Анализ на чувствительность к антибиотикам является обязательным при возникновении у врача подозрений, что заболевание пациента имеет бактериальную природу. Это связано с тем, что медики пытаются контролировать назначение данных препаратов, чтобы не стимулировать мутации и не вызывать резистентность у микроорганизмов.
Анализ на чувствительность к антибиотикам – это лабораторный способ выявления препарата, который будет оказывать наибольшее действие на патогенную флору в данном конкретном случае болезни.
На данный момент антибактериальная терапия применяется достаточно широко там, где она нужна, а также в тех случаях, когда это совсем не обязательно, для перестраховки от возможных осложнений. Например, после кесарева сечения, лапароскопических операций, удаления конкрементов из почек или мочеточников и т. д.
Фармацевтическая промышленность может предложить широкий выбор препаратов как в плане цены, так и в плане действенности. Для того чтобы не «тыкать пальцем в небо» и назначить эффективный антибиотик, нужно провести посевы на чувствительность.
Перед тем как врач подберет терапию, пациенту необходимо сдать некоторые анализы. Посев на чувствительность к антибиотикам назначается, если необходимо определить лекарство, которое в данном случае будет наиболее уместно. Чаще всего это исследование назначается для лечения заболеваний, передающихся половым путем, или ЗППП. Для детей же необходимость в определении антибиотика – это обязательное условие.
Кроме того, определение чувствительности нужно, чтобы избежать устойчивости бактерий к лечению. Если пациента недавно лечили антибиотиками, и теперь вновь необходим повторный курс, то требуется замена препарата. Это позволит использовать меньшие дозы лекарства и не вызывать мутации у возбудителя. В гнойных хирургических отделениях антибиотики меняют каждые два-три месяца.
Данный анализ необходим еще в том случае, если на основную группу антибиотиков у больного возникает аллергическая реакция.
Анализ мочи на чувствительность к антибиотикам, и не только ее, можно провести несколькими способами. Первый из них – это метод дисков. Проводят его следующим образом. В чашку Петри заливают агар, а когда он застынет, специальным инструментом наносят исследуемый материал. Затем по поверхности агара раскладывают бумажные диски, пропитанные антибиотиками. После чашку закрывают и ставят в термостат. Постепенно диск погружается в желатин, а антибиотик диффундирует в окружающее пространство. Вокруг бумаги образуется зона «подавления роста». Чашки проводят в термостате двенадцать часов, затем их вынимают и измеряют диаметр вышеуказанной зоны.
Второй способ – это метод Е-теста. Он похож на предыдущий, но вместо бумажных дисков используют полоску, которая на своем протяжении в разной степени пропитана антибиотиком. После двенадцати часов экспозиции в термостате чашку Петри достают и смотрят, в каком месте зона подавления роста соприкасается с полоской бумаги. Это будет наименьшая концентрация препарата, которая необходима для лечения заболевания.
Достоинством этих тестов является быстрота и простота их проведения.
Анализ на флору и чувствительность к антибиотикам можно провести и другим способом. Этот метод основан на последовательном уменьшении концентрации антибиотика (от максимальной до минимальной) с целью определить, в какой из пробирок прекратится сдерживание роста бактерий.
Сначала подготавливают растворы препарата. Затем их вносят в жидкую среду с бактериями (бульон или агар). Все пробирки на ночь (то есть 12 часов) помещаются в термостат при температуре 37 градусов, а утром проводят анализ получившихся результатов. Если содержимое пробирки или чашки Петри мутное, это свидетельствует о росте бактерий и, следовательно, неэффективности антибиотика в данной концентрации. Первая пробирка, в которой визуально не будет определяться рост колоний микроорганизмов, будет считаться достаточной концентрацией для лечения.
Это разведение препарата принято называть минимальной подавляющей концентрацией (МПК). Она измеряется в миллиграммах на литр или микрограммах на миллилитр.
Анализ на чувствительность к антибиотикам нужно уметь не только правильно сделать, но и грамотно расшифровать. Основываясь на получаемых результатах, все микроорганизмы делят на чувствительные, умеренно резистентные и резистентные. Для того чтобы различать их между собой, используются условные пограничные концентрации препаратов.
Эти значения не являются постоянными и могут изменяться в зависимости от приспосабливаемости микроорганизмов. Разработкой и пересмотром этих критериев поручено заниматься химиотерапевтам и микробиологам. Одной из официальных структур такого рода является Национальный комитет по клиническим лабораторным стандартам США. Разработанные ими стандарты признаны во всем мире для использования в оценке активности антибиотиков, в том числе для рандоминизированных многоцентровых исследований.
Различают два подхода к оценке результатов анализа на чувствительность к антибиотикам: клинический и микробиологический. Микробиологическая оценка ориентируется на распределение эффективных концентраций антибиотика, а клиническая — на качество антибактериальной терапии.
Анализ — определение чувствительности антибиотикам — назначается с целью выявить чувствительные и устойчивые микроорганизмы.
Чувствительными называются возбудители, которые поддаются лечению антибиотиками в средней терапевтической концентрации. Если достоверная информация о категории чувствительности микроорганизма отсутствует, то учитываются данные, полученные в условиях лаборатории. Они совмещаются со знаниями о фармакокинетике используемого препарата, и после синтеза данной информации делается вывод о восприимчивости бактерий к лекарству.
К резистентным, то есть устойчивым, микроорганизмам относятся те бактерии, которые продолжают вызывать заболевания даже при использовании максимальных концентраций лекарственных веществ.
Промежуточную резистентность устанавливают в том случае, если заболевание в процессе лечения может иметь несколько исходов. Выздоровление пациента возможно в случае использования высоких доз антибиотиков либо в случае прицельного накапливания лекарства в месте инфекции.
Анализ на микрофлору и чувствительность к антибиотикам определяет такой показатель, как минимальная бактерицидная концентрация, или МБК. Это самая низкая концентрация препарата, которая в лабораторных условиях вызывает элиминацию практически всех микроорганизмов в течение двенадцати часов.
Знание этого показателя врачи используют, когда назначают терапию не бактерицидными, а бактериостатическими лекарственными средствами. Или в случаях, когда стандартная антибактериальная терапия оказывается неэффективной. Чаще всего этот анализ заказывают для больных с бактериальным эндокардитом, остеомиелитом, а также при оппортунистических инфекциях.
Анализ на чувствительность к антибиотикам может проводиться с использованием биологических жидкостей:
Кроме того, для определения местной чувствительности производят забор мазков из уретры, цервикального канала и верхних дыхательных путей.
Бак. анализ на чувствительность к антибиотикам не требует от пациентов существенной подготовки, но некоторые ограничения все-таки есть.
- Для исследования используется средняя порция утренней мочи, которая собирается в стерильную посуду. Перед этим пациент обязательно должен осуществить туалет наружных половых органов и рук.
- Грудное молоко собирается перед кормлением ребенка. Первая порция сливается, а затем в стерильный контейнер сцеживается несколько миллилитров с каждой груди.
- Перед сдачей мазка из носоглотки стоит воздержаться от приема пищи в течение пяти-шести часов.
- В случае взятия мазка из половых путей, рекомендуют воздерживаться от половых контактов в течение пары дней.
На сегодняшний день не существует клинических или лабораторных методов, которые бы со стопроцентной вероятностью могли предсказать эффект от антибактериальной терапии. Но в то же время определение чувствительности бактерий к лекарственным веществам может быть ориентиром для врачей в вопросах выбора и коррекции лечения.
источник
Если у лечащего врача возникнут подозрения о наличии бактериальной природы заболевания пациента, то он обязательно попросит сдать анализ на чувствительность к антибиотикам. Данная процедура помогает представителям медицины назначать правильные лекарственные препараты, поскольку микроорганизмы могут мутировать и развить к ним резистентность.
Это исследование представляет собой лабораторный метод определения лекарственного средства, оказывающего наибольшее воздействие на болезнетворные микроорганизмы, вызвавшие развитие данного конкретного заболевания.
Фармацевтический рынок предлагает огромный выбор лекарственных средств, как в плане эффективного воздействия, так и в плане стоимости. Поэтому, чтобы выбрать наиболее эффективное антибактериальное средство, назначают бактериологический посев.
В целях подбора правильной терапии врач рекомендует пациенту пройти обследование. Анализ на чувствительность к антибиотикам назначают для определения самого эффективного и уместного лекарства в данном случае. Наиболее часто это необходимо для лечения инфекций, передающихся половым путём. Также определение самого эффективного антибиотика является обязательным условием при терапии заболеваний у детей.
Помимо этого, определение чувствительности необходимо во избежание развития устойчивости микроорганизмов к антибиотикам. Если пациент перед этим уже принимал антибиотики, а теперь нужно провести повторный курс лечения, то препарат необходимо заменить на другой. Подобный образ действия позволяет применить меньшую дозировку лекарства и предотвратить мутацию возбудителя. В отделениях гнойной хирургии антибиотики заменяют раз в несколько месяцев.
Тест на чувствительность бактерий необходим при возникновении у пациента аллергических реакций на определенную группу препаратов.
Анализ мочи на чувствительность к антибиотикам также проводится очень часто.
