Меню Рубрики

Расшифровка ифа анализа на инфекции

Для оценки способности организма сопротивляться инфекционным болезням или для определения фазы патологии применяют анализ крови. Метод ИФА занимает важное место среди лабораторных исследований, он помогает всесторонне изучить деятельность защитной функции крови, определить иммунодефицит при инфекционных заболевания, недугах крови, гормональных, аутоиммунных процессах.

Этот метод относится к лабораторным исследованиям, определяет наличие защитных факторов крови белковой природы (антител) к определенным болезнетворным агентам (антигенам). Иммуноферментный анализ крови определяет иммуноглобулины, которые могут обнаруживаться в виде иммунокомплексов. Появляются они при возникновении сложных нейрогуморальных реакций иммунной защиты человека, которые становятся ответом на внедрение чужеродных антигенов.

Против каждого вида болезнетворного агента производятся в организме специфические антитела. Далее происходит связывание патологического микроорганизма или антигена, образуется комплексное соединение «антиген-антитело». Затем оно нейтрализуется, происходит ферментативный лизис, реакция фагоцитоза, и заканчивается процесс выводом из организма. Наличие конкретных комплексов, определяющееся ИФА, говорит о виде возбудителя, вредного вещества у больного.

Учеными обнаружено и изучено 5 видов иммуноглобулинов: IgE, IgD, IgG, IgM, IgА. Существуют и другие классы, но они находятся еще на стадии исследования, и не до конца выяснена их роль. В практической медицине важное значение имеют А, М, G. Информативность, точность определения базируется на временных промежутках, за которые они появляются, достигают максимума и исчезают.

  1. Иммуноглобулины IgA (А) – выполняют защитную функцию слизистых мочевыделительной системы, желудочно-кишечного тракта, дыхательных путей. Выявить их при остром начале патологии нельзя, они образуется только через 2 недели после первых признаков болезни, в некоторых ситуациях еще позже. Сосредоточен глобулин А в слизистых тканях (около 80% от общего количества). Оставшаяся часть находится в крови, чтобы обезвреживать и уничтожать микроорганизмы. К 8 неделе после стихания острой фазы патологии количество этих иммуноглобулинов уменьшается до полного исчезновения.
  2. Первым и главным маркером острого периода развития болезни становятся глобулины IgM (M). Анализ их показывает на 5 сутки после начала появления первых признаков патологии. Выявляет ИФА эти иммуноглобулины первые 6 недель, затем они быстро исчезают.
  3. Класс иммуноглобулинов IgG (G) показывает остаточный иммунный ответ в крови на патологический процесс. Анализ покажет фактор спустя месяц после начала болезни. Потом они могут еще долгие месяцы, года и даже всю жизнь определяться в анализе. Они защищают человека от рецидива недуга, иногда обеспечивают невозможность вторичного развития патологии. При определении роста иммуноглобулина G подозревают повторное заражение патологией. Для подтверждения проводят несколько проб ИФА с промежутком в 2 недели.
  4. В паразитологии и аллергологии используется иммуноглобулин IgE (E).
  5. Иммуноглобулин IgD (D) находится на В-лимфоцитах, небольшая концентрация встречается и у здоровых людей. Достигает максимальных значений после 10 лет жизни человека. При анализе ИФА отмечается рост иммуноглобулина D у пациентов с системными патологиями соединительной ткани, во время беременности, при бронхиальной астме, недугах, которые спровоцированы иммунодефицитным состоянием.

При помощи этого анализа можно оценивать эффективность лечения, проводить комплексное исследование перед трансплантологическими операциями, определять состояние иммунодефицита и антитела к более 600 видов аллергенов. Исследование крови методом ИФА использует в качестве дополнительного способа обнаружения онкологических клеток. Назначают анализ при необходимости обнаружения антител к микробам, которые провоцируют венерические патологии:

  • трихомониаз;
  • сифилис;
  • токсоплазмоз;
  • микоплазмоз;
  • уреаплазмоз.

При глистных инвазиях в анализе ИФА будет отмечен рост количества иммуноглобулинов. Проводится исследования для подтверждения наличия у больного:

  • вируса Эпштейна-Барра;
  • герпетических инфекций;
  • цитомегаловируса;
  • группы вирусных гепатитов.

Анализ ИФА используется в диагностике паразитарных патологий, показателем становится специфический иммуноглобулин IgE. Отмечается его рост в крови при заражении организма пациента паразитами. Иммуноглобулин Е становится маркером атопической реакции при аллергических процессах. Содержание в крови – незначительное. Локализуется, как правило, на слизистых оболочках, макрофагах, базофилах.

Основная функция белкового комплекса – защита слизистых оболочек организма. Также он участвует в иммунных реакциях, которые направлены на уничтожение паразитов. Отвечают за активизацию IgE макрофаги и эозинофилы. При сопоставлении с данными анализа этот факт помогает установить диагноз. Анализ ИФА используют для обнаружения:

  • хронической, острой формы описторхоза;
  • круглых гельминтов: остриц, аскарид;
  • лямблий;
  • трихинеллеза;
  • амебиаза;
  • форм лейшманиоза;
  • содержания токсоплазм.

Иммуноферментное исследование крови не единственный вариант для определения иммуноглобулинов. Иногда для этого исследования делают забор спинномозговой жидкости, ткани стекловидного тела, околоплодных вод. При использовании крови набирают ее из локтевой вены при помощи инъекционной иглы. Сдавать анализ необходимо натощак, перед ИФА не рекомендуется принимать медицинские препараты, которые могут повлиять на результат. Следует отказаться от алкоголя, курения, употребления наркотических веществ перед сдачей биоматериала. Варианты результатов теста:

  1. При отрицательных показателях иммуноглобулинов IgG, IgM, IgA, врачи говорят об отсутствии патологии или начальной стадии. Такой же результат (отрицательный) будет после полного выздоровления по прошествии длительного периода.
  2. Если IgG проявляется положительно, а IgM и IgA не обнаружены, это указывает на образование иммунитета после прививки или инфекционной болезни.
  3. При высоких титрах IgM и отрицательных IgA, IgG ставят диагноз острого инфекционного заболевания.
  4. При положительном показателе IgG, IgM, IgA врачи говорят об острой фазе рецидива уже имеющегося хронического недуга.
  5. При хронической инфекции, которая находится на стадии стихания (ремиссии), анализ ИФА показывает отрицательные титры IgM, а IgA и IgG будут положительными.

