Анализы методом днк на инфекции

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – это современный инструмент диагностики разнообразных инфекций, отличающийся высокой точностью. Анализ ПЦР позволяет определять возбудителей инфекционных заболеваний, опираясь на их генетический материал (РНК или ДНК). Биологическим материалом для исследования может служить кровь, мазок из половых органов, слюна и прочее.

Метод ПЦР был открыт в 1983. Его создатель Кэри Мюллис (США), за это открытие получил Нобелевскую премию в области химии. Уже за первые десять лет методика стала обязательным лабораторным исследованием во всем мире, получив признание ученых и врачей.

Анализ ПЦР в клинике ДИАНА

Медицинский центр Диана предлагает провести исследование по методике полимеразной цепной реакции в кратчайшие сроки и с высочайшим уровнем точности. Наша диагностическая база соответствует всем международным стандартам и требованиям.

На диагностику отправляют гинеколог, уролог или дерматолог. Анализ ПЦР дает возможность диагностировать большое число разнообразных инфекций. В эту группу попадают и скрытые, бессимптомные заболевания, находящиеся в инкубационном периоде:

С помощью метода ПЦР можно обнаружить:

гепатит C, B;
уреаплазмоз половых органов;
ИППП – уреаплазмоз, трихомониаз, гарднереллез,;
хламидиоз половых органов и дыхательных путей;
микоплазмоз половых органов и дыхательных путей;
бактериальный вагиноз;
кандидоз половых органов;
инфекционный мононуклеоз;
туберкулез;
сальмонеллез;
туберкулез (легочные и внелегочные формы);
листериоз, клещевые энцефалиты, болезнь Лайма;
цитомегаловирусную, папилломавирусную, герпесную инфекцию;
детские заразные болезни, выявляемые при беременности и до зачатия — краснуху, паротит, дифтерию, корь;
ВИЧ.

При каждом из вышеперечисленных заболеваний, обнаруженным другим методом, желательно делать и ПЦР — исследование. Возбудители многих инфекций имеют несколько типов (штаммов), а более точная диагностика делает лечение эффективнее. Поскольку разные типы возбудителей обладают своими способами передачи инфекции, точное определение возбудителя помогает уберечь от заражения окружающих. Например, гепатитом А можно заразиться через общие предметы и посуду (болезнь грязных рук), а гепатитом С — только через кровь, медицинские инструменты и половые контакты. Это важно для тех, кто находится рядом с больным.

Метод основан на выявлении возбудителя по участкам ДНК или РНК. ПЦР напоминает криминалистику, когда преступника находят по частичкам кожи или волосам, оставленным на месте преступления. Поскольку каждый живой организм имеет уникальную структуру ДНК или РНК. Метод позволяет безошибочно идентифицировать микроорганизм, даже если он присутствует в исследуемом материале в минимальных количествах.

ПРЦ подходит для выявления скрытого носительства, нетипичных, стертых и прочих форм заразных заболеваний. Диагностика отличается высокой точностью, поэтому практически не дает ошибок и ложных результатов. Анализ часто назначается, как дополнительное обследование, чтобы выявить конкретный тип вируса или микроба.

Анализ ПЦР – результативный диагностический инструмент, позволяющий врачу не только правильно определить тип инфекционного возбудителя в организме больного, но также и количество микробов. Эта особенность позволяет методу ПЦР эффективно обнаруживать и хронические инфекции, к примеру, вирусный гепатит.

Преимущества методики заключаются в следующих особенностях:

Универсальность . Метод дает возможность определить все известные на сегодняшний день микроорганизмы, вне зависимости от вида исследуемого материала.
Специфичность . ПЦР позволяет определить ДНК вируса или бактерии со 100% точностью, что не дает ни один другой способ диагностики.
Чувствительность – даже один мельчайший «обломок» ДНК или РНК может быть обнаружен и идентифицирован, благодаря быстрой реакции образования копий.
Оперативность – поставить диагноз на основании полимеразной цепной реакции можно уже через несколько часов после забора биологического материала, что дает возможность своевременно приступить к лечению заболевания.
Возможность проведения количественного анализа . Эта особенность важна при выявлении болезней, вызванных условно-патогенной флорой (например, молочницы). Повышенное содержание грибков кандида в организме вызывает заболевание, а нормальное количество до 10 3 — 104 КОЕ/тамп. – нет.

Недостатки ПЦР-диагностики – это необходимость в высокотехнологичном оборудовании и высококвалифицированных специалистах. Для анализа нужен специальный бокс-ламинар, где поддерживается необходимая температура и обеспечивается чистота эксперимента.

Чтобы понять, как именно следует подготовиться к предстоящему анализу ПЦР, пациент должен обязательно уточнить у своего врача, какой именно биологический материал планируется взять. От этого непосредственно зависит подготовка.

Выделения из половых органов, мазок из шейки матки или мочеиспускательного канала, моча – посредством исследования данных вариантов материала методом ПЦР эффективно диагностируются инфекции половых органов.
Вирусный гепатит C, ВИЧ инфекция требуют взятие крови на анализ ПЦР.
С помощью мазка из зева можно подтвердить или опровергнуть факт наличия инфекционного мононуклеоза.

Для диагностики половых инфекций методом ПЦР у женщин, как правило, берут мазок из влагалища . При беременности действуют стандартные правила подготовки к анализу ПЦР.

За пару дней до проведения ПЦР нужно отказаться от спринцеваний, средств интимной гигиены.
За неделю до анализа на инфекции стоит перестать применять любые виды лекарственных препаратов, разумеется, если они не входят в программу подготовки к анализу ПЦР, прописанную врачом.
За пару дней до обследования нужно начать воздерживаться от полового акта.
Подмывание в день анализа ПЦР не нужно, гигиена половых органов проводится накануне вечером, используется только теплая вода.
За пару часов до сдачи анализа мочиться нельзя.

Подготовиться к забору мазка из мочеиспускательного канала для проведения ПЦР несложно. Достаточно соблюдать изложенные ниже правила.

За 2 суток до ПЦР обследования нужно начать воздерживаться от сексуальных отношений.
Прием лекарств прекращается приблизительно за 7 дней до проведения анализа, если, конечно же, они не были специально назначены врачом.
Гигиена половых органов должна проводиться накануне вечером, в день анализа ПЦР это делать не стоит.
Рекомендуется не мочиться примерно 2-3 часа перед сдачей анализа.

Если в процессе ПЦР анализа объектом изучения станет кровь пациента, правила подготовки к нему следующие.

Оптимальное время для сдачи крови – утро, анализ нужно обязательно сдавать натощак (минимум 8 часов отсутствия пищи). Воду можно пить свободно.
Отказ от алкоголя за сутки до ПЦР анализа, отказ от курения за час до него.
Если здоровье допускает такой вариант, от приема лекарственных средств рекомендуется на время отказаться.
Перед сдачей проб крови в обязательном порядке следует отдохнуть около 20 минут.
Накануне ПЦР исследования совершенно исключены эмоциональные и физические перегрузки, они могут сказаться на результатах анализа.

