Меню Рубрики

Гепатит с анализ пцр отрицательный

Гепатит С является болезнь с вирусной этиологией, которая поражает печень. Провоцирует данное состояние вирус HCV с РНК-молекулой. Наличие этой кислоты дает возможность делать анализ ПЦР на гепатит С.

Опасность рассматриваемого заболевания в том, что период между попаданием вируса в организм и появлением первых симптомов может быть довольно длительным — от 1-2 до 4-5 недель. Это мешает выявить заболевания и начать терапию своевременно.

Зависимо от особенностей организма носителя вируса заболевание может протекать остро, а также приобретать хроническую форму, которая требуется затратного и продолжительного по времени лечения. Если обнаруживаются вирусные частицы гепатита С, то пациента назначаются необходимые анализы, одним из которых есть ПЦР на гепатит С. Этот анализ проводится абсолютно всем лицам, у кого были обнаружена антитела к вирусу.

Анализ крови поможет доктору определить наличие или отсутствие вируса гепатита С в организме пациента. Данный показателя определяют количество вируса, который поразил организм, а также его генотип и характеристики.

На основе полученных результатов после проведения данного анализа, а также ссылаясь на дополнительное проведенные исследования специалист определяет продолжительность лечения, и степень угрозы пациента для здоровья других людей.

ПЦР гепатит С имеет и другое название — РНК-анализ. Такое название объясняется тем, что в вирусе присутствует частичка РНК. Этот микроорганизм способен мутировать.

Все генотипы вируса характеризуются дифференциальной резистентностью, именно поэтому каждому пациенту назначаются разные методы терапии и в каждом индивидуальном случае дальнейший прогноз может отличаться.

В качестве исследуемого материала выступает кровь из вены. ЕЕ нужно сделать на голодный желудок. Обычно тестирование осуществляется методом Real-Time PCR, но также может использоваться тест COBAS AMPLICOR. В не зависимости от выбранного типа исследования крайне важно учесть порог чувствительности, то есть возможность реагента определить саму малую концентрацию вирусных частиц в крови.

Если показатели нормальные, то в расшифровке теста будет указано «не найдено».

  • количественный анализ;
  • качественный;
  • генотропирование.

Благодаря тесту можно выявить генетику вирусной инфекции, а также стадию его развития в организме пациента. В зависимости от того, насколько система диагностики чувствительна, анализ моет проводиться либо один раз либо несколько — для подтверждения результата, используя более чувствительный реагент.

Рассматриваемый анализ также может называть анализ ПЦР на гепатит С качественный. Обычный уровень чувствительности теста, который позволяет определить присутствие вируса — от 10 до 500 МЕ.

При отрицательных показателях можно говорить о том, что уровень вируса в крови пациента значительно меньше порога чувствительности теста.

В случае, если результаты тестов ничего не показали, доктору необходимо немного больше узнать о пороге чувствительности пациента.

Тест может определить наличие вируса в организме пациента примерно через неделю после инфицирования.

Благодаря подобному исследованию можно узнать количество РНК флавивируса присутствует в организме человека. Он определяет, сколько вирусного РНК есть на 1 кубическом см крови. Результаты анализов расшифруются в МЕ на мл.

Количественную диагностику ПРЦ следует проводить прежде чем назначать лечебную терапию, ну и конечно же после проведенных процедур, примерно на 12 недели лечения. Данная процедура необходима для того, чтобы удостоверится в правильности лечебной терапии. Вирусная нагрузка дает возможность определить 3 главных показателя болезни:

  • продолжительность и прогноз противовирусного лечения (чем большей будет вирусная нагрузка, тем длительней будет терапевтический курс);
  • эффективность, а также метод терапии;
  • инфекционность, то есть степень риска передачи вируса от зараженного человека к здоровому.

Данный вид диагностики зависит от вида лабораторного теста, а также от порога чувствительности.

Так как HCV имеет высокую активность в плане мутации, при проведении теста необходимо определить, какой генотип вируса присутствует у больного в крови. Существует 11 генотипов вируса гепатита С, они также делятся на разные субтипы.

Следует помнить о том, что данный этап анализа крайне важен, потому что благодаря нему доктор может сделать выводы об фазе вируса, назначить подходящее лечение, а также выписать пациенту наиболее эффективные препараты.

Различные генотипы HCV поддаются лечению по-разному. К примеру, чтобы вылечить первый генотип потребуется более года, а эффективность такой терапии примерно 65%. А вот генотип 2 и 3 можно вылечить за полгода, при этом эффективность терапии значительно выше — примерно 90%.

Также следует отметить, что благодаря генотипироанию можно также понять, в каком состоянии находится печень. К примеру, часто генотип 3 протекает совместно с стеатозом, который способствует накоплению жира в клетках печени.

Анализ крови на ПРЦ способен определить генотип заболевания. В некоторых случаях тестовые системы не могут определить вирус. В таком случае можно получить результат «не типируется». Подобный результат анализов говорит о том, что генотип вируса не характерен для определенной территории. В подобных случаях нужно провести повторные анализы но уже с высшим пороком чувствительности.

Вся расшифровка анализов основана на сведениях полученных ранее. Благодаря лабораторным исследованиям в большинстве случаев обозначаются такие данные:

  • тест обычно называется Real-time;
  • обозначается цифра генотипа;
  • к-во фракций с РНК;
  • найдено или не найдено.

Самым важным при расшифровке данного анализа есть пункт под номером 3. Он позволяет увидеть вирусную нагрузку, от которой зависит продолжительность лечебных процедур, и дальней шее состояния пациента, а также его время его выздоровления.

Результаты исследований показывают цифру генотипа а также иногда можно увидеть латинскую букву, которая является определителем субгенотипа вируса. Чтобы доктор мог поставить правильный диагноз и назначить лечение ему необходимо знать генотип заболевания, этого будет достаточно для проведения дальнейших действий.

Для того, чтобы расшифровать анализы, надобно обратиться к таким специалистам — инфекционисту либо гепатологу. Эти доктора смогут расшифровать полученные данные. В основном расшифровка результатов анализа крови, да и вообще любых анализов, для человека без медицинского образования, совершенно непонятны.

К примеру, при отрицательном тесте на гепатит, и ИФА положительном, смело можно утверждать об отсутствии у пациента НСВ, но это не исключает того, что гепатит С пациент перенес намного раньше, при чем в острой форме.

Считается, что положительный ИФА говорит, о том, что в кровяном русле обнаружены антитела, произведенные после того, как вирус был в прошлом поражен. Однако в нынешней медицине этот анализ не считают достаточно надежным. Доктора его используют исключительно в качестве первичного скрининга. При диагностике болезни доктора отталкиваются от показателей ПЦР-тестов.

Чтобы сделать анализ ПЦР используется кровь из вены. Обычно делают двойной забор биоматериала — для теста ПЦР и для ИФА. Чтобы результаты были точными и достоверными, нужно соблюдать некоторые правила забора биоматериала:

  • между употреблением еды и забором биоматериала должен быть выдержан временной промежуток — не меньше 8 часов;
  • кровь нужно сдавать на голодный желудок, в первой половине дня;
  • на протяжении суток перед анализом нужно отказаться от интенсивных физнагрузок;
  • перед тем, как сдавать анализ, надобно отказаться от употребления жареной еды и от питья спиртного.

Готовые результаты можно забрать на следующий день.

источник

ПЦР (полимеразная цепная реакция) на гепатит С — определяет причину появления РНК вируса в организме человека.

Способ диагностики вируса — ПЦР или его еще называют РНК анализом — очень молод, пока что он насчитывает десятилетия. Но не смотря на такой короткий промежуток времени, он сумел зарекомендовать себя с положительной стороны.Результат анализа ПЦР на гепатит С бывает нескольких видов: отрицательный и положительный. Отрицательный — показывает отсутствие вируса в крови, а положительный — свидетельствует о наличие в крови РНК гепатита С.

Кровь для данного исследования сдается из вены и натощак, желательно в период с 08:00 до 11:00. Тестируется высокочувствительным режимом “Real-tima PCR” — 14 МЕ/мл, что позволяет получить более точный результат.

Диагностика гепатита С (ПЦР) делится на три вида:

  • качественный — наработка схемы РНК (цепная реакция).
  • количественный — установление нагрузки вируса на организм человека.
  • генотипированный — определение типа вируса.

Количественный — это отражение уровня концентрации РНК инфекции в крови больного.Чаще всего врачи назначают его перед проведением терапевтического лечения для выяснения полной картины болезни. Самой информативной для докторов является 12 неделя заболевания. Именно на ней можно определить — эффективно ли проводимое лечение или есть ли болезнь или нет.

