Сдать анализ пцр качественный гепатит с

• ЧТО БЕСПОКОИТ
  • Идут выделения
  • Зуд и жжение
  • Боли внизу живота
  • Интимные боли
  • Задержка месячных
  • Боль при мочеиспускании
  • Запах из влагалища
  • Боли при месячных
  • Как не забеременеть
• ПОСЕТИТЬ ВРАЧА
  • Пройти гинеколога
  • Проверить инфекции
  • Профосмотр гинеколога
  • Получить справку
  • Выбрать контрацепцию
  • Гинеколог в праздники
• ОБСЛЕДОВАНИЕ
  • ОБСЛЕДОВАНИЕ У ГИНЕКОЛОГА:
    • Осмотр
    • Кольпоскопия
    • Анализы
    • Биопсия шейки матки
    • Пайпель эндометрия
    • УЗИ малого таза
    • УЗИ проходимости труб
    • Определение беременности
• СДАЧА АНАЛИЗОВ
  • СДАТЬ АНАЛИЗЫ:
    • Мазок на флору
    • ПЦР мазок
    • Бакпосев
    • Флороценоз
    • Онкоцитология
    • Анализ на ВПЧ
    • Гарднерелла
    • Общий и клинический
    • Биохимия крови
    • Анализы на витамины
    • Кровь на ПЦР
    • Кровь на ХГЧ
    • Анализы на ВИЧ
    • Кровь на гепатит
    • Витамин Д
    • Анализы на гормоны
    • Генетический анализ
    • Онкомаркеры
    • Кишечные инфекции
    • Квантифероновый тест
    • Гемостаз
    • Иммунный статус
    • Интерфероновый статус
    • Аллергия
    • Анонимные анализы ✔
    • Экспресс анализы (быстрые тесты) ✔
    • Анализы на ИППП ✔
• ЛЕЧЕНИЕ
  • ЛЕЧЕНИЕ У ГИНЕКОЛОГА:
    • Воспаление придатков
    • Женское бесплодие
    • Выделения из влагалища
    • Кольпит и вагинит
    • Лечение цистита
    • Эрозия шейки матки
    • Удаление кист на шейке
    • Прижигание кондилом
    • Лечение спаек
    • Загиб матки
    • Застой крови в тазу
    • Лечение после аборта, операций по гинекологии
  • Медикаментозный аборт
• ЛЕЧЕБНЫЕ ПРОЦЕДУРЫ
  • МЕТОДЫ ЛЕЧЕНИЯ В НАШЕЙ ГИНЕКОЛОГИИ:
    • Физиотерапия
    • Гинекологический массаж
    • Массаж при цистите
    • Грязелечение
    • Лечение пиявками
    • Плацентарная терапия
    • Аутоплазменная терапия
    • Санация влагалища
• ВАКЦИНАЦИЯ
  • Гардасил
  • Гиперроу СД
  • Камроу
  • Иммуноро Кедрион
  • Солкотриховак
  • Гинатрен
• ЭСТЕТИЧЕСКАЯ ГИНЕКОЛОГИЯ
  • ИНТИМНАЯ ЭСТЕТИКА:
    • Интимная пластика
    • Уколы в интимную зону
    • Эпиляция бикини
  • Пластика половых губ
  • Гименопластика
  • Операции на клиторе
  • Хирургическая дефлорация
  • Сужение влагалища
  • Увеличение точки G
  • Гель в половые губы
• ЗАПИСЬ НА ПРИЕМ
  • Запись к гинекологу
• ПУБЛИКАЦИИ
  • ВПЧ у женщин
  • Мазок у девственниц
  • Фото УЗИ молочных желез
  • Народное лечение придатков
  • Как лечить цистит народными средствами
  • Хронический аднексит
  • Народная медицина при бесплодии
  • Что полезно яичникам
  • Здоровая матка

Копирование и воспроизведение материалов данного сайта запрещено.
Сайт клиники гинекологии обновлен 01.06.2019

источник

Анализ ПЦР гепатит С – это исследование, основной целью которого является идентификация генетического материала возбудителя. Анализ выявляет возбудитель заболевания методом использования полимеразной цепной реакции. Данная диагностика отличается высокой степенью точности, специфичностью к выявлению отсутствия или наличия вирусной инфекции.

Достоинства анализа ПЦР на гепатит

Как подготовиться к сдаче крови для ПЦР-исследования

Результаты анализа: нормы и отклонения

Расшифровка количественного анализа

Расшифровка качественного анализа

Ложноположительные и ложноотрицальные результаты

Где сделать ПЦР-диагностику и сколько стоит?

Чтобы провести ПЦР анализ на определение вируса гепатита С у пациента берётся венозная кровь, которая потенциально содержит в себе РНК (рибонуклеиновая кислота) HCV искомого вируса.

Тест ПЦР на гепатит С подразумевает порядок действий, когда в частицы крови пациента добавляют:

• праймеры (короткие искусственно-синтезируемые участки необходимо гена);
• специальный фермент (РНК-полимераза).

После забора биологический материал отправляется на исследования в лабораторию. Одна порция крови нужна для проведения непосредственно ПЦР анализа, вторая – отправляется на исследование по методу ИФА. Фермент способен за короткое время увеличить численность генетического материала вируса возбудителя. В специальном аппарате проводится несколько циклов тепловых и охлаждающих процессов. На конечном этапе полученный материал сопоставляется с генами вируса и делается заключение о наличии или отсутствии патологии в организме пациента.

Суть и проведение ПЦР анализа в лаборатории. Снято каналом SiberianMedicalLaboratory.

Существует 3 вида диагностики, дающие возможность определять наличия вируса гепатита С в организме человека:

• генотипирование;
• качественный;
• количественный.

Диагностика гепатита С качественным методом применима для пациентов, у которых в анализе крови определены антитела к вирусу. В случае наличия острой фазы РНК ВГС подобные диагностические мероприятия позволяют определить наличие заболевания за 1-2 недели после инфицирования. В этот период антитела к гепатиту С могут быть ещё не выработаны.