Для исследования берется любая среда, в которой может находиться возбудитель, но чаще всего используются:

Кровь сыворотка или плазма – для выявления множества возбудителей – вирусов гепатита B, C, D, G, герпеса, ВИЧ, цитомегаловируса;
Моча и сок простаты – при диагностике ЗППП;
Мокрота, плевральная жидкость, бронхоальвеолярный лаваж – для диагностики легочных и внелёгочных форм туберкулеза;
Спинномозговая жидкость – для диагностики инфекций нервной системы;
Околоплодная жидкость – для определения внутриутробных заражений;
Мазок из зева – для выявления возбудителей инфекционного мононуклеоза и дифтерии;
соскобы и мазки со слизистых для диагностики ЗППП;
клетки слизистой желудка и желудочный сок — для выявления бактерии хеликобактер, вызывающей гастрит и язву.

При одном взятии материала можно обнаружить сразу нескольких возбудителей, попавших в организм. Такая универсальность избавляет пациента от дополнительных обследований и лишних трат.

Обнаружить и идентифицировать участки генетической информации удается при помощи специальных эталонных маркеров ДНК (праймеров) созданных для каждого известного возбудителя. Эталон позволяет найти «свой» фрагмент среди миллионов других. Если это происходит, запускается реакция полимеразной цепи.

» data-medium-file=»//i0.wp.com/medcentr-diana-spb.ru/wp-content/uploads/2017/01/ptsr-analiz.jpg?fit=422%2C300&ssl=1″ data-large-file=»//i0.wp.com/medcentr-diana-spb.ru/wp-content/uploads/2017/01/ptsr-analiz.jpg?fit=662%2C471&ssl=1″ />
ПЦР—реакция делает огромное число копий выявленного участка генной информации (репликацию). Важно, что реплицируются только участки ДНК и РНК, необходимые для проведения анализа. Поэтому так важны чистота эксперимента и умение персонала обращаться с аппаратурой и образцами.

Цепная реакция протекает очень быстро, уже через два часа участок ДНК увеличивается в миллионы раз, что позволяет обнаружить и точно идентифицировать инфекцию. Для работы с эталонами пробирки помещают в специальный прибор. При помощи программы задается алгоритм, несколько раз меняющий температуру среды и влияющий на протекание реакции. Результат ПЦР виден сразу после окончания исследования.

Проведение ПЦР исследования позволяет не просто установить тип инфекции, присутствующий в организме больного, но и оценить его с количественной точки зрения (количество микробов). Расшифровка результатов количественного анализа ПЦР играет важную роль в обнаружении и проверке эффективности лечения большого числа хронических заболеваний, скажем гепатита C.

Результатом анализа ПЦР могут стать положительный и отрицательный ответы.

Отрицательный результат. Следы инфекции не были выявлены в биологическом материале, который являлся объектом исследования в процессе анализа ПЦР. Как правило, на основании отрицательного результата можно полагать, что в организме действительно отсутствует инфекция.
Положительный результат. Такой результат анализа ПЦР свидетельствует о том, что следы инфекционного заболевания присутствуют в биологическом материале пациента. Положительный результат анализа ПЦР характеризуется большой степенью точности.

Иногда инфицирование выявляется на фоне полного здоровья и отсутствия признаков заболевания. Некоторые больные считают, что анализ сделан неправильно, но реальная ситуация другая. Если ПЦР показала, что возбудитель в организме есть, значит, он там действительно находится. Просто инфекционные болезни никогда не начинаются сразу после заражения, имея инкубационный период различной продолжительности.

Скрытый период может продолжаться очень долго, например, при СПИДе – несколько лет, пока какие-то механизмы не подтолкнут вирусы к размножению. Возбудитель определяется в организме носителей и тех, кто не долечился. Очень часто переходят в скрытую (латентную) форму различные ЗППП. В этом случае может понадобиться дополнительная лабораторная диагностика.

Метод ПЦР, позволяющий выявлять достаточно большое число инфекций, характеризуется повышенной точностью, чувствительностью и специфичностью. Эти характеристики говорят о том, что с помощью исследования ПЦР можно:

Максимально точно установить отсутствие или присутствие инфекционного возбудителя.
Максимально точно определить конкретную разновидность инфекционного возбудителя (специфичность).
Выявить инфекцию даже в том случае, когда она имеет скрытый характер. Речь идет о низком уровне присутствия в подвергаемом исследованию биологическом материале пациента ДНК микробов (чувствительность).

Преимущества метода ПЦР над иммуноферментным анализом и прочими иммунологическими инструментами выявления инфекции заключается в том, что он реже дает ошибочные результаты. То есть расшифровка анализа ПЦР значительно реже показывает отсутствие инфекционных микробов, если они есть в организме больного.

Кроме того, почти не бывает, чтобы расшифровка анализа выявляла наличие в организме несуществующей инфекции, то есть давала ложноположительные результаты.Разумеется, стопроцентно правильными результаты ПЦР назвать все же нельзя, поэтому необходимо обязательно дополнять это исследование другими методиками.

Если вы нашли ошибку, пожалуйста, выделите фрагмент текста и нажмите Ctrl+Enter

источник

ДНК-ДИАГНОСТИКА осуществляется с помощью метода ПОЛИМЕРАЗНОЙ ЦЕПНОЙ РЕАКЦИИ (ПЦР).

Метод ПЦР позволяет выявить многие инфекции и грибковые заболевания. Используя метод ПЦР, можно обнаружить специфичный фрагмент ДНК возбудителей в биологическом материале. А затем многократно копировать эти фрагменты. Таким образом, в течение нескольких часов с помощью ПЦР из одного фрагмента молекулы ДНК можно получить 50 млрд. идентичных молекул. Такое количество копий фрагмента ДНК становится видимым в ультрафиолете после проведения электрофореза в агарозном геле.

Метод ПЦР открыл американский химик Кэрри Б. Мюллисом в 1983 году, за что он был удостоен Нобелевской премии. В настоящее время метод получает все большую популярность для диагностики пациентов и имеет ряд преимуществ:

Метод ПЦР направлен на поиск самого возбудителя, а не антител к нему,
Метод ПЦР обладает высокой специфичностью – в исследуемом материале выявляется уникальный, характерный только для данного возбудителя фрагмент ДНК,
Метод ПЦР обладает наиболее высокой чувствительностью среды известных методов диагностики,
Метод ПЦР автоматизирован и позволяет получить результаты анализа в течение одного рабочего дня,
Метод ПЦР универсален – одна порция биологического материала позволяет провести исследования на наличие возбудителей целого ряда заболеваний.

Заболевания передаваемые половым путем (ЗППП), отличаются от других инфекций специфичной биологией возбудителей, течением инфекционного процесса, лечением и профилактикой.

отсутствие характерных проявлений, признаков болезни,
асимптомность течения инфекционного процесса, т.е. отсутствие четких клинических проявлений, невозможность диагностировать без лабораторных исследований,
склонность к хроническому течению,
организм человека формирует слабый постинфекционный иммунитет, не обеспечивающий защиту от повторного инфицирования.

Лучше всего для их диагностики ИППП использовать метод ПЦР.

Половым путем могут передаваться бактериальные (гонорея, хламидиоз, уреаплазмоз, микоплазмоз, гарднереллез), вирусные (герпес, цитомегалия, гепатит), протозойные (трихомониаз) и грибковые (кандидоз) инфекции.

Для быстрой, полной и недорогой диагностики инфекций, передаваемых половым путем, был разработан комплексный ПЦР анализ на 13 основных возбудителей. Распространенным возбудителем является также вирус папилломы человека.

высокая контагиозность,
способность вызывать образование как доброкачественных, так и злокачественных опухолей.

Как правило, причиной инфицирования ВПЧ является раннее начало половой жизни юношей и девушек, частая смена половых партнеров и низкий социально-экономический статус женщин.

