Иммуноферментный анализ кала на хеликобактер

Диагностика хеликобактерной инфекции – сложный процесс, поскольку ни один из имеющихся тестов в отдельности не может послужить основанием для постановки окончательного диагноза. Человек на протяжении всей жизни может являться носителем Хеликобактер пилори, при этом проявление клинических симптомов не является обязательным.

Существуют экспериментальные данные о возможности спонтанной элиминации инфекции, однако, в большинстве случаев требуется подбор адекватных методов лечения под контролем врача.

Helicobacter pylori (Хеликобактер пилори) условно-патогенная бактерия спиралевидной формы, по Граму окрашивается в красный цвет (грамнегативная). Преимущественное место обитания в организме человека – желудок и двенадцатиперстная кишка.

Роль Хеликобактер пилори в развитии заболеваний органов желудочно-кишечного тракта (ЖКТ) отрицалась на протяжении длительного времени. Лишь в 2005 году австралийскому патологу Р. Уоренну и врачу Б. Маршаллу удалось доказать медицинское значение бактерий, за что они были удостоены Нобелевской премии.

Особенность: у 90 % носителей Хеликобактер пилори является частью нормальной микрофлоры и не вызывает развития инфекционного заболевания. Однако существует мнение о том, что именно данный вид – причина многих патологий ЖКТ (язва, гастрит, рак, лимфома).

Отношений к условно-патогенным бактериям означает их способность провоцировать инфекционный процесс при наличии определённых условий (факторов). Например, длительный приём антибиотиков с последующим дисбактериозом, снижение иммунитета и наличие сопутствующих патологий. Однако при заражении штаммами с выраженными патогенными свойствами наличие вышеперечисленных факторов не обязательно.

Инфекция не передаётся воздушно-капельным путём, поскольку является строгим анаэробом (гибнет при контакте с кислородом). Заразиться можно при пренебрежении правилами личной гигиены (столовые приборы и посуда, личная косметика и индивидуальные гигиенические средства), а также при поцелуе.

Первичное инфицирование может произойти в детстве (от матери к ребёнку). Еще один путь заражения – вода и мясо, прошедшее недостаточную термическую обработку. Не исключено заражение через эндоскоп, который применяется при гастроэндоскопии.

Быстрое заселение слизистой органов ЖКТ обеспечивается за счёт высокой степени подвижности Хеликобактер пилори (при помощи жгутиков). Специфические белки и липополисахариды на поверхности мембраны помогают бактериям прикрепиться к поверхности клеток. Наличие чужеродных антигенов провоцирует развитие иммунного ответа (выделение специфических антител к Хеликобактер пилори) и инициирует воспаление слизистой оболочки.

Бактерии выделяют во внешнюю среду ферменты, растворяющие защитную слизь желудка. Выживание в кислой среде желудка обеспечивается за счёт фермента уреазы, разлагающей мочевину с выделением аммиака (нейтрализовывает соляную кислоту). Побочное действие аммиака – химическое раздражение клеток с последующей их гибелью. Наряду с этим бактерии выделяют токсины, усиливающие процесс деградации и гибели клеток.

В большинстве случаев (до 70 %) носительство не проявляется в виде клинических симптомов и обнаруживается случайно при комплексном обследовании пациента. Однако патологии желудка и кишечного тракта, сопровождающиеся хеликобактерной инфекцией, имеют определённые признаки:

• ощущение боли в абдоминальной области (живот);
• частая изжога и отрыжка;
• необъяснимое снижение аппетита и веса;
• тошнота или рвота;
• обильный налет на языке;
• воспаления десен;
• гнилостный запах из ротовой полости (при исключении заболеваний зубов);
• ощущение тяжести после употребления пищи;
• повышенное газообразование.

Отмечено, что у детей степень выраженности клинических признаков выше, чем у взрослых. Особенно часто подобная ситуация наблюдается при наличии физического или эмоционального стресса, а также при изменении питания в худшую сторону (замена супов бутербродами или нерегулярное употребление пищи).

Пациенты задают вопрос – когда нужно сдать анализы на Хеликобактер пилори? Направление на лабораторную диагностику может выписать врач терапевт, педиатр, гастроэнтеролог или инфекционист. Показания к назначению анализа на Helicobacter pylori: подозрение или наличие заболевания ЖКТ, а также проявление вышеперечисленных симптомов.

Методы выявления Хеликобактер пилори различны:

• дыхательный (уреазный) тест;
• реал-тайм ПЦР для обнаружения ДНК возбудителя;
• иммуноферментный анализ (ИФА) для определения уровня антител, вырабатываемых в ответ на инфицирование;
• одностадийный иммунохроматографический метод для обнаружения антигенов возбудителя в исследуемом материале;
• биопсия во время эзофагогастродуоденоскопии.

В зависимости от метода диагностики различается исследуемый биоматериал, стоимость и сроки исследования. Важно чтобы пациент соблюдал правила подготовки к анализу, от этого зависит точность и достоверность полученных результатов. Рассмотрим подробнее каждую методику.

Выявление Хеликобактер пилори при помощи дыхательного анализа хелик-тест всё чаще используется в рутинной диагностической практике. Преимущества метода:

• короткие сроки получения результатов (до нескольких часов);
• низкая себестоимость;
• безболезненность;
• отсутствие противопоказаний;
• отсутствие необходимости в дорогостоящем оборудовании.

К недостаткам относят возможность получения ложноотрицательного или ложноположительного результата. Снижение достоверности исследования на фоне внутренних кровотечений.

В каких случаях дыхательный уреазный тест на Хеликобактер может показать ложный отрицательный результат? Помимо неправильной подготовки пациента к сдаче анализа и ошибок на этапе сбора биоматериала ложноотрицательный результат может быть получен при инфицировании штаммами, не выделяющих уреазу. Иными словами, даже если ЖКТ пациента бактерии заселяют, но не выделяют уреазу, результат теста будет отрицательным.

За 3 суток полностью исключается алкоголь и лекарственные препараты, растворителем в которых выступает спирт. За 6 часов ограничивается приём пищи, чистую несладкую воду пить разрешается. Минимальный интервал между последним приёмом антибиотиков и висмутсодержащих препаратов – 6 недель. За 2 недели желательно отказаться от приёма любых лекарств, по согласованию с врачом.

Забор биоматериала (выдыхаемый воздух) разрешается проводить через 24 часа после ФГДС (гастроскопия).

За 10 минут до сбора воздуха следует выпить сок (грейпфрутовый или апельсиновый) с целью замедления эвакуации из желудка. Затем пациент максимально выдыхает воздух в специальный пакет.

После чего необходимо выпить раствор меченной изотопом углерода мочевины (50 мл – взрослым, 25 мл – детям до 12 лет). Раствор не имеет специфического вкуса или запаха, готовиться непосредственно перед применением. Через 30 минут проводится контрольный сбор выдыхаемого воздуха.

Обе пробы анализируются на специальном приборе и определяют соотношение углекислого газа.

Заражение хеликобактерной инфекцией запускает защитные иммунные реакции. Первым вырабатываются иммуноглобулины М (IgM), а затем в большом количестве IgG и IgA. Кровь на антитела к Хеликобактер пилори позволяет установить факт заражения, поскольку IgG обнаруживаются в 90 – 100 %, а IgA – в 80 % случаев.