Полученные результаты интерпретирует лечащий врач. Показатели начинают определяться при 8х5 МЕ/мл — при этом в организме отмечает не менее 3х6 копий на 1 мм крови.

Бывают случаи, когда лаборатории не удается подсчитать РНК, и тогда результат пишется так: “ниже измерительного диапазона”.

СТоимость проводимого исследования колеблется от 350 до 5 000 рублей. Цена напрямую зависит от применяемых в исследовании реактивов.

Стоит отметить, что прямой связи концентрации инфекции в крови (HCV RNA) со степенью болезни нет.

Данный метод помогает установить:

  • эффективность выбранного лечения и ее тот или иной метод,
  • продолжительность болезни, установление диагноза и прогноза на лечение и дальнейшую жизнь,
  • степень опасности, при которой больной является переносчиком болезни, например, при ПА (половом акте).

Встречаются такие случаи, когда у пациента отмечается высокая степень инфекционной нагрузки, но при этом у него нет поражения клеток жизненно важного органа.

Качественный анализ — это результат изучения полимеразной цепной реакции болезни. Стандартные показатели вирусной отметки колеблются от 10 до 500 МЕ\мл. Если после прохождения исследования отмечается отрицательный показатель вирусной нагрузки, то процент концентрации инфекции в крови пациента находится ниже нормы. Если же Вы получили результат “не обнаружено”, то следует через 10 дней повторить обследование, так как у каждого человека может быть свой порог чувствительности. Важно, проводить исследование в одной и той же лаборатории. Так как от этого тоже зависит результат.

Если Вы заразились гепатитом С, то данный анализ покажет “обнаружено” уже через 4-6 дней после заражения. А вот для проведения количественного анализа — пока рано, так как может быть ложно-отрицательный результат.

Анализы позволяют на довольно-таки ранних сроках выявить разновидность генотипа инфекции, находящегося в крови пациента. В медицинской практике выявлено 11 генотипов. Также ПЦР помогает лечащему врачу установить устойчивость и непоколебимость вируса к применяемому методу лечения, то есть определить форму мутации болезни. Все это нужно для того, чтобы доктор мог назначить правильное лечение, так как один генотип требует 48 дневной терапии, а другие — всего 20 дней. Бывают случаи, когда лаборатории не могут определить тип болезни и пишут “не типируется”, то есть в человеке присутствует вирус, который не совпадает с представленными в данной лаборатории видами гепатита С. В таком случае лучше пересдать анализ в другой лаборатории с более чувствительной аппаратурой.

Для того чтобы расшифровать результаты полученных исследований, лучше обратиться к своему лечащему врачу, так как знания показателей нормы в данном вопросе не достаточно. Например: слова “анализ ПЦР гепатит С не обнаружено” или “найдено/обнаружено” мы можем понять, а вот в какой степени находится болезнь, и при каком типе гепатита С, увы, нет.

Также в полученном результате может быть написано следующее:

  • наименование проводимого теста, чаще всего пишут: “Real-time”.
  • диапазон, устанавливающий наличие болезни,
  • генотип заболевания — 1, 2…, который может обозначаться с буквой, например, генотип 3а.
  • объем РНК, присутствующий в крови, например, 831,6 МЕ/мл.

Врачи всегда обращают особое внимание на пункт определения вирусной нагрузки болезни. Так как именно данный показатель делает прогноз на будущее и помогает определиться с методом лечения.

Бывает пациенты задают вопрос: “ У меня антитела гепатита С есть, а ПЦР отрицательный? Почему так?” Это происходит за счет того, что анализ был проведен некачественно или с несоблюдением некоторых правил: например, употребление накануне данного метода диагностики лекарственных средств.

Встречается, но редко, когда пациент получает ложный результат. Это происходит по причине несоблюдения некоторых правил пациентом или лабораторией. Также бывает и такое, когда анализ на ПЦР отрицательный, а ИФА положительный. Это свидетельствует о том, что в крови больного не обнаружено HCV, но до этого в организме был вирус в острой форме. Но это случается ещё реже. Тем более при интерпретации полученных результатов, врачи ориентируются на показатель ПЦР.

Если у Вас есть подозрение на наличии в организме заболевания “гепатит С” — ознакомьтесь с нашей статьей о путях заражения гепатитом С. При необходимости проверить факт наличия инфекции или проверить эффективность лечения этой болезни, то следует провести качественный и количественный анализ. Благодаря им врачи могут с точностью определить правильность своих действий, направленных на выздоровление пациента.

Анализ на ПЦР можно пройти в любой лаборатории платно и бесплатно. Главное, если появляется необходимость пройти повторное исследование, не относящееся к ложно-отрицательному результату, лучше всего обследоваться в одной лаборатории, так как у каждой установлены свои нормативные границы, которые могут запутать лечащего врача. Что в свою очередь может привести к назначению неправильного метода лечения и увеличению времени выздоровления.

источник

Диагностика гепатита включает целый комплекс анализов для определения наличия вируса в крови. Одним из способов обнаружения заболевания является такой метод исследования, как ПЦР на гепатит С. Что это такое, почему анализ ПЦР на гепатит так важен, как его проводят и расшифровывают?

Полимеразная цепная реакция, или ПЦР, используется для диагностики язвы желудка, колита, энтерита. Но главное ее преимущество заключается в том, что она помогает обнаружить в организме как сам вирус гепатита C, так и антитела к нему, которые обладают способностью не вызывать реакции иммунной системы из-за их способности к мутации.

Исследование и его суть заключаются в создании определенных условий, при которых происходит цепная реакция РНК гепатита. Если при их сопоставлении с нуклеотидной последовательностью вируса гепатита C выявляются совпадения, это свидетельствует о том, что в крови имеются вирусные частицы, а в печени происходят процессы распада. Если количество вируса ниже определенного уровня, выносится отрицательный диагноз, если выше – положительный.

Существует два вида исследования крови методом ПЦР при гепатите: количественный анализ и качественный анализ.

Количественный ПЦР, как упомянуто выше, определяет концентрацию РНК вируса гепатита. Кроме того, он способен дать информацию об интенсивности, с которой развивается патология, и эффективности назначенного лечения. Количественный анализ на гепатит C крайне важен, поскольку фиксирует резистентность к действию противовирусных препаратов и позволяет скорректировать терапию.

После того как больной пройдет курс лечения, ПЦР помогает определить дальнейший порядок назначений. В некоторых случаях выявляется необходимость дополнительных обследований. Например, если уровень АЛП повышен (но не более, чем в 2 раза в течение полугода), а расшифровка анализа указывает на вирусную нагрузку выше 105 МЕ/мл, пациенту назначается биопсия. Если количественный анализ на ПЦР выявляет сильное воспаление и фиброз, больному прописывают курс лечения противовирусными препаратами.

В ситуациях, когда большое количество вирусных частиц сочетается с высоким показателем АЛТ, пациенту незамедлительно должно быть назначено лечение без проведения дополнительных диагностическим мероприятий.

Пройдите этот тест и узнайте есть ли у вас проблемы с печенью.

Качественно расшифровать показатели при количественном анализе крови на гепатит могут только квалифицированные и опытные специалисты, а современные технологии помогают сделать это при низкой концентрации вируса в крови.

Качественный анализ ПЦР направлен на определение и подтверждение фактического присутствия вируса в организме. Его проводят при обнаружении в крови антител к гепатиту. Именно качественный анализ на гепатит гарантирует точность результата на 100% и позволяет поставить диагноз на ранних стадиях заболевания, что дает возможность начать борьбу с гепатитом уже в течение первых недель после заражения и повышает шансы на полное выздоровление (в случае с заболеванием типа B).

Читайте также:  Могут ли анализы не показать гепатит

При исследовании методом ПЦР и расшифровке анализа крови на гепатит можно также определить генотип возбудителя заболевания. Всего существует 6 генотипов вируса и большое количество субтипов, однако в нашем регионе распространение получили 1, 2 и 3 генотипы.

Другими преимуществами данного вида диагностики являются:

  • высокая точность полученных показателей и низкая вероятность ошибки в них;
  • высокий уровень чувствительности к вирусным частицам в крови;
  • возможность выявления сразу нескольких возбудителей;
  • диагностика болезнетворных внутриклеточных микроорганизмов, обладающих высокой антигенной изменчивостью;
  • работа с расшифровкой анализа на гепатит позволяет обнаружить скрытые текущие инфекции.