Количественный метод диагностики используется для определения концентрации вируса в образцах крови. Подобный тест на виремию (степень концентрации) даёт возможность точно определить количество единиц вирусной РНК. Конечный результат выражается в соответственном объёме. Если речь идёт о количественном анализе, тогда показатели измеряются в 1 мл (1 куб. см).

Параметр вирусной нагрузки означает уровень инфекционности заболевания, то есть отображает степень «заразности» пациента. На практике это значит, что чем выше концентрация вируса в крови, тем больше шансов у пациента заразить окружающих гепатитом С. Количественный метод исследования также позволяет установить качество и результативность проведённого лечения.

Генотипированием выявляют мутации возбудителя заболевания. Перед назначением лечебного плана определяют генотип вируса: от этого зависит качество и продолжительность терапии. Так, например, при лечении заболевания I-типа эффективность составляет 60%, в случае II, III-типа – около 80%.

Среди основных достоинств проведения процедуры выделяют:

1. Возможность ранней диагностики. ПЦР анализ способен определить наличие вируса на ранних стадиях заражения.
2. Низкая погрешность результатов. Исследуемый биологический ресурс позволяет диагностировать участок генетического материала, который является характерным только для одного типа вирусной инфекции. Это обстоятельство позволяет не допустить ложных результатов диагностики.
3. Высокая степень чувствительности. Анализ ПЦР способен выявлять РНК вируса в небольших количествах, что также дает возможность вовремя отследить скрытые инфекции.

Сдавать анализ ПЦР на гепатит C нужно, если есть:

• наличие контактов с больными людьми, которое могло бы привести к заражению;
• симптомы заболевания цирроза печени (увеличение селезенки, нехарактерные изменения размеров печени, обнаружение на животе венозного сплетения под кожей);
• положительные результаты ИФА;
• увеличение активности АСТ и АЛТ (проявляется в биохимическом анализе крови);
• необходимость контроля ведения антивирусной терапии;
• проведение начального этапа лечения для необходимости установления вирусной нагрузки;
• проведение завершающего этапа терапии для исключения возможных рецидивов;
• наличие у пациента гепатита В, чтобы исключить вариант развития смешанного поражения печени.

Подготовка к ПЦР анализу включает следующие рекомендации:

• забор крови проводится утром;
• анализ проводится натощак, поэтому желательно выдержать перерыв между последним приёмом пищи 8-10 часов;
• за несколько дней до проведения диагностики следует исключить жирную, острую и жареную пищу, алкогольные напитки и курение;
• за сутки до анализа следует воздержаться от тяжёлых физических нагрузок, исключить занятия в спортзале или бассейне.

Сам анализ делается недолго, а расшифровывает результаты ПЦР на гепатит С высококвалифицированный специалист гепатолог или инфекционист. На основании результатов анализа пациенту выставляется диагноз.

Чтобы правильно расшифровать результаты обследования, учитывают показатели:

• биохимического анализа крови;
• данные ультразвукового исследования;
• результаты биопсии.

При получении результатов количественного анализа ПЦР учитываются следующие показатели:

В заключении качественного анализа ПЦР на гепатит С могут присутствовать следующие данные:

При получении анализов на генотипирование вируса можно обнаружить следующие варианты показателей:

Ложно положительные и ложноотрицательные результаты ПЦР исследования получаются в таких случаях:

• при недостаточной квалификации медицинского персонала, которые проводят диагностику;
• ошибки в работе лаборантов, когда кровь транспортируется в лабораторию ненадлежащим способом или биоматериал загрязнён;
• случаи ненамеренной подмены проб крови;
• нарушения в процессе подготовки биологического материала;
• воздействие на исследуемые образцы повышенной температурой.

Среди других причин получения неточных результатов выделяют такие:

• кровь пациента содержит остаточные частицы гепарина и прочих коагулянтов;
• в образце присутствуют вещества-ингибиторы, способствующие замедлению или остановке полимеразной цепной реакции.

Подобные исследования проводятся:

• в частных медицинских центрах;
• в КДВ;
• в государственных поликлиниках.

Государственные поликлинники проводят анализ ПЦР на гепатит С бесплатно на основаниях наличия у пациента направления от гепатолога или инфекциониста.

Диагностика заболевания на платной основе проводится во всех крупных городах России.

Стоимость диагностики зависит от:

• качества оборудования клиники;
• скорость выполнения работы;
• типа теста.

Цена на изучение крови методом ПЦР колеблется в следующих пределах:

• качественный ПЦР анализ — 600-900 рублей (в Москве и Санкт-Петербурге);
• качественный ПЦР анализ — 300-800 рублей (регионы);
• определение вирусной нагрузки — 17000-22000;
• определение других видов инфекции количественного анализа 1200-10000 рублей.

Ошибочные анализы на гепатит С. Снято каналом Гепатит С побежден.

источник

Гепатит С — патология воспалительного характера, при которой поражаются клетки печени. Болезнь развивается вследствие проникновения вируса гепатита С (HVC) в организм человека.

Форма заболевания может быть острой или хронической.

Чаще всего признаки острой формы патологии у большинства пациентов отсутствуют, иногда болезнь сопровождается болезненными ощущениями в области живота, снижением работоспособности, повышенной утомляемостью, нарушением аппетита, темным оттенком мочи, обесцвечиванием каловых масс, желтушностью кожных покровов и слизистых, суставными болями. Возникают такие симптомы как правило через 6-8 недель после заражения, но могут проявиться и через полгода.

При развитии подобных явлений необходимо обратиться в медицинское учреждение и пройти комплексное обследование всего организма. В рамках медицинского обследования проводят анализ крови на гепатит С.

Сегодня при помощи современных диагностических методик можно выявить данную патологию на начальной стадии развития, что значительно увеличивает шансы на полное излечение от болезни.

