Анализы на тромбоциты ручной подсчет

Дата публикации статьи: 28.06.2018

Дата обновления статьи: 26.11.2018

Автор: Дмитриева Юлия (Сыч) — практикующий врач-кардиолог

Анализ тромбоцитов по Фонио — это распространенный метод микроскопического исследования, позволяющий получить наиболее информативные и точные данные.

Рассмотри в чем суть этого анализа, как он проводится, какие преимущества и недостатки у него существуют и каковы нормальные показатели.

Тромбоциты — это самые мелкие безъядерные элементы крови сферической формы, образующиеся в процессе синтеза из крупных клеток (мегакариоцитов) костного мозга.

Они играют важнейшую роль в механизмах первичного и вторичного гемостаза, при повреждении сосудов.

Тромбоциты стоят на первой линии обороны при возникновении кровотечений.

Более того, они являются источником ферментов (факторов регенерации и роста), которые способствуют следующим процессам:

• стимулируют клеточный синтез;
• регенерируют ткани;
• содействуют эластичности стенок артерий;
• участвуют в регуляции уровня проницаемости клеточных мембран.

Как и лейкоциты, тромбоциты имеют свой цикл жизнедеятельности (не более 7 дней) и деление по фазе созревания — молодые, зрелые, старые. Однако процесс старения у них выражен наиболее ярко.

В норме у здорового человека уровень зрелых клеток должен колебаться в пределах 95%.

Отклонения от нормы указывают на следующее:

• высокая концентрация молодых клеток — развитие многочисленных нарушений в кровеносной системе;
• присутствие в крови дегенеративных (старых) клеток — дестабилизация производства и переработки кровяных телец.

По количеству тромбоцитов можно определить состояние свертывающей системы человека. Превышение нормы носит название тромбоцитоз, понижение — тромбоцитопения.

Метод Фонио — это анализ крови из пальца на основе микроскопии мазка. Количество тромбоцитов высчитывается по формуле относительных отклонений от абсолютного суммарного значения эритроцитов.

Анализ проводят без ограничений по возрасту или половому признаку, поэтому он разрешен даже для новорожденных и беременных женщин.

Суть методики — точный подсчет пониженного или повышенного числа тромбоцитов, позволяющий заранее выявить развитие патологий различного происхождения. Результаты метода используют для коррекции терапевтического лечения.

Сегодня существует много других, даже более технологичных, исследований. Однако в большинстве случаев врачи прибегают именно к методу Фонио, который имеет ряд существенных преимуществ.

Таблица с указанием плюсов метода:

Единственным недостатком метода считается плохое качество мазка или неравномерность распределения кровяных клеток по лабораторному стеклу, в результате чего иногда отмечаются большие погрешности.

На достоверность результатов может повлиять и неграмотность или халатность лаборанта, а также оборудование для исследований низкого качества.

Помимо этого, чтобы получить достоверные данные подсчета тромбоцитов по методу Фонио, пациенту необходимо соблюдать простые правила подготовки к сдаче крови:

• В течение 3 дней необходимо воздержание от спиртного, жирного, жареного.
• Сдавать кровь нужно натощак, с последнего приема пищи и жидкости должно пройти не менее 8 часов.
• Накануне вечером необходимо отказаться от любых физических нагрузок.
• На забор крови пациент приходит в утренние часы в строго установленное время.

При получении сомнительного результата анализ проводится 2-3 раза с интервалом не более 5 суток.

Для определения тромбоцитарного индекса используют следующие реактивы:

• магния сульфат — стерильный 14%-й раствор;
• пигмент Романовского-Гимзы (красящее вещество);
• фиксатор (Лейшмана или Май-Грюнвальда).

1. Палец вытирается насухо, прокалывается.
2. На место прокола наносится капля раствора сульфата магния для смешивания с кровью.
3. Из кровяной смеси делают мазки, которые сушат и окрашивают.

Подсчет тромбоцитов проводится по формуле: У = А х В/1000.

Где А — абсолютное значение эритроцитов, В — количество тромбоцитов.

1. В мазке вычисляют 1000 эритроцитов + выявленные тромбоциты.
2. Для получения абсолютного значения полученная величина умножается на количество эритроцитов на 1 мкл и делится на 1000.
3. Полученная сумма выражается в промилле.

Количество тромбоцитов во многом зависит от возраста и факторов, влияющих на изменение объема крови.

У грудничков диапазон значений довольно широкий, так как он определяется по общему состоянию ребенка. Относительно стабильными показатели становятся после 4 лет.

У представительниц слабого пола на показатели влияет то, на какой день и даже в какое время суток наступает менструальный цикл. От него зависит скорость выработки тромбоцитов.

Во время беременности и в период менструации показатели могут снижаться до 150 тыс/мкл, что считается нормой. Однако значение ниже этого уровня или постоянно сниженные показатели могут свидетельствовать о патологическом состоянии.

У мужчин процесс обновления клеток происходит с постоянной регулярностью. В связи с чем нижняя граница нормы у них выше, чем у женщин.

Нормальные значения у взрослых указаны в этой таблице:

У детей показатели будут следующими:

При отклонениях от нормы назначают повторный анализ. Если результаты подтверждаются неоднократно, то это говорит о развитии патологии.

Превышение нормы (тромбоцитоз или тромбофилия) происходит на фоне следующих деструктивных состояний:

• нарушение работы костного мозга;
• менингококковая инфекция;
• наличие в организме воспалительного процесса;
• некроз в тканях;
• развитие онкологии (лимфогранулематоз, миелолейкоз);
• прием медикаментозных средств;
• после удаления селезенки;
• серьезные кровопотери после открытой травмы или хирургической операции (стентирование, коронарное шунтирование);
• дисфункция работы печени или почек (эритроцитоз, рак);
• туберкулез или пневмония;
• хронические заболевания кроветворной системы;
• общие факторы — физические перегрузки, обезвоживание, отравление, стрессы.

Если тромбоциты повышены у женщины в период беременности, то это опасное состояние, угрожающее серьезными осложнениями:

• токсикоз ярко выраженной формы;
• выкидыш (произвольное прерывание беременности);
• задержка развития у плода;
• варикозное расширение вен;
• тромбоз (или тромбофлебит) нижних конечностей;
• тромбоэмболия (закупорка кровеносного сосуда мозга, сердца, легочной артерии и т. д.), на фоне которой развиваются инфаркты, инсульты и даже гангрены.

Низкие показатели или тромбоцитопения часто наблюдается у недоношенных малышей. Подобные аномалии обычно возникают на фоне недоразвития органов или систем.

Факторы, способствующие снижению тромбоцитов у новорожденных:

• инфицирование плода внутри утробы;
• несовместимость группы крови у матери и плода;
• асфиксия во время родов;
• наследственная анемия.

Причины понижения тромбоцитов у взрослых людей и детей старше 4 лет:

• облучение (радиация);
• интоксикация ядами или химией (свинцом);
• болезни крови;
• злокачественная онкология;
• аллергии сложного типа;
• коллагенозы;
• заболевания печени (цирроз, гепатит);
• после гемодиализа;
• дисфункции щитовидной железы;
• инфекции различной этиологии;
• аутоиммунные патологии;
• обильные кровопотери;
• хронический нефрит;
• алкоголизм;
• наследственность.

Недостаток тромбоцитов часто сопровождается следующими симптомами:

• частые кровотечения из носа;
• подкожные и внутренние геморрагии;
• петехии (точечные геморрагии);
• обширные гематомы или кровоподтеки;
• обильная менструация, которая длится больше обычного.

Для установки точного диагноза требуется дополнительное инструментальное обследование, а также посещение врачей узкого профиля.

Основной метод нормализации уровня содержания тромбоцитов — провести лечение заболевания, которое явилось причиной отклонений.

