Анализы на гормоны методом иммуноферментного анализа

В современной лабораторной диагностике инфекционных болезней широкое применения нашел метод иммуноферментного исследования крови (ИФА), основанный на обнаружении специфических, характерных для возбудителей антител.

Иммуноферментный анализ крови — диагностика, которая позволяет комплексно оценить деятельность защитных функций организма, выявить состояние иммунодефицита при инфекционных болезнях, аутоиммунные нарушения, паразитов в организме, гематологические патологии, гормональные нарушения (гормоны щитовидной железы, ТТГ).

Чтобы это понять, следует знать, как работает иммунная система человека, что такое антиген, антитела, какие функции они выполняют.

• Антиген в нашем организме представляет собой молекулу, которая специфично связывается с антителом. Он переносит определенную информацию о клетке.
• Когда в кровь попадает чужеродный антиген, начинают вырабатываться антитела (иммуноглобулины Ig), которые распознают его и стремятся уничтожить.
• Такое взаимодействие называется иммунным комплексом, на котором и основан метод диагностики ИФА.
• Анализ позволяет определить уровень гормонов, иммуноглобулинов, иммунологических комплексов и других биологически активных веществ, поэтому важен для комплексной диагностики.

Специалист может назначить исследование с целью:

• Выявления ЗППП (микоплазмоз, уреаплазмоз, хламидии и т.д.).
• Обнаружения вирусных болезней (герпес, цитомегаловирус).
• Выявления аллергических реакций, раковых опухолей.
• Проблемы с щитовидной железой, концентрацию ТТГ в норме и патологии.
• Обнаружения распространения паразитов.
• Оценки эффективности терапии, назначенной ранее.

Исследование ИФА нашло широкое применение для обнаружения паразитов в организме. ИФА-тесты позволяют выявить паразитов при спровоцированной выработке антител и антигенов к ним, оценить масштаб их расселения, определить вид. Совместно с другими вспомогательными методиками (анализ на яйцеглист, например) точность исследования доходит до 99%.

Иммуноферментный анализ крови распознает: лямблиоз, аскариды, амебы и другие типы паразитов.

По сравнению с другими методами исследования ИФА обладает целым рядом преимуществ:

Анна Поняева. Закончила нижегородскую медицинскую академию (2007-2014) и Ординатуру по клинико-лабораторной диагностике (2014-2016).Задать вопрос>>

• Возможность провести полноценную диагностику на самых ранних сроках заболевания.
• Расшифровка позволяет выявить развитие и стадию заболевания.
• Обнаружение ЗППП (хламидии, уреаплазма и т.д.).
• Возможность проведения во время беременности.
• Определение концентрации ТТГ в сыворотке крови для установления нормы или патологии. ТТГ является важным показателем для диагностики работы щитовидной железы.
• Удобство проведения исследования и быстрые сроки предоставления результата.
• Высокая чувствительность — с точностью до 90-95%. До 98% для ЗППП (хламидии, микоплазмы, герпес и т.д.), концентрацию ТТГ.
• Отслеживание динамики развития процесса инфекционного заболевания.
• Выявление в организме паразитов.
• Возможность проведения массовых обследований в очагах инфекции.
• Приемлемая стоимость.
• Ряд лабораторий имеют возможность постановки парных сывороток, а также постановки анализа после его сдачи повторно (материал может храниться некоторое время при соблюдении правильных условий).

Из недостатков можно отметить возможную неточность расшифровки. Иногда анализ показывает ложноотрицательный или ложноположительный результат, особенно при неправильной подготовке или нарушении техники выполнения.

Процедура ничем не отличается от взятия материала для клинического исследования венозной крови.

• После назначения анализа пациент направляется в лабораторию для забора венозной крови. Процедура проводятся утром на голодный желудок.
• Материал отправляется в лабораторию, где из крови получают сыворотку, в которой находятся антитела.
• Сыворотку помещают в пробирки с наборами антигенов. В практике таких наборов применяется много. Это могут быть разные аллергены (пыльца, шерсть, цитрусовые, молоко и другие), возбудители инфекционных и вирусных заболеваний и другие.
• После получения реакции остатки сыворотки сливают. Количество антител определяют при помощи специальных индикаторов.

Срок выполнения зависит от конкретной лаборатории. Некоторые лаборатории предоставляют результаты в течении 1-2 дней, другие в течение 1 недели. Задержки могут быть из-за накопления определенного количества сывороток.

Перед сдачей анализа следует придерживаться простых правил подготовки:

• Исключить прием любых медикаментозных средств накануне анализа. Если это невозможно, обязательно поставьте в известность врача, назначающего диагностику. Особое внимание уделяется лекарствам от аллергии. Если пациент принимает антигистаминные препараты, следует проконсультироваться с врачом, за сколько до начала исследование нужно их отменить. Это касается и некоторых лекарств для щитовидной железы. Иначе концентрация ТТГ может быть определена неправильно и результат нормы и патологии будет получен неверно. Как правило, в норме антибактериальные, противовирусные, антигистаминные препараты прекращают принимать за 10-16 дней до диагностики.
• Кровь забирается строго натощак. Последний прием пищи в норме должен быть за 8-12 часов до поездки в лабораторию.
• Нельзя принимать алкогольные напитки и курить, иначе это повлияет на норму результатов.
• Следует исключить любые стрессовые факторы, физические нагрузки. Обязательно хорошо выспаться.

Все, что вам необходимо знать про анализ на примере одной из лабораторий

Анализ ИФА — достаточно точный метод исследования. Погрешности возникают в случаях:

• нарушении процедуры взятия материала;
• при неправильной транспортировки и хранении материала;
• во время приема некоторых медикаментозных средств (препараты для щитовидной железы, например, которые могут повлиять на концентрацию ТТГ);
• при наличии скрытых заболеваний (в том числе ЗППП, хламидии, например), нарушениях обмена веществ, иммунодефиците;
• в период новорожденности, когда в норме в организме присутствуют еще материнские антитела.