Анализ на гепатит С в обязательном порядке сдают следующие группы людей:

• женщины в период вынашивания ребенка;
• лица, имеющие признаки гепатита;
• сотрудники медицинских учреждений;
• потенциальные доноры органов и крови;
• наркозависимые, вич-инфицированные, лица, ведущие беспорядочную интимную жизнь.

Какие анализы нужно сдать при гепатите С? Для точной диагностики болезни, выявления ее причин и определения состояния паренхимы печени требуется выполнение таких исследований:

• общего анализа мочи и крови;
• биохимического анализа крови;
• анализа методом ПЦР;
• анализа крови на выявление антител к HVC;
• анализа крови на имеющиеся антитела к собственным печеночным клеткам;
• биопсии печени.

Расшифровка анализа крови на гепатит С выполняется специалистом. Рассмотрим каждый способ исследования подробнее, а также разберемся какой анализ на гепатит С самый точный.

При выполнении общего анализа крови при гепатите С можно оценить состояние пациента. Изменения показателей крови не воспринимаются, как специфические симптомы гепатита, однако при данном заболевании происходят такие нарушения, как:

• снижается концентрация гемоглобина, тромбоцитов и лейкоцитов;
• повышается содержание лимфоцитов;
• нарушается свертываемость крови;
• увеличивается скорость оседания эритроцитов (СОЭ).

Общий анализ мочи дает возможность обнаружить в ее составе уробелин — желчный пигмент, возникающий в моче в результате нарушения функционирования печени.

Биохимический анализ крови при гепатите С позволяет выявить такие нарушения, как:

• повышено содержание ферментов печени (аланинтрансаминазы — АЛТ и аспартатаминотрансферазы — АСТ), которые поступают в кровь при повреждении гепатоцитов. В нормальном состоянии данные показатели у мужчин не должны быть более 37 МЕ/л, у женщин — не выше 31 МЕ//л. Повышенная концентрация АЛТ и АСТ при гепатите С, протекающем бессимптомно, часто является единственным симптомом данного заболевания. Кроме этого, в составе крови увеличивается уровень глутамилтранспептидазы щелочной фосфатазы (в норме не выше 150 МЕ/л).
• содержание билирубина (как общего, так и прямого) в крови превышено. Если уровень желтого пигмента в сыворотке крови превышает 27-34 мкмоль/л, возникает желтуха (до 80 мкмоль/л в легкой форме, 86-169 мкмоль/л — в среднетяжелой, выше 170 мкмоль/л — в тяжелой форме).
• Понижен уровень альбуминов, концентрация гамма-глобулинов, наоборот, повышена. Гамма-глобулины состоят из иммуноглобулинов — антител, которые защищают организм от болезнетворных веществ.
• увеличена концентрация триглицеридов в составе крови.

При помощи методики ПЦР можно диагностировать возбудителя болезни. Выполнение этого анализа дает возможность обнаружить в составе крови вирус, даже если количество его минимально. Анализ ПЦР на гепатит С позволяет определить в крови имеющуюся инфекцию уже по прошествии 5 дней с момента заражения, то есть задолго до того, как появятся антитела.

Если результат анализа крови на гепатит С методом ПЦР положительный, это говорит о присутствии активной инфекции в организме. При помощи данного метода можно провести качественное и количественное исследование РНК HVC.

В ходе качественного анализа ПЦР на гепатит С возможно обнаружить в организме человека имеющийся вирус.

Такую диагностическую процедуру выполняют в том случае, если в крови выявлены анти-HVC.

Расшифровка анализа на гепатит С содержит информацию о том, что в организме инфекция или выявлена, или не выявлена. В нормальном состоянии патологические вещества в составе крови не обнаруживаются.

Если анализ на гепатит С дает положительный результат, это говорит о том, что патогенный микроорганизм непрерывно делится и поражает печеночные клетки.

Результаты такого анализа могут оказаться недостоверными, это возможно в следующих случаях:

• при загрязнении используемого биоматериала;
• при наличии в крови гепарина;
• при наличии химических или белковых субстанций (ингибиторов) в исследуемом биоматериале, влияющих на элементы ПЦР.

Количественный анализ на гепатит С дает информацию о количестве вируса, содержащегося в крови, то есть определяет вирусную нагрузку. Под данным понятием подразумевается объем РНК HVC, присутствующий в крови (например, в 1 мл). В расшифровке количественного анализа на гепатит С это значение выражено в цифровом эквиваленте, измеряется в МЕ/мл.

Кровь на ПЦР при гепатите С сдают перед проведением терапевтических мероприятий. После анализ выполняют на 1, 4, 12 и 24 неделях. Исследование на 12 неделе является показательным и выполняется с целью оценки эффективности проводимых лечебных процедур.

Если анализ на гепатит С при беременности положительный и при этом значения вирусной нагрузки превышены, то риск передачи болезнетворных микроорганизмов от больной матери к ребенку увеличивается в несколько раз. Также при повышенных значениях вирусной нагрузки осуществление лечебных мероприятий затруднительно.

Согласно расшифровке анализов на гепатит С, если значения вирусной нагрузки превышают 800 000 МЕ/мл, то она является высокой. Если показатели ниже 400 000 МЕ/мл, уровень вирусной нагрузки считается низким.

Анализ на гепатит С методом ПЦР считается самым точным и обладает рядом преимуществ перед другими вариантами исследований, а именно:

• прямая диагностика возбудителя болезни. При выполнении традиционных исследований определяются наличие белковых маркеров, являющихся продуктами жизнедеятельности болезнетворных веществ. Это говорит только о том, что инфекция присутствует в крови. При сдаче анализа на гепатит С методом ПЦР возможно определить вид возбудителя опасной патологии.
• специфичность методики. В ходе такой процедуры в биоматериале определяется уникальный участок ДНК, соответствующий лишь одному типу возбудителя. Это позволяет минимизировать вероятность получения недостоверных результатов.
• высокая чувствительность. При выполнении ПЦР-анализа можно обнаружить минимальное количество вируса. Это важно, если выявляются условно-патогенные вещества, представляющие угрозу только в случае повышения их уровня.
• при использовании такой методики в одном образце биоматериала можно выявить сразу несколько возбудителей.
• можно обнаружить скрыто протекающие инфекции. Помимо этого, анализ позволяет диагностировать болезнетворные микроорганизмы, обитающие внутри клеток и имеющие высокую антигенную изменчивость.