Анализ ПЦР на гепатит обязательно сдают следующие категории людей:

  • беременные женщины;
  • сотрудники учреждений здравоохранения;
  • потенциальные доноры крови и органов;
  • те, кто имеют характерные признаки заболевания;
  • ВИЧ-инфицированные лица;
  • наркозависимые;
  • лица, ведущие беспорядочную половую жизнь.

Забор крови для ПЦР-исследования производится из вены. Как правило, это происходит утром до того, как человек поел, поскольку после приема пищи должно пройти минимум 8 часов. В крайних случаях кровь могут взять на исследование днем или вечером, но временной зазор между анализом и приемом пищи должен составлять не менее 5 часов.

Человеческий фактор может количественно отразиться на результатах: их точность в некоторых случаях снижается со 100% до 95%, поэтому к сдаче крови необходимо заблаговременно готовиться. Качество биоматериала для анализа будет соответствующим при следовании пациентом следующим правилам:

  • перед сдачей крови можно пить только чистую воду;
  • за двое суток до проведения исследования нужно отказаться от приема жареной и жирной пищи, а также алкогольных напитков;
  • за сутки до посещения лаборатории следует прекратить прием лекарственных средств. В случае если это не представляется возможным, об этом в обязательном порядке необходимо предупредить лаборанта и лечащего врача;
  • накануне нужно избегать стрессовых ситуаций и физических нагрузок;
  • не следует проходить ультразвуковое, рентгенологическое и инструментальное исследования незадолго до сдачи крови;
  • в течение часа до анализа необходимо воздержаться от курения;
  • за 20 минут до сдачи крови нужно отвлечься, успокоиться и выровнять дыхание.

Если исследование проходит ребенок до 5 лет, родители должны проследить, чтобы он пил кипяченую воду каждые 10 минут в течение получаса до забора биоматериала.

Расшифровка анализа может быть представлена словами (в случае качественного исследования), например, «не обнаружено» или «ниже диапазона изменений». В первом случае, это свидетельствует о том, что инфекция не обнаружена. Во втором – что вирус присутствует, но в незначительном количестве. Такая ситуация требует проведения повторного исследования.

Вирусная нагрузка определяется по количеству инфекционного РНК и обозначается как МЕ/мл или копии/мл.

Нормальным показателем (нормой) количественного анализа на гепатит C является диапазон от 1,8х102 до 2,4х107 МЕ/мл.

Концентрация вируса в крови может быть:

  • низкой: от 600 МЕ/мл до 3х10 4 /мл;
  • средней: от 3х10 4 МЕ/мл до 8х10 5 МЕ/мл;
  • высокой: более 8х10 5 МЕ/мл.

Количественны и качественны анализ ПЦР на гепатит позволяет определить наличие вируса в организме и уровень его концентрации. Полиразмерная цепная реакция способна диагностировать заболевание на ранних стадиях, но для этого необходимо, чтобы больные как можно раньше обращались в медицинские учреждения за помощь и строго следовали рекомендациям лечащего врача.

Гепатит С — патология воспалительного характера, при которой поражаются клетки печени. Болезнь развивается вследствие проникновения вируса гепатита С (HVC) в организм человека.

Форма заболевания может быть острой или хронической.

Чаще всего признаки острой формы патологии у большинства пациентов отсутствуют, иногда болезнь сопровождается болезненными ощущениями в области живота, снижением работоспособности, повышенной утомляемостью, нарушением аппетита, темным оттенком мочи, обесцвечиванием каловых масс, желтушностью кожных покровов и слизистых, суставными болями. Возникают такие симптомы как правило через 6-8 недель после заражения, но могут проявиться и через полгода.

При развитии подобных явлений необходимо обратиться в медицинское учреждение и пройти комплексное обследование всего организма. В рамках медицинского обследования проводят анализ крови на гепатит С.

Сегодня при помощи современных диагностических методик можно выявить данную патологию на начальной стадии развития, что значительно увеличивает шансы на полное излечение от болезни.

Анализ на гепатит С в обязательном порядке сдают следующие группы людей:

  • женщины в период вынашивания ребенка;
  • лица, имеющие признаки гепатита;
  • сотрудники медицинских учреждений;
  • потенциальные доноры органов и крови;
  • наркозависимые, вич-инфицированные, лица, ведущие беспорядочную интимную жизнь.

Какие анализы нужно сдать при гепатите С? Для точной диагностики болезни, выявления ее причин и определения состояния паренхимы печени требуется выполнение таких исследований:

  • общего анализа мочи и крови;
  • биохимического анализа крови;
  • анализа методом ПЦР;
  • анализа крови на выявление антител к HVC;
  • анализа крови на имеющиеся антитела к собственным печеночным клеткам;
  • биопсии печени.

Расшифровка анализа крови на гепатит С выполняется специалистом. Рассмотрим каждый способ исследования подробнее, а также разберемся какой анализ на гепатит С самый точный.

При выполнении общего анализа крови при гепатите С можно оценить состояние пациента. Изменения показателей крови не воспринимаются, как специфические симптомы гепатита, однако при данном заболевании происходят такие нарушения, как:

  • снижается концентрация гемоглобина, тромбоцитов и лейкоцитов;
  • повышается содержание лимфоцитов;
  • нарушается свертываемость крови;
  • увеличивается скорость оседания эритроцитов (СОЭ).

Общий анализ мочи дает возможность обнаружить в ее составе уробелин — желчный пигмент, возникающий в моче в результате нарушения функционирования печени.

Биохимический анализ крови при гепатите С позволяет выявить такие нарушения, как:

  • повышено содержание ферментов печени (аланинтрансаминазы — АЛТ и аспартатаминотрансферазы — АСТ), которые поступают в кровь при повреждении гепатоцитов. В нормальном состоянии данные показатели у мужчин не должны быть более 37 МЕ/л, у женщин — не выше 31 МЕ//л. Повышенная концентрация АЛТ и АСТ при гепатите С, протекающем бессимптомно, часто является единственным симптомом данного заболевания. Кроме этого, в составе крови увеличивается уровень глутамилтранспептидазы щелочной фосфатазы (в норме не выше 150 МЕ/л).
  • содержание билирубина (как общего, так и прямого) в крови превышено. Если уровень желтого пигмента в сыворотке крови превышает 27-34 мкмоль/л, возникает желтуха (до 80 мкмоль/л в легкой форме, 86-169 мкмоль/л — в среднетяжелой, выше 170 мкмоль/л — в тяжелой форме).
  • Понижен уровень альбуминов, концентрация гамма-глобулинов, наоборот, повышена. Гамма-глобулины состоят из иммуноглобулинов — антител, которые защищают организм от болезнетворных веществ.
  • увеличена концентрация триглицеридов в составе крови.

При помощи методики ПЦР можно диагностировать возбудителя болезни. Выполнение этого анализа дает возможность обнаружить в составе крови вирус, даже если количество его минимально. Анализ ПЦР на гепатит С позволяет определить в крови имеющуюся инфекцию уже по прошествии 5 дней с момента заражения, то есть задолго до того, как появятся антитела.

Если результат анализа крови на гепатит С методом ПЦР положительный, это говорит о присутствии активной инфекции в организме. При помощи данного метода можно провести качественное и количественное исследование РНК HVC.

В ходе качественного анализа ПЦР на гепатит С возможно обнаружить в организме человека имеющийся вирус.

Такую диагностическую процедуру выполняют в том случае, если в крови выявлены анти-HVC.

Расшифровка анализа на гепатит С содержит информацию о том, что в организме инфекция или выявлена, или не выявлена. В нормальном состоянии патологические вещества в составе крови не обнаруживаются.

Если анализ на гепатит С дает положительный результат, это говорит о том, что патогенный микроорганизм непрерывно делится и поражает печеночные клетки.

Результаты такого анализа могут оказаться недостоверными, это возможно в следующих случаях:

  • при загрязнении используемого биоматериала;
  • при наличии в крови гепарина;
  • при наличии химических или белковых субстанций (ингибиторов) в исследуемом биоматериале, влияющих на элементы ПЦР.

Количественный анализ на гепатит С дает информацию о количестве вируса, содержащегося в крови, то есть определяет вирусную нагрузку. Под данным понятием подразумевается объем РНК HVC, присутствующий в крови (например, в 1 мл). В расшифровке количественного анализа на гепатит С это значение выражено в цифровом эквиваленте, измеряется в МЕ/мл.

Кровь на ПЦР при гепатите С сдают перед проведением терапевтических мероприятий. После анализ выполняют на 1, 4, 12 и 24 неделях. Исследование на 12 неделе является показательным и выполняется с целью оценки эффективности проводимых лечебных процедур.

