергается изменениям, а потому вероятность ложного результата повышается.

Если ИФА дал положительный анализ на гепатит C, то для исключения ложного результата проводится дополнительное исследование в виде теста RIBA (рекомбинантный иммуноблоттинг). Цель такой лабораторной диагностики остается прежней — обнаружение специфических антител, однако методика проведения несколько отличается от ИФА.

Предварительно берутся антигены вируса HCV и с помощью иммунофореза распределяются по фракциям на нитроцеллюлярной мембране с учетом молекулярного веса. Таким образом, носители антигенных маркеров распределяются по образцу полосами, а не «кляксой», как в случае с ИФА. Поэтому иммуноферментная реакция проявляет не смесь антигенов, а конкретные маркеры, благодаря чему RIBA является более чувствительным и достоверным тестом по сравнению с ИФА.

Однако важнейшее диагностическое значение в выявлении гепатита C остается за анализом ПЦР (полимеразная цепная реакция). Достоверность данного метода составляет 99,9%, поскольку кровь исследуется не на наличие антител, которые могут появиться лишь через несколько месяцев после заражения, а на наличие РНК вируса в организме. Таким образом, ПЦР покажет, инфицирован ли человек, уже на третий день после потенциального заражения.

ПЦР получила широкое применение в медицине: в диагностике заболеваний (наследственных, врожденных, аутоиммунных, криптогенных, инфекционных), в установлении отцовства, в клонировании и мутагенезе генов. Однако при гепатите C такой анализ назначается только после нескольких положительных или противоречивых реакций ИФА и RIBA из-за сложности выполнения диагностики и дороговизны процедуры. Если для обнаружения антител достаточно провести химические реакции, то для выполнения ПЦР нужны не только специфические знания, но и современное оборудование. Процедура выполняется в несколько этапов:

«плавление ДНК» — выделенную из организма двухцепочную матрицу ДНК нагревают в течение 30–120 секунд при температурах 96–98ºС для «разведения» полимеразных цепей. Чтобы разрушение водородных связей происходило «мягче», образец заранее прогревают при более низких температурах в течение 2–5 минут;
«отжиг» — после расслоения ДНК проводится ее отжиг при температуре 60–70ºС для связывания праймеров с одноцепочной матрицей;
элонгация — на этой стадии начинается копирование специфических фрагментов ДНК, которые представляют диагностический интерес. Для получения количественной информации о концентрации вирусных фрагментов в организме человека проводится несколько циклов финальной элонгации.

Несмотря на политику бесплатной медицины в странах СНГ, ПЦР-тест проводят только коммерческие диагностические центры. Причем такой анализ будет стоить в 3–5 раз дороже, чем ИФА. Однако он не только подтвердит диагноз, но и определит степень тяжести патологического процесса по вирусной нагрузке.

источник

Специфические лабораторные методы применяются для диагностики гепатита С. К ним относятся иммунохимические, молекулярно-биологические анализы распознавания РНК-содержащего вируса (ВГС).

Интерпретация полученных данных зависит от:

Чувствительности применяемого метода. Это способ определения минимального компонента в величине разведения — антител, антигенов, нуклеиновых кислот. Выражается в количественных единицах — титрах.
Специфичности конкретного метода, способного выявить ВГС и антитела к нему

Цель работника лаборатории заключается в разграничении ложноположительных анализов на гепатит С и обнаружение вируса и антител к нему.

Постановка диагноза HСV-инфекции происходит с помощью вирусологических (ПЦР) и серологических тестов (ИФА).Симптоматика острой фазы заболевания практически отсутствует, но уже в первые 7-14 дней после инфицирования диагностировать этот период гепатита С можно при обнаружении РНК методом ПЦР.

Применение ИФА в этой стадии не результативно, так как антитела вырабатываются через несколько недель. Изобретение тестовых систем 3 поколения способствует определению IgM в ранние сроки. Метод используют в лабораториях, но он не отвечает целям полной диагностики и оценки эффективности лечения.

Метод иммуноферментного анализа разработан в трех вариантах: иммуноферментный, радиоиммунный, флюороиммунный. Востребован твердофазный ИФА. В постановке реакции он прост, высокочувствителен и относительно не дорог.

В зависимости от агента, который определяют – антиген или антитело, ИФА представляет разную ценность в диагностике. Верные результаты получаются при выявлении вирусных антигенов. Это также не является критерием постановки диагноза, так как часть антигенов расположена только в печеночной ткани и в крови обнаружить их не возможно. Поэтому нужно применять ИФА с определением сразу двух видов вирусных антигенов.

При обнаружении антител к ВГС нельзя говорить о присутствии вируса. Выявлены случаи когда анализ ИФА оказывается ложноположительным у обследуемого. Это указывает на иммунологическую память ранее присутствующего вируса в организме.

В проведенных исследованиях 957 проб с положительным ИФА потребовались другие арбитражные методы—ПЦР. В итоге у 36,6% РНК не обнаружилось, что свидетельствует о получении ложноположительного ответа.

Разработанные за последнее десятилетие новые тестовые системы способны одновременно определять антитела и антигены к вирусу гепатита С.

Этот метод детекции—полимеразная цепная реакция, создан для обнаружения вирусной РНК в образце сыворотки крови. Исследование заключается в многоцикловом процессе, который состоит из переходящих друг в друга этапов.