Пониженный уровень повышают при помощи:

• приема препаратов, стимулирующих выработку телец;
• приема витаминов (К, В12, фолиевую кислоту, железо);
• применения народных средств — крапива в любом виде (отвар, сок, настой), кунжутное масло, настойка вербены.

При недостатке тромбоцитов рекомендуется соблюдать лечебную диету.

Нужно исключить из рациона:

• лук, чеснок, острые специи, имбирь;
• маринады и соленья;
• жирную рыбу;
• темный виноград.

И включить в ежедневное меню:

• каши (греча, рис, чечевица);
• крольчатину, индейку;
• говяжий язык, сердце, печень;
• орехи, зелень, зеленый чай.

При повышенных показателях рекомендуется выполнение следующих пунктов:

• прием препаратов, включающих ацетилсалициловую кислоту;
• пропить витаминный комплекс на основе магния;
• исключить — шиповник, бананы, манго, гранат;
• включить в рацион — клюкву, облепиху, свеклу, томаты;
• потреблять достаточное количество жидкости.

При отклонении в ту или другую сторону рекомендуется отказаться от алкоголя (временно), избегать стрессов и физических перегрузок, заниматься лечебной физкультурой.

источник

• А Абакан
• Азов
• Аксай
• Алушта
• Апрелевка
• Аргун
• Ардон
• Арзамас
• Армянск
• Архангельск
• Архипо-Осиповка
• Астрахань
• Б Баксан
• Балаково
• Балашиха
• Балашов
• Барнаул
• Батайск
• Бахчисарай
• Белгород
• Белогорск
• Беслан
• Бишкек
• Бор
• Боровск
• Бронницы
• Брянск
• Бузулук
• Буйнакск
• Булатниковское
• Быково
• В Видное
• Вилино
• Владикавказ
• Владимир
• Волгоград
• Волжский
• Волоколамск
• Вольск
• Воротынск
• Воскресенск
• Всеволжск
• Вязники
• Вязьма
• Г Гай
• Гвардейское
• Георгиевск
• Глубокий
• Глухово
• Грозный
• Гудермес
• Д Дедовск
• Дербент
• Джанкой
• Дзержинск
• Дзержинский
• Дмитров
• Долгопрудный
• Домодедово
• Дрожжино
• Дубна
• Е Евпатория
• Егорьевск
• Екатеринбург
• Елец
• Елизово
• Ессентуки
• Ж Железноводск
• Жуков
• Жуковка
• Жуковский
• З Заречный
• Звенигород
• Зеленоград
• Златоуст
• И Иваново
• Ивантеевка
• Ижевск
• Избербаш
• Икша
• Истра
• Ишим
• Ишимбай
• Й Йошкар-Ола
• К Казань
• Калининград
• Калуга
• Каменск-Уральский
• Каменск-Шахтинский
• Камешково
• Карабулак
• Каспийск
• Керчь
• Киевский
• Кимовск
• Кимры
• Киров
• Кировское
• Кисловодск
• Климовск
• Ковров
• Ковылкино
• Когалым
• Кокошкино
• Коломна
• Кольчугино
• Коммунарка
• Кондрово
• Коркмаскала
• Королев
• Кострома
• Котельники
• Красногвардейское
• Красногорск
• Краснодар
• Красноперекопск
• Красноярск
• Кременки
• Кстово
• Кубинка
• Курск
• Л Лангепас
• Ленино
• Лесной городок
• Липецк
• Лобня
• Лопатино
• Лыткарино
• Люберцы
• Людиново
• М Майский
• Малгобек
• Махачкала
• Мегион
• Миасс
• Минеральные воды
• Минусинск
• Мисайлово
• Михайловск
• Михнево
• Можайск
• Моздок
• Москва
• Московский
• Муром
• Мытищи
• Н Назрань
• Нальчик
• Наро-Фоминск
• Нарткала
• Невинномысск
• Нижневартовск
• Нижнегорский
• Нижний Новгород
• Нижний Тагил
• Новоивановское
• Новокузнецк
• Новопавловск
• Новороссийск
• Новосибирск
• Новотроицк
• Новочеркасск
• Ногинск
• Нягань
• О Обнинск
• Одинцово
• Октябрьский
• Омск
• Орел
• Оренбург
• Орехово-Зуево
• Орск
• Осинники
• П Пенза
• Первомайское
• Первоуральск
• Петропавловск-Камчатский
• Подольск
• Починок
• Прохладный
• Псков
• Путилково
• Пушкино
• Пущино
• Пятигорск
• Р Раздольное
• Раменское
• Реутов
• Рославль
• Ростов-на-Дону
• Рощинский
• Рузаевка
• Рыбинск
• Рязань
• С Саки
• Салехард
• Самара
• Санкт-Петербург
• Сапроново
• Саранск
• Саратов
• Севастополь
• Сергокала
• Серебряные Пруды
• Серпухов
• Симферополь
• Смоленск
• Советский
• Совхоз имени Ленина
• Солнечногорск
• Сочи
• Ставрополь
• Старая Купавна
• Старый Крым
• Старый Оскол
• Стерлитамак
• Стрелецкое
• Строитель
• Струнино
• Ступино
• Суворов
• Судак
• Сунжа
• Сураж
• Сургут
• Сухиничи
• Сходня
• Т Тамбов
• Таруса
• Тбилисская станица
• Тверь
• Терек
• Тобольск
• Токмок
• Тольятти
• Томск
• Троицк
• Тула
• Тюмень
• У Узловая
• Улан-Удэ
• Ульяновск
• Успенское
• Уфа
• Ухта
• Ф Федоровский
• Феодосия
• Фрязино
• Фурманов
• Х Ханты-Мансийск
• Хасавюрт
• Химки
• Ц Цхинвал
• Ч Чебоксары
• Челябинск
• Череповец
• Черкесск
• Черногорск
• Чехов
• Чита
• Ш Шали
• Шатура
• Шебекино
• Шелехов
• Шилово
• Шира
• Щ Щелково
• Э Электросталь
• Энгельс
• Ю Южно-Сахалинск
• Я Ялта
• Ярославль
• Ясногорск

• Пересчет единиц изменения

  Код по бланку

  Наименование анализов

  Срок исполнения

  Цена в руб.

• 3.7.

  Подсчет тромбоцитов по методу Фонио

  1 день

  220

(назначать только вместе с исследованием «Общий анализ крови»)

источник

Клинический анализ крови с подсчетом тромбоцитов проводится в следующих случаях:

• диспансеризация человека с проведением общего анализа крови для профилактики появления различных заболеваний;
• симптомы повышенного количества тромбоцитов, вследствие которых может произойти закупорка сосуда (повышенное давление, онемение конечностей);
• клинические проявления сниженного количества кровяных пластинок (постоянное появление синяков и гематом, бледность кожных покровов);
• проведение повторного анализа, если первый тест показал нарушение.

Во всех перечисленных случаях необходимо обратиться к врачу для проведения общего осмотра. Он назначит методику, которая будет наиболее приемлемой для пациента, чтобы правильно поставить диагноз.

Выделяют три методики для подсчета кровяных пластинок в капиллярной крови:

• использование камеры Горяева;
• методика по Фонио;
• использование полуавтоматического анализатора.

Все методики применяются в клинических учреждениях. Каждая из них имеет положительные и отрицательные стороны. Возможен подсчет тромбоцитов ручным методом для просмотра их формы и размера. Если врач будет сомневаться в точности результата, он может назначить подсчет клеток с помощью полуавтоматического анализатора.

Унифицированными является методики, которые считаются более точными. Для подсчета кровяных пластинок таким тестированием является методика по Фонио и применение камеры Горяева.

С помощью анализов можно не только почитать точное число клеток, но и изучить их строение. Возможно определение раковых атипичных клеток.