Если анализ на гепатит С при беременности положительный и при этом значения вирусной нагрузки превышены, то риск передачи болезнетворных микроорганизмов от больной матери к ребенку увеличивается в несколько раз. Также при повышенных значениях вирусной нагрузки осуществление лечебных мероприятий затруднительно.

Согласно расшифровке анализов на гепатит С, если значения вирусной нагрузки превышают 800 000 МЕ/мл, то она является высокой. Если показатели ниже 400 000 МЕ/мл, уровень вирусной нагрузки считается низким.

Анализ на гепатит С методом ПЦР считается самым точным и обладает рядом преимуществ перед другими вариантами исследований, а именно:

  • прямая диагностика возбудителя болезни. При выполнении традиционных исследований определяются наличие белковых маркеров, являющихся продуктами жизнедеятельности болезнетворных веществ. Это говорит только о том, что инфекция присутствует в крови. При сдаче анализа на гепатит С методом ПЦР возможно определить вид возбудителя опасной патологии.
  • специфичность методики. В ходе такой процедуры в биоматериале определяется уникальный участок ДНК, соответствующий лишь одному типу возбудителя. Это позволяет минимизировать вероятность получения недостоверных результатов.
  • высокая чувствительность. При выполнении ПЦР-анализа можно обнаружить минимальное количество вируса. Это важно, если выявляются условно-патогенные вещества, представляющие угрозу только в случае повышения их уровня.
  • при использовании такой методики в одном образце биоматериала можно выявить сразу несколько возбудителей.
  • можно обнаружить скрыто протекающие инфекции. Помимо этого, анализ позволяет диагностировать болезнетворные микроорганизмы, обитающие внутри клеток и имеющие высокую антигенную изменчивость.

Если результаты исследования положительные, значит в биоматериале обнаружены следы вируса, то сеть в организме имеется инфекция.

Отрицательный анализ ПЦР на гепатит С означает, что следы инфекции в биоматериале отсутствуют.

Данный способ позволяет определить антитела ко всем видам вируса гепатита, а также антитела к печеночным клеткам собственного организма, возникновению которых способствует развитие аутоиммунного гепатита.

Результаты, полученные в ходе исследования, актуальны на протяжении 3 месяцев, затем следует повторно сдавать кровь на гепатит С.

Возможно также выполнение экспресс-исследования с применением специальных тестовых полосок. Данный анализ дает возможность определить в составе крови и слюны антитела к вирусу С. Такую процедуру можно осуществить самостоятельно, на дому.

Для выполнения такого анализа берут элемент паренхимы печени и выполняют гистологическое исследование полученного биоматериала. Это позволяет оценить состояние органа: выявить воспалительные, некротические очаги, стадию фиброза и прочее.

Сегодня используются тесты, которые заменяют гистологический анализ печеночной паренхимы.

Для оценки стадии поражения печени и интенсивности процесса воспаления применяют специфические биомаркеры венозной крови. С помощью Фибротеста можно оценить степень разрастания фиброзной ткани.

При выполнении Актитеста можно получить информацию об интенсивности патологических процессов в паренхиме печени. С помощью Стеатотеста можно диагностировать жировое перерождение ткани печени и оценить степень этого процесса. Фибромакс состоит из всех вышеуказанных тестов и может включать в себя некоторые другие исследования.

Какие анализы сдают при гепатите С и как выполняется тот или иной вид исследования мы выяснили. Не менее важно знать, как нужно подготовиться к проведению анализа.

Для получения достоверных результатов рекомендуется придерживаться следующих требований:

  • анализы при гепатите С необходимо сдавать в утренние часы, на голодный желудок. Последний раз пищу следует употреблять минимум за 8 часов до выполнения исследования.
  • Забор биоматериала можно осуществлять и в дневное или вечернее время. В таком случае важно, чтобы между последним приемом пищи и выполнением анализа прошло не меньше 5-6 часов.
  • перед сдачей крови на гепатит С следует отказаться от чая, кофе, сока или других напитков, разрешена только вода.
  • за 48 часов до проведения исследования необходимо исключить употребление жирных, жареных продуктов и спиртсодержащих напитков.
  • на протяжении минимум часа до выполнения анализа нужно воздержаться от табакокурения.
  • не следует выполнять анализ сразу после проведения ультразвукового, инструментального, рентгенологического обследования, сеанса массажа или физиотерапии.
  • за сутки до осуществления исследования требуется исключить прием медикаментозных средств и интенсивную физическую активность. Эмоциональные нагрузки также противопоказаны.
  • 15 минут перед выполнением исследования рекомендуется провести в спокойном состоянии.

Где сдать анализ на гепатит С? Забор биоматериала для дальнейшего исследования проводится в лаборатории медицинского учреждения или же на дому у пациента.

Кровь из вены берут следующим образом:

  • при помощи специального жгута, обернутого вокруг предплечья больного, приостанавливается венозный кровоток. Благодаря таким манипуляциям вены наполнятся кровью и будут более заметными, что значительно облегчит процесс введения иглы.
  • участок кожи, куда будет вводиться игла, тщательно обрабатывается спиртом или спиртсодержащей жидкостью.
  • в вену осторожно вводится игла, затем к ней прикрепляется пробирка, специально предназначенная для сбора крови.
  • сразу после того, как игла введена в вену сдавливающий жгут снимается с руки пациента.
  • после того, как собран необходимый для выполнения анализа объем крови, игла плавно вынимается из вены.
  • к месту укола обязательно прикладывается стерильный ватный или марлевый тампон, смоченный в спирте.
  • для предупреждения возникновения гематомы тампон следует с некоторым усилием прижать к области введения иглы, согнуть руку в локтевом суставе и держать в таком положении несколько минут. Такие действия также помогут быстрее остановить кровь.

При условии хорошей техники внутреннего введения данная процедура абсолютно безопасна и прочти не вызывает болезненных ощущений.

В редких случаях после забора крови возможно опухание вен. Данное явление носит название «флебит». Устранить проблему поможет компресс (не горячий), прикладывать его следует к опухшим участкам кожи несколько раз в сутки.

Также могут возникать определенные проблемы, если имеется нарушение свертываемости крови. Прием аспирина, варфарина и иных средств, разжижающих кровь, может спровоцировать кровотечение. Именно поэтому перед выполнением анализа требуется отказаться от приема любых медикаментов. Если же лечение отменить нельзя, следует сообщить об этом специалисту.

Сколько делается анализ на гепатит С? Результаты исследования крови на гепатит могут быть готовы и через несколько часов, и через несколько дней (как правило, не более 8 дней). Длительность подготовки результатов зависит от вида вируса и выбранной методики анализа. Более быстрым является исследование, проводимое способом ПЦР. Результаты в этом случае будут готовы всего через несколько часов.

Сколько стоит анализ на гепатит С? В зависимости от клиники и сложности осуществления исследования цена процедуры может варьироваться от 400 до 11 000 рублей.

Следует знать, что для формирования достаточного объема антител к HVC может потребоваться несколько недель. Поэтому на раннем этапе развития патологии результат исследования может быть ложноотрицательным.

Кроме этого, получение недостоверных данных возможно при некачественном выполнении анализа и нарушении условий транспортировки полученного биоматериала (образцы должны быть доставлены в лабораторию максимум через 2 часа после забора крови).

Если результат исследования окажется положительным, необходимо незамедлительно обратиться к врачу-инфекционисту. Специалист проведет дополнительное обследование и назначит соответствующее лечение.

Сегодня современные препараты нового поколения Софосбувир и Даклатасвир с 97-100% вероятностью навсегда излечат вас от гепатита C. Новейшие лекарства можно приобрести в России у официального представителя индийского фармгиганта Zydus Heptiza. Заказанные препараты доставят курьером в течение 4 дней, оплата после получения. Получить бесплатную консультацию по применению современных препаратов, а также узнать о способах приобретения вы можете на официальном сайте поставщика Zydus в России.