С помощью применения обратной транскриптазы (фермента) образуются молекулы ДНК вируса гепатита С. Итоговый результат—выделение вирусной рибонуклеиновой кислоты. Количественный вариант ПЦР используют для определения концентрации РНК. Исследуется количество копий в 1 мл. Выражается в логарифмических выражениях (log10).

Для прогнозирования эффективности лечения важным является выяснение принадлежности гепатита С к генотипу. В проведении генотипирования используют типоспецифические праймеры, в методах основанных на методике ПЦР.

Чувствительным методом определения нуклеиновых кислот считается «ПЦР в реальном времени». С помощью этого метода получают результат в ходе реакции даже при малом количестве нуклеиновых кислот. Полученные показатели с высокой точностью определяют уровень вирусной нагрузки.

На сегодня по-прежнему остается шанс получения ложноположительного результата на наличие анти-ВГС. При определенных обстоятельствах искаженные данные получаются при проведении ИФА и ПЦР.

Внимание! Доля ошибочных ложноположительных результатов составляет 10-20%.

Для уточнения нахождения вируса в крови обследуемого человека применяют метод обнаружения РНК совместно с другими чувствительными методами. Однако получение отрицательного ответа не свидетельствует о ложноположительном ответе. В случаях полного выздоровления пациентов (10-15%) в крови возможно присутствие анти-ВГС.

Получение ложноположительного результата зависит от естественных причин:

появление мутантных штаммов;
репродукции антител и антигенов возбудителя.

Ошибочный анализ регистрируется в виде ложнонегативных и ложнопозитивных результатов.

Ложноположительный ответ получается при:

смешении исследуемого образца с предыдущим через лабораторное оборудование или аэрозоли;
соединение между пробами при работе с реакционной смесью.

Ложноотрицательные ответы определения РНК получаются при:

нарушениях правил перевозки клинических образцов;
несоблюдении теплового режима образцов крови;
распад РНК при подготовке к пробе;
поэтапное прохождение ПЦР нарушает гепарин и высокий уровень криоглобулинов;
присутствие в сыворотке белковых, химических субстанций.

Распространенные причины ошибок анализов связаны с:

иммунодефицитными состояниями;
онкологией;
аутоиммунными заболеваниями (синдром Рейно, полинейропатия, узелковый периартериит и другие);
поражениями системы крови (тромбоцитопения, гемолитическая анемия);
глистными инвазиями;
сифилисом.

Ошибка в анализе возможна с учетом действия работников, участвующих в процессе, с процедурного кабинета и до клинической лаборатории.

Человеческий фактор возможен при:

нарушении нумерации пробирок в момент забора крови;
указании ошибочного ответа;
неправильных действиях лаборанта в ходе подготовки образца;
проведении пробы в условиях повышенной комнатной температуры;
неопытности молодого специалиста;
изготовлении некачественных диагностических препаратов.

Моментом, который способен искажать данные исследований является алкоголь. Это своеобразный антидепрессант, который воздействует на диагностику гепатита С. У пьющих людей с хронической формой выявляться HCV РНК при отсутствии антител и наоборот.

Установленный гепатит С ложноположительный у беременной женщины может быть связан с физиологическими изменениями происходящими в организме в период вынашивания плода:

выработку характерных гестационному периоду белков;
полную перестройку гормональной системы;
повышение концентрации противовоспалительных цитокининов;
изменение биохимических показателей;
присоединение инфекций бактериального и вирусного генеза.

Инфекционные заболевания протекают с выделением антител (защитные факторы крови) в ответ на антигены (болезнетворные возбудители). Работа иммунитета человека заключается в выработке иммуноглобулинов в ответ на проникновение чужеродных агентов.

Одновременное выделение иммуноглобулинов при инфекционном процессе в сочетании с гепатитом С искажает результаты анализов ИФА, что ведет к возрастанию количества ложноположительных и ложноотрицательных результатов.

Инфекции, которые приводят к ошибке:

токсоплазмоз;
цитомегаловирус;
передающиеся половым путем (уреаплазма, микоплазма, трихомоноз).

Лабораторная диагностика гепатита С при коинфекции с ВИЧ затруднена. Ложноотрицательный ИФА по выявлению анти-ВГС связан с формированием иммунодефицита у человека. Поэтому всегда проводится исследование РНК методом ПЦР.

Ошибочный диагноз гепатита сводят к минимуму благодаря:

качественному обучению лабораторных работников и прохождению курсов повышения квалификации;
проведению этапов ПЦР в изолированных зонах;
применению автоматических пипеток для каждого этапа реакции;
проведение дополнительных анализов для уточнения.

Исключить ложноположительный результат возможно при проведении дополнительных (supplemental) тестов. Это препараты, созданные специально для определения антител к конкретным белкам, кодированных разными зонами вирусной РНК.

Внедрение новых методик лабораторного исследования вирусного гепатита С обеспечивает раннюю диагностику заболевания и сводит к минимуму появление ложных результатов. Это мера способствует своевременно начатому лечению, которое заканчивается выздоровлением.

источник

Среди самых опасных вирусных заболеваний — гепатит С. Это особо тяжелая форма. Часто бывает ложноположительный анализ на гепатит С, потому что его трудно диагностировать. Он может мутировать, проходить без симптомов, часто обращается в перманентную форму. Найти в организме вирус могут случайно: при диагностировании другого недуга или при постановлении на учет беременных.