К анализам с ручным подсчетом тромбоцитов относятся использование камеры Горяева и метода по Фонио. Для обоих исследований осуществляется подсчет тромбоцитов в мазке под микроскопом. Полученные цифры подставляют в формулу, с помощью которой результат из 1 мкл переводится на 1 л крови.

Для подсчета тромбоцитов по методике Горяева необходимо приготовить раствор, состоящий из следующих веществ:

• реактив 1 (кокаина гидрохлорид 3 г, натрия хлорид 0,25 г, фурацилин 0,25 г, дистиллированная вода 100 мл);
• Реактив 2 (раствор оксалата аммония 1%).

Чаще всего применяют раствор оксалата аммония. Он эффективно уничтожает эритроциты, возможен свободный подсчет кровяных пластинок.

Рекомендуется для исследования выбирать венозную кровь. При использовании капиллярной биологической жидкости повышается риск образования сгустка. Если произойдет агрегация тромбоцитов, корректный подсчет количества тромбоцитов будет невозможен. К крови добавляют раствор ЭДТА, который препятствует образованию сгустка.

В пробирку наливают 0,02 мл крови, добавляют 4 мл реагента 1 или 2. Получившуюся массу перемешивают. В течение 30 минут должен произойти полный гемолиз красных кровяных телец. Пипеткой отбирают полученную жидкость, добавляют в камеру Горяева.

Внимание! Для осаждения кровяных пластинок камеру Горяева с жидкостью помещают во влажную среду. Кладут счетную камеру под микроскоп и подсчитывают форменные элементы.

Тромбоциты считают в 25 больших квадратах. Для этого микроскоп перемещают слева направо, вниз, справа налево. Кровяные пластинки под микроскопом выглядят, как небольшие фиолетовые точки.

Полученное значение подставляют в формулу подсчета тромбоцитов в мазке:

• X – число тромбоцитов на 1 мкл биологической жидкости;
• a — количество тромбоцитов в 25 квадратах;
• 200 – разведение крови;
• 25- количество квадратов;
• 1/250 – объем одного квадрата.

После завершения методики все используемые приспособления дезинфицируют с помощью этилового спирта.

Для методики используют капиллярную кровь, взятую из пальца. Ее помещают в капилляр, добавляют один из следующих реактивов, препятствующих образованию сгустка:

• раствор ЭДТА 2, 6%;
• раствор сульфата магния 14%.

Жидкость необходимо тщательно перемешать. Каплю разведенной крови добавляют на предметное стекло, размазывает пластиковым шпателем. Полученный мазок фиксирует с помощью метода по Романовскому-Гимзе.

Важно! Время фиксации зависит от применяемого реактива. Для ЭДТА оно составляет 40 минут, для сульфата магния — до 3 часов.

Мазок рассматривают под микроскопом, считают эритроциты и тромбоциты до получения значения, равного 1 тыс. Необходимо перемещать микроскоп слева направо, вниз, справа налево до тех пор, пока не будет достигнута данная цифра.

Для пересчета количество тромбоцитов 1 мкл на 1 литр крови число эритроцитов и тромбоцитов перемножают, делят на 1 тысячу.

Для метода подсчета количества тромбоцитов используют капиллярную или венозную кровь. Добавляет антикоагулянт, чтобы она не свернулась. Если это произойдет, потребуется повторное изъятие биологической жидкости. Жидкость подносят к полуавтоматическому анализатору, который забирает объем жидкости, равный 1 мл.

Прибор самостоятельно подсчитывает данные, выдавая их на бланке исследования. Читайте о домашних анализаторах крови.

С помощью подсчета показателя на мазке возможно визуально определить параметры клеток. Выявляется их размер, форма, патологические образования. Врач может ошибиться при подсчете или прокрасить мазок неправильно. В первом случае возможна постановка ошибочного диагноза. Для его подтверждения потребуется повторное исследование.

Внимание! Полуавтоматический анализатор в точности подсчитывает количество клеток, редко выдает ошибочный результат по этому параметру. Но аппарат не сможет рассмотреть параметры клеток, их атипичность.

Рекомендовано сначала проводить подсчет тромбоцитов вручную, затем исследовать их на полуавтоматическом анализаторе.

Возможны следующие ошибки в подготовительном этапе и проведении анализа:

• отсутствие подготовки пациента в виде диеты, ограничения физической активности и времени сдачи исследования;
• использование первой капли крови для проведения анализа (по правилам ее стирают водой, так как в ней содержится большое число форменных элементов);
• отсутствие добавления антикоагулянта, который препятствует образованию сгустка;
• ошибка в покраске мазка (использование просроченных или некачественных реактивов, укороченное или чрезмерно продолжительное время воздействие краски);
• ошибки в подсчете клеток.

Для идентификации заболевания или его профилактики необходимо раз в год проходить обследование крови. Одним из тестирований является подсчет тромбоцитов. Для этого используют ручной подсчет или применение специализированного аппарата. Обе методики имеют плюсы и минусы, рекомендуется проводить их по очереди для подтверждения диагноза и отсутствия возможной ошибки. После получения данных обращаются к врачу. Только он сможет правильно расшифровать данные, назначив лечение при выявлении нарушений.

Екатерина Беликова, врач лабораторной диагностики, специально для Mirmam.pro

источник

Тромбоциты по Фонио — анализ, позволяющий определить точное количество тромбоцитов в крови и узнать причины многих заболеваний. Эти кровяные клетки являются важным фактором сворачивания крови.

Рассмотрим, в чем состоит суть такого метода анализа крови и о чем говорят его показатели.

Многие пациенты не знают, что это такое — подсчет тромбоцитов по указанному методу. Подсчет тромбоцитов по Фонио осуществляется на одну тысячу эритроцитов в мазках крови, окрашенных специальным красителем. Затем полученное количество пересчитывается в соотношении на 1 литр или 1 мкл.

Метод позволяет максимально точно узнать количество этих кровяных телец, что, в свою очередь, повышает точность диагноза.

Общее число этих клеток в определенном объеме крови называется коагулограммой. Кровь берется из пальца. Сдать ее для анализа надо каждому обследуемому человеку, ведь такой показатель способен помочь врачу определить многие опасные патологии.

При сдаче крови на тромбоциты необходимо учитывать следующее:

1. Их показатель оказывается максимальным после физических перегрузок и приема еды. Вот почему сдача материала должна проводиться не ранее чем через восемь часов после последнего приема пищи.
2. То же относится и к физической нагрузке: если анализ делается в состоянии возбуждения человека или обследуемый недавно занимался тяжелым физическим трудом, результаты могут быть неточными.
3. Анализ берется утром.
4. Чтобы точность анализа была максимальной, процедуру надо повторить еще два раза с перерывом в 3–5 суток.

Чтобы провести подсчет по методу Фонио, необходим 14%-й раствор магния сульфата и 2,6%-й раствор натрия этилендиаминтетраацетата. Реактивы берутся с помощью капилляра Панченкова.

1. В пробирку вводится один из реактивов, в капилляре его должно быть до уровня «75». Туда же добавляется кровь, взятая тем же сосудом (ее должно быть до отметки «К».).
2. Компоненты надо тщательно перемешать и приготовить тонкие мазки.
3. Они окрашиваются по методу Романовского-Гимзе в течение двух-трех часов, если был взят сульфат магния, или на протяжении 35–45 минут, если был взят ЭДТА. В это время происходит окрашивание тромбоцитов. Они будут окрашены в фиолетово-розовый оттенок.

Как считаются тромбоциты? Для этого в поле зрения микроскопа производится подсчет эритроцитов и тромбоцитов до 1 тысячи красных кровяных телец. Количество тромбоцитов в крови можно узнать, умножив их число в мазке на количество эритроцитов в 1 мкл и разделив полученное произведение на 1000. Специфическая окраска клеток помогает врачу более точно подсчитать число анализируемых клеток.

