Классификация методов выявления инфекции Нelicobacter pylori представлена в таблице.
Инвазивные методы | Неинвазивные методы |
|
|
Инвазивные методы требуют проведения эндоскопического исследования (ФЭГДС) с биопсией и дальнейшим изучением гастробиоптатов. Неинвазивные методы эндоскопического исследования не требуют.
Гистологический метод исследования биоптатов СОЖ — микроскопия окрашенных различными способами (гематоксилин-эозином, по Гимзе, толуидиновым синим, по Вартину-Старри) мазков-отпечатков гастробиоптатов. Этот метод позволяет определить выраженность воспаления СОЖ, наличие атрофии, кишечной метаплазии и наличие (степень обсемененности) НР.
Быстрый уреазный тест (Хелпил-тест) — определение HР по уреазной активности микроорганизма в биоптатах СОЖ. Helicobacter pylori продуцирует уреазу, под влиянием которой происходит гидролиз мочевины с образованием иона аммония. При этом увеличивается рН среды, что можно зафиксировать с помощью изменения цвета индикатора. Гастробиоптаты помещают в раствор, содержащий мочевину и индикатор, изменение цвета которого косвенно свидетельствует о наличии HР.
Молекулярно-генетический метод исследования биоптатов СОЖ с помощью ПЦР позволяет выделять высокопатогенные и низкопатогенные штаммы HР.
Бактериологический метод исследования биоптатов СОЖ: культуральное исследование и определение чувствительности HР к антибиотикам перед терапией первой линии важно проводить в регионах с высокой резистентностью к кларитромицину (более 15-20%), если планируется использовать стандартную трехкомпонентную эрадикационную терапию, одним из компонентов которой является кларитромицин. Бактериологический метод с определением чувствительности к антибиотикам также необходимо применять при неэффективности эрадикационной терапии второй линии.
ИФА (особенно с применением моноклональных антител) выявления антигена HР в кале является высокочувствительным и специфическим методом как для первичной диагностики инфекции НР, так и для контроля результата лечения.
Серологический метод (ИФА) — определение антител IgG к HР в сыворотке крови — простой и доступный метод первичного скрининга инфекции. Учитывая, что антитела к HР сохраняются в течение многих месяцев после эрадикации микроорганизма, использование серологического метода не рекомендуется для оценки эффективности проведения эрадикационной терапии.
Уреазный дыхательный тест — исследование состава выдыхаемого воздуха после приема раствора мочевины, меченной изотопом углерода (13С). При наличие в желудке обследуемого HР мочевина под действием уреазы, продуцируемой бактерией, подвергается гидролизу до Nh5+ и HCO3- с последующим образованием из HCO3- углекислого газа, который, попадая в кровоток, затем выделяется через легкие и может быть определен спектрометром в выдыхаемом воздухе. Этот тест может использоваться как для первичной диагностики HР, так и для оценки эффективности эрадикации.
На фоне инфекции Helicobacter pylori развиваются такие воспалительные заболевания желудочно-кишечного тракта, как язва желудка или двенадцатиперстной кишки, эрозивный гастрит, гастродуоденит.
- Гистологический метод исследования биоптатов СОЖ — в норме патологические изменения не определяются.
- Быстрый уреазный тест (Хелпил-тест) — в норме тест отрицательный.
- Молекулярно-генетический метод исследования биоптатов СОЖ с помощью ПЦР — в норме результат отрицательный.
- Бактериологический метод исследования биоптатов СОЖ — в норме результат отрицательный.
- ИФА (особенно с применением моноклональных антител) выявления антигена HР в кале — в норме результат отрицательный.
- Серологический метод (ИФА) — в норме результат отрицательный.
- Уреазный дыхательный тест — в норме тест отрицательный.
Подготовка к исследованию: Не рекомендуется принимать ингибиторы протонной помпы, препараты висмута, антациды и антибактериальные препараты за 14 дней до проведения анализа Исследуемый материал: Кал
Helicobacter pylori — бактерия в форме спирали, которая поражает стенку желудка и двенадцатиперстной кишки, вызывая атрофический гастрит, язвенную болезнь и злокачественные образования. Около 50-60% населения инфицировано Helicobacter pylori, обычно заражение происходит еще в детстве.Благодаря своей форме Helicobacter pylori способна повреждать защитный слой слизистой оболочки желудка. Бактерия продуцирует фермент уреаза, который способен нейтрализовать соляную кислоту желудка. Таким образом стенка желудка становится восприимчивой к повреждающему действию соляной кислоты и пепсина, что ведет к язвенной болезни желудка или двенадцатиперстной кишки.Helicobacter pylori может действовать непосредственно на клетки желудка, ослабляя защитный механизм и провоцируя воспаление слизистой. Helicobacter pylori способна усиливать секрецию соляной кислоты в желудке, хотя механизм этого процесса не изучен. Путь передачи инфекции — орально-фекальный и бытовой. Заражение обычно происходит от человека к человеку посредством близкого контакта (при поцелуях). Источником инфекции может быть слюна, вода.Часто инфекция может протекать латентно, не вызывая никаких симптомов.Язвенная болезнь двенадцатиперстной кишки практически в 100% случаев ассоциирована с Helicobacter pylori. Антибактериальная терапия, которая направлена на уничтожение бактерии, приводит к полному излечению от язвенной болезни.У 90% страдающих язвенной болезнью желудка обнаруживается Helicobacter pylori. Антибактериальное лечение приводит к рубцеванию язвы в 70-90% случаев. Тяжелое заболевание желудка — аденокарцинома — в 70-90% случаев вызвано инфицированием Helicobacter pylori.В кале инфицированного Helicobacter pylori можно обнаружить антиген бактерии. Через неделю после проявления симптомов активной инфекции количество бактерий в фекалиях сокращается, что снижает диагностическую ценность метода. Отсутствие антигена к хеликобактеру через 4 недели после проведенной терапии говорит об эрадикации Helicobacter pylori.