Когда анализ будет готов, пациент получает бланк, где указываются отрицательные (-) и положительные (+) результаты определения каждого класса иммуноглобулинов. Интерпретация может быть такая:

• На выздоровление пациента указывают отрицательный результат IgM, без определения IgA, IgG.
• Хроническое инфекционное заболевание подразумевает расшифровка: (-) IgM и отрицательный, положительный IgG, IgA.
• Об отсутствии защитной реакции к инфекциям указывают (-) значения IgM, IgG, IgA.
• Острая инфекция обнаруживается при отрицательном или положительном IgG и IgA, (+) IgM.
• Постинфекционный иммунитет при (-) IgM, IgA и положительном значении IgG.
• Обострение хронического заболевания — (+) показателях IgM, IgG, IgA.

Наглядная демонстрация ИФА анализа

Анализ крови методом ифа считается востребованной диагностикой и предлагается различными лабораториями, клиниками города.

В Москве анализ ИФА можно сделать:

• в лаборатории Ниармедик,
• Инвитро,
• Царской клинике,
• Дельтаклинике,
• ЛДЦ Кутузовском,
• МедЦентрСервисе,
• сети Онклиник,
• Чудо докторе,
• Семейном докторе,
• К+31,
• ООО Медицине и других.

В Санкт-Петербурге анализ ИФА проводится

• в Мэдисе,
• Американской медицинской клинике,
• Клинике доктора Филатова,
• NGC,
• Medem,
• Клинике Доктора Пеля,
• Лека-Фарм,
• Инклиник,
• Экспрессе и других.

Очень полезный учебный фильм про анализ ИФА

Складывается от количества нужных маркеров. Чем больше маркеров, тем выше цена.

Цена на определение антител к

• цитомегаловирусу Igm/IgG варьируется в пределах 350-700 рублей,
• к микоплазме 340-520 рублей,
• к кандиде 320-450 рублей,
• Анти-Хламидия tr. IgA + Анти-Хламидия tr. IgG 1000-1300,
• антитела класса IgM к Хламидии 500-600 рублей и т.д.
• Забор крови в среднем составляет 150-250 рублей.

Некоторые клиники и лаборатории предоставляют услугу отправки результатов по электронной почте. Услуга бесплатна.

Диагностика ИФА занимает особое место в диагностике заболеваний.

Она характеризуется широким спектром действия, быстротой и удобством проведения, высокой точностью результатов, приемлемой стоимостью. Она востребована, поэтому доступна в разных клиниках и лабораториях города.

источник

Иммуноферментный анализ (ИФА) — это лабораторное исследование, основанное на реакции «антиген-антитело». Суть этого лабораторного метода — выявление специфических антител с помощью специальных биохимических реакций, которые помогают определить присутствие или отсутствие антител и их количество.

Методом ИФА можно определить уровень гормонов, иммуноглобулинов, иммунологических комплексов и других биологически активных веществ. Материалом для исследования может служить кровь (ИФА крови), спинномозговая жидкость, содержимое стекловидного тела, околоплодные воды и т.д.

• высокая чувствительность, которая, составляющая 90%;
• стабильность при хранении всех ингредиентов, необходимых для проведения ИФА (год и более);
• быстрота и удобство проведения диагностической реакции;
• возможность использовать минимальные объемы исследуемого материала;
• возможность автоматизации всех этапов проведения реакции;
• небольшая стоимость диагностических наборов;
• возможность ранней диагностики инфекции;
• унифицированность и пригодность для массовых обследований;
• легкость в отслеживании динамики развития процесса инфекционного заболевания.

Недостаток — относясь к непрямым методам диагностики, он позволяет определить иммунный ответ организма на возбудителя, а не самого возбудителя.

Метод иммуноферментного анализа используется для определения наличия антигенов возбудителей различных инфекций и для определения наличия антител классов (IgA, IgM, IgG) к антигенам различных возбудителей (вирусные гепатиты, ВИЧ, сифилис, TORCH, хламидиозы, паразитозы). С помощью ИФА можно определить антитела к любой инфекции, при условии, конечно, что организм их выработал. Этот метод позволяет различать острые и хронические формы заболеваний, выделять стадию заболеваний и выявлять практически здоровых носителей и контролировать вакцинацию. Необходимо заметить, что наличие антител в сыворотке крови или в патологическом материале может свидетельствовать лишь о контакте организма с возбудителем в настоящее время или в прошлом.

Для постановки диагноза, ИФА диагностики, используют лабораторные тесты для идентификации возбудителя, инструментальные методы обследования и клиническую диагностику (клинический опыт врача). Естественно, что только по наличию тех или иных антител не может быть поставлен достоверный диагноз заболевания. Необходимо одновременно выявлять антитела к возбудителю методом ИФА и выявлять возбудителя методом ПЦР (полимеразная цепная реакция) или другими методами.

р.д. — рабочий день, кол. — количественный, кач. — качественный, п.кол — полуколичественный

* Исследование в режиме CITO:

— поступление биологического материала до 14.00 — выдача результатов исследований после 19.00 в тот же день по факсу или электронной почте;

— поступление биологического материала после 14.00 — выдача результатов исследований до 13.00 следующего дня по факсу или электронной почте.

источник

Под анализом крови на гормоны, врачи подразумевают комплексное исследование вышеозначенного материала на концентрации и присутствие в нём ряда биологически активных веществ, вырабатываемых железами человека. Данная процедура может помочь в выявлении большого количества самых разнообразных болезней, притом даже в очень ранних стадиях, когда клинические внешние симптомы их пока отсутствуют.

Единственный способ точного диагноза серьезных болезней, которые важно выявлять на ранних стадиях, тогда лечение будет эффективным.

Содержание гормонов в крови невелико, особенно если сравнивать показатель с аналогичными для других элементов плазмы, однако именно этот ряд биологически активных веществ участвует практически во всех критических для организмах, процессах. Гормональные нормы при этом не являются стационарной величиной и зависят как от пола человека, так и от его возраста.

Анализ крови на гормоны назначается при подозрении на неправильную работу внутренних органов, желез, надпочечников, заболеваний плода при беременности и в иных случаях.