Заразиться можно при переливании крови или при использовании одного шприца много раз (чаще так заражаются наркоманы), в салоне красоты (ногтевой сервис), у стоматолога, при операции по пересадке органов. Источником есть больные хронической или острой формой заболевания. Кровь инфицированного человека заразна в течение долгого периода: от нескольких недель, до нескольких лет.

При сдаче любых анализов возможны ошибки. Но бывает как ложноотрицательный, так и положительный ответ на гепатит С. Это случается из-за ошибок медицинского персонала или воздействия других факторов. Чтобы обнаружить, заразен ли человек или что повлияло на ложный результат, надо провериться всесторонне и сдать анализы на маркеры инфицирования HCV.

Стрессовое состояние во время диагностики может спровоцировать ложный положительный результат.

На первом этапе используют иммуноферментный метод (ИФА) — осуществляется для нахождения в венозной крови антител к вирусу (маркеры инфицирования HCV). Отрицательный его результат означает, что пациент не инфицирован. Положительный результат не всегда однозначен. Ошибка метода для человека — существенный стресс.

Обнаруженные маркеры могут являться реакцией организма как на пребывание вируса, так и на то, что организм уже вылечился или реакцией на совсем другой вирус. То есть дает сомнительный результат на гепатит С. Поэтому врачи не всегда доверяют ему и определяют добавочные исследования:

общий анализ крови;УЗИ печени;УЗИ органов брюшной полости;ПРЦ (полимеразная цепная реакция) — этот метод позволяет выяснить наличие инфекции, количество в организме, но когда концентрация вируса на антитела к гепатиту мала, то исход будет отрицательным (ошибочным);рекомбинантный иммуноблот эссей (тест RIBA) — специфичный развернутый тест на гепатит, который не только выявляет, но и идентифицирует антитела, что направлены против вируса гепатита С (более точный, но и он порой дает ложноположительный результат).

Ложноположительный результат возможен во время беременности.

После проведенных исследований методом ИФА сомнительный анализ (с ошибками) могут получить до 15% пациентов, при том что для беременных он выше. Причины ложноположительного явления:

ошибочные атаки иммунной системы на ткани собственных органов, как на чужеродные (болезни аутоиммунного характера);опухоли (доброкачественные и злокачественные);онкологические заболевания;новообразования в организме;беременность;инфекции, которые проходят в тяжелой форме;сбои в работе иммунной системы;наличие гепарина в крови вследствие принятия некоторых препаратов;употребление иммуностимулирующих медикаментов;диагностика в инкубационный период на очень ранней фазе, когда иммунитет не отреагировал, потому что концентрация вируса мала;иммуносупрессивные пациенты (которые подавляют иммунитет);новорожденные с внутриутробными инфекциями (антитела, переданные от матери);высокий уровень криоглобулина в крови;острые болезни верхних дыхательных путей;аутоиммунный гепатит;нужно повременить с анализом, если прививались от гриппа или столбняка.Результат анализа будет ложноотрицательным в первые две недели инфицирования.

Инфицированность гепатитом С в данных случаях подтверждается только при положительном результате в следующих исследованиях. Ложноотрицательные результаты устанавливают при проведении тестирования раньше двухнедельного срока со дня заражения. За этот период маркеры не формируются. Поэтому пациенту стоит обращать внимание на изменения в своем организме и через некоторое время пересдать анализы.

Кроме проблем со здоровьем, причинами ложноположительного результата бывают:

ошибки лаборантов — малоопытность, случайные подмены пробирок, опечатки в результатах, неверная подготовка образца к анализу;неправильная транспортировка и несоблюдение температурных режимов хранения;начальные стадии болезни;низкое качество проведения исследований;загрязнения биоматериалов;воздействие высоких температур на образцы;возможен разный результат при использовании наборов для диагностики от разных производителей.

Проявления симптомов гепатита у беременных можно принять за токсикоз.

Узнав о беременности, женщина обращается в женскую консультацию для постановки на учет. При этом ей предстоит не единожды сдавать целый список анализов. Один из них на гепатит С при беременности. При этом часто результат неблагоприятный. Не стоит сразу впадать в панику. При беременности нередко отображаются ложноположительные результаты.

Врачи с большим опытом назначают несколько исследований, прежде чем поставить диагноз, потому что в период беременности организм перестраивается и результат анализов может быть ошибочный. Причиной этому есть изменение в гормональном фоне, нарушения метаболизма, грипп, простуда, изменения в белках крови, начало вынашивания плода. Плазма крови беременных считается сложной, что может повысить недостоверность результата.

Отрицательный результат означает, что женщина не инфицирована и не является носителем антител или же они не успели выработаться при недавнем заражении. Поэтому этот анализ сдают несколько раз для достоверности результата. Опасность болезни в том, что она протекает бессимптомно и похожа на признаки токсикоза. Определив на ранней стадии заболевание, это позволит оградить еще не родившегося малыша, врачей, остальных пациенток от заражения и позволит подготовиться к возможным проблемам.

При положительном результате женщине нужно успокоиться и обо всем подумать. Опасность инфицирования плода невелика. Антитела пассивно могут передаться в процессе вынашивания ребенка. В случае нервного состояния у матери и плода может снизиться иммунитет. Это послужит увеличению вируса и в результате перейдет в хроническую или острую фазу гепатита С. Ребенок может родиться с анти-HCV в крови.