В 2012 году произошёл прорыв в лечении гепатита C. Были разработаны новые противовирусные препараты прямого действия, которые с вероятностью 97% полностью избавляют вас от заболевания. С этого момента гепатит С официально считается полностью излечимым заболеванием в медицинском сообществе. В Российской Федерации и странах СНГ препараты представлены марками софосбувир, даклатасвир и ледипасвир. В настоящий момент на рынке появилось очень много подделок. Лекарства надлежащего качества можно приобрести только у компаний, имеющих лицензии и соответствующую документацию. Перейти на сайт официального поставщика >>

Читайте также:  Методы иммуноферментного анализа гепатит в

В 2012 году произошёл прорыв в лечении гепатита C. Были разработаны новые противовирусные препараты прямого действия, которые с вероятностью 97% полностью избавляют вас от заболевания. С этого момента гепатит С официально считается полностью излечимым заболеванием в медицинском сообществе. В Российской Федерации и странах СНГ препараты представлены марками софосбувир, даклатасвир и ледипасвир. В настоящий момент на рынке появилось очень много подделок. Лекарства надлежащего качества можно приобрести только у компаний, имеющих лицензии и соответствующую документацию. Перейти на сайт официального поставщика >>

Гепатит С — вирусное заболевание печени, вызываемое флавивирусом HCV (от англ. hepatitis C virus), в структуре которого содержится молекула рибонуклеиновой кислоты (РНК). РНК несет генетический код вируса. Ее наличие позволяет проводить анализ ПЦР на гепатит С.

Опасность HCV для человека заключается и в том, что так называемое серологическое окно (промежуток времени между заражением и появлением реакции со стороны иммунной системы) может быть достаточно длительным — от нескольких недель до шести месяцев.

Это не дает обнаружить инфицирование и начать лечение вовремя.

В зависимости от индивидуальных особенностей организма носителя HCV может проявляться в острой форме, а также протекать как хроническое заболевание, которое потребует длительного и дорогостоящего лечения. При выявлении антител к HCV проводится ряд лабораторных анализов, в том числе ПЦР на гепатит С. Этот тест делается всем людям, в чьей крови были найдены антитела к HCV.

Лабораторный анализ ПЦР на гепатит С — исследование биологического материала с целью выявить наличие флававируса.

Полимеразная цепная реакция (так расшифровывается аббревиатура) показывает количественное значение вирусного поражения организма, его качественные характеристики, а также генотип вируса, содержащего РНК.

На их основе, а также на базе дополнительных анализов определяется способ и длительность терапии, а также эпидемиологический фактор (степень риска передачи другому носителю).

ПЦР гепатита С еще называют РНК-анализом (HCV RNA), т.к. флававирус содержит в себе частицу РНК размером вириона 30-60 нм. Одной из особенностей этого микроорганизма является высокая склонность к мутациям.

Каждый из подвидов (генотипов) вируса имеет различную резистентность, что обуславливает разные методики лечения и характер дальнейшего прогноза для пациента.

Биологический материал (венозная кровь) сдается натощак и, как правило, тестируется методом Real-Time PCR (высокочувствительной диагностики в режиме реального времени с нижним лимитом определения 15 МЕ/мл с применением закрытых автоматизированных систем).

Существуют другие тесты, например COBAS AMPLICOR с сенситивностью 50-100 МЕ/мл. Для любого лабораторного исследования важен порог чувствительности, т.е. способности реагента выявить минимальную концентрацию вируса в биологическом материале.

Референсное значение теста (нормальные показатели) — «не найдено».

ПЦР на гепатит С включает в себя три важных составляющих:

  • качественный анализ;
  • количественный анализ;
  • генотипирование.

Эти тесты позволяют определить характер виремии, а также генетические признаки возбудителя. В зависимости от чувствительности диагностической системы, исследование проводится один раз, и иногда для подтверждения или уточнения результатов делается повторный тест с более чувствительным реагентом.

Анализ ПЦР на гепатит С качественный — это другое общее название анализа полимеразной цепной реакции. Стандартная чувствительность теста, позволяющего выявить наличие вирусного поражения, находится в пределах 10-500 МЕ/мл.

Негативный анализ ПЦР на гепатит С показывает, что концентрация вируса в крови пациента находится ниже порога восприимчивости диагностической системы.

Если качественный ПЦР дал ответ «не обнаружено», то для последующего лечения важно узнать порог чувствительности реагента.

Положительный ответ на ПЦР анализ на гепатит С может быть дан уже на 4-5 сутки после заражения HCV.

Белковые фракции к флававирусу появляются значительно позже.

ПЦР гепатит С количественный — это показатель вирусной нагрузки, который отображает уровень концентрации РНК флававируса в организме. Это показатель, отображающий, сколько фрагментов вирусной РНК содержится на один кубический сантиметр крови. Результаты ПЦР РНК гепатита С количественного теста в общепринятой системе обозначаются в международных единицах на миллилитр (МЕ/мл) и могут записываться разными способами, например — 1,7 млн или 1.700.000 МЕ/мл.

Количественная ПЦР диагностика гепатита С назначается пациентам перед началом противовирусной терапии, и на 12 неделе лечения, чтобы оценить результаты выбранного метода борьбы с HCV. Вирусная нагрузка позволяет определить три важных показателя заболевания:

  • инфекционность, т.е. степень риска передачи вируса от одного носителя к другому (чем выше концентрация РНК флававируса, тем выше вероятность заразить другого человека, например, при половом контакте);
  • метод и эффективность лечения;
  • длительность и прогноз противовирусной терапии (чем выше вирусная нагрузка, тем дольше длится лечение).

Количественная ПЦР диагностика гепатита С зависит от типа лабораторного теста и порога его чувствительности. Нижней границей нормы принято считать показатель до 600.000 МЕ/мл, среднее значение находится в пределах 600.000-700.000 МЕ/мл. Результаты от 800.000 МЕ/мл и выше считаются высоким уровнем концентрации РНК-содержащего вируса.

Важно: нет прямой связи между уровнем HCV RNA в крови и тяжестью заболевания. У больного может быть очень высокая вирусная нагрузка, но это еще не свидетельствует о том, что имеется серьезное поражение клеток печени.

Ввиду высокой мутационной активности HCV в природе при тестировании важно выявить, какой именно генотип вируса находится в крови пациента. Всего на планете зафиксировано 11 генотипов вируса гепатита С, в которые входят множество подвидов (субтипов). На территории РФ распространены 1,2 и 3.

ПЦР РНК гепатита С вместе с генотипированием — очень важная составляющая анализа, т.к. позволяет врачу определить резистентность (устойчивость) вируса, подобрать подходящие препараты и назначить курс лечения.

Разные генотипы HCV по-разному поддаются противовирусной терапии. Например, 1 генотип требует до 48 недель лечения, а его эффективность в среднем составляет 60%, тогда как 2 и 3 генотипы лечатся в два раза быстрее с эффективностью до 85%.

Генотипирование также позволяет и косвенно определить состояние печени. Например, 3 генотип HCV нередко сопровождается стеатозом, при котором в клетках органа накапливается жир.

Анализ крови на ПЦР при гепатите С должен выдать цифру, определяющую генотип. В лабораторных ответах может быть написано «не типируется» — и это значит, что в крови человека находится вирус, не определяемый тестовой системой. Это может говорить о том, что генотип нехарактерен для данной географической зоны. В этом случае следует повторно сдать анализ с более высокой чувствительностью системы диагностирования.

Тест на гепатит С ПЦР количественный расшифровать можно на основе приведенных выше данных. При получении результатов лабораторных анализов обычно пишутся следующие данные:

  • «найдено»/ «не найдено» (ПЦР качественный на гепатит С);
  • количество РНК-содержащих фракций, например 831.680 ME/мл (анализ на ПЦР количественный);
  • цифра, определяющая генотип HCV, например — 1, 2, 3, 4;
  • название теста — чаще всего Real-time.

Наиболее важным при расшифровке анализа ПЦР на гепатит С считается второй пункт, который показывает вирусную нагрузку, определяющую прогноз, способ и длительность лечения.

Важно: в результате теста рядом с цифрой, показывающей генотип, может стоять латинская буква, например, 1а, что обозначает субтип вируса. Для врача он не имеет значения: для выбора метода лечения берется только генотип.

Для расшифровки лабораторных анализов важно обратиться к гепатологу или инфекционисту, который разъяснит полученную информацию в соответствии с видом диагностической системы и порогом ее чувствительности. В медицинской практике существует множество данных анализов крови, которые могут ввести человека без медицинского образования в заблуждение.

Например, если тест на гепатит С ПЦР отрицательный, а ИФА положительный, то может обозначать, что в данный момент в крови пациента нет HCV, но ранее он перенес острую форму гепатита С. Принято считать, что позитивный иммуноферментный анализ (ИФА) показывает, что в крови есть антитела, выработанные после вторжения вируса в прошлом. Но в современной медицинской практике ИФА анализ считается недостаточно надежным и нередко дает нетипичные результаты, поэтому врачи используют его в качестве первичного скрининга. При диагностике заболевания специалисты ориентируются именно на ПЦР тесты.