На сегодняшний день существует несколько основных методов определения чувствительности микроорганизмов к антибиотику. Самым распространенным и простейшим является диско-диффузионный способ, или метод дисков.
Для определения чувствительности диско-диффузионным способом по поверхности застывшего агара в чашке Петри распределяют исследуемый материал (бактериальную суспензию). После этого туда помещают картонные диски, пропитанные определенными антибиотиками. Затем бакпосев закрывают и размещают в термостате при температуре 35-37°С на 12-18 часов. Диффузия антибиотика влечет за собой формирование зоны подавления роста бактерий вокруг бумажных дисков. По истечении указанного времени результат проверяют путём замера диаметра этой зоны.
Второй анализ на чувствительность к антибиотикам – это Е-тест. Он проводится аналогично предыдущему способу, только вместо картонных дисков применяют полоску Е-теста, которая содержит градиент степени пропитки антибиотиком от минимальной к максимальной. После двенадцатичасовой инкубации в термостате специалист достает чашку и оценивает эффективность каждого вида антибиотика, просматривая конкретное место соприкосновения зоны подавления роста бактерий и шкалу полоски. Такова будет самая минимальная концентрация лекарства, необходимого для лечения заболевания.
Преимуществом диффузионных методов является доступность для любой бактериологической лаборатории и простота тестирования. Однако стоимость Е-тестов высока, поэтому наиболее часто используют диско-диффузионный способ.
Как именно осуществляются анализ — посев на чувствительность к антибиотикам?
Данные методы основываются на применении последовательных двойных разведений антибактериального препарата от максимальной до минимальной концентрации. При этом различную концентрацию антибиотика распределяют по жидкой питательной среде (бульону) или агару. После этого бактериальную суспензию помещают на поверхность агара в чашке или в бульон с антибиотиками. По истечении двенадцатичасовой инкубации в термостате при температуре 35-37°С, специалисты анализируют полученные результаты.
Помутнение бульона (рост бактерий) или поверхности агара говорят о том, что данной концентрации антибиотика недостаточно для подавления жизнеспособности микроорганизмов. Увеличение концентрации антибиотика влечет за собой ухудшение роста бактерий. После серии последовательных разведений антибиотика, первая наименьшая концентрация, где не наблюдается рост бактерий, считается минимальной подавляющей концентрацией (МПК), то есть достаточной для лечения.
На основании полученных данных (значения МПК или диаметра зоны подавления роста) бактерии разделяют на чувствительные, с промежуточной резистентностью и резистентные. Для разделения данных категорий резистентности (или чувствительности) применяют пограничные концентрации антибиотика.
Эти величины не являются постоянными и пересматриваются в зависимости от изменений чувствительности бактерий. Пересмотром критериев и их разработкой занимаются микробиологи и химиотерапевты, которые входят в специальные комитеты.
Всего существует два метода интерпретации полученных результатов анализа чувствительности: клинический и микробиологический. Последний основывается на тестировании значений распределения концентрации антибиотика, подавляющего жизнедеятельность микроорганизмов. Клинический метод интерпретации основывается на оценивании эффективного действия антибактериальной терапии.
Как сдавать анализ на чувствительность к антибиотикам?
Что же означает это интересное понятие?
Клинически к чувствительным относят микроорганизмы, если во время лечения стандартной дозировкой антибиотика инфекции, вызванной данными бактериями, наблюдается хорошее терапевтическое действие.
Если достоверная клиническая информация отсутствует, то разделение на категории резистентности основывается на совокупности результатов, полученных in vitro, а также на концентрации антибиотика в сыворотке крови.
Какие из них являются резистентными?
Микроорганизмы относят к устойчивым, когда во время лечения заболеваний, вызванного данными бактериями, от терапии не наблюдается никакого положительного эффекта, даже при применении максимальной дозировки антибиотика. Данные бактерии обладают механизмом резистентности.
Сдать анализ мочи на чувствительность к антибиотикам довольно просто.
Когда говорят о промежуточной резистентности бактерий, то подразумевают случай, когда заболевание, вызванное этими штаммами, имеет различный терапевтический исход. Терапия может оказаться успешной при применении повышенной дозировки антибиотика, или если инфекция локализуется в месте, где накапливается самая высокая концентрация антибактериального препарата.
Иногда резистентные микроорганизмы и штаммы с промежуточной устойчивостью объединяются в одну категорию устойчивых бактерий.
В определенных ситуациях при недостатке результатов тестирования чувствительности распространенными способами, применяют определение минимальной бактерицидной концентрации.
Расшифровка анализа мочи на чувствительность к антибиотикам интересует многих.
Говоря о минимальной бактерицидной концентрации (МБК), имеют в виду наименьшую концентрацию антибиотика, вызывающую при исследовании in vitro уничтожение 99,9% бактерий от изначального показателя на протяжении определенного временного промежутка.
Показатель МБК применяют во время лечения антибиотиками, способными оказывать бактериостатическое действие, или если у особой категории пациентов отсутствует эффект от антибактериальной терапии. К частным случаям применения МБК относят остеомиелит, бактериальный эндокардит или генерализованные инфекции у больных с ослабленным иммунитетом.
Тестирование бактерий на чувствительность к антибиотику проводят с применением следующих биологических жидкостей:
Помимо этого, для того чтобы узнать местную чувствительность, проводят забор материала из уретры, верхних дыхательных путей или цервикального канала.
В заключении хотелось бы сказать, что в нынешнее время не существует способов, которые с абсолютной достоверностью позволили бы предсказать потенциальный клинический эффект антибиотиков при терапии заболеваний, вызванных проникновением в организм болезнетворных микроорганизмов. Однако результаты определения чувствительности, могут стать отличным ориентиром врача для подбора и корректировки антибактериального лечения.
Мы рассмотрели то, как проводится анализ на чувствительность к антибиотикам.
источник
Лечение простуды и гриппа
Заболевания, как серьёзные, так и не слишком, к большому сожалению, отнюдь не редкость. В борьбе с некоторыми болезнями никак не получается обойтись без антибиотиков. Их применение оценивается по-разному. Врачи разделились на два лагеря: их сторонников и их противников. Если у вас возникла необходимость употребления антибиотиков, то прежде всего нужно узнать, как воспримет их ваш организм. Сделать это можно с помощью посева на чувствительность к антибиотикам. Расшифровка анализа все прояснит.
Эта процедура основана на том, что каждая группа микроорганизмов, обитающих в наших органах, обладает чувствительностью к какой-либо группе антибиотиков. Чувствительность проявляется в остановке их роста и размножения, что в конечном итоге приводит к гибели этих микроорганизмов. На основе этого анализа делается вывод о том, какие антибиотики эффективнее помогут в борьбе с конкретными бактериями.
Чувствительность к антибиотикам – что это? Сейчас существует три способа определения чувствительности микроорганизмов к антибиотикам:
Первый заключается в том, что испытуемый препарат распыляется в среду, созданную благодаря бумажным дискам.
Второй метод главным образом состоит в том, что на основе произведённого бактериологического анализа выявляется чувствительность микроорганизмов к антибиотику, результат регистрируется в специальной таблице, и происходит его расшифровка. Чувствительность к антибиотикам становится ясна для специалиста.
Третий метод признан наиболее точным. При его использовании бактерии подлежат серийному разведению в бульоне из антибиотика.
В целом, вне зависимости от избранного метода, суть анализа сводится к тому, что выделяется возбудитель болезни в чистом виде и проводится его реакция на тот или иной антибиотик, выясняется чувствительность микрофлоры к антибиотикам. Расшифровка этого анализа в данных аспектах чрезвычайно важна.
Крайне важно делать анализ на основе стерильных жидкостей органов или тканей, из которых берётся возбудитель. К ним относят:
- кровь;
- жидкость спинного мозга;
- мочу;
- микрофлору влагалища;
- микрофлору уретры.
Результат проведённого анализа — перечень антибиотиков, к которым была или не была проявлена чувствительность у исследуемого микроорганизма. Этот результат предоставляется в форме списка, называемого антибиотикограммой. В качестве используемой измерительной единицы используется то минимальное количество лекарства, которое необходимо для уничтожения микроорганизма, вызывающего заболевание.
Условно все микроорганизмы можно разделить на три группы. Деление основывается на устойчивости к антибиотику.
- чувствительные возбудители;
- умеренно устойчивые возбудители;
- устойчивые возбудители.
Для того чтобы вызвать гибель чувствительных микроорганизмов, хватит обычной дозы лекарства. Для умеренно устойчивого микроорганизма понадобится максимальная доза антибиотика. И для борьбы с устойчивыми микроорганизмами не поможет и максимально возможная доза антибиотика.
На основе результата анализа, когда проведена его расшифровка, чувствительность к антибиотикам выявлена, врач понимает, какую дозу лекарства необходимо назначить пациенту. Кроме этого, он приходит к выводу о наиболее эффективном препарате и о продолжительности курса лечения.
Однако необходимо учесть, что чувствительность возбудителя из пробирки и чувствительность возбудителя в организме могут отличаться. Это отличие заключается в количестве микроорганизмов в организме в целом.