Основным отрицательным моментом этого исследования является вероятность получения ложноположительных или ложноотрицательных результатов. Причиной недостоверности становится прием медикаментов, технические недочеты лаборатории. Фальсифицировать анализ может процесс нарушения метаболизма в организме. Главными достоинствами анализа ИФА являются:

  • точность, диагностическая специфичность;
  • невысокая себестоимость анализа;
  • скорость получения результатов;
  • возможность динамического контроля стадии патологии, эффективности лечения;
  • простота исследования;
  • возможность выполнять массовые обследования очагов инфекции;
  • безболезненность, безопасность для больного;
  • применение при обработке информационных технологий.

источник

ИФА анализ — что это такое, расшифровка иммуноферментного анализа крови на паразитов, сифилис, ВИЧ, туберкулез. Норма в таблице, результаты

Благодаря развитию современной медицины, врачу при постановке диагноза больше не нужно ориентироваться на косвенные проявления заболеваний или проводить многоступенчатые лабораторные исследования. Достаточно провести один анализ, который подтвердит или опровергнет предполагаемый первоначальный диагноз.

Таким методом является иммуноферментный анализ (ИФА) — это исследование позволяет обнаружить специфические антитела и антигенны свойственные при разнообразных патологиях, что во многом ускоряет установку диагноза.

ИФА анализ — это такое лабораторное исследование (метод), которое помогает определить присутствие или отсутствие определённых антител в организме для борьбы с вирусом и их количество.

Основой исследования является естественная реакция антиген (вредоносный организму объект) – антитело (белок уничтожающий вредоносные объекты), позволяющая выявить присутствие разнообразных вирусов, бактерий.

ИФА представляет собой естественный иммунный ответ организма – взаимодействие антитела с соответствующим антигеном. Так во время ИФА в пробирку с материалом добавляются поочередно антигены или антитела, после чего происходит выявление концентрации получившихся комплексов антиген-антитело.

Если совпадения образовались, то возникают иммунные комплексы, далее происходит ферментная реакция красящего вещества с объединённой молекулой. Именно благодаря изменению цвета в ходе ферментативной индикации происходит идентификация заболевания после исследования уровня определяемого соединения.

Иммуноглобулины человека дифференцируются на несколько классов, отличающихся друг от друга свойствами, структурой и антигенными особенностями тяжелых цепей (Н-цепи). У всех млекопитающих, в том числе и человека, выделяют пять Н-цепей, которые и определяют принадлежность иммуноглобулинов к соответствующему классу: G, М, A, D, Е.

Каждый класс отличается друг от друга биологическими свойствами, и способностями связывать антигены, и скоростью и прочностью связи с молекулой.

Функции каждых иммуноглобулинов (lg) различны:

Кол-во в организме Функции Период полураспада (дней) Значение
G 70% Формируют пассивный иммунитет у новорожденного;

необходимы для иммунного ответа

улучшают фагоцитоз,

21-24 обеспечивают длительный гуморальный иммунитет при инфекционных заболеваниях
М 5-10% нужны для активации фагоцитоза,

способны связать 5 молекул антигена,

5 Обеспечивает первичную иммунную реакцию
А 10-15 Нейтрализуют токсины и вирусы

нужны для формирования раннего иммунитета

Образование местного иммунитета

4-5 Защита слизистых оболочек
Е 0,2% вызывают аллергию и анафилаксию активируют тканевые базофилы 2 Защита от паразитов
D 0,2% задействованы в выработке лимфоцитов, необходим как мембранный рецептор для антигенов; 3 Их роль малоизучена

Возникновение иммуноглобулинов происходит по своеобразной «цепочке» — lgM lgG, именно так реагирует организм на появление в организме антигена. Во время лабораторной диагностики проводится оценка концентрации трех основных иммуноглобулинов – G, M, A.

ИФА-анализ с каждым годом становится все более популярным.

Такое исследование ускоряет постановку диагноза, а это очень важно для терапии таких патологий как:

  • вирусный гепатит;
  • ВИЧ-инфекция;
  • цитомегаловирус,
  • вирус Эпштейна-Барр,
  • вирус герпеса,
  • корь
  • краснуха,
  • туберкулез,
  • сальмонеллёз,
  • дизентерия,
  • клещевой энцефалит,
  • бактерии хеликобактер,
  • боррелиоз,
  • столбняк,
  • сифилис,
  • дифтерия,
  • лептоспироз,
  • хламидиоза,
  • уреаплазмоз,
  • микоплазмоз,
  • коклюш.

Так же анализ позволяет определить инфицирование паразитами:

  • плоскими червями
  • аскаридами
  • гистолическими амебами,
  • печеночными тремадами,
  • лямблиями,
  • токсоплазмами,
  • трихинеллами,
  • двуусткой,
  • цестодозами.

ИФА является своеобразным маркером аутоиммунных патологий и злокачественных новообразований.

При подготовке к исследованию следует придерживаться таких правил:

  • за сутки до забора крови нельзя курить и употреблять алкоголь,
  • не заниматься спортом или другими физическими нагрузками,
  • стараться не допускать стрессов,

Перед тем как сдать ИФА анализ, нужно избегать стрессов.

  • прекратить употребление лекарственных средств не позже чем за 10 дней до манипуляции.
  • Так же врачи рекомендуют придерживаться специальной диеты – исключить жирную и жареную пищу, а если исследование проводится на гепатиты, то необходимо не употреблять любые оранжевые овощи и особенно цитрусовые. Сдавать кровь следует с утра на голодный желудок.

    Ложноположительным анализ бывает из-за невыполненных рекомендаций, особенно употребления жирной пищи, что приводит к слишком большой концентрации триглицеридов в плазме, из-за чего проводимость ИФА снижается.

