Для успешного лечения аутоиммунных заболеваний важно установить провоцирующие недуг факторы. С задачей обнаружения антител и лимфоцитов-киллеров успешно справляются методы исследования крови. По результатам анализов удается определить, какие структуры организма, выступающие в роли аутоантигенов, стали виновниками аутоаллергии.
Для патологий, вызванных нарушениями работы иммунной системы, характерен сбой механизма распознания Т-лимфоцитами чужеродных антител. В итоге, клетки-санитары, призванные очищать организм человека от видоизмененных клеточных структур, превращаются в клетки-киллеры. Иммунитет перестает распознавать здоровые (собственные) клетки, что провоцирует агрессию Т-лимфоцитов, способствующую процессу саморазрушения.
Линейка аутоиммунных заболеваний включает более 80-ти патологий, проявляющихся как сходными симптомами, так и специфической симптоматикой. Поэтому для предотвращения разрушения органов и тканей необходимо быстрее начать лечение недуга, ставшего следствием сбоя иммунитета. Правильно поставить диагноз специалисту помогут результаты анализов крови, позволяющие выявить антитела, указывающие на определенный тип аутоиммунных заболеваний:
- органоспецифическая группа – доминируют антигены, вызывающие сбои в сосудисто-тканевых структурах;
- неспецифическая группа – после перерождения собственных тканевых компонентов, организм начинает с ними борьбу, как с чужими агентами;
- смешанная группа – внешние антигены, маскирующиеся под собственные компоненты тканей, провоцируют иммунитет на уничтожение собственных белков.
Тесты на аутоиммунные антитела включают группы различных анализов (иммунологических) сыворотки крови. Цель тестирования – выявить в крови аутоантитела, следы воспалительного процесса, проверить функционирование органов.
Какие необходимо сдать анализы для обнаружения в крови аутоантител, подтверждающих аутоиммунную природу заболевания
- Общий анализ состояния крови. Оценивая уровень СОЭ (скорость оседания эритроцитов), специалист устанавливает стадию заболевания, степень активности патологического процесса.
- Анализ крови на биохимические показатели. Результаты необходимы для выявления ревматоидного фактора, в случае воспалительного процесса – высокой концентрации С-реактивного белка.
- Иммунологические тесты. Выявление белковых титров станет подтверждением факта аутоиммунного заболевания. Также необходима оценка выраженности и стойкости специфических клеток.
Чтобы качество результатов анализов не вызывало сомнения, важна правильная подготовка к их сдаче. Накануне тестирования следует исключить алкоголь, отказаться от высокой физической нагрузки, отменить временно лечение медикаментами. Сдавать пробы крови положено натощак (лучше сутра).
Специфика тестирования в том, что антитела являются иммуноглобулинами нескольких типов. Белковые структуры ориентированы на борьбу с угрожающими элементами, находящимися в организме. По превышению нормального их уровня, отсутствию либо присутствию антитоксинов судят о принадлежности аутоиммунного недуга к определенному типу.
Анализ назначают при подозрении на глютеновую болезнь (целиакия). Заболевание связано с повреждением ворсинок тонкой кишки глютеном, содержащимся в белках злаков. Избыток глиадина, как составляющей глютена, вызывает диарею, истощение. Скрытую форму целиакии без явных симптомов определяют по превышению уровня иммуноглобулинов класса A и G к глиадину.
Результаты комбинированного тестирования крови для оценки уровня IgA и IgG считаются более достоверными, чем исследование только антител IgA (защитный фактор слизистых оболочек).
Результаты анализа можно расценивать как тест на факт сахарного диабета. Высокий уровень иммуноглобулинов связывают с аутоиммунными заболеваниями поджелудочной железы на фоне инсулиновой зависимости. Высокоинформативные данные анализа позволяют определить вероятность старта патологии в будущем.
Тест на ASCA назначают при дискомфорте в области эпигастрия, диспепсических расстройствах, болях по зоне живота. Проверка уровня антител к сахаромицетам, которые присутствуют в пекарских дрожжах, важна при подозрениях на патологии кишечника (язвенный колит неспецифического характера, а также болезнь Крона). Точность анализа подтверждается результатами других исследований, в том числе биопсии.
Повышенный показатель антител к компонентам в составе клеточных мембран, указывает на поражение внутренних тканей сосудов кровеносного русла. Результаты тестирования предупреждают о вероятности развития антифосфолипидного синдрома (АФС). Дети страдают умственной отсталостью и анемией. Он опасен ухудшением свертывания крови с высоким риском тромбообразования, что становится причиной инфаркта и инсульта.
Синдром повышенного индекса иммуноглобулинов IgМ и IgG угрожает женщинам проблемами во время беременности. Повышается опасность выкидышей, преждевременных родов.
- тест на аутоантитела к собственному кардиолипину, который обеспечивает функционирование ферментов;
- тест на антитела к протромбину – важному фактору, ответственному за свертывание крови (риск тромбозов).
Анализ на обнаружение иммуноглобулинов, отвечающих за количественный состав фосфолипидных ферментов, назначают для уточнения прогноза аутоиммунных заболеваний. Это особо актуально при характерных симптомах, указывающих на склеродермию и красную волчанку.
Высокий показатель глобулинов IgG к нативной ДНК двуспирального типа считается маркером такого тяжелого аутоиммунного заболевания, как системная красная волчанка. Именно этот титр из группы антинуклеарных структур подтверждает факт поражения клеток многих органов, а также важных систем организма. Причем повышенный уровень иммуноглобулинов регистрируют во время обострения болезни, снижение индекса в анализе крови – во время ремиссии.
Появление нейтрофильных антител (ANCA) связано с аутоиммунными заболеваниями, которым подвержены сосуды. Высокие титры также характерны при симптомах красной волчанки, подозрении на билиарный цирроз, гранулематоз Beгeнepa. При нормальном состоянии организма в сыворотке крови не должно быть антител к нейтрофилам.
Повышение показателя БМК-глобулинов связывают с синдромом Гудпасчера. При этой патологии атака иммунитета направлена на почки и легкие, страдает хрусталик глаза, яички. Анти-БМК обнаруживают в крови при симптомах гломерулонефрита, легочно-печеночного синдрома, других видах аутоиммунных проблем с почками.
Высокий титр анитуклеарного фактора (ANA) предупреждает об иммунной атаке, которая направлена против белков и нуклеиновых кислот в составе ядра клеточных структур. Аутоантитела IgG считаются маркерами ревматоидных патологий воспалительного характера, волчаночного психоза, синдрома Шегрена.
Местом синтеза аутоантител является синовиальная оболочка суставов, поэтому показатель носит название ревматоидного фактора. Высокий уровень антитоксинов к Fc-фрагментам, обеспечивающими связь между антителами группы IgG, считается характерным признаком ревматоидного артрита. Благодаря ревматоидному фактору диагностируют признаки самых сложных аутоиммунных синдромов – склеродермии и красной волчанки.
Аутоиммунные заболевания трудно поддаются диагностике. Поэтому благодаря выявлению аутоантител врач получает возможность установить тип патологии, вызванной сбоем функционирования иммунной системы. Информация важна для оценки степени поражения организма, контроля эффективности лечебного процесса.
источник
Проблема диагностики аутоиммунных заболеваний в настоящее время стоит очень остро. Таких патологий известно много, но особенности их течения обуславливают сложность своевременного выявления. Симптоматика зачастую смазанная, поэтому больной долгое время посещает врачей в попытке выявить первопричину беспокоящего состояния. Рассмотрим, что включают в спектр аутоиммунных болезней, какие методы уточнения диагноза применяются современными врачами.