Перед проведением лабораторных исследований на гепатит С специальных советов нет. По возможности лучше сдать анализ в нескольких лабораториях. Кровь надо сдавать при отсутствии гриппа и ОРВИ. Можно провести исследования на наличия в крови ДНК и РНК вируса гепатита С, их проводят только в платных клиниках. Также сообщить врачу о приеме лекарств и хронических болезнях, если такие имеются. Смотреть, чтобы забор крови делали стерильным инструментом.

Гепатит любого типа является серьезным заболеванием и может привести к печеночной недостаточности. Поэтому так важно знать и правильно оценивать результат обследований на это заболевание. В данной статье мы рассмотрим, какие сдают анализы и почему они бывают ложными.

Существует огромное количество маркеров и методов исследования, которые помогают выявить вид гепатита и активность процесса. Самостоятельно разобраться в таком сложно вопросе трудно. Чтобы решить какой анализ сдать, необходимо обратиться к инфекционисту, гастроэнтерологу или узкому специалисту – гепатологу.

Для лечения и чистки ПЕЧЕНИ наши читатели успешно используют

. Внимательно изучив этот метод мы решили предложить его и вашему вниманию.

Основными методами постановки диагноза являются ИФА и ПЦР.

Для первичного обследования назначают ИФА (иммуноферментный анализ). Он может подтвердить заражение гепатитом и определить наличие антител в крови. Материалом для диагностики является венозная кровь.

IgM – свидетельствуют об остром воспалительном процессе в печени. Определяются через 2 недели после инфицирования. Могут циркулировать в крови 5-6 месяцев; IgG – выявляются при хроническом гепатите. Могут быть обнаружены даже через десять лет после заражения, а также у переболевших людей.

Данные иммуноглобулины могут выявляться вместе или только IgM.

Следующим этапом является проведение ПЦР (полимеразной цепной реакции). Она используется для окончательного подтверждения диагноза, а также является критерием эффективности лечения. Метод основан на выявлении ДНК вируса.

В некоторых случаях положительный результат обследования не говорит о заболевании гепатитом. Для подтверждения диагноза исследование повторяют 3-х кратно.

Чтобы исключить ложноположительный и ложноотрицательный результат, нужно соблюдать простые правила:

сдавать анализ в проверенной лаборатории; температура тела должна бать в норме; сообщить лаборанту и специалисту, который направил на обследование, о сопутствующих заболеваниях и приеме любых медикаментов; не заниматься спортом непосредственно перед сдачей крови; не курить за час до исследования; исключить прием алкогольных напитков.

При постановке на учет у гинеколога все женщины сдают анализ на гепатиты и ВИЧ. Интересно, что у беременных ложноположительный результат обнаруживают чаще. Это может быть связано с наличием резус-конфликта, повышением синтеза цитокинов и гормонов.

Ложноположительный анализ на гепатит С получают в редких случаях (10-15 %). Причин этого явления много, самые распространенные из них:

контакт иммунной системы с вирусом. На момент исследования вирионы могут быть разрушены, но антитела будут обнаруживаться еще некоторое время; реакция иммунитета на другую инфекцию (туберкулез, малярию, рассеянный склероз, склеродермию); аутоиммунные болезни печени и других органов (щитовидной железы, соединительной ткани); наличие в организме новообразований; беременность, сопровождающаяся изменением гормонального фона и иммунной реактивности; неправильное проведение анализа в лаборатории; начальная стадия болезни, когда количество копий вируса менее 200 в мл; некачественные реактивы; случайная замена образца крови при взятии или неправильная маркировка пробирки; нарушение температурного режима при хранении крови; сдача анализа в период болезни (например, гриппа или ОРВИ) или после вакцинации от гриппа, гепатита, столбняка; прием иммунодепрессантов, Гепарина; идиопатические причины.

Ложноотрицательный тест определяют, если он проведен ранее двух недель со дня заражения. За этот период антитела не успевают выработаться.

Даже без рекомендации специалиста обследоваться на гепатит С нужно при:

недавно перенесенных операциях; переливании крови; нанесении татуировок; частом посещении маникюрных салонов; лечении у стоматолога; любых контактах с кровью; положительном результате на гепатит у близких родственников.

Определение гепатита С заключается не только в подтверждении наличия вируса. Кроме методов ИФА и ПЦР, проводят следующие обследования:

Биохимический анализ крови, во время которого определяется уровень свободного и связанного билирубина, АЛТ, АСТ, тимоловую пробу, общий белок, иммуноглобулины ɑ, ɣ, ɮ, фибриноген, ПТИ. Общеклинические исследования: анализ крови и мочи. УЗИ печени и других органов брюшной полости. Рекомбинантный иммуноблоттинг. Биопсия печени. На вирусный гепатит В, D, вирус иммунодефицита человека. Эластометрия. Фибротест.

Чтобы исключить ложноположительный результат, проводят оценку щитовидной железы – определяют уровень тиреоидных гормонов, наличие антител к пероксидазе, исключают болезни соединительной ткани (ревматоидный фактор, серомукоиды, С-реактивный белок).

Гепатит С излечим в 50 % случаев. Несмотря на опасность болезни, он в разы легче поддается лечению по сравнению с гепатитом В.