    В качестве исследуемого материала может использоваться цельная кровь, сыворотка или плазма венозной крови. Забор материала, обычно проводится из локтевой вены, для этого применяется одноразовая игла и вакуумная пробирка, необходимо 5-10 мл крови.

    Для точности результата важно придерживаться правильной техники взятия пробы – прокол самого сосуда и окружающих тканей должен быть произведен одной манипуляцией, поэтому используется короткая игла с большим диаметром, благодаря чему не травмируется противоположная стенка вены и не повреждаются эритроциты.

    Так же для сохранения целостности эритроцитов, нужно чтобы кровь стекала по стенкам пробирки.

    Во время хранения материала следует избегать возможной его ионизации, кроме того материал не должен контактировать с остатками дезинфицирующих средств, поэтому используется только одноразовая пластиковая пробирка, с маркировкой ФИО пациента, датой и временем сдачи материала.

    Читайте также:  3 раза анализ показал сифилис

    Если необходимо непродолжительное хранение исследуемого материала, то используется холодильная камера с температурой 2-4 о С, если необходимо более продолжительное хранение, то материал замораживается при температуре -20 о С.

    После подготовки исследуемого материала врач-лаборант приступает к необходимым манипуляциям. Для этого используются ряд специальных наборов антигенов, обдающих свойством спровоцировать ответные реакции организма на раздражитель, это разнообразные инфекции, гормоны, аллергены.

    Схема ожидаемой реакции «антиген-антитело» выглядит приблизительно так:

    • Первичная реакция — определяемый Ig (Ab) и очищенный антиген возбудителя (Ag).
    • Для обнаружения получившихся иммунных комплексов далее следует новая иммунологическая реакция, где антигеном выступает связанный специфический Ig, а антителом для него выступает коньюгат- Ig (Ab).
    • Последний этап — ферментативная реакция, вместе с катализатором молекулой коньюгата. Субстратом выступает хромоген (не окрашенный), который в процессе протекания реакции окрашивается, и интенсивность цвета и определяется количественный показатель иммуноглобулина в пробе.

    В настоящий момент разработано множество разнообразных вариантов ИФА, четкая классификация их отсутствует. Обычно, методы рассматриваются исходя из разделения её на гетеро- и гомогенные — все фазы анализа происходят с применением твердой фазы или с использованием только раствора.

    Современные клинико-диагностические лаборатории обычно используют гетерогенный (твердофазный) ИФА, в нем под твердой фазой подразумевается абсорбция антигенов или антител на твердой поверхности специальных лунок, расположенных на полистироловом микропланшете, метод подразделяется на прямой и непрямой ИФА.

    При прямом ИФА, вносимый антиген закрепляет в период инкубационного процесса на поверхности пустых лунок, для этого исследуемые пробы материал помещают в чистые лунки на 20-25 минут, это нужно для прикрепления антигена к их поверхности. После этого происходит добавление необходимого антитела. Далее материал остается на определенное время для образования связей.

    Антитела всегда добавляют в избытке, поэтому даже при их наличии в пробе остаются не связанные антигены, а если антигенов нет совсем, то связей не будет. Чтобы удалить«лишние» антитела проводится декантация, после чего остаются только те антитела, которые создали связь с антигеном.

    После этого следует ферментативная реакции – добавление в лунки раствора с ферментом, после чего происходит окрашивание полученных связей.

    При непрямом методе ИФА используемые антитела, заранее соединенные с субстратом ферментативной реакции; в этом случае связь антител с антигеном происходит в период инкубационного процесса, после чего происходит мобилизация связей на поверхности лунок, а вносимый после конъюгат и субстратно-хромогенный реагент окрашивают реакцию.

    Таким образом, главным отличием непрямого от прямого метода является не приклеивание материала к поверхности чистых лунок, а связывание с антигеном, иммобилизованным на планшете.

    Останавливается протекание реакции с применением специализированных устройств, далее каждая лунка подвергается процессу фотометрирования, за которым следует сравнительная характеристика полученного результата с проведенными ранее контрольными пробами.

    Если обнаруживается повышение оптической плотности в пробе, то завышена и концентрация специфических антител в исследуемом результате.

    Проведение исследования не занимает много времени, от забора крови до получения результата проходит от 1 до 10 дней, в зависимости от диагностических мероприятий.

    На полученном пациентом бланке-результате диагностики указывается отрицательный либо положительный результат на определенные классы иммуноглобулинов, так же указывается количественный показатель различных классов антител.

    Возможны различные интерпретации результатов:

    1. IgM (+) (IgA, IgG не определялись) – процесс выздоровления;
    2. IgM (-) ;IgG (+), IgA (+) – хроническая инфекционная патология;
    3. IgM, IgG, IgA (все с – значением) – отсутствие защитных механизмов к инфекциям;
    4. IgG (+/-) и IgA (+/-), IgM (+) – острый процесс;
    5. IgM (-), IgA(-),IgG(+) – постинфекционный иммунитет;
    6. IgM, IgG, IgA (+) – хроническая патология в стадии обострения.

    Так, например, если были обнаружены IgG и IgM, то возможно у пациента одно из таких заболеваний:

    • вирусный гепатит;
    • цитомегаловирус;
    • герпес;
    • ветряная оспа;
    • хламидиозом;
    • стафилококковая или стрептококковая инфекция.

    Иммуноферментный анализ часто назначается при гормональных исследованиях, нормы показаны в таблице:

    Название гормона Пол Норма
    1 тиреоглобулин м/ж До 70 МЕ/мл
    2 тироксин м/ж 64-146 нмоль/л
    3 трийодтиронин м/ж 1,8-2,8 нмоль/л
    4 Свободный тироксин м/ж 11-25 пмоль/л
    5 Свободный трийодритонин м/ж 4,49-9,3 пмоль/л
    6 Тестостерон, дегидротестостерон Ж 0,5-10 мЕд/л

    ИФА анализ — это такое диагностическое исследование, которое позволяет оценить вероятность образования онкологических патологий. Однако интерпретация результатов проводится только лечащим врачом.

    ИФА подходит для выявления разнообразных форм половых инфекций, в том числе сифилиса, часто используется и для скрининга беременных.