Данный анализ позволяет определить антиген Helicobacter pylori, возбудителя заболеваний желудка и двенадцатиперсной кишки. Анализ позволяет диагностировать хеликобактерную инфекцию.
Иммуно-ферментный анализ — ИФА
Информация, касающаяся референсных значений показателей, а также сам состав входящих в анализ показателей может несколько отличаться в зависимости от лаборатории!
В норме результат анализа отрицательный, то есть антиген Helicobacter pylori не обнаружен.
- Диагностика Helicobacter pylori
- Оценка эффективности антихеликобактерной терапии
- Инфицирование Helicobacter pylori
- Отсутствие инфицирования Helicobacter pylori.
- При сохранении клинических проявлений заболеваний, ассоциированных с Helicobacter pylori, рекомендуется повторить анализ через 2 недели.
ГАСТРИТ — воспаление слизистой оболочки желудка, сопровождающееся дистрофическими и некротическими изменениями.
Причины: нарушение качества и режима питания, химические и лекарственные препараты, инфекция, и прежде всего, Helicobacter pylori (HP). В этом случае отмечается лимфоцитарно-плазмоклеточная инфильтрация слизистой оболочки. На начальных стадиях процесс захватывает только антральный отдел желудка, что сохраняет его основные функции. В дальнейшем присоединяются нарушения регенерации и дифференцировки эпителиальных клеток, что приводит к атрофии слизистых и снижению секреторной функции желудка.
(ДИАГНОСТИКУ ХРОНИЧЕСКОГО ГАСТРИТА СМ. ВНИЗУ СТРАНИЦЫ)
Дополнительные исследования, помогающие уточнить диагноз
* — скидка 3% при оформлении заказа на сайте
Основные симптомы: хронический гастрит может протекать бессимптомно, наиболее характерны боли в верхних отделах живота и язвенно-подобный синдром (голодные эпигастральные боли, тошнота, чувство переполнения желудка, тревога, депрессия). Часто хронический гастрит В переходит в язвенную болезнь желудка и 12-перстной кишки. НР, образуя аммиак из мочевины, постоянно защелачивает антральный отдел желудка, что приводит к гиперсекреции гастрина и гиперпродукции соляной кислоты, которая воздействует на слизистую желудка, приводя к образованию эрозий и язвы, В то же время, НР выделяет особые токсические вещества, повреждающие слизистую оболочку желудка. Двойное повреждающее действие вызывает стимуляцию иммунной системы, истощая лимфоцитарное и фагоцитарное звенья иммунитета. Усиленная агрессия в сочетании со снижением защиты слизистых приводит к возникновению хронического гастрита и язвенной болезни, а также к раку и лимфоме желудка. Гастроскопия как диагностический прием с последующим исследованием биоптата для выявления НР может оказаться не достоверной из-за трудностей точного попадания в очаг инфицирования в измененной слизистой оболочки. Поэтому в настоящее время современная диагностика хронического гастрита В осуществляется с обязательным иммунологическим лабораторным исследованием инфекционного агента, т.е. выявления в кале антигена НР, в сыворотке крови — антител к НР, а также нарушений системного и местного иммунитета (иммунограмма и секреторный IgA). Кроме того, играет диагностическую роль и изменение микрофлоры кишечника.
Бактерия хеликобактер пилори (Helicobacter pylori) живет в клетках слизистых тканей желудка и двенадцатиперстной кишки. Некоторые разновидности этого «обитателя» ЖКТ при определенных обстоятельствах способны разрушать здоровые клетки человеческого организма и провоцировать заболевания. Эта бактерия – самая частая причина возникновения гастритов, доуденитов и энтероколитов. Правильное лечение подобных недугов зависит от точного выявления «виновника». Для определения наличия и количества хеликобактерии в организме используется несколько методов, одним из которых является анализ кала или, на языке медицинском, копрограмма.
Анализ кала – самый нетравматичный вариант исследования для пациента в отличие от взятия крови или биопсии. Поэтому он столь распространен в диагностике не только хеликобактерной инфекции, но и других заболеваний, застрагивающих ЖКТ. Предпочтительнее проводить прямой анализ кала на хеликобактер, так как он выявляет непосредственно саму бактерию или ее ДНК, а косвенные методики не столь достоверны.
Выделяют три типа прямого исследования каловых масс:
- ПЦР.
- Культуральный анализ.
- Иммунологический анализ.
Каждый из них имеет свои особенности, критерии нормы и недостатки.
Метод полимеразной цепной реакции (ПЦР) относится к молекулярно-генетическим способам диагностики и гарантирует максимальную информативность анализа. Суть такого исследования заключается в выявлении ДНК определенного болезнетворного мирокорганизма, многократном увеличении его численности и последующей идентификации вида.
Чтобы такой анализ был максимально достоверным, необходимо соблюсти несколько условий подготовки:
- не употреблять антибактериальный препараты и другие, схожие по действию медикаменты минимум за 3 суток до сдачи биологического материала;
- также за 3–4 дня до исследования нельзя использовать ректальные свечи, слабительные препараты и другие средства, влияющие на перистальтику ЖКТ;
- за этот же период времени до сдачи анализа не стоит принимать медикаменты и продукты питания, способные изменить окраску кала (препараты железа, свекла и т.д.);
- емкость для биологического материала должны быть стерильной, и доставить ее в лабораторию желательно как можно быстрее.
В среднем, результат ПЦР-исследования будет готов по истечению суток.
Этот вариант относится к микробиологическим методикам исследования и заключается в следующем: взятые биологический материал помещают в специальную среду, которая является благоприятной для роста тех или иных микроорганизмов. По истечению определенного периода времени, который для хеликобактер пилори составляет 7 дней и более, выращенную культуру тщательно изучают под микроскопом. Чтобы определить род микроорганизма с наибольшей вероятностью, ученые используют дополнительные методы: окрашивают культуру специальными красителями, проводят исследования на взаимодействие с другими веществами, изучают способность выявленных бактерий вступать в ту или иную биохимическую реакцию.