Анализ крови по Фонио отличается высокой точностью, поэтому много специалистов пользуется именно данными, полученными данной методикой.

Эта методика является самой распространенной на сегодняшний день. Главное отличие этого метода от других в том, что содержание форменных элементов учитывается в мазке (он является окрашенным).

Достоинства данного метода в следующем:

• лаборант может хорошо видеть все клетки в мазке;
• кровь обследуется в какое угодно время, без привязки к моменту получения образца крови;
• формула подсчета количества клеток достаточно проста, кроме того, это количество зависит от тысячи красных кровяных телец в микролитре.

Если тромбоциты у человека понижены, это говорит о развивающейся тромбоцитопении. Она бывает:

• при воздействии радиационного излучения;
• при отравлении свинцом и другими веществами;
• при разных болезнях системы крови;
• если у человека развиваются коллагенозы;
• при развитии хронического нефрита.

У людей с низким количеством тромбоцитов часто бывают внутренние кровотечения, кровоподтеки и гематомы, что является следствием понижения эластичности сосудов. Также обращают на себя внимание петехии, то есть точечные кровотечения.

Повышение количество тромбоцитов в крови (тромбофилия) наблюдается в таких случаях:

• употребление некоторых лекарств;
• если пациенту была сделана хирургическая операция;
• если у человека была удалена селезенка;
• после травм, если они сопровождались большой кровопотерей;
• при развитии у человека злокачественных новообразований;
• при железодефицитной анемии.

Если тромбоциты у человека повышены, это очень опасно для его здоровья и жизни. В таком случае существенно повышается риск развития тромбоза. При этом внутри сосуда образуется сгусток крови, препятствующий нормальному кровотоку.

Особенно опасным считается повышение количества этих клеток у беременных. Это может иметь крайне неприятные последствия:

• выраженный токсикоз беременных;
• прерывание беременности;
• выраженная задержка плода;
• варикоз беременных;
• тромбоз ног у беременных;
• рост кровяного сгустка внутри сосуда (тромбоэмболия);
• инфаркт.

При таких патологиях, как воспаление оболочек мозга, печени, легких, токсоплазмоз, также повышается количество тромбоцитов. Такому состоянию сопутствует и повышение уровня лейкоцитов.

Норма тромбоцитов по методу Фонио — от 120 до 400 тысяч в одном кубическом миллиметре крови. Однако у тех или иных групп населения полученные при анализе показатели будут существенно отличаться. Такие отличия являются вариантами нормы.

Итак, норма у детей от одного года — от 180 до 320 тысяч в одном миллиметре кубическом. У новорожденных детей нормальные пределы показателей тромбоцитов немного шире — от 100 до 420 тысяч в одном кубическом миллиметре крови.

У мужчин число тромбоцитов колеблется от 180 до 400 тысяч. Максимальное их количество наблюдается в 40-летнем возрасте. Далее происходит некоторое снижение количества тромбоцитов, однако оно не опускается ниже 320 тысяч.

Норма у женщин — 180–340 тысяч указанных элементов крови. Максимальное же количество бывает в 16 лет. Во время менструаций нормальный показатель этих клеток падает до 150 тысяч. У подростков это число может снизиться даже до 75 тысяч.

К увеличению тромбоцитов причастны многие факторы. Так, все острые инфекции в организме неизбежно ведут к повышению количества этих форменных элементов крови. То же происходит и при нарушениях системы кроветворения, онкологических патологиях.

Если человек часто переживает стресс, это тоже влияет на количество тромбоцитов в крови. Некоторым может показаться странным то, что при кровопотерях число таких форменных элементов растет. Но так человеческий организм пытается компенсировать потери крови.

Повышенные тромбоциты бывают и у лиц, длительно употребляющих алкоголь.

Если же человек длительно и бесконтрольно принимает препараты, обладающие тромбоцитопеническими свойствами, то в итоге картина его крови существенно изменяется. Это же бывает и при поражении многих органов, в частности, щитовидной железы, печени и др. Иногда кровотечение из носа или порез может отрицательно сказаться на количестве тромбоцитов и снизить их количество.

Меры по нормализации количества этих форменных элементов будут существенно отличаться в зависимости от того, какие результаты получены в ходе анализа. Но все меры будут бесполезными, если на организм продолжают воздействовать вредные факторы. Их надо устранить в первую очередь. Надо стараться избегать эмоциональных и физических перегрузок.

Итак, повысить количество тромбоцитов можно такими способами:

1. Исключить из рациона соления, спиртное, морскую капусту, виноград (красный).
2. Включить в рацион такие продукты, как свежая рыба, печень, перец болгарский, яблоки, гречку.
3. Врач назначит необходимые лекарства для подъема количества тромбоцитов в крови. Самолечение ими категорически запрещается!
4. Не использовать те лекарства, которые в качестве своих побочных эффектов имеют тромбоцитопению.
5. Принимать витамины, такие как А, группы В, С.

Чтобы снизить количество этих форменных элементов крови, надо в первую очередь наладить образ жизни и уменьшить количество стрессов. Нельзя заниматься травмоопасными видами спорта.

Чтобы понизить количество этих клеток крови, нужно:

• употреблять препараты ацетилсалициловой кислоты в рекомендованных врачом дозах;
• отказаться от плодов шиповника, бананов, манго, граната, потому что такие продукты повышают число тромбоцитов;
• ввести в рацион побольше клюквы, черники, облепихи, свеклы и других продуктов;
• принимать поливитамины и препараты магния;
• соблюдать суточное количество воды и не допускать обезвоживания.

Как видим, метод подсчета тромбоцитов по Фонио отличается высокой точностью. И если анализ показал расхождения с нормой, можно быстро и эффективно скорректировать показатель этих форменных элементов крови и не допустить опасных последствий.

Если же не устранять нарушения, связанные с отклонениями количества таких клеток от нормы, возможно развитие очень серьезных патологий.

источник

Тромбоциты по Фонио – это наиболее распространенный и достоверный способ подсчета количества маленьких кровяных пластинок, которые образуются в костном мозге. Особенностью такого теста является то, что форменные элементы крови учитываются не в жидком виде, а в окрашенном мазке.

Такой анализ не имеет ограничений по половой принадлежности и возрастной категории, отчего является разрешенным для детей и представительниц женского пола в период беременности.

Для получения наиболее достоверной информации необходимо соблюдение нескольких несложных правил подготовки, о которых гематолог заранее предупреждает каждого больного.

Необходимость осуществления такого лабораторного теста заключается не только в том, чтобы выявить повышенное или пониженное содержание тромбоцитов в крови, но также для контроля над эффективностью терапии.

В настоящее время существует несколько методик подсчета уровня тромбоцитов: люминесцентная микроскопия, использование электронно-автоматических счетчиков, применение камеры Грязева. Однако в подавляющем большинстве случаев применяется именно метод по Фонио.

Положительные стороны такого исследования:

• высокая точность – достигается благодаря использованию специальной формы расчета, компоненты которой легко обнаруживаются в капле крови;
• быстрота осуществления – промежуток времени с момента забора биологического материала и до получения результатов составляет не более 2 часов, а с применением новейшего высокоточного оборудования вся процедура занимает не более получаса;
• отсутствие необходимости в дорогостоящих реактивах – для активации тромбоцитов достаточно введения коагулянтов, а также проводится подкрашивание мазка специальным раствором.

Именно такие факторы дают возможность получить более точную информацию, нежели при общеклиническом анализе крови или коагулограмме.

