Иммуноферментный анализ на все инфекции

С прогрессом современной медицины удается проводить более углубленную диагностику при подозрении на те или иные патологии у пациента. Одним из информативных методов лабораторного исследования стал ИФА анализ, который проводят методом забора венозной крови. То есть для пациента ничего в целом не меняется. А вот лаборант-анализатор ИФА проводит сложную технику исследования забранного биоматериала. В том, что такое анализы ИФА и, каковы тонкости применения ИФА метода в качестве диагностического, разбираемся в материале ниже.

Иммуноферментный анализ крови — это один из способов лабораторной диагностики, который основан исключительно на реакции под названием «антиген-антитело». Здесь стоит уяснить, что антиген — это чужеродное белковое соединение (молекула), попавшее в организм человека с паразитарной, вирусной или другой инфекцией. То есть, попросту вредитель. В свою очередь антитело — это иммунная клетка (иммуноглобулин), встающая на защиту организма человека при обнаружении в нем чужеродных молекул.

Выработку антител провоцируют сами же антигены, проникшие в организм человека. При вступлении в «битву» за здоровье организма антитела как бы помечают собой антигены, что при исследовании крови и видит лаборант. То есть в забранном биоматериале можно отследить не только наличие инфекции, но и ее следы уже после того, как организм полностью выздоровел.

При проведении анализа на ИФА лаборант может видеть такие иммуноглобулины к антигенам:

• Иммуноглобулины М (в результатах значатся как IgM). Свидетельствуют о том, что инфекционный процесс в организме только набирает свою силу. То есть инфицирование произошло совсем недавно;
• Иммуноглобулины G (значатся как IgG). Способствуют уничтожению антигенов через несколько дней после внедрения инфекции в организм человека. Иммуноглобулины G могут находиться в организме пациента достаточно долго, формируя иммунитет к определенному вирусу;
• Иммуноглобулины Е (значатся как IgЕ). Свидетельствуют о паразитарных инфекциях в организме. Он же говорит и об атопических реакциях при аллергии. При этом стоит знать, что проведение анализа ИФА дает результат с точностью 90% на паразитарные инфекции;
• Иммуноглобулины А (значатся как IgА). Максимально выступают на защиту слизистых оболочек пациента.

Таким образом, назначая иммуноферментный анализ крови пациенту, лечащий врач может отследить давность инфекции, степень ее прогрессирования или выявить наличие иммунитета к той или иной инфекции.

Процесс ИФА диагностики выглядит таким образом:

• Забранная венозная кровь приводится в лаборатории в состояние сыворотки крови;
• Затем лаборант использует специальный лоток с ячейками, в каждой из которых уже имеются все необходимые антигены. Достаточно просто капнуть в каждую ячейку сыворотку крови и отследить реакцию иммуноглобулинов (антител) на антигены. О наличии «нужной» реакции свидетельствует изменение цвета исследуемого материала. В дальнейшем лаборант изучает оптическую плотность исследуемой среды.

В целом иммуноферментный анализ на паразитов помогает выявить такие паразитарные патологии:

• Аскаридоз и энтеробиоз (аскариды и острицы);
• Трихинеллез;
• Описторхоз в острой и хронической формах;
• Лямблиоз;
• Амебиоз;
• Токсоплазмоз;
• Лейшманиоз в любой форме.

Важно: иммуноферментный анализ бывает как качественным, так и количественным. В первом случае лаборант лишь подтверждает или опровергает наличие искомого вещества в крови. Во втором случае в результате анализа указывают его концентрацию в организме пациента.

При всех достоинствах такого способа диагностики стоит понимать, что иммуноферментный анализ крови — не способ нахождения причины болезни пациента, а лишь метод подтверждения предполагаемого лечащим врачом диагноза. А ввиду того, что исследование является достаточно недешевым, использовать его нужно с умом. При этом результаты исследования должен трактовать только квалифицированный специалист.

Важно понимать, что выявление паразитов через анализ крови требует определенной подготовки от пациента. Так, перед сдачей крови необходимо сделать следующее:

• За сутки до забора биоматериала нужно исключить из рациона жирную пищу, алкоголь и копчености;
• Кровь на иммуноферментный анализ крови на паразитов и другие инфекции следует сдавать с утра натощак;
• Перед сдачей крови запрещено курить минимум за 3-4 часа;
• В день забора крови желательно не нервничать и не прибегать к усиленным физическим нагрузкам.

Соблюдение этих правил позволит избежать ложноположительного результата на антитела к паразитам.

После того как мы разобрали аббревиатуру ИФА и что это такое ─ выяснили, стоит перейти к трактовке результатов. Здесь важно понимать, что если анализ проводили качественный, то результат будет лишь положительным или отрицательным. То есть диагностика либо подтверждает подозрения доктора относительно определенного диагноза, либо опровергает их. В этом случае в бланке будут стоять символы «+» или «-» соответственно.

