Пцр анализ кала на энтеровирус

Выявление вирусов рода Enterovirus (Echovirus, Сoxsackievirus, Poliovirus), в ходе которого с помощью метода полимеразной цепной реакции (ПЦР) определяется генетический материал (РНК) вируса в образце биоматериала.

Энтеровирусы, энтеровирусная инфекция [полимеразная цепная реакция].

Синонимы английские

EV, RNA [polymerase chain reaction, PCR].

Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Кал, ликвор, мазок из зева (ротоглотки).

Как правильно подготовиться к исследованию?

За 3-4 часа до взятия мазков из зева (ротоглотки) не употреблять пищу, не пить, не чистить зубы, не полоскать рот/горло, не жевать жевательную резинку, не курить. За 3-4 часа до взятия мазков из носа не закапывать капли/спреи и не промывать нос. Взятие мазков оптимально выполнять утром, сразу после ночного сна.
Исключить прием слабительных препаратов, введение ректальных свечей, масел, ограничить (по согласованию с врачом) прием медикаментов, влияющих на перистальтику кишечника (белладонна, пилокарпин и др.), и препаратов, влияющих на окраску кала (железо, висмут, сернокислый барий), в течение 72 часов до сбора кала.

Общая информация об исследовании

Enterovirus – это группа РНК-содержащих вирусов, характеризующихся нуклеокапсидом в форме икосаэдра и отсутствием оболочки. Они относятся к семейству Picornaviridae, в которое также входят возбудитель вирусного гепатита А и риновирус.

Род Enterovirus объединяет несколько десятков различных вирусов, являющихся возбудителями целого спектра заболеваний человека: полиомиелита (Poliovirus), миокардита и перикардита (Сoxsackievirus В), вирусной пузырчатки полости рта и конечностей, герпетической ангины, асептического менингита и энцефалита (Сoxsackievirus A, Echovirus), а также более редких болезней. Для всех вирусов рода Enterovirus характерен схожий патогенез: попадание возбудителя в желудочно-кишечный тракт (фекально-оральный путь передачи), репликация в эпителиальных клетках слизистой оболочки ЖКТ и гематогенное распространение с поражением различных органов и тканей. Учитывая эти особенности заражения, основными биологическими средами для выявления Enterovirus являются отделяемое носоглотки, кал и ликвор. Как правило, острая инфекция Enterovirus протекает бессимптомно или в доброкачественной форме, а клиническая картина заболевания развивается лишь спустя некоторое время после первичного заражения. Эту особенность следует учитывать при выборе вида биоматериала, направляемого на анализ.

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – это метод молекулярной диагностики, позволяющий выявлять в биологическом материале (например, в ликворе) фрагменты генетического материала (РНК) возбудителя инфекции. Она характеризуется высокой чувствительностью и специфичностью, а также позволяет получить результат в более короткие сроки по сравнению с большинством других анализов, что делает ее незаменимым инструментом для своевременной диагностики Enterovirus-ассоциированных инфекций.

ПЦР является «золотым стандартом» исследования ликвора для диагностики Enterovirus-ассоциированного менингоэнцефалита. Чувствительность такого анализа составляет 95-97 %, специфичность – 97-100 %. Благодаря этим преимуществам ПЦР заменила другой прямой метод идентификации возбудителя – выделение вируса в культуре клеток эмбриона. При этом исследование ликвора, полученного в первые 2 дня развития симптоматики менингоэнцефалита, характеризуется меньшей чувствительностью. Следует отметить, что вероятность обнаружить вирус при анализе нестерильных биологических сред (отделяемого носоглотки, кала) меньше, что необходимо учитывать при отрицательном результате анализа у пациента с клиническими признаками Enterovirus-ассоциированной инфекции. Большая частота ложноотрицательных реакций связана с полной элиминацией вируса из клеток ЖКТ к моменту развития симптомов заболевания (период репликации вируса в эпителии глотки составляет от 2 дней до 2 недель, в эпителии кишки – до 3 месяцев). Также ниже и специфичность метода при исследовании нестерильных сред, что связано с возможным «здоровым носительством» Enterovirus, сопутствующим клинически выраженному заболеванию, но не являющимся ее причиной.

ПЦР основана на непосредственном выявлении РНК вируса и может быть применена для выявления Enterovirus на раннем этапе болезни, что отличает ее от серологических (непрямых) методов, требующих около 2-4 недель для оценки динамики уровня выявляемых специфических антител. Однако по этой же причине ПЦР не позволяет различить острую и хроническую энтеровирусную инфекцию.

Благодаря тому, что в ПЦР выявляется общий для всех Enterovirus фрагмент РНК, она позволяет определить наличие любого представителя этого рода. Современные серологические методы разработаны только для 11 из более чем 70 вирусов рода Enterovirus. Однако по этой же причине с помощью ПЦР нельзя различить вирусы рода Enterovirus между собой, что имеет определенное значение в дифференциальной диагностике Enterovirus 71 – и Сoxsackievirus type A 16 – ассоциированного поражения нервной системы.

Диагностиказаболеваний, вызванных вирусами рода Enterovirus, представляет определенные трудности и требует проведения дополнительных лабораторных, а также инструментальных исследований.

Для чего используется исследование?

Для диагностики Enterovirus-ассоциированных инфекций:

менингита;
герпетической ангины;
вирусной пузырчатки полости рта и конечностей;
миоперикардита;
полиомиелита.

Когда назначается исследование?

менингита (головная боль, раздражительность, лихорадка, фотофобия, тошнота и не приносящая облегчения рвота, ригидность затылочных мышц);
герпетической ангины (острое начало заболевания, лихорадка с температурой 39-40 ºС, головная боль, тошнота, рвота, болезненная шейная лимфаденопатия, везикулезная сыпь на слизистой оболочке миндалин, мягкого и твердого неба, боль при глотании);
вирусной пузырчатки полости рта и конечностей у детей (лихорадка, кашель, везикулезная сыпь на коже кистей, стоп и на слизистой оболочке рта);
миоперикардита (одышка, загрудинная боль, усиливающаяся на вдохе и ослабевающая при наклоне вперед, а также периферические отеки и нарушения ритма сердца);
полиомиелита (лихорадка, головная боль, тошнота, боль в животе, парез или паралич конечностей или группы мышц, нарушения глотания, пронации и др.).

