Анализ риф на половые инфекции

Реакция иммунофлюоресценции (РИФ) — серологическая реакция, позволяющая выявить антитела к известным антигенам. Метод заключается в микроскопии окрашенных мазков.

Данную реакцию используют в иммунологии, вирусологии и микробиологии. Она позволяет определить наличие вирусов, бактерий, грибов, простейших и ИКК. РИФ очень широко применяется в диагностической практике для обнаружения вирусных и бактериальных антигенов в инфекционном материале. Метод основан на способности флюорохрома вступать в связь с белками, не нарушая при этом их иммунологической специфичности. В основном применяется при диагностике инфекций мочеполовых путей.

Различают следующие методы проведения реакции иммунофлюоресценции: прямой, непрямой, с комплементом. Прямой метод заключается в окрашивании материала флюорохромами. Благодаря способности антигенов микробов или тканей светиться в УФ-лучах люминесцентного микроскопа, они определяются как клетки с ярко окрашенной каймой зеленного цвета.

Непрямой метод заключается в определении комплекса антиген+антитело. Для этого опытный материал обрабатывается антителами антимикробной кроличьей сыворотки, предназначенной для диагностики. После того как антитела свяжутся с микробами, их отделяют от не связавшихся и обрабатывают антикроличьей сывороткой, помеченной флюорохромом. После этого комплекс микроб+анимикробные антитела+анитикроличьи антитела определяется с помощью ультрафиолетового микроскопа также, как и при прямом методе.

Реакция иммунофлюоресценции незаменима при диагностике сифилиса. Под воздействием флюорохрома возбудитель сифилиса определяется как клетка с желто-зеленой каймой. Отсутствие свечения означает, что пациент не заражен сифилисом. Этот анализ часто назначается при положительной реакции Вассермана. Данный метод очень эффективен при диагностике, так как позволяет определить возбудителя на ранних стадиях заболевания.

Кроме того, что РИФ позволяет диагностировать сифилис, его также применяют для определения наличия таких возбудителей как хламидии, микоплазма, трихомонады, а также возбудителей гонореи и генитального герпеса.

Для проведения анализа используют мазки или венозную кровь. Процедура взятия мазка совершенно безболезненная и не представляет никакой опасности. К сдаче данного анализа необходимо подготовиться. За двенадцать часов до него не рекомендуется пользоваться средствами гигиены, такими как мало или гели. Также иногда по показаниям врача проводиться провокация. Для этого рекомендуют прием острой пищи или алкоголя или проводится инъекция провоцирующего вещества, например гоновакцина или пирогенал. Помимо этого промежуток между приемом антибактериальных препаратов и сдачей анализа должен быть не менее четырнадцати дней.

При оценке результатов следует учитывать тот факт, что свечение наблюдается не только у живых бактерий, но и у мертвых, особенно это относится к хламидиям. После курса антибиотиков мертвые клетки хламидий также обладают свечением.

При правильной подготовке пациента и соблюдении техники взятия мазка, данный анализ позволяет определить заболевания на ранних стадиях, что очень важно для своевременного лечения. Положительными сторонами данного метода является короткие сроки получения результата, простота выполнения и небольшая стоимость анализа.

К недостаткам можно отнести то, что для проведения анализа необходимо достаточно большое количество исследуемого материала. Кроме того, оценку результатов может проводить только опытный специалист.

источник

Сегодня лаборатории могут предложить различные анализы для обнаружения инфекций, передающихся половым путем, в том числе тех, которые протекают в скрытой форме.

Исследование крови на ИППП назначается не только обычным пациентам, но и женщинам при беременности.

Пройти исследование на ИППП пациент может следующим образом:

• Анализплазмы (сыворотки) крови на ИППП. Диагностика позволяет выявить присутствие в организме вирусных гепатитов, склонных передаваться половым путем (тип B и C). Также проводится с целью обнаружения Chlamydia trachomatis, Treponema pallidum и HIV-инфекцию (ВИЧ).
• Диагностика мазка ПЦР-методом. Исследование позволяет обнаружить более широкий спектр заболеваний, передающихся половым путем. ПЦР мазка может подтвердить присутствие патогенных микроорганизмов бактериальной, вирусной и грибковой этиологии, находящихся на доклинической стадии, когда явные признаки инфицирования отсутствуют.

• Какие применяют виды анализов крови для выявления инфекции
• ПЦР крови в диагностике ИППП
• Анализ крови на Treponema pallidum (сифилис)
• Когда назначается анализ крови на Treponema pallidum
• Анализ крови на Chlamydia trachomatis (хламидиоз)
• Тестирование крови на маркеры Hepatitis B и С
• Что означает положительное обнаружение HBsAG в крови
• Исследование крови на Herpes simplex (герпес)
• Как интерпретировать результат определения антител к ВПГ-2 в крови
• Анализ крови на ИППП: вопросы пациентов

Сдать кровь на ИППП для диагностики инфекционного процесса, можно прибегнув к таким исследованиям:

Иммунологический анализ ELISA

ИФА (enzyme-linked immunosorbent assay) представляет собой иммунологический анализ.

Используется для определения антител, антигенов, белков и других низкомолекулярных соединений гликопротеинов.

На каждый тип патогенного микроорганизма вырабатываются собственные антитела, которые позволяет выявить ИФА.

Сегодня анализ назначается для достижения следующих целей:

• выявление антител к патологии инфекционного характера;
• поиск антигенов болезней, передающихся половым путем;
• исследование сыворотки крови на наличие аутоиммунных патологий;
• обнаружение специфических раковых веществ (онкомаркеров).

Иммунофлюоресцентный анализ (РИФ)

Также можно встретить под названием метод Кунса.

Представляет собой серологическую реакцию, которая может обнаружить антитела к известному антигену.

Таким образом, обнаружение определенного белка с помощью иммунофлюоресценции основано на реакции антитело-антиген.

Методика РИФ основывается на окрашивании мазка крови и последующем его микроскопическом исследовании.

Различают прямую и непрямую иммунофлюоресценцию.

В случае непрямой иммунофлюоресценции, антитела, которые должны быть обнаружены в сыворотке крови пациента, сначала связываются с антигенами, которые фиксируются в твердой фазе.

При прямой или первичной иммунофлюоресценции специфическое антитело для тестируемого белка связывается с флуорохромом.

Иммуноблоттинг

Метод лабораторного исследования, который отличается высокой точностью и чувствительностью.

Проводится с целью уточнения диагноза, если ИФА показал сомнительные результаты.

Вестерн-блоттинг, также известный как иммуноблоттинг или белковый блоттинг, является основным методом в клеточной и молекулярной биологии.

Метод используется, чтобы обнаружить присутствие определенного белка в сложной смеси, извлеченной из клеток.

Поскольку Вестерн-блоттинг выполняется быстро, с использованием простого оборудования и недорогих реагентов, это один из самых распространенных лабораторных методик.

Первым этапом процедуры вестерн-блоттинга является разделение макромолекул в образце с помощью гель-электрофореза.

Затем разделенные молекулы переносятся или блотируются на вторую матрицу, обычно на нитроцеллюлозную или поливинилидендифторидную мембрану.