Для исследования крови на гормоны, у вас её возьмут из вены. За 12 часов до предполагаемого времени сдачи образцов, максимально ограничьте эмоциональный и физические нагрузки, а также откажитесь от алкоголя и препаратов/продуктов, содержащих йод.

Отдельного внимания заслуживает подготовка к сдаче анализов для женщин – она должна проводиться в определенные дни менструального цикла, которые обозначит вам лечащий врач. Сам анализ сдаётся в утреннее время, натощак.

1. ТТГ. Данный гормон из гипофиза прямо воздействует на щитовидную железу, обеспечивает полноценную циркуляцию других элементов. Норма для здорового человека – от 0,4 до 4 мЕд/л. Повышенные значения свидетельствуют о надпочечниковой недостаточности, тяжелой нетиреоидной патологии, резистентности к таким гормонам, нервнопсихическом возбуждении либо употреблении наркотиков, в частности морфия. Пониженное значение – увеличенный уровень кортизола, тиреотоксикоз, избыточная терапия гормонами.
2. Т3 в свободной форме. Обеспечивает метаболическую активность и имеет обратную связь с работой гипофиза. Нормальные показатели от 2,6 до 5,7 пмоль/л. Повышенные значения – синдром периферического сопротивления сосудов, гормональный токсикоз или гипертиреоз, приём метадона, амфетамина. Пониженное значение – синдром периферического сопротивления сосудов, почечная недостаточность, дисальбуминемическая гипертироксинемия, голодание, приём йодсодержащих препаратов, дексаметазона, кумарина, фенитоина, артифициальный тиреотоксикоз, а также физиологическое снижение уровня в летний период времени.
3. Т3 общий. Тиреоидный гормон в сывороточном состоянии, отвечающий за периферийную работу желез. Нормальные значения от 1,3 до 2,7 нмоль/л. Повышение показателя свидетельствует о беременности, ВИЧ-инфекции, гепатите, порфирии, гиперпротеинемии, приёма тамоксифена, контрацептивов орального спектра, амиодарона, амфетамина, а также эстрогенов. Снижение – акромегалия, дефицит ТСГ, заболевания ЖКТ, печени и почек, голодание, гемолиз, соматические патологии, приём тестостерона, анаболиков, кофеина.
4. Т4 свободный. Основной гормон щитовидки отвечает за работу транспортных белков и поддерживает их баланс в организме. Норма для здорового человека – от десяти до 22 пмоль/л. Повышенные значения свидетельствуют о липемии, психических или соматических болезнях, надпочечниковой недостаточности, приёме аспирина, амиодарона, фуросемида, наследственном повышении ТСГ. Пониженные значения – мощные физнагрузки, беременность, голодание, аутоантитела с гормонами тиреоидного типа, приём метадона, салицилатов, трийодтиронина, рифампицина.
5. Т4 общий. Один из основных гормонов щитовидной железы. Нормальные значения – от 58 до 161 нмоль/л. Повышение свидетельствует об ожирении, беременности, острых гепатитах, интермиттирующей порфирии, ВИЧ-инфекции в неактивной фазе, гипербилирубинемии, приёме контрацептивов, тамоксифена, гепарина, препаратов тиреоидного ряда. Понижение – физические нагрузки, голодание, акромегалия, врождённый дефицит ТСГ, соматические патологии, заболевания ЖКТ и почек, приём тестостерона, лиотиронина, дифенила, салицилатов, анаболиков.
6. ТСГ. Данный гликопротеин из полипептидной цепи считается третьим основным связующим белком-носителем и функциональным элементом щитовидки. Нормальные значения – от 259 до 573,5 нмоль/л. Повышенные значения диагностируются при гиперпротеинемии, беременности, гепатитах в острой фазе. Понижение свидетельствует о соматической патологии, гипофункции яичников, высоком уровне катаболизма, акромегалии, врождённом дефиците гормона.
7. Антитела к тиреоглобулину. Являются полезным индикатором для определения ряда проблем в организме, особенно после оперативного вмешательства. Нормальные значения данного показателя – до 40 МЕ/мл. Превышение свидетельствует об перциозной анемии, болезни Грейвса, идиопатической микседеме, тиреоидите Хашимото, карциноме щитовидной железы, подостром тиреоидите, иных хромосомных и аутоиммунных проблемах.
8. Антитела к тиреоидной периоксидазе. Индикатор противодействия известному ферменту. Сверхнормальные показатели его свидетельствуют об аутоиммунных заболеваниях щитовидной железы. Нормальное значение параметра – до 35 МЕ/мл.
9. Тиреоглобулин. Гормон, состоящий из 2-х субъединиц, вырабатывается исключительно щитовидной железой, анализируется как маркер различных новообразований, а также своеобразный «монитор» состояния пациента с удалённой железой или человека, находящегося под терапией радиоактивный йодом. Норма – от 1,7 до 56 нг/мл. Снижение показателя свидетельствует о дефиците продуктивной функции щитовидки в отношении данного гормона при гипотиреозе. Повышение указывает на доброкачественную аденому, тиреотоксикоз, подострый тиреоидит, а также первичные проявления рака щитовидной железы.