Выявить ВПЧ следует как можно раньше, т.к. он прогрессирует и ассоциирован с возникновением злокачественных новообразований.

предрасположенность человека к онкогенным заболеваниям,
нарушения клеточного иммунитета, являющиеся результатом смешанного инфицирования возбудителями ИППП (хламидиями, мико- и уреаплазмами, грибами рода Candida, герпесвирусами, трихомонадами).

Смешанная ВПЧ-инфекция осложняется воспалениями мочеполовой системы, требует длительного медицинского наблюдения пациентов и комплексного лечения обоих половых партнеров.

Для выявления ВПЧ и определение стадии заболевания применяют метод ПЦР.

выявить ДНК вирусы папилломы человека с типированием серотипов ВПЧ, относящихся к группам различной степени онкогенного риска,
диагностировать папилломавирусную инфекцию на стадии латентной инфекции и ранних предраковых поражений в клинически скрытой форме,
выявлять возбудителей наиболее распространенных ИППП, ассоциированных с ВПЧ-инфицированием.

Комплексный анализ по выявлению 15 типов ВПЧ (с указанием типа), обладающих онкогенным потенциалом, позволяет:

Установить точный диагноз с учетом всех инфекционных агентов,
Составить прогноз течения заболевания,
Выбрать комплексную поэтапную тактику лечения заболевания.

Большинство известных ИППП излечимы. На современном этапе специфическое лечение ИППП основано на точной лабораторной диагностике, где на первый план выходят высокоспецифичные диагностические методы (ПЦР), такие, как ДНК ДИАГНОСТИКА.

источник

Все чаще в медицинской практике стали применять новый метод диагностики инфекционных заболеваний, который имеет аббревиатуру ПЦР. В чем заключается сущность такого метода исследования и какие заболевания можно благодаря ему выявить, а также в чем достоинства ПЦР в сравнении с другими распространенными способами диагностики и как правильно подготовиться к анализу, можно узнать, прочитав данную статью.

Аббревиатура ПЦР расшифровывается как полимеразная цепная реакция. Это возможность участка ДНК пропорционально приумножаться при необходимых условиях. Изобретена ПЦР-диагностика инфекций еще в 1980-х годах. Работали над открытием европейские, американские и советские ученые, поэтому определить первоизобретателя инновационного диагностического метода не представляется возможным. Кроме того, начиная с 1983 года, когда был официально зарегистрирован такой метод исследования инфекционных заболеваний, как ПЦР, продолжается работа по усовершенствованию данного способа. На сегодняшний день такой метод диагностики применяют практически в каждой медицинской лаборатории, имеющей современное необходимое оборудование.

Для анализа ПЦР, в зависимости от медицинских показаний, необходимо провести медицинский забор таких материалов, как кровь, слюна, моча, сперма, грудное молоко или половые выделения, эпителиальные клетки. Диагностика инфекций методом ПЦР заключается в том, чтобы обнаружить ДНК возбудителя в исследуемом материале. С помощью специальных лабораторных манипуляций с использованием химических реактивов и оборудования лаборанты проводят полимеразную цепную реакцию. С ее помощью незаметный в микроскоп участок ДНК возбудителя разрастается до заметных в прибор размеров. Именно поэтому можно обнаружить возбудителя инфекции даже при наличии незначительного участка его ДНК в исследуемом материале.

Способна обнаружить целый ряд патогенных микроорганизмов ПЦР-диагностика инфекций. Расшифровка результатов сводится к обнаружению возбудителя и определению его вида. С помощью полимеразной цепной реакции диагностируют различные заболевания человека: от передающихся половым путем до бессимптомных, так называемых скрытых инфекций. С помощью ПЦР находят:

вирус гепатита (А, В, С);
уреплазму уреалитикум;
уреплазму парвум;
хламидию трахоматис;
кандиду;
микоплазму хоминис;
микоплазму гениталиум;
гарганеллу вагиналис;
трихомоназ;
микобактерию туберкулеза;
вирус герпеса простого 1 и 2 типа;
вирус папилломы;
вирус Эпшетейна-Барра;
хеликобактер пилори;
вирус иммунодефицита.

Вышеперечисленные микроорганизмы вызывают такие заболевания, как гепатит, туберкулез, ИППП и СПИД.

ПЦР-диагностика инфекций проводится в виде качественного (то есть определяют наличие или отсутствие возбудителя) и количественного анализа (высчитывают количество микроба в организме – такой подход необходим, например, при диагностике ВИЧ-инфекций и гепатита).

Практически в каждой лаборатории сегодня проводят диагностику инфекций человека с помощью полимеразной цепной реакции. В чем же достоинства такого метода, почему он стал невероятно популярным как среди медиков, так и в среде пациентов за такой короткий промежуток времени? Объясняется такое стремительное распространение инновационной технологии высоким уровнем достоверности, эффективности и чувствительности. Рассмотрим подробнее достоинства метода диагностики ПЦР:

Процесс проведения анализа максимально автоматизирован, что исключает человеческий фактор при проведении исследования и расшифровке результата.
Благодаря современным технологиям культуры выращиваются в течение 4–6 часов, а соответственно, получить результат анализа можно в день сдачи материала для исследования.
ПЦР-диагностика инфекций обладает высокой чувствительностью, что позволяет обнаружить возбудителя даже при наличии незначительного участка ДНК. В некоторых случаях, например, при вялотекущих и бессимптомных заболеваниях, посев культур иным методом является затруднительным или полностью невозможным.
Материалом для исследования методом ПЦР могут стать кровь, слюна, урогенитальные выделения, эпителиальные клетки, моча, сперма, что крайне удобно при невозможности взятия для анализа определенного материала. Для диагностики инфекционных заболеваний обычно используют венозную кровь и урогенитальный мазок.
Методом полимеразной цепной реакции можно определить несколько возбудителей из одного материала. Такой подход не только сокращает время для постановления правильного диагноза, но и экономит затраты на исследование.
Метод ПЦР считается достоверным, так как было отмечено лишь небольшое количество ложноотрицательных результатов. Ложноположительных ответов зафиксировано до сегодняшнего дня не было.

Какими бы достоинствами ни обладала ПЦР-диагностика инфекций, применяют такой метод не всегда. Например, при диагностике токсоплазмоза полимеразную цепную реакцию проводят только в том случае, если анализ ИФА показал сомнительный или спорный результат. С помощью метода ПЦР невозможно проследить динамику заболевания. Отметим следующие случаи, когда данный метод исследования принесет достоверные и эффективные результаты:

для определения инфекционных заболеваний, указанных выше, в соответствующем разделе статьи;
широко распространена ПЦР-диагностика урогенитальных инфекций;
для определения ИППП во время беременности;
для диагностики ВИЧ;
при спорных медицинских ситуациях для подтверждения или опровержения предварительного диагноза;
для определения отцовства и родственных связей;
применяют в генотипировании для обнаружения наследственных предрасположенностей;
помогает метод ПЦР работникам криминалистического отдела медицины для идентификации генетического материала.

Обследование ПЦР-методом назначается в обязательном порядке беременной женщине при постановке на учет с целью ранней диагностики инфекций, передающихся половым путем. Так как такие заболевания крайне опасны для нормального протекания периода вынашивания ребенка. ИППП провоцируют замирание развитие плода, выкидыши, внутриутробные уродства, мертворождение, врожденные патологии. Своевременное обнаружение и лечение инфекции значительно повышают шансы на благоприятный исход беременности и рождение здорового малыша.