К сожалению, не существует способа, с помощью которого можно было бы провести анализ прямо из органа.
Поэтому, несмотря на довольно высокую точность анализа, необходимо помнить о том, что выявленная чувствительность к препарату не всегда совпадает с действительной чувствительностью организма пациента. Исходя из этого, врач должен контролировать применение лекарства, чтобы лечение не проходило впустую.
Как уже было сказано ранее, анализ должен проводиться на основе стерильных выделений организмов. К ним в первую очередь относится моча.
Анализы на основе мочи показаны пациентам с заболеваниями в мочевыделительной системе.
К симптомам таких заболеваний относятся:
- боли при мочеиспускании;
- боли в поясничном отделе;
- нарушения в процессе мочеиспускания;
- изменения в результатах проведённых анализов мочи;
- реакция на применение антибиотиков в органах, отвечающих за мочевыделение.
Для того чтобы провести такой анализ, понадобится утренняя порция мочи. Её нужно собрать в специальную стерильную ёмкость. Эту ёмкость можно как купить, так и использовать любую подходящую домашнюю ёмкость, например, простую небольшую баночку. Однако перед использованием её нужно простерилизовать.
При сборе не нужно использовать первые капли мочи и последние. Именно так на анализ попадёт наиболее концентрированная микроорганизмами, если они есть, моча.
Следует предупредить врача, если за несколько дней до сдачи образца принимали антибиотики. Они могут вызвать ложный результат.
Анализ займёт до десяти дней. Продолжительность исследования зависит от микроорганизмов. За эти десять дней моча будет подвергнута ряду анализов, в результате которых врач получит представление о возбудителе заболевания, его чувствительности и об антибиотике, с помощью которого будет проведено наиболее эффективное лечение.
Как и анализ на основе мочи, анализ на чувствительность к антибиотикам, расшифровка его на основе крови помогает понять, есть ли у пациента возбудители той или иной болезни.
Кровь также относится к стерильным выделениям организма, она довольно часто используется в анализах.
Брать её следует до того, как пациент начал приём антибиотиков. Если сбор был осуществлён после, то результаты могут быть ложными.
Сбор производится из вены. Количество колеблется от пяти до десяти миллилитров.
После того как кровь была взята, она помещается в специальную бутыль, в которой подготовлена питательная для бактерий среда. Производится посев на чувствительность к антибиотикам. Расшифровка анализа выполняется по результатам после завершения процесса.
Итоги анализа выясняются через шестнадцать или восемнадцать часов. Время меняется в зависимости от вида возбудителя. В конечном итоге оно определяется моментом, когда его рост становится очевидным.
Так определяется тип возбудителя, после чего начинается проверка на устойчивость.
Результаты исследования крови могут быть следующими:
- в крови нет возбудителей;
- найден один вид возбудителя;
- несколько видов возбудителей.
Анализ и его расшифровка, чувствительность к антибиотикам в котором указана, передаются врачу, и тот на их основании определяет тип лечения, препарат, его дозировку.
Очень часто, перед тем как назначить лечение и выписать соответствующие лекарственные препараты, врачи проверяют человека на чувствительность к антибиотикам. Делается это несколькими методами.
Итак, выявление чувствительности или сопротивляемости микроорганизмов к антибиотикам необходимо для назначения правильного метода лечения. Так, например, если у возбудителей инфекции наблюдается резистентность к определенному препарату, то лечение им просто не будет оказывать должного эффекта. Различают несколько форм сопротивляемости:
- чувствительные;
- умеренно чувствительные;
- устойчивые.
Чувствительные микроорганизмы погибают сразу же после введения небольших доз, а умеренно чувствительные – при определенных концентрациях. При этом устойчивые могут погибнуть только при взаимодействии с большим количеством антибиотика, который не может быть введен в организм, а, следовательно, необходимо искать альтернативный способ лечения и устранения заболевания.
Существует несколько способов определения чувствительности микроорганизмов к антибиотикам:
- метод последовательных разведений в жидкой питательной среде;
- метод диффузии в агар;
- ускоренный метод.
Чаще всего проба на чувствительность к антибиотикам проводится по методу определения в физиологической жидкости. В этом случае используется процесс обработки интегрированных пластин с различной концентрацией антибиотиков. Таким методом определяют больных раком, для того чтобы подтвердить или опровергнуть эффективность назначенных препаратов при химиотерапии.
Анализ на чувствительность к антибиотикам по диффузионному методу почти так же распространен, как и первый. При этом он дает лишь качественный ответ, есть или нет сопротивляемость.
Благодаря развитию микробиологических технологий, появились ускоренные методы диагностики, которые дают полную и развернутую информацию. Это очень важно при назначении лекарственных препаратов, а также, когда время не терпит, и следует как можно быстрее приступить к лечению.
Случается иногда так, когда результатов и вышеуказанных методов исследования недостаточно. В этом случае выводят минимальную бактерицидную концентрацию, которая способна уничтожить возбудителя инфекции, только происходит это в течение определенного промежутка времени.
Анализы на чувствительность к антибиотикам в медицине называют бактериальным посевом. Эти методы позволяют определить возбудителя заболевания и его концентрацию в организме. Цель анализа – выявить в полученном материале вредные микроорганизмы, чтобы в дальнейшем решить задачи насчет специфического лечения.
Выделив микроорганизмы, проводят антибиотикограмму – определение чувствительности обнаруженных микробов к бактериофагам и антибактериальным препаратам.
Методы лабораторного определения чувствительности бактерий к антибиотикам
Метод отличается высокой специфичностью – не наблюдается перекрестных ложных реакций. Есть возможность исследовать любую биологическую жидкость. Проводится он в целях определения чувствительности выявленного микроба к лечебным средствам, что позволяет применять самую эффективную терапию.
Результат получают не сразу. Требования к забору материала высокие. Персонал лаборатории должен быть высококвалифицированным.
Показания для бактериологического посева
Этим методом широко пользуются в медицинской практике, особенно при инфекционных заболеваниях, в гинекологии, хирургии, урологии, онкологии, отоларингологии и пр.
Абсолютным показанием являются любые воспалительные заболевания органов и систем, подозрение на сепсис.
Материал для исследования
Исследовать могут следующие материалы: слизь из зева, носоглотки, цервикального канал, уретры; мокроты; кал; урину; кровь; секрет простаты; грудное молоко; желчь; спинномозговую жидкость; содержимое кист; раневое отделяемое.
Слизь из носа и зева может содержать: гемолитические стрептококки, пневмококки, золотистый стафилококк, коринобактерии дифтерии, менингококк, гемофильную палочку, листерии.
- кишечную группу бактерий – сальмонеллы, шигеллы, иерсинии;
- тифопаратифозную группу;
- условно-патогенных возбудителей кишечных инфекций;
- анаэробных микробов; возбудителей пищевых инфекций;
- обследовать на дисбактериоз кишечника.
В биопунктате, гнойном отделяемом и содержимом ран выделяют:
- псевдомонады;
- синегнойные палочки.
Урогенитальную слизь исследуют так:
- на наличие возбудителей половых инфекций – гонококк, грибы, трихомонады, уреаплазму, листерии, микоплазму;
- на бактериальную флору.
Кровь могут исследовать на стерильность. Грудное молоко, секрет простаты, мочу, мазки, раневое отделяемое, суставная жидкость, желчь – эти материалы могут быть обследованы на обсемененность (бактериальную флору).
Собранный материал помещают в специальные среды. В зависимости от необходимого результата посев делают в разные среды. К примеру, в избирательная или элективная среда, примером которой является свернутая лошадиная сыворотка для обнаружения возбудителя дифтерии или же среда с солями желчных кислот/селенитом для определения возбудителя кишечных инфекций.
Другой вариант – дифференциально-диагностические среды, которые применяют для расшифровки бактериальных культур.
Если есть необходимость, делают пересев с жидкой на твердую питательную среду, чтобы идентифицировать колонии.
После этого питательную среду помещают в термостат, где создают благоприятные условия для жизнедеятельности возбудителей заболеваний. При этом задают конкретное время, влажность и температуру.
После извлечения образца из термостата проводят контрольный осмотр выросших колоний микробов (культура микроорганизмов). Если есть необходимость, проводится микроскопия полученного материала со специальной окраской. Контрольный осмотр – оценка формы, цвета, плотности колоний.
В заключение проводится подсчет возбудителей. В лабораторной практике используется понятие колониеобразующая единица (КОЕ) – одна микробная клетка, которая способна образовать колонию, или же видимая колония микробов. Показатель КОЕ позволяет определить количество микробов в образце или определить их концентрацию. Подсчет КОЕ может проводиться разными методами.
Качество теста зависит от нескольких факторов, включая соблюдение правил при заборе материала для исследований. Посуда и инструменты должны быть стерильными! В противном случае происходит контаминация (происходит обсеменение бактериями, не имеющих клинического значения), что делает тест бессмысленным.
Если человек принимает антибиотики, посев не будет точным. Прием таковых нужно прекратить за 10 суток до предполагаемой даты анализа. Также нужно сообщить лечащему врачу о приеме любых медикаментозных средств.
Доставка в лабораторию должна быть очень быстрой, не допускается высыхание материала и изменение его кислотности.