В комплекс лечебных мероприятий входит специфическая противовирусная терапия (с применением пегилированного интерферона, Рибавирина), применение гепатопротекторов, метаболических средств, санаторно-курортное лечение. Терапию можно проводить в домашних условиях.

Многие наши читатели для лечения и чистки печени активно применяют широко известную методику на основе натуральных ингредиентов, открытую Еленой Малышевой. Советуем обязательно ознакомиться.

Выделяют 11 генотипов вируса. От того какой из них вызвал болезнь, зависит длительность лечения. В среднем она составляет от 6 до 12 месяцев.

В заключение нужно сказать, что положительный результат не всегда является поводом для расстройства. Анализ обязательно повторяют в другой лаборатории, проводят дополнительные обследования. Так как болезнь длительное время протекает скрыто и не вызывает нарушения самочувствия, необходимо сдавать анализ на гепатит при наличии факторов риска. Будьте здоровы!

Вам все еще кажется, что победить Гепатит С невозможно?

Судя по тому, что вы сейчас читаете эти строки — победа в борьбе с Гепатитом С пока не на вашей стороне…

И вы уже принимали токсичные препараты, у которых было куча побочек? Оно и понятно, ведь игнорирования болезни, может привести к тяжелым последствиям. Усталость, потеря веса, тошнота и рвота, желтоватый или сероватый оттенок кожи, горечь во рту, ломота в теле и в суставах… Все эти симптомы знакомы вам не понаслышке?

Эффективное средство от Гепатита С существует. Перейдите по ссылке и узнайте, как вылечила Гепатит С у себя Ольга Сергеева…

Эксперт проекта VseProPechen.ru

Гепатит С — заболевание печени, вызванное флавивирусом HCV (hepatitis C virus). Заражение происходит через кровь и биологические жидкости инъекционным, половым и трансплацентарным (от матери к плоду) путем.

В группе риска заражения HCV находятся люди, ведущие беспорядочные половые отношения, потребляющие инъекционные наркотические вещества, медицинские работники и пациенты, которым проводится переливание крови и другие манипуляции. Какой анализ на гепатит С нужно сдавать в первую очередь?

Попадая в кровь, вирус гепатита HCV дает непосредственное цитопатическое действие — поражает клетки печени, там же происходит его размножение. Параллельно с поражением клеток вирус HCV вызывает аутоиммунные реакции организма (аутоиммунный тиреоидит, ревматоидный артрит и т.п.)

Особенностью HCV по сравнению с другими формами вирусной болезни печени является менее выраженная клиническая картина. В 95% случаев заболевание проходит в скрытой форме, что часто затрудняет постановку диагноза.

Анализы на гепатит С — это комплекс лабораторных тестов, позволяющих определить наличие активного вируса HCV в крови.

Из-за особенностей и различной чувствительности диагностических систем невозможно верно диагностировать заболевание на основании какого-то одного из скрининговых тестов, поэтому для подтверждения наличия вируса проводится несколько исследований.

Какие анализы на гепатит С нужно сдавать?

Первичный анализ на гепатит С — это исследование сыворотки крови на присутствие антител методом иммуноферментного анализа (ИФА).

свидетельствует, что организм пациента сталкивался с вирусом, но позитивный результат ИФА на гепатит С еще не дает основания для диагностики заболевания.

При выявлении anti-HCV требуется обязательная перепроверка результатов.

Какие еще анализы сдают на гепатит С?

Для диагностирования заболевания проводятся дополнительные анализы при гепатите С. После иммуноферментного исследования в случае позитивного ответа используется метод ПЦР. Положительный анализ на гепатит С при ПЦР показывает, что на момент проведения исследования в крови находится вирус.

Во время ПЦР проводится исследование количественных характеристик инфекции, позволяющее выявить концентрацию вируса HCV. Далее следует анализ РНК вируса гепатита С — генотипирование, на основании которого определяются индивидуальные генетические особенности возбудителя. Всего в природе насчитывается 11 генетических типов вируса HCV. Исследование РНК гепатита С позволяет выбрать тактику лечения, а также сделать предварительное заключение о результатах противовирусной терапии.

В случае, если анализ на гепатит С позитивный при ИФА, но негативный при использовании метода ПЦР, то это может быть при ошибках во время проведения исследований.

В таком случае пациент считается потенциально инфицированным, и для подтверждения наличия anti HCV гепатита С назначается развернутое исследование сыворотки методом рекомбинантного иммуноблота (recomBlot HCV).

Этот тест позволяет точно идентифицировать анти HCV гепатита С — антитела, вырабатываемые иммунной системой человека в ответ на белковые компоненты вируса. Специфические белки к нему появляются в крови на 3-4 неделе после инфицирования, поэтому информативность ИФА тестов и recomBlot HCV на этой стадии достаточно высока.

Иммуноферментный тест проводится на сыворотке крови, не содержащей фибрина и форменных элементов.

ИФА основывается на взаимодействии антигена с антителами, при котором содержимое пробирки меняет цвет. На основании сравнения полученного цвета сыворотки с существующей цветовой шкалой устанавливается антиген, например, возбудитель инфекционного заболевания.

Какие анализы при гепатите С относятся к ИФА?