После чего мембрана поддается блокированию с целью предотвращения какого-либо неспецифического связывания антител с поверхностью мембраны.

В качестве исследуемого материала используется кровь (сыворотка или плазма).

Полимеразная цепная реакция популярный метод диагностики заболеваний, передающихся половым путем.

Анализ крови на ИППП с помощью ПЦР отличается быстротой, высокой точностью и способностью определить инфекцию на самых ранних стадиях развития.

Однако пациенту необходимо учитывать, что сдать анализ крови на ИППП методом ПЦР возможно не на все инфекционные заболевания.

Диагностика крови полимеразной реакции позволяет выявить герпес, CMV, гепатит, ВИЧ.

Для обнаружения других видов половых болезней пациенту необходимо сдать урогенитальный мазок.

Расшифровка ПЦР анализа крови на ИППП будет содержать два результата: «отрицательно» или «положительно».

Результат «отрицательно» указывает на отсутствие в исследуемом биологическом материале инфекционного патогена.

При получении такого результата следует говорить об отсутствии заболевания.

При положительном результате подразумевается присутствие в крови искомого патогена.

При получении подобного заключения следует рассматривать присутствие в организме инфекционного или вирусного заболевания.

Также ПЦР может показать положительный результат, при этом клинические признаки заболевания могут отсутствовать.

В данном случае речь идет о бессимптомном носительстве, при котором терапия не назначается, но рекомендуется постоянный врачебный контроль.

Это касается только тех случаев, когда исследовался урогенитальный мазок.

Данный результат анализа чаще всего наблюдается при вирусе папилломы человека и герпетической инфекции.

Если же положительный результат получен в ходе диагностики крови, пациент не рассматривается как носитель, здесь уже потребуется специфическое лечение.

Исследование крови на присутствие бледной трепонемы носит название «реакция Вассермана».

Тест Вассермана (RW), названный в честь немецкого врача и бактериолога Августа фон Вассермана, был разработан в 1906 году. Анализ включает тестирование образцов крови пациентов на наличие антител к сифилисной бактерии.

Тест Вассермана с трудом идентифицирует первичный сифилис из-за того, что вырабатывается недостаточное количеств реагина.

При вторичном сифилисе реакция почти всегда будет положительной из-за активной пролиферации и широкого распространения патогена.

Это приводит к образованию достаточного количества антител.

Тест Вассермана является наиболее диагностически ценным.

Но, с другой стороны, исследование имеет относительно высокую вероятность ошибки.

Поэтому, одновременно с RW следует прибегать к другим лабораторным тестированиям.

Также, в ряде случаев следует провести исследование спинномозговой жидкости.

• Случайный сексуальный контакт без использования презерватива.
• В качестве стандартного анализа перед хирургическим вмешательством.
• Развитие клинических признаков инфекции (высыпания, патологические выделения и др.).
• В качестве профилактического обследования.

Анализ крови на выявление такой ИППП как сифилис, в обязательном порядке назначается пациенткам при планировании беременности.

Подготовка к RW

В качестве биологического материала выступает венозная кровь.

Забор материала проводят в утреннее время, как правило, до 12 часов.

За 8-12 часов следует исключить употребление еды, кофеиносодержащих и алкогольных напитков, соков, а также медикаментозных препаратов.

Перед анализом рекомендуется выпить стакан очищенной воды без газа.

Оценка полученных результатов крови на ИППП проводится следующим образом:

Отрицательно:

1) Сифилис не был выявлен, заболевание отсутствует.

2) Инфекционный процесс находится в стадии позднего или раннего течения.

1) В организме присутствует Treponema pallidum, сифилис может протекать как первично, вторично или третично.

2) После курса терапии прошло менее 12 месяцев.

Анализы крови, проведенные по реакции Вассермана на ИППП — сифилис, могут быть ложноположительные в таких случаях:

• протекающие онкологические процессы;
• ранние сроки беременности;
• наличие вирусного поражения печени (гепатиты);
• при употреблении наркотических веществ и при алкоголизме;
• после прохождения вакцинирования.

Положительная реакция Вассермана требует более тщательного обследования пациента врачом-венерологом.

Серологическое исследование крови — определение в биоматериале антител может помочь определить этапность инфекционного процесса и его характер.

В основе лабораторного тестирования лежит определение специфических антител в сыворотке крови, которые вырабатываются организмом при внедрении Chlamydia trachomatis.

В основном принято выделять три типа антител, которые можно выявить в ходе серологического анализа: M, G и A.

Антитела, также известные как иммуноглобулины, представляют собой белковые молекулы, образованные иммунной системой для борьбы с патогенами.

В зависимости от их структуры антитела делятся на пять классов.

В зависимости от принадлежности к классу они встречаются в определенном месте тела, где они выполняют определенные функции.

Различают следующие классы антител:

• IgM (иммуноглобулин М)

При первом заражении возбудителем IgM образуется сразу.

Таким образом, это первый признак новой инфекции.

• IgG (иммуноглобулин G)

IgG является наиболее распространенным антителом в крови.

Иммуноглобулины класса G преимущественно находятся в плазме и состоят из нескольких подтипов.

Часто IgG можно выявить при хронических инфекциях или если они уже прошли.

Он образуется только через три недели после начала заражения, когда организм снова вступает в контакт с тем же патогеном.

В-лимфоциты немедленно воссоздают соответствующие антитела для защиты от инфекции.

• IgA (иммуноглобулин A)

IgA встречается в секреции слизистых оболочек.

IgA несет ответственность за местный иммунитет, в частности мочеполовой системы.

Дефицит данного иммуноглобулина говорит о снижении локального иммунитета.

Это может быть как временным, так и постоянным явлением.

При развитии острого инфекционного процесса, связанного с заражением Chlamydia trachomatis, в крови пациента можно выявить иммуноглобулин М.

Также завышенные или сниженные концентрации IgG/IgA.

Наличие в организме антител класса М говорит о раннем течении инфекции или о хроническом хламидиозе, который обострился.

Также о недавнем заражении хламидиозом будут свидетельствовать высокие показатели IgM в сочетании с низкой концентрацией IgG.

После курса лечения, в качестве контроля рекомендуется повторно сдать анализ крови и мазка на ИППП.

Обнаружить в крови присутствие вируса гепатита B можно благодаря специфическому маркеру HBsAg, который представляет собой оболочку патогена.

Антиген HBs обнаруживается с помощью иммуноферментного анализа.

В большинстве случаев это первый обнаруживаемый маркер инфекции гепатита B и показатель активности заболевания и инфекционности пациента.

Положительное обнаружение HBsAg говорит о персистирующей (постоянной) инфекции с высокой вирусной нагрузкой.

В случае положительного определения HBsAG в крови можно говорить о присутствии следующих заболеваний:

• Острый гепатит В.
• Хронический гепатит В.
• Носитель антигена (эти люди не имеют симптомов, но могут передавать вирус).

Что означает отрицательный результат HBsAg

Получение отрицательного результата, как правило, говорит о том, что вирус в организме не обнаружен.