В следующем видео очень подробно и интересно рассказывается, в чем суть метода ПЦР, как проводится анализ:

Полимеразной цепной реакцией (ПЦР) в молекулярной биологии называют экспериментальный метод выявления вирусов. Он позволяет значительно увеличивать концентрации определенных фрагментов нуклеиновой кислоты (ДНК) в пробах биологического материала, что дает возможность их детерминировать (распознавать) и подсчитывать.

Проведение анализа выполняют следующим образом. Генетический материал (пробу крови), который потенциально может включать искомый ген, вносится в пробирку. Туда же помещают праймеры –синтезированные химическим путем отрезки небольшой длины искомого гена.

В сосуд также добавляют ДНК или РНК полимеразу, она способна выстроить цепочку нуклеиновой кислоты, которая полностью идентична первоначальной. В полученный состав вводят и набор из четырех свободных нуклеотидов – особого строительного материала для РНК или ДНК, один их которых содержит радиоактивные частицы фосфора.

Полученную смесь подогревают до 95–96°С, из-за чего две спирали ДНК, которые в обычном состоянии переплетены между собой, расплетаются. Затем препарат охлаждают, в это время праймеры сами прикрепляются к искомому участку генома вируса, не давая РНК (либо ДНК) вновь сформировать двойную спираль.

В процессе охлаждения полимераза отыскивает свободную цепочку нуклеотидов. Для функционирования данного фермента необходима именно одиночная цепь нуклеотидов. Поскольку полимераза проскальзывает по цепи ДНК (как кольцо по веревке), на двойной спирали она не способна работать.

После этого выполняют повторный цикл нагревания, из-за чего между собой разделяются цепочки нуклеотидов. При каждом из таких циклов ПЦР количество в пробе именно искомого гена гепатита возрастает в геометрической прогрессии, а остальной генетический материал продуцируется (вырастает) линейно.

После очистки раствора от остатков нуклеотидов и разделения при помощи электрофореза цепочек ДНК по параметру молекулярной массы, можно легко определить: есть ли искомый ген в исследуемом образце или нет.

Лабораторное исследование методом ПЦР позволяет получить даже больше информации, чем просто присутствие РНК вируса. Определяя параметр уровня радиоактивного излучения, есть возможность выявить, какое количество генетического материала содержалось изначально в исследуемом образце. В случае гепатита – определить показатель уровня вирусной нагрузки.

Еще одним достоинством этого метода является очень высокая степень чувствительности реакции ЦР. Она гораздо выше, чем у классических методов выявления вирусов. В идеальном варианте, для того чтобы выявить искомый ген, для ПЦР достаточно всего одного вируса в пробе.

Кроме этого, ПЦР полностью специфична. Ее праймеры создаются таким образом, чтобы они полностью соответствовали уникальным участкам искомых генов, которых нет ни у какой другой последовательности. Как уникальны отпечатки пальцев, так и в каждом гене есть уникальные последовательности из нуклеотидов.

Качественный анализ позволяет выявить только факт наличия вируса в крови. Этот тест нужно проводить для всех пациентов, у которых были обнаружены в крови антитела к гепатиту С. Его результатом может быть лишь одно значение из двух: «обнаружено» либо «не обнаружено». У здорового человека в норме (референсное значение) должно быть «не обнаружено».

Есть и специальная интерпретация таких результатов проведенного качественного исследования:

  • Результат «обнаружено». Это означает, что в анализируемом образце взятого биологического материала был найден фрагмент РНК, который специфичен для вируса гепатита С. Следовательно, есть факт инфицирования пациента вирусом гепатита С. Если результатом качественного ПЦР является «обнаружено», то это свидетельствует о том, что вирус размножается и в это время инфицирует в организме новые клетки печени.
  • Результат «не обнаружено». Такой вердикт говорит о том, что в анализируемом образце полученного биологического материала в данной лаборатории не обнаружен фрагмент РНК, который специфичен для вируса гепатита С. Либо же концентрация РНК инфекции-возбудителя в данном образце была ниже границы чувствительности теста.

В острой фазе РНК вируса гепатита С такие качественные исследования по методике ПЦР могут выявить уже спустя 1–2 недели непосредственно после инфицирования организма, то есть задолго до появления антител к самому гепатиту.

Недостоверные результаты анализов такого исследования могут быть получены при:

  • загрязненном биоматериале;
  • присутствии в крови пациента гепарина;
  • наличии в образце химических или белковых субстанций (ингибиторов), которые влияют на различные компоненты ПЦР.

Для проведения качественного анализа ПЦР специальной подготовки пациента к исследованию не требуется. В качестве материала используется венозная кровь.

Качественные тесты ПЦР имеют определенную степень чувствительности, и в зависимости от точности проведения исследований и уровня аппаратуры в лаборатории могут варьироваться в пределах от 10 до 500 МЕ/мл.

Это обозначает, что если вирус в пробе крови присутствует в очень малой концентрации (меньше порогового значения чувствительности данной лаборатории), то у больного пациента может быть определен результат как «не обнаружено». Из-за этого при проведении качественного анализа ПЦР с низким уровнем виремии (малой концентрацией вируса), к примеру, для больных, проходящих лечение противовирусной терапией, очень важно знать и порог чувствительности данной диагностической системы.

Для контролирования вирусологического ответа, при проведении противовирусного лечения рекомендуется использовать диагностические системы с порогом чувствительности не меньше 50 МЕ/мл. Этим критериям соответствуют, к примеру: анализаторы Cobas Ampicolor ВГС-Теst (c точностью 50 МЕ/мл), а также РеалБест РНК ВГС (с чувствительностью 15 МЕ/мл).

Согласно рекомендациям ВОЗ, для установления окончательного диагноза гепатит С, необходимо основываться лишь на основании трехкратного обнаружения РНК вируса С в пробах сыворотки крови у больного, при отсутствии других разновидностей маркеров гепатита.

Кроме методов ПЦР для выявления у пациентов РНК ВГС также применяют исследование ТМА (метод транскрипционной амплификации). Он обладает лучшим порогом чувствительности (5–10 МЕ/мл), но в нашей стране такой метод тестирования пока не очень распространен.

Такое качественное определении в сыворотке крови наличия РНК вируса гепатита С позволяет определять несколько генотипов этого вируса. В настоящее время науке известно более шести генотипов этого вируса, а также около 10 субтипов данного заболевания.

В нашей стране распространены вирусы 1, 2, 3 генотипов. Лаборатории могут выявлять следующие генотипы: 1а и 1в, 2а, 2в и 2с, а также 3, 4, 5а и 6 независимо от субтипов. Для всех модификаций вирусов специфичность определения составляет 100%.

При помощи количественного теста ПЦР определяется уровень концентрации вируса гепатита в пробах крови (вирусная нагрузка). Данный тест на виремию (концентрацию вируса) позволяет определить количество единиц определенного генетического материала (самой вирусной РНК), которую выявляют в определенном объеме. В данном случае определяют его концентрацию в 1 мл, что соответствует 1 куб. см.

Количественные параметры анализа выражаются в цифрах, для этого используют как единицы измерения международные единицы (МЕ) на миллилитр (мл), обозначающийся как МЕ/мл. Сейчас в некоторых лабораториях количество вируса может определяться и в других единицах измерения: количестве копий на мл, обозначается как копии/мл.

  • Сроки проведения.Для гепатита С такой количественный анализ ПЦР делают непосредственно перед началом проведения терапии. Затем на 1-й, 4-й, 12-й и 24-й неделях. Оценивание на 12-й неделе является показательным, оно позволяет определить эффективность проведения терапии.
  • Подготовка к анализу. Для проведения количественного анализа ПЦР специальной подготовки пациента к исследованию не требуется. За полчаса до взятия проб не следует курить. В качестве лабораторного материала используется венозная кровь.

Для разных лабораторных тест-систем существуют разные коэффициенты перевода этого показателя в МЕ/мл. В среднем берут параметр пересчета, при котором 4 копии/мл=1 МЕ/мл. То есть к примеру, если лаборатория выдает результат анализа ПЦР 2,4*106 копий/мл, то этот параметр нужно разделить на 4 и получим 6*105 МЕ/мл.

Высокой считается уровень нагрузки в 800000 МЕ/мл, это примерно соответствует показателю в 3000000 копий/мл. Низкая виремия, согласно данным некоторых авторов, соответствует параметрам количественного ПЦР ниже 400000 МЕ/мл.