Иммуноферментный тест на Anti HCV позволяет установить факт инфицирования на основании наличия в крови иммуноглобулинов — антител к возбудителю. Белки крови anti HCV гепатита С бывают двух типов— M и G, которые обозначаются в ходе лабораторных анализов как IgG и IgM. Белки типа М вырабатываются в крови через 4-6 недель после внедрения вируса, в это время их содержание максимально. К 5-6 месяцу уровень IgM снижается, но может возрастать при реактивации заболевания. Антитела типа G обнаруживаются через 11-12 недель после заражения, их уровень достигает пика на 5-6 месяц.

Для определения маркеров HCV проводится тест на Anti-HCV total, который показывает суммарное значение наличия антител IgG и IgM. Пропорция между иммуноглобулинами этих классов также позволяет судить о характере заболевания. Преобладание IgM над IgG говорит об активности вируса, и в ходе лечения заболевания показатели соотношения антител выравниваются.

Важно! Следует понимать, что выявление антител IgG и IgM в ходе анализа не является достаточным основанием для диагностирования заболевания, и требует верификации методом рекомбинантного иммуноблота.

Этот тест делается на основании чувствительности реагента к белкам HCV, в ответ на которые появляются антитела. Это — структурный белок С1 и С2, а также неструктурные протеины — NS2, NS3, NS4A, NS4B, NS5B. Иммуноглобулины к этим протеинам могут выявляться в крови в различном соотношении и количестве.

Рекомбинантный иммуноблот — это высокоспецифичное лабораторное исследование сыворотки крови, дающее возможность верифицировать позитивные результаты тестов на anti HCV гепатита С. Этот тест назначается для подтверждения неясных показателей ИФА.

Recomblot HCV проводится для выявления антител к С1, С2, NS3, NS4. Различные комбинации антител могут давать отрицательные, положительные, сомнительные и возможно-положительные (пограничные) результаты. Наличие антител к двум из четырех белков HCV дает основание для позитивного результата Recomblot HCV.

Полимеразная цепная реакция — это анализ, позволяющий изучить генетический код вируса, а также установить уровень концентрации вирионов в крови. На основании результатов RNA можно выбрать способ и узнать продолжительность терапии, а также определить фактор риска передачи инфекции от одного носителя к другому.

Качественный ПЦР — это общий показатель, который свидетельствует о наличии/отсутствии вируса в крови. Анализ проводится методом исследования сыворотки крови Real-Time PCR с разной степенью чувствительности скрининговой системы. Результат качественного анализа может быть либо позитивный («выявлено») или негативный («не выявлено»).

Количественный ПЦР — это показатель концентрации вирионов в 1 мл биологического материала. На основании этого теста можно определить, есть ли вероятность распространения инфекции от зараженного пациента на новых носителей, а также установить методы и длительность лечения (чем выше концентрация вируса, тем интенсивнее требуются терапия с применением комбинированных противовирусных препаратов).

Анализ на генотип гепатита С — это еще один важный лабораторный тест, показывающий генетические особенности вируса. Кроме 11 основных генотипов HCV известно множество субтипов вируса. Разница между генотипами обуславливает особенности протекания болезни, выбор терапии и исход лечения.

Разные генотипы имеют различную резистентность к лекарственным препаратам, а также разную продолжительность лечения. Например, гепатит С, вызванный 1-м генотипом вируса HCV, может заметно регрессировать за 48 недель, а при наличии вируса 2 и 3 генотипов болезнь при надлежащем лечении может регрессировать за 24 недели.

В зависимости от типа лабораторных тестов норма анализов на гепатит С может быть в качественных и количественных показателях.

Для иммуноферментного анализа у здорового человека, никогда не болевшего гепатитом С, суммарные анти HCV гепатита С в норме должны отсутствовать (референсное значение — «не найдено»), или быть меньше 0,9 (после перенесенного заболевания в прошлом). При превышении показателя 1,0 можно сделать вывод, что вирус есть в крови пациента в настоящий момент.

Показатели гепатита С в анализах ПЦР типа выражаются в числовых значениях:

нижний показатель нормы находится на уровне 600.000 МЕ/мл;
среднее значение колеблется в пределах 600.000-700.000 МЕ/мл (международных единиц на 1 мл биологического материала);
при показателях вирусной нагрузки от 800.000 МЕ/мл и выше можно говорить о повышенной концентрации HCV в крови.

Несмотря на высокую чувствительность скрининговой системы при исследовании сыворотки крови на антитела, вероятность ошибочных результатов тестов всегда есть.

Ложноотрицательный анализ на гепатит С бывает в 8% всех случаев.

Объясняется такой результат тем, что существует т.н. серологическое окно — временной промежуток между инфицированием HCV и появлением реакции со стороны иммунной системы (выработки антител к HCV). Если анализ крови был проведен в этот отрезок времени, то диагностическая система может дать отрицательный результат. Поэтому в медицинской практике при подозрении на гепатит С анализы рекомендуется делать несколько раз с небольшим интервалом.

Чтобы сдать анализ на гепатит С и получить правдивый результат, нужно соблюдать несколько несложных правил лабораторных тестов.

Кровь берется из вены натощак.
Перед тем как сдавать тест на гепатит С, следует исключить из употребления алкоголь, жирную, жареную и копченую пищу.
Между приемом пищи и моментом забора крови должно пройти 8-10 часов.