Важно: отрицательный результат анализа не всегда свидетельствует об отсутствии инфекции. Дело в том, что антитела к антигенам могут формироваться в течение 14 дней после инфицирования и вполне вероятно, что они еще не сформированы.

В случае же если проводится количественный анализ, то здесь определяется вид антител, их количество и стадия активности. В частности при такой диагностике определяют антитела (иммуноглобулины) IgG и IgM, которые формируются в разные периоды прогрессирования инфекции. Самыми распространенными вариантами результатов в этом случае являются:

• Повышенный IgМ и полное отсутствие IgG. Такая картина свидетельствует о недавнем инфицировании и острой фазе течения патологии.
• Повышенная активность иммуноглобулинов обоих видов (IgМ и IgG). Говорит о давнем и хроническом протекании инфекционного процесса.
• Активность IgG и полное отсутствие IgМ. Инфицирование было не менее полугода назад и сейчас вирус пребывает в затяжной хронической стадии.
• Отсутствие антител IgG и IgA. Результат не определен.
• Отсутствие антител IgM, IgA и IgG. Свидетельствует об отсутствии иммунитета к определенной инфекции.
• Активность антител IgG, IgM и IgA говорит об обострении хронического процесса.

Помимо выявления типов антител лаборант в специальной графе бланка указывает и их количество на объем крови. Помните, разобравшись в том, что такое метод ИФА, не трактуйте результаты самостоятельно. Полученные результаты с точностью может интерпретировать только лечащий врач в зависимости от предполагаемого диагноза, выстраиваемого на основании клинической картины у пациента.

источник

Иммуноферментный анализ (ИФА-диагностика) — современный метод лабораторного диагностирования, который идентифицирует специфические антитела крови и антигены определенной болезни.

Данный метод используется в медицине с 1960 годов. Изначально он имел очень трудоемкую специфику исследования, поэтому его массовое применение считалось затруднительным. Благодаря усовершенствованию микротехнологий, открытию новых биополимерных материалов, стало возможным использование ИФА массово. Это произошло в 1980 году. В первую очередь ИФА-анализатором были оборудованы центры переливания крови и венерологические отделения.

Применение иммуноферментного анализа очень обширно, а область его применения охватывает почти всю медицину. Особенно важен ИФА в онкологии, когда возможно определить начало заболевания на самых ранних стадиях.

В клинической диагностической лаборатории существует множество панелей иммуноферментного анализа для выявления и ранней диагностики инфекционного процесса, гормональных сбоев, аутоиммунных заболеваний, венерических болезней. ИФА-диагностикой пользуются при тестировании лекарственных препаратов, их воздействия на организм человека. Область применения ИФА-диагностирования весьма обширна и может применяться для выявления:

• нарушения репродуктивной функции;
• нарушения в щитовидной железе;
• нарушения иммунной системы;
• инфекционные заболевания;
• маркеры онкологических заболеваний.

И это список самых распространенных анализов. Полный список иммуноферментного анализа довольно большой и постоянно обновляется.

Иммуноферментный анализ состоит из двух компонентов: иммунной реакции и ферментативной реакции. Эти обе части данного метода работают сообща. Иммунная реакция находит болезнетворные микробы и микроорганизмы, а ферментативная реакция переводит полученные результаты в измеримую форму. Совмещаясь эти обе реакции, являют собой собственно сам ИФА.

[su_youtube_advanced url=»https://www.youtube.com/watch?v=-Z0hoaIPmS4″ w >

ИФА различают как прямой и непрямой, конкурентный и неконкурентный. При прямом ИФА берут антитела к нужному антигену и соединяют между собой ферментативной реакцией. При непрямом методе ИФА производится двойной контроль.

В организме антитела (иммуноглобулины) вырабатываются как ответ на обнаружение вируса, микроорганизма или бактерии. Иммуноглобулины бывают разных видов: IgA, IgE, IgD, IgM, IgG. При определении того или иного вида иммуноглобулина применяется полистироловая панель. В лунках панели приготовлен чистый антиген. Вступая в реакцию с сывороткой крови, антиген и иммуноглобулин образуют особый антиген. На следующем этапе, благодаря образовавшемуся особому антигену, происходит появление иммунных комплексов. В результате чего в лунках планшета окрашивается вещество, насыщенность цвета которого зависит от числа антител пациента.

Все тест-системы для проведения иммуноферментного анализа проходят тщательную диагностику и укомплектацию необходимыми реагентами. При проведении ИФА нужно сверять результат с конкретной тест-системой, на которой проводится анализ, так как у каждой тест-системы свои показатели.

Чтобы определить наличие сифилиса, необходим иммуноферментный анализ. Кровь пациента берется из вены, натощак. Для проведения анализа используется панель со специфичностью АТ классов A, M, G. Антитела при сифилисе производятся в конкретной последовательности, поэтому благодаря ИФА можно точно определить, когда настало заражение и какая стадия болезни на данный момент у пациента. На планшете ответ на анализ на сифилис будет иметь следующий вид:

• отрицательный результат оставит лунки бесцветными;
• положительный результат окрасит лунки в желтый цвет.