Читайте также:  Могут быть ложные анализы гепатит с

В результате проведения количественного теста могут быть поставлены окончательные результаты не в виде цифрового значения, а: «ниже диапазона измерений», или же «не обнаружено».

  • Оценка: «ниже диапазона измерений». Это свидетельствует о том, что количественный тест не смог выявить вирусные РНК гепатита С, однако сам вирус в организме присутствует в очень малых концентрациях. Об этом говорит дополнительно проведенный качественный тест, подтверждающий сам факт присутствия вируса.
  • Оценка: «не обнаружено». Такой результат свидетельствует, что количественный тест не обнаружил в пробе РНК вируса.

Параметр вирусной нагрузки, прежде всего, определяет степень инфекционности болезни, уровень «заразности» больного. Чем выше у пациента показатель концентрации вируса, тем больше вероятность риска передачи его другим людям. К примеру, при половых контактах с больным человеком, либо вертикальным путем. Такой количественный показатель также помогает определить эффективность проведения лечения больного.

Проведение количественного анализа ПЦК важно для противовирусной терапии, оценивания ее успешности и планирования сроков продолжительности курса. Так, при быстром ответе организма на лечение и низкой степени виремии, срок терапии может быть и сокращен.

При медленном снижении параметра количественного ПЦР противовирусную терапию следует продлить либо модифицировать. Если уровень вирусной нагрузки низкий, то это благоприятный фактор проведения терапии, если же повышенный, то применяемый метод лечение неэффективен и следует менять препараты или методы их использования.

Оставьте комментарий 7,180

Качественный анализ полимеразной цепной реакции — ПЦР на гепатит С определяет наличие или отсутствие ВГС в организме. В лабораторных условиях исследуется структура РНК, в составе которой и будет находиться вирус. В случае выявления вируса С необходимо пройти курс лечения, так как запущенное состояние печени в результате приведет к тяжелым последствиям. Качественный ПЦР проводится и после выздоровления для подтверждения отсутствия антител. Назначается и для профилактического осмотра. При низкой концентрации возбудителя в крови ПЦР (качественный) может ничего не обнаружить, ведь у диагностической системы есть свои пороги чувствительности. В случае начальной стадии болезни или легкой форме проводят ПЦР ультра диагностику на сверхчувствительном оборудовании.

Термином РНК вируса гепатита С (или вирус гепатита С РНК) называется само заболевание печени. Вирус С связывается со здоровой клеткой организма, проникая внутрь. Со временем разносится по всему организму, стоит только ему попасть в кровь. В итоге возбудитель проникает в печень, сращивается с ее клетками и усиленно работает. Печеночные клетки (гепатоциты) работают под его воздействием, претерпевая изменения, и от этого гибнут. Чем дольше вирус С находится в печени, тем большее количество клеток гибнет. Со временем развиваются опасные болезни, приводящие к злокачественному перерождению и летальному исходу.

Заражение печени этой разновидностью вируса может никак не проявляться внешне. Долгие годы или десятки лет зараженный человек чувствует себя абсолютно здоровым, и только случайное обследование чаще всего и выявляет патологию. При сдаче крови на гепатит исследуется часть цепочки РНК (рибонуклеиновой кислоты), входящей в состав человеческого гена (ДНК). Результаты лабораторного исследования не стоит использовать для самолечения, ведь это только показатель. Точную картину и дальнейшую диагностику лучше определит врач.

В подтверждение ВГС назначается анализ ПЦР (полимеразная цепная реакция). Исследования ПЦР помогают найти материал возбудителя в структуре РНК и назначить эффективную терапию. Назначается в следующих случаях:

  • выявление признаков воспаления печени;
  • скрининговые исследования с целью профилактики;
  • обследование контактирующих людей;
  • диагностирование гепатитов смешанного происхождения (определение главного возбудителя);
  • определение уровня активности размножения вируса при хронической форме;
  • цирроз печени;
  • для определения эффективности назначенного лечения.

Исследования ПЦР назначает врач для определения эффективности курса лечения гепатита.

Существует качественный, а также количественный анализ ПЦР. Количественный ПЦР показывает процентное соотношение РНК с носителями вируса в крови, а качественный указывает на вирусное присутствие либо отсутствие. Положительный показатель качества (присутствия РНК гепатита С) нуждается и в количественном исследовании. Высокий уровень концентрации возбудителя гепатита С сопряжена с риском его передачи, то есть заражения окружающих. Низкие показатели количества лучше поддаются лечению. Количество РНК-вирусов в составе крови никак не связано с интенсивностью заболевания. Делается анализ ПЦР и в случае интерфероновой терапии, чтобы назначить продолжительность и сложность лечебного курса.

Назначается качественный анализ с показателем полимеразной цепной реакции всем пациентам, у кого в крови обнаружены антитела к гепатиту С. Кто переболел и выздоровел, должен повторно пройти тестирование. Рекомендуется сдать анализ и на гепатит В, затем, в случае положительного заключения, и на гепатит D. Также качественно анализированная реакация должна проводиться в комплексе с другими анализами крови. Анализы покажут полную картину вирусного распространения.

Из результатов теста будет виден только положительный анализ на гепатит С или же отрицательный, то есть наличие или отсутствия вируса. Если в выводе стоит «обнаружено», значит, вирус есть и продолжает активно действовать. Обозначение «не обнаружено» говорит об отсутствии вируса или его маленьком количестве. При таком показателе следует учитывать то, что аналитическая чувствительность диагностических систем разная и РНК гепатит С все же может находиться в крови, но не проявиться в анализе.

Особо чувствительный метод ПЦР ультра гепатит С выявляет даже в мизерных количествах. Используется гибридизационно-флуоресцентное исследование, которое во много раз выше, чем стандартные системы ПЦР. Метод применяют в нескольких случаях:

  • подозреваются скрытые формы гепатита С;
  • диагностика ПЦР не подтвердила возбудитель, но антитела есть;
  • в случае выздоровления;
  • для выявления ранней стадии заражения.

На окончательное решение при постановке диагноза влияет ПЦР расшифровка ВГС, в частности, при ультраметоде. Основной недостаток такого исследования — строгое соблюдение стерильных условий для образца и материалов. Небольшое отклонение иногда показывает неточные выводы аналитики, усложнит постановку диагноза и последующее лечение. Анализ ПЦР на определение РНК вируса гепатита не всегда уверенно показывает картину заболевания, иногда допускаются неточности, причем в обе стороны.

Диагностируя вирус гепатита, рекомендуется применять комплексное обследование.

Отсутствие в результатах исследования антител JgM к РНК вирусному гепатиту С считается нормой при анализе полимеразной цепной реакции. В то же время выводы серологического анализа указывают на присутствие антител к вирусу С и это также в пределах нормы. Качественное определение не показывает интенсивность заболевания, оно только выявляет возбудитель гепатита С в РНК. Такой анализ повторяют и после лечения, чтобы подтвердить действительное выздоровление.

Если антитела JgM к РНК ВГС присутствуют, это говорит о развивающемся заражении. Заболевание при этом протекает остро или хронически, проявляется в разных стадиях. Если зафиксировано уменьшение количества антител, то анализ будет свидетельствовать о достижении результатов лечения в ходе выздоровления. Встречаются в диагностике исключительно редкие случаи ложноположительных выводов. Они обнаруживаются у женщин при беременности и у людей с другими инфекционными болезнями.

Полимеразной цепной реакцией (ПЦР) в молекулярной биологии называют экспериментальный метод выявления вирусов. Он позволяет значительно увеличивать концентрации определенных фрагментов нуклеиновой кислоты (ДНК) в пробах биологического материала, что дает возможность их детерминировать (распознавать) и подсчитывать.

Проведение анализа выполняют следующим образом. Генетический материал (пробу крови), который потенциально может включать искомый ген, вносится в пробирку. Туда же помещают праймеры –синтезированные химическим путем отрезки небольшой длины искомого гена.

В сосуд также добавляют ДНК или РНК полимеразу, она способна выстроить цепочку нуклеиновой кислоты, которая полностью идентична первоначальной. В полученный состав вводят и набор из четырех свободных нуклеотидов – особого строительного материала для РНК или ДНК, один их которых содержит радиоактивные частицы фосфора.

Полученную смесь подогревают до 95–96°С, из-за чего две спирали ДНК, которые в обычном состоянии переплетены между собой, расплетаются. Затем препарат охлаждают, в это время праймеры сами прикрепляются к искомому участку генома вируса, не давая РНК (либо ДНК) вновь сформировать двойную спираль.