О гепатите С, его возбудителе, симптомах, диагностике и лечении можно узнать из следующего видео:

При подозрении на вирусное заболевание печени следует сдать анализы на гепатит С как можно скорее. Важно помнить, что это серьезное заболевание, которое при отсутствии должного лечения может вызвать цирроз печени и даже появление нетипичных клеток.
Пациенту важно объяснить, как называются анализы на гепатит С и что при первичных положительных результатах исследований не нужно впадать в панику.
Поскольку большинство иммуноферментных тестов не являются основанием для окончательной постановки диагноза гепатита С, анализы нужно сдавать несколько раз, желательно в разных лабораториях.
Перед тем как провериться на гепатит С, следует помнить об индивидуальных особенностях иммунной системы, которые также обуславливают нетипичные результаты анализов.

Может ли анализ на гепатит С быть ошибочным? К большому сожалению, такие случаи иногда бывают. Эта патология опасна тем, что после заражения симптомы часто отсутствуют у человека в течение многих лет. Точность в диагностике гепатита С особенно важна, так как при несвоевременном выявлении и лечении недуг приводит к катастрофическим осложнениям: циррозу или раку печени.

Вирусы гепатита C передаются через кровь, поэтому важен ее анализ. Иммунная система вырабатывает против возбудителей болезни белковые антитела — иммуноглобулины М и G. Они являются маркерами, посредством которых печеночная инфекция диагностируется при применении иммуноферментного анализа (ИФА).

Примерно месяц спустя после инфицирования или при обострении хронического гепатита С формируются антитела класса М. Наличие таких иммуноглобулинов доказывает: организм поражен вирусами и стремительно уничтожает их. В ходе выздоровления пациента численность этих белков неуклонно сокращается.

Антитела G (anti-HCV IgG) формируются значительно позже, в период от 3 месяцев до полугода после вторжения вирусов. Их обнаружение в кровотоке сигнализирует о том, что инфицирование случилось давно, поэтому острота болезни миновала. Если таких антител немного и в повторном анализе становится еще меньше, это свидетельствует о выздоровлении больного. Но у пациентов с хроническим гепатитом С иммуноглобулины G присутствуют в кровеносной системе всегда.

В лабораторных анализах определяют и наличие антител к неструктурным вирусным белкам NS3, NS4 и NS5. Anti-NS3 и Anti-NS5 выявляются на ранней стадии болезни. Чем больше их показатель, тем вероятнее, что она станет хронической. Anti-NS4 помогают установить, давно ли инфицирован организм и как сильно поражена печень.

У здорового человека в анализах крови нет АЛТ (аланинаминотрансферазы) и АСТ (аспартатаминотрансферазы). Каждый из данных печеночных ферментов свидетельствует о ранней стадии острого гепатита. Если же обнаружены оба, то это может сигнализировать о начале некроза клеток печени. А наличие фермента ГГТ (гамма-глутамилтранспептидазы) — один из признаков цирроза органа. Доказательством разрушительной работы вирусов является и присутствие в крови билирубина, фермента ЩФ (щелочной фосфатазы), белковых фракций.

Самая точная диагностика при правильном ее проведении — методом ПЦР (полимеразной цепной реакции). Основывается она на выявлении не иммунных антител, а структуры РНК (рибонуклеиновой кислоты) и генотипа возбудителя гепатита С. Используют 2 варианта этого метода:

качественный — есть вирус или нет;
количественный — какова его концентрация в крови (вирусная нагрузка).

«Анализ на гепатит С — отрицательный». Такой формулировкой подтверждается отсутствие болезни при качественном исследовании методом ПЦР. Аналогичный результат количественного теста ИФА показывает, что в крови нет антигенов вируса. В иммунологических исследованиях иногда указывают их концентрацию ниже нормы — это тоже отрицательный результат. Но если антигенов нет, а антитела к ним есть, данное заключение сигнализирует о том, что пациент или уже переболел гепатитом С или недавно был вакцинирован.

«Анализ на гепатит С — положительный». Такая формулировка требует уточнения. Позитивный результат лаборатория может выдать человеку, который когда-то болел им в острой форме. Эта же формулировка применима и к людям, которые в настоящее время здоровы, но являются вирусоносителями. Наконец, это может быть ложный анализ.

В любом случае необходимо провести исследование повторно. Больному с острым гепатитом С, находящемуся на лечении, врач может назначать тестирование через каждые 3 дня, чтобы отслеживать эффективность терапии и динамику состояния. Пациент с хроническим недугом должен сдавать контрольные анализы через каждые полгода.

Если результат теста на антитела положительный, а заключение исследования методом ПЦР отрицательное, считается, что человек потенциально инфицирован. Чтобы убедиться в наличии или отсутствии антител, проводят диагностику методом RIBA (РИБА — рекомбинантного иммуноблота). Данный метод информативен через 3–4 недели после инфицирования.

Во врачебной практике различают 3 варианта неадекватных результатов диагностического исследования:

сомнительный;
ложноположительный;
ложноотрицательный.

Иммуноферментный метод считается весьма точным, но порой он дает ошибочную информацию. Сомнительный анализ — когда клинические симптомы гепатита С у пациента есть, но маркеров в крови нет. Чаще всего это происходит при слишком ранней диагностике, поскольку антитела не успевают сформироваться. В таком случае делают повторный анализ через 1 месяц, а контрольный — через полгода.

Ложноположительный анализ на гепатит С врач получает, когда методом ИФА обнаруживаются иммуноглобулины класса М, а методом ПЦР РНК вируса не выявляется. Такие результаты нередко бывают у беременных женщин, пациентов с иными типами инфекции, онкобольных. Им тоже нужно делать повторные тесты.