1. СТГ. Соматотропный гормон роста, ответственный за стимуляцию развития костей, мышечной массы и иных органов. Нормальные значения – до десяти нг/мл. Повышенные значения свидетельствуют о болезни гигантизм либо акромегалии, пониженные же – индикатор гипофизарного нанизма.
2. АКТГ. Данный адренокортикотропный элемент стимулирует производство гормонов в коре надпочечников. Норма для здорового человека до 50-ти пг/мл. Пониженные значения свидетельствуют об системной недостаточности надпочечников или наличия в них опухолей. Повышенный показатель – индикатор гиперплазии того же органа, а также болезней Иценко/Кушига либо Аддисона.
3. ТТГ. Классически тиреотропный гормон влияет на распад тиреоглобулина и йодирование тирозина. Норма по ИФ – от 0,24 до 2,9 мк МЕ/мл. Норма по РИА – от 0,6 до 3,8 мк МЕ/мл. Повышение параметра показывает наличие тиреоидита или гипотиреоза в начальной стадии, понижение параметра – симптом аденомы либо тиреотоксикоза.
4. Пролактин. Данный элемент у представителей сильного пола отвечает за работу простаты и формирование семенных пузырьков, у женщин – за рост молочных желез. Нормальные значения: женщины в детородный период от 130 до 540 мкг/л, женщины в менопаузе и не детородящие от 107 до 290 мкг/л, представители сильного пола от ста до 265 мкг/л. увеличение данного параметра у мужчин показывает различные нарушения потенции, у представительниц прекрасного пола – беременность, лактацию, гипотиреоз в первичной фазе, аменорею и опухоли гипофиза.
5. ФСГ. Фоллитропин у представительниц прекрасного пола отвечает за работу фолликулов, у мужчин же – за активность сперматогенеза и работу семенных канальцев. Нормы: женщины при менопаузе от 29,5 до 55 мЕД/л, женщины при овуляции от 2,7 до 6,7 мЕД/мл, представительницы прекрасного пола в лютеиновой фазе от двух до четырёх мЕД/мл, представители сильного пола от 1,9 до 2,4 мЕД/мл. Увеличенные показатели свидетельствуют о менопаузе, недостаточности яичников в начальной фазе, проблеме со сперматогенезом, а также синдроме Тернера. Снижение параметра показывает наличие гипофункции гипоталамуса, а при беременности и параллельно почти «нулевых» показателях параметра – глубокой недостаточности яичников, рака предстаты, а также приёма контрацептов орального спектра либо эстрогенов.
6. ЛГ. Лютеинизирующий гормон помогает вырабатывать прогестерон у представительниц прекрасного пола, а тестостерон – у лиц мужского пола. Нормы: для представителей сильного пола от 2,12 до 4-х мЕД/мл, у девушек при овуляции от 18 до 53 мЕД/мл, у женщин в лютеиновой фазе от 1,54 до 2,56 мЕД/мл, у представительниц прекрасного пола в фолликулярной фазе от 3,3 до 4,66 мЕД/мл, при менопаузе у лиц женского пола от 29,7 до 43,9 мЕД/л. Увеличение уровня – индикатор различных дисфункций половых желез. Понижение уровня свидетельствует о нарушениях в работе гипофиза/гипоталамуса, недостаточности половых желез во вторичной фазе, а также приёме внутрь, прогестерона.

1. Тестостерон. Данный гормон напрямую влияет на формирование у людей, вторичных половых признаков, развитие соответствующих органов, а также стимуляцию роста костей и мышечной массы. Нормы: от 0,2 до одного нг/мл у представительниц прекрасного пола и от двух до десяти нг/мл у представителей сильного пола.
2. Эстрадиол. Женский гормон эстрогенового ряда, обеспечивает правильное развитие беременности и продуцирование половых клеток. Нормы: от 200 до 285 пм/л (женщ. в фолликулярной фазе), от 440 до 575 (женщ. в лютеиновой фазе), от 50 до 133 пм/л (при менопаузе). Повышение параметра наблюдается при опухолях в яичниках. Понижение – при их недостаточном функционировании и нарушениях выделения гонадотропных гормонов.
3. Прогестерон. Второй по значимости женский гормон эстрогенового ряда, обеспечивающий правильное развитие половых органов у представительниц прекрасного пола. Нормы: от одного до 2,2 нм/л (женщ. в фолликулярной фазе), от 23 до 30-ти нм/л (женщ. в лютеиновой фазе) и от одного до 1,8 нм/л (при менопаузе). Увеличение наблюдается при опухолях коры надпочечников. Понижение параметра – при облучениях и склерозе яичников.

1. Кортизол. Влияет на восприимчивость аллергических реакций, катализирует создание глюкозных структур из белков и аминокислот, систематизирует выработку антител. Нормальные показатели – от 230 до 750 нм/л. Понижение концентрации свидетельствует о недостаточности надпочечников в хронической фазе или болезни Аддисона. Снижение показывает возможный рак надпочечников либо аденому.
2. Норадреналин и адреналин. Вышеозначенные элементы влияют на сосуды, нормализируют давление, систематизируют функционирование моторики ЖКТ, катализируют проникновение жирных аминокислот в кровь, ритмы работы сердца, а также формируют уровни глюкозы. Нормы: от 1,92 до 2,46 нм/л и от 0,62 до 3,23 нм/л для ад-на и норад-на соответственно. Увеличение показателей указывает на желтуху, физически-эмоциональную загруженность, болезни почек, синдром Иценко-Кушинга. Понижение свидетельствует о поражениях гипоталамуса либо миастении.
3. Альдостерон. Гормон отвечает за баланс водного и солевого обмена в организме. Нормы: для горизонтального положения от 30 до 65 пг/мл, для вертикального положения от 58 до 172 пг/мл. Пониженный уровень альдостерона свидетельствует о тромбозе вен надпочечника, эмболии артерии данного органа, болезни Аддисона, скудности рациона регулярного питания, в котором не хватает калия, а также гипофункции надпочечников либо слишком большом употреблении слишком большого количества жидкости. Повышенный уровень обычно указывает на гиперплазию или опухоль надпочечников, различные проблемы с натриевым выводом, имеющим осложнения в виде цирроза печени, нефрозов и заболеваний сердечно-сосудистой системы. Также понижение концентрации альдостерона ниже нормы свидетельствует о беременности, повышенном потоотделении, беременности, сильных физических переутомлениях и недостатке натрия в рационе питания.

Обязательно сдавайте анализы на гормоны, выписываемые вашим лечащим врачом – в ряде случаев их результаты позволяют диагностировать серьезную болезнь еще на стадии её первичного формирования, что в конечном итоге сэкономит вам время, деньги и здоровье при лечении. Однако старайтесь не переусердствовать, заказывая не слишком нужные для комплексного обследования, изучения анализов – точные параметры для диагностики может сообщить вам только квалифицированный медицинский работник. Удачи и не болейте!