В процессе охлаждения полимераза отыскивает свободную цепочку нуклеотидов. Для функционирования данного фермента необходима именно одиночная цепь нуклеотидов. Поскольку полимераза проскальзывает по цепи ДНК (как кольцо по веревке), на двойной спирали она не способна работать.

После этого выполняют повторный цикл нагревания, из-за чего между собой разделяются цепочки нуклеотидов. При каждом из таких циклов ПЦР количество в пробе именно искомого гена гепатита возрастает в геометрической прогрессии, а остальной генетический материал продуцируется (вырастает) линейно.

После очистки раствора от остатков нуклеотидов и разделения при помощи электрофореза цепочек ДНК по параметру молекулярной массы, можно легко определить: есть ли искомый ген в исследуемом образце или нет.

Лабораторное исследование методом ПЦР позволяет получить даже больше информации, чем просто присутствие РНК вируса. Определяя параметр уровня радиоактивного излучения, есть возможность выявить, какое количество генетического материала содержалось изначально в исследуемом образце. В случае гепатита – определить показатель уровня вирусной нагрузки.

Еще одним достоинством этого метода является очень высокая степень чувствительности реакции ЦР. Она гораздо выше, чем у классических методов выявления вирусов. В идеальном варианте, для того чтобы выявить искомый ген, для ПЦР достаточно всего одного вируса в пробе.

Кроме этого, ПЦР полностью специфична. Ее праймеры создаются таким образом, чтобы они полностью соответствовали уникальным участкам искомых генов, которых нет ни у какой другой последовательности. Как уникальны отпечатки пальцев, так и в каждом гене есть уникальные последовательности из нуклеотидов.

Качественный анализ позволяет выявить только факт наличия вируса в крови. Этот тест нужно проводить для всех пациентов, у которых были обнаружены в крови антитела к гепатиту С. Его результатом может быть лишь одно значение из двух: «обнаружено» либо «не обнаружено». У здорового человека в норме (референсное значение) должно быть «не обнаружено».

Есть и специальная интерпретация таких результатов проведенного качественного исследования:

  • Результат «обнаружено». Это означает, что в анализируемом образце взятого биологического материала был найден фрагмент РНК, который специфичен для вируса гепатита С. Следовательно, есть факт инфицирования пациента вирусом гепатита С. Если результатом качественного ПЦР является «обнаружено», то это свидетельствует о том, что вирус размножается и в это время инфицирует в организме новые клетки печени.
  • Результат «не обнаружено». Такой вердикт говорит о том, что в анализируемом образце полученного биологического материала в данной лаборатории не обнаружен фрагмент РНК, который специфичен для вируса гепатита С. Либо же концентрация РНК инфекции-возбудителя в данном образце была ниже границы чувствительности теста.

В острой фазе РНК вируса гепатита С такие качественные исследования по методике ПЦР могут выявить уже спустя 1–2 недели непосредственно после инфицирования организма, то есть задолго до появления антител к самому гепатиту.

Недостоверные результаты анализов такого исследования могут быть получены при:

  • загрязненном биоматериале;
  • присутствии в крови пациента гепарина;
  • наличии в образце химических или белковых субстанций (ингибиторов), которые влияют на различные компоненты ПЦР.

Для проведения качественного анализа ПЦР специальной подготовки пациента к исследованию не требуется. В качестве материала используется венозная кровь.

Качественные тесты ПЦР имеют определенную степень чувствительности, и в зависимости от точности проведения исследований и уровня аппаратуры в лаборатории могут варьироваться в пределах от 10 до 500 МЕ/мл.

Это обозначает, что если вирус в пробе крови присутствует в очень малой концентрации (меньше порогового значения чувствительности данной лаборатории), то у больного пациента может быть определен результат как «не обнаружено». Из-за этого при проведении качественного анализа ПЦР с низким уровнем виремии (малой концентрацией вируса), к примеру, для больных, проходящих лечение противовирусной терапией, очень важно знать и порог чувствительности данной диагностической системы.

Для контролирования вирусологического ответа, при проведении противовирусного лечения рекомендуется использовать диагностические системы с порогом чувствительности не меньше 50 МЕ/мл. Этим критериям соответствуют, к примеру: анализаторы Cobas Ampicolor ВГС-Теst (c точностью 50 МЕ/мл), а также РеалБест РНК ВГС (с чувствительностью 15 МЕ/мл).

Согласно рекомендациям ВОЗ, для установления окончательного диагноза гепатит С, необходимо основываться лишь на основании трехкратного обнаружения РНК вируса С в пробах сыворотки крови у больного, при отсутствии других разновидностей маркеров гепатита.

Кроме методов ПЦР для выявления у пациентов РНК ВГС также применяют исследование ТМА (метод транскрипционной амплификации). Он обладает лучшим порогом чувствительности (5–10 МЕ/мл), но в нашей стране такой метод тестирования пока не очень распространен.

Такое качественное определении в сыворотке крови наличия РНК вируса гепатита С позволяет определять несколько генотипов этого вируса. В настоящее время науке известно более шести генотипов этого вируса, а также около 10 субтипов данного заболевания.

В нашей стране распространены вирусы 1, 2, 3 генотипов. Лаборатории могут выявлять следующие генотипы: 1а и 1в, 2а, 2в и 2с, а также 3, 4, 5а и 6 независимо от субтипов. Для всех модификаций вирусов специфичность определения составляет 100%.

При помощи количественного теста ПЦР определяется уровень концентрации вируса гепатита в пробах крови (вирусная нагрузка). Данный тест на виремию (концентрацию вируса) позволяет определить количество единиц определенного генетического материала (самой вирусной РНК), которую выявляют в определенном объеме. В данном случае определяют его концентрацию в 1 мл, что соответствует 1 куб. см.

Количественные параметры анализа выражаются в цифрах, для этого используют как единицы измерения международные единицы (МЕ) на миллилитр (мл), обозначающийся как МЕ/мл. Сейчас в некоторых лабораториях количество вируса может определяться и в других единицах измерения: количестве копий на мл, обозначается как копии/мл.

  • Сроки проведения.Для гепатита С такой количественный анализ ПЦР делают непосредственно перед началом проведения терапии. Затем на 1-й, 4-й, 12-й и 24-й неделях. Оценивание на 12-й неделе является показательным, оно позволяет определить эффективность проведения терапии.
  • Подготовка к анализу. Для проведения количественного анализа ПЦР специальной подготовки пациента к исследованию не требуется. За полчаса до взятия проб не следует курить. В качестве лабораторного материала используется венозная кровь.

Для разных лабораторных тест-систем существуют разные коэффициенты перевода этого показателя в МЕ/мл. В среднем берут параметр пересчета, при котором 4 копии/мл=1 МЕ/мл. То есть к примеру, если лаборатория выдает результат анализа ПЦР 2,4*10 6 копий/мл, то этот параметр нужно разделить на 4 и получим 6*10 5 МЕ/мл.

Высокой считается уровень нагрузки в 800000 МЕ/мл, это примерно соответствует показателю в 3000000 копий/мл. Низкая виремия, согласно данным некоторых авторов, соответствует параметрам количественного ПЦР ниже 400000 МЕ/мл.

В результате проведения количественного теста могут быть поставлены окончательные результаты не в виде цифрового значения, а: «ниже диапазона измерений», или же «не обнаружено».

  • Оценка: «ниже диапазона измерений». Это свидетельствует о том, что количественный тест не смог выявить вирусные РНК гепатита С, однако сам вирус в организме присутствует в очень малых концентрациях. Об этом говорит дополнительно проведенный качественный тест, подтверждающий сам факт присутствия вируса.
  • Оценка: «не обнаружено». Такой результат свидетельствует, что количественный тест не обнаружил в пробе РНК вируса.

Параметр вирусной нагрузки, прежде всего, определяет степень инфекционности болезни, уровень «заразности» больного. Чем выше у пациента показатель концентрации вируса, тем больше вероятность риска передачи его другим людям. К примеру, при половых контактах с больным человеком, либо вертикальным путем. Такой количественный показатель также помогает определить эффективность проведения лечения больного.

Проведение количественного анализа ПЦК важно для противовирусной терапии, оценивания ее успешности и планирования сроков продолжительности курса. Так, при быстром ответе организма на лечение и низкой степени виремии, срок терапии может быть и сокращен.

При медленном снижении параметра количественного ПЦР противовирусную терапию следует продлить либо модифицировать. Если уровень вирусной нагрузки низкий, то это благоприятный фактор проведения терапии, если же повышенный, то применяемый метод лечение неэффективен и следует менять препараты или методы их использования.

источник