К примеру, кал нужно доставлять в теплом виде.
- Забор мочи проводится после утренних гигиенических процедур. Собирают среднюю порцию урины. Объем мочи – 10-15 мл. посуда должна быть стерильной. В лабораторию ее нужно доставить за 2 часа;
- Если назначен мазок из носа или зева: нельзя чистить зубы, полоскать рот/нос дезинфекторами, есть и пить;
- Забор кала проводят утром стерильной лопаткой в такую же посуду. Объем – 15-30 г. Не допускается попадание в него мочи. Максимальное время доставки – 5 часов. Не допускается замораживание. Кал собирают без слабительных и клизм;
- Кровь берут до антибиотикотерапии. Минимальное количество – 5 мл для детей, не меньше 15 мл взрослым;
- Проба мокрот берется утром натощак. Предварительно полощут рот и чистят зубы. Доставляют в лабораторию максимум за 1 час;
- Грудное молоко собирают после водных процедур. Кожу около соска обрабатывают спиртом. Сцеживают 15 мл молока, затем последующие 5 мл выдавливают в стерильный контейнер. Доставляют его за 2 часа;
- Мазок половых органов: забор осуществляют минимум через 14 с момента окончания менструаций, не раньше месяца после курса антибиотиков. Не мочиться на протяжении 2 часов женщинам и 5-6 часов до пробы мужчинам.
Данный анализ проводят с целью определения аллергии у человека на конкретный медикамент. Это позволяет после выявления бактерий и определения их чувствительности к антибиотику подобрать лечение. Но если у человека имеются какие-либо противопоказания к таким лекарствам, проводится внутрикожная проба, чтобы снизить риск развития побочных реакций.
Результат исследования слизи из носоглотки готов спустя 5-7 суток, испражнения – 4-7, урогенитальный соскоб– 7, посев на общую флору – 4-7, кровь на стерильность – 10.
Учитывают качество и количество, то есть сам факт наличия микробов, так и их концентрацию. Расшифровка результатов проводится очень простым методом.
В исследуемом материале выделяют несколько степеней роста микроорганизмов (обсемененность).
- Первая степень – рост отсутствует;
- вторая степень – рост на твердой среде до 10 колоний;
- третья – до 100;
- четвертая – больше 100 колоний.
Результаты очень важны при выявлении условно-патогенной микрофлоры, так как 1 и 2 степени не считаются причинами заболевания, а просто свидетельствуют о загрязненности исследуемого материала, однако 3 и 4 степень указывают на причину воспаления. При выделении патогенной флоры учитывают абсолютно все колонии.
Результаты подсчета КОЕ/мл расшифровывают следующим методом:
- 103/мл – одна колония;
- 104/мл – от одной до пяти;
- 105/мл – от 5;
- 106/мл – больше 15.
Количество колоний важно для определения степени патологии и контроля проводимой терапии.
Важной составляющей диагностики и лечения является определение чувствительности возбудителя к антибактериальным препаратам. Набор антибиотиков, к которому резистентный или чувствителен возбудитель, называют антибиотикограммой. Чувствительность микроорганизма – это когда антибиотик подавляет его размножение. Резистентность – это устойчивость бактерии, то есть лекарство никак на нем не отразится. Антибиотикограмма выдается в конкретных единицах измерения – минимальной ингибитирующей концентрации (МИК).
Как видите, исследованием данного вопроса может заниматься искючительно пофильный специалист. Здоровья вам и хорошего самочувствия!
Здравствуйте! Помогите расшифровать анализ: Посев на флору с определением чувствительности к антибиотикам. Выделенная флора Escherichia coli Количество: обильный рост (10^6 и выше) Норма: менее 1×10^4 Патогенность: Условно-патогенная флора Чувствительность к антибиотикам Вид м/о Escherichia coli Амикацин 20мм (S)Чувствителен Ампициллин 18мм (S)Чувствителен Ко-тримоксазол 2мм (R)Устойчив Левомицетин 24мм (S)Чувствителен Цефтриаксон 2мм (R)Устойчив Ципрофлоксацин 24мм (S)Чувствителен
Миловская Ольга, Санкт-Петербург
Здравствуйте, Ольга! Там где (S)Чувствителен — микроорганизм погибает под действием антибиотика, там где (R)Устойчив — антибиотик на микроорганизм не действует и, соответственно, лечить этим антибиотиком смысла нет. С наилучшими пожеланиями!
Здравствуйте, сдавала анализа на флору с определением чувствительности к антибиотикам, метод — микробиологический. Помогите расшифровать. УЗИ в норме. Выделенная флора — Escherichis coli, количество — обильный рост (10^6 и выше), норма — менее 1^10^4, патогенность — условно патогенная флора. Чувствительность к антибиотикам: Амикацин -10 мм- устойчив, Меропенем — 26 мм- чувствителен, Цефтриаксон — 27 мм — чувствителен, Ципрофлоксацин — 27 мм — чувствителен. Спасибо!
Здравствуйте, помогите пожалуйста расшифровать анализ мужа. Эпителий плоский(в поле зрения)- 4-5 Эпителий переходный ( в п/зрения)-10-15 Лейкоциты (в п/зрения)-0-5, до 10 Эритроциты-0 Грам(+)кокки-1 Грам(-)кокки- — Грам+-коккобациллярная флора -2 Слизь-2 Больше ничего нет, все отрицательно. Скрытых тоже нет ни одной. У меня кишечная палочка была-10 в пятой степени. И замершая беременность. Теперь мы ищем причины. У него есть эта кишечная палочка? Ее надо ему лечить? Помогите пожалуйста! И еще.
Беременность 27-28 недель. Месяц назад были наложены швы на шейку матки (в 21 нед. Причина — шейка была ампутированна год назад). За неделю до наложения швов был закончен курс антибактериальной терапии (амоксиклав внутривенно 7 дн), проводившийся из-за выявленного инфицирования энтерококк фекалис. Сейчас посев снова показывает активный рост фекалис и кишечной палочки, лейкоцитов в мазке пока нет, швы чистые. Чувствительность есть к широкому спектру антибиотиков, однако клинический фармаколог рд.
Посев на флору с определением чувствительности к антибиотикам
Выделенная флора: Staphylococcus epidermidis
Количество: скудный рост (10^2-10^3)
Норма: менее 1х10^5
Патогенность: нормальная флора
Цитологическое следование смешанного соскоба шейки матки и цервикального канала
Качество препарата адекватный
Цитограмма (описание) Цитограмма соответствует воспалительному процессу слизистой оболочки с реактивным изменением эпителия. Подскажите пожалуйста, что это значит и чем это опасно.
Уважаемый доктор! Обращаюсь к Вам со следующим вопросом: Меня зовут Кристина мы с мужем планируем беременность у меня выявили Ureaplasma spp. 10^6 я прошла полный курс лечения антибиотиками (Вильпрофен, Флемоклав Солютаб, Полижинакс), у мужа делали бак. Посев на уреаплазму species с определением титра и чувствительности к антибиотикам, результат анализа показал скудный рост (менее 10^4) без параметров антибиотика так как нам сказали что не возможно выявить чувствительность к антибиотикам так м.
18+ Онлайн-консультации носят информационный характер и не заменяют очной консультации врача. Пользовательское соглашение
Ваши персональные даннные надежно защищены. Платежи и работа сайта осуществляются c использованием защищенного протокола SSL.
Представляет собой микробиологическое исследование отделяемого из нижних отделов дыхательных путей для определения вида микроорганизма и выбора адекватной терапии. Основные показания к применению: воспалительные заболевания респираторного тракта (пневмония, острые и хронические бронхиты, абсцесс легкого). Обычно мокроту получают путем отхаркивания при кашле или аспирации из трахеи.
Возбудители инфекций нижних дыхательных путей по степени патогенности подразделяют на три группы:
- Патогены высокого уровня приоритетности — Staphylococcus aureus, Haemophilus influensae, Кlebsiella pneumoniae, Streptococcus pneumoniae.
- Среднего уровня — Candida albicans, Moraxella (Branhamella) cataralis, энтеробактерии.
- Низкопатогенные — Mycoplasma pneumonia, Pseudomonas aeruginosa, Chlamydia spp. Legionella pneumophila и ряд других микроорганизмов.
При интерпретации полученных данных следует учитывать, что у лиц со сниженным иммунитетом представители нормальной флоры в количественном отношении могут значительно превышать свои нормальные значения и в этом случае эту флору рассматривают как возбудителя инфекции. Считается, что для мокроты клинически значимым числом является 106-107 КОЕ/мл. Для бронхиальных смывов после бронхоальвеолярного лаважа — 104-105 КОЕ/мл.
Цифровые значения единиц обсемененности трактуются так: например, обнаружены бактерии 102 это значит, что обнаружено 100 колониеобразующих единиц бактерий в 1 мл биологического материала, поскольку цифра степени (в данном примере это цифра 2) указывает на степень обсемененности. Если 103, то 1000 колониеобразующих единиц бактерий в 1 мл биологического материала.
В связи с тем, что в мокроте, как правило, присутствует микрофлора ротоглотки, результат посева следует интерпретировать с учетом клинической картины и общего состояния пациента.