Интенсивность окрашивания прямо пропорциональна зависимости связанных между собой антигенов и антител.

В мире, где заразиться ВИЧ (Вирус иммунодефицита человека) возможно даже от похода к зубному, очень остро стоит вопрос о диагностики этого заболевания. Сейчас пройти исследования крови на ВИЧ возможно в анонимной лаборатории. Кровь берется из вены. Целесообразно проводить ИФА-диагностику на ВИЧ после переливания крови, полового акта без презерватива и т.д. Обязательно стоит учитывать инкубационный период заболевания. Он может составлять от 40 до 95 дней.

Существует два вида ВИЧ-инфекции: ВИЧ1 и ВИЧ2. ИФА выявляет антитела класса G уже в позднем течении болезни. Для ранних сроков определения ВИЧ используются рекомбинантные тест-системы, где антитела класса А и М выявляют болезнь.

Если все-таки определяется ВИЧ, то для постановки окончательного диагноза проводится тщательное лабораторное обследование. Кровь из первого забора подвергается повторной перепроверке на новой тест-системе. Если положительный результат повторяется, кровь у пациента берется повторно и тестируется. В случае повторного положительного результата, кровь тестируют особо чувствительной тест-системой 3 раза подряд. Если результаты теста повторяются, проводят иммуноблотинг и только после этого дается окончательный ответ.

Такие серьезные заболевания, как цитомегаловирус и хламидиоз, возможно определить иммуноферментным анализом с точностью до дня инфицирования, а также в какой стадии данное заболевание сейчас находится, какое лечение будет наиболее эффективно.

Когда в анализе определяется хламидия, появляются антитела класса А, М, G:

• антитело (IgM) определяется в первые дни инфицирования;
• антитело (IgA) определяется после 30 дня инфицирования;
• антитело (IgG) определяется независимо от времени инфицирования. Иммуноглобулины этого вида находятся в организме и помогают отслеживать лечение.

С цитомегаловирусом сложнее. ЦМВ проявляется в IgM, когда заболевание уже циркулирует в организме больше месяца. И наоборот — IgG определяет развитие начальной (острой) стадии болезни или повторное реинфицирование вирусом. При исследовании иммуноферментного анализа на IgG необходимо учитывать авидность антитела IgG. Если антитело низкоавидное, это значит, инфекция находится на первичной своей стадии. Высокоавидный IgG показывает хроническую форму заболевания, также это показывает сформированный устойчивый иммунитет.

Наличие паразитов в организме очень опасно. Существуют такие виды вирусов, определить которые можно только посредством ИФА-диагностики. Иммуноферментный анализ определяет наличие паразитов, даже если они пребывают в форме от цисты до взрослого гельминта. По анализу крови, можно определить наличие инфекции в любом органе. Организм человека выделяет антитела в ответ на инородные антигены, что и покажут результаты диагностики методом иммуноферментного анализа.

Благодаря изобретению иммуноферментного анализа люди получили возможность диагностировать огромное количество опасных заболеваний. Сейчас можно сдать кровь (берется только кровь из вены) в любой диагностической лаборатории и получить достоверный результат в короткие сроки.

источник

В середине прошлого века, у учёных появилась идея. В целях проведения научных исследований началась серьёзная работа. Тогда никто и предположить не мог, во что она выльется, какой обретёт резонанс, масштаб и известность. А значение? Исследователям хотелось самим понять, а потом поведать миру о происхождение клеток. К слову, наука цитология тогда находилась в детском возрасте.

Поэтому в первую очередь речь шла о патологических клетках, несущих людям болезни. Нужно было правильно выявить вредные или, как их называют учёные, антигенные клетки. К ним относятся: токсины микроорганизмов, яды пресмыкающихся (таких, как змеи и скорпионы), яды растительного происхождения (например, грибов, некоторых видов ягод и других растений).

Антигенами являются чужеродные человеческому организму вещества. Их много. Нельзя забывать, что вредители изворотливы, они умеют очень хорошо прятаться, маскироваться, приспосабливаться, поэтому подчас бывает очень трудно их обнаружить. Но, как только иммунная система человека различает патологические клетки в организме, антитела встают на нашу защиту. Так работает иммунная система здорового организма.

И вот тогда родилось новое исследование, которое расшифровывается, как иммуноферментный анализ или в сокращении — ИФА. Метод уникален тем, что даёт возможность учёным, исследователям проводить диагностику специфических иммуноглобулинов, тех, которые участвуют в процессе выявления инфекции. В ходе обследования происходит взаимодействие двух структур: антител, которые борются за нашу жизнь, и антигенов, которые имеют родственные начала и обнаруживаются в контакте с ферментом. Вот этот результат дал толчок к новому витку, мы бы сказали, новой вехе в развитии микробиологии и медицинской науки в целом. Почему?