Если результаты исследования положительные, значит в биоматериале обнаружены следы вируса, то сеть в организме имеется инфекция.

Отрицательный анализ ПЦР на гепатит С означает, что следы инфекции в биоматериале отсутствуют.

Данный способ позволяет определить антитела ко всем видам вируса гепатита, а также антитела к печеночным клеткам собственного организма, возникновению которых способствует развитие аутоиммунного гепатита.

Результаты, полученные в ходе исследования, актуальны на протяжении 3 месяцев, затем следует повторно сдавать кровь на гепатит С.

Возможно также выполнение экспресс-исследования с применением специальных тестовых полосок. Данный анализ дает возможность определить в составе крови и слюны антитела к вирусу С. Такую процедуру можно осуществить самостоятельно, на дому.

Для выполнения такого анализа берут элемент паренхимы печени и выполняют гистологическое исследование полученного биоматериала. Это позволяет оценить состояние органа: выявить воспалительные, некротические очаги, стадию фиброза и прочее.

Сегодня используются тесты, которые заменяют гистологический анализ печеночной паренхимы.

Для оценки стадии поражения печени и интенсивности процесса воспаления применяют специфические биомаркеры венозной крови. С помощью Фибротеста можно оценить степень разрастания фиброзной ткани.

При выполнении Актитеста можно получить информацию об интенсивности патологических процессов в паренхиме печени. С помощью Стеатотеста можно диагностировать жировое перерождение ткани печени и оценить степень этого процесса. Фибромакс состоит из всех вышеуказанных тестов и может включать в себя некоторые другие исследования.

Какие анализы сдают при гепатите С и как выполняется тот или иной вид исследования мы выяснили. Не менее важно знать, как нужно подготовиться к проведению анализа.

Для получения достоверных результатов рекомендуется придерживаться следующих требований:

• анализы при гепатите С необходимо сдавать в утренние часы, на голодный желудок. Последний раз пищу следует употреблять минимум за 8 часов до выполнения исследования.
• Забор биоматериала можно осуществлять и в дневное или вечернее время. В таком случае важно, чтобы между последним приемом пищи и выполнением анализа прошло не меньше 5-6 часов.
• перед сдачей крови на гепатит С следует отказаться от чая, кофе, сока или других напитков, разрешена только вода.
• за 48 часов до проведения исследования необходимо исключить употребление жирных, жареных продуктов и спиртсодержащих напитков.
• на протяжении минимум часа до выполнения анализа нужно воздержаться от табакокурения.
• не следует выполнять анализ сразу после проведения ультразвукового, инструментального, рентгенологического обследования, сеанса массажа или физиотерапии.
• за сутки до осуществления исследования требуется исключить прием медикаментозных средств и интенсивную физическую активность. Эмоциональные нагрузки также противопоказаны.
• 15 минут перед выполнением исследования рекомендуется провести в спокойном состоянии.

Где сдать анализ на гепатит С? Забор биоматериала для дальнейшего исследования проводится в лаборатории медицинского учреждения или же на дому у пациента.

Кровь из вены берут следующим образом:

• при помощи специального жгута, обернутого вокруг предплечья больного, приостанавливается венозный кровоток. Благодаря таким манипуляциям вены наполнятся кровью и будут более заметными, что значительно облегчит процесс введения иглы.
• участок кожи, куда будет вводиться игла, тщательно обрабатывается спиртом или спиртсодержащей жидкостью.
• в вену осторожно вводится игла, затем к ней прикрепляется пробирка, специально предназначенная для сбора крови.
• сразу после того, как игла введена в вену сдавливающий жгут снимается с руки пациента.
• после того, как собран необходимый для выполнения анализа объем крови, игла плавно вынимается из вены.
• к месту укола обязательно прикладывается стерильный ватный или марлевый тампон, смоченный в спирте.
• для предупреждения возникновения гематомы тампон следует с некоторым усилием прижать к области введения иглы, согнуть руку в локтевом суставе и держать в таком положении несколько минут. Такие действия также помогут быстрее остановить кровь.

При условии хорошей техники внутреннего введения данная процедура абсолютно безопасна и прочти не вызывает болезненных ощущений.

В редких случаях после забора крови возможно опухание вен. Данное явление носит название «флебит». Устранить проблему поможет компресс (не горячий), прикладывать его следует к опухшим участкам кожи несколько раз в сутки.

Также могут возникать определенные проблемы, если имеется нарушение свертываемости крови. Прием аспирина, варфарина и иных средств, разжижающих кровь, может спровоцировать кровотечение. Именно поэтому перед выполнением анализа требуется отказаться от приема любых медикаментов. Если же лечение отменить нельзя, следует сообщить об этом специалисту.

Сколько делается анализ на гепатит С? Результаты исследования крови на гепатит могут быть готовы и через несколько часов, и через несколько дней (как правило, не более 8 дней). Длительность подготовки результатов зависит от вида вируса и выбранной методики анализа. Более быстрым является исследование, проводимое способом ПЦР. Результаты в этом случае будут готовы всего через несколько часов.

Сколько стоит анализ на гепатит С? В зависимости от клиники и сложности осуществления исследования цена процедуры может варьироваться от 400 до 11 000 рублей.

Следует знать, что для формирования достаточного объема антител к HVC может потребоваться несколько недель. Поэтому на раннем этапе развития патологии результат исследования может быть ложноотрицательным.