Следует отметить, что анализ крови на Хеликобактер пилори может являться альтернативой для инвазивных методов диагностики (при невозможности эндоскопии). Данное правило не распространяется для пожилых пациентов. Сила их иммунного ответа недостаточна, поэтому не исключено получение ложноотрицательных результатов.

Высокий титр IgG указывает на недавнее заражение и активный процесс распространения инфекции при условии, что пациент не принимал антибиотики. Концентрация IgG остаётся умеренно повышенной на протяжении длительного времени (до 1,5лет), поэтому данный тест не применяется для оценки эффективности выбранного лечения.

Величина IgA позволяет определить степень тяжести инфекционного заболевания. Малое содержание IgA сохраняется до нескольких лет, тем не менее, отсутствие положительной динамики по снижению его величины указывает на неэффективность лечения.

Как проходит сдача крови на Хеликобактер пилори (как берут анализ)? В качестве биоматериала выступает венозная кровь из периферической вены на локтевом сгибе. Особой подготовки к анализу не требуется. Желательно сдавать кровь на Хеликобактер пилори после 2-3 часов без еды, за полчаса запрещается курить.

Если в биоматериале обнаруживаются антитела к Helicobacter pylori IgG, то делается вывод о:

• активной инфекции – при наличии выраженной клинической картины;
• бактериальном носительстве.

Снижение титра IgG в анализе крови на хеликобактер на 25 % в течение полугода после завершения лечения свидетельствует о гибели бактерий.

Кал исследуется 2 методиками: иммунохроматографией (выявление антигенов) и ПЦР (наличие ДНК возбудителя). Оба метода характеризуются высокой чувствительностью и выступают в качестве взаимодополняющих.

Анализ кала на антиген Хеликобактер пилори – это качественный метод, точность которого достигает 95 %. Получение положительных результатов через 7 суток после приёма антибиотиков указывает на неэффективность лечения. Повторный тест проводится через 1,5 месяца терапии, при этом отсутствие антигенов в кале больного указывает на полное уничтожение бактерии.

Метод не позволяет установить вид бактерий: H. suis, H. Baculiformis или H. Pylori, поскольку весь их биоматериал является чужеродным (антигеном) для человека.

Чувствительность метода ПЦР кала на заражение Хеликобактер пилори достигает 95 %. Анализ позволяет устанавливать заражение некультивируемыми формами бактерий. К недостаткам можно отнести возможность получения ложноположительных результатов после успешного курса лечения, поскольку разрушенные клетки бактерий (и их ДНК) сохраняются в организме человека на протяжении длительного времени.

Исключена возможность получения ложноположительных результатов, поскольку специфичность метода достигает 100 %. Метод является альтернативой дыхательного теста или ФГДС для маленьких детей.

Специальной подготовки к сбору биоматериала для обоих исследований не требуется. Кал собирается естественным путём без применения слабительных препаратов, желательно до начала приёма антибиотиков.

Пациенты задают вопрос – что представляет собой биопсия и цитология как обследование на хеликобактер? Суть метода в прижизненном заборе клеток или участка ткани с целью последующего исследования. Процедуру осуществляют во время инвазивной диагностики методов ФГДС желудка и двенадцатиперстной кишки.

Собранный биоматериал анализируют на наличие уреазы и антигенов бактерии. После чего возможно последующее культивирование биоматериала с выделением Хеликобактер пилори.

Несмотря на то, что ни одна из методик не защищена от диагностических ошибок, самый точный анализ на Хеликобактер – это биопсия.

При этом врач должен обладать достаточной компетенцией и не допускать ошибок. Например, при биопсии не исключена возможность ложноотрицательных результатов при неправильном выборе места сбора биоматериала. Именно поэтому диагностика хеликобактериоза предполагает одновременный комплекс лабораторных и инвазивных анализов.

Расшифровка анализа крови на Хеликобактер пилори, а также других полученных данных – работа врача и не допускает самостоятельную интерпретацию результатов пациентом. В таблице представлены нормальные значения для каждой диагностической методики.

Пациентов волнует вопрос — что означает Хеликобактер негативный? Получение подобного результата свидетельствует об отсутствии хеликобактерной инфекции или об успешной терапии с полным уничтожением бактерий.

Методы, направленные на полное уничтожение Хеликобактер пилори носят название – эрадикации. В 1987 году была сформирована Европейская группа, цель которой – разработка наиболее эффективных, доступных и безопасных методов эрадикации. Их рекомендации, оформленные в виде трудов, именуются Маастрихтскими консенсусами.

Основной метод лечения – антибиотики. Однако не всегда удаётся достичь положительной динамики в виду высокого уровня устойчивости Хеликобактер пилори к большинству известных антибиотиков. Кроме того, в определённых зонах ЖКТ патогенные бактерии недосягаемы для антибактериальных веществ из-за большого количества слизи.

Самостоятельное применение методов нетрадиционной медицины не позволяет достичь полного уничтожения инфекции. Однако методика может применяться в качестве дополнения при медикаментозном лечении.

Снижению кислотности способствует лечение семенем льна, настойку которого принимают перед употреблением пищи. Консистенция отвара в виде слизи помогает дополнительно защищать желудок от разрушительного воздействия ферментов и токсинов бактерии.

Лечение картофельным соком предполагает его ежедневное употребление перед едой. Отмечено, что сок картофеля, как и других овощей, способствует снятию боли и снижению воспалительного процесса.

Допустимо применение настоек из различных трав, например, зверобой, ромашка и тысячелетник. Травы смешиваются в равных количествах, заливаются кипятком и настаиваются. До еды необходимо принять не более 2 столовых ложек настойки.

Лечение корнем аира болотного способствует увеличению уровня кислотности. Настойка принимается до еды по 50-70 мл до трёх раз.

Отзывы по лечению Хеликобактера пилори народными средствами различны. Многие люди связывают свое выздоровление исключительно с настойками и отварами, при полном исключении антибиотиков. Однако не следует забывать об известных случаях спонтанной элиминации бактерии из организма человека. Несмотря на отсутствии доказательной базы феномена, его исключение невозможно.

Максимальный терапевтический эффект достигается при строгом соблюдении диеты, применении антибиотиков и методов неофициальной медицины. Успешным считается лечение, в результате которого клинические симптомы стали менее выражены или полностью исчезли.

Дипломированный специалист, в 2014 году закончила с отличием ФГБОУ ВО Оренбургский госудаственный университет по специальности «микробиолог». Выпускник аспирантуры ФГБОУ ВО Оренбургский ГАУ.

В 2015г. в Институте клеточного и внутриклеточного симбиоза Уральского отделения РАН прошла повышение квалификации по дополнительной профессиональной программе «Бактериология».

Лауреат всероссийского конкурса на лучшую научную работу в номинации «Биологические науки» 2017 года.

источник

Хеликобактер пилори ─ это бактерия больших размеров, которая локализуется и паразитирует под слизистой оболочкой желудка. В таких условиях она размножается и образует обширные колонии. При избыточной колонизации бактерии заселяют желчные протоки и отделы тонкого кишечника.

Анализ кала на хеликобактер ─ это один из видов диагностики, который подтверждает или опровергает наличие бактерий в организме. Его также проводят для контроля лечения. Тест кала на хеликобактер пилори ─ это неинвазивный (не требующий использования эндоскопии) метод, анализирующий биоматериал.

С диагностикой хеликобактер пилори связано два термина ─ «чувствительность» и «специфичность», на их основании делается заключение анализа.

Чувствительность ─ это способность методики давать положительный результат. Так определяется процент выявления инфекции из общего количества проведенных тестов. Этот параметр посчитать довольно просто.