Благодаря этому открытию началась эра полномасштабных диагностических исследований, что называется, прорыв в науке. Эта была большая победа учёных микробиологов и новая эра в лабораторной диагностике.

Это время совпало с периодом, когда заболевание ВИЧ начало своё победоносное и триумфальное шествие по всей планете. Напомним, зародилось это смертоносное оружие в Африке. Но в восьмидесятых годах прошлого столетия первыми появилась возможность на практике использовать Иммуноферментный метод. Делали этот анализ учреждения особого назначения: станции переливания крови, подразделения скорой помощи, венерические диспансеры, инфекционные больницы. Они были снабжены оборудованием, нужными реактивами. Так работа закипела. Срочно понадобилось принимать меры по выявлению СПИДа и разработке новых лекарственных препаратов, способных воздействовать на это страшное заболевание, которое уносило молодые жизни.

Рассмотрим, в каких же сферах и областях Иммуноферментный анализ применим.

Сразу скажем, что данный метод может использоваться во многих областях. Его применяют практически во всех отраслях медицины. Исследования проводятся даже в онкологических отделениях.

Иммуноферментный анализ способен обнаруживать маркеры целого ряда опухолей, в том числе и те, которые имеют злокачественный характер. Именно такая особенность помогает специалистам выявлять тяжелейший недуг на ранней стадии, когда другие обследования бессильны что-либо диагностировать в силу того, что в зачаточном состоянии опухоли плохо различимы. Вы ещё убедитесь, что этот анализ имеет очень большие возможности.

Представьте себе, что сегодня Иммуноферментный анализ успешно применяется в такой области, как ветеринария. Наши любимые домашние питомцы точно так же, как и люди, подвергаются опасным заболеваниям.

В настоящее время современные лаборатории, помимо онкологических маркеров, снабжены большим багажом технического оборудования, что позволяет применять иммуноферментный метод в случаях особо опасных. Имеется в виду исследования с целью выявления тяжелейших патологических процессов. Таких как: инфекционные заболевания широкого спектра действия, даже гормональные сбои. Более того, на сегодняшний день иммуноферментный анализ проводится в стратегически важной области — фармакологии. Метод помогает разобраться досконально, каким образом влияет на состояние заболевшего человека тот или иной лекарственный препарат. Как мы рассказали выше, всё это относится в равной степени и к препаратам, которые используют в ветеринарной службе.

Так каким же образом иммуноферментный анализ (или коротко ИФА) устанавливает и определяет истинную причину?

Итак, у больного взяли из вены кровь. Что происходит дальше? Реактивы и метод этого анализа настолько чувствительны и имеют уникальную специфику, поэтому в результате обнаруживают следующее:

• наличие у больного целого ряда инфекций: прежде всего, ВИЧ, в обязательном порядке все виды гепатитов, конечно, сифилис, инфекции нового поколения TORCH-инфекции и герпетическая, уреа и микоплазмоз, и множество других заболеваний, которые вызывают патогенные, болезнетворные микробы и бактерии,
• наличие антител, которые вырабатываются после перенесенных болезней и осуществляют жизнедеятельность в организме, перемещаясь в кровеносной системе, и являясь надёжным щитом и барьером от новых инфекций,
• гормональный уровень, продуктивность работы всей эндокринной системы: статусное состояние гормонов половой сферы, надпочечников и щитовидной железы.

Обследование помогает своевременно обнаружить нахождение опасного возбудителя инфекционного заболевания в организме, но оно также позволяет увидеть, в каком количестве антигены размножились в сыворотке крови самого больного. И это очень важно. Более качественного обследования трудно найти. И именно количественный состав микроорганизмов в анализе играет невероятно большую роль в дальнейшей окончательной диагностике инфекционного заболевания и своевременном лечении на любых стадиях. Поймите, независимо от того, в организме поселился вирус или бактерия, их количественный состав определяет ход инфекционного заболевания и его итог.

Дело в том, что Иммуноферментный анализ обладает широким спектром действия, способен задействовать все инструменты, подвластные ему, чтобы защитить всех живущих на планете Земля от тяжелейших заболеваний, угрожающих людям и братьям меньшим потерей здоровья, а порой и самой жизни. Исследование запрограммировано так, что в его подчинении несколько вариантов, каждый из которых выполняет свою функцию, несёт специфическую нагрузку и ответственность, решает ряд поставленных задач, с которыми прекрасно справляется. Цель оправдывает средства. Так и здесь. Иммуноферментный анализ ищет целенаправленно и тщательно.

Даже работая на полуавтоматической системе, лаборатории достигают нужного результата. Сегодня не каждая лаборатория может перейти на полное автоматическое управление, ибо это дорогое удовольствие. Но исследователи не гнушаются старыми методами закапывания, промывания. Пусть эта ручная работа монотонная, нудная и забирает лишнее время, но иммуноферментный анализ готовится в лабораториях определённой направленности, где в любом случае большей частью задействован ручной труд. Анализ проводится на различных тест-системах.