Особенности диагностики аутоиммунных заболеваний обусловлены тем, что такие патологические состояния приводят к повреждению разных внутренних систем и органов. В рамках выявления болезни пациента направляют на общие анализы и осмотры. Следующий этап предполагает подбор более точных методов, актуальных для конкретного случая. Без своевременного определения болезни и подбора подходящего терапевтического метода возможно возникновение осложнений, включая тяжелые и не поддающиеся коррекции.
Такое патологическое состояние встречается сравнительно часто. Оно наносит вред сердцу, сосудистой и нервной системам. Своевременная диагностика аутоиммунного заболевания позволяет предупредить тяжелые тромбозы, которые при такой патологии могут быть самой непредсказуемой локализации. Среди последствий заболевания – тромбоцитопения, неспособность женщины выносить плод. Возможны непредсказуемые произвольные выкидыши и гибель эмбриона внутри матки. Известны случаи молниеносного формирования заболевания. При такой болезни особенно важно активное и адекватно подобранное лечение.
Заподозрить такую болезнь можно, если на телесных покровах появляется сосудистый рисунок, анализ на сифилис дает утвердительный результат, появляются очаги высыпаний, нарушается целостность крупных суставных элементов. При аутоиммунной болезни появляются язвы, залечить которые не удается. Чаще локализованы на голенях. Нарушается ток крови, пальцы нижних конечностей поражаются гангреной. Есть опасность тромбоэмболии легких. Чаще болезнь выявляют у молодых женщин. Для постановки диагноза необходимо тщательно изучить показатели крови пациентки, проверить наличие сифилиса, дабы доказать ложность утвердительного анализа.
Планируя диагностику аутоиммунных заболеваний, необходимо помнить, что ряд неспецифических симптомов может объясняться почечными нарушениями такого типа. Поражение почек приводит к васкулиту, гломерулопатии, гломеролонефриту, заболеванию Гудпасчера. Чтобы уточнить состояние, сперва назначают общие анализы крови и урины, при подозрении на аутоиммунную болезнь проводят специализированные лабораторные исследования биологических жидкостей человеческого организма. Неадекватное лечение или его отсутствие сопряжены с формированием хронических воспалительных очагов и последующим ухудшением состояния здоровья пациента.
Есть вероятность васкулита Вегнера. Так называют аутоиммунное поражение сосудистых стенок. Страдают и крупные, и мелкие сосуды. Заметить болезнь можно по общей слабости, снижению веса и ухудшению аппетита. Больного лихорадит, возникают суставные, мышечные боли. Развитие ситуации определяется локализацией очагов поражения. Обычно постановка диагноза проста из-за специфической симптоматики. Без адекватной терапии больной живет не более полугода. Правильное лечение позволяет увеличить длительность жизни до десятилетия.
Паранеопластический энцефалит – аутоиммунное патологическое состояние, относящееся к типу энцефалитов. Повышен риск летального исхода, при этом болезнь запросто может быстро перейти в этап ремиссии. Патология охватывает головной мозг и ведет к психическим нарушениям.
Возможен полимиозит – по частоте распространения он занимает далеко не последнюю строку в списке аутоиммунных заболеваний. Диагностика болезни, анализы для уточнения состояния позволяют определить степень поражения мышечной ткани, кожных покровов. Отличительная особенность – многочисленные воспалительные очаги. Чаще диагностируется у представительниц прекрасного пола. При полимиозите повышается температура тела, активизируются потовые железы, болит голова. Состояние оценивается как некомфортное, беспокоит слабость мышц.
Подозревая аутоиммунную патологию, необходимо проверить кровь больного. Как уточняют специалисты лаборатории диагностики аутоиммунных заболеваний СПБГМУ имени Павлова, такое исследование должно показать наличие специфических аутоантител. Дополнительно проводится тестирование с целью выявления сенсибилизации клеток. Иногда рекомендовано тестирование РБТ. Альтернатива – проверка ингибиции лейкоцитной миграции. Исследование производят при условии выявления аутоантигена.
Проверяя состояние больного, нужно уточнить HLA-фенотип и проверить концентрацию комплиментов С3, С4 – уровни будут ниже нормы. В лаборатории уточняют содержание гамма-глобулина. Повышение показателя сверх среднего статистического позволяет заподозрить аутоиммунное нарушение. Дополнительно уточняют иммунорегуляторный индекс и специфические отложения в тканях, пораженных при заболевании. Им характерна инфильтрация лимфоидно-клеточного типа.
Среди сравнительно часто встречающихся аутоиммунных патологий не последнее место рейтинга принадлежит системной красной волчанке (СКВ). Диагностика аутоиммунного заболевания соединительной ткани представляет собой немалую сложность для современной медицины. Уточнение состояния – последовательная работа, обязательно включающая несколько этапов. Сперва врач изучает историю болезни, уточняет симптоматику случая, определяет все значимые признаки. Нужно отсортировать их хронологически по мере появления. Затем направляют больного на лабораторные исследования, дабы подтвердить предварительный диагноз. Отмечается индивидуальность истории болезни для каждого конкретного случая. Это обязывает подбирать подходящий терапевтический курс также индивидуально.
Специалисты лаборатории диагностики аутоиммунных заболеваний СПБГМУ не раз обращали внимание на проблематику работы с пациентами, страдающими СКВ. Правильно сформулировать диагноз в силах лишь опытный ревматолог, обладающий высоким квалификационным уровнем. Задача пациента – максимально ответственно сотрудничать с доктором, наблюдаться у одного профессионала, сдавать анализы, когда это назначено. Если врач выбирает какие-то исследования, все их нужно проходить максимально быстро. Пока нет единого специального анализа, по итогам которого можно было бы диагностировать СКВ. Задача доктора – оценить комплексно сведения, полученные из многочисленных лабораторных и инструментальных исследований.
Основной принцип диагностики аутоиммунного заболевания – комплексный последовательный подход. Сперва доктор собирает анамнез пациента и его семьи. Затем необходимо полностью осмотреть тело больного. Нуждающегося направляют в лабораторию для изучения состояния крови. Назначается общий анализ для выявления концентрации форменных элементов. Показано исследование на биохимию и проверка на наличие аутоантител. В настоящее время при подозрении на СКВ практикуются основные методы: проверка анти-РО, анти-ЛА, РНП. Уточняют наличие антител в ДНК, сформированной двумя спиралями, и присутствие антинуклеарных антител.
Следующий диагностический этап – реакция Вассермана. Кровь проверяют на сифилис. Если результат позитивный, но дополнительные анализы показывают отсутствие этого заболевания, он считается ложным и указывает на СКВ. В некоторых случаях назначают биопсию кожных покровов, почек. По мере наблюдения случая перечисленные лабораторные исследования повторяют для контроля прогресса состояния.
Основной принцип диагностики аутоиммунного заболевания – исследование клинических проявлений. Задача доктора – выбрать подходящие лабораторные анализы и направить больного на обследование с помощью рентгеновского излучения, позволяющего оценить состояние суставов. Чтобы поставить диагноз, работу с пациентом начинают с общего осмотра тела. Затем человека направляют в лабораторию, где берут кровь для общего исследования и анализа на биохимию. Следующим шагом будет рентгенологическое обследование для определения уровня поражения формирующих суставы тканей.
Необходимо проверить кровь, дабы определить появление воспалительных маркеров. К таковым относят фибриноген, С-реактивный протеин. При ревматоидном артрите в крови наблюдается специфичный воспалительный маркер, который в медицине назвали ревматоидным. Обязательно исследуют биологическую жидкость на предмет его наличия. В качестве дополнительных исследовательских мероприятий назначают анализы для определения функциональности внутренних органов. Допускается иммунологическое обследование. Время от времени больному придется сдавать анализы заново, чтобы доктор мог контролировать прогресс случая.