Культуральный анализ позволяет не только определить антиген хеликобактер пилори, но и выяснить, к каким антибактериальный препаратам эта бактерия чувствительна. Это обстоятельство становится крайне важным в случае длительного лечения хеликобактерной инфекции и невосприимчивости ее к ранее назначаемым препаратам. Однако к великому сожалению медиков, полученные результаты чувствительности к определенным антибиотикам не всегда совпадают с реальностью, и те медикаменты, которые «сработали» в пробирке, в жизни оказываются бесполезными или недостаточно эффективными.
Этот вариант исследования основан на способности антител соединяться с антигенами. Для этого на выбранные антитела наносятся специальные метки, которые, слипаясь с антигенами хеликобактерии, формируют целые комплексы. По их количеству и делается вывод о результатах анализа.
Особенность этого исследования – риск получения ложного результата при анализе, биологический материал для которого взят уже после эрадикации. Тест может быть ложноположительным, так как в кале еще могут быть обнаружены бактерии.
Иммунологический анализ в основном назначают до проведения инструментальных методов обследования, если клиническая картина соответствует хеликобактерной инфекции, и имеются характерные симптомы. В случае подозрения на ложноположительный или ложноотрицательный результат проводится дополнительные анализы другими способами.
К сожалению, в нашей стране распространенна практика повального использования антибактериальных препаратов. Это приводит к росту числа микроорганизмов, устойчивых даже к самым современным медикаментам, что ставит под угрозу здоровье и жизнь человека при серьезных недугах, требующих интенсивной антибиотикотерапии. Касается это и лечения хеликобактерной инфекции, ведь далеко не все штаммы этой бактерии опасны и не все требуют немедленного «изгнания».
ПЦР-анализ позволяет не только доподлинно выявить бактерию, но и определить ее штамм, что кардинально влияет на тактику лечения и необходимость терапии в целом.
Достоинства этого метода исследования:
- неинвазивность и простота забора биологического материала;
- высокая чувствительность, что сводит риск получения ложного результата к минимуму;
- максимальная информативность;
- безопасность;
- возможность выявления разных видов и штаммов хеликобактерии.
Именно поэтому специалисты все больше и чаще прибегают к методу полимеразной цепной реакции. Однако и недостатки у этого анализа имеются, и одним из самых главных является довольно высокая стоимость, особенно при необходимости генотипирования.
Анализ кала на антиген хеликобактер пилори может проводится разными способами и дополняться другими методами исследования, как лабораторными, так и инструментальными. Выбор конкретного варианта – прерогатива врача, который также расскажет, как правильно сдать биологический материал, оценит результаты исследования и в соответствии с ними подберет адекватную терапию.
источник
Современные диагностические методы позволяют узнать многое о состоянии здоровья человека по его биологическим жидкостям: крови, моче, фекалиям.
Исследуя кал, можно узнать, поселилась ли в организме бактерия Н.руlori, способная вызывать гастриты, язвы желудка и провоцировать онкопатологию.
Кал на наличие или отсутствие данного микроба можно изучать тремя способами: культуральным, иммунологическим, и наиболее достоверным и распространённым – методом полимеразно-цепной реакции (ПЦР).
Сама бактерия крайне редко встречается в фекалиях в своей привычной S-образной форме целиком. Толстый кишечник и каловые массы не являются благоприятной средой для микроорганизма, поэтому, попадая в них, она может принимать круглую кокковую форму, изредка встречаясь в испражнениях именно в таком виде.
Культуральный метод подразумевает под собой посев части исследуемого материала на питательную среду, в которой бактерия будет хорошо себя чувствовать и начнёт размножаться.
Происходит рост колоний, которые анализируются, окрашиваются специальными реактивами и исследуются под микроскопом. Данным способом в прямом смысле выращивают патогенные микробы с целью их дальнейшего изучения.
Кроме обнаружения самой бактерии, метод позволяет установить чувствительность патогена к тому или иному антибиотику. Если при добавлении лекарственного препарата рост колонии сохраняется – Н.руlori устойчива к антибактериальному средству, а если микроорганизмы погибают – имеет смысл назначить данный препарат пациенту с целью лечения и эрадикации, бактерии чувствительны к нему.
Культуральный способ весьма достоверен, но только в том случае, если во взятом биологическом материале обнаружена S-форма микроба. Метод имеет свои недостатки, и по этой причине не слишком распространён:
- Сроки исследования занимают от 6 до 12 дней
- Дорогостоящие среды для высевания хеликобактерий
- Специфические условия для сред, обеспечивающие рост колонии, которые сложно воспроизвести в лаборатории
- Редкая встречаемость S-образных форм бактерии в испражнениях, пригодных для роста в питательных условиях (кокковые формы не исследуют)
Фекалии пациента могут быть подвергнуты иммунологическому исследованию, которое позволяет выявить уже не сам микроорганизм, а его части – антигены.
Используются специальные антитела, направленные на обнаружение чужеродного антигена – частей бактерии, продуктов её жизнедеятельности, генетического материала.
Взаимодействуя с чужеродным агентом, антитела образуют специфический комплекс, который и определяется иммуно-ферментным анализом.
Данный способ изучения кала редко применяется в России, не многие лаборатории оснащены необходимыми реактивами и необходимыми тестами.
Но в перспективе возможно включение данного способа обнаружения хеликобактер в качестве скрининг-тестов: исследования широких групп населения на заражённость бактерией.
Это наиболее распространённый метод исследования фекалий на данную бактерию, обладающий высокой точностью.
Из биологического материала пациента выделяется участок ДНК бактерии, который затем многократно искусственно дублируется на специальном аппарате, так происходит восстановление гететического кода Н.руlori
Когда геномный фрагмент микроба достигает достаточных размеров, его сравнивают с эталонным и делают вывод об исследуемом микроорганизме: хеликобактер ли это или другой патоген.
Положительный ПЦР анализ означает наличие в организме человека хеликобактерной инфекции: бактерия присутствует в желудке, ее фрагменты ДНК обнаружены в кале и совпали с эталонными.