Стоимость анализов будет зависеть от того, какой гормон исследуется – их достаточно много. Конкретные показатели, необходимые для комплексной диагностики вашей проблемы, определяет лечащий врач, т.е. всё будет зависеть от органа, который исследуется, характерной медицинской проблемы, потенциального диагноза и т. д. Средняя стоимость анализа на отдельный гормон (например, ТТГ, прогестерон, кортизол, тиреоглобулин) колеблется в пределах от 350 до одной тысячи рублей по Москве. Часто, клиники предоставляют скидки на исследование нескольких параметров сразу, однако такой возможностью нужно также пользоваться с осторожностью – иногда отдельные исследования из предлагаемого комплекса, вам попросту не нужны и дешевле будет заказать лишь несколько по стандартным расценкам.

В некоторых государственных медицинских учреждениях могут делать отдельные анализы на тот или иной гормон бесплатно – чаще всего такую услугу оказывают в городах-миллионниках, преимущественно в женских консультациях. Однако в подавляющем большинстве случаев вас направят в частный медицинский центр, поэтому на всякий случай готовьте деньги, естественно, предварительно разузнав, не предоставляется ли по месту обращения в муниципальном медицинском учреждении, такого рода сервис.

источник

С развитием таких смежных наук, как генетика, молекулярная биология, химия, а также ростом технического прогресса, современная медицина может похвастаться инновационными методами диагностики самых разных заболеваний человека. Они отличаются высокой точностью результатов и безопасностью проведения. Одним из таких способов выявления проблем со здоровьем является иммуноферментный анализ. Он приобрел широкую популярность в последнее десятилетие и завоевал репутацию высокоэффективного, надежного и безопасного для пациента метода обнаружения заболеваний еще до появления внешних симптомов. Мы доступно объясним, что представляет собой такой вид диагностики, каков принцип его действия, отметим достоинства, сориентируем в стоимости такого анализа.

Для того чтобы понять, как, благодаря иммуноферментному анализу, лаборанты диагностируют различные заболевания, необходимо разобраться в физиологическом процессе, который происходит в организме во время заражения инфекциями. Когда патогенный микроорганизм попадает в кровоток, иммунная система человека демонстрирует защитную реакцию в виде выделения определенных веществ – антител. Они связываются с клеткой и анализируют, является ли она частью организма или внедрилась извне. Если иммунная система определила, что клетка чужеродная, то количество антител начинает увеличиваться с целью борьбы с патогенным микроорганизмом.

Антитела бывают разных видов, имеют свои особенности. Одни вещества появляются непосредственно в период инфицирования, другие остаются в течение всей жизни в организме человека и именно благодаря им вырабатывается стойкий иммунитет к конкретному заболеванию. Рзделяют белковые структуры на такие виды: A, D, E, M, G. В медицине антитела называют иммуноглобулинами. Поэтому принято обозначать показатели этих веществ латинскими буквами Ig.

Иммуноферментный анализ (ИФА) основан именно на данных медицинских знаний. С помощью специальных антигенов в лабораторных условиях можно определить наличие или отсутствие тех или иных антител в биологическом материале. По результатам такого анализа врач может поставить диагноз, а также определить не только наличие патологии, но и давность ее происхождения, выявить уровень опасности для пациента. При иммуноферментном анализе чаще других исследуют наличие антител групп M и G.

На самом деле иммуноферментный анализ не является инновацией современного общества. Его изобрели еще в 80-х годах. Но для проведения таких исследований требовалась громоздкая дорогостоящая аппаратура. Поэтому использовали такой метод только в специально оснащенных научных лабораториях: его применяли для типирования клеток и тканей. А вот широкого распространения в диагностической медицине он тогда не получил, использовать его было технически сложно и крайне затратно. Лишь с развитием техники и изобретением биополимерных материалов ИФА усовершенствовали. После чего метод стал популяризироваться и завоевывать доверие в медицинских кругах.

Как уже было сказано выше, данный метод подразумевает обнаружение в биоматериале — крови, околоплодных водах, стекловидном теле или спинномозговой жидкости — определенных групп иммуноглобулинов.

Различают исследования без нанесения антигена на поверхность и твердофазный иммуноферментный анализ, который предполагает проведение реакции в специальных лунках. Последний метод имеет большую чувствительность и надежность, поэтому именно таким образом проводят анализ в медицинских лабораториях для обнаружения заболеваний человека.

В зависимости от предполагаемого заболевания, из набора для иммуноферментного анализа используют необходимый антиген, который во время химической реакции при наличии инфекции свяжется с патогенной флорой. Этот процесс называется проведением иммунной реакции.

Затем для того, чтобы визуально определить результат исследования, проводят ферментативную фазу ИФА. Она предполагает окрашивание материала с помощью специальных реагентов. В данном исследовании применяют такие ферменты, как щелочная фосфатаза, пероксидаза и авидин. В зависимости от получившегося цвета в процессе проведения химических реакций и определяют результат иммуноферментного анализа.

Анализ ферментативной фазы диагностики проводится с помощью метода, который имеет название «колориметрия». Дело в том, что не только цвет материала дает информацию об инфекции, но и получившаяся в результате химических реакций плотность окраса. Именно этот показатель определяет концентрацию патогенного микроорганизма. Если по старинке используют ручной метод диагностики, то для определения указанных показателей выстраивают специальный калибровочный график.

В современных лабораториях сегодня редко применяют ручной метод. Для проведения анализа ИФА используют специальный аппарат – колориметр, в котором вручную задаются лишь параметры исследования, а затем всю работу, включая построение графика, прибор проводит автоматически.

Различают прямой и непрямой методы иммуноферментного анализа. Первый вид занимает меньше времени, так как имеет лишь 3 стадии выполнения. Сперва к антигенам исследуемого материала, помещенным в специальные лунки, добавляют специфические антитела. Затем удаляют избыточное их количество и проводят ферментативную фазу анализа, получая таким образом результат.