Исследование в обязательном порядке проводится врачом, специализирующимся на лабораторной диагностике. В практике результатов можно проследить специфику иммунологических исследований, когда допускается ложноположительные либо ложноотрицательные ответы.

Так какие результаты выдаёт Иммуноферментный анализ в случае диагностики сифилиса?
Надо сказать, что исследование проводится на голодный желудок, забор крови производится из вены больного. В процессе исследования задействована специфическая аппаратура: Класс АТ, А, М, G или вместо этого, как мы отметили выше, антитела.

При заражении сифилисом, класс АТ конкретизирует результат и показывает его в определённой форме. В этом случае Иммуноферментный анализ даёт ответ на ряд поставленных вопросов и показывает, когда именно больной был заражён, обозначает стадию заболевания и представляет данные в соответствующей последовательности, где показатели:

• IgA — конкретизирует, что человек заразился месяц с лишним тому назад;
• IgM — предоставляет сроки, указывая на длительность инфекционного заболевания. Помимо этого в результате могут присутствовать данные, что сифилис обострился после рецидивов имеющихся хронических болезней;
• IgG — этот показатель сообщает исследователям и врачам, что заболевание находится на пике своего развития и этот метод может выявить недавно проведенное лечение.

У исследования на сифилис существует своя специфическая особенность. Результат определяется по окрашиванию реактивов. Более яркий окрас будет свидетельствовать о наличии заражении. Слабый окрас считается отрицательным результатом, но обязательно проверяется ещё раз.
И, конечно, для пациентов самым тревожным моментом является ожидание результатов обследования на ВИЧ.

С некоторых пор люди стали острее относиться к имеющемуся факту заражения. Что греха таить, по сей день в обществе живут наркоманы, женщины, занимающиеся древним ремеслом — проституцией. К сожалению, заболевание передаётся не только этими путями и вовлекает новые пласты общества: люди заражаются и по ряду иных обстоятельств и причин. Вот для этого существует возможность своевременного обследования. Для тех, кто не желает придавать огласке данный факт, предусмотрен вариант анонимного обследования. Что же касается самих инфицированных ВИЧ-инфекцией, то они с некоторых пор защищены законом.

Иммуноферментный анализ для выявления инфицированных ВИЧ-инфекцией в медицинской среде является наиглавнейшим обследованием. Оно предъявляет определённые требования и особые условия в связи с тем, что исследователю и врачу важно не нанести больному моральный ущерб.

Для этого нужно выполнить главные требования: обследования на ВИЧ иммуноферментным методом нужно проводить сразу после прохождения разного рода медицинских процедур, полового акта и переливания крови. Существует инкубационный период, как при заражении многими другими инфекционными заболеваниями. К сожалению, инкубационный период у всех заболеваний и стадий различается, иногда колеблется в промежутке между несколькими периодами. Но учёные вывели среднее значение: оно колеблется в промежутке от сорока пяти до девяносто дней. Забор крови на ВИЧ производится точно также, как и на иные инфекции — только утром и натощак! Результаты объявляются, как правило, в промежутке от двух до десяти дней, в зависимости от загрузки работников лаборатории. Однако они стараются объявить результат быстро, понимая волнения и состояние пациента.

Лабораторные исследования выдают два результата: определение наличия антител ВИЧ-1 и ВИЧ-2. Первый поселился в России и странах Европейского континента, также в Азии. Второй получил распространение в Западной Африке.

Главной задачей для исследователей является определение заражения на ранних стадиях, это возможно в инкубационном периоде. Обследование на ВИЧ Иммуноферментным методом — непростое и проходит в несколько этапов. Результаты бывают противоречивыми и требуют дополнительной проверки.

Заключение после проведенного обследования выносится только на основании полного цикла исследования. При положительном результате специалист беседует тет-а-тет с больным без свидетелей. Разглашать результат, который является медицинской тайной, категорически воспрещается. Это наказуемо и подводит под уголовную ответственность.

Иммуноферментный метод способен обнаружить паразитов, хламидию и цитомегаловирус.

Эти обследования не так давно стали обретать известность, получили хорошую репутацию и считаются приоритетными у специалистов. Иммуноферментный анализ справляется с выявлением хламидии, цитомегаловирус. Он своевременно обнаруживает вредителей, степень заражения, указывает, в какой стадии находится болезнь, а также правильно ли подобрано лечение.

Метод отслеживает рождение антител в организме, их классификацию, причём от фазы к фазе инфекционного процесса, вызванного возбудителем. Все это позволяет специалистам отследить специфические показатели, как например:

• IgM — в этой стадии анализ показывает состояние возбудителя примерно через неделю после начала заболевания,
• IgA — в этой стадии анализ показывает, что заражение произошло больше месяца тому назад,
• IgG — эта стадия даёт ясную картину и возможность подтвердить диагноз. Специалисты получают возможность отслеживать, как действует на организм больного назначенная терапия, определять её эффективность.