К бактериям, приводящим к развитию патологии дыхательных путей, относятся Staphylococcus aureus, Haemophilus influenzae, Pseudomonas aeruginosa, Streptococcus pyogenes, Streptococcus pneumoniae, Moraxella catarrhalis, грибы рода Candida, Nocardia asteroides и N. cavia, Acinetobacter baumannii, Chlamydia psittaci и Mycobacterium tuberculosis — 100%.
В норме мокрота человека контаминирована (загрязнена) следующими видами нормальной симбиотической микрофлоры, характерной для верхних дыхательных путей: Staphylococcus spp. Streptococcus viridans group. Corynebacterium spp.(за исключением Corynebacterium diphtheria), Neisseria spp. (за исключением Neisseria meningitidis), Bacteroides spp. Veillonella spp. Lactobacillus spp. Candida spp. Дифтероиды, Fusobacterium spp.
Это микробиологическое исследование, позволяющее определить качественный и количественный состав микрофлоры исследуемого биоматериала, в том числе выявить условно-патогенные микроорганизмы в высоком титре и патогенные микроорганизмы, определить их чувствительность к антибиотикам.
- разовая порция мочи,
- урогенитальный мазок (с секретом предстательной железы),
- мокрота,
- мазок из ротоглотки,
- мазок из носоглотки,
- грудное молоко,
- эякулят,
- отделяемое из уха,
- мазок с конъюнктивы,
- синовиальная жидкость,
- спинномозговая жидкость,
- мазок из цервикального канала,
- мазок из уретры,
- плевральная жидкость,
- смыв с бронхов,
- желчь,
- экссудат,
- биоптаты.
- употребление пациентом большого количества воды не менее чем за 8-12 часов до сбора мокроты;
- посев мочи на флору должен проводиться при условии исключения мочегонных препаратов в течении 48 часов до сбора мочи;
- женщинами сдача мочи или урогенитатального мазка выполняется до начала менструации или спустя 2 дня после ее окончания;
- для мужчин рекомендуется не мочиться в течение не менее 3 часов до сдачи мочи или мазка;
- в день взятия биоматериала на анализ пациентам запрещается чистить зубы.
Нормальная микрофлора человека представляет собой совокупность микроорганизмов, населяющих кожу и слизистые оболочки. Наибольшее их количество обитает в желудочно-кишечном тракте, остальная часть — на кожных покровах, зеве, глотке, в мочеполовой системе. Нормальная микрофлора подразделяется на постоянную, факультативную и случайную. Референсные значения для различных видов микроорганизмов зависят от их локализации (точки взятия биологического материала). Так, биологический материал, полученный из зева, носа, используется для определения характера неспецифического инфекционного процесса, протекающего в организме. Также соскоб из носа актуален при анализе на чувствительность к антибиотикам.
По способности вызывать инфекционные заболевания микроорганизмы классифицируют на непатогенные (не вызывающие заболевания), условно-патогенные (в норме могут выделяться в небольших количествах и при определенных условиях активно размножаются, приводя к воспалению) и патогенные (являются возбудителями инфекционных заболеваний и в составе нормальной микрофлоры не обнаруживаются).
При обнаружении условно-патогенных микроорганизмов в высоком титре или патогенных микроорганизмов определяется их чувствительность к антибиотикам и бактериофагам.
Как у мужчин, так и у женщин на результаты исследования может оказывать влияние проведенная ранее противогрибковая или антибактериальная терапия.
источник
Микроорганизмы по отношению к конкретному виду антибиотика могут характеризоваться как чувствительные, условно-устойчивые и устойчивые. Чувствительными патогенными микроорганизмами являются те, что подавляются рекомендованными дозами антибактериального препарата. Условно-устойчивые для подавления требуют увеличение дозы. Активность устойчивых патогенных микроорганизмов не подавляется даже повышенными дозами антибиотика.
Чувствительность микрофлоры к антибиотикам индивидуальна: у разных людей бактерии могут реагировать на одни и те же антибиотики по-разному. Поэтому назначение антибактериальных препаратов на основании лишь среднестатистической картины не всегда дает желаемый лечебный эффект. Между тем любой антибиотик – это серьезное лечебное средство, обладающее побочными действиями. В частности, при его применении гибнут не только патогенные бактерии, но и полезные микроорганизмы. Может получиться ситуация, когда антибиотик уничтожит полезную микрофлору, а возбудитель заболевания не пострадает – по причине его устойчивости к данному антибиотику.
Чтобы обеспечить эффективность проводимого курса антибактериальной терапии, врач должен быть уверен, что назначаемый им антибиотик действительно справится с выявленным возбудителем заболевания. Для этого и нужен анализ на чувствительность к антибиотикам.
Анализ на чувствительность микрофлоры к антибиотикам назначается, если необходимо:
- определить наиболее эффективно действующий препарат. Чаще всего анализ на чувствительность к антибиотикам назначается при лечении ЗППП, но необходимость в нем может возникнуть и при лечении других инфекционных заболеваний;
- избежать «привыкания» патогенных микроорганизмов к антибиотику – в случаях повторного использования антибактериальной терапии в течение ограниченного периода времени;
- заменить один препарат на другой, например, в случае проявления аллергической реакции.
Для анализа используется различный биологический материал – в зависимости от заболевания это может быть моча, кал, мазок (из влагалища, уретры, с задней стенки глотки), грудное молоко, мокрота, слюна, и т.д.
Анализ на чувствительность к антибиотикам относится к культуральным (микробиологическим) исследованиям. Поэтому другое его название – посев на чувствительность к антибиотикам.
Наибольшее распространение имеет диско-диффузный метод проведения анализа. В соответствии с данным методом патогенные микроорганизмы засеваются в питательную среду. Сверху накладываются диски, пропитанные антибиотиками. После чего посев помещается в термостат на 16-18 часов. Результат покажет, насколько тот или иной антибиотик способен справиться с данными бактериями.
В «Семейном докторе» для анализа чувствительности к антибиотикам используется также автоматический анализатор Vitek, обеспечивающий высокую стандартизацию и компьютеризацию исследования.автоматический анализатор
В зависимости от метода анализа результаты анализа поступают к врачу через 2-3 дня после сдачи материала в лабораторию.
Анализ на чувствительность к антибиотикам действителен только в период заболевания, по поводу которого он был назначен, и до начала антибиотикотерапии. То есть пока не началось лечение антибиотиками, картина остаётся та же, но само лечение может сказаться на чувствительности патогенных организмов к применяемым антибиотикам. Поэтому в случае повторного заболевания анализ может быть назначен снова.
Необходимо соблюдать стандартные требования для сдачи каждого вида биологического материала:
- при сдаче мочи собирается средняя порция (первая порция мочи пускается в унитаз). Моча собирается в стерильный контейнер. Перед сбором мочи обязательны гигиенические процедуры;
- грудное молоко собирается до кормления ребенка. Первая порция молока из каждой груди сбрасывается, следующие 0,5-1 мл молока из каждой груди собираются в отдельный стерильный контейнер;
- перед забором мазка из зева и носоглотки не следует есть (в течение 4-5 часов до сдачи анализа);
- если вы сдаете мазок из влагалища, уретры или секрет простаты, желательно воздержаться от половой жизни (в течение 1-2 дней до сдачи анализа).
Сделать анализ на чувствительность к антибиотикам (посев на чувствительность к антибиотикам) в Москве Вы можете в АО «Семейный доктор». Сдать биологический материал анализ можно в любой из поликлиник компании.
источник
Сегодня все большую популярность приобретает анализ на чувствительность к антибиотикам. Микрофлора человека довольно разнообразна, представлена большим количеством микроорганизмов, в различных биотопах.
Фармацевтические компании разработали большое количество антибактериальных средств, антибиотиков, которые позволяют поддерживать нормальное соотношение и численность микробных популяций. С началом эры антибиотиков удалось вылечить многие заболевания, которые раньше считались смертельными. Но микроорганизмы также стремятся к выживанию, постепенно адаптируются к действию антибактериальных препаратов. Со временем многие из них обрели устойчивость по отношению ко многим лекарственным средствам, закрепили ее в генотипе и стали передавать из поколения к поколению. Таким образом, новые микроорганизмы, уже изначально не чувствительны к определенным препаратам, и их назначение может быть неэффективно. Фармацевты разрабатывают все новые и новые средства, добавляя в них новые активные компоненты, меняя основную формулу. Но постепенно к ним также вырабатывается устойчивость.
Причина повышенной устойчивости микрофлоры ко многим препаратам, и даже их аналогам зачастую кроется в неправильном и бесконтрольном приеме антибиотиков. Врачи назначают антибиотики и их комбинации при различных бактериальных заболеваниях. При этом не проводится предварительная оценка того, насколько эффективными они окажутся, не подбирается оптимальная дозировка, что очень важно как для лечения, так и для предотвращения механизмов развития дальнейшей устойчивости. Многие ошибочно назначают антибактериальную терапию даже при вирусных заболеваниях, что неэффективно, поскольку антибиотик не действует против вирусов.