Однако если пациент недавно проходил терапию с использованием препаратов на основе гепарина, можно получить ложноотрицательный результат.

В данном случае рекомендуется повторно сдать анализ, когда лучше это сделать, посоветует врач.

В целом лабораторные значения при выяснении инфекции гепатита всегда должны оцениваться вместе и в сочетании с конкретными показателями анализов печени, включая AST и ALT.

Чтобы доказать хронический гепатит B или оценить активность заболевания, в крови можно измерить геном вируса гепатита В.

Это дезоксирибонуклеиновая кислота — ДНК.

То есть так называемое определение вирусной нагрузки методом полимеразной цепной реакции — ПЦР).

Выявить гепатит C возможно с помощью специального маркера anti-HCV (антитела к гепатиту С).

Положительный результат анализа может означать следующее:

• острый гепатит C;
• хронический гепатит C;
• недавно пройденная терапия против вируса.

При некоторых заболеваниях, таких как ревматизм или аутоиммунные расстройства, могут быть получены ложноположительные результаты при выявлении anti-HCV.

Положительное обнаружение anti-HCV должно быть дополнительно подтверждено другими исследованиями.

Для этой цели в первую очередь прибегают к PCR для обнаружения вирусной ДНК гепатита C в крови.

Если в ходе ПЦР было обнаружено ДНК гепатита, следует говорить об активной фазе заболевания.

Необходимо как можно скорее начать противовирусное лечение.

Отрицательный тест на anti-HCV означает маловероятное присутствие вируса в организме, но не исключает его со 100% уверенностью.

Особенно, если анализ проводился в период «диагностического окна».

Аnti-HCV является основным параметром серологии гепатита.

Сдача такого анализа (а также и на другие ИППП), потребуется человеку, который решил участвовать при переливании крови, а именно, стать донором.

Анализ крови на HIV (ВИЧ)

Наиболее популярным лабораторным исследованием на ВИЧ является ИФА-анализ.

Сегодня скрининг-тест на ВИЧ (ELISA) обычно проводится как комбинированный анализ.

Может обнаружить как антитела, так и антиген p24 (белок, формирующий нуклеокапсид ВИЧ-1).

Поскольку ретровирус встречается в двух вариантах, тип 1 и тип 2, должны быть обнаружены антитела против обоих видов вируса.

Обнаружение антител против ВИЧ в крови является первым шагом в исследовании возможной ВИЧ-инфекции.

Что означает положительное обнаружение антител к ВИЧ в крови

Положительное обнаружение антител к ВИЧ всегда может интерпретироваться следующим образом:

• заболевание на самом деле имеется, в организме присутствует ВИЧ-инфекция;
• результат теста «ложноположительный» (анализ назначается повторно или проводятся другие тестирования).

По этой причине любое положительное обнаружение антител к ВИЧ должно быть подтверждено с помощью других лабораторных исследований.

Для этого прибегают к иммуноблоту.

С его помощью в крови обнаруживаются определенные компоненты вирусных белков ВИЧ или специфические антитела против отдельных белков ретровируса.

Этот подтверждающий тест должен проводиться с использованием второго образца крови.

При получении положительного результата иммуноблотинга, его следует рассматривать как подтверждающий фактор наличия заболевания.

Следующие исследования используются в качестве диагностики характера прогрессирования ретровируса и оценки прогноза инфекции:

• Скрининг на ВИЧ (обнаружение антител) / иммуноблот (подтверждающий тест).
• ПЦР на ВИЧ применяется для определения количества вируса («вирусная нагрузка») в крови. Чем больше вирусных частиц в исследуемом образце материала, тем хуже для пациента. По мере проведения терапии вирусная нагрузка должна снижаться.
• Определение CD4 лимфоцитов и других подтипов лимфоцитов в крови.

Инфекция «вирус иммунодефицит человека» (ВИЧ) является причиной возникновения так называемого «синдрома приобретенного иммунодефицита» (СПИД).

По оценкам, в настоящее время более 30 миллионов человек во всем мире инфицированы ВИЧ.

СПИД является одной из пяти наиболее распространенных причин смерти.

Генитальный герпес является инфекционным заболеванием, вызываемым вирусом простого герпеса (ВПГ) 1 или 2 типа.

От 70 до 80 % всех случаев генитального герпеса связано с ВПГ-2, который передается во время полового акта.

HSV-1 является ДНК-вирусом семейства герпесвирусов человека.

Герпесвирусы обладают типичной способностью сохраняться в организме после острой инфекции.

В определенных ситуациях (как правило, это ослабление иммунной системы), вызывают повторное обострение заболевания.

У людей инфекция HSV-2 приводит к типичным симптомам:

• Генитальный герпес: первичная инфекция ВПГ-2 встречается в подростковом и взрослом возрасте в результате сексуального контакта с носителем инфекции. Основная клиническая картина — характерные высыпания в области гениталий.
• Заражение ребенка в утробе или во время рождения. ВПГ-2 может привести к опасному для жизни состоянию — герпетическому энцефалиту.

Для диагностического выяснения подозреваемой инфекции могут быть использованы следующие лабораторные исследования:

• Обнаружение антител против IgG и IgM типа HSV-2.
• ПЦР ДНК ВПГ-2 (с целью выявить острую инфекцию).

Для определения антител в крови существуют различные лабораторные процедуры.

Наиболее часто используемые такие тестирования:

• Метод ELISA (иммуноферментный анализ). Принцип анализа все тот же, в образце крови определяются антитела к герпесу.
• ВПГ-2 иммуноблот. С помощью этого метода могут быть обнаружены такие антитела как IgG и IgM.
• Метод РСК. Диагностика основана на том, что при определенном соответствии друг другу антитело и антиген приводят к развитию иммунного комплекса. Впоследствии чего, к иммунному комплексу через кристаллизующийся фрагмент присоединяется система комплемента. Анализ РСК является сложным серологическим исследованием, требующим использования пяти ингредиентов. Недостаток метода РСК состоит в том, что он определяет только всю совокупность антител к HSV-2 и не может отличить IgG от IgM.

Антитела к ВПГ-2 типа IgG.

Эти антитела образуются только на более поздних стадиях острой инфекции и обычно обнаруживаются на протяжении всей жизни.

При острой инфекции HSV-2 следует контролировать течение антител IgG в крови в течение двух недель.

Антитела к ВПГ-2 типа IgM.

Эти антитела образуются иммунной системой на ранней стадии инфекции.

Высокие уровни IgM указывают на острое течение инфекционного процесса.

Антитела IgM к ВПГ-2 также могут снова стать положительными в ходе эндогенной реактивации персистирующей инфекции (типичной для всех герпесвирусов).

В дополнение к серологическим методам обнаружения ВПГ-2, существуют также, так называемые методы прямого обнаружения.

Наиболее важным методом считается анализ ДНК вируса путем ПЦР.

Это молекулярно-диагностическая процедура создана для обнаружения генетического материала патогена в крови.

Преимущество ПЦР ДНК HSV-2 заключается в быстрой доступности результатов анализа.

Кроме того, метод ПЦР обладает очень высокой чувствительностью.