Референсные значения: отрицательно.

Enterovirus-ассоциированная инфекция;
носительство Enterovirus.

отсутствие Enterovirus в исследуемом биоматериале.

Что может влиять на результат?

Применение рибавирина и плеконарила может приводить к получению ложноотрицательного результата.
Применение противовирусного иммуноглобулина не влияет на результат исследования.
Анализ ликвора в первые 2 дня менингоэнцефалита, а также исследование отделяемого носоглотки и кала характеризуются большей частотой ложноотрицательных результатов.

Кто назначает исследование?

Инфекционист, невролог, педиатр, стоматолог, врач общей практики.

Sawyer MH. Enterovirus infections: diagnosis and treatment. Semin Pediatr Infect Dis. 2002 Jan;13(1):40-7. Review.
Rhoades RE, Tabor-Godwin JM, Tsueng G, Feuer R. Enterovirus infections of the central nervous system. Virology. 2011 Mar 15;411(2):288-305. Epub 2011 Jan 20.
Ooi MH, Wong SC, Lewthwaite P, Cardosa MJ, Solomon T. Clinical features, diagnosis, and management of enterovirus 71. Lancet Neurol. 2010 Nov;9(11):1097-105.
Smalling TW, Sefers SE, Li H, Tang YW. Molecular approaches to detecting herpes simplex virus and enteroviruses in the central nervous system. J Clin Microbiol. 2002 Jul;40(7):2317-22.
Hsiung GD, Wang JR. Enterovirus infections with special reference to enterovirus 71. J Microbiol Immunol Infect. 2000 Mar;33(1):1-8.

источник

Энтеровирусы, энтеровирусная инфекция [полимеразная цепная реакция].

Синонимы английские

EV, RNA [polymerase chain reaction, PCR].

Полимеразная цепная реакция с обратной транскрипцией (ОТ-ПЦР).

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Как правильно подготовиться к исследованию?

Исключить прием слабительных препаратов, введение ректальных свечей, масел, ограничить прием медикаментов, влияющих на перистальтику кишечника (белладонны, пилокарпина и др.) и на окраску кала (железа, висмута, сернокислого бария), в течение 72 часов до сдачи кала.

Общая информация об исследовании

Исследование ПЦР основано на непосредственном выявлении РНК вируса и может быть применено для выявления Enterovirus на раннем этапе болезни, что отличает его от серологических (непрямых) методов, требующих около 2-4 недель для оценки динамики уровня выявляемых специфических антител. Однако по этой же причине ПЦР не позволяет различить острую и хроническую энтеровирусную инфекцию.

Благодаря тому, что в исследовании ПЦР выявляется общий для всех Enterovirus фрагмент РНК, она позволяет определить наличие любого представителя этого рода. Современные серологические методы разработаны только для 11 из более чем 70 вирусов рода Enterovirus. Однако по этой же причине с помощью ПЦР нельзя различить вирусы рода Enterovirus между собой, что имеет определенное значение в дифференциальной диагностике Enterovirus 71 – и Сoxsackievirus typeA 16 – ассоциированного поражения нервной системы.

Для чего используется исследование?

Для диагностики Enterovirus-ассоциированных инфекций:

менингита;
герпетической ангины;
вирусной пузырчатки полости рта и конечностей;
миоперикардита;
полиомиелита.

Когда назначается исследование?

менингита (головная боль, раздражительность, лихорадка, фотофобия, тошнота и не приносящая облегчения рвота, ригидность затылочных мышц);
герпетической ангины (острое начало заболевания, лихорадка с температурой 39-40 ºС, головная боль, тошнота, рвота, болезненная шейная лимфаденопатия, везикулезная сыпь на слизистой оболочке миндалин, мягкого и твердого неба, боль при глотании);
вирусная пузырчатки полости рта и конечностей у детей (лихорадка, кашель, везикулезная сыпь на коже кистей, стоп и на слизистой оболочке рта);
миоперикардита (одышка, загрудинная боль, усиливающаяся на вдохе и ослабевающей при наклоне вперед, а также периферические отеки и нарушения ритма сердца);
полиомиелита (лихорадка, головная боль, тошнота, боль в животе, парез или паралич конечностей или группы мышц, нарушения глотания, пронации и других).

Референсные значения: отрицательно.

Enterovirus-ассоциированная инфекция;
носительство Enterovirus.

отсутствие Enterovirus в исследуемом биоматериале;
неправильное взятие биоматериала на исследование.

Что может влиять на результат?

Применение рибавирина и плеконарила может приводить к получению ложноотрицательного результата.
Применение противовирусного иммуноглобулина не влияет на результат исследования.
Анализ ликвора в первые 2 дня менингоэнцефалита, а также исследование отделяемого носоглотки и кала характеризуются большей частотой ложноотрицательных результатов.
Присутствие гемоглобина в образце биоматериала может приводить к ложноотрицательному результату.

Общий анализ крови (без лейкоцитарной формулы и СОЭ)
Глюкоза в ликворе
Белок общий в ликворе
Креатинкиназа MB
Креатинкиназа общая
Cytomegalovirus предранний белок IEA, IgM, IgG
Influenza virus A/B (вирусы гриппа А/В), РНК [реал-тайм ПЦР]
ПЦР-диагностика «клещевых» инфекций
Полное серологическое обследование на «клещевые» инфекции
Микроскопическое исследование мазка со слизистой оболочки носа
Streptococcus pyogenes, ДНК [реал-тайм ПЦР]

Кто назначает исследование?

Инфекционист, невролог, педиатр, стоматолог, врач общей практики.