Кроме этого, получение недостоверных данных возможно при некачественном выполнении анализа и нарушении условий транспортировки полученного биоматериала (образцы должны быть доставлены в лабораторию максимум через 2 часа после забора крови).

Если результат исследования окажется положительным, необходимо незамедлительно обратиться к врачу-инфекционисту. Специалист проведет дополнительное обследование и назначит соответствующее лечение.

источник

Гепатит С переходит из острой фазы в хроническую в 80% случаев. Репликация болезнетворных вирусов в функциональных клетках печени ведет к дисфункции органа. Это обусловлено тем, что паренхиматозная ткань заменяется соединительной. В результате анамнез больного дополняется кровотечениями в ЖКТ, интоксикацией организма, проблемами со свертываемостью крови. Поэтому чем раньше будут диагностированы патологические изменения, тем больше у пациента шансов на выздоровление. Анализ ПЦР на гепатит С считается наиболее точным методом исследования.

Этот диагностический метод разрешено проводить спустя несколько дней после заражения. Полимеразная цепная реакция позволяет достоверно определить генотип и концентрацию вируса в крови. Чтобы сделать анализ, у пациента берут биологический материал, в котором может присутствовать РНК возбудителя.

ПЦР на гепатит С осуществляют в три этапа:

• Качественный анализ – с его помощью определяют генетический материал возбудителя.
• Количественное исследование – таким образом выявляют вирусную нагрузку.
• Генотипирование – на этой стадии врач узнает разновидность заболевания.

Методику разработали около 30 лет назад. Ее применяют для диагностики многих инфекционных заболеваний. ПЦР позволяет обнаружить уникальный генетический материал. Для этого используют праймеры. Так называют короткие нити РНК, которые присоединяют к началу гена.

В результате количество фрагментов болезнетворного вируса многократно увеличивается. Каждая фаза требует особого температурного режима и определенного промежутка времени. Молекула ДНК формируется в течение 3 минут. Амплификация включает в себя около 30 циклов. ПЦР делают в лаборатории посредством специального оборудования.

Сдача анализа ПЦР может быть обусловлена наличием клинических симптомов гепатита С. Процедура показана людям, которые:

• контактировали с инфицированным человеком;
• страдают от острых и хронических заболеваний печени;
• проходят лечение от патологических изменений в паренхиматозной ткани;
• входят в группу риска;
• являются донорами крови и ее компонентов.

ПЦР осуществляют не только при гепатите С. Анализ используют в медицине, биологии, криминалистике. Определение специфических показателей – этап, необходимый для подбора лекарственной схемы.

В схему диагностического обследования включают иммунофлуоресцентный анализ и ПЦР. С помощью первого можно определить концентрацию иммуноглобулинов. Эти вещества вырабатываются защитным механизмом после проникновения болезнетворных вирусов в организм. В отличие от ПЦР ИФА не обладает эффективностью во время инкубационного периода. С помощью полимеразной цепной реакции гепатит С можно выявить в первые 7 дней после инфицирования.

Данное клиническое исследование обладает следующими характеристиками:

• Минимальная вероятность ложного результата.
• Высокая эффективность.
• Специфичность.
• Чувствительность.
• Универсальность.
• Автоматизация процесса.
• Безопасность.
• Скорость получения показателей.

Единственным минусом ПЦР является ее техническая сложность. Это связано с тем, что врачу необходимо подобрать правильный состав нуклеотидов, в функциях которых синтез ДНК. Из-за повышенной чувствительности метода возможно получение ложноположительного или ложноотрицательного результатов.

Чтобы добиться точности значимых показателей, биологический материал тщательно очищают от медикаментозных препаратов и белковых соединений. Для подтверждения результата требуется сравнение ранее проверенных образцов. К факторам, провоцирующим ошибку, причисляют:

Нарушение техники забора анализа

• Нарушение техники забора анализа.
• Изменения в последовательности фрагментов РНК.
• Совпадение синтезируемых нуклеотидов и генов болезнетворных вирусов.

Вероятность получения ложного результата при гепатите С присутствует из-за невозможности определения генетической основы заболевания. ПЦР-диагностика позволяет напрямую выявить возбудителя. С помощью амплификации ДНК происходит обнаружение болезнетворных микроорганизмов в продуктах питания, воде и почве.

Ограничения, касающиеся данного метода, не уменьшают его эффективности и популярности. Клиническое исследование проводят регулярно. Таким образом врач может оценить эффективность принятых лечебных мер. Необходимость в этом возникает из-за того, что вирус гепатита С способен мутировать. Отсутствие положительного эффекта означает адаптацию вируса к применяемым лекарственным средствам.

Для того чтобы провести полимеразную цепную реакцию у больного, страдающего от гепатита С, берут венозную кровь. Обычно для изучения требуется две порции биологического материала. Посредством одной делается непосредственно ПЦР, а другую направляют на иммуноферментный анализ.

Кровь для анализа ПЦР берут из вены

Подготовка имеет большое значение. Пациент сдает кровь на ПЦР утром на голодный желудок. За несколько дней до процедуры придется отказаться от вредных продуктов питания, спиртных напитков, никотина и наркотиков. Больному следует избегать половых контактов, чрезмерной физической и эмоциональной нагрузки. Бассейн и спортзал оказываются под запретом. Подготавливаться придется в любом случае.

Существуют особые указания относительно медикаментозных препаратов. Это касается антибиотиков и антидепрессантов. Женщины, у которых начались менструации, должны отсрочить сдачу анализа на гепатит С. Кольпоскопия также является поводом для отказа от процедуры.

Перечисленные правила довольно просты. Благодаря им, можно добиться максимальной достоверности данного диагностического метода. Расшифровывать результаты должен специалист. Самостоятельно интерпретировать их у пациента вряд ли получится.