Обычно будущей маме назначается комплексное обследование, которое имеет название «ПЦР 6». Такое исследование включает анализ на 6 разных инфекций. Проводится как в государственных, так и в частных учреждениях ПЦР-диагностика: «Инвитро», «Счастливая семья», «Уро-Про» и другие лаборатории предлагают такую услугу. Более подробно этот вопрос описан ниже.

Таким образом, понадобится лишь один раз провести забор материала для анализа. При проведении ПЦР-диагностики во время беременности необходим урогенитальный мазок, который берется из канала шейки матки гинекологической щеточкой. Такая процедура не вызывает болезненных ощущений у беременной и никак не влияет на плод.

Часто назначают ПЦР-диагностику для обнаружения возбудителя гепатита. Объясняется это тем, что такое заболевание нередко протекает бессимптомно и переходит в хроническую тяжелую трудноизлечимую стадию. С помощью ПЦР определяют гепатит на самых ранних этапах, что способствует благоприятному излечению в максимально короткие сроки. Проводится в большинстве частных лабораторий такая ПЦР-диагностика инфекций. Цена зависит от типа определяемого вируса и вида анализа. Так, простое определение наличия или отсутствия ДНК возбудителя в крови стоит 400–600 р. Количественный метод обойдется в 1200-1500 р.

Для еще более эффективной результативности метода ПЦР в диагностике инфекционных заболеваний широко применяют комплексное исследование, которое способствует сокращению сроков постановки диагноза и своевременному лечению. Так, лаборатории предлагают анализ «ПЦР-6» и «ПЦР-12». В первый комплекс входит ПЦР-диагностика половых инфекций, таких как:

уреплазмоз;
хламидиоз;
микоплазмоз;
папилломавирус человека;
простой герпес;
цитомегаловирус.

Такое исследование часто назначается женщинам на ранних сроках беременности, а также в период планирования зачатия.

При проведении «ПЦР-12», помимо вышеуказанных заболеваний, диагностируют следующие:

гонорею;
кандидоз;
бактериальный вагиноз;
трихомониаз;
уреплазмоз;
герпес 1 и 2 типа.

В зависимости от лаборатории, перечень исследуемых заболеваний, входящих в комплекс, может различаться. Врач подберет в каждом конкретном случае наиболее подходящий вариант обследования. В любом случае комплексный анализ методом ПЦР займет гораздо меньше времени, сил и материальных затрат.

Подготовка к анализу методом ПЦР заключается в соблюдении рекомендаций по забору определенного вида материала:

Сдавая урогенитальный мазок, следует воздержаться от полового контакта за трое суток до предполагаемого анализа, прекратить прием антибактериальных препаратов и местных мазей, кремов, свеч, нельзя проводить процедуру спринцевания. Во время менструальных выделений забор материала не проводится – необходимо провести анализ не ранее, чем через 3 дня после завершения менструаций. Следует воздержаться от мочеиспускания за 3 часа до анализа.
Венозную кровь лучше сдавать с утра, натощак (хотя это не является правилом). Накануне следует ограничить употребление алкоголя и жирной пищи.
При сдаче спермы необходимо воздерживаться от полового контакта трое суток. Рекомендуется ограничить употребление спиртного, посещение сауны, прием горячей ванны.
Мочу следует сдавать утреннюю, предварительно проведя тщательный туалет половых органов. Лучше собирать материал в специальную стерильную емкость. Материал следует доставить в лабораторию в течение нескольких часов.

Не вызывает сложностей интерпретация результатов, после того как была проведена ПЦР-диагностика инфекций. Расшифровка качественного метода заключается в оценке наличия или отсутствия в исследуемом материале возбудителя, а также в определении вида патогенного микроорганизма. Если в исследуемом материале был обнаружен участок ДНК микроба, то записывается положительный результат на соответствующем бланке, а также указывается, какой именно вид микроба был определен. При отсутствии патогенного микроорганизма в материале результат будет отрицательным.

Полученные результаты количественного анализа, например при диагностике гепатита, необходимо расшифровывать с помощью норм, указанных лабораторией. Так как единицы измерения и количественный фактор значительно отличаются в разных медицинских диагностических учреждениях. Достоверно, с учетом всех сопутствующих факторов, расшифровать такой анализ может только врач.

На сегодняшний день практически каждая частная лаборатория предлагает такую услугу, как ПЦР-диагностика инфекций.

«Инвитро» — цена проводимых данной лабораторией исследований и качество зарекомендовали себя не только в России, но и в Украине, Казахстане, Белоруси. Отзывы пациентов свидетельствуют о высоком качестве предоставления медицинских услуг, быстром получении достоверных результатов. Но ценовая политика соответствует высокому качеству. Так, за анализ методом ПЦР на одну инфекцию, например гепатит, необходимо будет заплатить около 700 р. За сбор материала берут отдельную плату – это еще 400р. Значительно дешевле обойдется комплексное исследование «ПЦР-6» в данной лаборатории – такой анализ стоит 1445 р., в него входят исследования шести инфекций, передающихся половым путем.
Лаборатория «Хеликс» также заслуживает достойные отзывы потребителей. Современные технологии и оборудование, высококвалифицированный персонал и умеренные цены заслужили положительные отзывы. Стоимость анализа на одну инфекцию методом ПЦР составляет 290 р., дополнительно нужно оплатить забор материала. В зависимости от его вида такой платеж составит от 25 р. (моча) до 550 р. (урогенитальный мазок с секретом простаты).
Лаборатория «СитиЛаб» отличается тем, что выполняет практически любой анализ методом ПЦР в течение суток, в то время как другие предоставляют готовый результат только через 2 дня. Заплатив немного больше, можно получить ответ даже в день сдачи анализа. Ценовая категория приблизительно следующая: анализ на определение хламидий стоит 230 р., «ПЦР-6» обойдется в 1430 р., а количественный анализ гепатита С – 12650 р. Стоит отметить, что в данной лаборатории представлен широкий выбор комплексных анализов методом ПЦР. Это является несомненным достоинством при диагностике заболеваний.

Проводится ПЦР-диагностика и в государственной поликлинике на платной основе. Следует отметить, что стоимость таких анализов незначительно ниже по сравнению с исследованиями в частной лаборатории. А вот оборудование и материалы значительно отличаются – по этому критерию частные клиники явно выигрывают. Проконсультируйтесь с лечащим врачом по поводу выбора лаборатории для сдачи анализа методом ПЦР в вашем регионе.

источник

ПЦР на ИППП – это специальный метод исследования различных биологических жидкостей на предмет наличия в организме венерических заболеваний. Изобретение такой диагностики позволило выявлять скрытые формы ЗППП в самой начальной стадии.

Показания к назначению ПЦР на ЗППП

Преимущества и недостатки метода

Какие заболевания можно выявить с помощью ПЦР?

Соскоб из уретры и цервикального канала

Подготовка к сдаче анализа

Сроки исполнения анализов на ЗППП

Сколько стоит ПЦР на ИППП?

ПЦР (полимеразная цепная реакция) на ИППП – это анализ, который позволяет выявить 12 самых распространённых инфекционных заболеваний, передающихся половым путем.