    Благодаря этому исследованию можно узнать, как давно произошло заражение и стадия заболевания на момент исследования:

    • иммуноглобулины М говорят о длительности заболевания;
    • IgA — пациент заразился более 30 дней назад;
    • IgG обнаруживается на «пике» заболеваний, или же в тот момент, когда терапия окончилось недавно.

    В процессе исследования лунки на планшете с отрицательным показателем остаются бесцветные, а положительные окрашиваются в ярко-желтый цвет. Если цвет положительных лунок не совпадает с цветом контроля, то результат считается сомнительным и необходимо повторное исследование.

    Иммуноферментный анализ — это первая ступень в диагностике ВИЧ. Проводить анализ нельзя сразу же после предполагаемого заражения необходимо дождаться окончания инкубационного периода (от 14 дней до 6 месяцев).

    В ходе анализа определяются антитела к ВИЧ-1 и ВИЧ-2, происходит поиск АТ класса G, который обычно появляется на более поздних сроках и АТ класса А и М, они могут быть определены на ранних стадиях (во время инкубационного периода).

    При получении положительных проб далее следует:

    • если первый тест дал положительный результат, то кровь вновь перепроверяется другим лаборантом;
    • повторный положительный результат предполагает пересдачу материала,
    • при повторении результата, пациенту назначается иммуноблотинг.

    Окончательный вывод о наличии ВИЧ-инфекции выдается только после результата иммуноблотинга.

    ИФА также применяется в качестве диагностического исследования туберкулеза, но если у пациента даже и были выявлены антитела к данной патологии, то это не всегда подтверждает наличие у него туберкулеза, поэтому ИФА часто применяется качестве уточняющей методики, либо же для диагностики скрытой внелегочной формы.

    ИФА анализ — это такое исследование, позволяющее обнаружить у пациента заражения паразитами и простейшими, в ходе диагностики можно определить даже время заражения.

    Цитомегаловирус IgM обнаруживаются через 30-45 дней после заражения, либо во время реактивации инфекции в течение 4-6 месяцев

    источник

    Иммуноферментный анализ крови (ИФА) проводится для комплексной оценки защитных функций организма. В ходе проведения исследования определяется количество и свойства иммунных клеток, присутствие необходимых антител. ИФА анализ крови проводится для диагностики инфекционных, гематологических, аутоиммунных заболеваний, первичных и вторичных иммунодефицитов. Рассмотрим, что собой представляет анализ крови методом ИФА, и какие показания существуют для проведения данного исследования.

    Анализ крови методом ИФА является лабораторным методом, с помощью которого в пробе крови определяют антитела или антигены. Данное исследование используется для выявления уровня иммуноглобулинов, иммунологических комплексов, гормонов.

    Для назначения ИФА анализа крови существуют следующие показания:

    • диагностика инфекций, которые передаются половым путем – уреаплазма, микоплазма, хламидиоз, трихомонада, сифилис;
    • диагностирование вирусных заболеваний – цитомегаловирус, герпес, гепатиты, Эпштейн-Барр вирус;
    • определение уровня гормонов;
    • диагностика онкологических заболеваний;
    • определение иммунодефицита;
    • диагностирование аллергий;
    • предоперационное комплексное обследование перед пересадкой органов;
    • оценка эффективности терапии.

    Принцип действия метода иммуноферментного анализа основан на определении в крови специфических белков-антител – иммуноглобулинов. Иммуноглобулины вырабатываются иммунной системой человека при проникновении в организм антигенов (чужеродных микроорганизмов). Такие иммунные молекулы связываются с множеством инфекционных возбудителей в организме и нейтрализуют их.

    Иммуноглобулины обладают важной характеристикой – специфичностью. Благодаря этому они могут связываться с определенным антигеном, образуя комплекс антиген-антитело. Во время проведения ИФА анализа крови именно этот комплекс определяют качественно и количественно.

    Различают иммуноглобулины пяти классов. Но обычно определяют три класса – иммуноглобулины A, M, G. Данные антитела накапливаются в организме в разное время от момента инфицирования.

    • Иммуноглобулины класса М (IgM) появляются в крови самыми первыми на пятые сутки от момента заражения. Они находятся в организме на протяжении 5–6 недель, затем исчезают из кровотока. Антитела IgM указывают на острый период заболевания или обострение болезни при ее хроническом течении.
    • Примерно через 3–4 недели со времени заражения в крови появляются иммуноглобулины класса G (IgG). Они могут существовать в крови человека несколько месяцев или даже лет. Согласно расшифровке ИФА анализа крови, если в двух пробах крови, взятых последовательно через две недели, увеличено количество иммуноглобулинов IgG, говорят о текущей инфекции или реинфекции – повторном заражении той же инфекцией.
    • Иммуноглобулины класса А (IgA) можно выявить данным методом исследования через 2–4 недели после заражения или обострения инфекционной болезни. Из них только 20% циркулирует в крови, остальные находятся в секрете слизистых оболочек. Антитела IgA исчезают из кровотока через 2–8 недель после уничтожения инфекционных агентов. Исчезновение данных иммуноглобулинов означает излечение от инфекции. Если после окончания болезни определено присутствие в крови антител IgA, значит, заболевание перешло в хроническую стадию.

    Для проведения анализа крови методом ИФА чаще всего используют кровь человека. Но исследовать также можно содержимое стекловидного тела, спинномозговую жидкость, околоплодные воды.

    Проба крови для исследования берется у пациента из локтевой вены. Сдавать кровь рекомендуется натощак (с момента последнего приема пищи должно пройти не меньше 12 часов). Необходимо сообщить врачу, если пациент принимает лекарственные препараты, так как некоторые из них могут изменить результат анализа. На достоверность результатов исследования влияет прием алкоголя и наркотиков.

    В бланке результата данного анализа указывается положительный (+) или отрицательный (-) результат определения каждого класса иммуноглобулинов.

    Рассмотрим интерпретацию возможной расшифровки ИФА анализа крови.