Кроме этого, подсчет тромбоцитов по Фонио обладает следующими особенностями:

• хорошая визуализация клеточных элементов;
• изучение биологического материала может быть проведено в любое время, а не сразу же после получения крови;
• вычисление уровня мелких кровяных пластинок облегчено их «привязкой» к 1000 эритроцитов на 1 миллилитр крови.

Однако подобная методика может иметь погрешности, которые связаны с плохим качеством мазка или неравномерным распределением тромбоцитов по специальному стеклу.

Специалисты из области гематологии, занимающиеся расшифровкой результатов, выделяют несколько основных факторов, которые могут очень сильно повлиять как на качество, так и на исход анализа.

Прежде всего, необходимо отметить, что существует специфическая подготовка к подобному лабораторному тесту:

• Кровь не берется у пациента, находящегося в состоянии алкогольного опьянения, поскольку на этом фоне норма тромбоцитов повышается в 3-4 раза.
• Исследование не осуществляется при сильной физической усталости человека, а также в случае длительного влияния стрессовых ситуаций. Такие расстройства могут вызвать чрезмерную выработку форменных элементов, что является исключительно временным явлением и не несет в себе никакой информации о реальном положении вещей.
• Анализ выполняют на голодный желудок.
• За неделю до посещения врача необходимо полностью отказаться от приема каких-либо медикаментов. Если по каким-либо причинам сделать это невозможно, то следует проинформировать об этом клинициста.

Оптимальным временем для взятия образца являются утренние часы, а именно: с 7 до 9 утра.

Второе условие, влияющее на результат – качество реактивов. При применении некачественных веществ будут получены ложноположительные отклонения от нормы. В таких ситуациях человеку необходимо сдавать тест трижды, с промежутком в 2-3 суток. Это даст возможность свести к минимуму любые погрешности.

Помимо этого, учитываются особые состояния организма, а именно:

• протекание менструации;
• период вынашивания ребенка;
• грудное вскармливание;
• сильнейшая физическая нагрузка.

Именно такие обстоятельства приводят к тому, что результативность методики по Фонио значительно понижается.

Подсчет тромбоцитов по методу Фонио предусматривает окрашивание мазка крови специальным красителем. Подобные форменные элементы крови рассчитываются на 1000 эритроцитов, после чего переводятся в соотношение на 1 литр крови.

Реактивами, применяемыми во время такого теста, выступают:

• сульфат магния 14% раствор;
• краситель Романовского-Гимзы;
• фиксаторы Лейшмана и Май-Грюнвальда.

Перед тем как нанести то или иное вещество на кожный покров пациента, необходимо его предварительно обработать. Для забора крови из пальца делается небольшой прокол. При изучении не используется первая капля крови. После этого наносится небольшая капля раствора одного из вышеуказанных веществ и осторожно смешивается. Из получившегося соединения делают мазок для последующего изучения. Стоит отметить, что кровь высушивается и окрашивается по методу Паппенгейма.

Далее предметное стекло помещают под микроскоп и снижают количество красных кровяных телец до тысячи. Во внимание берутся только близлежащие клетки, формирующие между собой группы. Единичные включения не имеют никакой ценности при таком исследовании.

После получения необходимого уровня эритроцитов параметры тромбоцитов рассчитывают по следующей формуле – Х=АхВ, а полученное число делят на 1000, где:

• Х – это искомое количество тромбоцитов;
• А – число кровяных пластинок в мазке на тысячу эритроцитов;
• В – концентрация красных кровяных телец в литре крови;
• 1000 – показатель эритроцитов в исследуемом мазке.

Второй вариант действий лаборанта заключается в том, что в пробирку с капиллярной кровью вносят определенное количество магнезии или ЭДТА, тщательно перемешивают и готовят мазок. Затем смесь высушивается и окрашивается одним из вышеуказанных красителей. Формула расчета остается неизменной.

Именно такими способами определяется норма тромбоцитов как у взрослого человека, так и у ребенка.

Тромбоциты по Фонио норма будет немного отличаться в зависимости от влияния нескольких факторов, а именно: половой принадлежности и возрастной категории человека.

Установленный допустимый уровень описываемого компонента крови на 1 куб. миллиметр крови варьируется от 120 до 400 тысяч.

Количество тромбоцитов (тыс.)

Как повышенные, так и пониженные значения укажут специалисту на то, что в организме человека протекает тот или иной патологический процесс.

Если тромбоциты по Фонио снижены, то это в подавляющем большинстве случаев указывает на наличие следующих патологий:

• лучевая болезнь;
• острое отравление химическими веществами или ядами;
• коллагеноз;
• патологии кроветворной системы;
• злокачественные новообразования любой локализации;
• малокровие;
• поражение печени;
• различные аллергические реакции;
• обильные кровопотери;
• инфекционные недуги;
• передозировка медикаментами;
• хронический алкоголизм.

Когда анализ показал возрастание подобного элемента, то наиболее часто это указывает на:

• внутреннее кровотечение;
• удаление селезенки;
• дефицит железа;
• бактериальные, вирусные и паразитарные болезни;
• хронические патологии со стороны системы кроветворения;
• аутоиммунные заболевания;
• туберкулез и пневмонию;
• обезвоживание.

Для установления окончательного результата потребуются дополнительные лабораторные тесты, инструментальные процедуры и консультации клиницистов из различных областей медицины.

Повышенные и пониженные тромбоциты по Фонио требуют коррекции, что основывается на ликвидации базового заболевания или предрасполагающего фактора, не имеющего отношения к протеканию какого-либо недуга, например, алкоголизм или передозировка медикаментами.

Для восстановления нормального уровня необходимо:

• принимать лекарственные препараты с обязательным контролем суточной нормы и длительности приема;
• использовать рецепты народной медицины – показано только после одобрения лечащего врача;
• соблюдать определенные правила питания;
• полностью отказаться от вредных привычек.

В любом случае терапия будет носить индивидуальный подход. Однако полный отказ от квалифицированной помощи влечет за собой развитие осложнений, которые иногда несут угрозу для жизни человека.

источник

Существует три метода определения количества тромбоцитов:

1) Подсчет тромбоцитов в счетной камере Горяева микроскопией при фазовом контрасте, т.е. с фазовоконтрастной приставкой. Коэффициент вариации 25-30%

2) Подсчет тромбоцитов в мазке крови (по Фонио), Коэффициент вариации 10-15%. Достоинство – возможность оценить морфологические особенности тромбоцитов.

3) Определение количества тромбоцитов на гематологическом анализаторе,

Метод подсчета тромбоцитов в счетной камере Горяева микроскопией при фазовом контрасте, т.е. с фазовоконтрастной приставкой.

Принцип. Производится подсчет тромбоцитов в камере Горяева с применением в качестве разводящей и гемолизирующей жидкости раствора оксалата аммония. При подсчете используют фазовоконтрастную микроскопию.

Реактивы: 1 % раствор оксалата аммония.

Ход определения. Исследование можно проводить как в крови, полученной из пальца, так и в стабилизированной цитратом венозной крови. В последнем случае полученный при подсчете результат умножают на коэффициент 1,1 (учитывают разведение венозной крови раствором цитрата натрия – 9:1). Самым удобным и достаточно точным является способ разведения крови в пробирках (не в меланжере). Для этого, в предварительно высушенную чистую силиконированную или пластиковую (полистирол) пробирку пипеткой отмеривают 1,98 мл 1% оксалата аммония и осторожно вносят в нее 0,02 мл крови. В течение 1-2 мин содержимое пробирки тщательно перемешивают без вспенивания. Заполняют две камеры Горяева и на 10-15 мин помещают их для оседания тромбоцитов во влажную камеру (чашку Петри со смоченной фильтровальной бумагой или марлей). В каждой камере подсчитывают тромбоциты в 25 больших квадратах.