Это означает, что даже самое незначительное количество вируса в исследуемом материале приводит к получению надежного результата.

Когда после заражения можно сдать кровь на ВИЧ и другие ИППП?

Пройти лабораторное тестирование можно спустя 3-4 недели после предполагаемого инфицирования.

На какие иммуноглобулины (антитела) смотрят специалисты при анализе крови на ИППП?

Основное значение придается показателям антител M и G.

Чем отличается анализ крови на ИППП методом ИФА и ПЦР?

Метод ИФА направлен на обнаружение антител.

При их выявлении можно говорить о контакте с патогеном, но нельзя наверняка сказать о текущем инфекционном процессе.

ПЦР позволяет обнаружить непосредственно самого возбудителя инфекции, что будет говорить о наличии заболевания.

К какому врачу можно обратиться для сдачи крови на обнаружение ИППП?

Если появилась необходимость обследоваться на наличие венерических патологий, следует обратиться к венерологу.

При необходимости данного специалиста могут заменить уролог и гинеколог.

Сдать кровь на ИППП можно без огласки, анонимно.

Для сдачи крови на ИППП обращайтесь к автору этой статьи – венерологу в Москве с многолетним опытом работы.

• ВИЧ
• Гарднереллез
• Кондиломатоз
• Молочница
• Сифилис
• Трихомониаз
• Баланопостит
• Герпес
• Гонорея
• Микоплазмоз
• Уреаплазмоз
• Уретрит
• Хламидиоз
• ЗППП

источник

Реакция иммобилизации бледных трепонем (РИБТ). Обязательным условием является исключение перед обследованием приема больным антибиотиков, которые оказывают токсическое действие на бледные трепонемы, вызывая их неспецифическое обездвижение.

Положительные результаты РИБТ обнаруживаются примерно с середины вторичного свежего периода сифилиса, и могут длительно сохраняться после проведенного лечения. При необходимости метод используют для выявления АТ в СМЖ, это исследование отличает высокая специфичность, но низкая чувствительность (около 40 %).

РИБТ мало пригодна для диагностики ранних форм сифилиса ввиду позднего (не ранее 8–9 недель от момента заражения) появления АТ-иммобилизинов; метод может давать ложноположительные результаты, в особенности у больных с аутоиммунной патологией, злокачественными заболеваниями, диабетом. Кроме того, РИБТ – достаточно сложный, трудоемкий и дорогостоящий анализ, требующий высокой квалификации персонала и наличия вивария, в связи с чем в последние годы он используется лишь в отдельных лабораториях. В диагностике РИБТ применяется как реакция-арбитр при расхождении результатов других серологических исследований, для дифференцирования ложноположительных результатов и при установлении диагноза поздних форм сифилиса.

Реакция связывания комплемента с трепонемным антигеном (РСК с ТА).Чувствительность метода – около 80 %, специфичность – 98 %. Метод входил в состав комплекса стандартных серологических реакций на сифилис, регламентированного приказом Минздрава СССР № 1161 от 02.09.1985 «О совершенствовании серологической диагностики сифилиса». В настоящее время использование этой реакции, как и РСК с кардиолипиновым антигеном, ограничено отдельными лабораториями.

Реакция иммунофлуоресценции (РИФ). Для диагностики сифилиса используют несколько модификаций РИФ: РИФ-ц – для выявления АТ в СМЖ, РИФ-200 (тестируемую сыворотку перед реакцией разводят в 200 раз); РИФ-абс (РИФ с абсорбцией), IgM-РИФ-абс (для определения АТ IgM). По чувствительности и специфичности РИФ-абс не уступает РИБТ, но выполнение этого метода намного проще. Результаты РИФ-абс становятся положительными с 3–й недели после заражения (до появления твердого шанкра или одновременно с ним), это метод ранней диагностики сифилиса. Нередки положительные результаты исследования спустя много лет после полноценного лечения раннего сифилиса, а у больных с поздним сифилисом – на протяжении десятилетий.

Показания для выполнения РИФ-абс:

• положительные результаты НТТ у беременных при отсутствии клинических и анамнестических данных, свидетельствующих о сифилисе;
• обследование лиц с различными соматическими и инфекционными заболеваниями, при которых отмечают положительные результаты НТТ;
• обследование лиц с клиническими проявлениями, характерными для сифилиса, но с отрицательными результатами НТТ;
• ранняя диагностика сифилиса;
• в части случаев – как критерий успешности противосифилитического лечения: переход положительной РИФ-абс в отрицательную после лечения является 100% критерием излеченности сифилиса.

IgM–РИФ–абс применяют для раздельного выявления АТ классов Ig, что представляет особый интерес при диагностике врожденного сифилиса, когда АТ к трепонеме, синтезированные в организме ребенка, представлены IgM, а АТ IgG имеют материнское происхождение. Показаниями к проведению этого исследования являются: диагностика врожденного сифилиса; оценка результатов лечения раннего сифилиса.

РИФ обладает высокой чувствительностью (98,5%) и специфичностью (99,6%) практически при всех формах сифилиса. Недостатками РИФ являются: невозможность автоматизации исследования и учета результатов; трудности приготовления качественного антигена из взвеси бледных трепонем, полученных из яичка зараженного кролика; субъективизм в оценке результатов.

Реакция пассивной гемагглютинации (РПГА). Сопоставление результатов, полученных при использовании РПГА и РИБТ, РИФ–абс, КСР, МРП показало высокую чувствительность и специфичность РПГА при диагностике сифилиса, совпадающую с результатами РИФ–абс.

РПГА может быть выполнена в качественном и количественном вариантах, существуют их макро- и микромодификации. Количественный метод РПГА позволяет оценить концентрацию специфических трепонемных АТ в крови. Титры от 1 : 640 и ниже характерны для пациентов, леченных по поводу сифилиса в прошлом. Более высокие титры – обычно для активной нелеченной инфекции.

Положительные результаты РПГА, как правило, отмечают спустя 3 недели после появления твердого шанкра и далее у пациентов, перенесших сифилис, в течение многих лет, нередко пожизненно.

Чувствительность РПГА составляет 76% при первичном сифилисе; 100% при вторичном сифилисе; 97% при скрытом сифилисе; 94% при позднем сифилисе. Специфичность РПГА выше, чем специфичность РИФ–абс, составляет 99%.

Благодаря соотношению высокой специфичности, чувствительности, простоты выполнения, стандартизации реагентов среди трепонемных тестов для серодиагностики сифилиса РПГА стабильно занимает лидирующее место в клинической практике в мире.

Особые преимущества ИФА заключаются: в высокой чувствительности и специфичности метода; автоматизации постановки реакции; высокой степени стандартизации; возможности исследования большого количества образцов сывороток; в количественном учете и объективной документации полученных результатов; возможности одновременного определения титра противотрепонемных АТ разных классов (IgG и IgM) в одном образце; пригодности для ранней диагностики сифилиса и диагностики врожденного сифилиса; в удобстве применения для тестирования крови в службе переливания крови; применимости в качестве подтверждающего специфического трепонемного теста. Чувствительность ИФА 98–100%, специфичность 96–100%.