    • Отрицательный результат IgM, IgG, IgA – отсутствие иммунитета к инфекции.
    • Отрицательный результат IgM, IgA и положительный результат IgG – постинфекционный или поствакцинальный иммунитет.
    • Отрицательный или положительный результат IgG, IgA и положительный результат IgM – острая инфекция.
    • Положительный результат IgM, IgG, IgA – обострение хронического инфекционного заболевания.
    • Отрицательный результат IgM и отрицательный или положительный результат IgG, IgA – хроническая инфекция.
    • Отрицательный результат IgM и не определяются IgG, IgA – выздоровление.

    Анализ крови методом ИФА имеет много достоинств. Можно выделить основные из них:

    • относительно высокая точность (чувствительность);
    • возможность проведения ранней диагностики;
    • возможность отслеживания динамики инфекционного процесса;
    • высокий уровень унификации, что позволяет проводить массовые обследования;
    • небольшой промежуток времени, необходимый для получения результата анализа;
    • удобство в работе;
    • автоматизация всех этапов анализа;
    • относительно небольшая стоимость.

    Недостатком метода ИФА является то, что иногда он дает ложноотрицательные или ложноположительные результаты. Кроме технических ошибок при проведении исследования, причиной ложных результатов может быть ревматоидный фактор у пациента, наличие у него хронических болезней (при которых вырабатываются антитела), нарушения обмена веществ, прием некоторых лекарственных препаратов.

    С помощью данного метода исследования крови определяют наличие в организме следующих паразитарных процессов:

    • аскаридоз;
    • трихинеллез – анализ проводят несколько раз, максимальный уровень антител определяется на 4–12 неделе после заражения;
    • цистицеркоз;
    • тениоз;
    • фасциолез – антитела определяются в острой стадии заболевания;
    • описторхоз – проводят дифференциальную диагностику между хронической и острой формой болезни;
    • лямблиоз;
    • висцеральный и кожный лейшманиоз;
    • амебиаз;
    • токсоплазмоз.

    ИФА анализ крови на паразитов используется для выявления антигенов (паразитов и продуктов их жизнедеятельности) и антител (иммуноглобулинов). Иммуноглобулины вырабатываются в организме как антитела к антигенам. Специфичность данного метода при определении паразитов составляет 90%. С помощью этого анализа можно определить вид паразитов, их количество, и благодаря уровню антител проследить динамику развития процессов.

    источник

    Иммуноферментный анализ крови является распространенным методом выявления различных патологий. Результат анализа крови, расшифровка ИФА которого была интерпретирована врачом лабораторной диагностики, является достоверным в большинстве случаев.

    ИФА — современный диагностический метод, который применяется для диагностики инфекций, гормональных и иммунных нарушений, онкологических заболеваний в лабораторных условиях. Метод позволяет выявить антитела к инфекции уже на ранних сроках заболевания. Данный метод относится к непрямым диагностическим методам, так как он выявляет иммунный ответ организма. Среди преимуществ ИФА в сравнении с другими методами диагностики можно выделить высокий уровень технологичности, что уменьшает вероятность ошибок. Метод является высокочувствительным и применяется для диагностики заболеваний как у детей, так и у взрослых. Существует обширное количество различных модификаций ИФА.

    Метод ИФА основывается на специфичности иммунохимических реакций, а также физико-химических закономерностях реакций комплексов антиген-антитело. Реакции производятся с участием специфических ферментов, которые являются метками для определения антител. В результате иммунохимической реакции строго определенные антитела связываются с соответствующими антигенами. Исследование крови методом иммуноферментного анализа почти исключает возможность получения ложноположительного результата. О положительном или отрицательном результате специалисты лабораторной диагностики судят исходя из того, произошло ли окрашивание раствора в ходе ферментативной индикации комплекса антиген-антитело. Если раствор окрасился, то произошло взаимодействие антигена с антителом, результат ИФА положителен.

    Исследование методом иммуноферментного анализа позволяет:

    • выявить ряд инфекционных заболеваний;
    • диагностировать аутоиммунные заболевания;
    • выявить наличие онкологии;
    • определить гормональные нарушения;
    • произвести иные исследования.

    Анализ крови методом ИФА позволяет определить наличие следующих инфекций:

    • вирусные гепатиты;
    • ВИЧ;
    • цитомегаловирус;
    • вирус Эпштейн-Барра;
    • герпетические инфекции;
    • краснуха;
    • боррелиоз;
    • паразитарные инфекции;
    • ЗППП;
    • иные инфекции.

    Метод применяется для выявления антигенов возбудителей ряда инфекций, а также для выявления антител различных классов. Большую популярность метод ИФА получил для выявления сифилиса, ВИЧ, вирусных гепатитов. Определять наличие и уровень антител в сыворотке крови с целью первичной диагностики ИППП не рекомендуется. В данном случае наличие антител в крови может быть лишь признаком того, что организм пациента контактировал с возбудителем инфекции в прошлом.

    Диагностика различных аутоиммунных заболеваний методом ИФА производится посредством исследования:

    • антинуклеарных тел;
    • антител к двухспиральной ДНК;
    • антител к растворимым нуклеарным антигенам (ENA скрин);
    • антикардиолипиновых антител;
    • IgG к цитрулиновому пептиду;
    • ревматоидного фактора;
    • С-реактивного белка;
    • аутоантител к цитоплазматическим антигенам нейтрофилов (ANCA скрин).

    Специфические иммунные комплексы характерны для определенных аутоиммунных заболеваний. Например, антитела двуспиральной ДНК являются характерными для такого заболевания, как системная красная волчанка.

    Определение онкологических заболеваний производится при иммуноферментном исследовании сыворотки крови на специфические онкомаркеры, такие как ПСА, СА-125.

    ПСА свидетельствует о наличии аденомы простаты и рака простаты. СА-125 — это онкомаркер злокачественной опухоли яичника. Значение повышается и при раковых опухолях матки, молочных желез, эндометрия.

    Чтобы обеспечить максимальную точность результатов, нужно следовать определенным правилам подготовки к исследованию. Анализ для лабораторной диагностики методом ИФА, как правило, сдается утром из локтевой вены. Сдавать кровь необходимо строго натощак. Кроме этого простого предписания, следует выполнять следующие рекомендации по подготовке:

    • за 24 часа до исследования необходимо исключить прием алкоголя и курение;
    • избегать тяжелых физических нагрузок;
    • пребывать в спокойном состоянии;
    • избегать нервного напряжения;
    • сдавать кровь на ИФА не ранее, чем через 10 дней после отмены лекарств;
    • предупредить врача о приеме необходимых лекарств.