Показания к назначению ПЦР на ИППП:

высыпания в области половых органов;
боль во время мочеиспускания;
зуд или жжение;
обильные выделения с резким и неприятным запахом;
эрозии на слизистой или в области гениталий;
видоизменение (разрастание эпителия) слизистой в области шейки матки;
воспаление мочеполовой системы;
изменение цвета семенной жидкости у мужчин;
увеличение лимфатических узлов в области паха;
нарушение менструального цикла;
случаи выкидышей, патологий при беременности, трудности с зачатием;
наличие кисты на яичниках;
наличие спаек в области малого таза;
боли внизу живота;
наличие простатита у мужчин.

Следует отметить, что вне зависимости от симптомов, проходить обследование должны все в случаях:

незащищенного полового акта с двумя или более партнёрами в течение 6 месяцев;
планирование беременности.

Высокий процент достоверности. Даже если в биоматериале была обнаружена единичная клетка возбудителя, диагностика её выявит.
Оперативность получения результата.
Универсальность исследования. ПЦР на ИППП можно выполнять при взятии любого материала: мазок из влагалища или уретры, кровь, сперма.
Специфичность процедуры. Во время анализа находят специфичный фрагмент ДНК, который принадлежит конкретному вирусу.
Доступность. Проводят такие обследования практически все лаборатории.
Достаточно одной пробы, чтобы определить наличие или отсутствие ИППП.

Есть и недостатки в проведении процедуры, которые необходимо учитывать, прежде чем сдавать анализ:

Вероятность ложного результата. Её процент очень низкий, но все же возможен.
Возможность микроорганизмов мутировать структуру ДНК. В таком случае выявить болезнь будет сложно. Это редкость, но стоит учитывать этот фактор при обследовании.
Некоторых возбудителей сложно выявлять. Например, хламидиоз или трихомоноз. Чтобы результат был точным, приходится прибегать к стимуляции. Такие инфекции называют скрытыми.

С помощью ПЦР методики можно обнаружить практически все вирусы и инфекции. Комплексный анализ предполагает сдачу стандартного перечня именуемого в медицине группа «ИППП-12».

ИППП-12 может применяться при целом комплексе инфекций, в который входят:

Уреаплазмоз. Обычно протекает бессимптомно, но может стать причиной выкидыша, поэтому требует незамедлительного лечения при планировании беременности.
Микоплазмоз. Наиболее распространённые симптомы: боли в паху (усиливаются при половом акте), жжение при мочеиспускании, выделения. Мужчины являются носителями.
Хламидиоз. Хламидии опасны тем, что поражают уретру, кишечник и шейку матки. При отсутствии надлежащей терапии приводят к бесплодию у женщин.
Трихомонада. К наиболее частым симптомам относятся: покраснение и отёк половых органов, обильные выделения с резким неприятным запахом, небольшие язвочки на гениталиях. У мужчин заражение всего проходит бессимптомно, но может появляться жжение при мочеиспускании. Наряду с этой инфекцией, врачи могут выявить у женщин ещё такое заболевание, как трихомонадный кольпит. При отсутствии надлежащего лечения поражаются матка, яичники и мочевой пузырь.
Кандидоз (молочница). Самые распространённые симптомы: зуд и обильные творожистые выделения.
ВПЧ (вирус папилломы человека) 16 и ВПЧ 18. Различают бессимптомные (дисплазия) и клинически ярко выраженные варианты заболевания (кондиломы, папилломы и бородавки). Большинство из них безопасные. Но необходимо постоянно наблюдаться у гинеколога. Самым опасным осложнением является онкология.
Цитомегаловирус. Чаще всего протекает бессимптомно. Но может проявляться в виде обычной ОРВИ.
Генитальный герпес тип 1 и тип 2. На половых губах появляется небольшое красноватое пятнышко, которое вызывает чувство жжения и зуда. Затем надувается пузырёк и нарастают болевые ощущения. Через 3–5 дней волдырь лопается и вытекает жидкость. На месте ранки образуются корочки. На десятый день все симптомы полностью исчезают.
Гонорея. Возбудителем которой является нейссерия. Симптомы: сильные боли внизу живота, жжение и дискомфорт при мочеиспускании, выделения желтовато-белого цвета с резким неприятным запахом.
Гарднереллёз (бактериальный вагиноз). Симптоматика схожа с молочницей.
Сифилис и нейросифилис (по симптоматике похож на менингит).
ВИЧ (СПИД).

При проведении лабораторных исследований устанавливается точный диагноз и назначается терапия, направленная именно на устранение выявленных возбудителей.

Наиболее эффективными методами считаются:

анализ крови;
анализ мочи;
соскоб из уретры и цервикального канала;
исследование спермы;
анализ секрета простаты.

Анализ крови на ИППП выполняется методом прямой и непрямой иммунной флюоресценции. Материал окрашивают особыми антителами в сочетании с красителями.

Например, достоверность подобного исследования достигает при выявлении:

сифилиса — 100%;
микоплазмоза – до 70%;
хламидиоза – 98%.

Можно выделить следующие исследования:

анализ крови на TORCH инфекции: токсоплазмоз, краснуха и цитомегаловирус;
RW – реакция Вассермана (применяется для выявления сифилиса);
ВИЧ-инфекции, гепатиты B и C.

С помощью общего анализа мочи диагностируется воспалительный процесс в мочеполовой системе, а также наличие инфекции.

Для ПЦР мочу сдают в основном мужчины. Единственным и главным недостатком такого метода обследования является то, что можно установить лишь сам факт наличия бактерий, но невозможно определить их количество.

Эта диагностика является наиболее эффективной для определения ИППП. Методика совершенно безопасная и безболезненная. Мазок позволяет обнаружить как наличие вредных микроорганизмов, так и их количество.

Забор проводится следующим способом: врач соскабливает материал из уретры и цервикального канала (только у женщин) с помощью специальных инструментов.

Метод диагностики предназначен для обнаружения в биоматериале:

специфических фрагментов ДНК основных возбудителей инфекций, которые могут передаваться половым путём;
урогенитальных инфекций мочеполовой системы у мужчин (к ним относятся: гонорея, хламидиоз, трихомониаз, микоплазмоз, уреаплазмоз).

Главным преимуществом диагностики является установление не только наличия возбудителей, но и определение точного их количества.

Семенную жидкость пациент собирает самостоятельно в контейнер. Секрет простаты собирает врач после массажа предстательной железы.

Для получения достоверного результата ПЦР на ИППП, необходимо основательно к нему подготовиться.

Если речь идёт об анализе крови, то следует придерживаться простых правил:

Не рекомендуется употреблять пищу за 8–12 часов до забора.
Следует отказаться от вредных привычек за 24 часа до анализа.
Нельзя за два дня принимать антибиотики, иначе картина результата обследования будет смазана. Также следует закончить приём других лекарств за 4 недели до диагностики.

Чтобы сдать анализ мочи, необходимо следовать следующим рекомендациям:

воздержаться от половых контактов за 1 день до обследования;
за 4 недели до обследования следует прекратить приём антибиотиков;
собирать биоматериал нужно самостоятельно в контейнер с утра натощак.

При подготовке к взятию мазка из уретры и цервикального канала, следует выполнять следующие рекомендации:

за 7 дней до забора материала необходимо прекратить приём свечей, спринцеваний и спреев;
исключить половые акты за 2–3 дня до обследования;
вечером перед процедурой провести гигиенические процедуры, желательно без мыла;
рекомендуется не мочиться за 2–3 часа до процедуры;
у женщин брать мазок следует через 3 дня после менструации или за 3 дня до её начала.

Перед сдачей анализа семенной жидкости у мужчин необходимо:

накануне провести гигиену половых органов;
закончить приём антибиотиков за 4 недели до сдачи анализа;
воздержаться от половых актов за 3 дня до сбора материала.