Фазовоконтрастная микроскопия проводится при помощи обычного микроскопа, осветителя типа ОИ-19 (или аналогичного) и устройства для наблюдения методом фазового контраста КФ-1 или КФ-4 [2].

Метод подсчета тромбоцитов в мазках крови (по Фонио)

Принцип. Метод основан на подсчете числа тромбоцитов в окрашенных мазках крови на 1000 эритроцитов с расчетом на 1 мкл (или 1 л) крови, исходя из содержания в этом объеме количества эритроцитов.

Реактивы: Применяют 6% раствор этилендиаминтриацетата натрия (ЭДТА).

Ход определения. Смешивают кровь с раствором ЭДТА, для этого взятый капилляром Панченкова реактив до метки «75» вносят в пробирку, затем добавляют кровь, взятую до метки «0». Содержимое пробирки перемешивают и готовят тонкие мазки. Фиксируют и окрашивают по Романовскому-Гимзе в течение 30-45 минут (обычно окраска тромбоцитов занимает в 1,5 – 2 раза больше времени, чем окраска мазка для подсчета формулы крови). Высохшие мазки микроскопируют с иммерсионным объективом, подсчитывая тромбоциты в тонких местах препарата (эритроциты должны быть расположены изолировано). Подсчет производят следующим образом: в каждом поле зрения считают количество эритроцитов и тромбоцитов, передвигая мазок до тех пор, пока не будут просчитаны 1000 эритроцитов.

Расчет: Количество тромбоцитов на 1000 эритроцитов составляет А0/00. Зная число эритроцитов в 1 мкл (в 1 л) крови, легко подсчитать количество тромбоцитов в 1 мкл крови (в 1 л).

Например. А=600/00 ; число эритроцитов 5 000000 в 1 мкл (5*106/мкл или 5*1012/л)

Х= 60*5*1000000/1000=300*1000 мкл (300*103/мкл или 300*109/л).

Определение количества тромбоцитов с помощью гематологического анализатора

В настоящее время все шире используются определение количества тромбоцитов и их распределение по величине (гистограмма) с помощью автоматических счетчиков крови, или гематологических анализаторов. Эти аппараты точны, и позволяют проводить экспресс-диагностику (определения выполняются за 1 мин).

Подсчет тромбоцитов проводят согласно инструкции к аппарату. Бюджетные модели гематологических анализаторов определяют только количество тромбоцитов, а более совершенные приборы содержат полный анализ тромбоцитарного звена, и позволяют говорить о морфологии тромбоцитов. Развернутый анализ тромбоцитов на анализаторе позволяет определить такие показатели:

РLТ – количество тромбоцитов.

Норма от 180-320109/л; При выходе за эти пределы необходима микроскопия мазка.

MPV – средний объем тромбоцитов. «Молодые» тромбоциты имеют больший объем. MPV увеличивается с возрастом. Норма: 8,6-8,9 фл у детей 1 – 5 лет; 9,5-10,6 фл у людей старше 70 лет.

PDV ширина распределения тромбоцитов по объему отражает степень анизоцитоза тромбоцитов. Норма = 14-18%.

РСТ – тромбокрит доля объема цельной крови, занимаемая тромбоцитами (аналогичен Hct). Норма = 0,15-0,40%.

Также гематологический анализатор строит график распределения тромбоцитов по размеру [5].

источник

ОПРЕДЕЛЕНИЕ КОЛИЧЕСТВА ТРОМБОЦИТОВ В КРОВИ

Микроскопический метод подсчета

Чаще всего используется метод подсчета тромбоцитов в счетной камере Горяева микроскопией при фазовом контрасте, т.е. с фазово-контрастной приставкой. Мало точен и не может быть рекомендован метод подсчета тромбоцитов в мазке крови.

В настоящее время все шире используются определение количества тромбоцитов и их распределение по величине (гистограмма) с помощью автоматических счетчиков крови. Эти аппараты точны и позволяют проводить экспресс-диагностику (определения выполняются за 1 мин).

Принцип. Производится подсчет тромбоцитов в камере Горяева с применением в качестве разводящей и гемолизирующей жидкости раствора оксалата аммония. При подсчете используют фазово-контрастную микроскопию.

Реактивы. 1% раствор оксалата аммония.

Ход определения. Исследование можно проводить как в крови, полученной из пальца, так и в стабилизированной цитратом венозной крови. В последнем случае полученный при подсчете результат умножают на коэффициент 1,1 (учитывают разведение венозной крови раствором цитрата натрия — 9:1).

Разведение крови. Самым удобным и достаточно точным является способ разведения крови в пробирках (не в меланжере). Для этого, в предварительно высушенную чистую силиконированную или пластиковую (полистирол) пробирку пипеткой отмеривают 1,98 мл 1% оксалата аммония и осторожно вносят в нее 0,02 мл крови. В течение 1-2 мин содержимое пробирки тщательно перемешивают без вспенивания. Заполняют две камеры Горяева и на 10-15 мин помещают их для оседания тромбоцитов во влажную камеру (чашку Петри со смоченной фильтровальной бумагой или марлей). В каждой камере подсчитывают тромбоциты в 25 больших квадратах.

Фазово-контрастная микроскопия проводится при помощи обычного микроскопа, осветителя типа ОИ-19 (или аналогичного) и устройства для наблюдения методом фазового контраста КФ-1 или КФ-4.

Подготовка микроскопа. После установки на микроскопе фазовых объективов и фазового конденсора производят фокусировку объективов 40х на сетке камеры Горяева. Устанавливают освещение и центрируют изображение фазовой пластинки и кольцевой диафрагмы. Микроскопию проводят с зеленым светофильтром. При работе с фазово-контрастной установкой необходимо пользоваться камерами одного типа, так как фокусировка оптических систем зависит от толщины стекла камеры.

Расчет определения числа тромбоцитов в 1 мкл крови. Среднюю арифметическую величину из двух параллельных определений умножают на 1000 (площадь 25 больших квадратов — 1 мм 2 , высота камеры — 0,1 мм, разведение 1:100; следовательно, количество тромбоцитов должно быть умножено на1 х10х100 = 1000).

Нормальные пределы колебаний числа тромбоцитов в крови у человека составляют от 170 до 350 х 10 9 /л. Ошибка метода ± 6,5%.

Подсчет тромбоцитов в крови и определение их размера в мазке — важная часть диагностики тромбоцитопений, эссенциальной и полицитемической тромбоцитемии, ДВС-синдрома, тромботической тромбоцитопенической пурпуры и других микротромбоваскулитов, нарушений гемостаза при аутоимунных формах патологии (СКВ, антифосфолипидном синдроме и др.) и при гепатолиенальном синдроме. При наследственных тромбоцитопатиях наблюдаются формы с микроцитозом (синдром Вискотта-Олдрича) и преобладанием гигантских форм кровяных пластинок (аномалии Бернара-Сулье и Мей-Хегглина), а также формы без изменения размеров этих клеточных элементов.

Подсчет тромбоцитов на гематологическом анализаторе .

На сегодняшний день методом выбора при исследовании тромбоцитов является их определение на автоматическом анализаторе. Автоматические счетчики позволяют получать достаточно надежные результаты при определении количества тромбоцитов.

При подсчете тромбоцитов по Фонио коэффициент вариации находится в пределах 20%, в камере Горяева — составляет 7-10%, тогда как автоматический подсчет воспроизводится с точностью до 2-4%.

Современные анализаторы сигнализируют о выходе количества тромбоцитов за референтные пределы, наличии агрегатов тромбоцитов, макротромбоцитов или других элементов, сравнимых по объему с тромбоцитами (микроэритроциты), что существенно облегчает трактовку получаемых результатов.