Только лишь по анализу крови диагностика аутоиммунного заболевания не производится. Необходимо уточнить клиническую картину. Патологию выявляют, если пациент отмечает скованность в утреннее время, если три или большее число суставов поражены артритом. К критериям заболевания относят артрит, локализованный в суставах кистей, симметричное заболевание и формирование специфических узелков. Оценивают наличие ревматоидного фактора в плазме. Рентген должен показать изменение тканей суставов.
Чтобы диагностировать ревматоидный артрит, необходимо определить не менее четырех признаков из семи обозначенных. Оценивают длительность присутствия: некоторые признаки считают актуальными, лишь если они фиксируются от шести недель и более продолжительное время.
Диагностика этого заболевания разработана, исходя из его принадлежности к воспалительным патологиям. Особенность болезни – атака со стороны иммунной системы поджелудочной человека. Воспалительный очаг формируется внутри органа, в силу чего генерируемые ферменты не могут проникать в кишечный тракт. Они сохраняют в железе и приводят к разрушению ее структуры. Кроме поджелудочной страдают иные органы – почки, железы, ответственные за генерирование слюны, лимфатические узлы, печеночные протоки для желчи. Болезнь принадлежит к числу хронических и диагностируется сравнительно редко. Выше опасность для мужчин старше пятидесятилетнего возраста, но известны случаи выявления у детей, женщин разных возрастных групп.
Уточнение болезни затруднено в силу малой изученности и неспецифичности симптоматики. Работу разбивают на несколько последовательных шагов. Сперва отвечающий за диагностику и лечение аутоиммунного заболевания доктор осматривает нуждающегося в помощи и уточняет, каковы жалобы на здоровье. Необходимо собрать историю болезни, полностью сформировать анамнез случая. Врач осматривает клиента, ощупывает, простукивает в области живота, проверяет вес. Далее пациента направляют в лабораторию для исследования крови. Особенно значимой считается информация о содержании иммуноглобулина ИГГ4. Дополнительно изучают урину, кал. Следующий шаг – работа с эндокринологом, гастроэнтерологом. Узкоспециализированые врачи осмотрят пациента и определят, какие обследования нужны в конкретном случае. Назначат ультразвуковое исследование брюшной полости и МРТ. Альтернативный вариант – КТ. Такие мероприятия дают точные сведения о структуре и габаритах органов. Для оценки состояния желчных путей необходим рентген. Показана биопсия поджелудочной.
Термином обозначают аутоиммунное поражение щитовидки. Заболевание протекает в форме хроники, принадлежит категории воспалительных. Хронически прогрессирует инфильтрация лимфой, наблюдаются процессы деструкции железистой ткани, формируется первичный гипотиреоз. Впервые болезнь описал японский доктор Хашимото. Работа опубликована в 1912-ом. Группа риска – женщины старше сорокалетнего возраста. Болезнь объясняется генетическими факторами, влиянием внешнего мира. Спровоцировать заболевание могут длительный прием избытка йода, облучение, воздействие интерферона, никотина.
Врач, занимающийся диагностикой аутоиммунного заболевания щитовидной железы, должен опросить больного и уточнить историю болезни, направить нуждающегося на специализированные исследования. Среди диагностических критериев – рост концентрации в крови антител щитовидки. Наиболее информативными будут показатели содержания антител к тиреопероксидазе, несколько менее полезна информация о таких частицах к тиреоглобулину. Обычно понижается эхогенность железистой ткани, ее объем увеличивается или уменьшается (зависит от формы болезни). Больной аутоиммунным заболеванием страдает первичным гипотиреозом. Если хотя бы один из перечисленных критериев АИТ не наблюдается, диагноз формулируют как вероятный, но не поставленный абсолютно точно.
Чтобы правильно подобрать лечение аутоиммунного заболевания, в диагностику включают пункционную биопсию ткани щитовидки, позволяющую отличить рассматриваемую болезнь от узлового зоба. Если заболевание установлено у планирующей вынашивание ребенка женщины, нужно изучить функциональность щитовидки. Для этого анализируют кровь на содержание Т4, ТТГ до зачатия. Анализ повторяют каждый триместр.
При подозрении на аутоиммунную болезнь в лабораторных условиях проверяют кровь на разные формы анемии. Биохимию делают, дабы выявить отклонения от нормы. При рассматриваемой патологии они сходны со свойственными гипотиреозу: растет содержание общего холестерина, умеренно повышается креатининовый уровень, увеличивается содержание триглицеридов, аспартат-трансаминазы.
Лабораторная диагностика аутоиммунного заболевания включает проверку гормонального фона. Есть несколько сценариев развития патологии. ТТГ может быть выше нормы при стандартной концентрации Т4, возможно повышение ТТГ при уменьшении количества Т4, а также снижение ТТГ на фоне нормального содержания Т4. Если АИТ-исследование показывает картину, сходную с рассматриваемой болезнью, но гормональная функциональность щитовидки в норме, диагноз считается опровергнутым.
Необходимо проверить состав крови для определения наличия антител к тканям щитовидки. Обычно повышается содержание таких элементов к тиреопероксидазе, тиреоглобулину. Если оба показателя оказались выше нормы, вероятность аутоиммунного заболевания особенно высока. Если такового еще нет, результаты анализов указывают на высокую опасность его развития.
Как было указано выше, только на основе симптомов диагностику аутоиммунных заболеваний не проводят, так как для большинства патологий этого типа картина смазанная, имеет сходство со многими другими нарушениями здоровья. Не будет исключением аутоиммунный тиреоидит. Дифференцирование случаев проводят, учитывая особенности зоба, функциональность щитовидки. В частности, хаши-токсикоз нужно уметь отличить от токсического зоба. На аутоиммунную природу нарушения указывает АИТ у ближайшей родни, а также субклинический гипертиреоз. В пользу рассматриваемой болезни говорит кратковременный тиреотоксикоз (до шести месяцев), а также умеренность симптоматики случая. Довольно специфична картина ультразвукового исследования. Эутиреоз достижим в короткие сроки при назначении пациенту тиреостатиков. Кроме того, не растет титр антител к ТТГ-рецепторам.
Эутиреоидный этап сходен с эндемическим зобом. Псевдоузловая форма имеет ряд сходств с узловым зобом и онкологией органа. Для уточнения состояния необходима пункция железы. Проводимая в лаборатории диагностика аутоиммунного заболевания должна показать инфильтрацию лимфоцитами. Такое явление свойственно АИТ, бывает распространенным, ограниченным. При аутоиммунной болезни выявляют крупные оксифильные клетки.
Диагностика аутоиммунного заболевания печени тоже довольно сложна. При гепатите такой формы разрушаются ткани печени из-за активности иммунитета человеческого тела. Такая болезнь отличается быстрым развитием и повышенным риском цирроза в скором будущем. При нем ткани массово погибают, трансформируются в фиброзные. Симптоматика сходна с упомянутой ранее СКВ. Диагноз формулируют, исключив иные болезни печени и проверив кровь на наличие вируса гепатита. Если сравнивать аутоиммунный тип и иные хронические разновидности гепатита, следует отметить: нет нужды ожидать полгода для постановки диагноза. Для прочих хронических печеночных заболеваний важным критерием является наблюдение случая в течение полугода.