Специфичность ─ это способность диагностики не давать ложноположительных результатов при отсутствии бактерий. Этот параметр определяет процент отрицательных ответов в группе здоровых людей.

Важно! Язвенная болезнь желудка и двенадцатиперстной кишки ─ абсолютный показатель для диагностики.

В каких случаях назначают делать этот анализ:

1. Заболевания, относящиеся к онкологическим или предопухолевым. Важное значение анализ имеет при лимфоме желудка, так как на ранних стадиях проводят только антибактериальное лечение без применения химиотерапии.
2. Атрофический гастрит.
3. Хронический хеликобактерный гастрит с развитием кишечной метаплазии (замещением желудочного эпителия кишечным).
4. Дисплазия желудка ─ нарушение анатомических и функциональных свойств эпителия органа.
5. Наличие семейного анамнеза рака желудка, особенно при онкологическом заболевании у родственников первой линии (родители — дети), у которых этот диагноз был доказан.
6. Болезнь Менетрие ─ хронический гастрит, для которого характерна значительная гипертрофия слизистой оболочки с последующим образованием кист и аденом. Она является предраковой патологией, поэтому возникает потребность дополнительно исследовать кал на инфекцию хеликобактер пилори.
7. Устойчивая функциональная диспепсия более шести месяцев, особенно при болях в эпигастральной области.
8. Подготовка к длительному применению нестероидных противовоспалительных препаратов, ацетилсалициловой кислоты.
9. У пациентов, которые вынуждены длительно употреблять ингибитор протонной помпы (при болезнях пищевода, для профилактики гастропатии).
10. Заболевания крови ─ тромбоцитопеническая пурпура, идиопатическая железодефицитная анемия.

Все методики диагностирования хеликобактер инфекции делятся на прямые и косвенные.

Прямые направлены на выявление самой инфекции или антигенов в кале. Косвенные исследования определяют иммунную реакцию и метаболиты ─ вещества, выделяемые бактериями (уреаза).

Анализ каловых масс относится к прямым методам.

Это исследование является инновационным и самым востребованным в мировой медицине. Оно определяет h. pylori методом моноклональных антител.

Преимущества ─ низкая стоимость, высокая чувствительность и специфичность более 95%. Недостатки ─ ограниченная доступность в некоторых странах мира.

ИФА h. pylori в стуле более предпочтителен в лабораторной практике, чем ПЦР. Существует большое количество научных данных, на основании которых формируется этот вывод. В анализах высокие показатели чувствительности и специфичности как для первичной диагностики, так и для контроля эрадикации (режим стандартной терапии, направленный на уничтожение хеликобактер). Поэтому анализ на антиген хеликобактер пилори в кале является одним из ведущих, и его игнорировать нельзя.

Иммуноферментный анализ ─ лабораторный метод, определяющий количественное и качественное содержание бактерий в биоматериале. Он основан на специфической реакции антиген — антитело. Для него характерны:

• высокая чувствительность;
• надежность;
• быстрота.

Определение h. pylori происходит за счет того, что бактерии обладают свойствами антигена и способны вызывать в организме синтез антител.

Принцип анализа заключается в специфическом связывании антитела с антигеном. При этом один из элементов соединен с ферментом. В результате реакции с высокоспецифическим реагентом (хромогенным субстратом) образуется окрашенный продукт, количество которого определяют с помощью спектрофотометрии.

Основные стадии ИФА и определение pylori антигена:

1. Процесс идентификации тестируемых бактерий специфическим антителом. Так получают иммунный комплекс.
2. Формирование устойчивой связи бактерий с иммунным комплексом.
3. Преобразование ферментной метки в специальный регистрируемый сигнал.

Всего три стадии сделали возможным автоматизировать анализ кала на антиген хеликобактера. Недостатками такой системы является сложность синтеза ферментных соединений и влияние хеликобактер на активность ферментов.

ИФА кала ─ это основа верификации инфекции h. pylori.

При этой диагностике проводится работа с ДНК и РНК бактерий. Это метод молекулярной биологии, суть которого заключается в многократном увеличении малых концентраций некоторых фрагментов ДНК.

Для проведения исследования используют несколько компонентов:

• праймеры ─ занимаются поиском и обозначением нужного фрагмента ДНК;
• полимераза ─ фермент, копирующий найденный участок цепи ДНК;
• DNTP ─ строительный материал для создания новой цепи;
• анализируемый образец, выделенный из биоматериала пациента;
• буферный раствор, который создает максимальные условия для реакции.

При проведении реакции специфические фрагменты ДНК накапливаются в геометрической прогрессии. Из одной молекулы получаются более 100 миллионов идентичных молекул.

Таким образом, идентифицируют генетический материал бактерий, который обнаружен даже в самых малых количествах. Если в кале есть фрагменты хеликобактер пилори, то цепочка ДНК выстроится. Если цепь не образовалась, то это значит, что результат будет отрицательным.

1. Метод автоматизирован, и участие человека в процессе исследования минимальное.
2. Диагностическая ценность метода достаточно высока (до 98%).
3. В условиях современной лаборатории не дает ложноположительных результатов.

1. Отрицательный результат анализа не исключает наличия возбудителя в организме.
2. Универсальность тест-системы бывает ограничена в связи с разновидностью штаммов бактерий.
3. Результаты исследования биоматериала сложно стандартизировать. Практически невозможно выровнять количество исследуемого материала для сравнения разных образцов между собой.
4. Результаты ПЦР не могут быть окончательными и основополагающими при постановке диагноза.

Анализ на бакпосев h. pylori представляет собой сложный, трудоемкий процесс. Для выращивания живой культуры требуются специальные условия. Как правило, подобные исследования проводят в научно-исследовательских центрах или учебных заведениях, имеющих клиническую лабораторию.

Посев не является 100%-но специфичным методом. Хеликобактер часто невозможно высеять, так как сдать биологический материал правильно не всегда удается. Он может не содержать колонии культивируемого микроорганизма. Также бактерии погибают при нарушении правил сбора материала или его транспортировки.

Поэтому данный метод применять для диагностики нецелесообразно. Его используют для научных экспериментов.

Это иммунохимический метод, основанный на распределении исследуемого образца между неподвижной и подвижной фазой и на свойстве антител связываться с антигеном избирательным образом.

Подвижная фаза, содержащая анализируемый материал, перемещается через неподвижную. При этом многократно повторяются акты сорбции (поглощения) и десорбции (выделения). Так происходит идентификация вещества (бактерий).

• простота и удобство, метод не требует дорогостоящего оборудования;
• достоверность тестов — 99%;
• доступность (более экономичный метод в сравнении с ИФА).

К недостаткам методики можно отнести тот факт, что результат анализа зависит от качества моноклональных антител, которые используют при производстве тест-систем, а также от концентрации бактерий в биоматериале, которые не всегда могут обнаруживаться.

Чтобы итоговые показатели анализа были достоверными, нужно знать, как правильно сдавать пробу.

Биоматериал собирают в чистую сухую емкость. В нем не должно содержаться примесей мочи или крови. Оптимальный вариант, если кал собран утром, перед доставкой в лабораторию. Если такой возможности нет, то можно взять и вечернюю пробу. При этом ее нужно хранить не более 10 часов в холодильнике при температуре, не превышающей 8 °C.