Из видео вы узнаете о методах диагностики ПЦР, а так же как подготовиться к обследованию. Снято Московским КВД.

Как правило, средняя продолжительность исследования материалов составляет от 1 до 3 дней. Ответы на большинство анализов, где будут расшифровывать результаты, можно получить уже в день забора. Например, анализ крови или мочи.

Существует только 2 варианта расшифровки результата:

Отрицательный ответ указывает на то, что во взятом для исследования материале не было обнаружено никаких вредоносных микроорганизмов.
Положительный результат ПЦР свидетельствует о наличии следов инфекции в образце. С большой вероятностью такой ответ подтверждает наличие возбудителей в данный момент.

Нельзя исключать ситуации, когда ПЦР оказывается положительной, но активной инфекции не выявлено. Это «здоровое носительство», без ярко выраженных клинических симптомов. Оно не требует специальной терапии, но необходимо проходить плановые периодические обследования по назначению врача.

Стоимость ПЦР на ИПП по регионам приведена в таблице:

Регион	Стоимость	Фирма
Москва	от 350 руб.	«МедЦентрСервис»
Челябинск	от 400 руб.	Эститик Центр «Комильфо»
Краснодар	от 230 руб.	«ЗДРАВА»

Из этого видео можно узнать, что такое диагностика ПЦР на ИППП и как она проводится. Снято каналом MYVENEROLOG RU.

источник

ДНК-диагностика подразумевает выявление и идентификацию генетического материала микроорганизмов в исследуемом материале.

Данный вид диагностики проводится с использованием различных методик исследования.

В практической медицине наибольшее распространение получила ПЦР (полимеразная цепная реакция).

ПЦР позволяет выявить патогенный микроорганизм методом амплификации нуклеиновых кислот.

Все живые организмы содержат индивидуальную видовую информацию, закодированную определенной, уникальной для каждого вида последовательностью нуклеотидных оснований.

При помощи ПЦР проводится выявление молекул носителя данной информации ДНК (дезоксирибонуклеиновая кислота) или РНК (рибонуклеиновая кислота),

Также расшифровывается последовательность нуклеотидных оснований с определением видовой принадлежности.

Данная реакция является ферментативной.

Ее суть заключается в многократном копировании (амплификации) выявленного участка генетического материала.

Благодаря автоматизации процесса, методика получила широкое распространение в практической медицине для диагностики различной инфекционной патологии.

ДНК ПЦР анализы применяются для диагностики большинства инфекций с половым путем передачи.

Это дает возможность достоверной верификации патогенных (болезнетворных) микроорганизмов с последующим установлением диагноза.

И назначением соответствующей этиотропной терапии, направленной на уничтожение возбудителя.

В венерологии, урологии, гинекологии ПЦР применяется для диагностики нескольких групп возбудителей половых инфекций, к которым относятся:

Поговорим о каждой группе.

О том как исследование
методом ПЦР рассказывает
подполковник медицинской службы,
врач Ленкин Сергей Геннадьевич

Содержание данной статьи проверено и подтверждено на соответствие медицинским
стандартам врачем дерматовенерологом, урологом, к.м.н.

Наименование	Срок	Цена
ДНК Chlamydia trachomatis	1 д.	300.00 руб.
ДНК Neisseria gonorrhoeae	1 д.	300.00 руб.
ДНК Trichomonas vaginalis	1 д.	300.00 руб.

Бактериальные инфекции.

При помощи данной методики исследования диагностируются такие заболевания как хламидиоз, микоплазмоз, уреаплазмоз.

В неясных клинических ситуациях также может проводиться исследование для выявления возбудителя сифилиса и гонореи.

Вирусные инфекции.

Выполняется диагностика инфекционных заболеваний, вызванных различными вирусами при помощи ПЦР ДНК – ВИЧ-инфекция (вирус иммунодефицита человека).

ВИЧ приводит к развитию синдрома приобретенного иммунодефицита (СПИД).

Возбудителя герпеса, парентеральных гепатитов (вирусные гепатиты В и С) и папилломавирусной инфекции.

Патология, возбудителем которой являются простейшие одноклеточные микроорганизмы – трихомониаз.

Данный вид диагностики активно применяется для выявления возбудителя некоторых грибковых инфекций, которые могут локализоваться в структурах урогенитального тракта (молочница).

ПЦР ДНК диагностика подразумевает выявление генетического материала патогенных микроорганизмов в различных биологических средах, к которым относятся:

Рассмотрим подробнее каждый вид материала.

Мазок из уретры.

Берется соскоб слизистой оболочки для проведения исследования при помощи специального стерильного зонда.

В данном материале выявляется возможное наличие генома возбудителей всех бактериальных инфекций, некоторых вирусных заболеваний (генитальный герпес, папилломавирусная инфекция).

У женщин дополнительно мазок берется со слизистой оболочки влагалища и шейки матки.

Исследуется для выявления возбудителей в неясных диагностических случаях, при скрытом или хроническом течении инфекционного процесса.

При подозрении на распространение патогенного микроорганизма в ткани предстательной железы с развитием её воспаления.

Выявляются возбудители вирусных инфекций, в частности ВИЧ, вирусных гепатитов.

Расшифровку результатов исследования проводит врач.

Существует два основных результата ПЦР ДНК — обнаружено (человек инфицирован возбудителем инфекционной патологии) или не обнаружено, что свидетельствует об отсутствии инфекционного процесса.

При необходимости сдать анализы на ДНК диагностику методом ПЦР, обращайтесь к автору этой статьи – венерологу в Москве с 15 летним опытом работы.

источник

ПЦР (полимеразная цепная реакция) – достижение молекулярной биологии, одна из главных методик клинической лабораторной диагностики конца 20-го и начала 21-го веков, приносящая огромную пользу в различных областях медицинской науки.

Многие люди путают ее с ИФА (иммуноферментный анализ), что, в общем-то, понятно. Они в чем-то схожи, поскольку выполняют одну задачу – поиск причины патологических состояний, обусловленных проникновением в организм человека инфекционных агентов. Однако между ними есть и различия. ИФА, например, ищет следы пребывания микроорганизмов, то есть, антитела (АТ), а ПЦР находит «святая святых» возбудителя – ДНК или РНК (нуклеиновые кислоты), дающих жизнь чуждым человеческому телу микроскопическим существам.

Методам ПЦР доступны нуклеиновые кислоты «врага», находящиеся во всех биологических жидкостях и тканях организма, поэтому данный анализ не обязывает использовать в качестве исследования только венозную кровь, можно взять слюну, выделения из половых путей, мокроту или другую среду, несущую информацию о заболевании. Выбор материала для исследования остается за врачом, который предполагает ту или иную патологию и знает, какая среда в таких случаях более информативна.

ПЦР-исследование – это достижение и огромная заслуга молекулярной биологии. Это – метод, который, обнаружив микроучастки ДНК или РНК чужеродного генетического материала (генома), способен распознать индивидуальные характеристики, присущие только одному виду микроорганизмов, не спутав его ни с каким другим. Как же работает метод ПЦР и как ему удается восстановить картину поведения инфекционной клетки в живом организме?