К недостаткам ИФА можно отнести: непригодность для исследования единичных образцов; более длительный срок до получения результата, и меньший срок годности ИФА-наборов, например, по сравнению с РПГА.

Иммунный блот (ИБ). Одним из современных методов диагностики сифилиса является ИБ для определения АТ IgG либо IgM к определенным АГ бледной трепонемы.

Метод обладает высокой чувствительностью (до 100%,), специфичностью (98%) и воспроизводимостью (100%). Исследование дает возможность изучения спектра АТ сразу к нескольким АГ T.pallidum, применения высокоочищенных рекомбинантных и пептидных АГ, снижающих до минимума неспецифическую реактивность сывороток.

Все это определяет возможность предпочтения применения метода ИБ перед другими трепонемными тестами для верификации диагноза сифилиса в сложных случаях, в частности, для диагностики сифилиса во второй половине инкубационного периода, скрытого врожденного сифилиса в первые дни жизни ребенка, для выявления скрытого сифилиса у лиц со слабым гуморальным ответом, а также для дифференцирования ложноположительных результатов других тестов.

источник

Тесты РИФ и РИБТ – анализы для выявления сифилиса.

Эти исследования относятся к специфическим трепонемным тестам.

Когда назначается РИБТ-анализ, у пациента возникает вопрос, что это?

РИБТ – это реакция иммобилизации бледных трепонем.

Такой анализ является наиболее специфичным видом определения сифилиса.

При исследовании в сыворотке крови определяют антитела – иммобилизины. Такие белки лишают подвижности бледные трепонемы. Это позволяет произвести количественный подсчет возбудителя.

Важно! Когда назначается анализ РИБТ, сдать его можно только через 2 недели после отмены антибиотиков.

РИФ расшифровывается как «реакция иммунофлюоресценции».

Этот анализ исследует свечение возбудителей сифилиса.

Такая реакция возникает при наличии антител к бледной трепонеме в сыворотке крови пациента.

Кровь на РИБТ и РИФ сдают для того, чтобы выявить скрытый сифилис.

Реакция иммунофлюоресценции дает возможность поставить диагноз, даже если в крови не выявляется бледная трепонема. Для этого требуется проведение исследования с десятикратным разведением сыворотки.

Важно! Реакция РИБТ неэффективна для установления раннего сифилиса.

Это связано с тем, что иммобилизины появляются только через 1,5 – 2 месяца после инфицирования.

Кровь на РИБТ сдают по следующим показаниям.

• Диагностика скрытого сифилиса, в том числе у беременных.
• Сифилис на поздних стадиях болезни.
• Контроль лечения сифилиса.
• Положительная реакция Вассермана при отсутствии клинических проявлений.

РИФ и РИБТ, если сифилис вылечен, могут оставаться положительными. Это связано с тем, что антитела к бледной трепонеме еще какое-то время циркулируют в крови.

РИБТ становится отрицательным в течение полугода после окончания эффективного лечения. РИФ может сохранять положительную реакцию дольше. Это связано с тем, что свечение возникает не только у живых бактерий. Погибшие бледные трепонемы тоже флуоресцируют. Тем не менее, после лечения результат РИФ становится слабоположительным.

При пройденной терапии такой результат анализа не является диагностическим критерием сифилиса.

Существует ряд патологий, при которых анализ на сифилис может дать положительный результат.

Такими заболеваниями являются:

• туберкулез;
• системные аутоиммунные заболевания;
• цирроз печени;
• злокачественные новообразования.

Тем не менее, в таких случаях РИБТ никогда не достигает 100% положительности.

Реакция остается на слабоположительном уровне.

Аналогично реагирует и анализ РПГА – реакция прямой гемагглютинации. Поэтому, если РИБТ и РПГА положительные у пожилой женщины, это повод для обращения к врачу.

Такие результаты могут указывать на системные патологии, онкологию или острое нарушение кровообращения.

Для исследования требуется венозная кровь.

Анализ сдается утром, строго натощак – нельзя употреблять пищу минимум 4 часа до исследования.

Накануне анализа следует избегать употребления жирной пищи и алкоголя.

Антибактериальные препараты необходимо отменить не менее чем за 2 недели до анализа.

Прием других лекарственных средств нужно предварительно обговорить с врачом.

Женщинам не рекомендуется сдавать анализы на сифилис во время менструаций.

РИБТ – трудоемкий и дорогой анализ. Для его проведения требуется высококвалифицированные специалисты, а при лаборатории должен быть виварий.

Сдать анализы крови на РИБТ и РИФ вы можете в нашей клинике.

источник

Анализы на половые инфекции обычно назначаются при планировании беременности, бесплодии, привычном невынашивании беременности. Для профилактики исследование показано относящимся к группе риска лицам. Метод лабораторной диагностики определяется лечащим врачом.

Половые инфекции (инфекции, передаваемые половым путем, ИППП, или заболевания, передаваемые половым путем, ЗППП) – это группа патологий, к которым относятся не только венерические, но также некоторые другие инфекционные болезни органов мочеполовой системы.

К половым инфекциям относятся генитальный герпес, сифилис, гонорея, трихомониаз, хламидиоз, донованоз и пр. Половым путем могут передаваться вирус иммунодефицита человека (ВИЧ), вирусы гепатита и некоторые другие. Кроме того, в редких случаях воспалительный процесс может быть вызван условно-патогенными микроорганизмами (микоплазма, уреаплазма и др.).

Срочный анализ на некоторые половые инфекции можно сделать при помощи экспресс-тестов (метод иммунохроматографии). Такие тесты позволяют выявить ВИЧ, гепатит В и С, сифилис.

Нередко половые инфекции протекают скрыто, и могут быть выявлены только путем проведения анализа.

Анализ на половые инфекции входит в число обязательных исследований при планировании беременности. Некоторые ЗППП могут не только инфицировать плод, но и стать причиной выкидыша, преждевременных родов, бесплодия.

С целью своевременного обнаружения половых инфекций женщинам, входящим в группу риска, рекомендуется проходить осмотр у гинеколога один раз в полгода, а мужчинам посещать уролога ежегодно. Кроме этого, показания к анализу на половые инфекции следующие:

• привычное невынашивание беременности;
• бесплодие;
• патологии суставов;
• подготовка к оперативному вмешательству на органах мочеполовой системы;
• контроль эффективности терапии ЗППП.

Также анализ можно сдать по желанию при подозрении на возможное заражение ЗППП. Для направления на анализ и последующей расшифровки результата, а также для лечения в случае, если ИППП будет обнаружена, необходимо обратиться к специалисту (инфекционисту, дерматовенерологу), который также порекомендует, где сдать анализ. Самолечение, так же, как отсутствие лечения ЗППП весьма нежелательно, так как с высокой вероятностью приведет к развитию осложнений.

Для получения точного результата анализа, к нему нужно правильно подготовиться. За 3-4 недели необходимо прекратить прием противоинфекционных препаратов (делать это можно только по согласованию с врачом). Может потребоваться отмена и некоторых других лекарственных средств, способных повлиять на результат исследования.

Серодиагностика базируется на выявлении в крови пациента специфических иммуноглобулинов, которые вырабатываются организмом в ответ на внедрение инфекционных агентов.