Перед тем как сдавать кал, за 72 часа до исследования следует отменить прием лекарственных препаратов. При нарушении перистальтики, наличии запоров пациенту назначается мягкое слабительное (лактулозу) для предупреждения ложного результата.

Для контроля лечения инфекции h. pylori анализ кала проводят не раньше чем через месяц после окончания антибактериальной терапии.

источник

После заражения микроб появляется во многих средах организма. Так что становится возможным анализ на хеликобактер пилори по биохимии крови, слюне, калу и так далее. Вопрос об этом решается по наличию соответствующих возможностей у местной лаборатории. Анализ крови на хеликобактер пилори проводится с целью выявить наличие антител IgG и некоторых других комплексов, формируемых под действием антигенов (CagA и другие). Расшифровка анализа ведётся по таблицам. Так норма в крови этих веществ известна.

Золотым методом у медиков считается вовсе не анализ крови на хеликобактер пилори. Рекомендуется сделать биопсию с последующим посевом образца на питательные среды. Это как результативный анализ хеликобактер, так и путь для определения чувствительности культуры к лекарственным препаратам.

В сыворотке быстро формируются антитела к хеликобактер пилори. Картина характеризуется количественным изменением интелейкинов:

1. Повышение числа IL-6, 8 и 10.
2. Снижение количества IL-2.

Однако в исследованиях, проведённых на подростках, обнаружено несоответствие картин у детей и взрослых. С 14 до 17 лет у людей не зафиксировано количественного изменения цитокинов. Подростки сдали кровь на хеликобактер, и не выявилось никаких различий по содержанию интерлейкинов, факторов некроза и интерферонов.

Цитокины пока ещё недостаточно изучены, так что диагностика в этом плане носит скорее предположительный характер. О чем и было сказано выше. Медики пока ещё выясняют соотношения между понятиями хеликобактер пилори, анализ крови, норма и цитокины.

Описываемые структуры представляют собой белковые комплексы, формируемые как ответ иммунной системы. По конфигурации цитокины близки к гормонам, а функции их пока что не изучены. Вот некоторые предположения на этот счёт:

1. Контроль за производством клеток крови и их дифференцированием.
2. Балансировка иммунной системы.
3. Регулировка процессов воспаления.
4. Поддержание нормального давления крови и её свёртывания.

Цитокины сегодня постоянно пополняются новыми представителями класса. Медики делят их на классы следующим образом:

• Интерлейкины.
• Интерфероны.
• Хемокины.
• Монокины.
• Лимфокины.
• Колониестимулирующие факторы.

Когда велось исследование новой тогда ещё инфекции хеликобактер пилори, медики обнаружили в цифрах повышенный фон IL-1 бета и IL-6 (на слизистой, а не в крови). Со временем стало ясно, что неадекватные реакции иммунной системы, которая отказывается бороться с инфекцией и постепенно переключается на аутоиммунные реакции, обусловлены формируемыми цитокинами. Указанные вещества проникали в цитоплазму клеток и межклеточное вещество.

Вот почему сегодня положительный анализ крови расшифровывается, как источник проблем в области сердечно-сосудистой системы, кожных заболеваний, анемии и других. При эрадикации helicobacter pylori в первую очередь фиксируется снижение уровня факторов некроза опухоли альфа, IL-8 и IL-1 бета.

Не все штаммы провоцируют подобные изменения, а те, которые содержат антиген CagA. IL-8 – провокатор воспаления в организме.

Когда медики столкнулись с проблемой замены биопсии ввиду сложности проведения процедуры, то выдумали сонм иных методик. Исследования на антитела в крови относятся к этому разряду. Анализ считается неинвазивным, хотя проводится при помощи шприца. Первоначально исследование на антитела напоминало то, что проводится для кампилобактера. Посредством перекрёстной реакции антигенов медики решали вопрос о присутствии их в сыворотке крови.

Что касается исследований на специфические факторы, например, CagA, то было вынесено решение о нецелесообразности такого подхода из-за плохой чувствительности.

Наличие IgG не указывает на присутствие инфекции. Удаётся обнаружить при анализе этот фрагмент в течение продолжительного времени. Из-за резкого снижения носителей инфекции в развитых странах удаётся определить наличие IgG у тех, кто давно уже получил негативный статус присутствия микроба.

Постепенно титры антител падают. Требуется парный анализ (до и после лечения), чтобы понять, каков диагноз. Потому единые цифры не удаётся выявить для отдельно взятого пациента. Снижение титров длится десятилетиями. Сегодня медики предлагают оценивать успех лечения по 50% снижению за 6 месяцев. Этот признак отличается повышенной чувствительностью (97%) и специфичностью (95%).

Сегодня тесты на иммуноглобулины IgA и IgM не одобряются в развитых странах. Поскольку показатели достоверности желают лучшего.

Помимо морфологических признаков, регистрируемых инструментальными методиками (гастрит, язва и так далее), выделяют клинические признаки, как например, сильный голод. Это обусловлено биохимическим составом крови – повышенным уровнем гастрина. Слабоположительный прирост уровня пепсиногена рассматривается как фактор риска развития язвы. Однако этот фактор указывает не на формирование заболевания, а выявляет в крови маркер присутствия хеликобактера.

Сначала этот признак отнесли к генетически заложенному в организме человека. Поскольку то же характерно при аутоиммунном гастрите. Однако повторный анализ ситуации показал, что бактерия – причина. Так что медики уровень пепсиногена и гастрина в крови считают весомым доводом в пользу выставляемого диагноза. Так при росте соотношения пепсиногенов I и II на 25% пора уже присмотреться. Фурута сообщает о специфичности этой методики в 90% случаев и чувствительности – 95%.

Гипотеза проверялась путём оценки титров IgG после лечения инфекции. Через 2 недели после излечения медики зафиксировали снижение гастрина. Однако, чтобы сдать тест крови по этой методики, придётся выполнить его дважды с интервалом 6-12 месяцев.

Результат оценивается, например, по той сумме, которую дают антитела к хеликобактер (иммуноглобулины А, М и G):

1. 0,8 – суммарные показатели указывают на негативный ответ о наличии диагноза.
2. 0,8 – 1,1 – требуется дополнительное исследование.
3. Свыше 1,1 – значит, что в желудке локализована инфекция.

Бактерия обнаруживается в испражнениях, так что анализ кала на хеликобактер – неотъемлемое исследования на бактерию. Однако стул анализируется на антиген. В США (штат Цинциннати) уже разработан комплект количественной оценки кала на наличие нужных молекул.

В основу заложен иммуноферментный анализ, чувствительность которого к антигену составляет 185 нг/мл. Подготовка сильно напоминает то, о чем было написано выше в отношении проб крови. На антитела из состава оборудования осаждаются антигены (посредством белковых механизмов идентификации). Однако это не даёт представления о том, как лечить инфекцию. То, что антиген в кале, показывает наличие бактерии в желудке.

Поликлональные антитела, связанные с пероксидазой, и пробу инкубируют в течение 1 часа. Затем материал наносится на лунки и выдерживается 10 минут. Связанный фермент изменяет цвет, регистрируемый спектрофотометрическими методами. Для фиксации результата (чтобы остановить процесс) добавляют стоп-раствор.

Результат по достоверности сравним с гистологическим исследованием биопсии. Медики даже не берутся сказать, какой самый точный. Однако ошибки (5%) все-таки встречаются. С биопсией это случается реже.