Непрямой метод применяется намного чаще, так как имеет более высокую чувствительность по сравнению с прямым способом диагностики. При его проведении используется двойное исследование. А именно — сначала антиген связывают с немеченым антителом, а затем с меченым. Такой процесс занимает больше времени, но и результат является наиболее точным.

Наборы для иммуноферментного анализа выпускают разные производители, в самых разных комплектациях. В России признанной является компания «Союз медико-биологический». Данный производитель выпускает наборы реагентов для исследования методом ИФА практически всех распространенных в наших широтах инфекций, поддающихся анализу таким способом. Кроме непосредственно самих реагентов в комплекты входят дополнительные материалы, что обеспечивает безопасность, удобство и быстроту выполнения анализа. Кроме того, химические субстанции окрашены в разные цвета, что снижает вероятность ошибки в выборе реагента лаборантом.

Отличаются химико-биологические наборы относительной доступностью, что прямо влияет на распространение и доступность иммуноферментного анализа для населения.

Несомненно, иммуноферментный анализ имеет ряд преимуществ по сравнению с другими диагностическими методиками:

1. С его помощью можно определить даже незначительное наличие патогенных организмов, что говорит о высокой чувствительности теста.
2. Возможность обнаружения заболевания на самых ранних стадиях, что значительно повышает шанс на благополучное излечение.
3. Простота и удобство взятия биологического материала. Такой анализ проводят как в частных лабораториях, так и в государственных. При необходимости материал может взять медсестра у пациента дома.
4. Для анализа требуется совсем незначительный объем биоматериала.
5. Быстрое получение результата. Современное медицинское оборудование позволяет выполнить анализ в течение суток.
6. Возможность обнаружения скрытых бессимптомных форм инфекции.
7. Доступность исследования.
8. При необходимости возможно проведение массовых обследований данным методом.
9. Существует возможность отслеживания протекания заболевания и эффективности назначенного лечения, так как можно проводить анализ методом ИФА многократно абсолютно безопасно для пациента.
10. Автоматизация этапов проведения анализа, что исключает человеческий фактор и повышает достоверность результатов.
11. Реагенты для проведения ИФА хранятся достаточно долго – около года.
12. Проведение анализа возможно при колебаниях температуры окружающей среды.

Антитела группы М вырабатываются иммунной системой сразу после обнаружения чужеродного антигена. Следовательно, если иммуноферментный анализ завершился обнаружением таких веществ в биоматериале, то это свидетельствует об острой стадии протекания заболевания, первичном инфицировании. Иммуноглобулины группы М могут находиться в организме до месяца в зависимости от вида заражения. Затем их количество уменьшается до полного исчезновения.

На смену иммуноглобулинам группы М появляются белковые структуры вида G. Эти вещества вырабатывают стойкий, в большинстве случаев пожизненный иммунитет к заболеванию. Определение белковой структуры IgG в исследуемом материале указывает на то, что организм ранее встречался с возбудителем и имеет защитную реакцию от повторного заражения.

Иммуноферментный анализ крови применяют для определения разных инфекционных заболеваний, гормональных состояний, делают аллергопробы. А именно:

• определяют уровень гормонов щитовидной железы;
• показатели репродуктивной гормональной панели;
• онкомаркеры;
• обнаруживают возбудителей инфекционных заболеваний, таких как цитомегаловирус, гепатит, токсоплазма, краснуха, корь, туберкулез, хламидия, сифилис, микоплазма, уреплазма, кандида, лямблии и даже ВИЧ;
• диагностируют аутоиммунные заболевания. В том числе часто используют для исследования гормонов щитовидной железы иммуноферментный анализ: ТТГ, ТГ, Т3 и Т4.

Кроме диагностических целей, метод иммуноферментного анализа применяют в научно-исследовательской медицинской деятельности.

В большинстве случаев для анализа рекомендуется забор венозной крови. После обработки и подготовки материала для исследования проводят иммуноферментный анализ сыворотки крови или плазмы.

Особого внимания требует исследование гормональной панели, так как в данном случае крайне важно учитывать особенности забора материала. Например, диагностика большинства гормонов репродуктивной системы женщины требует взятия венозной крови в определенные дни менструального цикла. На ряд других гормонов действуют внешние факторы: сезонность, время суток, психологическое состояние пациента и многое другое. Не учитывая специфические факторы, можно получить ложный результат, что приведет к обострению заболевания или неправильно назначенному лечению.

В некоторых, чаще осложненных случаях, для анализа могут понадобиться спинномозговая жидкость, стекловидное тело или околоплодные воды беременной женщины. Процедуры по забору этих биологических материалов несут определенный риск, имеют противопоказания и восстановительный период. Поэтому следует проводить только по показаниям врача и под его профессиональным наблюдением такой иммуноферментный анализ. Расшифровка в таком случае требует специальных медицинских знаний и может занять некоторое время.

Иммуноферментный анализ следует проводить, придерживаясь всех рекомендаций, так как на результаты исследования влияют внешние факторы. Например, важно сдавать венозную кровь натощак утром (до 11 часов). За 2 недели до предполагаемого забора материала нужно прекратить прием каких-либо лекарственных препаратов, особенно гормональных. Несколько дней перед исследованием следует воздержаться от употребления алкоголя и жирной пищи, а также исключить физическую нагрузку, переживания и стрессы.

Расшифровка результатов иммуноферментного анализа требует специальных знаний об особенностях белковых структур (антител), о которых было рассказано выше (IgG и IgM). В соответствии с этими данными анализируют показатели исследований. В таблице описаны варианты, которые могут быть получены при проведении анализа:

Анализируя представленную таблицу, можно сделать вывод, что в большинстве случаев для подтверждения диагноза потребуются дополнительные исследования. Не может дать однозначного ответа один лишь иммуноферментный анализ. Норма в данном случае не имеет четких границ: обнаруженные белки группы G указывают лишь на то, что организм ранее подвергался инфицированию определяемым возбудителем. Но этот же результат может говорить и о наличии острой фазы — важно сопоставить множество факторов и показателей для того, чтобы поставить правильный диагноз.