В то же время следует иметь в виду, что в отличие от ручного подсчета тромбоцитов, где проводится предварительный лизис эритроцитов, автоматические счетчики крови анализируют тромбоциты и эритроциты в одной камере без предварительной обработки. Тромбоциты распознаются по размерам в диапазоне 2-20 фл. Это создает проблему дифференцирования больших форм тромбоцитов (макротромбоцитов) и сравнимых с ними по объему эритроцитов (микроцитов), их фрагментов (шизоцитов), а также отшнуровавшихся фрагментов цитоплазмы лейкоцитов (клеточный дебрис).

Ложное занижение числа тромбоцитов может быть при их агрегации, агглютинации под действием тромбоцитарных агглютининов и при прилипании тромбоцитов к лейкоцитам (тромбоцитарный «сателлитизм»). При подсчете на гематологических анализаторах в качестве антикоагулянта используется ЭДТА. При наличии аутоантител к тромбоцитам калиевая соль ЭДТА инициирует агрегацию тромбоцитов, что проявляется псевдотромбоцитопенией.

Нормальные величины. Количество тромбоцитов у здоровых людей составляет 170 — 350 х 10 9 /л.

Снижение количества PLT в крови — тромбоцитопения — может развиваться в результате снижения продукции PLT:

наследственные: синдром Франкони (Фанкони), врожденная тромбоцитопения, краснуха новорожденных;

приобретенные: лейкозы, миелодиспластические синдромы, миелофиброз, метастазы новообразований в костный мозг; дефицит витамина В12 и фолиевои кислоты (мегалобластные анемии), ночная пароксизмальная гемоглобинурия, вирусные инфекции, интоксикации, наследственные аномалии, ионизирующее облучение, прием миелодепрессивных препаратов, циклическая тромбоцитопения, почечная недостаточность. в результате повышения деструкции PUT: инфекции (значительное, иногда катастрофическое снижение PLT, наблюдается при Конго-Крымской геморрагической лихорадке), эклампсия беременных, гемолитико-уремический синдром (ГУС), ВИЧ-инфекция, идиопатическая тромбоцитопеническая пурпура, системная красная волчанка, хронический лимфолейкоз, хронический активный гепатит, посттрансфузионная тромбоцитопения; гемодиализ, кровотечения, разрушение в селезенке (гиперспленизм при болезнях накопления, лимфомах, волосатоклеточном лейкозе, миелопролиферативных заболеваниях, портальной гипертензии);

в результате потребления PLT: синдром ДВС.

Клинико-диагностическое значение тромбоцитопений (по С.А. Луговской и соавт., 2002)

Клинические ситуациии патологические состояния

Недостаточность гемопоэза -нарушение образования тромбоцитов

Гипо-и апластические состояния, лейкозы, метастазы рака в костный мозг, ионизирующее облучение, химиотерапия, дефицит витамина В12 или фолиевои кислоты, вирусные инфекции, сепсис, милиарный туберкулез и др.

Повышенное потребление тромбоцитов

Кровопотеря, ДВС, гигантская гемангиома, тромбоз, геморрагическая тромбоцитемия.

Повышенная деструкция тромбоцитов (внутриклеточный, внутрисосудистый гемолиз)

Ауто- и иммунные гемолитические анемии, изоиммунные, гетероиммунные (гаптеновые), лекарственные, вирусные, системная красная волчанка, лимфопролиферативные заболевания, поеттрансфузионные реакции и др.

Механические повреждения тромбоцитов

Протезирование клапанов сердца, экстракорпоральное кровообращение.

Интоксикация: экзогенная, эндогенная

Химические вещества, лекарственные препараты, алкоголь, уремия, тяжелые заболевания печени.

Повышенная секвестрация в селезенке (гиперспленизм)

Спленомегалия при циррозе печени, портальной гипертензии, гистиоцитозах, болезнях накопления, болезни Гоше, синдроме Фелти, туберкулезе селезенки, миелопролиферативных заболеваниях, талассемии.

(по С.А. Луговской и соавт., 2002)

Характеристика антитромбоцитарных антител

Идиопатическая (аутоиммунная) тромбоцитарная пурпура

Аутоантитела против неизмененных антигенов тромбоцитов больного

Гаптеновая (гетероимунная) тромбоцитопения

Гаптеновые аутоантитела против измененных или чужеродных антигенов на поверхности тромбоцитов

Антитела против комплекса лекарства (хинин, гепарин) с тромбоцитарным антигеном

Тромбоцитопения, ассоциированная с вирусной инфекцией

Антитела против вирусных антигенов, фиксированных на поверхности тромбоцитов, или против измененных тромбоцитарных антигенов

Аллоантитела против аллоантигенов тромбоцитов плода или переливаемых тромбоцитов

Неонатальная аллоиммунная тромбоцитопеническая пурпура

Аллоантитела матери, проникшие в организм плода. Направлены против аллоантигенов тромбоцитов плода и отца, отсутствующих на тромбоцитах матери

Повышение количества PLT в крови — тромбоцитоз — характерно для миелопролиферативных заболеваний. Тромбоцитоз наблюдается также при злокачественных новообразованиях, после операций, при воспалительных заболеваниях (острый ревматизм, ревматоидный артрит, туберкулез, остеомиелит), после спленэктомии, циррозе печени, кровотечениях, в период выздоровления при мегалобластных анемиях, лечении кортикостероидами, остром гемолизе, физических перенапряжениях.

Спленэктомия, острая кровопотеря, острый гемолиз, состояние после операции, злокачественные новообразования, ревматоидный артрит, туберкулез, язвенный колит, остеомиелит

Миелопролиферативные заболевания (хронический миелолейкоз, идиопатический миелофиброз, эритремия, хронический мегакариоцитарный лейкоз), острый мегакариобластный лейкоз, идиопатическая геморрагическая тромбоцитемия

Средний объем тромбоцита (МРV)

У здоровых людей MPV равен 6-12 фл и находится в обратной зависимости от числа тромбоцитов. MPV увеличивается с возрастом. У мужчин MPV несколько выше, чем у женщин.

Использование ЭДТА в качестве антикоагулянта вызывает изменение формы тромбоцитов от диска к сфере, что приводит к увеличению MPV на 10-12% в течение 2 часов, а затем показатель существенно не меняется. Под действием цитрата натрия MPV может уменьшаться или увеличиваться, а при высокой концентрации (1:4) — не изменяется со временем. Кроме типа применяемого антикоагулянта и времени от момента взятия пробы до исследования, на MPV оказывает влияние температура окружающей среды. Преходящее увеличение MPV отмечается у рабочих, контактирующих с асфальтовыми испарениями, органическими растворителями. MPV — важный диагностический показатель функции тромбоцитов.

PDW — показатель, являющийся мерой гетерогенности размеров (анизоцитоза) тромбоцитов. Величина PDW в среднем составляет 10-15%.

Как артефакт, ложно завышенное увеличение PDW может быть связано с присутствием микроцитов, шизоцитов, микроагрегатов тромбоцитов, фрагментов цитоплазмы лейкоцитов.

Этот показатель находится в обратной зависимости от числа тромбоцитов и их периода жизни. В каждом конкретном случае важна не только величина PDW, но и ее динамика во времени, а также связь с другими тромбоцитарными показателями. Так, увеличение PDW с одновременным снижением MPV свидетельствует о преобладании микротромбоцитов среди общей популяции тромбоцитов (указывает на угнетение тромбоцитопоэза), а сочетание повышенного PDW с увеличением MPV отражает нарастание числа макротромбоцитов (усиление продукции тромбоцитов). Одновременное присутствие фракций макротромбоцитов и микротромбоцитов ведет к увеличению PDW, но MPV может оставаться в пределах нормы. В современных гематологических анализаторах отдельными показателями указывается процентное содержание микротромбоцитов (MicroPLT) и макротромбоцитов (MacroPLT).