Медики обратили внимание на зависимость качества ингредиентов, поставляемых вместе с набором, а также значение профессионализма сотрудников лаборатории. Реактивы получают из подопытных кроликов, и стандартизация сильно осложнена из-за недостатка знаний о нужных технологиях.

Исследование кала по результативности сравнивается с тестом дыхательным. Этим путём проводится определение достоверности результатов, полученных по крови.

Помимо того, как сдаётся анализ, как берут пробу, выделяют пути оценки нужных параметров. Выше приведены сведения о биохимических и иммуноферментных разновидностях. Но точный – ПЦР. Это клонирование участков ДНК при помощи специальных реакций, что позволяет обнаружить бактерию.

Этот метод считается сегодня перспективным. В особенности, когда речь идёт о дизентерии. ПЦР на определение микроба в кале затруднено, так как наличие специфических компонентов препятствует протеканию реакции. Это мешает правильно понять результаты. К тому же, некоторые участки ДНК схожи с теми, что выявлены у других бактерий (которых в испражнениях много). Поэтому тест в этом случае не считается оптимальным, а стоит дороже, нежели дыхательный.

Однако ПЦР позволяет быстрее обнаруживать мутации ДНК, обусловливающие резистентность класса к тем или иным медицинским препаратам. Так что достоверность отходит на второй план перед перспективами, открывающимися исследователям (в научном, а не клиническом смысле).

Из сказанного понятно, что одно обследование дополняет другое. Они не альтернатива друг другу. Проверяйтесь по той и другой методике, чтобы правильно диагностировать заболевание. Этим методы дополняют собой дыхательный тест.

По большей части оба применяются уже после лечения для оценки успешности эрадикации. С целью определения титра, где повышен эффект присутствия антител. Если речь идёт о диагностике, то сдаётся в лаборатории кал. Поскольку так обнаруживается присутствие микроба в ЖКТ. Что касается крови, то наилучшие результаты получаются при двух разнесённых по времени пробах. Что далеко не во всех случаях уместно.

Чаще делается всё-таки дыхательный тест, который люди иной раз сдают в домашних условиях. А кровь при необходимости берётся медиками в клинике. Проверенным случаем считается тот, когда при ФГДС проводится взятие биопсии с последующим высеванием на питательную среду. Лучше пока что ничего не придумано.

А рассматриваемые виды – вспомогательные методики. Если речь идёт об экспресс-анализе, исследование кала помогает уточнить диагноз. Если о лечении – состояние крови характеризует результативность эрадикации. Желающим определить наличие микроба лучше начинать с дыхательного теста, как безобидного и простого в реализации.

источник

Положительный результат анализа кала на хеликобактер служит достоверным доказательством заражения человека. Исследование относится к прямым видам, когда выявляется конкретный возбудитель или его ДНК, а не последствия его воздействия или продукты распада (как при проведении иммунологических анализов крови).

Кроме того, достоинством способа является его неинвазивность — отсутствие необходимости применять для забора материала более или менее травматичные процедуры (прокола вены для взятия крови, введения дуоденального зонда).

Проведение анализа кала не связано с присутствием пациента, достаточно своевременной доставки в лабораторию испражнений. Это особенно важно для обследования детей.

Существуют разные методики выявления Helicobacter pylori, каждая обладает своими достоинствами и недостатками.

Лечащий врач определяет необходимость и выбор способа исследования. Немалое значение имеет доступность анализа для конкретного пациента из-за цены. Большая часть выполняется только в частных клиниках и лабораториях, поскольку требует дорогостоящего оборудования.

Цель исследования — выявление причинной связи заболевания с хеликобактер и назначение целевого курса лечения для избавления от возбудителя.

Название Helicobacter pylori переводится как «спиралевидная привратниковая». Оно привязано к характерной форме бактерии, локализации в области привратника (приграничная зона желудка с двенадцатиперстной кишкой). Микроорганизм имеет жгутики, помогающие ему перемещаться даже в густой слизи.

Хеликобактерия способна выдерживать кислую среду желудочного сока. Для жизнеобеспечения использует энергию молекул водорода, которую вырабатывают кишечные бактерии.

Наиболее известные ферменты хеликобактер:

К особенностям микроорганизма относятся:

• сложность выделения культуральным способом, поскольку хеликобактерия не растет на обычных питательных средах;
• длительный период отсутствия симптоматики, указывающей на заражение;
• возможность в «опасной» ситуации трансформироваться в шаровидную форму и покрываться защитной пленкой.

В кале спиралевидную форму обнаружить невозможно, поскольку кишечная среда неблагоприятна для существования хеликобактерии. Здесь не имеется нужной кислотности, мало кислорода, действуют сильные разрушающие ферменты желчи, поджелудочной железы. Поэтому в каловых массах находится кокковая форма бактерии.

Симптомы поражения желудка, вызванные хеликобактерией, могут быть минимальными или соответствовать клинике обострения заболевания. У пациента наблюдаются:

• вздутие живота;
• отрыжка;
• изжога;
• болевой синдром, особенно при обострениях весной и осенью;
• запоры или поносы;
• чувство тяжести в эпигастрии;
• снижение аппетита;
• резкое падение веса.

Показаниями к исследованию могут быть:

• необходимость проверки перед длительным курсом терапии нестероидными противовоспалительными лекарствами, ингибиторами протонной помпы, поскольку они снижают выработку соляной кислоты в желудке;
• признаки железодефицитной анемии;
• неясная тромбоцитопения;
• возможность заражения членов семьи;
• контроль проведенного курса антибиотикотерапии;
• выяснение связи с генетической предрасположенностью.

У ребенка о признаках заражения говорят жалобы на тошноту, неясные боли в животе, плохой аппетит и отказ от еды, частое обильное срыгивание, а также вздутие и урчание живота.

Выделение культуры возбудителя — микробиологический вид исследования. Классика способа требует посева материала на питательную среду, подсчета выросших колоний, исследования микроорганизма из колонии под микроскопом. Также необходимо проведения биохимических проб для изучения его свойств и дополнительного посева на среду с антибиотиками для выявления чувствительности к разным препаратам.

Анализ кала на хеликобактер пилори с помощью культурального способа провести сложно:

• посев должен проходить без доступа кислорода;
• можно выделить только спиралевидные формы, которые редко попадают в кал, а не кокковые;
• результаты реакции на чувствительность к антибиотикам in vitro (инвитро означает «на стекле, в пробирке») на практике оказываются обманчивыми и в некоторых случаях не совпадают с фактическим применением у пациента (in vivo), обнаруженный оптимальный антибиотик оказывается недостаточно эффективным;
• анализ требует длительного срока (7–10 дней) для полного проведения.

Суть иммунологического анализа — выявление комплексов антитело+антиген, в котором чужеродным агентом является хеликобактерия. Более привычно использование по исследованию крови. Но фактически косвенные признаки наличия антигена можно подтвердить по наличию в стуле, слюне, моче, у беременных в околоплодной жидкости.

В методиках используются готовые «помеченные» антитела. При обработке ими кала пациента, содержащего антигены (остатки хеликобактерии) возникает реакция соединения со стандартными антителами. Длительность исследования — сутки. Анализ кала на антиген хеликобактер назначается, если у пациента имеются любые симптомы нарушения пищеварения.

Наиболее распространенный вариант — первичный скрининг населения (обследование всех обратившихся или определенных групп), не имеющего специфических жалоб. В России не применяется из-за отсутствия достаточного количества иммунологических тестов в лабораториях поликлиник.