Все результаты чётко прописываются в бланке заключения исследования.

Результаты в данной категории выглядят по-другому. И это неудивительно.
Антитела группы М можно определить только через месяц и более. Поэтому IgM+, означает, что имеется подтверждённый результат о наличии инфекции, говорит, когда произошло инфицирование, что возбудитель продолжает жить в организме в пределах от четырёх месяцев до полугода.

Группа G показывает, что в организме присутствует острая форма инфекционного процесса и это подтверждает обследование. Но нет чёткой информации о том, в какой именно стадии заболевание.

IgG — вот здесь начинаются серьёзные осложнения при установлении истины. Причина самая простая, даже банальная. Всё зависит, в каком состоянии пребывает иммунная система обследуемого. Как видите, здесь все взаимосвязано с наличием и активностью антител.

Инфекции, описанные выше, встречаются у любого человека намного реже, нежели обыкновенные паразиты.

Все микроорганизмы, которые попадают под классификацию «паразиты», знакомы всем живущим на земле. Они преследуют нас с младенческого возраста и на протяжении всей жизни, в той или иной степени напоминают о себе. К сведению, их токсины ядовиты и очень опасны, поэтому легко могут отравить жизнь любому человеку, независимо от возраста. Возьмём, к примеру, глисты. Размерами они отличаются друг от друга. Встречаются очень большие, по форме они напоминают ужей. Но есть и такие, которые на вид крошечные, однако вред приносят невероятно большой. К ним в первую очередь относятся лямблии, которые проникают в печень, обживают там гнёздышко, откладывают яйца, которые неимоверно трудно извлечь оттуда. Кроме них, амебы и трихомонады наносят человеку не меньший вред. Раньше выявить этих вредителей не представлялось возможным. Только очень опытный врач по симптоматике и некоторым обследованиям крови мог выставить диагноз и назначить лечение.

С тех самых пор, как учёные создали Иммуноферментный метод, все вопросы отпали. Этот анализ справляется с поставленной задачей по выявлению паразитов очень успешно. Он видит паразитов на любой стадии: в форме личинок, цист, яичек либо созревших паразитов. Более того, укажет, где именно вредители присмотрели уютный уголок. Опять же, натощак у больного берут кровь, затем ищут антитела, которые рассказывают исследователям всё о чужеродных антигенах.

Иммуноферментный метод отлично зарекомендовал себя и в рекламе не нуждается. Он помогает решать многие серьёзнейшие вопросы и задачи, при этом от больного требуется всего лишь сдать анализ крови из вены натощак и всё. А это очень облегчает процесс, ведь данный метод не требует собирать материал для исследования, волнуясь дожидаться результатов. Учёные не стоят на месте, постоянно усовершенствуют свой метод. Вскоре нас ожидают новые открытия и сенсации. Придёт день, когда все заболевания будут диагностировать с помощью Иммуноферментного анализа.

источник

ИФА анализ — что это такое, расшифровка иммуноферментного анализа крови на паразитов, сифилис, ВИЧ, туберкулез. Норма в таблице, результаты

Благодаря развитию современной медицины, врачу при постановке диагноза больше не нужно ориентироваться на косвенные проявления заболеваний или проводить многоступенчатые лабораторные исследования. Достаточно провести один анализ, который подтвердит или опровергнет предполагаемый первоначальный диагноз.

Таким методом является иммуноферментный анализ (ИФА) — это исследование позволяет обнаружить специфические антитела и антигенны свойственные при разнообразных патологиях, что во многом ускоряет установку диагноза.

ИФА анализ — это такое лабораторное исследование (метод), которое помогает определить присутствие или отсутствие определённых антител в организме для борьбы с вирусом и их количество.

Основой исследования является естественная реакция антиген (вредоносный организму объект) – антитело (белок уничтожающий вредоносные объекты), позволяющая выявить присутствие разнообразных вирусов, бактерий.

ИФА представляет собой естественный иммунный ответ организма – взаимодействие антитела с соответствующим антигеном. Так во время ИФА в пробирку с материалом добавляются поочередно антигены или антитела, после чего происходит выявление концентрации получившихся комплексов антиген-антитело.

Если совпадения образовались, то возникают иммунные комплексы, далее происходит ферментная реакция красящего вещества с объединённой молекулой. Именно благодаря изменению цвета в ходе ферментативной индикации происходит идентификация заболевания после исследования уровня определяемого соединения.

Иммуноглобулины человека дифференцируются на несколько классов, отличающихся друг от друга свойствами, структурой и антигенными особенностями тяжелых цепей (Н-цепи). У всех млекопитающих, в том числе и человека, выделяют пять Н-цепей, которые и определяют принадлежность иммуноглобулинов к соответствующему классу: G, М, A, D, Е.