Первый шаг необходимой для подбора лечения диагностики аутоиммунного заболевания печени – анализ анамнеза. Нужно выявить, как давно появились первые жалобы, насколько долго человека беспокоят тяжесть, болезненность справа под ребрами. Уточняют наличие повышенной температуры и пожелтения кожных покровов, слизистых, биологических жидкостей. Анализируют анамнез жизни, уточняют, были ли ранее хронические болезни, перенесено ли воспаление в брюшной полости, сепсис такой локализации. Нужно уточнить наличие наследственных патологий, вредных привычек. Спрашивают, были ли периоды продолжительного приема лекарственных средств, развивалась ли ранее опухоль, была ли нужда взаимодействовать с отравляющими соединениями. После детального опроса осматривают больного, обратив внимание на цвет кожи, слизистых. Проверяют температуру, пальпируют живот – пациент при этом обычно ощущает боль. Простукивание позволяет определить гепатомегалию.
Гепатит рассматриваемой природы среди прочих занимает не последнее место по встречаемости, в сравнении с другими патологиями из списка аутоиммунных заболеваний. Диагностика болезни предполагает лабораторное обследование. Первый и базовый способ – общий скрининг крови. Нужно определить анемию, если такая есть, проверить концентрацию форменных элементов. На гепатит указывает рост содержания лейкоцитов, характерный наличию очага воспаления в организме.
Проводят биохимическое исследование. Итоги дают представление о печеночной функции, работоспособности поджелудочной и концентрации жизненно важных микроэлементов в кровеносной системе. В рамках диагностики аутоиммунного заболевания анализы дают для оценки ПГА-индекса. Этот параметр отражает печеночный фиброз. Если такой процесс протекает, протромбиновый индекс ниже нормы, гамма-глутамилтранспептидаза наблюдается в повышенной концентрации, а первый тип класса «А» алипопротеина выявляется в несколько меньшем количестве, нежели это свойственно здоровому человеку. При проведении в рамках диагностики аутоиммунного заболевания анализа крови на индекс ПГА учитывают, что алипопротеин указанного типа представляет собой сывороточный протеин, ответственный за перемещение полезных фракций холестерина. Действующая система предполагает оценку индекса по двенадцатибалльной шкале. На высокую вероятность цирроза указывают значения выше девятки. Если по время проводимой в лаборатории диагностики аутоиммунного заболевания ПГА меньше двух, риски цирроза оценивают как нулевые.
Коагулограмма позволяет оценить состояние крови. При циррозе показатели понижаются. Иммунологическое исследование в рамках лабораторной диагностики аутоиммунного заболевания показывает рост концентрации гамма-глобулина, увеличение содержания иммуноглобулинов типа Г.
При оценке концентрации антител на аутоиммунный гепатит указывает рост антинуклеарных, микросомальных типов, а также антител к разным элементам печени и гладкомышечным клеткам.
При проводимой в лаборатории диагностике аутоиммунного заболевания можно выявить вирус гепатита в крови.
Дополнительно при подозрении на болезнь нужно проверить на заражение паразитами. Для этого исследуют кал.
Для этой патологии, в сравнении с прочими присутствующими в списке аутоиммунных заболеваний, диагностика болезни особенно сложна. Это связано с отсутствием специфических симптомов, встречающихся у всех больных целиакией. Известные симптомы у разных лиц выражены в разной степени. Отмечается, что опасность неправильной постановки диагноза при такой болезни особенно высока. Нет унифицированных алгоритмов лабораторных исследований и инструментального изучения состояния больного. Многие подходы усложнены, труднодоступны, что создает дополнительные препоны в диагностике. В 69-ом предложены критерии целиакии. Сперва предложено делать три последовательные биопсии. В 90-ом требования пересмотрели.
Диагностика предполагает исследование атрофии ворсинок и изучение состояния организма больного для определения гиперплазии крипт. Если такие явления обнаружены, им сопутствует дистрофия эпителия при поступлении глютена с пищей, при этом достижима ремиссия при его исключении, диагноз считают подтвержденным.
Первый шаг диагностики – выявление нарушений в работе ЖКТ. Симптомом считаются проблемы со стулом, хотя такое присутствует не у всех больных. Преимущественный процент страдает атрофическим дуоденитом. Чтобы правильно поставить диагноз, нужно получить биоптат. Гистологический анализ – ключевой метод постановки точного диагноза.
источник
1. Определение. СОЭ — это скорость образования столбика плазмы, свободного от эритроцитов, в вертикальном капилляре. Измеряют СОЭ в стандартных условиях, капилляр заполняют разведенной кровью с антикоагулянтом.
2. Диагностическая значимость. При воспалении в сыворотке увеличивается содержание фибриногена (одного из белков острой фазы воспаления), что приводит к агглютинации эритроцитов и повышению СОЭ . Таким образом, повышение СОЭ свидетельствует о воспалении, но не позволяет определить его причину. При аутоиммунных заболеваниях измерение СОЭ позволяет определить стадию заболевания (обострение или ремиссия), оценить его активность и эффективность лечения. Определение СОЭ малоинформативно при заболеваниях, сопровождающихся появлением аномальных эритроцитов (например, при серповидноклеточной анемии и микросфероцитозе), повышении вязкости плазмы, а также при тяжелой анемии.
а. В норме СОЭ , измеренная с помощью метода Вестергрена, у молодых мужчин составляет не более 15 мм/ч, у молодых женщин — не более 20 мм/ч.
б. Диагностическое значение небольшого (до 30 мм/ч) повышения СОЭ у пожилых не установлено. У молодых повышение СОЭ до 20 мм/ч в большинстве случаев свидетельствует о воспалении. У больных любого возраста измерение СОЭ в динамике более информативно, чем однократное определение этого показателя.
в. Выраженное повышение СОЭ более характерно для инфекционных и воспалительных заболеваний, чем для патологии опорно-двигательного аппарата, в частности остеоартроза, фибромиалгии, переломов костей. Определение СОЭ — один из наиболее простых лабораторных методов диагностики и оценки эффективности лечения ревматической полимиалгии и гигантоклеточного артериита.
г. СОЭ может повышаться при тиреотоксикозе, гипотиреозе, приеме пероральных контрацептивов, беременности, после хирургического вмешательства. После родов и хирургического вмешательства СОЭ может оставаться повышенной в течение месяца.
д. Нормальная СОЭ исключает воспаление, при повышении СОЭ необходимы дальнейшие исследования для выяснения причины воспаления.
1. Определение. C-реактивный белок — один из белков острой фазы воспаления, который содержится в сыворотке и связывает капсульный полисахарид (C-полисахарид) Streptococcus pneumoniae.
2. Методы выявления. C-реактивный белок определяют в реакции преципитации и в реакции агглютинации частиц латекса, покрытых антителами к этому белку.
3. Диагностическая значимость. В большинстве случаев чем выше СОЭ , тем выше уровень C-реактивного белка. Исключение составляют следующие случаи: 1) уровень C-реактивного белка быстро повышается даже после небольшого асептического повреждения тканей, СОЭ при этом остается нормальной, 2) СОЭ повышается, а уровень C-реактивного белка не меняется при некоторых вирусных инфекциях, тяжелой интоксикации, некоторых формах хронического артрита. В этих случаях уровень C-реактивного белка — менее информативный показатель, чем СОЭ . Иногда уровень C-реактивного белка измеряют для оценки активности ревматизма. Поскольку уровень C-реактивного белка в течение суток может резко меняться, его следует определять в динамике.
1. Определение. Ревматоидный фактор — это аутоантитела IgM к Fc-фрагменту IgG . В сыворотке ревматоидный фактор обычно присутствует в виде комплекса с IgG .
2. Методы выявления. Любые частицы, покрытые IgG , могут быть агглютинированы ревматоидным фактором. Первоначально для обнаружения ревматоидного фактора использовались покрытые антителами эритроциты барана или человеческие эритроциты группы 0. В последующем их заменили на частицы латекса и бентонита, что повысило чувствительность метода. В последнее время многие лаборатории применяют более точный метод определения ревматоидного фактора, основанный на нефелометрии. При нефелометрическом определении ревматоидного фактора оценивается повышение мутности сыворотки после добавления к ней IgG . Сыворотку, предназначенную для определения ревматоидного фактора, хранят при температуре не выше –20°C.