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) относится к молекулярно-генетической диагностике. С ее помощью выявляется не бактерия, а ее специфическая ДНК. Даже при малом количестве, в случае выздоровления или бессимптомного носительства метод позволяет с достаточной точностью связать изменения в организме с действием хеликобактер.

Методика рассчитана на искусственный синтез отдельных частей ДНК, удвоение и построение цепочки из 30 циклов. Процесс не происходит в случае отсутствия малейших остатков биоматериала. Для реакции необходим прибор ампликатор. Полимераза — фермент, ускоряющий процесс.

ПЦР кала назначают для подтверждения роли хеликобактерии в патологии и определения целесообразности специфической терапии:

• при эрозиях и язвах в желудке, пищеводе и двенадцатиперстной кишке;
• желудочно-пищеводном рефлюксе (заброс содержимого в обратном направлении);
• атрофическом поражении слизистой желудка;
• полипах;
• опухолях желудка;
• выявлении наследственной предрасположенности в случае наличия у родственников злокачественных опухолей органов пищеварения;
• контроле за результатами терапии антибиотиками.

Преимуществами ПЦР кала можно считать:

• высокую чувствительность и специфичность (соответственно определяются в 94% и 100%), реакция бывает положительной даже при наличии 10 бактерий;
• простоту проведения;
• безопасность для пациента, отсутствие травматичности при заборе материала;
• возможность определения ДНК как в спиралевидных, так и в кокковых формах хеликобактерии;
• выделение и изучение различных генетических модификаций, штаммов.

• не представляется возможность определения оптимального антибиотика по чувствительности;
• нет различий между протекающим острым заболеванием и остаточными явлениями после обострения, ДНК бактерий остаются в кале почти месяц после клинического выздоровления;
• чувствительность все-таки ниже, чем при исследовании биоптата из стенки желудка;
• сравнительно высокая стоимость;
• необходимость подготовки персонала и приобретения оборудования;
• положительная реакция в случаях загрязнения персоналом материала из чужого образца (контаминация извне).

Расшифровка результатов исследования — дело врача специалиста. Не стоит прибегать к самостоятельной трактовке или пользоваться услугами знакомых. Оценка проводится по комплексу признаков. При ПЦР выдается результат:

• отрицательный, если не выделился генотип хеликобактерии, обнаруживается в норме;
• положительный, если у пациента разгар заболевания или заражение было в анамнезе.

При бактериологическом исследовании:

• выявлено нулевое количество бактерий или хеликобактер отсутствует;
• если количество микроорганизмов больше нуля — подтверждается хелибактериоз;
• знак S означает чувствительность к заявленному антибиотику;
• R — указывает на устойчивость (резистентность) к препарату;
• I — чувствительность умеренная.

Бакпосев кала позволяет дать не только качественную, но и количественную характеристику хеликобактериального заражения. Для этого учитываются степени роста бактерии:

• 1 степень — наблюдается слабый рост на жидкой среде, на твердых образцах — роста нет;
• 2 степень — вырастает до 10 колоний;
• 3 степень — число выросших колоний достигает 100;
• 4 степень — распространенность и активность возбудителя очень активны, вырастает более 100 колоний.

Иммунологические тесты показывают отрицательный результат, если антиген возбудителя не определяется, положительный — при наличии хеликобактериоза. Достоверность иммунологического и культурального методов значительно уступает ПЦР, для их проведения необходима массивная распространенность возбудителя в фекалиях.

Где можно сдать анализ, укажет врач. Он же должен ознакомить пациента с правилами забора материала и подготовки. Некоторые частные клиники выдают посетителям напечатанную инструкцию «Как сдавать анализы». От соблюдения указанных условий зависит результативность исследования.

Общими правилами забора фекалий на выявления хеликобактер являются:

• прекращение приема антибактериальных средств за трое суток до анализа;
• контрольную сдачу анализа кала проводят через месяц после окончания курса лечения;
• некоторые анализы требуют за три дня до исследования перейти на диету без продуктов с пищевой клетчаткой, исключить соленья, алкогольные напитки;
• запрет на использование слабительных препаратов, ректальных свечей, если лечение требует ежедневного приема, нужно предупредить врача;
• собирать кал нужно в чистую лабораторную посуду (выдается в клинике или покупается в аптеке), желательно отбор проб производить из трех точек;
• непригодным считается кал с примесями слизи, гноя, крови, мочи;
• доставка материала в лабораторию должна быть обеспечена в первые 2 часа, при необходимости разрешается хранить в холодильнике не более суток при температуре от 2 до 8 градусов.

Пациент при диагностике не должен настаивать на изолированном исследовании кала. Используя дополнительные виды, врач повышает достоверность информации о заражении хеликобактерией.

Большой популярностью пользуются уреазные дыхательные тесты.

Неопровержимым видом обследования является цитологическое исследование образца слизистой желудка, полученного при биопсии во время фиброгастроскопического исследования. При высокой разрешающей возможности микроскопа лаборант видит окрашенную хеликобактерию.

Фиброгастроскопическая картина самой слизистой с характерными эрозиями, атрофией, изъязвлением указывает на косвенные признаки присутствия возбудителя в желудке. Рентгенологическая диагностика также позволяет по нарушениям в направлении складок, контуров желудка судить об органической патологии, вызванной хеликобактерией.

По итогам анализов врач может ввести пациента в группу риска с повышенной вероятностью заболевания язвой желудка, злокачественными опухолями. Предварительное применение специфического лечения позволяет снизить степень риска. При выборе медицинского учреждения для выполнения исследований на платных условиях нужно посоветоваться по поводу репутации и ответственности его сотрудников.

источник

В настоящее время язвенной болезнью желудка и двенадцатиперстной кишки страдает более 10% населения развитых стран, что делает проблему диагностики данного заболевания актуальной для современного здравоохранения. Анализ кала на хеликобактер является одним из основных диагностических методов выявления ассоциации язвенной болезни верхних отделов пищеварительного тракта с наличием бактериального агента, оказывающего активное ульцерогенное действие.

В настоящее время применяется несколько самостоятельных диагностических методик выявления бактерий, ассоциированных с язвенной болезнью желудочно-кишечного тракта. Верификация наличия Хеликобактер пилори в слизистой оболочке верхних отделов пищеварительной системы позволяет с высокой долей вероятности установить правильный клинический диагноз и назначить соответствующее заболевание, а значит, адекватное лечение патологии желудка. В гастроэнтерологической практике применяются следующие виды диагностики кала на предмет наличия в нём хеликобактерии:

• Молекулярная диагностика.
• Культуральный анализ или микробиологическое исследование биологического материала.
• Иммунологические методы исследования.

Каждый из вышеописанных типов анализа кала обладает собственными положительными и отрицательными сторонами. Далее будут более подробно разобраны основные диагностические методики и сравнение их чувствительности в верификации основного диагноза.

Исследование при помощи полимеразной цепной реакции (ПЦР) для проверки кала на наличие антигена хеликобактерии. Данный метод является одним из самых современных и высокоспецифичных. Точность и достоверность молекулярного анализа составляет от 93 до 97%, так как технология проведения данного исследования предполагает высокую чувствительность диагностических реагентов к исследуемому материалу.

Чувствительность метода полимеразной цепной реакции настолько высокая, что обнаружить возбудителя желудочно-кишечного заболевания можно ещё до развития симптоматики и развёрнутой клинической картины заболевания.