Терапия зачастую назначается без предварительной проверки чувствительности, подбор действующего средства и требуемой его дозировки по отношению к каждому конкретному заболеванию и биотопу не производится. Поскольку антибиотики назначаются «в слепую», часто наблюдаются случаи, когда они не проявляют никакой активности по отношению к тем микроорганизмам, которые вызвали заболевание и численность которых нужно снизить. Вместо этого они оказывают воздействие на других представителей микрофлоры, в результате чего развивается дисбактериоз, который является также довольно опасной патологией и может привести к серьезным последствиям. Особенно опасны случаи, когда антибиотик уничтожает нормальную микрофлору, которая призвана защищать организм и поддерживать его нормальное функционирование. Также бывают случаи, когда назначается слишком большая или слишком маленькая дозировка препарата.
Пациенты также безответственно относятся к лечению. Зачастую лечение прекращают после того, как симптомы заболевания перестали беспокоить. При этом полный курс до конца многие предпочитают не заканчивать. Это является одним из факторов, которые способствуют развитию устойчивости у бактерий. Полный курс рассчитан на то, чтобы полностью патогенную микрофлору. Если курс не закончен, она убита не полностью. Те микроорганизмы, которые выжили, подвергаются мутациям, вырабатывают механизмы, которые обеспечивают им защиту от данного средства, и передают ее следующим поколениям. Опасность состоит в том, что устойчивость вырабатывается не только по отношению к данному конкретному препарату, но и ко всей группе препаратов.
Поэтому на сегодня одним из наиболее эффективных средств рациональной терапии и профилактики устойчивости, является предварительное определение чувствительности к назначаемому средству и подбор его оптимальной дозировки.
[1], [2], [3], [4], [5], [6], [7], [8], [9]
В норме такой анализ должен проводить во всех случаях, когда требуется антибактериальная терапия. Исходя из основных законов антибиотикотерапии, любой антибиотик может быть назначен только после того, как проведена предварительная оценка чувствительности микрофлоры к данному средству, в лабораторных условиях определена оптимальная концентрация действующего вещества. На практике, в силу различных причин и обстоятельств, такое исследование перед началом лечения не проводится, и врач вынужден подбирать лекарственное средство «наугад».
Сегодня проверка чувствительности проводится только в тех случаях, когда у врача возникают большие сомнения в отношении того, будет ли назначенное средство эффективно, в случаях длительного отсутствия эффекта от препарата, а также при повторном использовании одного и того же средства в ограниченный промежуток времени. Часто чувствительность определяют при лечении заболеваний, передающихся половым путем. Многие специалисты обращаются к анализу в случае возникновения побочных эффектов, аллергических реакций, и когда нужно заменить один препарат на другой.
Также часто к анализу обращаются для подбора лекарственных средств при антибактериальной терапии в восстановительный период после операций, лапароскопических вмешательств, удаления органов. В отдлениях хирургии, гнойной хирургии такое исследование просто необходимо, поскольку здесь достаточно быстро развивается устойчивость.кроме того, развиваются сверхустойчивые «внутрибольничные»Многие платные клиники подходят к назначению лекарственных препаратов со всей ответственностью – только после проверки чувствительности. Во многих случаях бюджет государственных учреждений просто не позволяет проводить подобные исследования для каждого пациента, которому требуется антибактериальная терапия.
[10], [11], [12], [13], [14], [15]
Подготовка к исследованию не требует никаких специальных мер. Она такая же, как и при проведении любых анализов. За несколько дней до исследования нужно воздержаться от приема алкоголя. Утром, в день забора материала, в большинстве случаев кушать и пить нельзя. Но все зависит от типа анализа. Материал для исследования может быть различным, в зависимости от заболевания.
При заболеваниях горла, дыхательных путей, берут мазок из горла, носа. В венерологии, гинекологии, урологии, берут на анализ мазки из половых органов, кровь. При заболеваниях почек, часто требуется моча. При заболеваниях ЖКТ, некоторых инфекционных заболеваниях, исследуют испражнения, рвотные массы. Иногда может исследоваться грудное молоко, выделения из носа, глазной секрет, слюна, мокрота. При тяжелых патологиях и подозрении на инфекционный процесс, исследуется даже спинномозговая жидкость. Спектр достаточно широк.
Особенности забора материала определяются его биологической принадлежностью. Так, моча, кал, собирается утром в чистую емкость или в специальный контейнер для биологического материала. Забор грудного молока осуществляют до кормления. На исследование берется средняя порция. Мазок забирается при помощи специального тампона, которым проводят по слизистым, затем опускают в пробирку с подготовленной средой. Кровь забирается в пробирку, из пальца или вены. При заборе мазки из уретры или влагалища, рекомендуется в течение нескольких дней воздержаться от половых контактов.
При заборе биологического материала на исследование необходимо в первую очередь обеспечить правильность забора и стерильность. Но это в большинстве случаев является заботой медицинского персонала, пациенту по этому поводу беспокоиться не стоит. Чаще всего к подобным исследованиям обращаются гинекологи и урологи, на втором месте – отоларингологи при лечении заболеваний носоглотки и глотки, верхних дыхательных путей.
[16], [17], [18], [19], [20]
Собранный биологический материал в стерильных условиях доставляется в лабораторию, где и проводятся дальнейшие исследования. В первую очередь производится его первичный посев на универсальные питательные среды. Также берется часть материала для микроскопического исследования. Готовится мазок для микроскопии, проводится исследование, с помощью которого можно определить примерную картину, предполагать какие микроорганизмы присутствуют в образце. Это дает возможность подобать наиболее оптимальные среды для дальнейшего исследования и идентификации микроорганизмов. Также на микроскопии могут быть заметны признаки, указывающие на воспаление, онкологический процесс.
В течение нескольких дней в чашке Петри вырастают колонии микроорганизмов. Затем берут несколько колоний, пересеивают их на селективные питательные среды, которые дают возможность определить примерную группу микроорганизмов. Инкубируют в течение нескольких суток в условиях термостата, затем приступают к идентификации (определению вида микроорганизмов). Идентификацию проводят при помощи специальных биохимических и генетических тестов, определителей. Дополнительно могут проводиться иммунологические следования.
После того, как основной возбудитель выделен, проводя т оценку его чувствительности к антибиотикам. Для этого существует несколько методов. Чаще всего пользуются методом серийных разведений, или диско-диффузионным методом. Методики подробно прописаны в микробиологических справочниках, методических указаниях и стандартах лабораторий.
Суть диско-диффузионного метода состоит в том, что производится засев микроорганизмов, которые были идентифицированы на питательную среду, сверху накладываются специальные диски, пропитанные антибиотиками. В течение нескольких суток посев инкубируют в термостате, затем измеряют результаты. Оценивают степень задержки роста бактерий каждым антибиотиком. Если бактерия чувствительна к антибиотику, вокруг диска образуется «зона лизиса», в котором бактерии не размножаются. Их рост замедленный, или вовсе отсутствует. По диаметру зоны задержки роста определяют степень чувствительности микроорганизма к антибиотику и формулируют дальнейшие рекомендации.
Метод серийных разведений является наиболее точным. Для этого микроорганизмы высеивают на жидкие питательные среды, добавляют антибиотик, разбавленный по системе десятичных разведений. После этого пробирки ставят на несколько суток в термостат для инкубирования. Чувствительность к антибиотикам определяют по степени роста бактерий в питательном бульоне с добавлением антибиотиком. Регистрируют минимальную концентрацию, при которой еще происходит рост микроорганизмов. Это и есть минимальная дозировка препарата (необходим пересчет из микробиологических единиц на действующее вещество).
Это стандартные микробиологические методики, лежащие в основе любого исследования. Они подразумевают ручное выполнение всех манипуляций. Сегодня многие лаборатории оснащены специальным оборудованием, которое выполняет все эти процедуры в автоматическом режиме. Специалисту, работающему с таким оборудованием, необходимо только умение работать с оборудованием, соблюдение правил безопасности и стерильности.
Необходимо учитывать, что показатели чувствительности в условиях лаборатории и в условиях живого организма резко отличаются. Поэтому человеку назначается большая дозировка, чем определилась в ходе исследования. Это связано с тем, что в организме нет столь оптимальных условий для роста бактерий. В лаборатории создаются «идеальные условия». Часть препарата может быть нейтрализовано действием слюны, желудочного сока. Часть нейтрализуется в крови антителами и антитоксинами, которые вырабатываются иммунной системой.
Для начала производят забор биологического материала. Для этого нужно собрать среднюю порцию утренней мочи и доставить ее в лабораторию. Важно соблюдать стерильность и за несколько дней до анализа не принимать антибиотиков, иначе можно получить ложноотрицательный результат. После этого производится стандартный посев, суть которого состоит в выделении чистой культуры возбудителя и подборе антибиотика, который будет оказывать на него оптимальное бактерицидное воздействие. Определяется необходимая концентрация антибиотика.
Анализ мочи чаще всего назначают при подозрении на инфекционно-воспалительный процесс в мочеполовой системе, при иммунодефицитах и нарушении обмена веществ. В норме моча является стерильной жидкостью. Продолжительность такого исследования составляет 1-10 суток и определяется скоростью роста микроорганизма.