Достоинства ПЦР-метода:
- Высокая точность: даже незначительного количества генетического материала достаточно для исследования с большим процентом достоверности, приближающимся к 99%.
- Быстрота исследования. 2 суток достаточно для анализа, но существуют экспресс-способы, позволяющие установить диагноз за несколько часов.
- Безболезненность. Способ атравматичен, неинвазивен. Позволяет обследовать маленьких детей, пожилых, ослабленных пациентов, которым противопоказана ФГДС с биопсией и другие эндоскопические манипуляции.
- Для точного результата не обязательно обнаружение ДНК-фрагментов именно S или спиралевидных форм, части кокковых микробов (наиболее встречающихся в испражнениях) тоже подходят для анализа.
У ПЦР-диагностики значительно больше плюсов, чем минусов. К недостаткам можно отнести:
- Относительно высокую стоимость анализа.
- Сохранение фрагментов ДНК микроба в фекалиях и после эрадикации. Даже если лечение успешно пройдено и бактерия отсутствует в организме, ещё спустя какое-то время фрагменты ДНК обнаруживаются в биологическом материале и стул тест на хеликобактер может дать положительный результат. Поэтому с целью контроля излеченности рекомендуется ПЦР-диагностика не ранее, чем через 1 месяц после окончания терапии.
- Специальная дорогостоящая высокотехнологичная аппаратура, для работы на которой необходим подготовленный и обученный персонал.
Все диагностические исследования, проводимые с фекалиями пациента, относятся к манипуляциям ин витро – «в пробирке», «в стекле», вне организма человека.
Они обладают достаточно высокой точностью и информативностью, если преследуют цель обнаружения микроба.
Но не все процессы, происходящие «ин виво» — внутри человеческого организма, можно с той же достоверностью воссоздать «ин витро». К примеру, определение чувствительности к антибиотикам, анализируемую культуральным методом.
При исследовании антибактериальной чувствительности колоний микробов на питательных культурах, было выявлено, что самые подходящие препараты для бактерий ин витро, «не работали», оказывались малоэффективными при лечении пациента.
Результаты исследований чувствительности бактерии к антибиотикам «в пробирке» не всегда точны.
Информативность диагностического теста зависит не только от выбранного исследования, качества оборудования и квалификации персонала, а еще и от того, как пациент подготовился к анализу.
Кал для исследования необходимо правильно собрать:
- После дефекации часть фекальных масс необходимо поместить в стерильный контейнер для сбора биологического материала, который нужно заранее приобрести в аптеке или в лаборатории.
- Исключить попадание в биологический материал крови, мочи, слюны, гноя и других посторонних примесей, которые с большой вероятностью исказят результаты анализа.
- Контейнер с содержимым необходимо плотно закрыть и доставить в лабораторию не позднее 4-5 часов до исследования.
Кроме соблюдения технических моментов сбора материала для анализа, на протяжении нескольких дней до сдачи кала, нужно соблюдать следующие рекомендации:
- За неделю до сдачи перестать принимать антибиотики.
- За три дня не употреблять алкоголь, пищу, с большим содержанием клетчатки, а также способную приводить к окраске каловых масс: свеклу, напитки с красителями.
- Не применять ректально свечи либо мази, не пользоваться слабительными препаратами.
Соблюдение вышеописанных правил позволить врачу лабораторной диагностики максимально точно оценить состояние здоровья пациента и сделать правильные выводы при анализе.
ПЦР — диагностика фекалий наиболее достоверна из всех трех вышеописанных способов, она в какой-то степени уступает лишь биопсийному эндоскопическому исследованию.
ПЦР-анализ кала редко дает ложноположительные результаты, обладает высокой специфичностью, позволяет исследовать ДНК-материал часто встречаемых кокковых форм хеликобактерий в испражнениях.
Достоверность культурального и иммунологического метода ниже, чем ПЦР. Эти методы «грешат» появлением ложноположительных результатов, но в совокупности с другими способами выявления Helicobacter pylori, они являются прекрасным подспорьем для постановки диагноза.
В случае, если в кале обнаружен антиген хеликобактер пилори либо ДНК-фрагмент исследуемого микроорганизма, это означает, что:
- Человек инфицирован Н.руlori.
- Эрадикационная терапия недостаточно эффективна и микроб не исчез из слизистой оболочки ЖКТ.
- Прошло меньше месяца после терапии и в кале сохраняются антигены умертвлённых патогенов.
Чтобы исключить ложноположительный результат после прохождения схемы антихеликобактерной терапии (когда анализ положительный, а организм человека не содержит Н.рylori), следует не торопиться узнавать эффективность лечения, а выждать не менее одного месяца после его окончания.
Если лечение бактерии проведено успешно, спустя 1 месяц после эрадикации в кале не выявляются антигены и ДНК микроба. Результат обследования – отрицательный.
В случае выявления антигенов при первичном анализе, врач порекомендует пациенту пройти курс специальной терапии, направленной на уничтожение Н.руlori.
источник
Helicobacter pylori антиген – один из показателей инфицирования бактерией Helicobacter pylori, способствующей образованию пептических (вызванных действием пищеварительных соков) язв в желудке или двенадцатиперстной кишке.
Антиген H. Pylori, антиген возбудителя хеликобактериоза.
Helicobacter pylori antigen test, Helicobacter pylori Ag, HpSA.
Одностадийный иммунохроматографический метод.
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Как правильно подготовиться к исследованию?
Общая информация об исследовании
Хеликобактериоз – это широко распространенное инфекционное заболевание с оральным, фекально-оральным и контактным путем передачи возбудителя, сопровождающееся преимущественным поражением антрального отдела желудка, двенадцатиперстной кишки. Источником инфекции является больной человек или бактерионоситель, а наиболее чувствительны к ней люди с иммунодефицитами. Инкубационный период составляет около семи дней.