3. Диагностическая значимость. В низком титре (до 1:80) ревматоидный фактор выявляется у 5% здоровых лиц моложе 60 лет и у 30% — старше 80 лет. Более чем у 75% больных ревматоидным артритом титр ревматоидного фактора в реакции латекс-агглютинации превышает 1:80. В высоком титре ревматоидный фактор выявляется у больных с тяжелым прогрессирующим ревматоидным артритом. При этом обычно наблюдаются внесуставные проявления заболевания, например ревматоидные узелки, системный васкулит, синдром Шегрена. При синдроме Шегрена ревматоидный фактор определяется в наиболее высоком титре. Ревматоидный фактор в сыворотке обычно появляется через 3—6 мес после начала ревматоидного артрита. У серопозитивных больных (больные, в сыворотке которых выявляется ревматоидный фактор) во время ремиссии титр ревматоидного фактора значительно снижается, хотя обычно не нормализуется. Ревматоидный фактор не специфичен для ревматоидного артрита и выявляется при других аутоиммунных заболеваниях, сопровождающихся поражением суставов, инфекционном эндокардите, некоторых хронических заболеваниях печени и идиопатическом фиброзирующем альвеолите.
4. Другие аутоантитела к иммуноглобулинам. С помощью реакции латекс-агглютинации и нефелометрии выявляются преимущественно IgM к IgG . У некоторых больных эти антитела представляют собой мономерную молекулу. Помимо них в сыворотке больных ревматоидным артритом (особенно сопровождающимся системным васкулитом) могут обнаруживаться также IgG и IgA к IgG . Встречаются также антитела к Fab-фрагменту IgG , однако их роль в патогенезе заболевания не установлена. В настоящий момент исследование аутоантител к IgG , не относящихся к ревматоидному фактору, проводят лишь в научных целях.
5. Роль ревматоидного фактора в патогенезе ревматоидного артрита. Присутствие иммунных комплексов, в состав которых входит ревматоидный фактор, в синовиальной жидкости пораженных суставов позволяет предположить, что ревматоидный фактор участвует в развитии воспаления при ревматоидном артрите. Однако фактов, подтверждающих это предположение, пока нет. В некоторых случаях ревматоидный фактор определяется только в синовиальной жидкости, а в сыворотке отсутствует. Выявление ревматоидного фактора в синовиальной жидкости пораженных суставов позволяет подтвердить диагноз серонегативного ревматоидного артрита.
а. Определение. LE-клетки ( L upus E rythematosus cells — клетки красной волчанки) — это нейтрофилы или моноциты, содержащие крупные гомогенные базофильные включения. Эти включения представляют собой фагоцитированные ядра разрушенных клеток, покрытые антинуклеарными антителами. LE-клетки выявляются у больных СКВ в плевральном, перикардиальном, перитонеальном выпоте, синовиальной жидкости и СМЖ . Эти клетки можно получить in vitro, добавив к сыворотке больного лейкоциты здорового человека и ядра разрушенных клеток. На определении LE-клеток основан первый лабораторный метод диагностики СКВ , разработанный в 1948 г.
б. Диагностическая значимость. Выявление LE-клеток — трудоемкий и недостаточно чувствительный метод лабораторной диагностики СКВ , поэтому сейчас в большинстве лабораторий для диагностики этого и других аутоиммунных заболеваний используются более простые, дешевые и воспроизводимые методы, основанные на определении антинуклеарных антител.
а. Определение. Антинуклеарные антитела — это антитела, связывающиеся с теми или иными структурами клеточного ядра. Чаще всего для определения антинуклеарных антител используется непрямая иммунофлюоресценция.
б. Методы выявления. В качестве клеточного субстрата используются замороженные срезы, например пищевода обезьяны, печени крысы, или препараты, приготовленные из суспензии клеток с крупными ядрами, например из человеческих клеток линии HEp-2. Определение антинуклеарных антител проводят следующим образом: 1) клеточный субстрат инкубируют с исследуемой сывороткой; 2) отмывают от несвязавшихся сывороточных белков; 3) инкубируют в присутствии меченных флюоресцеином антител к человеческим иммуноглобулинам, после чего вновь отмывают; 4) исследуют с помощью флюоресцентного микроскопа. Антинуклеарные антитела, содержащиеся в исследуемой сыворотке, связываются с клеточным субстратом, а затем — с мечеными антителами против иммуноглобулинов. Если сыворотка не содержит антинуклеарных антител, меченые антитела, добавленные к клеточному субстрату, при отмывке удаляются. Для определения титра антинуклеарных антител исследование проводят с серийными разведениями исследуемой сыворотки. Каждая лаборатория сама устанавливает нормальные показатели титра антинуклеарных антител, поскольку они зависят от типа клеточного субстрата и способа его фиксации. Чаще всего для выявления антинуклеарных антител используется культура человеческих клеток HEp-2 (клетки рака гортани), содержащих много ядерных антигенов: Ro/SS-A, ядерный антиген пролиферирующих клеток и антигены центромеры. Использование меченых антител к разным классам иммуноглобулинов показало, что большинство антинуклеарных антител относятся к IgG .
в. Диагностическая значимость. Основная цель исследования антинуклеарных антител — исключить СКВ , поскольку при этом заболевании антинуклеарные антитела появляются в сыворотке 95% больных в течение 3 мес после начала заболевания. Антинуклеарные антитела выявляются не только при СКВ , они могут обнаруживаться у пожилых, появляются при применении некоторых лекарственных средств, а также при некоторых артритах. Если титр антинуклеарных антител повышен, необходимо определить, к какому антигену они направлены, так как при разных аутоиммунных заболеваниях выявляются антинуклеарные антитела разной специфичности. Титр антинуклеарных антител не позволяет судить об активности заболевания и эффективности лечения.
1) Тип окрашивания (характер распределения флюоресцентной метки в клетках) при разных заболеваниях неодинаков и определяет направление дальнейшего исследования антинуклеарных антител. Исследуемая сыворотка может содержать антинуклеарные антитела разной специфичности, однако тип окрашивания определяется теми антителами, которые присутствуют в наибольшем титре.
а) Диффузное окрашивание (равномерное распределение метки) наименее специфично и встречается чаще всего при СКВ , лекарственном волчаночном синдроме и других аутоиммунных заболеваниях, а также у пожилых. При диффузном окрашивании клеток реакцию повторяют с большим разведением исследуемой сыворотки. Если тип окрашивания остается прежним, наиболее вероятно, что антиген, против которого направлены антинуклеарные антитела, — дезоксирибонуклеопротеид.
б) Периферическое окрашивание наблюдается, когда в исследуемой сыворотке преобладают антитела к ДНК . Этот тип окрашивания часто встречается при волчаночном нефрите.
в) Пятнистое окрашивание обусловлено антителами к экстрагируемым ядерным антигенам и обычно наблюдается при системной склеродермии, смешанном заболевании соединительной ткани, синдроме Шегрена, лекарственном волчаночном синдроме.
г) Нуклеолярное окрашивание (распределение метки в районе ядрышек) обусловлено антителами к рибонуклеопротеиду. Этот тип окрашивания характерен для системной склеродермии, изредка встречается и при других аутоиммунных заболеваниях.