ПЦР-диагностику осуществляют следующим образом:

Кровь помещают в термостат

• Сначала забирают биологический материал. Кровь помещают в простерилизованные приспособления. Необходимый объем не превышает 1-1,5 мл. Держать кровь и ее компоненты следует не дольше 24 часов. Температура хранения не должна превышать 4 градусов по Цельсию.
• После начинают клиническое исследование. Подготовленную кровь помещают в термостат вместе с амплификационной смесью. Обычно требуется не более 25 мл специального состава. Амплификация проводится в автоматическом режиме на протяжении нескольких часов.
• Параллельно делают контрольные анализы. Для этого используют биологические материалы, взятые у здорового человека. Это поможет избежать ложных результатов.
• Расшифровка и регистрация показателей. Генетический материал обнаруживают с помощью бромистого этидия. Благодаря специфическому воздействию, фрагменты ДНК высвечиваются. Наличие (отсутствие) вируса выявляют ориентируясь на данные таблицы.

Определить значение полученных показателей может только инфекционист и гепатолог. Анализ ПЦР вводят диагностический комплекс вместе с биохимическим исследованием крови, УЗИ, ИФА и биопсией. Диагноз ставят на основании всех результатов. Порядок расшифровки анализов зависит от этапа диагностического обследования.

Ультразвуковая диагностика

На первой стадии ПЦР положительным результатом теста считается обнаружение фрагментов ДНК болезнетворного вируса. При проведении количественного анализа определяют уровень вирусной нагрузки. Она может быть низкой (менее 8*10^5 МЕ/мл), средней (от 8*10^5 МЕ/мл), высокой (больше 2,4*10^7 МЕ/мл). Нормой (отрицательным результатом) считается отсутствие специфических антител и частиц вирусной РНК. На этапе генотипирования об инфекционном заражении свидетельствует РНК определенного генотипа.

При получении положительного результата больному назначают эффективную терапевтическую схему. При этом обязательно учитывают информацию о наличии вируса в крови, степени его активности и генотипе. Цена процедуры зависит от методики тестирования, вида биологического материала. К общей стоимости могут быть добавлены затраты за забор крови или других жидкостей. Последнее обусловлено тем, что возбудителя часто обнаруживают в урине, каловых массах и сперме.

источник

Вирусный гепатит С — тяжелое заболевание, которое протекает с поражением печени. У восьмидесяти процентов больных оно переходит в хроническую форму. Вирус размножается в клетках печени — гепатоцитах — и вызывает их гибель. Отмершая ткань замещается очагами соединительной ткани, развивается фиброз.

По мере развития фиброза печень оказывается неспособна выполнять свои функции, начинается цирроз печени, который опасен своими осложнениями: повышением давления в системе портальной вены, желудочно-кишечными кровотечениями, нарушением свертывания крови, изменениями психики из-за повреждения ядер головного мозга токсическими продуктами.

Причина заболевания — заражение вирусом из семейства Flaviviridae, который относится к типу РНК-вирусов. Это значит, что генетический материал, по которому синтезируются белки возбудителя, закодирован в молекуле рибонуклеиновой кислоты. Заражение происходит через кровь, половым путем, и от беременной женщины к плоду. К сожалению, между инфицированием и началом выработки антител может пройти достаточно большое количество времени — от двух недель до шести месяцев. Это не дает определить заражение методом иммуноферментного анализа и начать лечение на ранних стадиях.

ПЦР — метод молекулярного анализа, который позволяет обнаружить генетический материал возбудителя уже на первой неделе после инфицирования с помощью полимеразной цепной реакции. Исследование обладает высокой специфичностью, точностью, и позволяет не только определить наличие или отсутствие вируса, но и его концентрацию и генотип.

Для исследования берут кровь пациента, в которой потенциально может находиться РНК вируса. В кровь добавляют праймеры — искусственно синтезированные участки искомого гена малой длины, и РНК-полимеразу — специальный фермент, который многократно увеличивает количество генетического материала возбудителя. С помощью специального аппарата проводят несколько циклов нагревания и охлаждения. Затем материал анализируют и сопоставляют с известными генами вируса, на основе чего делают заключение о наличии или отсутствии заражения.

Различают три вида ПЦР-анализа:

Качественный анализ ПЦР . Первая стадия исследования. Он позволяет выявить генетический материал вируса в крови.

Количественный анализ ПЦР . Позволяет определить вирусную нагрузку — концентрацию генетического материала возбудителя в одном миллилитре крови. Это исследование проводят перед началом терапии, а затем на первой, четвертой, двенадцатой и (если курс длительный) двадцать четвертой неделе лечения, чтобы оценить его эффективность.

Генотипирование . Возбудитель гепатита С часто и быстро мутирует. На планете было обнаружено семь вариантов генотипа этого вируса. В России распространены первой, второй и третий тип. Каждый из генотипов обладает различной устойчивостью к терапии, например эффективность лечения первого типа составляет шестьдесят процентов, а для второго и третьего этот показатель достигает восьмидесяти пяти. Поэтому, для того чтобы подобрать подходящие препараты и назначить курс лечения достаточной длительности необходимо точно определить, каким типом вируса заражен пациент.

ПЦР-исследование назначают в следующих случаях:

• контакт с больным человеком, при котором могло произойти заражение;
• положительный результат иммуноферментного анализа;
• признаки цирроза печени: изменение размеров печени, увеличение селезенки, появление на животе подкожного венозного сплетения;
• появление симптомов поражения печени: боли в правой части живота, пожелтение кожных покровов;
• повышение активности АЛТ и АСТ в биохимическом анализе крови;
• перед началом лечения для определения вирусной нагрузки;
• с целью контроля за эффективностью антивирусной терапии;
• после окончания лечения для контроля за рецидивами;
• при наличии диагностированного гепатита B, для исключения смешанного поражения печени.

Расшифровкой ПЦР-анализа и иммуноферментного анализа на гепатит С должен заниматься гепатолог или инфекционист. Анализировать результаты ПЦР необходимо в комплексе с данными биохимического анализа крови, биопсии и УЗИ. Только квалифицированный врач сможет проанализировать результаты исследований и, основываясь на них, назначить правильное лечение.