Возбудителем инфекции является Helicobacter pylori – спиралевидная грамотрицательная бактерия, способная инфицировать желудок и двенадцатиперстную кишку. Однако Helicobacter pylori вызывает лишь предрасположенность к гастриту и язвенной болезни, и только при дополнительных факторах – группе крови О(I), наследственной предрасположенности, курении, злоупотреблении алкоголем, приеме ульцерогенных лекарственных препаратов, частых стрессах, неполноценном питании – возникает язвенный дефект.
В настоящее время доказано, что хеликобактерная инфекция повышает риск рака желудка. Более половины населения в мире являются носителями Helicobacter pylori, однако у большинства носителей нет никаких симптомов, и лишь примерно у 15 % из них возникает гастрит или язвенная болезнь.
Определение антигена бактерии в кале является высокочувствительным и специфичным методом диагностики хеликобактериоза. Этот тест малоинвазивен, прост в применении, его специфичность и чувствительность – около 90 %.
Для чего используется исследование?
Для диагностики хеликобактерной инфекции.
Для определения показаний к назначению антихеликобактерной терапии и оценки ее эффективности.
Когда назначается исследование?
- При жалобах, позволяющих заподозрить язвенную болезнь, гастрит или дуоденит: при дискомфорте в эпигастральной области, расстройстве пищеварения, чувстве тяжести в желудке, вздутии живота, изжоге, необъяснимых потерях веса, тошноте, рвоте.
- Когда нужно проследить эффективность антихеликобактерной терапии и выявить возможный рецидив.
- Когда необходимо подтверждение полной ликвидации инфекции.
Референсные значения: отрицательно.
Инфицирование Helicobacter pylori (соответственно, высокий риск развития язвенной болезни, гастрита, дуоденита или уже имеющееся заболевание, повышенный риск развития рака желудка).
Инфицирования Helicobacter pylori нет.
Если при отрицательном результате теста у пациента есть симптомы язвенной болезни желудка или двенадцатиперстной кишки, гастрита, дуоденита, рекомендуется через 2 недели повторить данный анализ или же провести другие исследования на Helicobacter pylori.
- Helicobacter pylori, IgA (количественно)
- Helicobacter pylori, IgG (количественно)
- Helicobacter pylori, ДНК [реал-тайм ПЦР]
Кто назначает исследование?
Гастроэнтеролог, терапевт, инфекционист, педиатр, хирург.
источник
Классификация методов выявления инфекции Нelicobacter pylori представлена в таблице.
Инвазивные методы | Неинвазивные методы | |||||||||||||
Быстрый уреазный тест (Хелпил-тест) — определение HР по уреазной активности микроорганизма в биоптатах СОЖ. Helicobacter pylori продуцирует уреазу, под влиянием которой происходит гидролиз мочевины с образованием иона аммония. При этом увеличивается рН среды, что можно зафиксировать с помощью изменения цвета индикатора. Гастробиоптаты помещают в раствор, содержащий мочевину и индикатор, изменение цвета которого косвенно свидетельствует о наличии HР. Молекулярно-генетический метод исследования биоптатов СОЖ с помощью ПЦР позволяет выделять высокопатогенные и низкопатогенные штаммы HР. Бактериологический метод исследования биоптатов СОЖ: культуральное исследование и определение чувствительности HР к антибиотикам перед терапией первой линии важно проводить в регионах с высокой резистентностью к кларитромицину (более 15-20%), если планируется использовать стандартную трехкомпонентную эрадикационную терапию, одним из компонентов которой является кларитромицин. Бактериологический метод с определением чувствительности к антибиотикам также необходимо применять при неэффективности эрадикационной терапии второй линии. ИФА (особенно с применением моноклональных антител) выявления антигена HР в кале является высокочувствительным и специфическим методом как для первичной диагностики инфекции НР, так и для контроля результата лечения. Серологический метод (ИФА) — определение антител IgG к HР в сыворотке крови — простой и доступный метод первичного скрининга инфекции. Учитывая, что антитела к HР сохраняются в течение многих месяцев после эрадикации микроорганизма, использование серологического метода не рекомендуется для оценки эффективности проведения эрадикационной терапии. Уреазный дыхательный тест — исследование состава выдыхаемого воздуха после приема раствора мочевины, меченной изотопом углерода (13С). При наличие в желудке обследуемого HР мочевина под действием уреазы, продуцируемой бактерией, подвергается гидролизу до NH4+ и HCO3- с последующим образованием из HCO3- углекислого газа, который, попадая в кровоток, затем выделяется через легкие и может быть определен спектрометром в выдыхаемом воздухе. Этот тест может использоваться как для первичной диагностики HР, так и для оценки эффективности эрадикации. На фоне инфекции Helicobacter pylori развиваются такие воспалительные заболевания желудочно-кишечного тракта, как язва желудка или двенадцатиперстной кишки, эрозивный гастрит, гастродуоденит. источник Положительный результат анализа кала на хеликобактер служит достоверным доказательством заражения человека. Исследование относится к прямым видам, когда выявляется конкретный возбудитель или его ДНК, а не последствия его воздействия или продукты распада (как при проведении иммунологических анализов крови). Кроме того, достоинством способа является его неинвазивность — отсутствие необходимости применять для забора материала более или менее травматичные процедуры (прокола вены для взятия крови, введения дуоденального зонда). Проведение анализа кала не связано с присутствием пациента, достаточно своевременной доставки в лабораторию испражнений. Это особенно важно для обследования детей. Существуют разные методики выявления Helicobacter pylori, каждая обладает своими достоинствами и недостатками. Лечащий врач определяет необходимость и выбор способа исследования. Немалое значение имеет доступность анализа для конкретного пациента из-за цены. Большая часть выполняется только в частных клиниках и лабораториях, поскольку требует дорогостоящего оборудования. Цель исследования — выявление причинной связи заболевания с хеликобактер и назначение целевого курса лечения для избавления от возбудителя. Название Helicobacter pylori переводится как «спиралевидная привратниковая». Оно привязано к характерной форме бактерии, локализации в области привратника (приграничная зона желудка с двенадцатиперстной кишкой). Микроорганизм имеет жгутики, помогающие ему перемещаться даже в густой слизи. Хеликобактерия способна выдерживать кислую среду желудочного сока. Для жизнеобеспечения использует энергию молекул водорода, которую вырабатывают кишечные бактерии. Наиболее известные ферменты хеликобактер: К особенностям микроорганизма относятся:
В кале спиралевидную форму обнаружить невозможно, поскольку кишечная среда неблагоприятна для существования хеликобактерии. Здесь не имеется нужной кислотности, мало кислорода, действуют сильные разрушающие ферменты желчи, поджелудочной железы. Поэтому в каловых массах находится кокковая форма бактерии. Симптомы поражения желудка, вызванные хеликобактерией, могут быть минимальными или соответствовать клинике обострения заболевания. У пациента наблюдаются:
Показаниями к исследованию могут быть:
У ребенка о признаках заражения говорят жалобы на тошноту, неясные боли в животе, плохой аппетит и отказ от еды, частое обильное срыгивание, а также вздутие и урчание живота. Выделение культуры возбудителя — микробиологический вид исследования. Классика способа требует посева материала на питательную среду, подсчета выросших колоний, исследования микроорганизма из колонии под микроскопом. Также необходимо проведения биохимических проб для изучения его свойств и дополнительного посева на среду с антибиотиками для выявления чувствительности к разным препаратам. Анализ кала на хеликобактер пилори с помощью культурального способа провести сложно:
Суть иммунологического анализа — выявление комплексов антитело+антиген, в котором чужеродным агентом является хеликобактерия. Более привычно использование по исследованию крови. Но фактически косвенные признаки наличия антигена можно подтвердить по наличию в стуле, слюне, моче, у беременных в околоплодной жидкости. В методиках используются готовые «помеченные» антитела. При обработке ими кала пациента, содержащего антигены (остатки хеликобактерии) возникает реакция соединения со стандартными антителами. Длительность исследования — сутки. Анализ кала на антиген хеликобактер назначается, если у пациента имеются любые симптомы нарушения пищеварения. Наиболее распространенный вариант — первичный скрининг населения (обследование всех обратившихся или определенных групп), не имеющего специфических жалоб. В России не применяется из-за отсутствия достаточного количества иммунологических тестов в лабораториях поликлиник. Полимеразная цепная реакция (ПЦР) относится к молекулярно-генетической диагностике. С ее помощью выявляется не бактерия, а ее специфическая ДНК. Даже при малом количестве, в случае выздоровления или бессимптомного носительства метод позволяет с достаточной точностью связать изменения в организме с действием хеликобактер. Методика рассчитана на искусственный синтез отдельных частей ДНК, удвоение и построение цепочки из 30 циклов. Процесс не происходит в случае отсутствия малейших остатков биоматериала. Для реакции необходим прибор ампликатор. Полимераза — фермент, ускоряющий процесс. ПЦР кала назначают для подтверждения роли хеликобактерии в патологии и определения целесообразности специфической терапии:
Преимуществами ПЦР кала можно считать:
Расшифровка результатов исследования — дело врача специалиста. Не стоит прибегать к самостоятельной трактовке или пользоваться услугами знакомых. Оценка проводится по комплексу признаков. При ПЦР выдается результат:
При бактериологическом исследовании:
Бакпосев кала позволяет дать не только качественную, но и количественную характеристику хеликобактериального заражения. Для этого учитываются степени роста бактерии:
Иммунологические тесты показывают отрицательный результат, если антиген возбудителя не определяется, положительный — при наличии хеликобактериоза. Достоверность иммунологического и культурального методов значительно уступает ПЦР, для их проведения необходима массивная распространенность возбудителя в фекалиях. Где можно сдать анализ, укажет врач. Он же должен ознакомить пациента с правилами забора материала и подготовки. Некоторые частные клиники выдают посетителям напечатанную инструкцию «Как сдавать анализы». От соблюдения указанных условий зависит результативность исследования. Общими правилами забора фекалий на выявления хеликобактер являются:
Пациент при диагностике не должен настаивать на изолированном исследовании кала. Используя дополнительные виды, врач повышает достоверность информации о заражении хеликобактерией. Большой популярностью пользуются уреазные дыхательные тесты. Неопровержимым видом обследования является цитологическое исследование образца слизистой желудка, полученного при биопсии во время фиброгастроскопического исследования. При высокой разрешающей возможности микроскопа лаборант видит окрашенную хеликобактерию. Фиброгастроскопическая картина самой слизистой с характерными эрозиями, атрофией, изъязвлением указывает на косвенные признаки присутствия возбудителя в желудке. Рентгенологическая диагностика также позволяет по нарушениям в направлении складок, контуров желудка судить об органической патологии, вызванной хеликобактерией. По итогам анализов врач может ввести пациента в группу риска с повышенной вероятностью заболевания язвой желудка, злокачественными опухолями. Предварительное применение специфического лечения позволяет снизить степень риска. При выборе медицинского учреждения для выполнения исследований на платных условиях нужно посоветоваться по поводу репутации и ответственности его сотрудников. источник Исследование антигена H.pylori в кале — идеальный способ диагностики. Хеликобактер пилори относится к числу самых опасных для человека бактерий. Патогенный микроорганизм способен провоцировать серьезные отклонения в функциональном состоянии пищеварительного тракта и организма в целом. Бактерии данного типа отличаются повышенной устойчивостью к многочисленным факторам. Результат терапии напрямую зависит от правильно составленной схемы лечения. Для определения чувствительности микроорганизмов к определенным видам антибактериальных препаратов используются специальные анализы каловых масс. Каждая методика имеет свои достоинства и недостатки. Для получения точных результатов рекомендуется провести несколько тестов. Хеликобактер пилори длительное время присутствует в организме бессимптомно. Признаки нарушения функционального состояния желудочно-кишечного тракта проявляются только при активной жизнедеятельности бактерий. Одним из основных провоцирующих факторов является снижение иммунитета. При наличии у пациента определенных заболеваний или отдельных симптомов процедура анализа на хеликобактериоз становится обязательной. Показания к анализу:
Рекомендуем посмотреть видео: Проведение процедуры исследования каловых масс на наличие патогенных бактерий подразумевает соблюдение ярда правил. Если подготовка к анализу или сбор биологического материала будут совершены неправильно, то результаты тестов могут показать ложный результат. Каловые массы имеют определенный срок хранения. Если материал будет доставлен в лабораторию с нарушением сроков, то тестирование также может стать недостоверным. Этапы сбора кала на анализ. Подготовительные меры для анализа кала на хеликобактер пилори включают в себя рекомендации по соблюдению определенного режима питания, а также корректировку медикаментозной терапии (при ее наличии). Если прием назначенных препаратов временно прекратить не получается, то данный нюанс обязательно сообщается врачу. Вещества, содержащиеся в антибиотиках и других категориях медикаментов, могут стать причиной неправильной расшифровки данных исследования. Рекомендации:
Стерильную емкость для сбора биологического материала можно приобрести в аптеке. При покупке такой баночки исключается наличие загрязнений. В качестве альтернативы можно использовать другие варианты тар (например, емкости от детского питания). Важным нюансом является их стерильность. Емкости должны быть максимально очищены от любых видов загрязнений. Запрещено собирать каловые массы с памперса или из унитаза. Идеальным вариантом является забор биологического материала из горшка или с полиэтиленового пакета. Емкость для хранения кала должна быть заполнена на одну третью часть. К таре обязательно прикрепляется заполненное направление. Емкость с каловыми массами доставляется в лабораторию как можно быстрее. Если возможность быстро направить материал для анализа отсутствует, можно воспользоваться двумя вариантами хранения. В первом случае каловые массы однократно замораживаются. Во втором — хранятся не более двух суток при температуре не выше 4 градусов. Назначением конкретного анализа на хеликобактериоз занимается врач. Специалист учитывает индивидуальную клиническую картину состояния здоровья пациента. Сдать анализы на хеликтобактериоз можно самостоятельно, если возникают подозрения на функциональное отклонение пищеварительного тракта. Отклонение показателей анализа может свидетельствовать о наличии патологии в органах ЖКТ. При молекулярном анализе выявляется специфическая ДНК бактерии. Код дублируется на специальном аппарате. При достижении бактерией нужного размера, ее сравнивают с этанолом. Если части ДНК совпадают с оригиналом, то результат теста положительный (хеликтобактериоз выявлен). Методика отличается высокой степенью информативности. Бактериальный посев (или культуральный анализ) относится к категории микробиологических методов исследований. В процессе поведения процедуры биологический материал помещается в среду, которая является максимально благоприятной для размножения патогенных микроорганизмов. Через неделю каловые массы изучаются с помощью микроскопа.
Особенности методики:
Главной целью проведения иммунологических тестов при выявлении хеликобактер пилори является определение комплексов антиген + антитело. Для исследования используются помеченные антитела. Вступая в реакцию с калом, такие вещества подвергаются определенным изменениям. Антитела способны определить наличие в каловых массах не только патогенные бактерии, но и их части, а также продукты жизнедеятельности. ПЦР-диагностика имеет ряд достоинств и недостатков. Некоторые виды патогенных бактерий можно выявить только с помощью данной методики (например, цитотоксичные типы микроорганизмов). Сбор материала для анализа не подразумевает причинение боли или дискомфорта пациенту. Процедура показывает максимально достоверные результаты. Преимущества методики: ПЦР-анализ один из самых достоверных методов диагностики, который может выявлять разные формы хеликобактерии.
Высокая степень чувствительности теста является его одновременным достоинством и недостатком. Анализ с точностью определяет наличие бактерий, но при загрязнениях биологического материала или тары, результаты процедуры могут быть ложноположительными. Для исключения ложных показателей следует соблюдать все правила сбора каловых масс для проведения их исследования. Другие недостатки:
Процедуры исследования каловых масс осуществляются вне организма пациента («ин витро» — «в стекле», «в пробирке»). Для обнаружения микроба такие методы являются максимально точными и эффективными. Однако процедуры имеют некоторые недостатки. Некоторые процессы, происходящие в человеческом организме нельзя воссоздать искусственным способом. Анализы могут показать уровень чувствительности бактерий к определенным антибиотикам, но стопроцентной информативности такие тесты не дают. Уровень достоверности результатов Расшифровка результатов исследования Положительный — выявлен хеликтобактериоз; отрицательный — не выявлено ни одного типа хеликобактер пилори Бактериологический анализ на чувствительность к антибактериальным препаратам Низкая — на выявление антигена Высокая — на определение чувствительности Количество бактерий 0 — результат отрицательный, бактерии не выявлены; показатели больше 0 — определен хеликтобактериоз; R — устойчивость к определенному антибиотику; I — умеренная степень чувствительности к антибиотику; S — высокая степень чувствительности к антибиотику Положительный — выявлен хеликтобактериоз; отрицательный — патогенная бактерия не выявлена
Видео на тему: Чем опасна бактерия Хеликобактер Пилори? источник Бактерия Helicobacter pylori (хеликобактер пилори) обитает в клетках слизистой оболочки желудка и двенадцатипёрстной кишки человека. Некоторые штаммы (генетические типы) микроорганизма выделяют специфические токсины, разрушающие клетки и повышающие риск возникновения таких патологий, как хронические гастриты и дуодениты, язвенная болезнь желудка и двенадцатипёрстной кишки, некоторые виды злокачественных опухолейа. Такие штаммы необходимо своевременно выявлять и лечить. Одним из способов определения инфицирования Helicobacter pylori является анализ кала. ПЦР (полимеразная цепная реакция), культуральный и иммунологические анализы кала относятся к прямым методам исследования. В отличие от косвенных методов, когда о наличии патологического агента судят по присутствию продуктов его жизнедеятельности или реакции иммунной системы организма (выработка антител), прямые методы обнаруживают непосредственно сам микроорганизм или его ДНК. ПЦР-метод является одним из видов молекулярно-генетической диагностики и позволяет определить наличие Helicobacter pylori даже в случае присутствия в материале небольшого фрагмента ДНК бактерии. Суть метода состоит в многократном умножении анализируемого образца возбудителя заболевания. Для проведения реакции необходим своего рода «каркас», состоящий из двух праймеров – полученных с помощью искусственного синтеза фрагментов ДНК, идентичных нуклеиновой кислоте Helicobacter pylori. Во время реакции между праймерами наращивается цепочка ДНК в случае присутствия в кале фрагмента биоматериала микроорганизма. В случае его отсутствия реакции не происходит. Реакция проводится при определённых значениях температуры и кислотности среды, состоит из нескольких десятков повторяющихся циклов, для катализа (ускорения реакции) применяется специальный фермент – полимераза. За 30 циклов фрагмент ДНК патологического агента, присутствующий в биоматериале, умножается в миллиард раз, что позволяет с точностью диагностировать инфекцию. При наличии соответствующих праймеров можно выявить инфицирование цитотоксичными (повреждающими клетки слизистой желудка) видами Helicobacter pylori. Культуральный анализ (бактериологический посев) является микробиологическим методом исследования. Биологический материал помещается в специфическую среду, благоприятную для роста бактериальной колонии. По истечении определённого срока (для Helicobacter pylori – более недели) культуру изучают под микроскопом, используя для верной идентификации колонии различные методы – окраску, способность вступать в те или иные биохимические реакции. Кроме выявления патологического антигена (возбудителя заболевания) метод позволяет провести тест на его чувствительность к антибактериальным препаратам, что сокращает сроки и затраты на лечение, повышает эффективность терапии.