Ложноотрицательные результаты появляются весьма редко, например, в инкубационном периоде болезни, когда человек уже инфицирован вирусом гепатита С, но и иммунитет к нему, и симптомы еще отсутствуют. Такие результаты могут быть у пациентов, которые принимают препараты, подавляющие защитную систему организма.

Гепатит С протекает по-разному в зависимости от генотипа вируса. Поэтому в ходе диагностики важно определить, какой из 11 его вариантов находится в крови пациента. У каждого генотипа есть несколько разновидностей, которым присвоены буквенные обозначения, например 1а, 2в и т. д. Точно подобрать дозировки препаратов, длительность лечения можно, узнав вид вируса.

В России распространены преимущественно генотипы 1, 2 и 3. Из них хуже и дольше всего лечится генотип 1, особенно подтип 1в. У вариантов 2 и 3 более благоприятные прогнозы. Но генотип 3 может приводить к тяжелому осложнению: стеатозу (ожирению печени). Бывает, пациент инфицируется вирусами сразу нескольких генотипов. При этом один из них всегда доминирует над другими.

Диагностика гепатита С показана, если:

возникли подозрения на нарушения в деятельности печени;
получены сомнительные данные о ее состоянии при УЗИ органов брюшной полости;
в анализе крови содержатся трансферазы (АЛТ, АСТ), билирубин;
планируется беременность;
предстоит операция.

Ложноположительные анализы, когда инфекции в организме нет, но результаты указывают на ее наличие, составляют до 15% лабораторных исследований.

минимальная вирусная нагрузка в начальной стадии гепатита;
прием препаратов-иммунодепрессантов;
индивидуальные особенности защитной системы;
высокий уровень криоглобулинов (белков плазмы крови);
содержание гепарина в крови;
тяжелые инфекции;
аутоиммунные заболевания;
доброкачественные новообразования, раковые опухоли;
состояние беременности.

Ложноположительные результаты тестов возможны, если у будущей матери:

нарушается обмен веществ;
имеются эндокринные, аутоиммунные заболевания, грипп и даже банальная простуда;
появляются специфические белки беременности;
резко снижается уровень микроэлементов в кровотоке.

Кроме того, при проведении тестов на гепатит С причины ошибок могут заключаться в человеческом факторе. Нередко сказываются:

низкая квалификация лаборанта;
ошибочный анализ чужой крови;
некачественные химические реактивы;
устаревшие медицинские приборы;
загрязнение образцов крови;
нарушения правил их транспортировки и хранения.

Любая лаборатория может иногда ошибаться. Но это возможно при тестах только ИФА или только ПЦР. Поэтому при проведении диагностики заболевания следует применять оба метода исследования. Тогда оно наиболее достоверно, поскольку сложно допустить ошибку, если в крови нет вируса.

Важно делать анализ на гепатит С, когда нет никаких недомоганий, даже легкой простуды. Не требуется сдавать кровь натощак. Следует только накануне отказаться от жирных, жареных, острых блюд, не употреблять спиртное. И последнее: первоначальный ложноположительный результат о гепатите С — не повод для паники. Вывод нужно делать лишь после дополнительных исследований.

Стрессовое состояние во время диагностики может спровоцировать ложный положительный результат.

общий анализ крови;
УЗИ печени;
УЗИ органов брюшной полости;
ПРЦ (полимеразная цепная реакция) — этот метод позволяет выяснить наличие инфекции, количество в организме, но когда концентрация вируса на антитела к гепатиту мала, то исход будет отрицательным (ошибочным);
рекомбинантный иммуноблот эссей (тест RIBA) — специфичный развернутый тест на гепатит, который не только выявляет, но и идентифицирует антитела, что направлены против вируса гепатита С (более точный, но и он порой дает ложноположительный результат).

Ложноположительный результат возможен во время беременности.

ошибочные атаки иммунной системы на ткани собственных органов, как на чужеродные (болезни аутоиммунного характера);
опухоли (доброкачественные и злокачественные);
онкологические заболевания;
новообразования в организме;
беременность;
инфекции, которые проходят в тяжелой форме;
сбои в работе иммунной системы;
наличие гепарина в крови вследствие принятия некоторых препаратов;
употребление иммуностимулирующих медикаментов;
диагностика в инкубационный период на очень ранней фазе, когда иммунитет не отреагировал, потому что концентрация вируса мала;
иммуносупрессивные пациенты (которые подавляют иммунитет);
новорожденные с внутриутробными инфекциями (антитела, переданные от матери);
высокий уровень криоглобулина в крови;
острые болезни верхних дыхательных путей;
аутоиммунный гепатит;
нужно повременить с анализом, если прививались от гриппа или столбняка.

Результат анализа будет ложноотрицательным в первые две недели инфицирования.

Кроме проблем со здоровьем, причинами ложноположительного результата бывают:

ошибки лаборантов — малоопытность, случайные подмены пробирок, опечатки в результатах, неверная подготовка образца к анализу;
неправильная транспортировка и несоблюдение температурных режимов хранения;
начальные стадии болезни;
низкое качество проведения исследований;
загрязнения биоматериалов;
воздействие высоких температур на образцы;
возможен разный результат при использовании наборов для диагностики от разных производителей.

Проявления симптомов гепатита у беременных можно принять за токсикоз.

источник