Исследование подразумевает выделение микроорганизма, который является возбудителем в чистую культуру. Иногда таких микроорганизмов может быть несколько (микст-инфекция). Некоторые микроорганизмы способны формировать биопленки, которые являются своеобразными «микробными сообществами». Выживаемость биопленок намного выше, чем одиночных микроорганизмов, или ассоциаций. Кроме того, не все антибиотики способны оказывать воздействие на биопленку, и проникать внутрь нее.
Для определения возбудителя, его выделения в чистую культуру, производится посев. В ходе исследования производится несколько посевов, в различные питательные среды. Затем выделяется чистая культура, определяется е биологическая принадлежность, и определяется чувствительность к антибактериальным препаратам. Производится подбор оптимальной концентрации.
Для исследования может использоваться любой биологический материал, в зависимости от заболевания, локализации инфекционного процесса. Продолжительность определяется скоростью роста микроорганизмов.
[21], [22], [23], [24], [25], [26]
Кал исследуют при различных желудочных и кишечных заболеваниях, при подозрении на инфекционный процесс, бактериальной интоксикации, пищевых отравлениях. Целью исследования является выделение возбудителя и подбор к нему оптимальных антибактериальных препаратов, которые будут оказывать высокую активность. Важность этого типа исследования состоит в том, что можно подобрать препарат, который будет оказывать воздействие только на возбудителя заболевания, и не будет воздействовать на представителей нормальной микрофлоры.
Первым и весьма значимым этапом является сбор кала. Его нужно собрать в специальный стерильный контейнер, в утренние часы. Хранить следует не более 1-2 часов. Женщинам при наличии менструальных выделений, следует отложить анализ до окончания, поскольку точность результатов изменится. Материал доставляется на исследование в лабораторию. Анализ проводится с применением стандартной микробиологической техники посева и выделения чистой культуры. Дополнительно проводится антибиотикограмма. По заключению производится разработка рекомендаций, определяется дальнейшая схема исследования.
[27], [28], [29], [30]
Материалом для исследования служит кал, взятый непосредственно после акта дефекации. Нормальная микрофлора ЖКТ состоит из представителей нормальной флоры и нескольких представителей патогенной флоры. Их видовой состав, количество и соотношение строго обозначены и держатся в пределах допустимой нормы. Если такое соотношение нарушается, развивается дисбактериоз. Он может проявляться по-разному. Могут развиваться инфекционные заболевания, если резко увеличивается количество патогенной микрофлоры. Если количество какого-либо микроорганизма резко снижается, свободное место занимают другие представители, которые не свойственны ЖКТ, или же патогенные. Часто свободное место занимает грибок, тогда развиваются различные грибковые поражения, кандидозы.
Для того чтобы определить количественный и качественный состав микрофлоры кишечника, проводят анализ кала на дисбактериоз. Условно всех представителей, обитающих в кишечнике, разделяют на три группы: патогенные, условно-патогенные и непатогенные. Соответственно, анализ состоит из трех частей. Каждая группа микроорганизмов имеет свои потребности в источнике питания, энергии. Для каждой группы нужны отдельные питательные среды и селективные добавки.
Сначала проводят микроскопию и первичный посев. Затем после посева отбирают наиболее крупные колонии, по морфологическим признакам похожие на представителей каждой группы. Производят пересев на селективные среды. После того, как микроорганизмы выросли, производят их идентификацию и сразу же проводят тест на чувствительность к антибиотиком. Применяются стандартные микробиологические методы.
Исследование группы патогенных микроорганизмов, кроме стандартных исследований, подразумевает определение бактерий тифа, паратифа и дизентерии. Также определяется, является ли человек носителем этих микроорганизмов. Комплексное исследование на дисбактериоз включает также исследование представителей группы бифидобактерий и лактобактерий. Исследование занимает порядка недели и зависит от скорости роста микроорганизмов.
[31], [32], [33], [34], [35], [36], [37], [38], [39]
При кишечной инфекции для лечения часто применяют бактериофаги вместо антибиотиков. Бактериофаги представляют собой вирусы бактерий, которые восприимчивы только к ним. Они находят бактерию, с которой комплементарны, проникают в нее и постепенно разрушают бактериальную клетку. В результате инфекционный процесс прекращается. Но не все бактерии чувствительны к бактериофагам. Для того чтобы проверить, будет ли проявлять данный бактериофаг активность по отношению к представителям микрофлоры, нужно провести анализ.
Материалом исследования служит кал. Анализ следует доставить в лабораторию в течение часа, иначе его проведение будет невозможным. Необходимо проводить анализ в нескольких повторностях. Изначальная методика сходна с таковой при определении чувствительности к антибиотикам. Сначала проводится предварительная микроскопия образца, затем – первичный посев на универсальные питательные среды. Затем на селективных питательных средах производят выделение чистой культуры.
Основная работа ведется с чистой культурой. Их обрабатывают различными видами бактериофагов. Если колония растворяется (лизируется), это указывает на высокую активность бактериофага. Если же лизис происходит частичный – бактериофаг функционирует умеренно. При отсутствии лизиса можно говорить об устойчивости к бактериофагу.
Приеимущество фаговой терапии состоит в том, что бактериофаги не оказывают воздействие на организм человека, не вызывают побочного эффекта. Они прикрепляются к определенным видам бактерий и лизируют их. Недостатком является то, что они очень специфичны и оказывают избирательное действие, и не всегда могут прикрепиться к бактериям.
[40], [41], [42], [43], [44], [45], [46], [47], [48]
Анализ представляет собой исследование отделяемого нижних дыхательных путей. Целью является определение вида микроорганизмов, которые выступают в качестве возбудителя заболевания. Также проводится антибиотикограмма. При этом определяют чувствительность возбудителя к антибиотикам, подбирают оптимальную концентрацию. Применяется при заболеваниях дыхательных путей.
Исследование мокроты и другого содержимого легких и бронхов необходимо для выбора схемы терапии, для дифференциации различных диагнозов. Применяется для того, чтобы подтвердить или опровергнуть наличие туберкулеза.
Для начала необходимо получить биологический материал. Он может быть получен при кашле, путем отхаркивания, или путем забора из трахеи при бронхоскопии. Существуют специальные аэрозоли, которые способствуют отхаркиванию. Перед взятием мокроты рот следует прополоскать водой, что позволит снизить степень бактериальной контаминации ротовой полости. Сначала рекомендуется сделать 3 глубоких вдоха, произвести продуктивный кашель. Мокрота также может быть взята методом аспирации из трахеи. При этом в трахею вводится специальный катетер. При бронхоскопии вводится в полость бронхов бронхоскоп. При этом слизистая смазывается анестетиком.
Затем материал поставляют в лабораторию на исследование. Производят посев по стандартной схеме, микроскопия. Затем выделяют чистую культуру, и дальнейшие манипуляции проводят с ней. Ставится антибиотикограмма, которая дает возможность выявить спектр бактериальной чувствительности и подобрать оптимальную дозировку.
При подозрении на туберкулез исследуются утреннюю мокроту в течение трех дней. При исследовании на туберкулез результат будет готов через 3-4 недели. Поскольку микобактерии туберкулеза, которые являются возбудителем заболевания, растут очень медленно.
В норме должны быть обнаружены представители нормальной микрофлоры дыхательных путей. Также необходимо учитывать, что при сниженном иммунитете показатели нормальной микрофлоры могут отличаться.
Представляет собой бактериологическое исследование эякулята спермы с дальнейшим подбором чувствительных антибиотиков и их концентраций. Чаще всего проводится при лечении бесплодия, и других заболеваний мужской половой системы. В том случае, если заболевание сопровождается инфекционным процессом. Основной причиной мужского бесплодия является в большинстве случаев именно инфекция. Обычно изначально проводят спермограмму. По результатам устанавливают оплодотворяющую способность спермы. Если в этом анализе обнаружено большое количество лейкоцитов, можно говорить о воспалительном процессе. При этом обычно сразу же назначают микробиологический анализ, поскольку воспаление почти всегда сопровождается инфекцией. Уже на основании полученных результатов подбирают соответствующую терапию. Исследование обычно назначает андролог.
Также поводом для проведения анализа служит простатит, венерические заболевания. Назначают и в том случае, если у партнерши обнаружено венерическое заболевание.
В основе правильного анализа лежит, прежде всего, правильный забор биологического материала. Забирают материал в специальные сосуды с широким горлом. Температура хранения должна соответствовать температуре тела человека. В таком случае материал может храниться не более часа. В замороженном виде может храниться не более суток. Во время приема антибиотиков посев сдавать нецелесообразно, это меняет клиническую картину. Обычно посев сдают до того, как начат курс антибиотикотерапии. Либо прием лекарств прекратить за 2-3 дня до анализа.
Затем производят его посев на питательную среду. Инкубируют в термостате в течение 1-2 суток. После выделяют чистую культуру, затем проводят идентификацию, определяют чувствительность, а также тип и скорость роста каждой колонии. Чувствительность к антибиотикам определяется в случае выявления патогенных микроорганизмов. В среднем анализ делается 5-7 дней.