    Кроме того, за несколько дней до сдачи анализа рекомендуется придерживаться диеты. При этом из рациона исключить жирные продукты, жареную пищу. Перед анализом на вирусные гепатиты из рациона исключить не только жирное и жареное, но и цитрусовые, а также оранжевые овощи.

    Следует отметить, что на результаты определенного спектра гормональных исследований влияет такой фактор, как фаза менструального цикла. Необходимость сдавать анализ в ту или иную фазу менструального цикла следует заранее обговорить с лечащим врачом. В противном случае можно получить неожиданные показатели. Так, например, нормальный уровень лютеинизирующего полового гормона у женщин варьируется в зависимости от дня цикла:

    • 1-12 день — 2-14 мЕд/л;
    • 12-14 день — 24-150 мЕд/л;
    • с 15 дня до начала нового цикла — 2-17 мЕд/л.

    Анализ позволяет установить наличие в организме антител различных классов. Существуют антитела 3 классов:

    Выработка этих антител происходит на различных стадиях заболевания. Самыми первыми после заражения в организме начинают вырабатываться антитела IgM. Их наличие является показателем болезни в любом случае. В организме здорового человека этот класс антител отсутствует.

    Эти иммуноглобулины присутствуют в сыворотке крови около 5-6 недель.

    Иммуноглобулины класса G, присутствующие в крови, говорят о том, что человек либо уже перенес заболевание, либо является носителем инфекции. Эти антитела начинают вырабатываться после антител класса М, при большинстве заболеваний на 3-4 неделю после заражения. Их присутствие в организме возможно в течение нескольких лет. А при некоторых болезнях (например, сифилисе) IgG присутствуют в крови пожизненно.

    Если в организме присутствуют IgA, необходимо как можно интенсивнее бороться с инфекцией. Антитела этого класса появляются лишь в случае хронического инфекционного заболевания. Исчезновение IgA говорит об уничтожении инфекции.

    Если анализ ИФА производится в детском возрасте до 1,5 лет, должна учитываться следующая особенность: кровь ребенка содержит IgG матери к различным инфекциям. Это совсем не означает, что ребенок болен. В таком случае это скорее норма. Наличие IgM является свидетельством внутриутробной инфекции либо инфекции, приобретенной уже после рождения. IgM матери не могут проникнуть в организм ребенка через плаценту.

    В таблице представлены возможные комбинации наличия или отсутствия в организме антител 3 классов и их интерпретации.

    Таблица 1
    IgM IgG IgA Расшифровка
    Иммунитет к инфекции отсутствует
    + Имеется поствакцинальный или постинфекционный иммунитет
    + -/+ -/+ Острая инфекция
    + + + Обострение хронической инфекции
    +/- +/- Наличие хронической инфекции

    При расшифровке анализов (+) свидетельствует о положительном результате, а (-) говорит об обратном, то есть об отрицательном. Результат, показывающий наличие или отсутствие какого-либо вещества в организме, называется качественным. Он может быть дополнен количественным. Количественный результат отображает количественное содержание различных веществ в организме.

    Стоит отметить, что тест-системы имеют собственные, определенные изготовителем, референтные значения, которые характеризуют показатели. Превышения референтных значений, как правило, означают наличие тех или иных патологий в организме исследуемого.

    После получения результатов ИФА расшифровку полученных значений должен производить лечащий врач. Только он сможет произвести правильную оценку полученных результатов и определить стадию заболевания.

    источник

    Среди методов анализа крови (ссылка на 3-ю статью в этом файле), позволяющих оценить способность организма противостоять инфекционным болезням и показывающих фазу болезни, важное место занимает иммуноферментный анализ (ИФА). Проведение этого исследования позволяет всесторонне оценить деятельность защитной функции крови и выявить состояние иммунодефицита при инфекционных патологиях, также заболеваниях крови, аутоиммунных процессах, гормональных проблемах.

    Каким же образом удается охватить столько целей в одном анализе, и какие имеются показания для его проведения? Попробуем разобраться.

    Это лабораторное исследование, которое позволяет определять наличие специфических антител (защитных факторов крови белковой природы) к определенным антигенам (болезнетворным агентам). Среди антител первостепенное значение имеют иммуноглобулины, которые могут существовать в виде иммунокомплексов.

    Иммуноглобулины вырабатываются вследствие сложных нейрогуморальных реакций иммунитета человека, возникающих как ответная реакция на внедрение чужеродных антигенов. На каждый вид болезнетворного агента вырабатываются свои специфические антитела. Действуют они путем «связывания» антигена или патологического микроорганизма, образую комплексное соединение «антиген-антитело» с последующей нейтрализацией, ферментативным лизисом, реакциями фагоцитоза и выводом из организма.

    Обратите внимание: именно по наличию определенных комплексов методом ИФА определяется вид возбудителя или имеющегося у больного вредного вещества.

    Узнать базовые принципы функционирования иммунитет человека вы сможете, посмотрев данный видео обзор:

    Открыто и изучено 5 основных классов иммуноглобулинов – IgА, IgM, IgG, IgD, IgE. роль остальных еще до конца не выяснена и она находятся в стадии научного исследования.

    Обратите внимание: наиболее важное в практической медицине значение имеют иммуноглобулины классов – А, М и G. Информативность определения основана на разных временных промежутках их появления, максимума и исчезновения.

    Рассмотрим этот вопрос более детально.

    Основная задача иммуноглобулина А (IgA) заключается в защитных функциях слизистых оболочек дыхательных путей, желудочно-кишечного тракта и мочевыделительной системы. При остром начале заболевания выявить их невозможно. Появляются эти защитные комплексы лишь со 2 недели начала заболевания, иногда позже. Основная масса иммуноглобулина А сосредоточена в слизистых тканях. Ориентировочно около 80%. Остальные антитела циркулируют в крови. Основная функция – обезвреживание и уничтожение микроорганизмов. После стихания острых проявлений заболевания количество этих иммуноглобулинов начинает уменьшаться и полностью уходит на сроке до 8 недель после начала болезни. Если IgA обнаруживаются в более поздние сроки, то это свидетельствует о хронизации процесса.