а. Методы выявления. Антитела к нДНК можно обнаружить с помощью реакции связывания комплемента, реакции агглютинации частиц бентонита, покрытых ДНК , метода иммунодиффузии и других иммунологических методов. Чаще всего используют метод, основанный на связывании антител с ДНК , меченной 125 I. Суть метода заключается в следующем: 1) исследуемую и контрольную (нормальную) сыворотку смешивают с раствором ДНК , меченной 125 I; 2) для осаждения образовавшихся комплексов ( IgG — ДНК ) к сыворотке добавляют антитела к IgG или 50% раствор сульфата аммония. В контрольной сыворотке в осадок выпадает 10—20% ДНК . Если в исследуемой сыворотке в осадок выпадает больше ДНК , чем в контрольной, значит, содержание антител к нДНК в исследуемой сыворотке повышено. Это указывает на тяжелую СКВ или волчаночный нефрит. Антитела к нДНК можно также выявить с использованием ДНК Crith >ДНК , поэтому для оценки активности СКВ его не используют.
б. Диагностическая значимость. Антитела к нДНК характерны для волчаночного нефрита и других тяжелых проявлений СКВ . Серийное определение антител к ДНК используется для оценки эффективности лечения этого заболевания. Хотя определение антител к ДНК менее чувствительно, чем определение антинуклеарных антител методом иммунофлюоресценции, оно имеет следующие преимущества: 1) антитела к нДНК более специфичны для СКВ , чем остальные антинуклеарные антитела; 2) по уровню этих антител можно оценить риск и тяжесть волчаночного нефрита (с увеличением титра антител к ДНК возрастают риск и тяжесть волчаночного нефрита). Необходимо учитывать, что коммерческие препараты ДНК содержат не только двух-, но и одноцепочечные молекулы, а антитела к одноцепочечной ДНК выявляются при системной склеродермии, ревматоидном артрите, дерматомиозите, хроническом активном гепатите, лекарственном волчаночном синдроме, вызванном прокаинамидом, гидралазином, изониазидом, триметадионом, метилдофой и фенотиазинами. Примесь одноцепочечной ДНК можно удалить с помощью хроматографии. Если возникают сомнения в результатах исследования, необходимо проверить чистоту используемого препарата ДНК .
в. Роль в патогенезе аутоиммунных заболеваний. Антитела к ДНК обнаруживаются в почках (в виде иммунных комплексов) и в сыворотке больных СКВ . Поскольку эти антитела связывают и активируют комплемент, они способствуют разрушению клеток и активируют нейтрофилы и макрофаги.
а. Определение. Некоторые ядерные антигены, в отличие от ДНК , легко экстрагируются солевыми растворами. Экстрагируемые ядерные антигены включают Sm-антиген (от Smith — фамилия больного СКВ , у которого впервые был выявлен этот антиген), рибонуклеопротеид (в отличие от Sm-антигена, он расщепляется рибонуклеазой и трипсином), антигены Ro/SS-A и La/SS-B.
б. Методы выявления . Если исследуемая сыворотка содержит антитела к экстрагируемым ядерным антигенам, то интенсивность свечения срезов тканей после экстракции антигенов солевым раствором будет меньше, чем до экстракции. Другой способ выявления этих антител основан на преципитации экстрагированных ядерных антигенов исследуемой сывороткой в геле (метод иммунодиффузии). Применяют также метод непрямой иммунофлюоресценции, основанный на использовании чистого антигена: 1) на предметное стекло наносят каплю раствора антигена и высушивают ее, 2) пятно обрабатывают исследуемой сывороткой (в качестве контроля используют нормальную сыворотку), а затем — меченными флюоресцеином антителами к человеческим IgG , 3) избыток меченых антител удаляют отмыванием. Флюоресценция становится заметной при освещении стекол ультрафиолетовым светом: если светится только пятно, обработанное исследуемой сывороткой, значит, она содержит антитела к экстрагируемым ядерным антигенам.
1) Антитела к Sm-антигену высоко специфичны для СКВ , однако их уровень не отражает тяжесть заболевания. Эти антитела выявляются с помощью иммунодиффузии у 25—30%, а с помощью твердофазного ИФА — у 50—60% больных СКВ . Присутствие в сыворотке больного антител к Sm-антигену входит в критерии СКВ , принятые Американской ревматологической ассоциацией, и подтверждает диагноз СКВ .
2) Антитела к рибонуклеопротеиду. Методом двойной радиальной иммунодиффузии эти антитела выявляются у 30% больных СКВ . Обычно одновременно обнаруживаются и антитела к Sm-антигену. Значительное повышение титра антител к рибонуклеопротеиду (до 1:10 000) характерно для смешанного заболевания соединительной ткани. Присутствие антител к рибонуклеопротеиду в сыворотке является диагностическим критерием смешанного заболевания соединительной ткани. При других аутоиммунных болезнях (ревматоидный артрит, синдром Шегрена, системная склеродермия, полимиозит) антитела к рибонуклеопротеиду выявляются редко.
3) Антитела к антигенам Ro/SS-A и La/SS-B. Раньше для определения антител к этим антигенам применялся метод двойной радиальной иммунодиффузии, сейчас — более точный твердофазный ИФА . Антитела к антигенам Ro/SS-A и La/SS-B выявляются у 70% больных синдромом Шегрена (как первичным, так и вторичным). Антитела к Ro/SS-A определяются также при СКВ (у 40% больных), в том числе при подострой кожной красной волчанке (75%), сыпи, характерной для красной волчанки, у новорожденных, матери которых больны СКВ (90%), врожденной АВ -блокаде (60%) и при других аутоиммунных заболеваниях (10—20%): синдроме Фелти, системной склеродермии, полимиозите, первичном билиарном циррозе.
3. Антицентромерные антитела. В большинстве лабораторий исследование антинуклеарных антител включает в себя определение антицентромерных антител. При определении антицентромерных антител методом непрямой иммунофлюоресценции используются не срезы тканей, а культура клеток человека HEp-2 (характерно пятнистое окрашивание). Антицентромерные антитела обычно выявляются при заболеваниях, сопровождающихся синдромом Рейно, — системной склеродермии и СКВ , изредка — при полимиозите, дерматомиозите и первичном билиарном циррозе печени. В то время как выявление антител к антигену Scl-70 при системной склеродермии служит плохим прогностическим признаком, выявление антицентромерных антител при этом заболевании свидетельствует о благоприятном прогнозе. В этом случае внутренние органы не поражаются или поражаются незначительно.
4. Антитела к гистонам. С помощью иммуноблоттинга, РИА и твердофазного ИФА можно определить 5 типов гистонов. Антитела к гистонам H1 и H2B выявляются у 60% больных СКВ . При лекарственном волчаночном синдроме, вызванном прокаинамидом и гидралазином, более чем у 90% больных обнаруживаются антитела к гистонам H2A, H2B, H3 и H4. При этом также обнаруживаются антитела к одноцепочечной ДНК и антинуклеарные антитела (последние — методом иммунофлюоресценции).
5. Другие антинуклеарные антитела. Антитела к антигенам Pm-1 и Scl-70 ( ДНК -топоизомеразе I) выявляются у 25—30% больных системной склеродермией и специфичны для этого заболевания. Антитела к антигену Pm-1 обычно обнаруживаются при системной склеродермии, сопровождающейся миозитом, и при дерматомиозите, антитела к антигену Scl-70 — при системной склеродермии с диффузным поражением кожи. При системной склеродермии с миозитом также выявляются антитела к антигенам Jo-1 (гистидил- тРНК -синтетазе), Ku и рибонуклеопротеиду. При системной склеродермии определяются также антитела к антигенам ядрышек ( РНК -полимеразе I и фибриллину), однако диагностического значения они не имеют.
6. Другие аутоантитела также определяются методом непрямой иммунофлюоресценции. Эти антитела, как правило, неспецифичны и выявляются при разных заболеваниях, однако в сочетании с другими показателями часто помогают поставить диагноз.