Каждый класс отличается друг от друга биологическими свойствами, и способностями связывать антигены, и скоростью и прочностью связи с молекулой.

Функции каждых иммуноглобулинов (lg) различны:

Возникновение иммуноглобулинов происходит по своеобразной «цепочке» — lgM lgG, именно так реагирует организм на появление в организме антигена. Во время лабораторной диагностики проводится оценка концентрации трех основных иммуноглобулинов – G, M, A.

ИФА-анализ с каждым годом становится все более популярным.

Такое исследование ускоряет постановку диагноза, а это очень важно для терапии таких патологий как:

• вирусный гепатит;
• ВИЧ-инфекция;
• цитомегаловирус,
• вирус Эпштейна-Барр,
• вирус герпеса,
• корь
• краснуха,
• туберкулез,
• сальмонеллёз,
• дизентерия,
• клещевой энцефалит,
• бактерии хеликобактер,
• боррелиоз,
• столбняк,
• сифилис,
• дифтерия,
• лептоспироз,
• хламидиоза,
• уреаплазмоз,
• микоплазмоз,
• коклюш.

Так же анализ позволяет определить инфицирование паразитами:

• плоскими червями
• аскаридами
• гистолическими амебами,
• печеночными тремадами,
• лямблиями,
• токсоплазмами,
• трихинеллами,
• двуусткой,
• цестодозами.

ИФА является своеобразным маркером аутоиммунных патологий и злокачественных новообразований.

При подготовке к исследованию следует придерживаться таких правил:

• за сутки до забора крови нельзя курить и употреблять алкоголь,
• не заниматься спортом или другими физическими нагрузками,
• стараться не допускать стрессов,

Перед тем как сдать ИФА анализ, нужно избегать стрессов.

прекратить употребление лекарственных средств не позже чем за 10 дней до манипуляции.

Так же врачи рекомендуют придерживаться специальной диеты – исключить жирную и жареную пищу, а если исследование проводится на гепатиты, то необходимо не употреблять любые оранжевые овощи и особенно цитрусовые. Сдавать кровь следует с утра на голодный желудок.

Ложноположительным анализ бывает из-за невыполненных рекомендаций, особенно употребления жирной пищи, что приводит к слишком большой концентрации триглицеридов в плазме, из-за чего проводимость ИФА снижается.

В качестве исследуемого материала может использоваться цельная кровь, сыворотка или плазма венозной крови. Забор материала, обычно проводится из локтевой вены, для этого применяется одноразовая игла и вакуумная пробирка, необходимо 5-10 мл крови.

Для точности результата важно придерживаться правильной техники взятия пробы – прокол самого сосуда и окружающих тканей должен быть произведен одной манипуляцией, поэтому используется короткая игла с большим диаметром, благодаря чему не травмируется противоположная стенка вены и не повреждаются эритроциты.

Так же для сохранения целостности эритроцитов, нужно чтобы кровь стекала по стенкам пробирки.

Во время хранения материала следует избегать возможной его ионизации, кроме того материал не должен контактировать с остатками дезинфицирующих средств, поэтому используется только одноразовая пластиковая пробирка, с маркировкой ФИО пациента, датой и временем сдачи материала.

Если необходимо непродолжительное хранение исследуемого материала, то используется холодильная камера с температурой 2-4 о С, если необходимо более продолжительное хранение, то материал замораживается при температуре -20 о С.

После подготовки исследуемого материала врач-лаборант приступает к необходимым манипуляциям. Для этого используются ряд специальных наборов антигенов, обдающих свойством спровоцировать ответные реакции организма на раздражитель, это разнообразные инфекции, гормоны, аллергены.

Схема ожидаемой реакции «антиген-антитело» выглядит приблизительно так:

• Первичная реакция — определяемый Ig (Ab) и очищенный антиген возбудителя (Ag).
• Для обнаружения получившихся иммунных комплексов далее следует новая иммунологическая реакция, где антигеном выступает связанный специфический Ig, а антителом для него выступает коньюгат- Ig (Ab).
• Последний этап — ферментативная реакция, вместе с катализатором молекулой коньюгата. Субстратом выступает хромоген (не окрашенный), который в процессе протекания реакции окрашивается, и интенсивность цвета и определяется количественный показатель иммуноглобулина в пробе.

В настоящий момент разработано множество разнообразных вариантов ИФА, четкая классификация их отсутствует. Обычно, методы рассматриваются исходя из разделения её на гетеро- и гомогенные — все фазы анализа происходят с применением твердой фазы или с использованием только раствора.

Современные клинико-диагностические лаборатории обычно используют гетерогенный (твердофазный) ИФА, в нем под твердой фазой подразумевается абсорбция антигенов или антител на твердой поверхности специальных лунок, расположенных на полистироловом микропланшете, метод подразделяется на прямой и непрямой ИФА.