Правила подготовки зависят от вида анализа.

1. Бактериологическое исследование отделяемого из половых путей. За 2-3 дня до сдачи материала из половых путей на анализ необходимо избегать сексуальных контактов, за день – физического перенапряжения. Накануне исследования женщинам не следует проводить спринцевание, использовать вагинальные свечи, мази, средства для интимной гигиены. Исследования не проводятся во время менструации (в редких случаях могут быть исключения). Женщинам обычно рекомендуется сдавать анализ на половые инфекции на 4-5-й день цикла. Не следует мочиться на протяжении трех часов перед взятием биоматериала на бактериологический анализ. Материал берется у женщин из влагалища, мочеиспускательного канала, шейки матки, у мужчин – из уретры.
2. Анализ крови на болезни, передающиеся половым путем. Его сдают в утреннее время натощак, после последнего приема пищи должно пройти 8–12 часов. Накануне анализа из рациона исключают жирную и жареную пищу, спиртные напитки. Для исследования берется кровь из локтевой вены.
3. Анализ мочи на половые инфекции. Мочу следует собрать в специально предназначенную для этого стерильную емкость, которую можно приобрести в аптеке или получить в лаборатории перед исследованием.

К наиболее точным методам лабораторной диагностики ЗППП относится полимеразная цепная реакция (ПЦР). Метод заключается в выявлении ДНК и РНК возбудителя. К преимуществам исследования относится возможность обнаружения инфекционного агента даже на ранних стадиях развития патологии. ПЦР используют в диагностике сифилиса, хламидиоза, генитального герпеса, ВПЧ, цитомегаловируса и пр.

К половым инфекциям относятся генитальный герпес, сифилис, гонорея, трихомониаз, хламидиоз, донованоз и пр.

Серодиагностика базируется на выявлении в крови пациента специфических иммуноглобулинов, которые вырабатываются организмом в ответ на внедрение инфекционных агентов. Метод применяется в диагностике хламидиоза, вирусного гепатита, сифилиса и пр.

Разновидностью серодиагностики, часто используемый для выявления ИППП, является иммуноферментный анализ (ИФА), который позволяет определять в крови антитела к тем или иным инфекциям. Другим точным и часто используемым серологическим методом в диагностике половых инфекций является реакция иммунофлюоресценции (РИФ).

Культуральный метод (также называется бактериологическим посевом, бакпосевом, бактериологическим исследованием) подразумевает посев материала, взятого из половых путей пациента, на питательные среды с целью выделения культуры. Обычно при этом проводится и определение чувствительности микроорганизмов к антибиотикам.

Бактериоскопия, или, как еще называют этот анализ, мазок на микрофлору (также общий или гинекологический мазок) – это метод лабораторного определения половых инфекций, который заключается в исследовании материала из половых путей под микроскопом.

Для выявления гонореи, трихомониаза, хламидиоза может потребоваться анализ мочи.

Срочный анализ на некоторые половые инфекции можно сделать при помощи экспресс-тестов (метод иммунохроматографии). Такие тесты позволяют выявить ВИЧ, гепатит В и С, сифилис и пр.

У здорового человека возбудители половых инфекций не должны обнаруживаться. При получении положительного или сомнительного результата анализов обычно рекомендуется повторное исследование и/или дополнительное обследование.

Видео с YouTube по теме статьи:

Анализ будет готов в течение 2 дней, исключая субботу и воскресенье (кроме дня взятия биоматериала). Вы получите результаты на эл. почту сразу по готовности.

Срок исполнения: 2 дня, исключая субботу и воскресенье (кроме дня взятия биоматериала)

Забор материала осуществляется в кабинете гинеколога у женщин и уролога или венеролога у мужчин.

Для взятия мазка женщина садится в гинекологическое кресло, врач осматривает половые пути, вводит во влагалище зеркало-стерильный инструмент, убирает слизь.

Далее зондом врач берет материал из наиболее пораженной области. Это может быть: задний свод влагалища, шейка матки, уретра. Процедура не проводится во время менструации и в течении 5 дней после.

Для взятия мазка мужчина стоит, лаборант убирает слизь и вводит в уретру одноразовый аппликатор (зонд) на глубину около 4 см, осторожно вращает инструмент и извлекает из уретры.

• 72 часа не вступайте в половой контакта
• за 48 часов до взятия мазка исключите кольпоскопию и трансвагинальное УЗИ, а так же хлорсодержащие и антибактериальные препараты
• в день анализа не проводите гигиенические процедуры половых органов и спринцевание влагалища, а также не используйте тампоны и влажные салфетки
• воздержитесь от посещения туалета 2 часа до анализа

Результат анализа значительно зависит от подготовки. Пожалуйста соблюдайте ее точно.

Обсудите с врачом отмену антибактериальных препаратов и препаратов, содержащих микроорганизмы принимаемые в текущий момент и в последние 2 месяца. Их прием может приводить к ложноотрицательным и ложноположительным результатам.

Если вы беременны, обязательно предупредите медицинский центр по телефону заранее.

Для выявления инфекций, передающиеся половым путем (ИППП) мы используем самый точный метод — ПЦР (PCR Real time). Комплекс анализов ИППП-12 позволяет определить наличие или отсутствие ДНК возбудителей инфекций. Метод полимеразной цепной реакции (ПЦР) выгоден тем, что благодаря ему присутствие патогенных микроорганизмов обнаруживается на ранних сроках заболевания. Чувствительность ПЦР позволяет выявить даже единичные клетки в исследуемом материале. ИППП-12 скажет есть инфекция или нет, а комплекс анализов ИППП-12 количественная оценка позволит не просто выявить наличие инфекции, но установить стадию развития болезни и следить за процессом выздоровления.

В результате вы увидите наличие ДНК следующих возбудителей: Цитомегаловирус (CMV/ЦМВ), Вирус простого герпеса (HSV/ВПГ) тип 1,2, Вирусы папилломы человека (ВПЧ, HPV) тип 16 и 18, Chlamydia trachomatis (хламидия), Mycoplasma genitalium и Mycoplasma hominis, Neisseria gonorrhoeae, Gardnerella vaginalis, Trichomonas vaginalis (трихомонада) Candida albicans, (возбудитель молочницы (кандидоза), Ureaplasma spp. Подробнее посмотреть о возбудителе каждой инфекции можно во вкладке состав.

В этот комплекс не входят анализы на ВИЧ, сифилис и гепатиты, ввиду того, что они выполняются другим методом и выявляются в крови. Эти анализы входят в комплекс Группа риска.

Воспалительный процесс мочеполовых органов у женщин может быть вызван не только инфекциями (ИППП), но также нарушением состава микрофлоры влагалища. Для оценки микрофлоры влагалища сдайте анализ на Фемофлор 16, это позволит исключить такие заболевания, как бактериальный вагиноз, урогенитальный кандидоз, заболевания, ассоциированные с микоплазмой.