    Главными и первыми маркерами острой фазы развивающейся патологии являются иммуноглобулины класса М (IgM). Обнаруживаются они к 5 суткам начала недомогания. Определить их наличие в крови можно около 6 недель. Затем они начинают быстро исчезать.

    Остаточный иммунный ответ характеризует наличие в крови иммуноглобулинов класса G (IgG). Появление этих факторов в крови обнаруживается примерно через месяц после начала болезни. В дальнейшем они могут определяться в течение многих месяцев, лет и даже всю жизнь, выполняя защитную функцию от возврата (рецидива) болезни, а в некоторых случаях делая невозможным вторичное развитие патологии. Если же количество иммуноглобулина G начало вновь расти, то можно подозревать повторное заражение. Подобный вывод можно сделать путем проведения двух-трех проб, сделанных с промежутком в 2 недели.

    Иммуноглобулин Е (IgE) используется в практике паразитологии.

    Иммуноглобулин D (IgD) располагается на B-лимфоцитах, находится в небольшой концентрации у здоровых людей. После 10 года жизни достигает максимальных значений. Количество иммуноглобулина D увеличивается при беременности, у больных системными заболеваниями соединительной ткани, бронхиальной астмой, заболеваниями, вызванные иммунодефицитным состоянием.

    Определение антител к наличию в организме болезнетворных микробов, вызывающих:

    Имеется рост количества иммуноглобулинов и при глистных инвазиях.

    Диагностика проводится для обнаружения:

    • герпетических заболеваний;
    • группы вирусных гепатитов;
    • вируса Эпштейна-Барра;
    • цитомегоаловируса.

    При помощи ИФА можно определять наличие антител к 600 видов аллергенов, обнаруживать состояние иммунодефицита, проводить комплексное обследование перед трансплантологическими операциями, проводить комплексный анализ на предмет эффективности лечения.

    ИФА является дополнительным методом обнаружения онкологических клеток.

    Для иммуноферментного анализа в большинстве случаев используется кровь пациентов, иногда производят забор ткани стекловидного тела, жидкости спинномозгового канала, околоплодных вод.

    Кровь набирают через инъекционную иглу в шприц из локтевой вены. Исследование проводят натощак. Следует помнить, что прием некоторых медицинских препаратов может влиять на результат анализа. Перед сдачей крови необходимо воздержаться от курения, приема алкоголя. Исказить результаты может прием наркотических веществ.

    В случае отрицательных значений иммуноглобулинов IgM, IgG, IgA можно говорить об отсутствии заболевания или его начальной фазе, также результат с минусами возможен при полном выздоровлении по прошествии значительного количества времени.

    Если IgA и IgM не обнаружены, а IgG проявляется положительно, то по всей вероятности речь идет о сформированном иммунитете после инфекционного заболевания, или после прививки.

    В случае высокого титра IgM при отрицательных значениях IgG, IgA можно делать вывод о наличии остро протекающего инфекционного заболевания.

    Одновременные положительные значения результатов иммуноглобулинов – IgA, IgM, IgG характерны для острой фазы рецидива имеющегося хронического заболевания.

    Для хронической инфекции, находящейся в фазе стихания процесса (ремиссии) ИФА показывает отрицательные значения иммуноглобулина M (IgM), при этом результат иммуноглобулинов G (IgG) и A (IgA) будет положительным.

    Главными достоинствами метода ИФА являются:

    • невысокая себестоимость анализа;
    • диагностическая специфичность, точность;
    • динамический контроль (повтор анализа для определения эффективности лечения и стадий заболевания);
    • возможность проведения массовых обследований в очагах инфекции;
    • скорость получения результата;
    • относительная простота анализа;
    • возможность использования информационных технологий в обработке;
    • безопасность и безболезненность для пациента.

    Главным отрицательным моментом исследования является возможность получения ложноотрицательных и ложноположительных данных. Причиной недоразумений могут стать технические недочеты, прием медикаментов, который может исказить картину.

    Обратите внимание: фальсифицировать результат анализа может нарушение обменных процессов в организме. Осторожность в выводах надо соблюдать при сочетании нескольких хронических процессов у больного.

    Возможность применения ИФА в диагностике паразитарных заболеваний определяется специфическим иммуноглобулином E (IgE), который имеет тенденцию к повышению именно при этой группе заболеваний. Кроме того, иммуноглобулин Е является маркером атопических реакций связанных с аллергическими процессами. В крови он находится в незначительных количествах. Основная его локализация – слизистые оболочки, базофилы, маркофаги. Главная функция этого белкового комплекса заключается в защите слизистых оболочек организма. Но в тоже время он является участником иммунных реакций, направленных против паразитов. Активацией IgE «заведуют» эозинофилы и макрофаги. Это важный факт в сопоставлении данных анализа при установлении диагноза болезни.

    ИФА применяется для обнаружения:

    • круглых гельминтов (аскарид, остриц);
    • острой и хронической формы описторхоза;
    • трихинеллеза;
    • наличия лямблий (как дополнительный анализ);
    • форм лейшманиоза;
    • амебиаза;
    • содержания токсоплазм;

    Важно: иммуноглобулины вырабатываются в организме в качестве антител к определенным антигенам. Поэтому даже при самой высокой специфичности анализа не исключаются погрешности в точности. При паразитарных заболеваниях процент вероятности составляет около 90%.

    В заключение необходимо отметить, что современная иммунология постоянно находится в стадии развития, поиска новых методов диагностики и лечения заболеваний.

    Степаненко Владимир, хирург

    62,218 просмотров всего, 1 просмотров сегодня

    источник

    С прогрессом современной медицины удается проводить более углубленную диагностику при подозрении на те или иные патологии у пациента. Одним из информативных методов лабораторного исследования стал ИФА анализ, который проводят методом забора венозной крови. То есть для пациента ничего в целом не меняется. А вот лаборант-анализатор ИФА проводит сложную технику исследования забранного биоматериала. В том, что такое анализы ИФА и, каковы тонкости применения ИФА метода в качестве диагностического, разбираемся в материале ниже.