Sawyer MH. Enterovirus infections: diagnosis and treatment. Semin Pediatr Infect Dis. 2002 Jan;13(1):40-7. Review.
Rhoades RE, Tabor-Godwin JM, Tsueng G, Feuer R. Enterovirus infections of the central nervous system. Virology. 2011 Mar 15;411(2):288-305. Epub 2011 Jan 20.
Ooi MH, Wong SC, Lewthwaite P, Cardosa MJ, Solomon T. Clinical features, diagnosis, and management of enterovirus 71. Lancet Neurol. 2010 Nov;9(11):1097-105.
Smalling TW, Sefers SE, Li H, Tang YW. Molecular approaches to detecting herpes simplex virus and enteroviruses in the central nervous system. J Clin Microbiol. 2002 Jul;40(7):2317-22.
Hsiung GD, Wang JR. Enterovirus infections with special reference to enterovirus 71. J Microbiol Immunol Infect. 2000 Mar;33(1):1-8.

Оставьте ваш E-mail и получайте новости, а также эксклюзивные предложения от лаборатории KDLmed

источник

Энтеровирус, ДНК Enterovirus, качественный — определение ДНК Enterovirus в крови, методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с детекцией в режиме «реального времени».

Метод ПЦР позволяет идентифицировать в биологическом материале искомый участок генетического материала и обнаружить единичные молекулы ДНК вируса, не выявляемые другими методами. Принцип метода основан на многократном увеличении числа копий, специфичных для данного возбудителя участка ДНК.

С помощью ПЦР-анализа можно диагностировать инфекцию в остром периоде и выявлять случаи носительства.

Энтеровирусная инфекция
Широкий спектр острых инфекционных заболеваний вызывается РНК-содержащими вирусами, так называемой энтеровирусной инфекцией. Случаи инфицирования довольно часто регистрируются во многих странах мира. Это позволяет предположить, что инфекции этого типа распространены во всем мире.

Основной причиной столь широкого распространения является то, что энтеровирусы — кишечные вирусы. Источником заражения могут быть грязные овощи, вода, руки инфицированных людей и носителей вируса. Вызывающими инфекцию у человека являются следующие типы: Коксаки А, Б, ЕСНО. Вирусы Коксаки и ЕСНО в большинстве случаев диагностируются в микрофлоре кишечника неинфицированных людей так называемое «здоровое носительство».

Опасность энтеровирусной инфекции
Энтеровирусы проявляют повышенный уровень сродства к тканям и органам организма, в связи с чем симптомы и формы заболевания крайне разнообразны. Следует отметить, что клиническая картина заболевания у практически здорового пациента никак не проявляется, то есть не отмечается никаких симптомов.

В группу высокого риска входят люди с пониженным иммунным статусом (больные с онкологией, ВИЧ-положительные) и дети неонатального возраста. Значительная часть фиксируемых случаев заражения энтеровирусной инфекцией — это острые вирусные респираторные инфекции (простудные заболевания).

Симптомы энтеровирусной инфекции
Фенотипы заболевания описываются широчайшим спектром симптомов:

лихорадка;
головная боль;
боль в мышцах;
сыпь;
насморк;
боль в горле;
боли в области сердца, одышка при ходьбе;
боль в животе;
жидкий стул.

При возникновении симптомов, следует немедленно обратиться к специалисту. Наиболее опасны энтеровирусы для детей, так как у них еще не выработан окончательно иммунитет, и они наиболее восприимчивы к инфекции.

Энтеровирусная инфекция обычно становится причиной бессимптомной формы заболевания или вызывать симптомы широкого ряда заболеваний в слабовыраженной форме. Но в то же время, они могут стать причиной таких серьезных заболеваний, как менингит, эпидемическая миалгия (боль в мышцах), миокардит и так далее.

Показания:

подозрение на энтеровирусную инфекцию при тяжелом течении заболевания и необходимости комплексной дифференциальной диагностики;
эпидемиологические исследования при вспышках энтеровирусной инфекции.

Подготовка
Специальная подготовка не требуется. Рекомендуется взятие крови не ранее чем через 4 часа после последнего приема пищи.

Накануне сдачи исследования нужно исключить физические и психоэмоциональные нагрузки.

Забор крови производится в соответствующую пробирку строго до метки.

Условия, соблюдение которых обязательно:

не допускается замораживание;
не допускается длительное хранение (более 5–6 часов);
не пригодны никакие транспортные среды, кроме указанной;
не допускается неплотно закрытый контейнер;
не подлежит исследованию биоматериал, собранный накануне.

Интерпретация результатов
Ответ выдается в качественном формате: «обнаружено» или «не обнаружено».

Референсные значения: не обнаружено.

«Обнаружено»:

энтеровирусная инфекция (до одного месяца от начала заболевания);
носительство энтеровирусов.

«Не обнаружено»:

отсутствие РНК энтеровирусов в исследуемом материале;
концентрация РНК энтеровирусов в исследуемом материале ниже предела детекции.

источник

Кал для исследования собирается в одноразовую стеклянную или пластиковую посуду (контейнер можно получить в регистратуре CMD), в объеме, равном 1/2 чайной ложки из средней части фекальной массы.

Нельзя собирать кал в памперсы, после клизмы, после введения ректальных свечей или приема медикаментов, влияющих на перестальтику кишечника, с примесями мочи или выделений из половых органов.

Доставка в лабораторию в день взятия материала.

Данное исследование предназначено для выявления энтеровирусов человека (Human enterovirus) кластеров A, B, C и D; в том числе вирусов Коксаки A и B, но без дифференцировки по кластерам. Информация о наличии или отсутствии именно вирусов Коксаки не может быть отражена в результате.

Энтеровирусная инфекция широко распространена во всех регионах мира.

Вирус Коксаки относится к энтеровирусным инфекциям. Энтеровирусы хорошо переносят низкие температуры, сохраняются в воде. Источником инфекции является только человек — больной или бессимптомный носитель. Передача инфекции происходит через пищевые продукты, воду, контактно-бытовым, воздушно-капельным путем. Инкубационный период варьирует от 2 до 35 дней, в среднем – до 7 дней. Наиболее интенсивное выделение возбудителя происходит в первые дни болезни. Вирус выделяется с фекалиями в течение 3 — 4 недель (не более 5 недель), а у иммунодефицитных лиц может выделяться в течение нескольких лет.

У человека энтеровирусная инфекция может протекать бессимптомно или сопровождаться различными клиническими проявлениями: от легкого недомогания или диарейного синдрома до развития тяжелых заболеваний (серозный менингит, паралич, миокардит, сепсис новорожденных). Наиболее подвержены заболеванию дети младшего возраста.