Итак, фрагмент нуклеиновой кислоты найден, но он один и для проведения реакции его явно недостаточно, поэтому он кодируется (копирование). Однако для дальнейшего процесса необходимо большое количество таких микроучастков, что может обеспечить его размножение путем достраивания новых, идентичных найденному фрагменту, участков ДНК (репликация). Размножение является естественным и неотъемлемым свойством нуклеиновой кислоты, которая будет реплицироваться с помощью фермента полимеразы даже вне живого организма (в пробирке с пробой), образуя множество клонов, то есть, пойдет цепная реакция. Клонироваться будут все новые и новые фрагменты, но только те, в которых заинтересован исследователь. Вот почему так важно взять «чистый», без посторонних примесей анализ, а тест проводить очень аккуратно.

Учитывая перечисленные способности полимеразной цепной реакции, можно догадаться, почему она так легко отличает уреаплазму от микоплазмы, или каждую из них от хламидии.

Таким образом, даже если среди миллионов клеток человеческого организма затеряется не сам живой вирус, а лишь частица его ДНК, то ПЦР, если ей ничто не помешает, пожалуй, справится с задачей и сообщит о пребывании «чужака» положительным результатом. В этом суть ПЦР и ее основное достоинство.

К лаборатории, осуществляющей ПЦР-диагностику, предъявляются высочайшие требования в плане оборудования, тест-систем и квалификации медицинского персонала. Это высокотехнологичная лаборатория, располагающая арсеналом высокочувствительных и высокоспецифичных реагентов, поэтому особых недостатков она не имеет. Разве что выдает положительный результат при отсутствии клинических проявлений и тем самым ставит лечебника перед дилеммой: стоит начинать лечение или нет?

Врач, наблюдающий пациента, начинает сомневаться в достоверности результатов тестирования, поскольку никаких признаков заболевания не видит. Но все же, учитывая высокую чувствительность ПЦР-системы, следует помнить, что она обнаруживает возбудителя даже в доклинической стадии, а положительный результат в таком случае является скорее достоинством, чем недостатком. Исходя из этого, лечащий врач должен сам принять решение о целесообразности терапии, взяв во внимание и другие аргументы «за» и «против».

Преимущества диагностики с помощью полимеразной цепной реакции очевидны:

Высокая специфичность, достигающая 100%, обусловленная присутствием в отобранном образце частиц нуклеиновых кислот, присущих конкретному организму, но чужеродных человеку;
Высокая производительность, ведь ПЦР – высокотехнологичная автоматизированная методика, предоставляющая возможность проведения тестирования в день забора материала и избавления, таким образом, пациента от лишних треволнений;
ПЦР, работая над одной пробой, способна провести несколько исследований и обнаружить несколько возбудителей, если ей будет такое задание. Например, при диагностике хламидийной инфекции, где ПЦР относится к основным методам, наряду с хламидией, можно обнаружить и нейссерию (гонококк) – возбудитель гонореи. Причем, на достоверности результатов это негативно не отражается;
Тестирование методом ПЦР выявляет опасные микроорганизмы в инкубационном периоде, когда они еще не успели нанести ощутимый вред организму, то есть, ранняя диагностика предупреждает о грядущем развитии патологического процесса, что дает возможность подготовиться к нему и принять во всеоружии.

Кроме этого, во избежание недоразумений, иной раз возникающих при диагностике, ПЦР защищает себя еще и тем, что ее результаты могут зафиксироваться (фотография, компьютер) с целью использования их в экспертных целях, если будет на то необходимость.

Нормой в ответах ПЦР считают отрицательный результат, указывающий на отсутствие фрагментов чужеродных нуклеиновых кислот, положительный ответ будет свидетельствовать о наличии инфекции в организме, цифровые значения означают состояние вируса и его концентрацию на момент тестирования. Однако полную расшифровку анализа осуществляет врач, прошедший специальную учебу по теме «ПЦР». Пытаться же интерпретировать результаты самостоятельно не имеет никакого смысла, поскольку можно, что скорее всего и произойдет, неправильно понять и начать заранее волноваться.

Как в любых других исследованиях, иной раз результаты теста оказываются ложноположительными или ложноотрицательными, где ПЦР исключением не является. Подобное может происходить в случаях:

Нарушения технологического процесса на одном из этапов реакции;
Несоблюдения правил забора материала, его хранения или транспортировки;
Присутствие посторонних примесей в материале.

Это говорит о том, что к ПЦР – диагностике инфекций нужно подходить внимательно, осторожно и аккуратно, иначе образцы материала могут поменять свое структурное строение или вовсе разрушиться.

Этапы ПЦР-диагностики. Ложные результаты могут дать нарушения на любом из этапов исследования

ПЦР-диагностика инфекций относится к категории «золотых стандартов» среди других лабораторных методов, поэтому ее можно применить для поиска возбудителей многих заболеваний, на первый взгляд не имеющих ничего общего между собой:

Туберкулез различной локализации, пневмония (в том числе и атипичная, вызванная хламидией);
Детские инфекции (коревая краснуха, паротит, корь);
Дифтерия;
Сальмонеллез;
Зоонозная инфекционная болезнь – листериоз (заболевание характеризуется многообразием симптомов с поражением лимфоузлов, ЦНС, внутренних органов);
Заболевания, обусловленные проникновением вируса Эпштейн-Барра (инфекционный мононуклеоз и др.);
Онкологическая патология, спровоцированная папилломовирусной инфекцией (ВПЧ и его типы);
Боррелиоз (болезнь Лайма, клещевой энцефалит);
Хеликобактерная инфекция, возбудителем которой является проживающий в желудке человека микроб Helicobacter pylori. Доказано, что хеликобактер становится причиной развития рака желудка или 12-перстной кишки;
Кандидоз и практически все ЗППП.

ПЦР-диагностика инфекций, передающихся половым путем, имеет особую значимость, поскольку заболевания, вызванные таким образом, часто длительное время протекают без каких бы то ни было клинических проявлений, зато при беременности начинают активизироваться и, таким образом, угрожать здоровью и даже жизни ребенка. Аналогично себя ведут и TORCH- инфекции. Некоторые из них («торч») относятся одновременно и к ИППП, поэтому последние требуют более подробного рассмотрения. Ознакомиться с самыми популярными методиками читатель сможет в следующих разделах статьи.

Сразу заметим, что подготовка к ПЦР довольно простая, никаких особых усилий со стороны пациента не требующая. Нужно лишь выполнить три несложных задания:

Не иметь половых контактов за 24 часа до того, как сдать анализ;
Для забора и анализа крови из вены нужно прийти на голодный желудок, пить, кстати, тоже нельзя;
Сдать мочу следует ночную (утром – в стерильную баночку, приобретенную накануне в аптеке).

Метод ПЦР не отличается «кровожадностью», поэтому приемлет любую биологическую среду, содержащую предполагаемый инфекционный агент.Обычно выбор – что нужно взять для исследования, остается за врачом.

Таким образом, в поисках возбудителя, кроме анализа крови (хотя он тоже подходит и в большинстве случаях берется параллельно другому материалу), можно использовать:

Мазок (выделения урогенитального тракта);
Соскоб слизистых ротовой полости, конъюнктивы, носоглотки, половых путей (у женщин берут из шейки матки и влагалища, у мужчин – из уретры);
Слюну;
Сперму;
Сок предстательной железы;
Ткани плаценты и амниотиотическую жидкость (околоплодные воды);
Осадок мочи (после центрифугирования), например, для выявления некоторых ИППП и микобактерий туберкулеза;
Мокроту и плевральную жидкость с той же целью;
Экссудаты;
Спинномозговую жидкость при подозрении на инфекционное поражение ЦНС;
Биопсийный материал (биоптат), взятый из печени, 12-перстной кишки, желудка и пр.