ИФА является точным на 90%. Все же существуют факторы риска, которые влияют на искажение результата диагностики: неисправность аппаратуры, неправильный забор материала, его хранение и транспортировка, неучет иных внешних факторов.

Не рекомендуется проводить диагностику после переливания крови, гемолиза, хирургических вмешательств, взятия биопсии или пункции биологического материала — это также может повлиять на результаты показателей.

Стоимость диагностического исследования имеет большой диапазон и зависит от вида анализа и определяемого антигена, так как исходя из этих факторов рассчитывается стоимость реагентных наборов и определяется сложность проведения анализа. Но в большинстве случае является доступным многим пациентам иммуноферментный анализ. Цена его составляет от 300 р. до 2000 р.

ИФА – доступный, быстрый и высокоэффективный метод диагностики большого перечня заболеваний. Но расшифровкой результатов и постановкой диагноза имеет право заниматься только квалифицированный медицинский работник.

источник

Перечень доступных методик диагностики в последние десятилетия быстро расширяется, диагносты пытаются в новых методах объединить преимущества всех прежних анализов, избавившись от всех их прежних недостатков.

В последнее время все чаще в перечне диагностических процедур фигурирует иммуноферментный анализ — современный и достаточно новый тест, о котором мало известно обычному человеку, не связанному с медициной. Тем не менее эта методика стремительно пополняет ряды своих приверженцев среди квалифицированного медперсонала. Что она представляет собой и в каких случаях ее следует использовать, можно попытаться разобраться, ознакомившись с ее особенностями и главными характеристиками.

Иммуноферментное исследование — инструментально-лабораторная методика, построенная на молекулярной реакции «антиген-антитело», позволяющая обнаруживать специфичные белки в биологических материалах (образцах для исследования). Такими белками могут быть энзимы, разнообразные микроорганизмы (вирусы, бактерии, грибки), простейшие и т. д.

После открытия метода ему было дано название ELISA-тест, что не имеет отношения к имени первооткрывателей, а является аббревиатурой полного названия в английском варианте — enzyme-linked immunosorbent assay. Медики всего мира используют это название, некоторые врачи в русскоязычных странах тоже так называют этот тип исследования.

Основной принцип метода заключается в молекулярной реакции «антиген-антитело».

Антигеном является любая чужая молекула, попавшая в человеческий организм в составе микроба-возбудителя болезни. Антигены представляют собой, как правило, белковые молекулы. Кроме микроорганизмов таким «чужаком» могут быть клетки чужой крови, не совпадающие по группе или резус-фактору.

В ответ на попадание такого антигена в организме запускается иммунная реакция, которая направлена на защиту от любых чужих молекул. Это происходит за счет синтеза специальных агентов иммунной системы — антител (иммуноглобулинов). Каждое антитело подходит только к определенному антигену, и нейтрализует патогенного «чужака», связываясь с ним в единый комплекс. Именно процесс такого связывания и называют реакцией «антиген-антитело».

Все антитела (иммуноглобулины) делятся на 5 видов в зависимости от того, на каком этапе иммунного ответа они появляются:

• Класс М (IgM). Всплеск таких иммуноглобулинов наблюдается в течение нескольких первых суток после внедрения инфекции или другого патогенного агента. Приблизительно через 6 недель они начинают растворяться и исчезать.
• КлассG (IgG). Синтезируются на втором этапе, чтобы побороть болезнь. После полной ликвидации чужих молекул они продолжают присутствовать в крови в небольшом количестве для обеспечения иммунитета на случай повторного заражения.
• Класс А (IgА). Такие иммуноглобулины отвечают за защитные функции слизистых оболочек организма, через которые патогенным элементам проникнуть легче всего, так как слизистый эпителий гораздо тоньше и нежнее обычных кожных покровов.
• Класс Е (IgЕ). Эти специфические глобулины направляют свое действие против паразитарных инфекций, поражающих организм человека. Они появляются вне зависимости от того, какая система органов поражена паразитами.
• КлассD (IgD). Этот класс всегда обнаруживается даже у здоровых людей. У детей до 10 лет он постепенно нарастает, после чего его количество при условии абсолютного здоровья не изменяется. Если же показатель увеличивается выше нормы, то это может свидетельствовать о наступившей беременности, астмы, иммунодефицита и пр.

Для ИФА-диагностики чаще всего важны уровни иммуноглобулинов IgG, IgM и IgA. По их титрам можно узнать, переболел ли человек болезнью раньше или заразился в недавнем времени, выработался ли у него иммунитет или его организм беззащитен перед патологией.

На данный момент ИФА — один из самых точных и чувствительных методов. Он взят на вооружение специалистами в разных областях медицины и продолжает расширять сферы применения.

• Высокая точность полученных данных.
• Чувствительность (позволяет обнаружить необходимое вещество даже при минимальном присутствии возбудителя в образце).
• Возможность диагностики в первые дни болезни или в инкубационном периоде.
• Скорость получения данных в сравнении с другими методиками подобной точности.
• Высокая автоматизация процесса и минимальное участие человека, что снижает погрешность исполнителя.
• Получение данных о стадии патологического процесса и эффективности выбранной терапии.
• Безболезненность и малая инвазивность при отборе материала.

• В большинстве случаев позволяет определять ответ организма на патогенный агент, а не самого возбудителя.
• Перед исследованием должно быть точно известно предполагаемое заболевание, так как тест высокоспецифичен.
• Вероятность ложных показателей, вызванных техническими моментами, приемом лекарственных средств, одновременным присутствием нескольких хронических заболеваний или нарушениями обменных процессов в организме больного.
• Интерпретацию результатов должен делать только высококвалифицированный специалист, так как для трактовки полученных данных необходимо владеть специальной подготовкой и большим запасом медицинских знаний в определенной области.
• ИФА — достаточно редкий анализ, поэтому выполняют его далеко не во всех диагностических лабораториях.
• Метод довольно дорогой, так как помимо реактивов в лаборатории должно быть дорогостоящее многочисленное оборудование и образцы антигенов, изготавливаемых в специальных институтах.

Полный перечень показаний к назначению иммуноферментного исследования очень широк, он включает в себя практически все отрасли медицины.