[49], [50], [51], [52], [53], [54], [55], [56], [57]
Существует множество тестов, при помощи которых можно определить иммунологическую чувствительность к различным веществам или патогенам. Раньше основным методом было проведение анализов, основанных на реакции агглютинации антител и антигенов. Сегодня эти анализы применяются все меньше, поскольку их чувствительность намного ниже, чем многие современные методики, например глютеновые тесты. Чаще всего в практике прибегают к слюнному тесту на глютен и анализу кала.
Тест на чувствительность к глютену применяется для диагностики различных расстройств кишечника. Основан на реакции иммунной системы. Если в кал добавить глютен, реакция происходит, либо отсутствует. Это расценивается как ложноположительный или ложноотрицательный результат. Положительный указывает на предрасположенность к колитам, высокую вероятность его развития. Также подтверждает целиакию.
Также можно проводить анализ на глютен с использованием слюны в качестве биологического материала. Можно измерять количество антител к глиадину. Положительный результат указывает на чувствительность к глютену. Это может указывать на высокую вероятность диабета. Если в обоих тестах результат положительный, можно подтвердить иабет или целиакию.
[58], [59], [60]
Анализ проводят при лечении инфекционных и воспалительных заболеваний урогенитального тракта, при подозрении на хламидиоз. Материалом для исследования служит соскоб из слизистой влагалища – у женщин, мазок из уретры – у мужчин. Забор производится в процедурном кабинете с использованием одноразового оборудования. Важно соблюдать стерильность. Перед забором материала следует воздержаться от интимной близости в течение 1-2 дней до начала исследования. Если у женщины менструация, забор материала производится спустя 3 дня после ее полного окончания.
Материал доставляют в лабораторию. Полный анализ включает предварительную микроскопию мазка. Это дает возможность визуально определить микрофлору по морфологическим признакам, правильно подобрать питательные среды. Содержание слизи, гноя, частичек эпителия, может прямо или косвенно указывать на развитие воспалительного процесса или злокачественное перерождение клеток.
Затем производят первичный посев. Культуру инкубируют в течение нескольких дней в условиях термостата, производят идентификацию по культуральным признакам. Затем производят пересев на селективные питательные среды, предназначенные для культивирования хламидий. Полученные колонии идентифицируют с использованием биохимических тестов. После определяют чувствительность к антибиотикам стандартными методами. Подбирают наиболее чувствительный антибиотик, его концентрацию. Для культивирования хламидий нужны специальные среды, разработанные именно для этого типа микроорганизмов, которые содержат все необходимые вещества и факторы роста.
Также можно проводить исследование биологическим методом. Для этого заражают возбудителем крыс. В некоторых лабораториях используется вместо крыс специально выращенная культура тканей. Это связано с тем, что хламидии являются внутриклеточными паразитами, и для их культивирования нужны специальные условия. Затем определяют микроорганизмы методом ПЦР. Для определения чувствительности производят пересадку на селективную питательную среду для хламидий, через несколько суток производят учет результатов. О резистентности или чувствительности судят по подавлению инфекционного процесса в клетках.
[61], [62], [63], [64], [65], [66], [67], [68], [69]
В среднем анализ делается в течение 5-7 дней. Некоторые анализы делаются и дольше. Например, при диагностике туберкулеза результатов приходится ждать от 3 недель до месяца. Все зависит от скорости роста микроорганизмов. Часто сотрудникам лаборатории приходится сталкиваться со случаями, когда, пациенты просят сделать анализ быстрее. И даже предлагают «доплату» за срочность. Однако здесь нужно понимать, что от действий лаборанта в данном случае ничего не зависит. А зависит только от того, насколько быстро растет микроорганизм. Каждый вид имеет свою, строго определенную скорость роста.
Показателей абсолютной универсальной нормы для всех анализов не существует. Во-первых, для каждого биотопа эти показатели могут отличаться. Во-вторых, они индивидуальны для каждого микроорганизма. То есть показатели нормы одного и того же микроорганизма, скажем, для горла и кишечника отличается. Так, если в горле преобладает стафилококк как представитель нормальной микрофлоры, то в кишечнике преобладает кишечная палочка, бифидо- и лактобактерии. Также могут существенно отличаться показатели для одного и того же микроорганизма в разных биотопах. Например, кандиды в норме могут содержаться в определенном количестве в урогенительной микрофлоре. В ротовой же полости в норме они не содержатся. Попадание кандид в ротовую полость может указывать на их искусственный занос их из естественной среды обитания.
Моча, кровь, спинномозговая жидкость – это биологические среды, которые в норме должны быть стерильными, то есть не должны содержать никакой микрофлоры. Попадание в эти жидкости микрофлоры указывает на сильный воспалительный, инфекционный процесс, а также указывает на риск развития бактериемии и сепсиса.
В целом, есть примерная классификация. Единицей измерения в микробиологии служит КОЭ/мл, то есть количество колониеобразующих единиц в 1 миллилитре биологической жидкости. Степень обсеменения определяется числом КОЭ и варьирует в широком диапазоне от 10 1 до 10 9 . Соответственно, 10 1 – минимальное количество микроорганизмов, 10 9 – тяжелая степень инфицирования. При этом показателями нормы считается диапазон до 10 3 , все показатели свыше этого числа указывают на патологическое размножение бактерий.
Что касается чувствительности к антибиотикам, все микроорганизмы подразделяют на устойчивые, умеренно чувствительные, чувствительные. Часто этот результат выражают в виде качественной характеристики с указанием МИГ – минимальной ингибирующей дозы антибиотика, которая еще угнетает рост микроорганизма. Для каждого человека, как и для каждого микроорганизма, эти показатели строго индивидуальны.
[70], [71], [72], [73], [74], [75], [76], [77]
При проведении бактериологических исследований, тем более с определением чувствительности к антибиотикам, одного аппарата будет недостаточно. Необходимо полное, комплексное оснащение бактериологической лаборатории. Необходимо тщательно спланировать и подобрать оборудование, которое будет соответствовать каждому этапу исследований. На этапе забора биологического материала необходимы стерильные инструменты, боксы, биксы, контейнеры, камеры для хранения и транспортировочное оборудование для доставки материала в лабораторию.
В лаборатории в первую очередь понадобится качественный микроскоп для микроскопии мазков. Сегодня существует большое количество микроскопов, которые обладают самыми различными свойствами – от традиционного светового до фазово-контрастного и атомно-силового микроскопа. Современное оборудование позволяет сканировать изображение в трехмерном пространстве и рассматривать на большом увеличении с высокой точностью.
На этапе посева и инкубации микроорганизмов могут потребоваться автоклавы, сухожаровые шкафы, эксикаторы, паровые бани, центрифуга. Обязательно необходим термостат, в котором происходит основная инкубация биологического материала.
На этапе идентификации микроорганизмов и проведения антибиотикограммы, могут потребоваться микроманипуляторы, масс-спектрометры, спектрофотометры, колориметры для различных подсчетов и оценки биохимических свойств культур.
Кроме этого, современные лаборатории могут быть оборудованы высокотехнологичной аппаратурой, которая выполняет все перечисленные основные этапы исследования, вплоть до подсчетов результатов в автоматическом режиме. К числу таких приборов относят, к примеру, комплексное устройство бактериологической лаборатории на базе времяпролетного масс-спектрометра. Эта линия приборов дает возможность разделить всю территорию лаборатории на три зоны. Первая зона – грязная, в которой производится прием анализов, регистрация. Вторая зона – рабочая, в которой собственно и производят основные микробиологические исследования. И третья зона – стерилизационная и автоклавная, где производится подготовка и утилизация рабочего материала.
Модели дают возможность производить инкубирование при широком диапазоне температур и условий. Содержится встроенный анализатор крови и других биологических образцов, который выдает результаты с высокой точностью и достоверностью. В комплектацию включены электронные весы, бидистилляторы, центрифуги, автоклавы и стерилизационные шкафы, автоматическая средоварка, водяная баня со встроенной мешалкой, рН-метры, термометры и микроскопы.
Также применяют микробиологический анализатор, в который закладываются исследуемые образцы, питательные среды, наборы тестов для определения чувствительности. Аппарат выполняет необходимые исследования и выдает готовое заключение.
Расшифровку анализа может сделать только врач. Но зачастую пациенты, получив результат на руки, впадают в панику, заметив большое количество непонятных обозначений и цифр. Для того чтобы не теряться, целесообразно иметь хотя бы общее представление о том, как расшифровать анализ на чувствительность к антибиотикам. Обычно в результатах первым пунктом указывают название микроорганизма, который является возбудителем заболевания. Название приводится на латинском языке. Также здесь может быть указан представитель нормальной микрофлоры, который преобладает в организме, поэтому паниковать не стоит. Вторым пунктом указывается степень обсеменения, то есть количество микроорганизма. Обычно это число колеблется в пределах от 10 1 до 10 9 . Третьим пунктом указывается форма патогенности, и четвертым – названия антибактериальных препаратов, к которым этот микроорганизм чувствителен. Рядом указывается минимальная ингибирующая концентрация, при которой происходит подавление роста микроорганизма.
[78], [79], [80], [81], [82], [83], [84]
источник