В настоящее время комплекс инфекций передающихся половым путём (ИППП) включает в себя более 20 заболеваний, вызываемых бактериями, вирусами, простейшими. Объединяющим признаком для данной группы заболеваний является заражение в основном во время полового контакта. Инфицирование происходит при контакте зараженных жидкостей организма больного (например, спермы и влагалищных выделений) со слизистой оболочкой партнера. Инфекция может также передаваться от инфицированной матери плоду и новорожденному. Инфицирование бытовым путём через полотенца, туалетные принадлежности, и т.п. крайне редко возможно для некоторых заболеваний.

Каждый год во всем мире, по оценкам разных авторов, заражается ИППП около 330 миллионов человек. Самыми распространенными заболеваниями определены трихомониаз (около 120 млн.), хламидиоз (около 50 млн.) и гонорея (около 25 млн.). В России также наблюдается постоянный рост заболеваний передающихся половым путём. На сегодняшний момент более 50% взрослого населения являются носителями той или иной половой инфекции по данным различных авторов. Причиной такой высокой распространённости считается изменившееся сексуальное поведение и низкая культура населения в отношении профилактики заболеваний.

Продолжительность инкубационного периода с момента заражения может варьировать от 2-3 дней до нескольких недель в зависимости от вида инфекций. Об инфицировании можно судить по следующим симптомам: выделения из уретры или влагалища; зуд или боли при мочеиспускании; появление воспаления,сыпи, язвочек на половом члене у мужчин и на половых губах или во влагалище у женщин и т.п. Но при этом, необходимо учитывать, что заболевание может протекать и бессимптомно. Инфекция, которую вовремя не диагностировали и не пролечили ведет к развитию серьёзных осложнений: у мужчин — простатит, орхит, эпидидимит; у женщин — аднексит, цервицит, вагинит, воспалительные заболевания органов малого таза. Причины женского и мужского бесплодия до 80% связаны с ИППП.

Данный комплекс включает в себя определение ДНК 12 возбудителей ИППП методом ПЦР: цитомегаловирус (возбудитель цитомегаловирусной инфекции); вирус простого герпеса тип 1,2 (возбудитель генитального герпеса); вирус папилломы человека тип 16, вирус папилломы человека тип 18 (возбудители папилломовирусной инфекции); Chlamydia trachomatis (возбудитель урогенитального хламидиоза); Mycoplasma hominis, Mycoplasma genitalium (возбудители урогенитального микоплазмоза); Ureaplasma spp. (возбудитель урогенитального уреаплазмоза); Neisseria gonorrhoeae (возбудитель гонореи); Gardnerella vaginalis (возбудитель гарднереллёза); Trichomonas vaginalis (возбудитель трихомониаза); Candida albicans (возбудитель урогенитального кандидоза).

Внимание! Интерпретация результатов анализов носит информационный характер, не является диагнозом и не заменяет консультации врача. Референсные значения могут отличаться от указанных в зависимости от используемого оборудования, актуальные значения будут указаны на бланке результатов.

Положительный результат: в анализируемом образце обнаружена ДНК того или иного возбудителя из данного комплекса: инфицирование одним или несколькими возбудителями.

Отрицательный результат: в анализируемом образце не обнаружена ДНК данных возбудителей: нет инфицирования. Отрицательный результат исследования может быть также и при нарушении правил взятия материала, когда в образце не содержится ДНК возбудителя в достаточном для проведения исследования количестве.

Lab4U — медицинская онлайн-лаборатория, цель которой сделать анализы удобными и доступными, чтобы Вы могли заботиться о своем здоровье. Для этого мы исключили все затраты на кассиров, администраторов, аренду и прочее, направив деньги на использование современного оборудования и реактивов от лучших мировых производителей. В лаборатории внедрена система TrakCare LAB, которая автоматизирует лабораторные исследования и сводит к минимуму влияние человеческого фактора

• Вам удобно выбрать назначенные анализы из каталога, либо в строке сквозного поиска, у Вас всегда под рукой точное и понятное описание подготовки к анализу и интерпретация результатов
• Lab4U моментально формирует для Вас список подходящих медцентров, остается выбрать день и время, рядом с домом, офисом, детским садом или по пути
• Вы можете заказать анализы для любого члена семьи в несколько кликов, один раз внеся их в свой личный кабинет, быстро и удобно получив результат на почту
• Анализы выгоднее средней рыночной цены до 50%, так Вы можете направить сэкономленный бюджет на дополнительные регулярные исследования или другие важные траты
• Lab4U всегда онлайн работает с каждым клиентом 7 дней в неделю, это значит что каждый Ваш вопрос и обращение видят руководители, именно за счет этого Lab4U постоянно улучшает сервис
• В личном кабинете удобно хранится архив ранее полученных результатов, вы легко сравните динамику
• Для продвинутых пользователей мы сделали и постоянно совершенствуем мобильное приложение

Мы работаем с 2012 года в 24 городах России и выполнили уже более 400 000 анализов (данные на август 2017 года).

Команда Lab4U делает все, чтобы малоприятная процедура стала простой, удобной, доступной и понятной Сделайте Lab4U своей постоянной лабораторией

Получить результаты анализов в указанные на сайте сроки по электронной почте и, если необходимо, в медицинском центре.

*В заказ включается стоимость взятия материала для анализов и может входить годовой абонемент 99 руб (оплачивается раз в год и не взимается при регистрации через мобильное приложение для iOS и Android).

источник

В отличие от трихомонады или гонококка, бледную трепонему невозможно обнаружить в мазках. Если у человека нет явных признаков заболевания, то лучшим биологическим материалом для исследования с целью диагностики сифилиса является кровь. Анализ крови на сифилис достаточно надежен и тогда, когда у пациента имеются сифилиды.

Не удивляйтесь, если при медосмотре перед устройством на работу, операцией или при беременности вам предложат пройти исследование крови на сифилис. Это обычная процедура, предназначенная для скрининга населения. Таким образом выявляют носителей инфекции и больных на ранних стадиях.

Желание провести экспресс-диагностику может появиться у каждого, кто практиковал незащищенный секс или подозревает партнера в носительстве. Сегодня есть возможность самостоятельно совершить тестирование в домашних условиях.

Особое значение анализ крови на сифилис приобретает в процессе лечения инфекции: по результатам судят об эффективности выбранного метода терапии и делают выводы о выздоровлении пациента.

Направление на анализ можно получить не только у венеролога-дерматолога, но и у терапевта, гинеколога или уролога. Анализ по собственной инициативе делают, купив набор для экспресс-тестирования в аптеке.

Для анализа крови на сифилис в разных случаях могут брать капиллярную или венозную кровь. Домашние экспресс-тесты дают ответ по одной капле крови из пальца. В этом случае специальной подготовки не требуется. Общая рекомендация: воздерживаться от курения непосредственно перед взятием пробы, а от алкоголя – на протяжении 24 часов.

Похожие требования выдвигаются и при заборе венозной крови. Для пациентов, имеющих проблемы с иммунитетом, дополнительно не советуют заниматься тяжелым физическим трудом накануне анализов. За день до взятия проб лучше употреблять легкую пищу, хорошо выспаться.

Сдача венозной крови проводится утром натощак.