Обследование детей в случае возникновение групповой заболеваемости в детском организованном коллективе при наличии диарейного, респираторного синдрома

Референсные значения (вариант нормы):

Параметр	Референсные значения
РНК Enterovirus	Не обнаружено

Внимание! В графе «Результат» на бланке ответа предоставлена информацию о наличии или отсутствии энтеровирусов человека без уточнения по кластеру, т.е. информация о наличии или отсутствии именно вирусов Коксаки не может быть отражена в результате.

Интерпретация результата проводится с учетом факта высокой частоты бессимптомного носительства энтеровируса в популяции.

Обнаружение РНК энтеровируса может служить подтверждением инфекции во время вспышки при наличии у пациента клинической картины.

Обращаем Ваше внимание на то, что интерпретация результатов исследований, установление диагноза, а также назначение лечения, в соответствии с Федеральным законом ФЗ № 323 «Об основах защиты здоровья граждан в Российской Федерации», должны производиться врачом соответствующей специализации.

» [«serv_cost»]=> string(3) «570» [«cito_price»]=> NULL [«parent»]=> string(2) «25» [10]=> string(1) «1» [«limit»]=> NULL [«bmats»]=> array(1) array(3) string(1) «N» [«own_bmat»]=> string(2) «12» [«name»]=> string(6) «Кал» > > >

Доставка в лабораторию в день взятия материала.

Энтеровирусная инфекция широко распространена во всех регионах мира.

Обследование детей в случае возникновение групповой заболеваемости в детском организованном коллективе при наличии диарейного, респираторного синдрома

Референсные значения (вариант нормы):

Параметр	Референсные значения
РНК Enterovirus	Не обнаружено

источник

Анализ кала на энтеровирус методом полимеразной цепной реакции– это высокочувствительный и быстрый способ выявления присутствия вируса Enterovirus в биологическом материале больного. Суть ПЦР заключается в обнаружении РНК вирусов в образце кала.

Полимеразная цепная реакция является сегодня основным методом верификации любых вирусных инфекций, что объясняется ее специфичностью и невозможностью получить ложноположительный результат. Скорость получения окончательного ответа сделала возможной диагностику инфекционного заболевания на ранних этапах и, благодаря чему, ПЦР вытесняет серологические исследования.

Сроки выполнения	1 день
Cинонимы (eng)	Polymerase Chain Reaction Enterovirus
Методы	Полимеразная цепная реакция.
Единицы измерения	Не существует. Тест качественный: результат может быть либо положительным, либо отрицательным
Подготовка к исследованию	Для сдачи анализа кала необходима специальная стерильная тара.
	Кал берется на высоте клинических проявлений.
	За 3 суток до получения биоматериала необходимо прекратить пользоваться любыми свечами и слабительными препаратами.
	Исключить препараты белладонны, влияющие на перистальтику.
	Исключить попадание крови или других биологических субстанций в материал.
Тип биоматериала и способы его взятия	Кал.

Анализ кала на Enterovirus методом ПЦР относится к разновидности вирусологической диагностики и назначается по следующим показаниям:

Есть подозрение на энтеровирусный менингит.
Объективные симптомы герпетической ангины: воспалительные пузырьки на мягком небе.
Миокардит неясной этиологии.
Признаки полиомиелита: лихорадка, параличи и парезы лицевого нерва или нижних конечностей, боли в животе.
Симптомы гастроэнтерита (спастические явления в животе, диарея, рвота, умеренное повышение температуры).

Кал следует сдавать до начала лечения противовирусными препаратами и не ранее, чем через 12 часов после отмены.

Обычно материал собирается после самостоятельной дефекации без применения клизм и слабительных. Приобретается одноразовая стерильная емкость с широким горлышком, которую необходимо заполнить не более чем на треть. Лаборатория может предложить собственную стерильную посуду. Не желательно попадание в пробы мочи или крови, поэтому рекомендуется воздержаться от сдачи анализа в дни менструации. Для ПЦР забор биоматериала должен проводиться в период максимальных клинических проявлений инфекции. Использовать следует одноразовую стерильную лопатку. Рекомендуется избегать сбора кала непосредственно из унитаза, так как это предмет общего пользования, а дезинфектанты могут вызвать разрушение вирусной РНК.

При необходимости, возможно хранение контейнера с калом в камере холодильника в течение 3 часов или в морозилке при -20⁰Cне более 8 часов.

Направляют специалисты, в чьей практике могут встречаться заболевания, вызванные энтеровирусами: педиатры, неврологи, инфекционисты, кардиологи, семейные врачи и даже стоматологи.

По результатам ПЦР лаборатория может предоставить следующие возможные ответы:

положительный результат –диагностируется заболевание, вызванное энтеровирусом;
носительство вируса;
отрицательный результат – генетический материал в представленном образце отсутствует.

Причины ложноотрицательного результата

Изредка исследование может давать ложноотрицательные результаты. Это происходит в случае:

применения противовирусных препаратов, блокирующих РНК вируса;
наличия крови в образце.

Анализы Вопрос: Здравствуйте у мужа нашли половую инфекцию Enterococcus faecalis, какие анализы мне нужно сдать ?

уточнить цену Вопрос: Добрый день. Подскажите пожалуйста, мне нужно сдать комплекс анализов, однако в прейскуранте не все нашла. Рассчитайте мне какова сумма на сдачу данных анализов: Комплекс «Безопасный секс» +кровь на ВПГ1.2.6 ТИПЫ И цмви (Lg M и G). спасибо.

источник

Анализ на энтеровирусную инфекцию является одним из распространенных лабораторных методов в силу частого заражения этим возбудителем. Для уточнения диагноза используются различные способы диагностики.

Чтобы подтвердить диагноз энтеровирусной инфекции, применяют методы лабораторной диагностики: специфические вирусологические методики.

Инфекцию может вызвать содержащий рнк энтеровирус или семейство аденовирусов, которые поражают как слизистую оболочку кишечника, так и ткани верхних дыхательных путей, глаз. По этой причине материалом для исследования является не только кал, но и смывы с носоглотки и конъюнктивы.