PDW может применяться для дифференциальной диагностики. Так, увеличение PDW свыше 15% было обнаружено у 50% больных эссенциальной тромбоцитемией, у 21% пациентов с реактивным тромбоцитозом и лишь у 14% здоровых людей.

РСТ — показатель, характеризующий процент тромбоцитарной массы в объеме крови: вычисляется суммированием прямо измеренных объемов тромбоцитов или произведением среднего объема тромбоцитов на их число.

У здорового человека показатель стремится остаться стабильным: при уменьшении числа тромбоцитов усиливается тромбопоэз, в циркулирующую кровь выбрасывается большее число молодых макротромбоцитов, что ведет к увеличению MPV. При увеличении количества циркулирующих тромбоцитов снижается продукция их в костном мозге, тем самым уменьшается процент макротромбоцитов и MPV уменьшается. Однако при нарушении этого равновесия происходит или уменьшение РСТ, что, в конечном счете, приводит к патологии первичного гемостаза и риску возникновения кровотечений, или повышение РСТ, увеличивающее активность тромбоцитов и их способность к агрегации. Это повышает риск тромбозов.

Нормальные значения РСТ варьируют в пределах 0,15-0,35%. Было обнаружено, что снижение РСТ менее 0,1% обусловило возникновение послеоперационных кровотечений у пациентов с развившейся тромбоцитопенией. Также было отмечено, что этот показатель оказался более чувствительным для оценки риска возникновения кровотечения, чем число тромбоцитов.

Если скрининговые методы указывают на нарушение функции тромбоцитов, необходимо выполнить специальные тесты с учетом диеты и лекарственных препаратов, принимаемых пациентом (отмена за 7-10 суток перед исследованием глюкокортикостероидов, аспирина и других нестероидных противовоспалительных средств, адреноблокаторов, блокаторов кальциевых каналов, антиагрегантов: пентоксифиллина, папаверина, теофиллина, дипиридамола, тиклопидина, антибиотиков — пенициллина, карбенициллина).

Методы определения длительности кровотечения

Длительность кровотечения является скрининговым тестом для выявления нарушений первичного гемостаза. Метод основан на определении времени кровотечения из нанесенной на поверхности кожных покровов небольшой ранки стандартного размера. Это время зависит от способности сосудисто-тромбоцитарных гемостатических механизмов останавливать кровотечение из поврежденных мелких сосудов и капиллляров и поэтому его продолжительность может характеризовать состояние первичного гемостаза. Оно может быть нарушено вследствие дефектов сосудистого звена, неполноценности функциональных свойств кровяных пластинок или дефицита/дефекта плазменных кофакторов тромбоцитарных реакций (фибриногена, фактора Виллебранда), выраженной тромбоцитопении. При снижении числа тромбоцитов менее 100×109/л имеется прямая связь между степенью тромбоцитопении и удлинением времени кровотечения. Длительность кровотечения коррелирует также с геморрагическими тенденциями при тромбоцитопатиях и болезни Виллебранда. Увеличение времени кровотечения наблюдается и при тяжелой анемии (Ht Duke , при выполнении которого колотую ранку глубиной 3,5 мм наносят скарификатором в нижней части мочки уха; выступающие капли крови осторожно, не прикасаясь к раневой поверхности, снимают фильтровальной бумагой через 15-30 с. Регистрируют время от момента нанесения укола до прекращения кровотечения, которое в норме не превышает 4 мин. Тест малочувствителен и не позволяет выявить нарушения при тромбоцитопатиях легкой и средней тяжести.

Наиболее распространенными за рубежом методами определения длительности кровотечения второй группы являются различные модификации метода Ivy, который предложил проводить исследование на верхней конечности в условиях веностаза, затрудняющего сосудистые реакции.

Определение длительно сти кровотечения по методу Айви

Оценивают длительность кровотечения после разреза кожи предплечья скарификатором с глубиной разреза 3 мм. Стандартизация метода достигается равной глубиной кожного разреза и созданием венозного стаза путем повышения венозного давления до 40 мм рт. ст. при помощи сфигмома-нометра, что предупреждает эффект преждевременного склеивания краев раны.

Скарификатор, способный осуществить разрез кожи глубиной 2-3 мм.

Сфигмоманометр накладывают на плечо, нагнетают в нем давление, равное 40 мм рт. ст., и поддерживают такое давление в течение всего исследования.

Ладонную поверхность предплечья обрабатывают раствором этанола.

Натягивают кожу предплечья в поперечном (по отношению к костям предплечья) направлении.

Скарификатором наносят три разреза кожи по 5—10 мм (направление разреза должно быть перпендикулярно натяжению кожи предплечья, т. е. параллельно костям предплечья) глубиной 3 мм и включают секундомер.

Капли крови осторожно удаляют фильтровальной бумагой путем ее смачивания через каждые 15-30 с.

Регистрируют время остановки кровотечения из каждой ранки.

Снижают давление в манжете сфигмоманометра.

Вычисляют средний результат длительности кровотечения для каждого из трех разрезов.

Оценка результатов исследования

Существует несколько схожих методов для оценки длительности кровотечения [WW Duke, 1910; C.F. Borchgrevink, B.A. Waaler, 1958], однако метод Айви отличается от аналогичных неплохой воспроизводимостью и малой травматичностью. В оригинальном исполнении нормальное время кровотечения не превышает 8 мин, однако указанный норматив условен, поскольку результаты определения длительности кровотечения этим методом значимо варьируют в зависимости от варианта скарификатора и опыта исследователя, поэтому необходимо уточнить нормативы для каждой лаборатории. При тромбоцитопениях, тромбоцитопатиях и болезни Виллебранда длительность кровотечения часто удлинена, а при изолированных дефектах коагуляцион-ного гемостаза (гемофилии и др.) длительность кровотечения не отличается от нормы.

Нестандартный скарификатор, неглубокий (менее 3 мм) разрез кожи, недостаточная квалификация лаборанта.

Исследование агрегационной функции тромбоцитов

Тромбоциты способны агрегировать под воздействием различных субстанций, называемых индукторами (стимуляторами) агрегации (АДФ, адреналин, арахидоновая кислота, тромбин, кальциевый ионофор А23187, коллаген, фибрин-мономер, бычий коагуляционный фактор VIII, ристоцетин и др.). Изучение агрегационной функции тромбоцитов осуществляют при помощи специального прибора — агрегометра. В основе записи агре-гатограммы этим прибором — принцип Борна, который предполагает графическую регистрацию выраженности уменьшения оптической плотности богатой тромбоцитами плазмы в процессе агрегации тромбоцитов. В случае нарушения агрегационной функции тромбоцитов происходит незначительное изменение оптической плотности, что и регистрирует этот прибор.

Забор крови и подготовка плазмы для исследования

После пункции локтевой вены самотеком кровью наполняют пластиковую или силиконированную пробирку, в которую предварительно добавлен раствор цитрата натрия (соотношение объемов крови и цитрата натрия равно 9:1). Затем пробирку тщательно и аккуратно (без встряхивания) перемешивают в течение 2-3 минут.

Материалом для исследования является бедная тромбоцитами плазма.

БТП получают в два этапа. На первом этапе получают богатую тромбоцитами плазму, для чего цитратную кровь центрифугируют в течение 7 минут при 240 g. На втором этапе богатую тромбоцитами плазму переносят в другую пробирку и повторно центрифугируют в течение 15 минут при 1200-1400 g.

0,11 М раствор цитрата натрия (Na3C6H607).

Агрегометр с компьютером и принтером.

Стимуляторы агрегации (АДФ, адреналин, коллаген и др.). В табл. 12 представлены оптимальные конечные концентрации наиболее распространенных стимуляторов агрегации тромбоцитов.

Таблица. Оптимальные конечные концентрации стимуляторов агрегации тромбоцитов

источник