а. Антитела к разным типам клеток и компонентам цитоплазмы. Ниже представлены некоторые из этих антител и заболевания, при которых они выявляются: антитела к клеткам коркового вещества надпочечников при первичной надпочечниковой недостаточности, антитела к митохондриям при первичном билиарном циррозе, антитела к нейронам при СКВ с поражением ЦНС , антитела к обкладочным клеткам при аутоиммунном гастрите, антитела к P-белку рибосом при СКВ , особенно с поражением ЦНС и кожи, антитела к гладкомышечным клеткам при хроническом активном гепатите, антитела к микросомальным антигенам щитовидной железы при диффузном токсическом зобе и хроническом лимфоцитарном тиреоидите.
б. Антифосфолипидные антитела. Клиническое значение имеют антитела к кардиолипину, выявляемые в реакции преципитации плазмы с кардиолипиновым антигеном и с помощью твердофазного ИФА , а также волчаночный антикоагулянт. Антифосфолипидные антитела наряду с антителами к ДНК и антигену Ro/SS-A часто выявляются при СКВ и первичном антифосфолипидном синдроме и свидетельствуют о высоком риске артериальных и венозных тромбозов, тромбоцитопении и привычного самопроизвольного аборта. Реакция преципитации плазмы с кардиолипиновым антигеном — информативный и недорогой метод диагностики первичного антифосфолипидного синдрома. При положительной реакции преципитации плазмы с кардиолипиновым антигеном в сыворотке больных часто обнаруживают волчаночный антикоагулянт и IgG к кардиолипину. Титр IgG к кардиолипину определяют с помощью твердофазного ИФА . Считается, что его возрастание при первичном антифосфолипидном синдроме повышает риск осложнений и свидетельствует о неблагоприятном прогнозе. Другие антитела к кардиолипину ( IgA и IgM ) не имеют прогностического значения. Заподозрить наличие волчаночного антикоагулянта в сыворотке можно на основании следующих показателей: 1) увеличение АЧТВ , не поддающееся коррекции при добавлении фосфолипидов или смешивании исследуемой плазмы с нормальной; 2) повышение времени свертывания при добавлении каолина и фосфолипидов, 3) повышение рептилазового времени свертывания. По мнению некоторых исследователей, присутствие волчаночного антикоагулянта — более специфичный признак антифосфолипидного синдрома, чем присутствие IgG к кардиолипину. Известно, что в патогенезе тромбоэмболических осложнений антифосфолипидного синдрома играют роль активация факторов свертывания, взаимодействие антител к фосфолипидам с эндотелием, нарушение функции тромбоцитов. Однако окончательно он не изучен.
1) Антитела к цитоплазме нейтрофилов. Для определения этих антител используют метод иммунофлюоресценции с применением в качестве клеточного субстрата фиксированных этанолом нейтрофилов. Различают 2 типа антител к цитоплазме нейтрофилов: антитела к протеазе 3 и антитела к миелопероксидазе. Антитела к цитоплазме нейтрофилов чрезвычайно важны в дифференциальной диагностике васкулитов, протекающих с поражением легких и почек: антитела к протеазе 3 выявляются при гранулематозе Вегенера (у 90% больных), антитела к миелопероксидазе — при некоторых формах первичного быстропрогрессирующего гломерулонефрита и хронических воспалительных заболеваниях кишечника. Антитела к цитоплазме нейтрофилов часто обнаруживаются при узелковом периартериите с поражением мелких сосудов — форма узелкового периартериита, при которой иммунные комплексы не выявляются, — и других системных васкулитах.
2) Антитела к базальной мембране клубочков. Антитела к коллагену типа IV, входящему в состав базальной мембраны клубочков, лучше всего определять с помощью твердофазного ИФА . Он более чувствителен и специфичен, чем метод иммунофлюоресценции. Антитела к базальной мембране клубочков выявляются у 85% больных с синдромом Гудпасчера. Определение антител к базальной мембране клубочков, цитоплазме нейтрофилов, а также антинуклеарных антител и иммунных комплексов показано всем больным с первичным быстропрогрессирующим гломерулонефритом.
1. Определение. Комплемент — это система термолабильных сывороточных белков, каскадную активацию которой запускают иммунные комплексы (классический путь активации) или прямое расщепление C3 (альтернативный путь активации). При активации комплемента образуются: 1) медиаторы воспаления, 2) опсонины, связывающиеся с клетками-мишенями и облегчающие их фагоцитоз, 3) мембраноатакующий комплекс, разрушающий клетки-мишени.
а. Гемолитическая активность комплемента — функциональный показатель, который снижается при недостатке хотя бы одного из компонентов комплемента. Определение гемолитической активности комплемента проводят следующим образом. К эритроцитам, покрытым антителами, добавляют исследуемую сыворотку (в качестве контроля используют сыворотку здоровых лиц). Если содержание комплемента в исследуемой сыворотке снижено, она вызовет менее выраженное разрушение эритроцитов, чем нормальная сыворотка. Нормальная гемолитическая активность комплемента свидетельствует о том, что в сыворотке присутствуют все компоненты классического пути его активации ( C1 — C9 ) в достаточном количестве.
б. Определение C3 и C4 . С помощью твердофазного ИФА , нефелометрии и иммунодиффузии можно определить концентрацию C3 и C4 . Следует подчеркнуть, что эти методы не позволяют оценить функциональную активность C3 и C4 . Измерение уровней C3 и C4 в динамике позволяет судить об эффективности лечения многих аутоиммунных заболеваний, особенно СКВ .
3. Диагностическая значимость. Скорость разрушения и синтеза компонентов комплемента достаточно высока, поэтому обычно уже через 1—2 сут после активации комплемента иммунными комплексами его гемолитическая активность возвращается к норме. Снижение гемолитической активности комплемента свидетельствует о следующем: 1) об активации комплемента не ранее чем за 2 сут до исследования (гемолитическая активность комплемента снижается только при его выраженной активации, вызванной появлением большого количества иммунных комплексов), 2) о том, что в момент исследования комплемент активирован, 3) о наследственной недостаточности комплемента.
а. По изменению гемолитической активности комплемента можно судить о течении СКВ . Однако для этого лучше использовать другой, не менее информативный, но более простой и дешевый метод — определение СОЭ .
б. Определение C3 и C4 позволяет установить преобладающий путь активации комплемента. C4 расходуется только при активации по классическому пути. C3 участвует как в классическом, так и в альтернативном пути активации, однако при активации по альтернативному пути уровень C3 снижается более значительно.
в. При СКВ с поражением почек, ЦНС и гемолитической анемией уровень C3 и C4 в сыворотке, как правило, снижен. При обострении комплемент обычно активируется по классическому пути, при хроническом течении — по альтернативному пути (хотя возможно сочетание обоих путей активации комплемента).
г. У некоторых больных СКВ и ревматоидным артритом в плевральном и перикардиальном выпоте снижена гемолитическая активность комплемента.
д. Появление в сыворотке продуктов расщепления компонентов комплемента (фактора Ba, C3a, C4a и других) свидетельствует о ранних этапах активации комплемента. Их определение позволяет судить о течении ревматоидного артрита, СКВ , системной склеродермии и бактериальных инфекций.
е. При ревматоидном артрите гемолитическая активность комплемента в сыворотке снижается только в тех случаях, когда заболевание сопровождается системным васкулитом. Однако в синовиальной жидкости пораженных суставов при серопозитивном и иногда при серонегативном ревматоидном артрите гемолитическая активность комплемента обычно снижена.