    Иммуноферментный анализ крови — это один из способов лабораторной диагностики, который основан исключительно на реакции под названием «антиген-антитело». Здесь стоит уяснить, что антиген — это чужеродное белковое соединение (молекула), попавшее в организм человека с паразитарной, вирусной или другой инфекцией. То есть, попросту вредитель. В свою очередь антитело — это иммунная клетка (иммуноглобулин), встающая на защиту организма человека при обнаружении в нем чужеродных молекул.

    Выработку антител провоцируют сами же антигены, проникшие в организм человека. При вступлении в «битву» за здоровье организма антитела как бы помечают собой антигены, что при исследовании крови и видит лаборант. То есть в забранном биоматериале можно отследить не только наличие инфекции, но и ее следы уже после того, как организм полностью выздоровел.

    При проведении анализа на ИФА лаборант может видеть такие иммуноглобулины к антигенам:

    • Иммуноглобулины М (в результатах значатся как IgM). Свидетельствуют о том, что инфекционный процесс в организме только набирает свою силу. То есть инфицирование произошло совсем недавно;
    • Иммуноглобулины G (значатся как IgG). Способствуют уничтожению антигенов через несколько дней после внедрения инфекции в организм человека. Иммуноглобулины G могут находиться в организме пациента достаточно долго, формируя иммунитет к определенному вирусу;
    • Иммуноглобулины Е (значатся как IgЕ). Свидетельствуют о паразитарных инфекциях в организме. Он же говорит и об атопических реакциях при аллергии. При этом стоит знать, что проведение анализа ИФА дает результат с точностью 90% на паразитарные инфекции;
    • Иммуноглобулины А (значатся как IgА). Максимально выступают на защиту слизистых оболочек пациента.

    Таким образом, назначая иммуноферментный анализ крови пациенту, лечащий врач может отследить давность инфекции, степень ее прогрессирования или выявить наличие иммунитета к той или иной инфекции.

    Процесс ИФА диагностики выглядит таким образом:

    • Забранная венозная кровь приводится в лаборатории в состояние сыворотки крови;
    • Затем лаборант использует специальный лоток с ячейками, в каждой из которых уже имеются все необходимые антигены. Достаточно просто капнуть в каждую ячейку сыворотку крови и отследить реакцию иммуноглобулинов (антител) на антигены. О наличии «нужной» реакции свидетельствует изменение цвета исследуемого материала. В дальнейшем лаборант изучает оптическую плотность исследуемой среды.

    В целом иммуноферментный анализ на паразитов помогает выявить такие паразитарные патологии:

    • Аскаридоз и энтеробиоз (аскариды и острицы);
    • Трихинеллез;
    • Описторхоз в острой и хронической формах;
    • Лямблиоз;
    • Амебиоз;
    • Токсоплазмоз;
    • Лейшманиоз в любой форме.

    Важно: иммуноферментный анализ бывает как качественным, так и количественным. В первом случае лаборант лишь подтверждает или опровергает наличие искомого вещества в крови. Во втором случае в результате анализа указывают его концентрацию в организме пациента.

    При всех достоинствах такого способа диагностики стоит понимать, что иммуноферментный анализ крови — не способ нахождения причины болезни пациента, а лишь метод подтверждения предполагаемого лечащим врачом диагноза. А ввиду того, что исследование является достаточно недешевым, использовать его нужно с умом. При этом результаты исследования должен трактовать только квалифицированный специалист.

    Важно понимать, что выявление паразитов через анализ крови требует определенной подготовки от пациента. Так, перед сдачей крови необходимо сделать следующее:

    • За сутки до забора биоматериала нужно исключить из рациона жирную пищу, алкоголь и копчености;
    • Кровь на иммуноферментный анализ крови на паразитов и другие инфекции следует сдавать с утра натощак;
    • Перед сдачей крови запрещено курить минимум за 3-4 часа;
    • В день забора крови желательно не нервничать и не прибегать к усиленным физическим нагрузкам.

    Соблюдение этих правил позволит избежать ложноположительного результата на антитела к паразитам.

    После того как мы разобрали аббревиатуру ИФА и что это такое выяснили, стоит перейти к трактовке результатов. Здесь важно понимать, что если анализ проводили качественный, то результат будет лишь положительным или отрицательным. То есть диагностика либо подтверждает подозрения доктора относительно определенного диагноза, либо опровергает их. В этом случае в бланке будут стоять символы «+» или «-» соответственно.

    Важно: отрицательный результат анализа не всегда свидетельствует об отсутствии инфекции. Дело в том, что антитела к антигенам могут формироваться в течение 14 дней после инфицирования и вполне вероятно, что они еще не сформированы.

    В случае же если проводится количественный анализ, то здесь определяется вид антител, их количество и стадия активности. В частности при такой диагностике определяют антитела (иммуноглобулины) IgG и IgM, которые формируются в разные периоды прогрессирования инфекции. Самыми распространенными вариантами результатов в этом случае являются:

    • Повышенный IgМ и полное отсутствие IgG. Такая картина свидетельствует о недавнем инфицировании и острой фазе течения патологии.
    • Повышенная активность иммуноглобулинов обоих видов (IgМ и IgG). Говорит о давнем и хроническом протекании инфекционного процесса.
    • Активность IgG и полное отсутствие IgМ. Инфицирование было не менее полугода назад и сейчас вирус пребывает в затяжной хронической стадии.
    • Отсутствие антител IgG и IgA. Результат не определен.
    • Отсутствие антител IgM, IgA и IgG. Свидетельствует об отсутствии иммунитета к определенной инфекции.
    • Активность антител IgG, IgM и IgA говорит об обострении хронического процесса.

    Помимо выявления типов антител лаборант в специальной графе бланка указывает и их количество на объем крови. Помните, разобравшись в том, что такое метод ИФА, не трактуйте результаты самостоятельно. Полученные результаты с точностью может интерпретировать только лечащий врач в зависимости от предполагаемого диагноза, выстраиваемого на основании клинической картины у пациента.

    источник