В анализируемом биологическом материале обнаружен генетический материал возбудителя. Инфицирование подтверждено.

Инфицирование отсутствует, либо количество РНК возбудителя ниже границы чувствительности.

Нормальный показатель для здоровых людей. Означает, что в исследуемом материале отсутствует РНК гепатита С, либо его концентрация ниже порога чувствительности исследования.

Концентрация РНК ниже диапазона количественного определения. Такие результаты интерпретируют очень осторожно, соотносят их с данными других исследований, часто проводят повторное исследование.

Уровень вирусной нагрузки при данной концентрации считается низким. Обычно снижение количества вируса означает, что терапия идет успешно.

Уровень вирусной нагрузки при данной концентрации считается высоким.

Количество РНК выше верхнего предела диапазона количественного определения. Делать выводы о степени вирусной нагрузки при таком результате нельзя. Обычно в таких случаях тест повторяют с разведением образца крови.

Обнаружена РНК определенного генотипа

В биоматериале обнаружен вирус гепатита С определенного генотипа и субтипа. Результат кодируется римскими цифрами и латинскими буквами, например — 1а, 2b. Всего существует семь генотипов и шестьдесят семь субтипов, однако в России встречаются только три первых типа.

Обнаружена РНК вируса гепатита С

В крови обнаружена РНК редкого для России генотипа, который нельзя отнести к первому, второму или третьему типу. Необходимы дополнительные исследования.

Данный результат говорит о том, что пациент здоров, или о том, что колчество РНК возбудителя слишком мала.

Возможна ситуация, когда ПЦР-анализ на гепатит С отрицательный, а иммуноферментный анализ распознает антитела против вируса. Это значит, что пациент переболел гепатитом С в острой форме и излечился самостоятельно. Примерно двадцать случаев инфицирования заканчиваются самопроизвольным излечением, если организм пациента оказывает достаточное сопротивление инфекции.

Несмотря на то, что ПЦР — высокоточный анализ, его результаты могут быть искажены в следующих ситуациях:

• кровь транспортировалась в лабораторию в ненадлежащих условиях, был нарушен температурный режим;
• образец биоматериала был загрязнен;
• в крови находились остаточные следы гепарина и других антикоагулянтов;
• в исследуемом веществе оказались ингибиторы — вещества, которые замедляют или останавливают полимеразную цепную реакцию.

Диагностика на ранних стадиях . ПЦР обнаруживает генетический материал возбудителя заболевания. С помощью иммунофлюоресцентного анализа можно определить только иммуноглобулины — вещества, которые организм вырабатывает в ответ на инфекцию. В случае заражения гепатитом С промежуток между заражением и началом иммунного ответа может составлять несколько недель и месяцев, в это время ИФА будет неэффективна. ПЦР даст ответ уже на первой неделе после заражения.

Низкая вероятность ошибки . В исследуемом материале определяют участок генетического материала, который характерен только для одного вида возбудителей. Это позволяет исключить ложные результаты. При ИФА возможны ошибки, так как один и тот же вид антител может выделяться против разных вирусов — такие антитела называют перекрестными.

Высокая чувствительность . ПЦР позволяет обнаружить РНК возбудителя даже в минимальных количествах. Это дает возможность выявить скрытые инфекции.

Для ПЦР-анализа на гепатит С собирают венозную кровь. Обычно из вены пациента за один раз берут две порции крови: первую отправляют на ПЦР, а вторую на ИФА. Это делают для того чтобы более точно оценить, насколько сильно пациент заражен вирусом, и как иммунитет борется с ним.

Обычно от пациента требуют соблюдения следующих правил:

• анализ крови сдают с утра;
• перерыв между последним приемом пищи и сдачей крови должен составлять восемь-десять часов;
• за два-три дня до анализа нужно отказаться от жареной и жирной пищи, и алкоголя;
• в течение двадцати четырех часов перед анализом пациент должен избегать физических нагрузок: не переносить тяжестей, не посещать спортзал или бассейн.

источник

Для постановки диагноза «хронический вирусный гепатит С (ХВГС)» требуется комплексное обследование человека, которое включает клинические, лабораторные и инструментальные исследования. Важным с точки зрения диагностики для постановки правильного диагноза является метод ПЦР – полимеразная цепная реакция.

Этим лабораторным методом обнаруживают РНК вируса гепатита С в крови человека. Вместе с иммуноферментным анализом (ИФА) на антитела к вирусу, ПЦР используют для постановки диагноза ХВГС и генотипа его возбудителя. Это исследование является одним из новейших методов лабораторной диагностики. Его достоверность при ХВГС превышает 97%, что считается очень хорошим показателем для исследований.

Существует три ПЦР анализа крови при ХВГС: качественный, количественный и генотипирование вируса. Первое исследование (качественный анализ) на вирус обнаруживает его в крови, поэтому используется только для постановки диагноза.

Второе (количественное) исследование определяет степень вирусной нагрузки на организм, поэтому применяется для контроля эффективности терапии.

Третий ПЦР (генотипирование) уточняет диагноз, устанавливая генотип вируса, что очень важно для назначения правильного противовирусного лечения.

Суть методики полимеразной цепной реакции заключается в использовании ферментов, которые многократно размножают генетический материал возбудителя в биоматериале. В процессе такой репликации пробирку с кровью несколько раз подогревают и охлаждают до температуры, необходимой для ускорения ферментативной реакции. В результате этих манипуляций количество вирусного генома многократно увеличивается, что позволяет его выявить даже при минимальном количестве.

ПЦР диагностика имеет много преимуществ перед другими лабораторными исследованиями:

• высокая чувствительность – 97-98%;
• гарантированная аналитическая специфичность (выявляет именно тот возбудитель, который требуется найти, а не его родственный штамм);
• быстрота проведения (требуется не более 2 суток для получения заключения).