Метод высеивания бактерий на питательных средах, или иначе – культуральная диагностика, относится к классическим диагностическим исследованиям. Посев биологического материала на питательную среду с целью высеивания хеликобактер позволяет так же, как и иммунологические и молекулярные методы, добиться высокой достоверности результатов, однако, требует кропотливого труда микробиолога, ведь на подтверждение результатов исследования уходит от 4-5 дней до нескольких недель. Столь длительный период ожидания возникает в результате необходимости выращивания колоний бактерий, находящихся в биологическом материале. Важно понимать, что рост хеликобактер на питательных средах занимает длительное время и требует кропотливого труда от микробиолога.

К иммунологическим методам относятся иммуноферментный анализ, или ИФА, а также вестрн-блот (иммуноблот):

• Иммуноферментный анализ – это диагностическое исследование подразумевает выявление антигенных компонентов хеликобактерии в организме пациента, который обследуется. Так как организм любого живого существа, в том числе и человека, вырабатывает на любой антиген специфические иммуноглобулины или антитела, то и методика основана на их выявлении. Если клиническая картина заболевания желудочно-кишечного тракта остаётся неясной, то проводится анализ биологического материала на предмет наличия в нём антител к Хеликобактер пилори. Также иммуноферментный анализ может быть назначен с профилактической целью, если обследуемый находился в контакте с больными лицами.
• Вестрн-блоттинг – альтернатива проведению иммуноферментного анализа. Цель исследования аналогичная – выявление антител к хеликобактер, однако если при ИФА используются специальные ферменты, которые способны воспринимать специфичные комплексы антиген-антитело, то при иммуноблоттинге прибегают к методике электрфореза белков в геле. Иммуноблоттинг обладает так же, как и ИФА, высокой степенью специфичности, однако, позволяет проводить только качественный анализ, в то время как иммуноферментный анализ может показать количественные данные.

Выбор методики исследования зависит не только от желания больного, но и от материально-технического состояния лаборатории или клиники, где проходит лечение, однако, не стоит беспокоиться зря, ведь современные методы обладают примерно одинаковой достоверностью результатов.

Исследование кала на наличие в нём Хеликобактер пилори проводится в случаях, когда у пациента имеется неясная картина заболевания верхних отделов желудочно-кишечного тракта. Например, к таким заболеваниям можно отнести:

• Хронический гастрит.
• Рецидивирующая язвенную болезнь желудка и двенадцатиперстной кишки или её злокачественное течение.
• Дуаденогастральная рефлюксная болезнь.
• Стеноз привратника желудка.

Вышеописанные заболевания могут наблюдаться у больного, как изолированно, так и в различных комбинациях. Чаще всего в клинической практике наблюдаются смешанные варианты патологии верхних отделов пищеварительного тракта.

В 80% случаев язвенная болезнь является ассоциированной с Хеликобактер пилори, таким образом, полноценная патогенетическая терапия может быть только с применением в лечении антибактериальных препаратов, которые обладают и выраженными побочными эффектами. Для того чтобы определиться с направлением консервативной терапии гастроэнтерологического больного, необходимо подтверждение или исключение бактериального поражения слизистой желудочно-кишечного тракта.

ПЦР-диагностика – самый современный диагностический метод, он позволяет определить наличие патогенного агента даже в самых ничтожных концентрациях, а результаты данных обладают самой высокой степенью специфичности. Использование полимеразной цепной реакции является высокотехнологичным процессом и требует серьёзных материальных затрат, так что наряду с высокой информативностью результатов данный диагностический метод является и очень дорогим. В диагностике хеликобактер ПЦР можно применять, но тот же самый иммуноблоттинг даст сравнимые результаты, но не потребует серьёзных материальных затрат.

Подготовка к проведению анализа кала на предмет наличия в нём Хеликобактер пилори требует подготовки от исследуемого пациента. За неделю или хотя бы несколько дней до сдачи анализа стоит воздержаться от употребления некоторых продуктов питания и веществ, к ним относятся:

• Красящие продукты, такие как свекла, морковь, виноград, смородина и вино.
• Продукты с большим содержанием клетчатки, например, отруби или капуста.

Также нужно отказаться от любых продуктов, которые способствуют газообразованию и усилению моторной функции желудочно-кишечного тракта.

Сдавать биологический материал, в данном случае каловые массы, необходимо в специальном контейнере или любой чистой герметичной ёмкости. Сдавать кал необходимо правильно! Для этого нужно знать несколько правил, которые не дадут испортить результаты исследования.

Материал должен быть собран сразу в ёмкость, минуя унитаз, так как в него могут попасть посторонние бактерии и вещества, такие как дезинфицирующие средства. Посторонние вещества могут испортить результат анализа кала. Количество биологического материала, достаточное для проведения полноценного исследования, составляет не менее 1/3 от контейнера объёмом в 150-200 мл.

Сбор биологического материала нужно осуществить незадолго до сдачи анализа в лабораторию. Сдать анализ можно в любое время, он не зависит от приёма пищи и времени дня.

Важно отметить, что материал должен быть как можно быстрее доставлен в лабораторию для проведения исследования, так как результативность будет прямо пропорциональна свежести материала.

Результат исследования будет зависеть от методики выявления хеликобактерии. Результат может быть отрицательным, положительным и неопределённым. Конечно же, норма анализа – отрицательный результат. Помимо этого, при проведении иммунологического анализа можно определить напряжённость иммунитета и количество специфических антител в организме больного.

Диагностика кала при помощи иммунологического или молекулярного исследования занимает не более двух дней. Как правило, лаборатория выдаёт результат на следующий день после сдачи анализа.

Отдельно стоит отметить, что проведение культурального теста в настоящее время применяется всё реже, так как данный диагностический метод занимает длительный промежуток времени.

Расшифровка результата даёт понять лечащему врачу, в каком направлении необходимо строить лечебный план, и есть ли необходимость в антибактериальной терапии.

источник

Исследование антигена H.pylori в кале — идеальный способ диагностики. Хеликобактер пилори относится к числу самых опасных для человека бактерий. Патогенный микроорганизм способен провоцировать серьезные отклонения в функциональном состоянии пищеварительного тракта и организма в целом. Бактерии данного типа отличаются повышенной устойчивостью к многочисленным факторам.

Результат терапии напрямую зависит от правильно составленной схемы лечения. Для определения чувствительности микроорганизмов к определенным видам антибактериальных препаратов используются специальные анализы каловых масс. Каждая методика имеет свои достоинства и недостатки. Для получения точных результатов рекомендуется провести несколько тестов.

Хеликобактер пилори длительное время присутствует в организме бессимптомно. Признаки нарушения функционального состояния желудочно-кишечного тракта проявляются только при активной жизнедеятельности бактерий. Одним из основных провоцирующих факторов является снижение иммунитета.

При наличии у пациента определенных заболеваний или отдельных симптомов процедура анализа на хеликобактериоз становится обязательной.

Показания к анализу:

• проведение антибактериальной терапии (для контроля результатов лечения);
• эрозии и язвы двенадцатиперстной кишки или желудка;
• симптомы нарушения функционального состояния пищеварительного тракта (регулярные запоры или диарея, метеоризм, болевые ощущения различной локализации);
• генетическая предрасположенность к заболеваниям, провоцируемым хеликобактер пилори (злокачественные опухоли органов пищеварения, хронические патологии пищеварительного тракта);
• прогрессирующая атрофия слизистых оболочек желудка;
• регулярные болевые ощущения в желудке после употребления пищи;
• железодефицитная анемия;
• резкое снижение массы тела в сочетании с другими симптомами отклонений в функциональном состоянии пищеварительного тракта;
• наличие крови в рвотных или каловых массах;
• выявленные новообразования и полипы в пищеварительной системе;
• язва пищевода или гастроэзофагеальный рефлюкс.