При прямом ИФА, вносимый антиген закрепляет в период инкубационного процесса на поверхности пустых лунок, для этого исследуемые пробы материал помещают в чистые лунки на 20-25 минут, это нужно для прикрепления антигена к их поверхности. После этого происходит добавление необходимого антитела. Далее материал остается на определенное время для образования связей.

Антитела всегда добавляют в избытке, поэтому даже при их наличии в пробе остаются не связанные антигены, а если антигенов нет совсем, то связей не будет. Чтобы удалить«лишние» антитела проводится декантация, после чего остаются только те антитела, которые создали связь с антигеном.

После этого следует ферментативная реакции – добавление в лунки раствора с ферментом, после чего происходит окрашивание полученных связей.

При непрямом методе ИФА используемые антитела, заранее соединенные с субстратом ферментативной реакции; в этом случае связь антител с антигеном происходит в период инкубационного процесса, после чего происходит мобилизация связей на поверхности лунок, а вносимый после конъюгат и субстратно-хромогенный реагент окрашивают реакцию.

Таким образом, главным отличием непрямого от прямого метода является не приклеивание материала к поверхности чистых лунок, а связывание с антигеном, иммобилизованным на планшете.

Останавливается протекание реакции с применением специализированных устройств, далее каждая лунка подвергается процессу фотометрирования, за которым следует сравнительная характеристика полученного результата с проведенными ранее контрольными пробами.

Если обнаруживается повышение оптической плотности в пробе, то завышена и концентрация специфических антител в исследуемом результате.

Проведение исследования не занимает много времени, от забора крови до получения результата проходит от 1 до 10 дней, в зависимости от диагностических мероприятий.

На полученном пациентом бланке-результате диагностики указывается отрицательный либо положительный результат на определенные классы иммуноглобулинов, так же указывается количественный показатель различных классов антител.

Возможны различные интерпретации результатов:

1. IgM (+) (IgA, IgG не определялись) – процесс выздоровления;
2. IgM (-) ;IgG (+), IgA (+) – хроническая инфекционная патология;
3. IgM, IgG, IgA (все с – значением) – отсутствие защитных механизмов к инфекциям;
4. IgG (+/-) и IgA (+/-), IgM (+) – острый процесс;
5. IgM (-), IgA(-),IgG(+) – постинфекционный иммунитет;
6. IgM, IgG, IgA (+) – хроническая патология в стадии обострения.

Так, например, если были обнаружены IgG и IgM, то возможно у пациента одно из таких заболеваний:

• вирусный гепатит;
• цитомегаловирус;
• герпес;
• ветряная оспа;
• хламидиозом;
• стафилококковая или стрептококковая инфекция.

Иммуноферментный анализ часто назначается при гормональных исследованиях, нормы показаны в таблице:

ИФА анализ — это такое диагностическое исследование, которое позволяет оценить вероятность образования онкологических патологий. Однако интерпретация результатов проводится только лечащим врачом.

ИФА подходит для выявления разнообразных форм половых инфекций, в том числе сифилиса, часто используется и для скрининга беременных.

Благодаря этому исследованию можно узнать, как давно произошло заражение и стадия заболевания на момент исследования:

• иммуноглобулины М говорят о длительности заболевания;
• IgA — пациент заразился более 30 дней назад;
• IgG обнаруживается на «пике» заболеваний, или же в тот момент, когда терапия окончилось недавно.

В процессе исследования лунки на планшете с отрицательным показателем остаются бесцветные, а положительные окрашиваются в ярко-желтый цвет. Если цвет положительных лунок не совпадает с цветом контроля, то результат считается сомнительным и необходимо повторное исследование.

Иммуноферментный анализ — это первая ступень в диагностике ВИЧ. Проводить анализ нельзя сразу же после предполагаемого заражения необходимо дождаться окончания инкубационного периода (от 14 дней до 6 месяцев).

В ходе анализа определяются антитела к ВИЧ-1 и ВИЧ-2, происходит поиск АТ класса G, который обычно появляется на более поздних сроках и АТ класса А и М, они могут быть определены на ранних стадиях (во время инкубационного периода).

При получении положительных проб далее следует:

• если первый тест дал положительный результат, то кровь вновь перепроверяется другим лаборантом;
• повторный положительный результат предполагает пересдачу материала,
• при повторении результата, пациенту назначается иммуноблотинг.

Окончательный вывод о наличии ВИЧ-инфекции выдается только после результата иммуноблотинга.

ИФА также применяется в качестве диагностического исследования туберкулеза, но если у пациента даже и были выявлены антитела к данной патологии, то это не всегда подтверждает наличие у него туберкулеза, поэтому ИФА часто применяется качестве уточняющей методики, либо же для диагностики скрытой внелегочной формы.

ИФА анализ — это такое исследование, позволяющее обнаружить у пациента заражения паразитами и простейшими, в ходе диагностики можно определить даже время заражения.