В основу лабораторных методов диагностики сифилиса по крови положена способность организма давать иммунный ответ на появление возбудителя. Поскольку исследуют плазму или сыворотку крови, то всю группу реакций назвали серологическими.

Серологическая диагностика сифилиса включает нетрепонемные и трепонемные реакции выявления антител. Первые чаще используют для скрининга и оценки эффективности лечения, а последние – для диагностики.

Впервые серодиагностику сифилиса провел Август Вассерман в 1906 году. До сегодняшнего времени она не потеряла актуальности и называется в честь разработчика – реакция Вассермана (РВ, RW) или реакция связывания комплемента (РСК).

За 100 лет лабораторная практика значительно развилась, и теперь антитела IgM и IgG выявляют следующими способами (таблица 1).

Термин «нетрепонемные» объединяет реакции, выявляющие антитела не к возбудителю, а к липидам разрушенных мембран трепонемы или клеток хозяина. При проведении реакции преципитации реагент (кардиолипиновый антиген) взаимодействует с антителами (если таковые имеются) и комплекс антиген-антитело выпадает в осадок. В пробирке образуются белые хлопья. Лаборант оценивает результат невооруженным глазом в случаях РПР, МПР, RST и TRUST или под микроскопом (VDRL, USR). Реакция считается:

• положительной при появлении крупных хлопьев (4+, 3+);
• слабоположительной при появлении хлопьев среднего размера (2+, 1+);
• отрицательный – хлопьев нет (-).

С момента инфицирования до позитивной реакции нетрепонемных тестов может пройти до 1,5 месяца. Твердый шанкр проявляет сифилис раньше теста на 1-4 недели.

Титр опадающих антител замеряют в ходе количественной реакции преципитации. Для этого плазму или сыворотку разбавляют по инструкции. Этот анализ характеризует эффективность лечения. Если титр падает, то выздоровление идет успешно, если положение дел не меняется – следует сменить препараты.

Когда идет речь о микрореакции, имеется в виду, что требуется несколько капель исследуемого материала. Такие тесты очень удобны для скрининга больших групп населения или проведения в домашних условиях. Наборы для анализа дешевы и выпускаются в стандартизированном виде. Например «Сифилис-АгКЛ-РМП» производства ЗАО «ЭКОлаб», «Профитест» от New Vision Diagnostics, SD BIOLINE производства Standard Diagnostics.

Недостатком реакций преципитации является их невысокая точность. Первичный сифилис РПР выявляет в диапазоне от 70 до 90%, вторичный – на 100%, а поздний – 30-50%. Ложноположительные результаты нетрепонемных тестов редки и встречаются в 3% случаев. Препятствием для получения точных результатов могут быть ошибки при заборе, хранении образцов крови или нарушение порядка проведения анализа.

По положительной реакции преципитации диагноз «сифилис» не ставится. Для принятия решения требуется выполнение специфических трепонемных тестов.

В крови больного можно выявить антитела непосредственно к антигенам трепонемы. Для этого разработаны специфические методы серодиагностики. Такие тесты характеризуются высокой чувствительностью.

Самой привычной и испытанной временем является реакция Вассермана (РВ) на сифилис. Для ее проведения берут 5 мл крови из локтевой вены, из пробы получают сыворотку, инактивируют собственный комплемент и потом одну часть обрабатывают трепонемным антигеном, а другую – кардиолипиновым.

Результат оценивают по скорости гемолиза:

• полная или значительная задержка гемолиза – положительная реакция (4+, 3+);
• частичная задержка – слабоположительная (2+);
• незначительная задержка – сомнительная реакция (1+);
• полный гемолиз – отрицательный результат (-).

Положительные качественные результаты перепроверяют количественным методом. Титром реагинов считают максимальное разведение сыворотки крови до полной или значимой задержки гемолиза. Количественный тест РВ назначают для оценки эффективности лечения.

Реакцию Вассермана есть смысл проводить через 2-3 недели после появления шанкра. Вторичный сифилис она покажет в 100% случаев, третичный – в 75%.

1. Реакция пассивной гемагглютинации (РПГА)

Препарат для теста готовят из эритроцитов животных путем сенсибилизации антигеном Treponema pallidum. Клетки добавляют к сыворотке крови пациента. Время проведения теста – 1 час. В присутствии антител происходит реакция агглютинации, а лаборант видит специфические рисунки в микролунках.

• кольцо из агглютинированных клеток – положительный результат (4+, 3+, 2+);
• неплотное кольцо – сомнительный результат (+/-, 1+);
• точка в центре – отрицательный результат (-).

Реакцию пассивной гемагглютинации дает положительные результаты долго после излечения. Ложноположительный ответ можно получить в случаях заражения лепрой или мононуклеозом. Количественный РПГА проводят путем разведения проб.

1. Иммуноферментный анализ (ИФА)

Применяется для ранней диагностики сифилиса. Определяет наличие IgM, IgA, IgG антител к трепонеме при помощи иммуноглобулинов человека, меченных энзимом, и специального реагента. Ответ определяют по изменению цвета проб: чем больше антител, тем насыщеннее цвет смеси.

Метод очень чувствительный и специфичный. Он не дает ложноположительных результатов при наличии заражения пациентов другими инфекциями. Высокая чувствительность к антителам ограничивает возможность применения ИФА для контроля степени излечения.

1. Иммунофлюоресцентные тесты (РИФ)

Анализы этой группы позволяют оперативно выявить заражение трепонемой до появления шанкра. Дает положительные результаты к концу первой недели с момента инфицирования. Чувствительность близка к 100%. Действующим веществом теста являются флюоресцеины антител к человеческим глобулинам. Соединяясь с антителами сыворотки, они создают светящиеся комплексы. По интенсивности свечения определяют результат теста:

• желто-зеленое яркое свечение – 4+;
• зеленое – 3+;
• бледно-зеленое – 2+;
• еле заметное свечение – 1+;
• фоновое окрашивание или тени – отрицательный результат.

Тест используется для выявления скрытых форм сифилиса. Он трудоемкий и технически сложный. В основу методики положен феномен обездвиживания живых трепонем комплексом «антиген + антитело». Бактерии для теста культивируют на кроликах. Вся посуда для анализа должна быть стерильной. Кровь у пациента берут при условии, что антибиотики он принимал не позднее месяца до дня анализа. К сыворотке добавляют трепонемы. В окуляре микроскопа лаборант ищет неподвижные бактерии.

• если иммобилизация трепонем больше, чем 50% – результат 4+;
• 31-50% – слабоположительный 3+;
• 21-30% – сомнительный 2+;
• до 20% – отрицательный.

1. Иммуноблот (Western-blot)

Самый современный метод диагностики сифилиса, исключающий ложноположительные ответы других специфических тестов. В клинической практике он используется, как подтверждающий. Сыворотку крови пациента наносят на нитроцеллюлозную мембрану, покрытую электрофоретически разделенными антигенами Treponema pallidum. При наличии антител IgG и IgM на тесте появляются полоски.

Интерпретация результатов тест-системы выполняется по положению полос и их интенсивности.

Окончательный диагноз ставят с учетом нетрепонемных и трепонемных тестов.

источник