К вышеперечисленному хочется добавить, что материала для тестирования во всех случаях, даже в соскобах и выделениях, будет достаточно, так как тестирование методом ПЦР больших объемов не требует, анализу хватает и нескольких микролитров, которые обычно берут в микропробирку типа «эппендорф» и отправляют на исследование.

Обычно при прохождении анонимного обследования в случае положительных результатов иммуноблотинга, диагностику ВИЧ-инфекции повторяют заново. Если диагноз подтверждается, пациенту назначают дополнительные исследования:

Определение с помощью иммунологических реакций абсолютных значений количества лимфоцитов CD₄ (иммунокомпетентные клетки – Т-хелперы или помощники), которые инфекция поражает в первую очередь, после чего они теряют свои основные свойства и не могут отличить «свое» и чужое». Циркулирующую в плазме крови РНК вируса они принимают за нормальные клетки организма и не реагируют на них;
Обнаружение РНК вируса методом ПЦР и расчет концентрации вирусных частиц с целью установления стадии, тяжести патологического процесса и прогноза с учетом этих данных. Разумеется, слово «норма» в этом плане не существует, поскольку реакция всегда положительна, а расшифровка цифровых значений находится в компетенции врача.

Методом ПЦР можно выявлять возбудителей гепатитов, чаще всего тест используется для диагностики С гепатита, который плохо определяется другими методами.

Вирус гепатита С (РНК-содержащий) по своему поведению в организме человека напоминает ВИЧ. Вклиниваясь в геном клеток печени (гепатоцитов), он пребывает там в ожидании своего часа, который может наступить хоть через 2 года, хоть через 20 лет, поэтому медики прозвали его «ласковым убийцей». Гепатит С приводит к формированию злокачественного процесса в печеночной паренхиме, который проявляется на поздних стадиях. Все эти события иммунная система не замечает, принимая вирус за гепатоцит. Правда, антитела к вирусу в некоторых количествах вырабатываются, однако они не обеспечивают достойный иммунный ответ. Для диагностики ИФА на гепатит С не очень информативен, поскольку указывает на то, что вирус оставил следы, а ушел ли сам – неизвестно. При ВГС известны случаи самоизлечения, в то время как антитела против вируса остаются и продолжают циркулировать пожизненно (иммунологическая память). ПЦР заметно опережает образование антител и может выявить вирусную частицу уже через 1-1,5 недели, в то время как АТ могут появиться в интервале от 2 месяцев до полугода

ПЦР-диагностика в случае подозрения на разгул вируса гепатита С в организме человека является наиболее оптимальным методом исследования, ибо только она способна распознать присутствие «ласкового врага» в крови или биоптате печени пациента.

Однако иной раз имеют место случаи, когда АТ положительны, а результат ПЦР – отрицательный. Такое иногда происходит при очень низком количестве вируса или при его «дремлющем» состоянии в печени без выхода в кровяное русло. Чтобы все-таки найти истину, у пациента берут повторный анализ, а то и не один.

ВПЧ (вирус папилломы человека), если не произойдет самоизлечение, тоже может, ничем себя не проявляя, долго персистировать в организме хозяина, который об этом даже не подозревает, поскольку ПЦР сделать не доводилось, а симптомы болезни отсутствовали. Однако наличие папилломовирусной инфекции, пусть и латентной, далеко не безразлично для здоровья человека, где особую опасность несут определенные типы вируса, вызывающие онкологические заболевания (типы 16, 18).

Чаще от ВПЧ страдает женская половина населения, так как вирус больше любит женскую половую сферу, а особенно – шейку матки, где некоторые типы вирусов способствуют развитию диспластических процессов, а затем и рака шейки матки, если не лечить дисплазию и дать волю вирусу. Так вот, полимеразная цепная реакция обнаружит вирусную ДНК, а затем укажет «плохой» или «хороший» (онкогенный или неонкогенный) тип поселился в организме женщины.

Очевидно, что полимеразная цепная реакция может найти любую чужеродную структуру, состоящую из нуклеиновых кислот, поэтому данный тест подходит для выявления всех ЗППП и TORCH-инфекций, тем не менее, он далеко не всегда используется. Зачем, скажем, проводить такие дорогие исследования для обнаружения трихомонады или гонококка, если есть более доступные и дешевые?

TORCH-инфекции и ИППП настолько взаимосвязаны, что, порой, трудно определить, к какой группе следует отнести тот или иной возбудитель. В них вообще бывает сложно разобраться, так как это довольно разнообразные группы микроорганизмов, которые могут передаваться половым путем всегда или только при определенных условиях (иммунодефицит), а могут представлять интерес лишь при беременности, ввиду возможного негативного влияния на ее течение и на плод.

В основе развития клинических проявлений лежат разные возбудители, найти которые бывает под силу только ПЦР, что и является ее основной задачей иногда совместно с ИФА, а иногда в качестве единственного подтверждающего теста, особенно, если симптоматика заболевания отсутствует. Такую непростую ситуацию может создавать полимикробная инфекция, которая, помимо явных возбудителей, включает еще и условно-патогенные.

У мужчин, страдающих воспалительными заболеваниями половой сферы, например, уретритом, часто выявляют хламидию, уреаплазму и микоплазму. Эти же виды несут опасность и женскому организму. Те, кто знает коварство хламидии и сталкивался с ней, наверняка помнят, как тяжело бывает ее найти и распознать, поэтому анализу, произведенному методом ПЦР на хламидии, особенно доверяют, ведь спрятавшийся в клетке очень маленьких размеров паразит ведет себя осторожно, а вред наносит всегда исподтишка.

Уреаплазма зачастую рассматривается в паре с микоплазмой. И это неспроста. Данные виды, как и хламидию, не относят ни к вирусам, ни к бактериям, они проживают внутри клеток и относятся к ИППП, хотя их присутствие в здоровом организме тоже далеко не редкость. Так вот, чтобы отличить здорового носителя от больного человека, нужны особые методы, где ПЦР считается наиболее надежным, поскольку, ввиду особенностей строения и поведения этих микроорганизмов, другие исследования оказываются неэффективными.

Что касается вируса герпеса (тип 1, 2) и цитомегаловируса, который тоже относится к герпесвирусам (тип 5), то здесь тоже ситуация неоднозначная. Инфицированность населения земного шара приближается к 100%, поэтому в данном случае очень важна идентификация вируса и его доза, что особенно играет роль при беременности, ведь взрослому человеку, вирус, прижившийся в его организме, часто не доставляет никаких хлопот и признаков заболевания не дает.

Поэтому не следует игнорировать назначенное врачом подобное обследование, ведь в некоторых случаях полимеразная цепная реакция является обязательным и необходимым методом лабораторной диагностики, способным защитить от серьезных осложнений не только женщину, но и маленького, еще не родившегося, человечка.

В заключение хочется отметить, что такой замечательный метод, как ПЦР, вот уже более 30 лет служит человечеству. При этом, задачи теста не ограничиваются поиском возбудителей инфекционных заболеваний. Полимеразная цепная реакция, рожденная на почве молекулярной биологии, неразрывно связана с генетикой, она успешно применяется в криминалистике для идентификации личности, в судебной медицине для установления отцовства, в ветеринарии, если клиника для животных имеет возможности приобретать дорогое оборудование, а также в других сферах (промышленность, сельское хозяйство и пр.).

источник