Чаще всего ИФА применяют для таких целей:

• выявление инфекционных заболеваний;
• диагностика венерических болезней;
• определение иммунного статуса или отдельных аутоиммунных заболеваний;
• идентификация онкомаркеров;
• определение гормонов.

В случае инфекционных и вирусных заболеваний методика позволяет выявить следующие патологии:

• все типы вирусных гепатитов;
• вирус Эпштейна-Барра;
• все TORCH-инфекции;
• все типы кишечных инфекций;
• ВИЧ;
• сифилис;
• большинство паразитарных инфекций;
• хеликобактериоз и пр.

Кроме того, ИФА позволяет быстро и эффективно определить инфарктное состояние, оценить репродуктивный потенциал организма, выявить аллергию, ее источник и пр.

Иммуноферментная методика используется для проведения клинических исследований в ходе разработки новых лекарственных препаратов и в оценке их влияния на организм человека.

Чаще всего исследуемым материалом для иммуноферментного анализа служит кровь, которую берут из локтевой вены пациента. Отбор пробы проводится натощак, преимущественно в утреннее время. После отбора из крови отделяют и убирают те форменные клетки, которые мешают проведению исследования, оставляя только сыворотку.

При диагностировании мочеполовых инфекций часто материалом становятся мазки из слизистых тканей половых органов, слизь из уретры или шейки матки, образцы из прямой кишки, соскобы с эрозий или язв в области паха и с других участков тела. Мазки могут брать и с ротовой полости, а также с носоглотки.

Иногда иммуноферментное обследование используется в акушерской и гинекологической практике во время беременности для определения состояния околоплодных вод. В таком случае образцом становится амниотическая жидкость. Для этого отбирают небольшое количество жидкости, проколов плодный пузырь длинной иглой. Все манипуляции проводят стерильным инструментом, чтобы минимизировать возможные риски.

Нередко материалом становится спинномозговая или серозная жидкость. Это происходит при местной анестезии, которая вводится инъекционно.

Уточнить, какой тип материалов необходим для иммуноферментного анализа, должен специалист, направляющий на исследование. Часто берутся образцы сразу нескольких типов или из разных мест. Про подготовку к сдаче биоматериала пациенту тоже должен рассказать врач, выдающий направление на этот тип обследования.

Для увеличения точности данных, полученных после иммуноферментного обследования, подготовка к отбору материала должна быть такой:

• за 10 суток до исследования исключить антибиотики, противовирусные и антимикотические препараты;
• за сутки необходимо исключить спиртное, курение и прием наркотических веществ;
• в этот же период необходимо избегать физического перенапряжения;
• предупредить специалиста, выписывающего назначение, о всех лекарствах, которые пациент принимает;
• оповестить врача в случае беременности или подозрении на беременность.

Лучше всего, если материалы для тестирования будут отобраны утром натощак.

Если диагностика ставит цель определить состояние гормонального фона, то важно обеспечить себе спокойное состояние накануне и избегать нервного напряжения. Для женщин сдача крови на гормоны четко определяется периодом месячного цикла, о чем будет сказано врачом в момент назначения.

За 2-3 дня до отбора материала нужно исключить из меню жареное и жирное, а перед анализом на гепатит не есть цитрусовые и любые другие фрукты и овощи оранжевого и желтого цвета.

Результат качественного исследования, как правило, обозначается знаками «+» (обнаружено) или «-» (не обнаружено).

По наличию или отсутствию определенных групп иммуноглобулинов можно делать такие выводы:

• JgM (-), JgG (-), JgA (-) — иммунитет к заболеванию полностью отсутствует (с таким типом антигена организм ранее не сталкивался);
• JgM (-), JgG (+), JgA (-) — ранее было столкновение с данным антигеном или с вакциной;
• JgM (+), JgG (-/+), JgA (-/+) — острый патологический процесс (скорее всего первичный);
• JgM (-), JgG (+/-), JgA (+/-) — процесс хронического течения;
• JgM (+), JgG (+), JgA (+) — рецидив;
• JgM (-) — стадия выздоровления.

Количественные значения несут большую информационную нагрузку, но трактовать их способен только лечащий врач, исходя из предыдущих показаний, возраста пациента, норм для каждого конкретного заболевания. Именно по этой причине оценивать результаты самостоятельно нельзя.

Данная методика имеет много разновидностей, в зависимости от которых и определяется срок получения данных на руки. Средняя продолжительность ИФА-диагностики составляет 4-6 часов, что позволяет выдать результаты уже на следующий день.

Самые продолжительные методики занимают до 10 дней, например, в случае выявления ВИЧ-инфекции.

При острой необходимости возможно применение экспресс-методик, при которых ответ получают уже через 1-2 часа.

Поскольку оборудование для проведения такого типа диагностики довольно дорогое, то приобрести его могут не все лаборатории. Кроме того, тесты, содержащие специфические антигены, имеют ограниченный срок годности (обычно около 1 года), поэтому нуждаются в постоянном обновлении.

По этим причинам в государственных медицинских учреждениях ИФА-лаборатории есть далеко не всегда. Чаще всего необходимо обращаться в большие частные медицинские или крупные диагностические центры.

Для проведения ИФА-исследования лаборатория должна иметь специальную лицензию, а персонал и лаборанты должны пройти специальное обучение.

Чаще всего конкретный диагностический центр или лабораторию рекомендует врач, направляющий пациента на обследование.

Цена на данное исследование зависит от региона страны и от уровня клиники, предоставляющей услугу. В Москве минимальная цена за определение одного антигена стартует от 700 руб. Если необходимо выявить сразу несколько иммуноглобулинов, то цена будет суммироваться.

В случае срочного анализа стоимость увеличивается на 150-200 руб. за каждый антиген.

Несмотря на достаточно высокую стоимость, иммуноферментный анализ позволяет сделать обследование пациента максимально информативным и быстрым, что сокращает время до начала лечения и позволяет быстрее стабилизировать состояние человека.

На данном видео представлен фильм «Основы иммуноферментного анализа».

источник