ж. Псориатический артрит, анкилозирующий спондилит, синдром Рейтера и артриты при хронических воспалительных заболеваниях кишечника не сопровождаются снижением гемолитической активности комплемента в сыворотке. Напротив, поскольку компоненты комплемента относятся к белкам острой фазы воспаления, их концентрация в сыворотке и синовиальной жидкости может даже возрастать.
1. Определение. Криоглобулины — это иммуноглобулины сыворотки, которые обратимо преципитируют при температуре ниже 37°C.
2. Методы выявления. Собирают кровь, дают ей свернуться, фибриновый сгусток осаждают центрифугированием и отбирают сыворотку. Все манипуляции проводят при комнатной температуре. Сыворотку на ночь помещают в холодильник (при 4°C), после чего центрифугируют и определяют, какую часть ее объема занимает преципитат. Более точный способ основан на спектрофотометрическом определении белка в отмытом преципитате, полученном из фиксированного объема сыворотки.
3. Диагностическая значимость. Тяжесть заболевания не влияет на содержание криоглобулинов в сыворотке.
а. Преципитаты, содержащие как моноклональные (например, ревматоидный фактор), так и поликлональные (например, IgG ) антитела, называются смешанными криоглобулинами. Смешанная криоглобулинемия обычно проявляется васкулитами кожи. При этом чаще всего поражаются участки тела, подверженные действию холода. Смешанная криоглобулинемия характерна для аутоиммунных заболеваний. Она наблюдается при СКВ , узелковом периартериите, синдроме Шегрена и болезни Кавасаки. Гепатиты A, B и C всегда сопровождаются криоглобулинемией. Криоглобулины выявляются также при гемобластозах, хронических инфекциях и саркоидозе. Если криопреципитаты содержат только моноклональные антитела, исключают миеломную болезнь и макроглобулинемию Вальденстрема.
З. Проба Кумбса основана на способности антител к IgG или к C3b агглютинировать эритроциты, покрытые IgG или C3b соответственно. Связывание IgG и C3b с эритроцитами наблюдается при аутоиммунной и лекарственной иммунной гемолитических анемиях.
И. Антигены HLA . Эти антигены находятся на поверхности всех ядросодержащих клеток, иногда их называют трансплантационными, так как именно они определяют судьбу трансплантата — приживление или отторжение. Антигены HLA кодируются генами главного комплекса гистосовместимости, который находится на 6-й хромосоме. Определение некоторых антигенов HLA применяется для дифференциальной диагностики аутоиммунных заболеваний.
1. Методы выявления. Набор антигенов HLA уникален для каждого человека. Исключение составляют однояйцовые близнецы, у которых они полностью совпадают. Антигены HLA — сильные активаторы T-, B-лимфоцитов и макрофагов, участвующих в отторжении трансплантата. От набора антигенов HLA зависит предрасположенность к разным заболеваниям, в том числе — к аутоиммунным. Сыворотки против этих антигенов получают от людей, перенесших многократные переливания крови, и от многорожавших женщин.
3. Антиген HLA -B27. Это единственный антиген, который играет роль в дифференциальной диагностике аутоиммунных болезней. Его выявляют у 90% белых больных анкилозирующим спондилитом и синдромом Рейтера. У здоровых представителей этой расы антиген HLA -B27 встречается всего в 8% случаев. Антиген HLA -B27 часто обнаруживают при ювенильном ревматоидном артрите, псориатическом артрите, хронических воспалительных заболеваниях кишечника, протекающих с сакроилеитом и спондилитом, увеите и реактивном артрите, вызванном Yersinia spp. , Chlamydia spp. , Salmonella spp. , Shigella spp. Определение антигена HLA -B27 проводят в следующих случаях: 1) при необходимости исключить анкилозирующий спондилит у больного, родственники которого страдают этим заболеванием, 2) для дифференциальной диагностики неполной формы синдрома Рейтера (без уретрита или увеита) с гонококковым артритом, 3) для дифференциальной диагностики синдрома Рейтера, сопровождающегося тяжелым артритом, с ревматоидным артритом, 4) при обследовании больных ювенильным ревматоидным артритом. Если антиген HLA -B27 не обнаружен, анкилозирующий спондилит и синдром Рейтера маловероятны, хотя полностью исключить эти заболевания в таком случае нельзя.
4. Антиген HLA -DR4. У носителей антигена HLA -DR4 ревматоидный артрит чаще сопровождается тяжелым поражением суставов и внесуставными проявлениями и имеет менее благоприятный прогноз, чем у остальных больных ревматоидным артритом. При выявлении антигена HLA -DR4 у больного ревматоидным артритом как можно раньше начинают лечение средствами, замедляющими его прогрессирование.
К. Исследование синовиальной жидкости проводят у всех больных с выпотом в полость сустава. Соблюдение правил асептики при проведении пункции позволяет снизить риск инфицирования сустава. При гемартрозе и инфекционном артрите эта процедура носит лечебный характер.
1. Исследование синовиальной жидкости включает следующее.
а. Описывают внешний вид синовиальной жидкости: цвет, мутность, вязкость, наличие крови. В норме синовиальная жидкость вязкая, прозрачная, имеет соломенно-желтый цвет. При инфекционном артрите она мутная, ее вязкость обычно снижена из-за расщепления гиалуроновой кислоты ферментами лейкоцитов.
б. Определяют общее и относительное число клеток крови.
в. Окрашивают мазок по Граму и производят посев для выявления бактерий (например, Staphylococcus spp. , Streptococcus spp. , Haemophilus spp. , Neisseria spp. ) и грибов, окрашивают мазок по Цилю—Нильсену для выявления Mycobacterium tuberculosis.
г. Для исключения подагры и псевдоподагры проводят поляризационную микроскопию осадка, полученного при центрифугировании синовиальной жидкости. Используют поляризационный микроскоп с красным фильтром. Игольчатые кристаллы уратов характерны для подагры, светятся желтым светом (если их длинная ось параллельна оси компенсатора). Кристаллы пирофосфата кальция характерны для псевдоподагры, имеют ромбовидную форму и светятся голубым светом. При подагре и псевдоподагре кристаллы обнаруживаются и в нейтрофилах. Следует подчеркнуть, что гиперурикемия не является специфическим признаком подагры, а обызвествление суставов — псевдоподагры.
д. Определяют концентрацию белка в синовиальной жидкости и плазме.
е. Определяют концентрацию глюкозы в синовиальной жидкости и плазме.
ж. При подозрении на ревматоидный артрит и СКВ иногда дополнительно определяют гемолитическую активность комплемента и ревматоидный фактор в синовиальной жидкости. Исследование антинуклеарных антител в синовиальной жидкости неинформативно. При ревматоидном артрите и СКВ гемолитическая активность комплемента в синовиальной жидкости пораженного сустава обычно снижена и составляет менее 30% от нормального уровня в сыворотке. При остеоартрозе, анкилозирующем спондилите, синдроме Рейтера и большинстве других заболеваний, протекающих с поражением суставов, гемолитическая активность комплемента соответствует нормальному значению в сыворотке или превышает его. При серонегативном ревматоидном артрите в синовиальной жидкости изредка обнаруживают ревматоидный фактор. Результаты определения ревматоидного фактора и гемолитической активности комплемента при инфекционном и кристаллическом артритах часто бывают противоречивы.
Л. Артроскопия с биопсией показана при подозрении на злокачественное новообразование, туберкулез, грибковую инфекцию, а также при длительном увеличении одного сустава и неинформативности исследования синовиальной жидкости.
Источник: Г.Лолор-младший, Т.Фишер, Д.Адельман «Клиническая иммунология и аллергология» (пер. с англ.), Москва, «Практика», 2000
опубликовано 18/08/2011 11:36
обновлено 18/08/2011
— Аутоиммунные заболевания
источник