Иммунологические методы основаны на свойстве антител слипаться с антигеном. Для исследования антитела со специальными метками соединяются с анализируемым образцом, в результате, при наличии в материале Helicobacter pylori, образуются комплексы антиген-антитело. Все виды диагностики инфицирования Helicobacter pylori имеют свои преимущества и недостатки. Целесообразность применения того или иного метода зависит от разных факторов и этапов лечения. Оптимальный способ исследования выбирает врач-гастроэнтэролог. Показания к ПЦР-анализу кала:
Исследование ПЦР-методом оптимально назначать для оценки целесообразности проведения специфического лечения антибактериальными препаратами при имеющихся органических повреждениях. Показание к культуральному анализу – определение чувствительности к лекарственным препаратам при неэффективности эмпирического лечения. Поскольку анализ является сложным (посев требует специальной среды и отсутствия доступа кислорода) и долгосрочным, это исследование не назначается для диагностики инфекции.
Показания к иммунологическим методам:
Иммунологические методы и ПЦР без генотипирования назначаются с целью скрининга – ввиду простоты и относительно низкой стоимости исследование проводится широким массам населения для выявления группы риска развития органических и опухолевых поражений желудка и кишечника.
Иммунологический анализ проводится до инструментальных методов исследования при соответствующей симптоматике и позволяет предположить инфицированность Helicobacter pylori. По результатам анализа в случае необходимости назначаются другие методы исследования. Специфическая терапия хеликобактериоза антибактериальными препаратами – процесс длительный, сопровождающийся плохой переносимостью у многих больных и высоким риском развития осложнений. Назначение антибиотиков всем лицам, инфицированным Helicobacter pylori, — порочная практика. Специфическая антибиотикотерапия показана лишь пациентам с тенденцией к прогрессированию органических поражений – эрозий, язв, атрофического процесса, — как правило, заражённым определёнными штаммами хеликобактера. Этим больным требуется антибиотикотерапия с целью достижения ремиссии при язвенной болезни и предупреждения риска развития злокачественных новообразований. Выявить цитотоксичные типы Helicobacter pylori можно только посредством ПЦР-метода. Преимущества ПЦР-анализа кала:
Чувствительность теста – способность к выдаче истинно положительных результатов. Чем выше чувствительность, тем ниже доля ложноположительных результатов, когда антиген якобы выявляется у неинфицированных лиц. Специфичность теста – показатель, зависящий от количества ложноотрицательных (когда у инфицированного больного антиген не выделяется) результатов исследования. ПЦР-метод исследования кала на Helicobacter pylori характеризуется чувствительностью 64–94% и стопроцентной специфичностью. Собрать кал легко и просто. В отличие от забора крови или гастродуоденоскопии взятие материала не требует применения местных анестетиков, на которые может развиться аллергическая реакция, не причиняет боли и дискомфорта, безопасно в плане заражения «грязным» инструментом. Исследование не требует приложения определённых усилий, как, например, дыхательный метод, что делает его доступным даже для маленьких детей. Недостатки ПЦР-анализа кала:
Достоверность результата любого анализа зависит от чёткого выполнения определённых условий на всех этапах, и забор материала – не исключение.
Замедление пассажа каловых масс, запоры могут приводить к разрушению хеликобактера в фекалиях, что является причиной ложноотрицательных результатов. Для повышения достоверности результата врач может назначить перед анализом лёгкое слабительное – лактулозу. Анализы назначает гастроэнтеролог, поэтому перед исследованием на Helicobacter pylori необходима его консультация. Примерная стоимость исследования кала:
Для наиболее точной диагностики Helicobacter pylori необходимо выбирать медицинское учреждение, заслужившее хорошую репутацию. Период обработки анализов, их достоверность зависят от метода определения антигена.
Исследование кала на хелибактериоз безопасно, нетравматично и может осуществляться разными методами, позволяющими обнаружить инфекцию, определить штаммы вируса и чувствительность патогена к антибиотикам. По результатам анализов можно сформировать группу риска, у представителей которой высока вероятность развития язвы желудка и двенадцатипёрстной кишки, злокачественных опухолей желудка; оценить степень риска и минимизировать его своевременным антибактериальным лечением цитотоксичных штаммов хеликобактериоза. источник |