Если подозревается энтеровирусная инфекция, диагностика проводится в первые дни от начала заболевания, когда концентрация вирусов является наибольшей.

Чтобы дифференцировать инфекцию применяются такие серологические методы:

определение иммуноглобулинов к вирусу;
выделение аденовирусов в кале;
ПЦР-диагностика;
иммунофлуоресцентный метод.

Особенностью при инфицировании аденовирусной инфекцией является длительное выделение возбудителя и вирусоносительство после исчезновения симптомов болезни. По этой причине через 2-3 недели после заболевания обследование необходимо повторить, что важно для профилактики повторного заражения в коллективе. Инфицированию больше подвержены дети в возрасте до 14 лет.

Определение антител (иммуноглобулинов) к аденовирусам проводится методом иммуноферментного анализа (ИФА). Такая диагностика основана на способности организма вырабатывать защитные белки (антитела, иммуноглобулины) в ответ на заражение. С помощью специально подобранных реактивов можно определить наличие антител к определенному типу возбудителя. Кроме диагностики аденовирусной инфекции в целом, можно определить серотип возбудителя.

Для сдачи анализа в стерильную емкость набирается венозная кровь. Забор материала необходимо проводить натощак, а интервал после приема пищи должен быть не меньше 8 часов. За 24 часа до исследования нельзя принимать алкоголь. Для профилактики искажений результата не стоит проводить анализ после физиотерапевтических процедур, флюорографии и других рентгенологических исследований.

Позитивный результат подтверждается наличием иммуноглобулинов класса IgG. Эти антитела образуются в крови человека разу после заражения, а в периоде острой фазы болезни концентрация их резко повышается.

Метод парных сывороток – это диагностический способ определить острую фазу энтеровирусной инфекции в течение первых 2-х недель от заражения. Для этого исследуется динамика нарастания концентрации антител с интервалом от 10 дней до 2 недель. В случае значительного роста подтверждается наличие свежей инфекции. Чувствительность такого метода составляет 90%.

Кроме того, рост IgG отмечается при реактивации латентной инфекции. По мере выздоровления концентрация антител в крови падает, но они циркулируют еще продолжительно время, указывая на перенесенную инфекцию.

Стойкого иммунитета к энтеровирусной инфекции нет, а при повторном заражении отмечается повторный стремительный рост специфических IgG.

Энтеровирусы и аденовирусы вызывают кишечные формы заболевания или по мере развития инфекции она распространяется на слизистую оболочку кишечника, вызывая характерные симптомы.

Из-за недостаточного выполнения норм личной гигиены инфекцией чаще заражаются маленькие дети, у которых распространенным путем передачи является фекально-оральный.

К высокой температуре, явлениям катара верхних дыхательных путей и конъюнктивита присоединяется учащенное испражнение. Больного беспокоит диарея, водянистый светлый кал, боли в животе.

Такие симптомы являются показанием для лабораторной диагностики энтеровируса. Исследование необходимо проводить не позже 3 – 5 дня после появления симптомов. Через неделю болезни концентрация энтеровируса в кале уменьшается, что может снижать качество диагностики.

Тем не менее после выздоровления переболевший является источником инфекции, так как отмечается вирусоносительство, а возбудитель продолжает выделяться с калом.

Анализ также проводится для выделения конкретного возбудителя – для человека патогенными считаются несколько серотипов вируса.

Перед сдачей анализа необходимо помочиться, чтобы исключить попадание мочи в исследуемый материал. Для диагностики необходим свежий стул не более 15 г. Его набирают в специальный контейнер. Анализ должен пройти лабораторную диагностику не позже чем через 3 часа после забора материала.

Перед сбором кала нельзя применять любые препараты, влияющие на работу кишечника (слабительные или закрепляющие), а также делать клизмы. Прием дополнительных препаратов накануне забора материала, примеси мочи или других биологических жидкостей могут повлиять на конечный результат, сделав его недостоверным.

Результатом диагностики является положительный или отрицательный ответ. В первом случае врач может подтвердить диагноз и приступить к целенаправленному лечению болезни. В случае негативного результата, но при продолжающихся симптомах необходимо повторное проведение исследования.

Диагностика энтеровирусной инфекции современной методикой цепной полимеразной реакции является одним из наиболее достоверных и быстрых способов.

Этот тест основан на обнаружении вирусной ДНК в крови человека или мазке из зева. С его помощью возможна как диагностика острых форм болезни, так и определение вирусоносительства.

Анализ на энтеровирус методом ПЦР является “золотым стандартом” вирусологической диагностики. Этим способом проводится дифференциальная диагностика энтеровирусной инфекции.

Больной не нуждается в специальной подготовке, однако перед забором материала необходимо следовать некоторым правилам:

исследование рекомендовано проводить натощак и с интервалом не менее 8 часов после еды;
желательно не принимать какие-либо препараты за сутки до сдачи крови;
отказ от приема алкоголя за день до исследования и курения не менее чем за час до забора крови;
отказ от физических и психических перенапряжений накануне диагностики;

Нежелательно осуществлять забор крови после физиотерапевтического лечения или инструментальных исследований. В случае проведения биопсии следует сделать паузу на несколько дней.

Если доктор назначил проведение повторного лабораторного исследования, желательно делать это в одинаковых условиях: в той же лаборатории, в одно и то же время.

Метод иммунофлюоресценции основан на реакции со специальными реагентами, которые помечены красителем. Он применяется в рамках ранней диагностики энтеровирусной инфекции. Для исследования проводят соскоб со слизистой носа.

При определении энтеровирусов в организме человека во время микроскопии мазок подсвечивают ультрафиолетовыми лучами. Этот метод является способом экспресс-диагностики инфекции.

Специальные реактивы содержат антитела против энтеровирусов. При связывании антигенов и антител образовавшиеся комплексы становятся хорошо видимыми в ультрафиолетовом свете.

Такой тест имеет три разновидности:

Для проведения прямого способа диагностики к материалу анализа добавляют люминесцентный реактив. Образовавшиеся комплексы рассматривают через флуоресцентный микроскоп. При том анализе определяют наличие вирусных антигенов.