Качественный ПЦР анализ назначается всем пациентам, у кого ИФА-анализом были выявлены антитела к вирусу ХВГС. После проведения качественного ПЦР может быть получено два варианта ответа: «РНК обнаружено» или «РНК не обнаружено». Чтобы обнаружить в крови минимальное количество вируса, необходимы тест-системы с чувствительностью не менее 50 МЕ/мл. Если концентрация вируса в крови больного будет меньше, чем может определить диагностикум, то результат исследования может быть и ложноотрицательным. Чтобы избежать такой диагностической ошибки, лаборатории, осуществляющие ПЦР-диагностику, должны быть обеспечены высокочувствительными тест-системами. В лаборатории «Инвитро», к примеру, используются тесты с чувствительностью от 15 МЕ/мл. Информацию о чувствительности тестов работники лаборатории обязаны предоставлять пациентам и врачам по их первому требованию.

Количественный анализ ПЦР определяет степень виремии, то есть концентрацию возбудителя в крови, вирусную нагрузку. Результат этого исследования, в отличие от качественного ПЦР, выражается цифрами, например, 2×10*6 МЕ/мл, что означает 2 миллиона международных единиц в 1 мл крови. Часть лабораторий применяет другой показатель – число копий/мл. Эти два показателя легко конвертировать: 1 международная единица равна 4 копиям РНК. Таким образом, 2×10*6 МЕ/мл будет означать, что в крови больного обнаружено 8×10*6 копий вирусной РНК в 1 мл, т.е. 8 млн. копий в 1мл крови.

Генотипирование – это определение одного из шести генотипов вируса. От генотипа возбудителя зависит клиническая картина, скорость развития осложнений со стороны печени и прогноз для дальнейшей жизни пациента. Генотип вируса очень важен уже на стадии постановки диагноза, поскольку от его правильного определения зависит комбинация препаратов и длительность терапевтического курса, который будет назначен больному.

Однако даже такое казалось бы «идеальное» лабораторное исследование имеет свои минусы:

• в ходе исследования происходит репликация генетического материала всех возбудителей, даже неживых, что может исказить результат. Поэтому для осуществления контроля эффективности с помощью ПЦР повторный анализ проводят не ранее, чем через 2 месяца после предыдущего, чтобы погибшие вирусы успели «покинуть» организм больного;
• часть вирусного генома, который определяют с помощью тест-систем, теоретически может присутствовать и в других вирусах или микроорганизмах, поэтому есть вероятность ложноположительного ответа;
• вирусы быстро мутируют. Иногда скорость и степень мутирования вируса настолько высока, что тест-система перестает улавливать их геном. Как следствие, возможен ложноотрицательный результат.

Для нивелирования этих недостатков, производители лабораторных тест-систем для ПЦР диагностики постоянно проводят их испытания, в том числе на перекрестные реакции и на чувствительность к тому или иному генотипу вируса.

Чтобы заключение обследования методом ПЦР были достоверными, необходимо строго соблюдать правила подготовки к его проведению:

• исследование проводится на голодный желудок (глюкоза, жиры, минералы, попадающие в кровь из пищи, могут повлиять на скорость и качество ферментной реакции);
• разрыв между последним приемом пищи и отбором крови для анализа должен составлять не менее 8 часов;
• накануне исследования запрещено принимать алкоголь и употреблять жирную пищу, период выведения которых затяжной;
• за сутки до похода в лабораторию следует избегать сильных физических и эмоциональных нагрузок;
• до момента забора крови не рекомендуется курить.

Чтобы избежать появления ложных заключений, предполагаемому больному необходимо прийти в лабораторию немного раньше, чем будет проведен забор крови. Нужно 15-20 минут для того, чтобы человек отдышался, успокоился. Адреналин, присутствующий в крови после быстрой ходьбы, может повлиять на результат обследования.

Если направляемый на анализ пациент принимает какие-либо лекарственные препараты, об этом он должен уведомить врача. Вполне возможно, что от приема некоторых из них придется на некоторое время отказаться (если это возможно).

Расшифровкой результатов занимается врач-лаборант той лаборатории, которая проводила анализ. Расшифровка – это определение отклонения полученного результата от нормы. Норма показателей устанавливается непосредственно производителем тест-системы, которая используется лабораторией для диагностики. Поэтому не стоит удивляться, что в одних лабораториях вирусную нагрузку определяют в МЕ/мл, а в других – в копиях/мл.

Получив заключение, его нужно уметь правильно трактовать. Трактовкой результатов исследования должен заниматься лечащий врач больного гепатитом С. Только после объективного, инструментального и лабораторного обследования пациента, врач может получить достаточное количество данных для грамотной трактовки полученных результатов ПЦР.

Оценка качественного анализа, как правило, не вызывает затруднений, даже у пациентов. Результат там может быть только один: «обнаружен» или «не обнаружен». При этом второй из них является нормой.

Показатели количественного анализа трактовать сложнее. Он показывает степень вирусной нагрузки на пациента. Даже среди гепатологов нет единого мнения по поводу того, как трактовать обнаруженную виремию. Большинство врачей склоняются к тому, что высокой нужно считать нагрузку более 8×10*5 МЕ/мл. Очень высокой считается нагрузка более 1×10*7 МЕ/мл, а низкой – менее 4×10*5 МЕ/мл.

Степень вирусной нагрузки говорит о вирулентности (агрессивности) вируса: чем больше его количество в крови, тем быстрее могут развиваться осложнения со стороны печени. Высокая концентрация вируса в крови беременной женщины повышает вероятность его проникновения через гематоплацентарный барьер к плоду. Виремия также влияет на эффективность лечения: при низких цифрах результативность терапии выше, чем при высоких.

Для того, чтобы быть уверенным в достоверности проведенного анализа ПЦР на гепатит С, нужно отдавать предпочтение только тем лабораториям, которые хорошо себя зарекомендовали. Ценовая политика при этом не должна играть первостепенную роль.

источник