Рекомендуем посмотреть видео:

Проведение процедуры исследования каловых масс на наличие патогенных бактерий подразумевает соблюдение ярда правил. Если подготовка к анализу или сбор биологического материала будут совершены неправильно, то результаты тестов могут показать ложный результат. Каловые массы имеют определенный срок хранения. Если материал будет доставлен в лабораторию с нарушением сроков, то тестирование также может стать недостоверным.

Этапы сбора кала на анализ.

Подготовительные меры для анализа кала на хеликобактер пилори включают в себя рекомендации по соблюдению определенного режима питания, а также корректировку медикаментозной терапии (при ее наличии). Если прием назначенных препаратов временно прекратить не получается, то данный нюанс обязательно сообщается врачу.

Вещества, содержащиеся в антибиотиках и других категориях медикаментов, могут стать причиной неправильной расшифровки данных исследования.

Рекомендации:

• Медицинские одноразовые контейнеры для сбора кала для анализа. за несколько дней до процедуры следует прекратить прием слабительных или антацидных средств;
• в течение месяца до проведения теста пациент не должен принимать антибактериальные препараты;
• нельзя в течение нескольких дней употреблять продукты с содержанием грубой клетчатки (свекла, капуста, редис, редька);
• в течение трех дней до процедуры из рациона исключаются крепкий чай, кофе, острые специи и приправы, овощи и фрукты красного или оранжевого цвета);
• блюда в течение трех дней перед анализом рекомендуется готовить только методами варки, тушения или паровой обработки;
• несколько дней нельзя употреблять алкогольные напитки.

Стерильную емкость для сбора биологического материала можно приобрести в аптеке. При покупке такой баночки исключается наличие загрязнений. В качестве альтернативы можно использовать другие варианты тар (например, емкости от детского питания). Важным нюансом является их стерильность. Емкости должны быть максимально очищены от любых видов загрязнений.

Запрещено собирать каловые массы с памперса или из унитаза. Идеальным вариантом является забор биологического материала из горшка или с полиэтиленового пакета. Емкость для хранения кала должна быть заполнена на одну третью часть. К таре обязательно прикрепляется заполненное направление.

Емкость с каловыми массами доставляется в лабораторию как можно быстрее. Если возможность быстро направить материал для анализа отсутствует, можно воспользоваться двумя вариантами хранения. В первом случае каловые массы однократно замораживаются. Во втором — хранятся не более двух суток при температуре не выше 4 градусов.

Назначением конкретного анализа на хеликобактериоз занимается врач. Специалист учитывает индивидуальную клиническую картину состояния здоровья пациента. Сдать анализы на хеликтобактериоз можно самостоятельно, если возникают подозрения на функциональное отклонение пищеварительного тракта.

Отклонение показателей анализа может свидетельствовать о наличии патологии в органах ЖКТ.

При молекулярном анализе выявляется специфическая ДНК бактерии. Код дублируется на специальном аппарате. При достижении бактерией нужного размера, ее сравнивают с этанолом. Если части ДНК совпадают с оригиналом, то результат теста положительный (хеликтобактериоз выявлен). Методика отличается высокой степенью информативности.

Бактериальный посев (или культуральный анализ) относится к категории микробиологических методов исследований. В процессе поведения процедуры биологический материал помещается в среду, которая является максимально благоприятной для размножения патогенных микроорганизмов. Через неделю каловые массы изучаются с помощью микроскопа.

Для идентификации хеликобактер пилори учитываются окраска бактерий и их способности вступать в определенные реакции.

Особенности методики:

• процедура позволяет выявить патологический антиген;
• в процессе изучения биологического материала проводится тест на чувствительность к антибактериальным препаратам;
• результаты исследования позволяют подобрать максимально эффективную схему терапии.

Главной целью проведения иммунологических тестов при выявлении хеликобактер пилори является определение комплексов антиген + антитело. Для исследования используются помеченные антитела. Вступая в реакцию с калом, такие вещества подвергаются определенным изменениям. Антитела способны определить наличие в каловых массах не только патогенные бактерии, но и их части, а также продукты жизнедеятельности.

ПЦР-диагностика имеет ряд достоинств и недостатков. Некоторые виды патогенных бактерий можно выявить только с помощью данной методики (например, цитотоксичные типы микроорганизмов). Сбор материала для анализа не подразумевает причинение боли или дискомфорта пациенту. Процедура показывает максимально достоверные результаты.

Преимущества методики: ПЦР-анализ один из самых достоверных методов диагностики, который может выявлять разные формы хеликобактерии.

• процедура позволяет выявить различные штаммы патогенных бактерий;
• метод отличается высокой степенью чувствительности;
• анализ безопасен для пациента (для сбора материала не применяются медицинские инструменты);
• неинвазивность и простота процесса забора биологического материала;
• высокая степень специфичности теста;
• метод позволяет определить не только спиралевидные, но и кокковые типы бактерий.

Высокая степень чувствительности теста является его одновременным достоинством и недостатком. Анализ с точностью определяет наличие бактерий, но при загрязнениях биологического материала или тары, результаты процедуры могут быть ложноположительными.

Для исключения ложных показателей следует соблюдать все правила сбора каловых масс для проведения их исследования.

Другие недостатки:

• относительно высокая цена процедуры;
• отсутствие возможности определить чувствительность бактерии к антибактериальным препаратам;
• более низкий показатель чувствительности в сравнении с процедурой исследования биоптата слизистой оболочки желудка.

Процедуры исследования каловых масс осуществляются вне организма пациента («ин витро» — «в стекле», «в пробирке»). Для обнаружения микроба такие методы являются максимально точными и эффективными. Однако процедуры имеют некоторые недостатки. Некоторые процессы, происходящие в человеческом организме нельзя воссоздать искусственным способом.

Анализы могут показать уровень чувствительности бактерий к определенным антибиотикам, но стопроцентной информативности такие тесты не дают.

Уровень достоверности результатов

Расшифровка результатов исследования

Положительный — выявлен хеликтобактериоз; отрицательный — не выявлено ни одного типа хеликобактер пилори

Бактериологический анализ на чувствительность к антибактериальным препаратам

Низкая — на выявление антигена

Высокая — на определение чувствительности

Количество бактерий 0 — результат отрицательный, бактерии не выявлены; показатели больше 0 — определен хеликтобактериоз; R — устойчивость к определенному антибиотику; I — умеренная степень чувствительности к антибиотику; S — высокая степень чувствительности к антибиотику

Положительный — выявлен хеликтобактериоз; отрицательный — патогенная бактерия не выявлена

• существует несколько способов определения хеликобактерии в каловых массах лабораторным методом;
• каждый вариант анализов имеет свои достоинства и недостатки;
• для получения максимально точных результатов рекомендуется сдать несколько анализов разных типов;
• каловые массы для анализа собираются с учетом ряда правил;
• за несколько дней до процедуры из рациона исключается грубая клетчатка, жареные, жирные блюда, острые специи и приправы, алкоголь и любые плоды оранжевого или красного цвета;
• емкость для кала должна быть стерильной (оптимальный вариант — аптечные тары).

Видео на тему: Чем опасна бактерия Хеликобактер Пилори?

источник