Тест при непрямой реакции определяет наличие антител в собранном материале. Реагентом выступает специальный антиген, который взаимодействует с антителами, выработанными в организме человека.

При конкурентном способе исследуют наличие вирусных антигенов. Отличие способа состоит в добавлении двух реагентов: антител и специальных меченых антигенов, которые конкурируют в реакции связывания.

Точное диагностирование энтеровирусной инфекции необходимо для дифференциального диагноза и правильного назначения терапии. Современные методы позволяют сделать это быстро и качественно.

источник

Время: 4 раб. дн.

Цена в Вашем городе: 260грн.

Описание анализа:

Энтеровирус (методом ПЦР) – исследование, применяемое для выявления в образце, взятом из организма пациента, представителей группы энтеровирусов. Энтеровирусы распространены повсеместно, они устойчивы к воздействию этилового спирта и моющих средств, при комнатной температуре сохраняют жизнеспособность в течение нескольких дней.

В род энтеровирусов входит несколько десятков родственных видов, вызывающих у человека различные заболевания: полиомиелит, миокардит, перикардит, герпетическую ангину, асептический менингит и энцефалит. Название вирусам дано из-за того, что все они после попадания в организм, размножаются в желудочно-кишечном тракте.

Все энтеровирусы передаются фекально-оральным путем, проникновение происходит через пищеварительную систему, где происходит размножение вируса. В дальнейшем он разносится с током крови, поражая различные органы и ткани. Острая энтеровирусная инфекция протекает в доброкачественной форме (повышение температуры, воспаление верхних дыхательных путей) или вообще без проявлений, симптомы поражения какого-либо из органов возникают лишь со временем.

Лабораторный анализ методом ПЦР заключается в выявлении генетического материала (РНК) энтеровируса, которое возможно даже на ранних этапах заболевания. Это делает ПЦР-исследование оптимальным методом лабораторной диагностики, так как серологические исследования, выявляющие антитела, на ранних сроках не информативны.

В рамках исследования идет поиск одного фрагмента РНК, общего для всех представителей рода энтеровирусов, а потому анализ позволяет выявить любого из них, включая 3 типа вируса полиомиелита, 23 типа вируса Коксаки А, 6 типов вируса Коксаки В, 31 тип эховирусов и 4 – энтеровирусов.

Показания к назначению

Анализ может назначаться инфекционистом, неврологом, педиатром, терапевтом и стоматологом в случае:

симптомов менингита (головной боли, ригидности затылочных мышц, раздражительности, тошноты и лихорадки);
проявлений герпетической ангины (везикулезных (в виде пузырьков) высыпаний на миндалинах и нёбе, повышения температуры до 39-40 С, головной боли, тошноты, рвоты, болезненного увеличения шейных лимфоузлов);
признаков вирусной пузырчатки полости рта и конечностей у детей (везикулезных высыпаний на слизистой полости рта, коже кистей и стоп, лихорадки, кашля);
симптомов миоперикардита (нарушений ритма сердца, загрудинной боли (усиливающейся на вдохе и ослабевающей при наклоне вперед), одышки, лихорадки, головной боли, периферических отеков);
проявлений полиомиелита (пареза или паралича мышц, нарушений глотания, головной боли, тошноты, боли в животе и пр.).

Значение результатов

Если РНК энтеровирусов обнаружено, значит, тест положителен – у пациента энтеровирусная инфекция, либо же он является бессимптомным носителем. Если генетического материала вирусов не обнаружено, значит, анализ отрицателен, а пациент здоров.

Ложноотрицательный результат возможен при приеме плеконарила, рибавирина, а также в случае присутствия в образце гемоглобина.

Подготовка к обследованию: не нужна.

Материал для исследования: соскоб с ануса, кал.

Метод исследования: полимеразная цепная реакция (ПЦР).

Срок проведения: 4 рабочих дня.

источник

Энтеровирусные инфекции – большая группа острых инфекционных заболеваний, характеризующихся лихорадкой и полиморфизмом клинических симптомов, обусловленных поражением ЦНС, сердечно-сосудистой системы, ЖКТ, мышечной системы, легких, печени, почек и др. органов.
Возбудителями заболевания являются энтеровирусы Коксаки А, В и ЭКХО. Это РНК-содержащие вирусы, малых размеров (18–30 нм), длительно сохраняются во внешней среде и пищевых продуктах, чувствительны к нагреванию свыше 56°С, хлорсодержащим дезинфицирующим растворам, ультрафиолетовому облучению. Размножаются на культуре тканей, обладают цитопатогенным действием.
Источник инфекции – больной человек или вирусоноситель.
Выделение энтеровирусов с фекалиями происходит с первого дня болезни и на протяжении двух недель, из носоглотки – в течение первой недели болезни. Длительность вирусоносительства после перенесенной инфекции от 5 до 15 мес.
Механизмы передачи инфекции – фекально-оральный, воздушно-капельный, трансплацентарный.
Восприимчивость к энтеровирусным инфекциям всеобщая и высокая, но чаще болеют дети в возрасте от 3 до 10 лет. Инфекция высококонтагиозная, может протекать как спорадически, так и в виде групповых вспышек в детских коллективах; сезонность – весенне-летне-осенняя. Иммунитет нестойкий, типоспецифический.
Входные ворота инфекции – слизистые оболочки верхних дыхательных путей или пищеварительного тракта, где вирус размножается, накапливается и вызывает местную воспалительную реакцию, что проявляется симптомами герпетической ангины, ОРЗ, фарингита или кишечной дисфункцией. В результате последующей вирусемии вирусы гематогенно разносятся по всему организму и оседают в различных органах и тканях.
Тропность энтеровирусов к нервной ткани, мышцам, эпителиальным клеткам обусловливает многообразие клинических форм инфекции. При проникновении вируса в ЦНС возможно ее поражение с развитием асептического менингита, менингоэнцефалита или паралитических полиомиелитоподобных форм.
Вирусы ЭКХО обычно не диссеминируют из мест первичного проникновения, лишь иногда гематогенно заносятся в другие органы.
Клинические проявления энтеровирусных инфекций
Инкубационный период длится от 2-х до 7 дней. Начало заболевания острое, внезапное, бурное, температура быстро повышается до 39°–40° С, нередко с ознобом. Больных беспокоят сильная головная боль, головокружение, расстройство сна. Характерен внешний вид больного – яркие щеки и губы, гиперемия конъюнктив, инъекция сосудов склер, бледный носогубный треугольник. Часто отмечаются боли в животе, тошнота, могут быть рвота, диарея или запоры. Течение большинства форм доброкачественное, длительностью 3–7 дней, но склонное к рецидивам и волнообразному течению.
Выделяют несколько клинических форм энтеровирусной инфекции, которые могут быть либо единственным проявлением болезни либо комбинироваться с другими формами.
1. Герпетическая ангина. В первые сутки заболевания появляются красные папулы, которые располагаются на умеренно гиперемированной слизистой небных дужек, язычка, мягком и твердом нёбе, быстро превращаются в везикулы размером 1–2 мм, числом от 3–5 до 15–18, не сливающиеся между собой. Через 1–2 дня пузырьки вскрываются с образованием эрозий либо бесследно рассасываются к 3–6 дню болезни. Боль при глотании отсутствует или незначительная, иногда появляется слюнотечение. Увеличение шейных и подчелюстных лимфоузлов небольшое, но пальпация их болезненна.
2. Эпидемическая миалгия (болезнь Борнхольма, «чертова пляска», плевродиния). Характеризуется острыми болями с локализацией в мышцах передней брюшной стенки живота, нижней части грудной клетки, спине, конечностях. Боли носят приступообразный характер, продолжительностью от 30–40 секунд до 15–20 минут, повторяются на протяжении нескольких дней, могут носить рецидивирующий характер, но уже с меньшей интенсивностью и продолжительностью.
Менингеальный синдром сохраняется от 2–3 дней до 7-10 дней, санация ликвора происходит на 2-й — 3-й неделе. Возможны остаточные явления в виде астенического и гипертензионного синдромов.
Из других неврологических симптомов при менингите энтеровирусной этиологии могут быть расстройства сознания, повышение сухожильных рефлексов, отсутствие брюшных рефлексов, нистагм, клонус стоп, кратковременные глазодвигательные расcтройства.
4. Паралитические формы энтеровирусной инфекции отличаются полиморфизмом: могут развиться спинальная, бульбоспинальная, понтинная, полирадикулоневрическая формы. Чаще других встречается спинальная форма, которая характеризуется развитием острых вялых параличей одной или обеих ног, реже – рук с выраженным болевым синдромом мышечного характера. Течение этих форм легкое, не оставляет стойких парезов и параличей.
5. Энтеровирусная лихорадка (малая болезнь, 3-х дневная лихорадка). Это наиболее частая форма энтеровирусной инфекции, но трудно диагностируемая при спорадической заболеваемости. Характеризуется кратковременной лихорадкой без выраженных симптомов локальных поражений. Протекает с умереными общеинфекционными симптомами, самочувствие нарушено мало, токсикоза нет, температура сохраняется 2–4 дня. Клинически может быть диагносцирована при наличии вспышки в коллективе, когда встречаются и другие формы энтеровирусной инфекции.
6. Энтеровирусная экзантема («бостонская лихорадка»). Характеризуется появлением с 1-го – 2 дня болезни на лице, туловище, конечностях высыпаний розового цвета, пятнисто- или пятнисто-папулезного характера, иногда могут быть геморрагические элементы. Сыпь держится 1–2 дня, реже – дольше и исчезает бесследно.
7. Кишечная (гастроэнтеритическая) форма. Протекает с водянистой диареей до 5–10 раз в сутки, болями в животе, метеоризмом, нечастой рвотой. Симптомы интоксикации умеренные. У детей до 2-х летнего возраста кишечный синдром часто сочетается с катаральными явлениями со стороны носоглотки. Продолжительность болезни у детей раннего возраста в течение 1–2-х недель, у детей старшего возраста 1–3 дня.
8. Респираторная (катаральная) форма проявляется слабо выраженными катаральными явлениями в виде заложенности носа, ринита, сухого редкого кашля. При осмотре выявляется гиперемия слизистой ротоглотки, мягкого нёба и задней стенки глотки. Могут отмечаться легкие диспепсические расстройства. Выздоровление наступает через 1–1,5 недели.
9. Миокардит, энцефаломиокардит новорожденных, гепатит, поражение почек, глаз (увеит) – эти формы энтеровирусной инфекции у детей встречаются редко. Клиническая диагностика их возможна только при наличии манифестных форм энтеровирусной инфекции или эпидемических вспышек заболевания. Чаще они диагносцируются при проведении вирусологических и серологических исследований.

Где можно сдать? В любом медицинском офисе лаборатории ГЕМОХЕЛП.

Процедура взятия биоматериала оплачивается отдельно и зависит от типа материала:

источник

С помощью ПЦР-анализа можно диагностировать инфекцию в остром периоде и выявлять случаи носительства.

Симптомы энтеровирусной инфекции
Фенотипы заболевания описываются широчайшим спектром симптомов:

лихорадка;
головная боль;
боль в мышцах;
сыпь;
насморк;
боль в горле;
боли в области сердца, одышка при ходьбе;
боль в животе;
жидкий стул.

Показания:

подозрение на энтеровирусную инфекцию при тяжелом течении заболевания и необходимости комплексной дифференциальной диагностики;
эпидемиологические исследования при вспышках энтеровирусной инфекции.

Накануне сдачи исследования нужно исключить физические и психоэмоциональные нагрузки.

Забор крови производится в соответствующую пробирку строго до метки.

Условия, соблюдение которых обязательно:

не допускается замораживание;
не допускается длительное хранение (более 5–6 часов);
не пригодны никакие транспортные среды, кроме указанной;
не допускается неплотно закрытый контейнер;
не подлежит исследованию биоматериал, собранный накануне.

Интерпретация результатов
Ответ выдается в качественном формате: «обнаружено» или «не обнаружено».

Референсные значения: не обнаружено.

«Обнаружено»:

энтеровирусная инфекция (до одного месяца от начала заболевания);
носительство энтеровирусов.

«Не обнаружено»:

отсутствие РНК энтеровирусов в исследуемом материале;
концентрация РНК энтеровирусов в исследуемом материале ниже предела детекции.

источник

Определение ДНК энтеровирусаметодом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с детекцией в режиме «реального времени».

Enterovirus – группа РНК-содержащих вирусов, относятся к семейству Picornaviridae, в которое также входят возбудитель вирусного гепатита А и риновирус.

Род Enterovirus объединяет несколько десятков различных вирусов, являющихся возбудителями целого спектра заболеваний человека: полиомиелита (Poliovirus), миокардита и перикардита (Сoxsackievirus В), вирусной пузырчатки полости рта и конечностей, герпетической ангины, асептического менингита и энцефалита (Сoxsackievirus A, Echovirus), а также более редких болезней. Для всех вирусов рода Enterovirus характерен схожий патогенез: воздушно-капельный или фекально-оральный путь передачи, попадание возбудителя в желудочно-кишечный тракт (ЖКТ), репликация вируса в эпителиальных клетках слизистой оболочки ЖКТ и гематогенное распространение с поражением различных органов и тканей. Учитывая эти особенности заражения, основными биологическими средами для выявления Enterovirus являются отделяемое носоглотки, кал и ликвор. Как правило, острая инфекция Enterovirus протекает бессимптомно или в доброкачественной форме, а клиническая картина заболевания развивается лишь спустя некоторое время после первичного заражения. Эту особенность следует учитывать при выборе вида биоматериала, направляемого на анализ.

Вспышка энтеровирусных инфекций приходится на осенне-летний период. Чаще болеют дети от 3 до 10 лет; грудные дети болеют редко, так как получают иммуноглобулины с молоком матери. Основные периоды энтеровирусной инфекции: инкубационный (скрытый) период, длительность от 3 до 10 дней; период выраженных клинических проявлений; период реконвалесценции, или выздоровления. В зависимости от возбудителя заболевания, состояния иммунной системы человека, длительность и тяжесть течения заболевания у каждого человека различная. Первые симптомы энтеровирусной инфекции: признаки общего недомогания (головная боль, слабость, вялость); повышение температуры тела; гиперемия (покраснение) верхней половины туловища (лица, шеи, мягкого неба и дужек); появление на коже сыпи; увеличение шейных и подмышечных лимфатических узлов); тошнота, рвота, диарея. Группы основных клинических проявлений энтеровирусной инфекции: энтеровирусная лихорадка — характерно повышение температуры, слабо выраженные катаральные явления. Поражения кожи и слизистых оболочек: энтеровирусная сыпь (появляется после снижения температуры, пятнистая, розовая, не проходит в течение нескольких суток); герпангина (характеризуется появлением везикул на небе, задней стенке глотки, небных дужках, миндалинах, после вскрытия везикул образуются эрозии с белым налетом и красным ободком); поражение слизистой глаза (конъюктивит, чаще всего геморрагический). Поражения опорно-двигательного аппарата: плевродиния (характеризуется появлением резких мышечных болей — обычно поражаются мышцы груди, живота, спины, конечностей; боль носит приступообразный характер, продолжительность — 3-5 мин.). Поражение центральной нервной системы: менингит, энцефалит. Поражение органов дыхания: верхние дыхательные пути — фарингит, ларингит, трахеит, пневмония. Поражение сердечно-сосудистой системы: миокардиты; перикардиты.

Специфической профилактики энтеровирусной инфекции не существует. Неспецифическая профилактика включает соблюдение правил личной гигиены, тщательное мытье рук с мылом, соблюдение правил гигиены при приготовлении еды: раздельное использование разделочного кухонного инвентаря (ножей, досок) для готовых к употребления и сырых продуктов; тщательное мытье фруктов, ягод.

Для выявления возбудителя при подозрении на Enterovirus-ассоциированную инфекцию применяют серологические тесты, выделение вируса в культуре клеток и молекулярную диагностику. ПЦР характеризуется высокой чувствительностью и специфичностью, а также позволяет получить результат в более короткие сроки по сравнению с большинством других анализов, что делает ее незаменимым инструментом для своевременной диагностики Enterovirus-ассоциированных инфекций.

Следует отметить, что отрицательный результат анализа у пациентов с клиническими признаками Enterovirus-ассоциированной инфекции может быть связан с полной элиминацией вируса из клеток ЖКТ к моменту развития симптомов заболевания (период репликации вируса в эпителии глотки составляет от 2 дней до 2 недель, в эпителии кишки – до 3 месяцев).

Исследование рекомендуется проводить до начала приема противовирусных препаратов (рибавирина и плеконарила). При исследовании кала исключить прием слабительных препаратов, введение ректальных свечей, масел, ограничить прием медикаментов, влияющих на перистальтику кишечника (белладонна, пилокарпин и др.) и на окраску кала (железо, висмут, сернокислый барий), в течение 72 часов до сбора кала.

Кал собирается в стерильный контейнер с завинчивающейся крышкой и ложечкой в количестве не более 1/3 объёма контейнера. Материал должен быть доставлен в лабораторию в день сбора. Во время сбора избегать примесей мочи, отделяемого половых органов.

Соскобы из глотки берутся натощак (через 2-3 часа после последнего приема пищи).

Материал для исследования: кал, соскобы со слизистой задней стенки глотки.

Диагностика Enterovirus-ассоциированных инфекций (менингит, герпетическая ангина, вирусная пузырчатка полости рта и конечностей, миоперикардит, полиомиелит).

Интерпретация результатов содержит аналитическую информацию для лечащего врача. Лабораторные данные входят в комплекс всестороннего обследования пациента, проводимого врачом и не могут быть использованы для самодиагностики и самолечения.

Тест является качественным. Результат выдаётся в терминах «обнаружено» или «не обнаружено».

«не обнаружено»: в анализируемом образце биологического материала не найдено фрагментов РНК, специфичных для Enterovirus.

«обнаружено»: в анализируемом образце биологического материала найдены фрагменты РНК, специфичные для Enterovirus.

источник